Ảnh hưởng của malachite green kết hợp với nhiệt độ lên các chỉ tiêu huyết học của cá tra

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN VÕ VĂN LÀNH ẢNH HƯỞNG CỦA MALACHITE GREEN KẾT HỢP VỚI NHIỆT ĐỘ LÊN CÁC CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2011 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN VÕ VĂN LÀNH ẢNH HƯỞNG CỦA MALACHITE GREEN KẾT HỢP VỚI NHIỆT ĐỘ LÊN CÁC CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGs Ts NGUYỄN THANH PHƯƠNG 2011 LỜI CẢM ƠN Câu tục ngữ:"Khơng thầy đố mày làm nên" ñiều ñược nghe, ñược học in sâu vào lịng Đặc biệt thành ñạt ghế nhà trường Bất người kể vị lãnh tụ, nhà bác học khơng có dạy dỗ người Thầy chẳng Do vai trị người Thầy quan trọng chúng ta, người Thầy ví thuyền đưa đón hệ ñến hệ khác sang bến bờ tri thức Những tâm huyết với nghề thời gian mà Thầy Cơ dành để dạy dỗ, bảo truyền đạt cho chúng em làm cho chúng em mãi ghi nhớ biết ơn Trong thời gian học tập trường q Thầy Cơ tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức bổ ích ngành Ni trồng Thủy sản Đồng thời tạo điều kiện thuận lợi cho chúng em tham gia nghiên cứu khoa học Nay thời gian thực tập tốt nghiệp ñã kết thúc Em xin gởi lời cảm ơn ñến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Cần Thơ Bộ môn Dinh Dưỡng Chế Biến Thủy sản khoa thủy sản trường Đại học Cần Thơ Đặc biệt Thầy Nguyễn Thanh Phương ñã tận tình hướng dẫn, truyền ñạt kinh nghiệm suốt thời gian thực tập Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Đỗ Thị Thanh Hương ñã tạo ñiều kiện thuận lợi, ñộng viên thời gian thực tập tốt nghiệp Em xin cảm ơn chị Nguyễn Thị Kim Hà, Nguyễn Hương Thùy, anh Toàn, chị Khá ñã giúp ñỡ cho em nhiều thời gian thực tập môn Cảm ơn anh chị cao học K15 bạn sinh viên liên thơng K35, giúp đỡ, động viên học tập, thực tập TĨM TẮT Thí nghiệm ảnh hưởng Malachite green kết hợp với nhiệt ñộ lên tiêu huyết học cá Tra (Pangasianodon hypophthalmus) giai đoạn giống có khối lượng 15-20g thí nghiệm với ba khoảng nhiệt ñộ ñược chọn (220C, 280C 340C) với hai nồng ñộ thuốc MG (0,15 ppm 0,2 ppm) với hai nồng ñộ thuốc cho mức nhiệt độ Thí nghiệm dạng hai nhân tố (nhiệt ñộ nồng ñộ thuốc) ñược thực bể tích nước 120 lít, có bố trí sục khí bể, nhiệt độ ñiều chỉnh dụng cụ tăng nhiệt (heater) ñối với nghiệm thức có nhiệt độ cao (340C), nghiệm thức có nhiệt độ thấp bố trí phịng có lắp đặt hệ thống giảm nhiệt (máy lạnh), nhiệt ñộ ñược chọn dựa vào kết thí nghiệm tăng giảm nhiệt độ Thí nghiệm với đợt thu mẫu (0 giờ, giờ, 72 giờ, ngày, 14 ngày), bể thu ngẫu nhiên cá Kết thí nghiệm cho thấy số lượng hồng cầu, tổng bạch cầu, MCH, MCHC có xu hướng tăng cao so với nhiệt ñộ ñối chứng (280C) ñối với thí nghiệm tăng nhiệt Số lượng hồng cầu, tổng bạch cầu có xu hướng giảm so với nhiệt độ ñối chứng (280C) ñối với thí nghiệm giảm nhiệt ñộ Ngưỡng nhiệt ñộ cá Tra (16-380C), cá chết 100% nhiệt độ 420C 120C thí nghiệm tăng giảm nhiệt ñộ Các tiêu huyết học biến ñộng theo nhiều xu hướng khác nhau, số lượng hồng cầu giảm mạnh thời ñiểm sau tiếp xúc với MG Hầu hết tất tiêu huyết học ổn ñịnh trở lại ngày thứ 14 LỜI CẢM ƠN Câu tục ngữ:"Không thầy ñố mày làm nên" ñiều ñược nghe, ñược học ñã in sâu vào lòng Đặc biệt thành ñạt ghế nhà trường Bất người kể vị lãnh tụ, nhà bác học khơng có dạy dỗ người Thầy chẳng Do vai trị người Thầy quan trọng chúng ta, người Thầy ví thuyền đưa đón hệ đến hệ khác sang bến bờ tri thức Những tâm huyết với nghề thời gian mà Thầy Cô dành ñể dạy dỗ, bảo truyền ñạt cho chúng em làm cho chúng em mãi ghi nhớ biết ơn Trong thời gian học tập trường ñã q Thầy Cơ tận tình hướng dẫn, truyền đạt kiến thức bổ ích ngành Ni trồng Thủy sản Đồng thời tạo ñiều kiện thuận lợi cho chúng em tham gia nghiên cứu khoa học Nay thời gian thực tập tốt nghiệp ñã kết thúc Em xin gởi lời cảm ơn ñến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Cần Thơ Bộ môn Dinh Dưỡng Chế Biến Thủy sản khoa thủy sản trường Đại học Cần Thơ Đặc biệt Thầy Nguyễn Thanh Phương tận tình hướng dẫn, truyền ñạt kinh nghiệm suốt thời gian thực tập Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Đỗ Thị Thanh Hương tạo ñiều kiện thuận lợi, ñộng viên thời gian thực tập tốt nghiệp Em xin cảm ơn chị Nguyễn Thị Kim Hà, Nguyễn Hương Thùy, anh Tồn, chị Khá giúp ñỡ cho em nhiều thời gian thực tập môn Cảm ơn anh chị cao học K15 bạn sinh viên liên thông K35, ñã giúp ñỡ, ñộng viên học tập, thực tập MỤC LỤC Trang LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT .ii MỤC LỤC iii, iv DANH SÁCH HÌNH .v DANH SÁCH BẢNG vi Phần 1: ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Giới thiệu 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Nội dung ñề tài 1.4 Thời gian thực ñề tài Phần 2:TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vấn đề ni cá tra giới Đồng Bằng Sông Cửu Long 2.1.1 Tình hình ni cá tra giới 2.1.2 Tình hình ni cá tra Đồng Bằng Sơng Cửu Long 2.1.3 Tình hình dịch bệnh .5 2.1.4 Vấn ñề sử dụng thuốc kháng sinh 2.2 Một số nghiên cứu ảnh hưởng thuốc hóa chất số yếu tố môi trường lên tiêu nuôi trồng thủy sản 2.2.1 Những nghiên cứu sinh lý 2.3 Sơ lược Malachite Green 2.3.1 Công thức cấu tạo 2.3.2 Một số nghiên cứu ảnh hưởng Malachite Green nhiệt độ lĩnh vực ni trồng thủy sản 10 Phần 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 Địa ñiểm thời gian nghiên cứu 14 3.2 Vật liệu nghiên cứu 14 3.3 Các thí nghiệm 14 3.3.1 Xác ñịnh ngưỡng chịu ñựng nhiệt ñộ thay ñổi tiêu sinh lý theo nhiệt ñộ cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) 14 3.3.2 Thí nghiệm Xác định ảnh hưởng Malachite Green nhiệt