ĐÁNH GIÁ tác DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM và độc TÍNH bán TRƢỜNG DIỄN của CAO CHIẾT ETHANOL của lá cây bọ mẩy (CLERODENDRUM CYRTOPHYLLUM TURCZ , VERBENACEAE) KHÓA LUẬN tốt NGHIỆP dƣợc sĩ

s TẾ BỘ Y TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC ANH ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƢỜNG DIỄN CỦA CAO CHIẾT ETHANOL CỦA LÁ CÂY BỌ MẨY (CLERODENDRUM CYRTOPHYLLUM TURCZ., VERBENACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ HÀ NỘI - 2019 BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC ANH Mã sinh viên: 1401030 ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH BÁN TRƢỜNG DIỄN CỦA CAO CHIẾT ETHANOL CỦA LÁ CÂY BỌ MẨY (CLERODENDRUM CYRTOPHYLLUM TURCZ., VERBENACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƢỢC SĨ Người hướng dẫn: Ths Nguyễn Thu Hằng Nơi thực hiện: Bộ môn Dƣợc lực HÀ NỘI - 2019 LỜI CẢM ƠN Với tất kính trọng lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn tới Th.S Nguyễn Thu Hằng người trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ em suốt trình thực đề tài Em xin chân thành cảm ơn DS Đinh Đại Độ DS Đinh Thị Kiều Giang anh chị kỹ thuật viên mơn Dược lực giúp đỡ em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn Ban giám hiệu, phịng Đào tạo mơn, phịng ban khác Trường đại học Dược Hà Nội Viện dược liệu tạo điều kiện cho em thời gian học tập nghiên cứu Em xin cảm ơn anh chị, bạn bè nghiên cứu khoa học Bộ môn Dược lực đồng hành, hỗ trợ, động viên em suốt trình thực đề tài Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè ln bên cạnh, ủng hộ, chia sẻ khó khăn động viên em thực khóa luận Hà Nội, tháng năm 2019 Sinh viên Nguyễn Thị Ngọc Anh MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1.TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan viêm 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Cơ chế viêm 1.1.3 Một số loại bạch cầu phản ứng viêm 1.1.4 Một số mơ hình in vivo đánh giá tác dụng chống viêm 1.2 Tổng quan đau 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Vài nét sinh lí đau 1.2.3 Một số mơ hình đánh giá tác dụng giảm đau 10 1.3 Tổng quan chi Cỏ roi ngựa (Clerodedrum) 11 1.3.1 Công dụng 11 1.3.2 Thành phần hóa học 11 1.3.3 Một số nghiên cứu tác dụng sinh học 12 1.4 Tổng quan dƣợc liệu Bọ mẩy 14 1.4.1 Tên khoa học 14 1.4.2 Đặc điểm thực vật 15 1.4.3 Phân bố 15 1.4.4 Thành phần hóa học 15 1.4.5 Một số nghiên cứu tác dụng sinh học 16 1.4.6 Một số thuốc dân gian 18 1.4.7 Công dụng 18 CHƢƠNG 2.ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên vật liệu 19 2.1.1 Dược liệu nghiên cứu 19 2.1.2 Quy trình chiết xuất: 19 2.1.3 Chuẩn bị mẫu thử 19 2.1.4 Động vật nghiên cứu 20 2.1.5 Thuốc thử, hóa chất 20 2.2 Nội dung nghiên cứu 21 2.2.1 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 21 2.2.2 Nội dung nghiên cứu 21 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Phương pháp đánh giá tác dụng giảm đau 22 2.3.2 Phương pháp đánh giá tác dụng chống viêm 23 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu độc tính bán trường diễn 28 2.4 Phƣơng pháp xử lý số liệu 29 CHƢƠNG 3.KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 3.1 Kết đánh giá tác dụng giảm đau 30 3.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm 31 3.2.1 Kết đánh giá tác dụng chống viêm cấp 31 3.2.