ĐỊNH DANH cầu KHUẨN (THỰC HÀNH VI SINH)

NHUỘM GRAM BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM NUÔI CẤY, PHÂN LẬP PHẢN ỨNG SINH HÓA ĐỊNH DANH KHÁNG SINH ĐỒ Biết cách cấy vi khuẩn vào môi trường chẩn đốn sinh hóa Biết cách định danh cầu khuẩn gram (+), cầu khuẩn gram (-)  Các thử nghiệm đánh giá hoạt động chuyển hóa sinh học vi khuẩn mà qua định danh lồi vi khuẩn •Từ mơi trường phân lập, chọn khúm khuẩn cần định danh cấy vào mơi trường chẩn đốn sinh hóa •Mỗi lồi vi khuẩn có phản ứng sinh hóa định danh khác Mơi trường đặc:  Môi trường thạch nghiêng: Dùng que cấy khuyên tròn cấy zig-zag lên mặt nghiêng thạch Mt Simmon citrate MT Chapman  Môi trường thạch sâu: Dùng que cấy thẳng đâm thẳng đứng theo chiều sâu thạch MT mannitol  Môi trường thạch nghiêng - sâu Phần nghiêng: dùng que cấy khuyên tròn cấy zigzag lên mặt nghiêng thạch Phần sâu: dùng que cấy thẳng cấy thẳng xuống theo chiều sâu thạch MT KIA Mơi trường lỏng: Dùng que cấy khun trịn lấy khúm khuẩn, hịa vào ống mơi trường MT urê MT pepton MT lysin (Indol) CẦU KHUẨN Gram (+) Gram (-) Staphylococci N menigitisdis Streptococci N gonorrhoeae TIÊU HUYẾT α TAXO P + S pneumoniae Streptococcus tiêu huyết α, S pneumoniae Taxo P: Thử nghiệm nhạy cảm optochin  Phân biệt S pneumoniae với Streptococcus tiêu huyết α khác  Taxo P (+): vịng vơ khuẩn >=10mm  S.pneumoniae  Taxo P (-): vịng vơ khuẩn < 10mm Taxo P (+) Taxo P (-) BẢNG ĐỊNH DANH STREPTOCOCCI   Tiêu huyết Taxo A CAMP Taxo P S pyogenes (Group A) β + - - S agalactiae (Group B) β - + - S pneumoiae α - - + Tiêu huyết β: Taxo A (+): Streptococcus tiêu huyết β nhóm A Tiêu huyết α: Taxo P (+): Streptococcus pneumoniae Taxo P (-): Streptocuccus tiêu huyết α, S pneumoniae BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM Mủ niệu đạo, chất tiết CTC, kết mạc mắt, máu, dịch khớp NUÔI CẤY , PHÂN LẬP Môi trường chọn lọc: MTM, NYC, GC-chocolate Song cầu gram (-) nội bào NHUỘM GRAM Song cầu gram (-) hình hạt cà phê PHẢN Ứ NG SINH HÓA ĐỊNH DANH -Oxidase test (-) -Catalase -Glucose -Maltose -Sucrose -Levulose  Vk sản xuất men oxidase oxid hóa thuốc thử pphenylenediamine, thuốc thử chuyển từ không màu sang màu tím đen Oxidase (-) Oxidase (+) Các thử nghiệm lên men đường:  Chất thị màu: phenol red  Vi khuẩn cấy vào môi trường đường, lên men đường sinh acid Acid làm cho chất thị màu chuyển từ đỏ sang vàng Lên men đường Không lên men đường Glucose Mantose (+) (-) Sucrose (-) Levulose (+) BỆNH PHẨM NHUỘM GRAM Dịch não tủy, máu NI CẤY , PHÂN LẬP Mơi trường BA, CA Song cầu gram (-) BC NHUỘM GRAM Song cầu gram (-) hình hạt cà phê PHẢN Ứ NG SINH HÓA ĐỊNH DANH -Oxidase test (-) -Catalase -Glucose -Maltose -Sucrose -Levulose  TÍNH CHẤT SINH HĨA CỦA NEISSERIAE N gonorrhoeae N menigitidis OXIDASE + + CATALASE + + GLUCOSE + + MALTOSE - + SUCROSE - - LEVULOSE + + Đọc kết buổi Cấy vi khuẩn vào mơi trường chẩn đốn sinh hóa Làm thử nghiệm catalase Đọc tiêu thử nghiệm mẫu CẦU KHUẨN GRAM (+) + STAPHYLOCOCCI Chapman Coagulase + Streprococcus tiêu huyết β nhóm A (S pyogenes) - CATALASE STREPTOCOCCI TIÊU HUYẾT β TIÊU HUYẾT α TAXO A TAXO P Streprococcus tiêu huyết β nhóm A + S pneumoniae TIÊU HUYẾT γ Streprococc us tiêu huyết α ... sinh học vi khuẩn mà qua định danh lồi vi khuẩn •Từ mơi trường phân lập, chọn khúm khuẩn cần định danh cấy vào mơi trường chẩn đốn sinh hóa •Mỗi lồi vi khuẩn có phản ứng sinh hóa định danh khác... NUÔI CẤY, PHÂN LẬP PHẢN ỨNG SINH HÓA ĐỊNH DANH KHÁNG SINH ĐỒ Biết cách cấy vi khuẩn vào mơi trường chẩn đốn sinh hóa Biết cách định danh cầu khuẩn gram (+), cầu khuẩn gram (-)  Các thử nghiệm đánh... GRAM PHẢN ỨNG SINH HÓA ĐỊNH DANH  Tiêu huyết  Catalase  Coagulase  Chapman Thử nghiệm Catalase: Hydrogen peroxide (H2O2)  CATALASE H2O + O2 Phân biệt Staphylococci cầu khuẩn gram (+) khác Catalase