Nghiên cứu thành phần hóa học của cây đỉnh tùng (cephalotaxus mannii) ở việt nam

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC TRƢỜNG ĐẠI HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆN HOÁ HỌC LÊ THỊ THU HÀ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐỈNH TÙNG (CEPHALOTAXUS MANNII) Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội – 2016 VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆT NAM VÀ CƠNG NGHỆ VIỆN HỐ HỌC LÊ THỊ THU HÀ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐỈNH TÙNG (CEPHALOTAXUS MANNII) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Mã số : 60440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS TRẦN VĂN LỘC Hà Nội – 2016 LỜI CẢM ƠN Xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới Viện Hóa học-Viện Hàn Lâm Khoa Học Công Nghệ Việt Nam Đại học Khoa Học Tự Nhiên-Đại học Quốc Gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi để luận văn tốt nghiệp hoàn thành Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn TS.Trần Văn Lộc hướng dẫn, giúp đỡ em với dẫn khoa học quý giá trình triển khai, nghiên cứu hoàn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn cô-chú, anh chị em phịng Tổng hợp Hữu Cơ-Viện Hóa Học trực tiếp hướng dẫn, bảo giúp đỡ em hoàn thành luận văn Xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô trường Đại Học Khoa học Tự Nhiên trực tiếp giảng dạy, truyền đạt kiến thức khoa học chuyên ngành cho em năm tháng qua Xin chân thành cảm ơn! Tác giả luận văn Lê Thị Thu Hà LỜI CAM ĐOAN Luận văn tốt nghiệp thực phòng Tổng hợp Hữu cơ-Viện Hóa Học-Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nghiên cứu nêu luận văn trung thực Tác giả luận văn Lê Thị Thu Hà MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN .4 1.1 ĐẶC ĐIỂM CHUNG VỀ HÌNH THÁI CỦA HỌ ĐỈNH TÙNG (CEPHALOTAXACEAE) 1.1.1 Chi Amentotaxus 1.1.2 Chi Torreya 1.1.3 Chi Cephalotaxus 1.1.3.1 Cephalotaxus oliveri 1.1.3.2.Cephalotaxus griffithii (Cephalotaxus lanceolata) 1.1.3.3 Cephalotaxus fortune 1.1.3.4 Cephalotaxus alpine 1.1.3.5 Cephalotaxus latifolia 1.1.3.6 Cephalotaxus koreana 10 1.1.3.7 Cephalotaxus harringtonii 10 1.1.3.8 Cephalotaxus hainanensis 11 1.1.3.9 Cephalotaxus sinensis 11 1.1.3.10 Cephalotaxus wilsoniana 12 1.2 GIỚI THIỆU VỀ CÂY ĐỈNH TÙNG CEPHALOTAXUS MANNII HOOK.F 12 1.2.1 Phân bố loài đỉnh tùng Cephalotaxus mannii Hook.f 12 1.2.2 Đặc điểm hình thái đỉnh tùng Cephalotaxus mannii Hook.f 13 1.2.3 Công dụng đỉnh tùng Cephalotaxus mannii Hook.f .15 1.3 THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÁC LỒI TRONG CHI ĐỈNH TÙNG 15 1.3.1 Thành phần hóa học loài đỉnh tùng Cephalotaxus harringtonia 15 1.3.2 Thành phần hóa học lồi đỉnh tùng Cephalotaxus Wilsoniana .19 1.3.3 Thành phần hóa học lồi đỉnh tùng Cephalotaxus mannii 22 1.3.4 Các loại tinh dầu số loài đỉnh tùng [27] .23 CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM 24 2.1 THIẾT BỊ, HÓA CHẤT 24 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.2.1 Phương pháp ngâm chiết mẫu 24 2.2.2 Phương pháp tách chất xác định cấu trúc 25 2.2.3 Phương pháp thăm dị hoạt tính sinh học 25 2.3 CHIẾT TÁCH VÀ TINH CHẾ CÁC CHẤT TỪ CÂY ĐỈNH TÙNG 30 2.3.1 Nguyên liệu 30 2.3.2 Chiết tách tinh chế chất từ vỏ đỉnh tùng 30 CHƢƠNG 3:KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 