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm mạn 33 3.3 Kết xác định độc tính bán trƣờng diễn 36 CHƢƠNG 4.BÀN LUẬN 46 4.1 Bàn luận tác dụng giảm đau 46 4.2 Bàn luận tác dụng chống viêm 47 4.2.1 Về tác dụng chống viêm cấp cao chiết ethanol Bọ mẩy 47 4.2.2 Tác dụng chống viêm mạn cao chiết ethanol Bọ mẩy 49 4.3 Bàn luận độc tính bán trƣờng diễn 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ALT Alanin transaminase APC Antigen presenting cell AST Aspartate transaminase ATP Adenosine triphosphat COX Cyclooxygenase DC Dendritic cells DMBA 7,12-dimethyl benz [a]anthracene DNA Deoxyribonucleic acid DPPH 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ED50 Effective dose HCT Hematocrit HGB Hemoglobin HLA Human leukocyte antigen HTAB Hexadecyl trimethyl ammoni bromid IASP International Association for the Study of Pain IC50 The half maximal inhibitory concentration IFN Interferon IL Interleukin LOX Lipoxygenase LPS Lipopolysaccharide MCH Mean corpuscular hemoglobin MCHC Mean corpuscular hemoglobin concentration MCP Monocyte chemoattractant protein MCV Mean corpuscular volume MPO Myeloperoxidase NK Natural killer OECD Organisation for Economic Cooperation and Development PAF Platelet activating Factor PG Prostaglandin PLT Platelet count RBC Red blood cell ROS Reactive oxygen species RT-PCR Reverse transcription polymerase chain reaction TNF Tumor necrosis factor WBC White blood cell WHO World Health Organisation DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1: Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến số đau quặn 30 Bảng 3.2: Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy lên mức độ phù chân chuột (%) theo thời gian 31 Bảng 3.3 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến thông số bạch cầu 32 Bảng 3.4 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến mức độ tăng khối lượng u hạt 34 Bảng 3.5 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến thông số huyết học 38 Bảng 3.6 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến thơng số sinh hóa 39 Bảng 3.7 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến khối lượng quan 40 Bảng 3.8 Hình ảnh vi thể gan, thận chuột nhắt đực 42 Bảng 3.9 Hình ảnh vi thể gan, thận chuột nhắt 43 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 2.1 Quy trình chiết xuất cao ethanol Bọ mẩy 19 Hình 2.2 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 21 Hình 2.3 Quy trình thí nghiệm đánh giá tác dụng giảm đau phương pháp gây đau quặn acid acetic 22 Hình 2.4 Quy trình thí nghiệm đánh giá tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây phù bàn chân chuột carrageenan 23 Hình 2.5 Quy trình thí nghiệm đánh giá tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây viêm phúc mạc carrageenan 25 Hình 2.6 Quy trình thí nghiệm đánh giá tác dụng chống viêm mạn mơ hình gây u hạt 27 Hình 2.7 Quy trình xác định độc tính bán trường diễn 28 Hình 3.1 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến hoạt độ MPO 33 Hình 3.2 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy lên mức độ tăng khối lượng u hạt 34 Hình 3.3 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến khối lượng tuyến ức 35 Hình 3.4 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy lên thông số bạch cầu 36 Hình 3.5 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến khối lượng thể chuột nhắt 37 Hình 3.6 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến khối lượng thể chuột nhắt đực 37 ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm trình bệnh lý thường gặp nhất, xảy tất động vật đa bào, quan, mô Viêm bệnh cụ thể, mà trình bệnh lý chung gặp nhiều bệnh khác Bệnh lý liên quan đến trình viêm đa dạng, từ bệnh thông thường viêm họng, viêm amidan, viêm tuyến nước bọt,… đến bệnh lý nặng viêm gan virus, viêm não,… Như vậy, nhóm thuốc chống viêm đóng vai trị lớn đời sống Hiện nay, thuốc chống viêm sử dụng chủ yếu thuốc hóa dược (với hai nhóm thuốc chống viêm khơng steroid thuốc chống viêm steroid) Tuy nhiên, việc sử dụng thuốc hóa dược lâu dài đặt hai vấn đề bệnh nhân giới chuyên môn quan tâm bao gồm tác dụng không mong muốn thuốc chi phí cho phịng, điều trị bệnh Vì vậy, phương pháp bổ trợ thay thuốc hóa dược quan tâm nghiên cứu, có dược liệu [40] Bọ mẩy (tên khoa học Clerodendrum cyrtophyllum Turcz.) loài thuộc chi Clerodendrum L., loại phân bố nhiều tỉnh phía Bắc Việt Nam như: Thái Nguyên, Cao Bằng, Lạng Sơn, Bắc Giang, Vĩnh Phúc, Phú Thọ, Hịa Bình Trong dân gian, Bọ mẩy sử dụng nhiều điều trị bệnh liên quan đến viêm như: viêm ruột, viêm họng, viêm tuyến nước bọt, cảm mạo phát sốt… Trên giới, có số cơng trình nghiên cứu khoa học chứng minh tác dụng chống viêm Bọ mẩy Tuy nhiên số lượng nghiên cứu cịn Để có sở khoa học cho việc sử dung dược liệu cách hợp lý, thực nghiên cứu ”Đánh giá tác dụng giảm đau, chống viêm độc tính bán trường diễn cao chiết ethanol Bọ mẩy (Clerodendrum cyrtophyllum Turcz., Verbenaceae)” với mục tiêu sau: Đánh giá tác dụng giảm đau cao chiết ethanol Bọ mẩy Đánh giá tác dụng chống viêm cao chiết ethanol Bọ mẩy Đánh giá độc tính bán trường diễn cao chiết ethanol Bọ mẩy Khi gan bị tổn thương làm thay đổi tính thấm màng tế bào, dẫn đến hoạt độ nhiều enzym máu tăng, đặc biệt enzym có nguồn gốc gan Do đó, để đánh giá mức độ tổn thương tế bào gan người ta thường định lượng nồng độ enzym có nguồn gốc gan huyết Khi nồng độ enzym tăng, chứng tỏ tế bào gan bị tổn thương [13] Trong nghiên cứu này, định lượng hai enzym AST ALT máu, hai enzym có ý nghĩa việc chẩn đốn tổn thương tế bào gan Kết nghiên cứu cho thấy nồng độ AST, ALT máu tăng nằm giới hạn bình thường [27] Bên cạnh đó, kết mơ bệnh học cho thấy, mô bệnh học gan hai giống khơng có khác biệt so với lô chứng tương ứng Như vậy, thay đổi không cho thấy tổn thương từ gan Gan có vai trị lớn chuyển hóa glucid, lipid, protid cho thể Định lượng protein toàn phần, cholesterol, glucose máu giúp đánh giá chức chuyển hóa gan [10], [13] Kết nghiên cứu cho thấy khơng có khác biệt có ý nghĩa thông số protein, cholesterol, glucose máu lô thử so với lô chứng (p>0,05), chứng tỏ cao chiết ethanol Bọ mẩy không ảnh hưởng đến chức tổng hợp lipid, protid glucid gan Như vậy, cao chiết ethanol Bọ mẩy không ảnh hưởng đến chức gan 4.3.4 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy chức thận Thận quan nhỏ bé (chỉ chiếm 0,5% trọng lượng thể) lại đảm nhiệm nhiều chức sống thể Một thuốc vào thể, sau thực chức thận thải trừ ngồi thể [14] Tuy nhiên, nhu mô thận nhạy cảm với thuốc, số thuốc có khả gây độc thận [48] Creatin tổng hợp gan, theo dịng máu tới mơ thối hóa thành creatinin Creatinin lọc hoàn toàn