ñộ lên tiêu huyết học 15 3.4 Phương pháp phân tích 17 3.4.1 Phương pháp phân tích mẫu 17 3.5 Phương pháp xử lý số liệu 18 Phần 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 20 4.1 Ảnh hưởng nhiệt ñộ lên tiêu huyết học cá tra 20 4.1.1 Những phản ứng cá tăng giảm nhiệt ñộ 20 4.1.2 Ảnh hưởng q trình tăng nhiệt độ lên tiêu huyết học cá 4.1.2.1 Số lượng hồng cầu 21 4.1.2.2 Số lượng bạch cầu 21 4.1.2.3 Khối lượng trung bình huyết sắc tố hồng cầu 23 4.1.2.4 Nồng ñộ huyết sắc tố hồng cầu 23 4.1.2.5 Tỷ lệ huyết cầu 23 4.1.3 Ảnh hưởng trình giảm nhiệt lên tiêu huyết học 24 4.1.3.1 Số lượng hồng cầu 24 4.1.3.2 Số lượng bạch cầu 24 4.1.3.3 Khối lượng trung bình huyết sắc tố hồng cầu 24 4.1.3.4 Nồng ñộ huyết sắc tố hồng cầu 24 4.1.3.5 Thể tích hồng cầu tỷ lệ huyết cầu 26 4.2 Ảnh hưởng kết hợp nhiệt ñộ Malachite green lên tiêu huyết học 26 4.2.1 Các yếu tố mơi trường bể thí nghiệm 26 4.2.2 Biểu lâm sàng cá tiếp xúc với Malachite green khoảng nhiệt ñộ khác 27 4.2.3 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên tiêu huyết học 28 4.2.3.1 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên số lượng hồng cầu 28 4.2.3.2 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên số lượng bạch cầu 30 4.2.3.3 Tỷ lệ huyết sắc tố (hematocrite) 31 4.2.3.4 Khối lượng trung bình huyết sắc tố hồng cầu (MCH) 32 4.2.3.5 Nồng ñộ huyết sắc tố hồng cầu (MCHC) 33 4.2.3.6 Thể tích hồng cầu (MCV) 35 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN 37 5.1 Kết luận 37 5.2 Đề xuất ý kiến 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO 38 DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Cơng thức cấu tạo Malachite Green 10 21 Hình 2.2 Sự biến ñổi Malachite Green 11 Hình 3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 16 Hình 3.2 Buồng đếm Neubauer Ruling 18 DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Giá trị LC50 Malachite Green số loài cá khác 13 Bảng 4.1 Số cá chết tiến hành tăng giảm nhiệt ñộ 20 Bảng 4.2 Biến ñộng tiêu huyết học nhiệt ñộ tăng 22 Bảng 4.3 Biến ñộng tiêu huyết học nhiệt ñộ giảm 25 Bảng 4.4 Biến động yếu tố mơi trường q trình thí nghiệm 26 Bảng 4.5 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên số lượng hồng cầu 29 Bảng 4.6 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên số lượng bạch cầu 30 Bảng 4.7 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên tỉ lệ huyết cầu 32 Bảng 4.8 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên MCH (pg) 33 Bảng 4.9 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt ñộ lên MCHC (%) 34 Bảng 4.10 Ảnh hưởng Malachite green nhiệt độ lên MCV (µm3) 36 Phần 1: ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Giới thiệu Trong năm gần đây, ni trồng thủy sản ñang phát triển mạnh nhiều khía cạnh khác nhau: diện tích, mơ hình, mức độ thâm canh hóa ngày cao, đa dạng nhiều đối tượng ni khác Trong số đối tượng ni cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) ñối tượng ñang phát triển tương lai khu vực Đồng Bằng Sông Cửu Long (ĐBSCL) Đây số 14 lồi nhận biết hạ lưu sơng Mê Kơng thuộc địa phận Việt Nam (Nguyễn Hữu Phụng, Nguyễn Bạch Loan,1999) đối tượng ni quen thuộc có giá trị kinh tế cao, ni ngày nhiều kích thước lớn, tăng trưởng nhanh, ăn tạp nên sử dụng ñược nhiều loại thức ăn, thị trường tiêu thụ cao Hơn thế, cịn có khả chống chịu mơi trường bất lợi như: O2 thấp, nước giàu chất hữu cơ, mật độ ni cao,…(Dương Thúy n, 2003) Vì diện tích ni ngày mở rộng Chỉ riêng An Giang tháng đầu năm 2007 diện tích ni cá tra 1.286 tăng 479 so với 2006 (Báo cáo tình hình hoạt động sở thủy sản, An Giang tháng đầu năm 2007) Đi đơi với diện tích sản lượng cá tra tăng cao Năm 2006, sản lượng ni cá tra, basa An Giang đạt 100.000 tấn, Cần Thơ khoảng 45.000 Đồng Tháp 50.000 gấp 2,5 lần so với 2005 tiếp tục tăng mạnh, ñạt mức kỷ lục (Phân Viện Quy Họach Thủy Sản Phía Nam – Bộ Thủy Sản, 2006) Cũng mức độ thâm canh hóa ngày cao ñể ñạt lợi nhuận cao kéo theo việc sử dụng thuốc hóa chất nhằm kiểm sốt mơi trường, phòng trị bệnh trở nên nhiều Theo Nguyễn Thị Phương Nga, 2004 “ Phân tích tình hình phân phối sử dụng thuốc nuôi trồng thủy sản tỉnh Sóc Trăng, Bạc Liêu, Cà Mau” có 136 loại kháng sinh sử dụng, 40 loại chứa kháng sinh thuộc nhóm hạn chế sử dụng, cịn lại kết hợp kháng sinh thuốc giảm ñau, kháng viêm, trị nấm Theo Schnick (1998) Malachite green ñược sử dụng nhiều nơi giới giá thành thấp, hiệu cao, MG ñược sử dụng rộng rãi từ lâu ñược dùng phổ biến việc xử lý nước, diệt nấm, ký sinh trùng trứng cá, nhuyễn thể, nấm thủy mi, trùng dưa,… (Alderman, 2002; Srivastava et al., 2004) Khi vào thể, phần MG chuyển hóa thành Leucomalachite Green (LMG), thời gian đào thải MG nhanh, ngược lại LMG tồn thời gian dài (Bergwerff et al., 2005) (trích dẫn Lương Thị Diễm Trang, 2009) có khả gây ung thư (Annalaura et al., 2005), theo nhận ñịnh Srivastava et al., (2004) độc tính MG tỷ lệ thuận với nhiệt ñộ Từ thực tế ñó, việc thực ñề tài “ Ảnh hưởng Malachite Green kết hợp với nhiệt ñộ lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) ñiều cần thiết 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu đề tài nhằm tìm hiểu ảnh hưởng Malachite Green kết hợp với nhiệt ñộ lên thay ñổi số tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) 1.3 Nội dung ñề tài Xác ñịnh biến ñổi têu sinh lý cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) khoảng nhiệt ñộ khác với nồng ñộ Malachite Green khác 1.4 Thời gian thực Từ tháng 5-6/2010 xử lý thống kê Bảng 4.2 ta thấy số lượng hồng cầu mức nhiệt ñộ khoảng thời gian thí nghiệm có khác biệt