3.1 Chất 26 (DTV Et2): epicatechin 37 3.2 Chất 27(TNV1): harringtonolide 38 3.3 Chất 28 (TNV48A): cephalotaxine 41 3.4 Chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine 45 3.5 Chất 30 (DTV1): nordesoxyharringtonine 48 3.6 Hoạt tính sinh học đỉnh tùng 52 3.6.1 Hoạt tính chống oxy hóa chất 30 (DTV1) 52 3.6.2 Hoạt tính gây độc tế bào 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮ T Viết tắt Viết đầy đủ 1H-NMR MS 13C-NMR EI-MS IR SKC s SKBM brs HepG2 d MCF7 t KB dd ATCC m OD J (Hz) IC50 δ (ppm) EtOAc DCM Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton 1H MeOH Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13 Phổ hồng ngoại singlet singlet tù doublet triplet doublet dublet multiplet Hằng số tương tác tính Hz Độ chuyển dịch hóa học tính ppm Phổ khối lượng Phổ khối va chạm electron Sắc ký cột Sắc ký mỏng Tế bào ung thư gan người Tế bào ung thư vú Tế bào ung thư biểu mô Bảo tàng giống chuẩn Hoa kỳ Mật độ hấp thụ quang Nồng độ ức chế 50% số tế bào thử Ethylacetate Dichloromethane Methanol DANH MỤC CÁC BẢNG Số TT Bảng 3.1 Số Bảng 3.2 Số Số Bảng 3.3 de Bảng 3.4 K Bảng 3.5 K DANH MỤC CÁC HÌNH Số TT Hình 1.1 Hình 1.2 Hình 1.3 Hình 1.4 Hình 1.5 Hình 1.6 Hình 1.7 Hình 1.8 Hình 1.9 Hình 1.10 Hình 1.11 Hình 1.12 Hình 1.13 Hình 1.14 Hình 1.15 Hình 1.16 Hình 1.17 Hình 1.18 Hình 3.1 Hình 3.2 Hình 3.3 Hình 3.4 Hình 3.5 Hình 3.6 Hình 3.7 Hình 3.8 Hình 3.9 Hình 3.10 Hình 3.11 Hình 3.12 Hình 3.13 Hình 3.14 Hình 3.15 PHỤ LỤC SƠ ĐỒ Số TT Sơ đồ 2.1 Q Sơ đồ 2.2 Q Sơ đồ 2.3 Q Phụ lục 26: Phổ giãn 13 C-NMR chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine Phụ lục 27: Phổ DEPT chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine Phụ lục 28: Phổ giãn DEPT chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine Phụ lục 29: Phổ IR chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine Phụ lục 30: Phổ MS chất 29 (TNV4): desoxyharringtonine Phụ lục 31: Phổ H-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 32: Phổ giãn H-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 33: Phổ giãn H-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 34: Phổ 13 C-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 35: Phổ giãn 13 C-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 36: Phổ giãn 13 C-NMR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 37: Phổ DEPT chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 38: Phổ giãn DEPT chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 39: Phổ IR chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine Phụ lục 40: Phổ MS chất 30 (TNV=DTV1): nordesoxyharringtonine ...TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN VIỆT NAM VÀ CƠNG NGHỆ VIỆN HỐ HỌC LÊ THỊ THU HÀ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY ĐỈNH TÙNG (CEPHALOTAXUS MANNII) Ở VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Mã... khoa học Cephalotaxus mannii Hook.f Tuy nhiên nước ta chưa có nghiên cứu thành phần hóa học đỉnh tùng, lý tơi chọn đề tài: ? ?Nghiên cứu thành phần hóa học Đỉnh tùng (Cephalotaxus mannii) Việt Nam? ??... mannii) Việt Nam? ?? Mục tiêu nghiên cứu Nghiên cứu thành phần hóa học đỉnh tùng (Cephalotaxus mannii Hook.f.) Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Thu thập, xử lý nguyên liệu vỏ đỉnh tùng (Cephalotaxus mannii