qua cầu thận, không tái hấp thu tiết ống thận, khơng bị chuyển hóa thận Nồng độ creatinin huyết tương không phụ thuộc vào thể tích nước tiểu Đó sở để sử dụng creatinin làm xét nghiệm thăm dò chức lọc thận [14] 52 Kết nghiên cứu cho thấy, khối lượng thận theo thể chuột tất lô uống cao chiết ethanol Bọ mẩy khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng (p>0,05) Nồng độ creatinin máu tăng cho thấy ảnh hưởng thuốc chức thận Tuy nhiên, cao chiết ethanol Bọ mẩy hai mức liều nghiên cứu khơng làm tăng có ý nghĩa giá trị creatinin máu Bên cạnh đó, kết mơ bệnh học cho thấy, mô bệnh học thận chuột nhắt trắng hai giống khơng có khác biệt so với lô chứng tương ứng giới hạn bình thường Như vậy, cao chiết ethanol Bọ mẩy không ảnh hưởng đến chức thận 4.3.5 Ảnh hưởng cao chiết ethanol Bọ mẩy đến khối lượng quan Kết nghiên cứu cho thấy khối lượng quan tim, lách, phổi tất lô uống cao chiết ethanol Bọ mẩy khơng có khác biệt có ý nghĩa so với lơ chứng (p>0,05) Như vậy, cao chiết ethanol Bọ mẩy không ảnh hưởng đến khối lượng quan chuột Từ kết nghiên cứu độc tính bán trường diễn, chúng tơi nhận thấy cao chiết ethanol Bọ mẩy độc tính dùng dài ngày 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu tác dụng giảm đau, chống viêm độc tính bán trường diễn cao chiết ethanol Bọ mẩy, xin đưa số kết luận: Về tác dụng giảm đau Cao chiết ethanol Bọ mẩy thể tác dụng giảm đau tất mức liều thử nghiệm 4,8 g/kg, 9,6g/kg, 19,2 g/kg Đồng thời tác dụng giảm đau thể rõ mức liều 19,2 g/kg Về tác dụng chống viêm - Về tác dụng chống viêm cấp Cao chiết ethanol Bọ mẩy thể tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây phù chân carrageenan hai mức liều 2,8 g/kg 5,6 g/kg chuột cống trắng Cao chiết ethanol Bọ mẩy thể tác dụng chống viêm cấp mơ hình gây viêm phúc mạc carrageenan chuột nhắt trắng: liều 4,8 g/kg có tác dụng làm giảm bạch cầu, hai mức liều 4,8 g/kg 9,6 g/kg có tác dụng làm giảm hoạt độ MPO - Về tác dụng chống viêm mạn Cao chiết ethanol Bọ mẩy thể tác dụng chống viêm mạn mơ hình gây u hạt thực nghiệm bơng chuột cống trắng: liều 2,8 g/kg có tác dụng giảm khối lượng u hạt khô, liều 5,6 g/kg có tác dụng làm giảm khối lượng u hạt ướt, u hạt khô khối lượng tuyến ức Cả hai mức liều 2,8 g/kg 5,6 g/kg có tác dụng làm giảm bạch cầu Về độc tính bán trƣờng diễn - Cao chiết ethanol Bọ mẩy liều 4,8 g/kg 14,4 g/kg uống liên tục 28 ngày khơng ảnh hưởng đến tình trạng chung, gia tăng khối lượng thể, số huyết học, chức gan, thận khối lượng quan KIẾN NGHỊ Từ kết trình thực nghiệm, chúng tơi đưa đề xuất sau: Tiếp tục nghiên cứu tác dụng chống viêm hoạt chất nhóm hoạt chất số phân đoạn tiềm phân lập từ cao chiết ethanol Bọ mẩy, đặc biệt chất nhóm flavonoid, triterpen, steroid 54 Nghiên cứu tác dụng chống viêm in vitro để hiểu rõ chế chống viêm Bọ mẩy : khả ức chế COX, LOX chất trung gian khác liên quan đến viêm như: PGE2; TNF-α, IL-6, 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ Y tế - Viện Kiểm nghiệm (2005), Dự thảo hướng dẫn thử độc tính thuốc Bộ Y Tế (2007), Dược lý học tập 1, NXB Y học Hà Nội, tr 67-72 Tào Duy Cần, Trần Sỹ Viên (2007), Cây thuốc vị thuốc thuốc Việt Nam, NXB Hà Nội, tr 74 Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 61-62, 748-749 Võ Văn Chi (2002), Từ điển thực vật thông dụng, NXB Khoa học kỹ thuật, tập 1, tr 713-720 