ẢNH HƯỞNG CỦA THUỐC KHÁNG SINH LÊN CÁC CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) NHIỄM Edwardsiella ictaluri

Header Page of 126 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN LÊ NGỌC LAN VÂN ẢNH HƯỞNG CỦA THUỐC KHÁNG SINH LÊN CÁC CHỈ TIÊU HUYẾT HỌC CỦA CÁ TRA (Pangasianodon hypophthalmus) NHIỄM Edwardsiella ictaluri LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH BỆNH HỌC THỦY SẢN 2009 Footer Page of 126 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 LỜI CẢM TẠ Xin gởi lời cảm ơn đến cô Đặng Thụy Mai Thy, cô Đặng Thị Hoàng Oanh chị Nguyễn Thị Thúy Liễu tận tình hướng dẫn em suốt thời gian thực đề tài Mình xin chân thành cảm ơn người bạn thân yêu lớp Bệnh học thủy sản khóa 31 gắn bó, quan tâm, giúp đỡ năm đại học Lời cảm ơn cuối xin gởi đến cha mẹ, cha mẹ nguồn động viên lớn giúp cho vượt qua lúc khó khăn , giúp có đủ tự tin học tập sống Chân thành cảm ơn! Footer Page of 126 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 TÓM TẮT Đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri” nhằm mục tiêu xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra nhiễm E ictaluri Cá tra giống mua có biểu bệnh mủ gan, tiến hành bố trí thí nghiệm với nghiệm thức có nghiệm thức sử dụng kháng sinh, nghiệm thức – Amoxicilin, nghiệm thức – Flofenicol, nghiệm thức – Docycilin, nghiệm thức – Flofenicol Amoxicillin, nghiệm thức – Flofenicol Doxycilin nghiệm thức Amoxicillin Doxycilin, nghiệm thức đối chứng không sử dụng kháng sinh Theo dõi tỉ lệ chết cá, tiến hành phân lập vi khuẩn lấy máu xác định tiêu huyết học cá có biểu lờ đờ Kết thí nghiệm cho thấy tỉ lệ chết nghiệm thức cao (100% cá chết vào ngày thứ thí nghiệm), nghiệm thức đối chứng (93,3%), nghiệm thức (93%), nghiệm thức (47%), nghiệm thức (43%), nghiệm thức (30%) Kết phân lập vi khuẩn xác định cá nhiễm bệnh E.ictaluri Trong máu tìm loại tế bào: hồng cầu, lympho, tiểu cầu, bạch cầu đơn nhân, bạch cầu trung tính Ngoài tìm thấy hồng cầu nhiều nhân không nhân Hồng cầu định loại dung dịch Natt – Herick, bạch cầu phương pháp nhuộm Wright & Giemsa Số lượng hồng cầu cá sau điều trị kháng sinh 1,6x106 tế bào/mm3 thấp hồng cầu cá nhiễm bệnh trước sử dụng kháng sinh 1,8x106 tế bào/mm3, khác biệt ý nghĩa thống kê (p>0,05) Lympho sau sử dụng kháng sinh thấp trước sử dụng kháng sinh bạch cầu đơn nhân bạch cầu trung tính sau sử dụng kháng sinh cao trước sử dụng kháng sinh Đối với nghiệm thức, lympho bạch cầu trung tính nghiệm thức không sử dụng kháng sinh có số lượng thấp (13,3x103 tế bào/mm3 7,3x103 tế bào/mm3), số lượng lympho cao nghiệm thức (53,8x103 tế bào/mm3) bạch cầu trung tính cao nghiệm thức (16,6x103 tế bào/mm3) Số lượng bạch cầu đơn nhân cao nghiệm thức với 12,8x103 tế bào/mm3 tiểu cầu cao với số lượng 24.6x103 tế bào/mm3 nghiệm thức Nghiệm thức có số bạch cầu đơn nhân thấp (5,1x103 tế bào/mm3) nghiệm thức có số tiểu cầu thấp (5,3x103 tế bào/mm3) Footer Page of 126 i PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 MỤC LỤC Tóm tắt i Mục lục ii Danh sách bảng iv Danh sách hình v CHƯƠNG I: GIỚI THIỆU CHƯƠNG II: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tình hình dịch bệnh cá tra 2.2 Tình hình bệnh mủ gan cá tra 2.3 Bệnh mủ gan cá 2.4 Tình hình quản lý sử dụng kháng sinh giới Việt Nam 2.5 Kháng sinh 2.5.1 Khái