ý nghĩa thống kê (p0,05) so với nghiệm thức lại trừ nghiệm thức (400C 420C) Như ta thấy nồng ñộ huyết sắc tố hồng cầu ổn ñịnh khoảng 300C ñến 380C vượt qua nhiệt độ 380C cá bắt đầu điều chỉnh tăng lên ñể chống lại với ñiều kiện bất lợi môi trường 4.1.2.5 Tỷ lệ huyết cầu (Hct, %): Thơng thường thể tích tế bào máu chiếm 27% (biến ñộng 20-35%) (theo Đỗ Thị Thanh Hương Nguyễn Văn Tư, 2010) Từ kết Bảng 4.2 tỷ lệ huyết cầu dao động khoảng 28,1±2,46 đến 43,4±3,28 Nhìn chung tỷ lệ huyết cầu có gia tăng với gia tăng nhiệt ñộ trừ nghiệm thức 320C Đặc biệt tăng cao nghiệm thức 360C, 380C, 420C khác biệt có ý nghĩa thống kê (p280C) cá có xu hướng giảm thể tích hồng cầu tiêu khác (hồng cầu, bạch cầu, MCH, MCHC, Hct) ngược lại (có xu hướng tăng) với q trình tăng nhiệt độ 4.1.3 Ảnh hưởng trình giảm nhiệt lên tiêu huyết học Sự biến ñộng tiêu huyết học q trình giảm nhiệt độ trình bày Bảng 4.3 4.1.3.1 Số lượng hồng cầu: Số lượng hồng cầu dao ñộng khoảng 1,86±0,19 (106 tế bào/mm3) ñến 3,35±0,23 (106 tế bào/mm3), ñạt cao nghiệm thức (240C) với giá trị tương ứng 3,35±0,23 (106 tế bào/mm3), thấp nghiệm thức (140C) có 1,86±0,19 (106 tế bào/mm3) Ở hai nghiệm thức (240C 220C) số lượng hồng cầu tăng cao 3,35±0,23 (106 tế bào/mm3) 3,31±0,21 (106 tế bào/mm3) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Ở nghiệm thức 34oC+MG 0,15 ppm số lượng hồng cầu tăng khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) so với thời ñiểm (0 giờ) Ở ngày thứ 14 số lượng hồng cầu cá hai nghiệm thức (34oC+MG 0,15 ppm 28oC+MG 0,15 ppm) bắt ñầu tăng trở lại sau thời gian cá sống ñiều kiện môi trường bất lợi Số lượng hồng cầu ñạt giá trị gần với thời ñiểm (0 giờ) Ta thấy số lượng hồng cầu cá bắt ñầu hồi phục bắt ñầu thời ñiểm sau ngày, ñến ngày thứ 14 số lượng hồng cầu cá gần khơi phục hồn tồn cá huy ñộng hồng cầu từ kho dự trữ tăng nhanh q trình tạo máu để đối phó lại với tình trạng mơi trường sống bất lợi Bảng 4.5: Ảnh hưởng nhiệt ñộ MG lên số lượng hồng cầu (106tb/mm3) Thời gian thu mẫu Nghiệm thức o 22 C+ 0,15 mg/l 22oC+ 0,20 mg/l 28oC+ 0,15 mg/l 28oC+ 0,20 mg/l 34oC+ 0,15 mg/l 34oC+ 0,20 mg/l abAB 2,4±0,5 2,6±0,5abAB 3,3±1,3aC 3,0±0,6aBC 2,9±0,8aBC 2,5±0,5abAB 72 bA 2,3±0,6 2,3±0,4bA 3,1±0,4abB 2,2±0,4bA 2,3±0,5bA 2,0±0,4bA bcAB 2,0±0,5 2,2±0,5bB 1,4±0,7bdA 1,6±0,4cAB - ngày abA 2,8±0,6 2,5±0,8bcA 2,4±1,1abA - 14 ngày 2,8±0,6abA 3,1±0,6aA - Các giá trị bảng thể giá trị trung bình ± ñộ lệch chuẩn Các giá trị hàng mang chữ (a,b,c,d) cột mang chữ (A,B,C) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Kết cho thấy MG có xu hướng làm giảm số lượng hồng cầu cá từ tiếp xúc ñến 72 Kết phù hợp với nghiên cứu Lương Thị Diễm Trang (2009) cá tra (P hypophthamus) Lê Nguyễn Hạnh Đoan (2008) cá tra Ngoài ra, số lượng hồng cầu giảm cá tra tiếp xúc với kháng sinh hay ñộc chất kháng sinh Florfernicol (Lê Kim Ngọc, 2009) (trích dẫn Trần Thị Bích Như, 2010) 4.2.3.2 Ảnh hưởng MG nhiệt độ lên tổng bạch cầu Bảng 4.6 trình bày số lượng bạch cầu qua lần thu mẫu Ở nhiệt ñộ 22 C số lượng bạch cầu dao ñộng 22,1±10 (104 tb/mm3) ñến 23,4±7,6 (104 tb/mm3) Ở nhiệt ñộ 280C bạch cầu dao ñộng 11,6±2,4 (104 tb/mm3) ñến 17,6 ±8,7 (104 tb/mm3), nhiệt ñộ 340C số lượng bạch cầu dao ñộng 15,8±3,1 ñến 15,9±8,2 (104 tb/mm3), số lượng bạch cầu nghiệm thức thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Ở nhiệt ñộ ñối chứng (280C) số lượng bạch cầu có xu hướng thấp so với hai mức nhiệt ñộ (220C 340C) o Bảng 4.6: Ảnh hưởng nhiệt ñộ MG lên số lượng bạch cầu (104 tb/mm3) Nghiệm thức Thời gian thu mẫu giờ 72 o 22 C+0,15 mg/l o 22 C+0,20 mg/l o 28 C+0,15 mg/l 28oC+0,20 mg/l 34oC+0,15 mg/l 34oC+ 0,2 mg/l ngày 38,8±20,6 22,1±10abA 23,4±7,6ab 33,4±9,1cB 37,4±17,3c 11,4±7,2aA 27,1±24,4bcB A B C 17,6±8,7 ab A 18,6±7,9 ab B 13,9±5,9 aA 14 ngày c A 34,1±21,8 c 19,9±6,1abc 18,7±10,2abA A A - - 21,4±9,5abA 12,9±6,5abA 21,8±8,2abB B - - - ab B 11,6±2,4 15,8±3,1ab 18,3±8,5ab A B 15,9±8,2ab 21,8±7,2ab A B Các giá trị bảng thể giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Các giá trị hàng mang chữ (a,b,c,d) cột mang chữ (A,B,C) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05), (-) cá chết hết Ở thời ñiểm sau cá tiếp xúc với MG số lượng bạch cầu hầu hết tất nghiệm thức có gia tăng đáng kể ñặc biệt nhiệt ñộ 220C với nồng ñộ thuốc tương ứng (0,15ppm 0,2ppm) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) thời ñiểm sau tiếp xúc với thuốc so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ), khoảng nhiệt ñộ khác số lượng bạch cầu biến ñộng khác Số lượng bạch cầu cao ñối với nghiệm thức có nhiệt độ thấp, nịng độ thuốc cao Đặc biệt nghiệm thức, 22oC nồng ñộ (0,15ppm 0,2ppm) số lượng bạch cầu cao tăng nhanh so với nghiệm thức (280C 340C) với hai nồng ñộ cho mức nhiệt ñộ (0,15ppm 0,2ppm) Tóm lại, số lượng bạch cầu có xu hướng tăng lên nhằm bảo vệ thể cá ñiều kiện môi trường sống cá không thuận lợi Ở thời ñiểm 72 sau cá tiếp xúc với MG số lượng bạch cầu hầu hết tất nghiệm thức nhìn chung giảm mạnh so với thời ñiểm Số lượng bạch cầu giảm mạnh nghiệm thức (220C nồng ñộ MG 0,15ppm) (340C nồng ñộ 0,2ppm) Ở nghiệm thức (220C nồng ñộ MG 0,2ppm) có giảm khơng đáng kể Nhìn chung số lượng bạch cầu hầu hết tất nghiệm thức thời ñiểm 72 khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Ở thời ñiểm 72 số lượng bạch cầu giảm số lượng bạch cầu ñã tăng hầu hết tất nghiệm thức vào ngày thứ 7, thứ tự nghiệm thức (340C nồng ñộ 0,15ppm) < (280C nồng ñộ 0,15ppm) < (220C nồng ñộ 0,15ppm), riêng có nghiệm thức (280C nồng độ 0,15ppm) (220C nồng ñộ 0,15ppm) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Nhìn chung tỷ lệ huyết sắc tố hồng cầu có xu hướng giảm tiếp xúc với MG khoảng nhiệt ñộ khác Ở thời ñiểm sau tiếp xúc với MG tỷ lệ huyết sắc tố giảm so với thời ñiểm ñối chứng trừ nghiệm thức 22oC (nồng độ 0,2ppm) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Riêng ñối với hai nghiệm thức 28oC 340C (nồng ñộ MG 0,20 ppm) tỷ lệ huyết sắc tố giảm mạnh, thời gian ñối chứng tỷ lệ huyết sắc tố tương ứng với nhiệt ñộ 37,5±9,2% 38,5±9,8% thời ñiểm 30,7±11,3% 32,2±5,7% Sau 72 tỷ lệ huyết sắc tố hồng cầu lại tiếp tục giảm khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Tóm lại tỷ lệ huyết sắc tố hồng cầu thời ñiểm thu mẫu có xu hướng giảm theo thời gian tiếp xúc với thuốc giảm mạnh nghiệm thức 220C (nồng ñộ 0,2 ppm) thời ñiểm 72 tiếp xúc với thuốc khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05), (-) cá chết hết 4.2.3.4 Khối lượng trung bình huyết sắc tố hồng cầu (MCH) Kết khối lượng trung bình huyết sắc tố hồng cầu (MCH) qua lần thu mẫu trình bày Bảng 4.8 MCH thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) nhiệt độ khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) MCH biến động khơng tn theo quy luật chung, thay ñổi khoảng 27,9±7,4 ñến 38,2±10 (pg) Bảng 4.8: Ảnh hưởng nhiệt ñộ MG lên MCH (pg) Thời gian thu mẫu Nghiệm thức giờ 72 22oC+0,15 mg/l 31,4±12,5abAB 37,4±10,0bcA 30,2±6,3abAB 22oC+0,20 mg/l 38,2±10,0abBC 38,4±5,7 abA 24,2±8,7aA 28oC+0,15 mg/l 27,9±7,4aA 30,7±7,2 abAB 37,9±12,1bcBC 32,3±9,2abAB 28oC+0,20 mg/l 31,9±9,0 abAB 32,7±5,9abAB - - 34oC+0,15 mg/l 30,4±7,2 abAB 30,5±10,5abAB o aB 45,7±7,9cC ngày 14 ngày 25,2±5,2aA - 28,9±5,8abAB 26,9±6,2a A 23,7±3,3a A abA 36,0±8,1 34 C+ 0,2 mg/l 37,1±9,1 Các giá trị bảng thể giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Các giá trị hàng mang chữ (a,b,c,d) cột mang chữ (A,B,C) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05), (-) cá chết hết Qua bảng 4.8 cho thấy thời ñiểm sau cá tiếp xúc với MG MCH có xu hướng tăng hầu hết tất nghiệm thức (trừ nghiệm thức 340C nồng ñộ 0,2 ppm) Đặc biệt tăng nhanh nghiệm thức (220C nồng độ MG 0,15 ppm) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Ở nồng ñộ MG 0,15 ppm hầu hết nghiệm thức có nhiệt độ tương ứng MCH có xu hướng tăng nhanh so với nồng ñộ MG (0,2 ppm) Ở thời ñiểm 72 MCH nghiệm thức 220C (với nồng ñộ MG tương ứng 0,15 ppm 0,2 ppm) MCH có xu hướng giảm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ), ñặc biệt giảm mạnh nghiệm thức có nồng độ MG 0,2 ppm Ngược lại MCH tăng mạnh nghiệm thức 280C 340C với nồng ñộ (0,15 ppm) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p0,05) Ở thời ñiểm sau gây nhiễm MG nồng độ huyết sắc tố hồng cầu (MCHC) tăng nhẹ ñối với nghiệm thức có nồng độ MG thấp (nồng độ MG 0,15 ppm) Ngược lại nồng ñộ huyết sắc tố (MCHC) có xu hướng giảm nhẹ nghiệm thức có nồng độ MG cao (0,2 ppm) Nhìn chung q trình tăng hay giảm (MCHC) thời ñiểm (6 giờ) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Đến thời điểm 72 sau gây nhiễm MG MCHC hầu hết tất nghiệm thức có xu hướng giảm (trừ nghiệm thức (280C nồng ñộ MG 0,15 ppm) Tuy MCHC có tăng giảm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với hai thời điểm (0 giờ) Cịn thời ñiểm ngày MCHC nghiệm thức 220C (nồng ñộ MG 0,15 ppm) tăng chút so với thời ñiểm (0, 72 giờ) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) Cũng cung thời điểm MCHC hai nghiệm thức 280C 340C với nồng ñộ MG (0,15 ppm) có biến động, gần so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Nồng ñộ huyết sắc tố (MCHC) ngày thứ 14 tăng cao nghiệm thức 340C (nồng ñộ MG 0,15 ppm) cao so với tất thời ñiểm (0, 6, 72 ngày) khác biệt ý nghĩa thống kê (p>0,05) MCHC nghiệm thức 280C (nồng độ MG 0,15 ppm) khơng có thay ñổi nhiều (gần bằng) so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Bảng 4.9: Ảnh hưởng nhiệt ñộ MG lên MCHC (%) Nghiệm thức o Thời gian thu mẫu 72 ngày aA 21,9±2,8 22oC+0,20 mg/l 26,7±8,6aA 25,2±4,4aA 22,0±2,5aA aA aA aA 23,8±4,2 21,4±4,3 aA 22 C+0,15 mg/l o 23,0±3,3 aA 26,9±6,9 24,4±5,8 14 ngày aA 22,4±5,2 - aA 21,2±2,1aA 28 C+0,15 mg/l 22,6±4,6 28oC+0,20 mg/l 25,9±9,6aA 25,9±8,7aA - - - 34oC+0,15 mg/l 22,5±1,7aA 23,9±7,2aA 23,0±3,9aA 23,8±4,4aA 26,8±11,8aA 34oC+ 0,2 mg/l 25,0±9,6aA 22,5±3,6aA - - - Các giá trị bảng thể giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn,(-) cá chết hết Các giá trị hàng mang chữ (a) cột mang chữ (A) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) MG có xu hướng làm giảm mạnh nồng ñộ huyết sắc tố hồng cầu khoảng nhiệt ñộ khác sau tiếp xúc ñiều kiện ñiều kiện nhiệt ñộ thích hợp (Lương Thị Diễm Trang, 2009) Srivastava et al (1995) nêu ảnh hưởng MG ñến số huyết học cá Heteropneustes fossilis làm giảm hàm lượng chất ñạm can-xi huyết mức có ý nghĩ thống kê (p0,05) Thể tích hồng cầu biến ñộng khoảng (131±59 ñến 165±68 µm3) Đặc biệt thể tích hồng cầu cao nghiệm thức (220C nồng độ MG 0,15 ppm) nghiệm thức (340C nồng ñộ 0,2 ppm) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) so với nghiệm thức lại Ở thời điểm thể tích hồng cầu tăng nghiệm thức 220C (nồng ñộ 0,15 0,2 ppm) nghiệm thức (280C, 340C có nồng độ 0,2 ppm) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05), (MCV) tất nghiệm thức lần thu mẫu thời ñiểm khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p>0,05) khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với thời ñiểm ñối chứng (0 giờ) Ở nghiệm thức 280C 340C (có nồng độ MG 0,15 ppm) tích hồng cầu tăng có nghiệm thức 340C (nồng độ MG 0,15 ppm) khác biệt có ý nghĩa thống kê (p