Nguyễn Duy Cương (1999), Từ điển bách khoa dược học, NXB Từ điển bách khoa, tr 59, 79-80 Nguyễn Duy Cương, Nguyễn Hữu Quỳnh (1999), Từ điển bách khoa dược học, NXB Từ điển bách khoa, tr 79-80 Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 131-132 Hà Việt Hải, Hoàng Thanh Hương, Nguyễn Hữu Khôi (2000), "Nghiên cứu khả chống ung thư thành phần flavonid chiết xuất từ số thuộc chi Clerodendron Việt Nam", Tạp chí Dược học, Số 8, tr 10-13 10 Hồng Thanh Hương, Hà Việt Hải, Nguyễn Hữu Khôi, (2000), "Nghiên cứu khả kháng khuẩn flavonoid số loài Clerodendron thuộc họ Cỏ roi ngựa Việt Nam", Tạp chí Dược học, Số 9, tr 12-14 11 Vũ Đình Hồng, Bá Thị Châm, Đặng Thị Huyền Trang, Phạm Gia Điền (2006), "Nghiên cứu hóa học bọ mẩy (Clerodendron cyrtophyllum turcz.) Phần 1, Thành phần hóa học dịch chiết n-hexan rễ cây", Tạp chí hóa học, Số 44, tr 704-706 12 Vũ Đình Hồng, Bá Thị Châm, Đặng Thị Huyền Trang, Phạm Gia Điền (2006), "Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa flavonoid từ Bọ mẩy (Clerodendron cyrtophyllum Turcz.)", Tạp chí Dược học, Số 367, tr 30-33 13 Trần Thị Thanh Huyền (2012), Tạp chí Nghiên cứu Dược thông tin thuốc, Số 14 Nguyễn Thế Khánh, Phạm Tử Dương (2005), Xét nghiệm sử dụng lâm sàng, NXB Y học, tr 56-59 15 Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, tr 3740, 67-68 16 Vũ Xuân Phương (2007), Thực vật chí Việt Nam, Tập 6, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 123-125 17 Lê Đình Roanh, Nguyễn Đình Mão (1997), Bệnh học viêm nhiễm khuẩn, NXB Y học, tr 46-50 18 Trường đại học Dược Hà Nơi - mơn Hóa sinh (2005), Hóa sinh lâm sàng, Hà Nội, tr 123-126 19 Trường đại học Dược Hà Nội (2014), Hóa sinh học, NXB Y học, Hà Nội, tr 316-317 20 Trường đại học Y Hà Nội (2005), Sinh lý học, NXB Y học, Hà Nội, tr 125-127 21 Trường đại học Y tế công cộng (2013), Sinh lý bệnh miễn dịch học, NXB Y học, Hà Nội, tr 62-63 22 Viện Dược liệu (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 145-146 23 Viện Dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo, NXB Khoa học kỹ thuật, tr 58-63, 140-142 Tiếng Anh 24 Al Rehaily Adnan J, El Tahir Kamal EH, Mossa Jaber S, Rafatullah Syed (2001), "Pharmacological studies of various extracts and the major constituent, lupeol, obtained from hexane extract of Teclea nobilis in rodents", Natural Product Sciences 7(3), pp 76-82 25 Ancuta Petronela, Rao Ravi, Moses Ashlee, Mehle Andrew, Shaw Sunil K, Luscinskas F William, Gabuzda Dana (2003), "Fractalkine preferentially mediates arrest and migration of CD16+ monocytes", Journal of Experimental Medicine 197(12), pp 1701-1707 26 Andersen Oyvind M, Markham Kenneth R (2005), Flavonoids: chemistry, biochemistry and applications, CRC press 27 Boehm Olaf, Zur Berndt, Koch Alexander, Tran Nguyen, Freyenhagen Rainer, Hartmann Matthias, Zacharowski Kai (2007), "Clinical chemistry reference database for Wistar rats and C57/BL6 mice", Biological chemistry 388(11), pp 1255-1256 28 Bradley Peter P, Priebat Dennis A, Christensen Robert D, Rothstein Gerald (1982), "Measurement of cutaneous inflammation: estimation of neutrophil content with an enzyme marker", Journal of Investigative Dermatology 78(3), pp 206-209 29 Carl, Nathan (2006), "Neutrophils and immunity: challenges and opportunities", Nature reviews immunology 6(3), pp 173 30 Chen Linlin, Deng Huidan, Cui Hengmin, Fang Jing, Zuo Zhicai, Deng Junliang, Li Yinglun, Wang Xun, Zhao Ling (2018), "Inflammatory responses and inflammation-associated diseases in organs", Oncotarget 9(6), pp 7204 31 Cheng Huey-Hwa, Wang Hui-Kang, Ito Junko, Bastow Kenneth F, Tachibana Yoko, Nakanishi Yuka, Xu Zhihong, Luo Tsui-Yun, Lee Kuo-Hsiung (2001), "Cytotoxic Pheophorbide-Related Compounds from Clerodendrum c alamitosum and C cyrtophyllum", Journal of natural products 64(7), pp 915-919 32 Collier HOJ, Dinneen LC, Johnson Christine A, Schneider C (1968), "The abdominal constriction response and its suppression by analgesic drugs in the mouse", British journal of pharmacology and chemotherapy 32(2), pp 295310 33 Di Rosa, Massimo (1972), "Biological properties of carrageenan", Journal of pharmacy and pharmacology 24(2), pp 89-102 34 Fujiwara Nagatoshi, Kobayashi Kazuo (2005), "Macrophages in inflammation", Current Drug Targets-Inflammation & Allergy 4(3), pp 281-286 35 Goodman, Louis Sanford (1996), Goodman and Gilman's the pharmacological basis of therapeutics, Vol 1549, McGraw-Hill New York 36 Griswold DE, Webb E, Schwartz L, Hanna N (1987), "Arachidonic acidinduced inflammation: inhibition by dual inhibitor of arachidonic acid metabolism, SK&F 86002", Inflammation 11(2), pp 189-199 37 Huang Chifu, Šali Andrej, Stevens Richard L (1998), "Regulation and function of mast cell proteases in inflammation", Journal of clinical immunology 18(3), pp 169-183 38 Jabbour Henry, Sales Kurt, Catalano Roberto, Norman Jane (2009), "Inflammatory pathways in female reproductive health and disease", Reproduction 39 K.D.Rainsford (2007), Anti-inflammatory drugs in the 21st century, Biomedical Research Centre, Sheffield Hallam University, Howard Street 40 Kang Dae Gill, Lee Yong Sup, Kim Hyoung Ja, Lee Yun Mi, Lee Ho Sub (2003), "Angiotensin converting enzyme inhibitory phenylpropanoid glycosides from Clerodendron trichotomum", Journal of Ethnopharmacology 89(1), pp 151-154 41 Kar Pallab, Goyal Arvind Kumar, Das Abhaya Prasad, Sen Arnab (2014), "Antioxidant and pharmaceutical potential of Clerodendrum L.: An overview", International Journal of Green Pharmacy (IJGP) 8(4) 42 Koyasu Shigeo, Moro Kazuyo (2012), "Role of innate lymphocytes in infection and inflammation", Frontiers in immunology 3, pp 101 43 Kumar Shashank, Pandey Abhay K (2013), "Chemistry and biological activities of flavonoids: an overview", The Scientific World Journal 2013 44 Liu Huan, Wang Lan, Wang Myeong-Hyeon (2011), "Antioxidant and nitric oxide release inhibition activities of methanolic extract from Clerodendrum cyrtophyllum Turcz", Horticulture, Environment, and Biotechnology 52(3), pp 309-314 45 Maleki N, Garjani A, Nazemiyeh H, Nilfouroushan N, Sadat AT Eftekhar, Allameh Z, Hasannia N (2001), "Potent anti-inflammatory activities of hydroalcoholic extract from aerial parts of Stachys inflata on rats", Journal of Ethnopharmacology 75(2-3), pp 213-218 46 Maria C, Bruno Maurizio, Rodríguez Benjamín, Savona Guiseppe (1992), "Abietane and 20-nor-abietane diterpenoids from the root of Meriandra benghalensis", Phytochemistry 31(11), pp 3953-3955 47 Maroon Joseph C, Bost Jeffrey W, Maroon Adara (2010), "Natural antiinflammatory agents for pain relief", