ĐỊNH DANH VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT, TRỰC KHUẨN mủ XANH,KHÁNG SINH đồ (THỰC HÀNH VI SINH)

THỰC HÀNH BUỔI ĐỊNH DANH VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT, TRỰC KHUẨN MỦ XANH KHÁNG SINH ĐỒ CHẨN ĐOÁN VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM (tùy bệnh phẩm) Phân, nước tiểu, dịch não tủy, máu… NUÔI CẤY , PHÂN LẬP Môi trường Mac – Conkey (MC) Môi trường SS CHẨN ĐỐN VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT MƠI TRƯỜNG MAC – CONKEY:  MT phân biệt có chọn lọc vừa: - ức chế VK gram (+), cho VK gram (-) phát triển - Phân biệt VK: - lên men lactose: khúm màu hồng - không lên men lactose: khúm không màu Lactose (-) Lactose (+) Lactose (-) Lactose (+) Lactose (+) Lactose (-) CHẨN ĐOÁN VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT MÔI TRƯỜNG SS – Mt phân lập Salmonella Shigella - MT phân biệt chọn lọc cao  ức chế VK gram (+) VKĐR khác , cho Salmonella Shigella phát triển Sinh H2S Khơng sinh H2S CHẨN ĐỐN VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM (tùy bệnh phầm) Trực khuẩn đầu tròn, gram âm NHUỘM GRAM NI CẤY , PHÂN LẬP PHẢN Ứ NG SINH HĨA ĐỊNH DANH - Lên men Glucose, lactose, manitol - Di động, Sinh - Sinh H2S - Indol - Urê - Citrat… CHẨN ĐOÁN VI KHUẨN ĐƯỜNG RUỘT Phản ứng sinh hóa định danh Mơi trường KIA: - Chất thị màu phenol red: chuyển vàng pH acid - Đọc tính chất: - Lên men glucose Lên men lactose Sinh Sinh H2S KIA chưa cấy Lactose (+) Lactose (-) Glucose (+) Glucose (+) Sinh Khơng sinh PP PHA LỖNG LIÊN TIẾP(MIC): • Tìm nồng độ tối thiểu kháng sinh ức chế tăng trưởng vi khuẩn • Nguyên tắc: ▫ Dựa liên quan độ pha loãng kháng sinh tăng trưởng vi khuẩn nồng độ kháng sinh khác 1/2 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 VK VK VK VK VK VK VK VK 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd 0,5ml mt dd Chứng Chứng (-) (+) 10 VK 0,5ml mt dd Bỏ ,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l ống 0,5m l 0,5ml KS ống 1ml KS 256àg/ml 0,5ml mt dd C KT QU: ã Kiểm tra ống (ống chứng, biến thiên độ đục ống cịn lại) • Tìm ống cuối  MIC (µg/m) E-test Sinh viên thực tập Làm kháng sinh đồ phương pháp đĩa giấy Làm thử nghiệm oxidase Đọc kết định danh vi khuẩn đường ruột Đọc kết kháng sinh đồ ( phương pháp đĩa giấy MIC) BỘ Glucose (+) Lactose (+) H2S (-) Sinh (+) Mannitol (+) Di động (+) Indol (+) BỘ Salmonella Shigella Glucose (+) Lactose (+) E coli S.typhi Lactos e + - - - - - Glucos e + + + + + + Gas + - + + - - H2S - + - + - - Di động (+) Manitol + + + + - + Indol (+) Di động + + + + - - Indol + - - - -  S.paratyphi A S.paratyphi B S.shiga S.flexneri H2S (-) Sinh (+) Mannitol (+) BỘ Glucose (+) Lactose (-) H2S (+) Sinh (-) Mannitol (+) Di động (+) Indol (-) BỘ Glucose (+) Salmonella Shigella E coli S.typhi Lactos e + - - - - - Glucos e + + + + + + Gas + - + + - - H2S - + - + - - Manitol + + + + - + Di động + + + + - - Indol + - - - -  S.paratyphi A S.paratyphi B S.shiga S.flexneri Lactose (-) H2S (+) Sinh (-) Mannitol (+) Di động (+) Indol (-) BỘ Glucose (+) Lactose (-) H2S (-) Sinh (+) Mannitol (+) Di động (+) Indol (-) BỘ Glucose (+) E coli Salmonella S.typhi S.paratyphi A Shigella S.paratyphi B S.shiga S.flexneri Lactose (-) H2S (-) Sinh (+) Lactos e + - - - - - Glucos e + + + + + + Mannitol (+) Gas + - + + - - Di động (+) H2S - + - + - - Manitol + + + + - + Di động + + + + - - Indol + - - - -  Indol (-) BỘ Glucose (+) Lactose (-) H2S (+) Sinh (+) Mannitol (+) Di động (+) Indol (-) BỘ Glucose (+) Salmonella Shigella E coli S.typhi Lactos e + - - - - - Glucos e + + + + + + Gas + - + + - - H2S - + - + - - Manitol + + + + - + Di động + + + + - - Indol + - - - -  S.paratyphi A S.paratyphi B S.shiga S.flexneri Lactose (-) H2S (+) Sinh (+) Mannitol (+) Di động (+) Indol (-) BỘ Glucose (+) Lactose (-) H2S (-) Sinh (-) Mannitol (+) Di động (-) Indol (-) BỘ Glucose (+) Salmonella Shigella E coli S.typhi Lactos e + - - - - - Glucos e + + + + + + Gas + - + + - - H2S - + - + - - Manitol + + + + - + Di động + + + + - - Indol + - - - -  S.paratyphi A S.paratyphi B S.shiga S.flexneri Lactose (-) H2S (-) Sinh (-) Mannitol (+) Di động (-) Indol (-) ... ĐOÁN TRỰC KHUẨN MỦ XANH Pseudomonas aeruginosa CHẨN ĐOÁN P aeruginosa BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM NI CẤY , PHÂN LẬP PHẢN Ứ NG SINH HĨA ĐỊNH DANH NHUỘM GRAM Trực khuẩn đầu tròn, gram âm KHÁNG SINH ĐỒ -Sinh. .. Oxidase (+) KHÁNG SINH ĐỒ QUY TRÌNH CHẨN ĐỐN VI SINH LÂM SÀNG BỆNH PHẨM N1 NUÔI CẤY , PHÂN LẬP NHUỘM GRAM NHUỘM GRAM PHẢN Ứ NG SINH HÓA ĐỊNH DANH KHÁNG SINH ĐỒ N2 N3 KHÁNG SINH ĐỒ • MỤC ĐÍCH: Tìm... cui cựng MIC (àg/m) E-test Sinh vi? ?n thực tập Làm kháng sinh đồ phương pháp đĩa giấy Làm thử nghiệm oxidase Đọc kết định danh vi khuẩn đường ruột Đọc kết kháng sinh đồ ( phương pháp đĩa giấy MIC)