luận án tiến sĩ nghiên cứu squalene từ vi tảo biển dị dưỡng schizochytrium mangrovei PQ6 định hướng làm nguyên liệu cho thực phẩm bảo vệ sức khỏe, mỹ phẩm và dược phẩm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ N G U Y Ễ N C Ẩ M H À NGHIÊN CỨU SQUALENE TỪ VI TẢO BIỂN DỊ DƢỠNG SCHIZOCHYTRIUM MANGROVEI PQ6 ĐỊNH HƢỚNG LÀM NGUYÊN LIỆU CHO THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE, MỸ PHẨM VÀ DƢỢC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN S SINH HỌC Hà Nội Năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - NGUYỄN CẨM HÀ NGHIÊN CỨU SQUALENE TỪ VI TẢO BIỂN DỊ DƢỠNG SCHIZOCHYTRIUM MANGROVEI PQ6 ĐỊNH HƢỚNG LÀM NGUYÊN LIỆU CHO THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE, MỸ PHẨM VÀ DƢỢC PHẨM Chuyên ngành: Hóa sinh học Mã số: 42 01 16 LUẬN ÁN TIẾN S SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: GS TS Đặng Diễm Hồng Hà Nội – Năm 2020 i LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS TS Đặng Diễm Hồng, ngun Trưởng phịng Cơng nghệ tảo, Viện Công nghệ sinh học, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam - người thầy định hướng, truyền dạy kiến thức khoa học giúp đỡ tơi vượt qua trở ngại khó khăn suốt thời gian thực luận án Tôi trân trọng cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện Công nghệ sinh học, phịng thí nghiệm trọng điểm Cơng nghệ gen, phận đào tạo Viện Công nghệ sinh học, Ban Lãnh đạo phận đào tạo Học viện Khoa học Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi sở vật chất giúp tơi hồn thành thủ tục cần thiết trình làm nghiên cứu Trong q trình viết luận án tơi nhận giúp đỡ, bảo tận tình TS Hồng Thị Lan Anh Ngồi tơi nhận giúp đỡ đồng nghiệp làm việc phòng Cơng nghệ Tảo: TS Hồng Thị Minh Hiền, TS Ngơ Thị Hoài Thu, TS Lưu Thị Tâm, ThS NCS Lê Thị Thơm Nhân dịp này, xin chân thành cảm ơn tất giúp đỡ q báu Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS TS Nguyễn Hoàng Ngân- Học viện Quân Y, giúp đỡ số thử nghiệm động vật thực nghiệm, phân tích độc tính cấp, độc tính bán trường diễn tác dụng dược lý squalene Luận án thực khuôn khổ đề tài Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia - Nafosted, Bộ Khoa học Công nghệ “Nghiên cứu đánh giá khai thác chất squalene làm dược phẩm từ vi tảo biển Việt Nam” (2013-2016) PGS TS Đặng Diễm Hồng làm chủ nhiệm, đề tài “Cơ chế điều hòa trao đổi lipid hợp chất từ thực vật biển Việt Nam phòng điều trị bệnh gan nhiễm mỡ không rượu” (2014-2016) đề tài cấp Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam “Nghiên cứu hồn thiện quy trình ni trồng lượng lớn sinh khối tảo Schizochytrium mangrovei PQ6 tách chiết qualene đủ tiêu chuẩn nguyên liệu làm thực phẩm chức năng” (2014-2016) TS Hoàng Thị Minh Hiền làm chủ nhiệm Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè người thân ln bên cạnh chia sẻ, động viên, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho học tập, nghiên cứu hồn thành luận án Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Tác giả Nguyễn Cẩm Hà ii Lời cam đoan Tôi xin cam Ďoan: Đây công trình nghiên cứu tơi số kết cộng tác với cộng khác; Các số liệu kết trình bày luận án trung thực, phần Ďã Ďược công bố tạp