niệm 2.5.2 Cơ chế tác động thuốc kháng sinh 2.5.3 Các loại thuốc kháng sinh thường dùng thủy sản 2.6 Những nghiên cứu kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn E.ictaluri 2.7 Các tiêu huyết học 2.7.1 Hồng cầu ( Erythrocyte) 2.7.2 Bạch cầu đơn nhân 2.7.3 Bạch cầu trung tính ( Neutrophil) 2.7.4 Tiểu cầu ( Thrombocyte 2.7.5 Tế bào lympho ( lymphocyte) 10 CHƯƠNG III: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 Footer Page of 126 ii PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 3.1 Thời gian thực 11 3.2 Địa điểm nghiên cứu 11 3.3 Vật liệu nghiên cứu 11 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu 11 3.3.2 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu 11 3.3.3 Hóa chất 11 3.4 Phương pháp nghiên cứu 12 3.4.1 Chuẩn bị thí nghiệm 12 3.4.2 Bố trí thí nghiệm 12 3.4.3 Các tiêu thu thập 12 3.5 Định danh vi khuẩn 13 3.6 Phương pháp lấy mẫu máu quan sát tiêu huyết học 13 3.6.1 Phương pháp lấy mẫu máu, nhuộm đếm hống cầu 13 3.6.2 Phương pháp lấy mẫu máu, nhuộm đếm bạch cầu 14 3.7 Xử lý số liệu 15 CHƯƠNG IV KẾT QUẢ THẢO LUẬN 16 4.1 Dấu hiệu bệnh lý 16 4.2 Kết thí nghiệm 16 4.3 Kết phân lập vi khuẩn 17 4.4 Kết phân tích huyết học 18 4.4.1 Hồng cầu 18 4.4.2 Bạch cầu 20 CHƯƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 24 5.1 Kết luận 24 5.2 Đề xuất 24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 25 Footer Page of 126 iii PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 Phụ lục 28 Footer Page of 126 iv PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 So sánh độ nhạy loại kháng sinh vi khuẩn E.ictaluri phân lập cá tra bệnh gan thận mủ (nguồn: Nguyễn Đức Hiền) Bảng 3.1 Các loại thuốc liều lượng kháng sinh sử dụng cho nghiệm thức thí nghiệm 12 Bảng 4.1 Sự biến đổi số lượng loại bạch cầu trước sau sử dụng kháng sinh 20 Bảng 4.2 Số lượng loại bạch cầu nghiệm thức sau sử dụng kháng sinh 21 Footer Page of 126 v PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Cá tra bệnh xuất nhiều đốm trắng gan (G), thận (Th) tỳ tạng (Tt)) Hình 2.2 Tế bào hồng cầu Hình 2.3 Bạch cầu đơn nhân Hình 2.4 Bạch cầu trung tính Hình 2.5 Tiểu cầu 10 Hình 2.6 Tế bào lympho 10 Hình 3.1 Buồng đếm hồng cầu 13 Hình 3.2 Thao tác lấy mẫu máu trải mẫu 14 Hình 4.1 Biểu đồ thể tỉ lệ chết nghiệm thức trogn trình thí nghiệm 16 Hình 4.2 Khuẩn lạc môi trường TSA 17 Hình 4.3 Kết nhuộm gram 18 Hình 4.4 Kết kiểm tra loai đường 18 Hình 4.5 Hồng cầu nhiều nhân (100X) 18 Hình 4.6 Hồng cầu không nhân (100X) 18 Hình 4.7 Biểu đồ mật độ hồng cầu cá tra trước, sau sử dụng kháng sinh không sử dụng kháng sinh 19 Hình 4.8 Tế bào lympho (100X) 20 Hình 4.9 Tiểu cầu (100X) 20 Hình 4.10 Bạch cầu trung tính (100X) 20 Hình 4.11 Bạch cầu đơn nhân (100X) 20 Footer Page of 126 vi PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page of 126 Footer Page of 126 vii PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 10 of 126 CHƯƠNG I GIỚI THIỆU Nghề nuôi trồng thuỷ sản ngày phát triển trở thành ngành có đóng góp đáng kể kim ngạch xuất Hiện tại, nhu cầu cá tra cho xuất tiêu thụ nước tăng cao Giải pháp quan trọng để tạo thêm nhiều sản phẩm nuôi công nghiệp tập trung Song song với phát triển đó, vấn đề dịch bệnh cá tra nuôi ngày trở nên trầm trọng Tình hình dịch bệnh xuất nhiều vào mùa mưa, chủ yếu bệnh gan thận có