chí khoa học chuyên ngành với Ďồng ý cho phép Ďồng tác giả; Phần lại chưa Ďược công bố công trình khác Hà Nội, ngày tháng 10 năm 2020 Tác giả Nguyễn Cẩm Hà iii Trang phụ bìa Lời cảm ơn…………………………………………………………………… Lời cam Ďoan………………………………………………………………… Mục lục………………………………………………………………………… Danh mục ký hiệu, từ viết tắt………………………………………… Danh mục bảng…………………………………………………… Danh mục hình vẽ, Ďồ thị………………………………………………… MỞ ĐẦU……………………………………………………………………… Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU…………………………………… 1.1 G 1.1.1 Tí 1.1.2 Ng 1.1.3 Cá 1.1.4 Ứ 1.1.5 Cá 1.2 Cô 1.2.1 Cô 1.2.2 Cá 1.3 G 1.4 G 1.4.1 Đặ 1.4.2 Tì ch 1.4.2.1 Tì ch 1.4.2.2 Tì sq Chƣơng VẬ 2.1 Vật liệu…… 2.1.1 Mẫu vật…… 2.1.2 Các kít si 2.1.3 Động vật thí 2.1.4 Các dịng tế 2.1.5 Hố chất…… 2.1.6 Dụng cụ t 2.1.7 Môi trường n 2.2 Phƣơng ph 2.2.1 Nhóm phươn Ďiều kiện nu xuất squalen 2.2.1.1 Phương phá khối khô…… 2.2.1.2 Phương phá 2.2.1.3 Phương phá tảo…………… 2.2.1.4 Phương phá 2.2.1.5 Phương phá 2.2.1.6 Phương phá 2.2.1.7 Bố trí thí ngh chủng/lồi ti squalene cao 2.2.2 Nhóm phươn squalene từ S 2.2.2.1 Phương phá nhỏsqualene PQ6………… 2.2.2.2 Phương phá squalene PQ6………… 2.2.2.3 Phương phá squalene 2.2.2.4 2.2.3 2.2.4 2.2.4.1 2.2.4.2 2.2.5 2.2.6 Chƣơng 3.1 3.2 3.2.1 3.2.1.1 cấp độ bình tam giác……………………………………………… 67 3.2.1.2.Ảnh hưởng nồng độ cao nấm men lên sinh trưởng hàm lượng squale 3.2.1.3 Ảnh hưởng c hàm lượng s 3.2.1.4 Ảnh hưởng c lượng squale 3.2.1.5 Ảnh hưởng c hàm lượng s 3.2.2 Tối ưu Ďiều men 30 lít Ď 3.2.2.1 Ảnh hưởng squalene ch hệ thống bình lên 3.2.2.2 Ảnh hưởng của chủng S ma lên men 30 lít…… 3.2.2.3 Ảnh hưởng trưởng tích lũ 3.2.2.4 Ảnh hưởng squalene chủ 3.3 Xây dựng quy mangrovei PQ6 3.3.1 Tối ưu Ďiều kiệ S mangrovei PQ 3.3.1.1 Tách chiết lipid 3.3.1.2 Tách chiết lipid 3.3.1.3 Tinh địn ký lỏng cao áp… 3.3.1.4 Tách chiết, tinh dung môi………… 3.3.2 Xây dựng quy tr pilot từ S mangr 3.3.2.1 Ảnh hưởng sinh khối khô S 3.3.2.2 Tách chiết squa q trình ni cấ 3.3.2.3 Điều kiện tinh ch 3.3.2.4 Xây dựng quy tr từ sinh khối tảo 3.3.3 Tách chiết tin 3.3.4 Phân tích ch loại squalen 3.4 Tính an tồn S viv 3.4.1 Độ ng 3.4.2 Độ th 3.4.2.1 Ản trọ 3.4.2.2 Ản sin 3.4.2.3 Đá dù 3.4.3 Tá ng 3.5 Bƣ sq vit 3.5.1 Đá 3.5.2 Tá th 3.5.2.1 Tố lư 3.5.2.2 Tá tro 3.5.3 Cơ ch 3.5.4 Tá ma KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ……………………………………………… DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ……………………………… TÀI LIỆU THAM KHẢO…………………………………………………… PHỤ LỤC ... thực phẩm bảo vệ sức khỏe, mỹ phẩm dược phẩm Vi? ??t Nam Chính vậy, chúng tơi thực Ďề tài ? ?Nghiên cứu squalene từ vi tảo biển dị dƣỡng Schizochytrium mangrovei PQ6 định hƣớng làm nguyên liệu cho thực. .. hướng làm nguyên liệu cho thực phẩm bảo vệ sức khỏe, mỹ phẩm dược phẩm Các nội dung nghiên cứu luận án - Sàng lọc Ďược chủng/loài vi tảo biển Vi? ??t Nam tiềm cho sản xuất squalene từ số chủng vi. ..DƢỠNG SCHIZOCHYTRIUM MANGROVEI PQ6 ĐỊNH HƢỚNG LÀM NGUYÊN LIỆU CHO THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE, MỸ PHẨM VÀ DƢỢC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN S SINH HỌC Hà Nội Năm 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VI? ??N HÀN LÂM