mủ, trắng gan, trắng mang Theo thống kê Bộ nông nghiệp phát triển nông thôn, diện tích nuôi cá tra ĐBSCL giảm trước, tính đến ngày15/8/2008, diện tích thả nuôi tỉnh An Giang 1.392 ha, Cần Thơ - 1.250 ha, Đồng Tháp - 630 ha, Bến Tre - 563 ha, Vĩnh Long - 221 ha, Sóc Trăng - 212 ha, Hậu Giang - 171 Tiền Giang - 118 (Dương Long Trì, 2008) Để hạn chế dịch bệnh người nuôi sử dụng số loại kháng sinh Việc dùng kháng sinh trị bệnh thường tốn hiệu không cao Theo điều tra Nguyễn Tấn Duy Phong ( 2008) tình hình sử dụng thuốc thú y thủy sản tỉnh Cần Thơ An Giang cho thấy chi phí cho việc sử dụng thuốc thú y thủy sản lớn, chiếm 7% tổng chi phí sản xuất Hơn lượng tồn dư kháng sinh không ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm, mà ảnh hưởng đến sức khoẻ người tiêu dùng Việc dùng kháng sinh tùy tiện, không loại, liều lượng cách thức điều trị đưa đến hiệu điều trị kháng sinh ngày giảm tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc Từ thực tế nêu trên, đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri” thực với mục tiêu xác định ảnh hưởng loại kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra khỏe cá bị nhiễm E ictaluri Nội dung đề tài: - Xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra nhiễm E ictaluri Footer Page 10 of 126 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 70 of 126 Footer Page 70 of 126 61 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 71 of 126 Footer Page 71 of 126 62 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 72 of 126 Footer Page 72 of 126 63 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 73 of 126 Footer Page 73 of 126 64 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 74 of 126 Footer Page 74 of 126 65 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 75 of 126 Footer Page 75 of 126 66 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 76 of 126 Footer Page 76 of 126 67 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 77 of 126 Footer Page 77 of 126 68 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 78 of 126 Footer Page 78 of 126 69 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 79 of 126 Footer Page 79 of 126 70 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 80 of 126 Footer Page 80 of 126 71 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 81 of 126 Footer Page 81 of 126 72 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 82 of 126 Footer Page 82 of 126 73 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 83 of 126 Footer Page 83 of 126 74 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com Header Page 84 of 126 Footer Page 84 of 126 75 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version http://www.fineprint.com ... “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri nhằm mục tiêu xác định ảnh hưởng loại thuốc kháng sinh thường dùng nuôi cá tra. .. hypophthalmus) nhiễm Edwardsiella ictaluri thực với mục tiêu xác định ảnh hưởng loại kháng sinh thường dùng nuôi cá tra lên tiêu huyết học cá tra khỏe cá bị nhiễm E ictaluri Nội dung đề tài: - Xác định ảnh. .. cách thức điều trị đưa đến hiệu điều trị kháng sinh ngày giảm tạo dòng vi khuẩn kháng thuốc Từ thực tế nêu trên, đề tài “ Ảnh hưởng thuốc kháng sinh lên tiêu huyết học cá tra (Pangasianodon hypophthalmus)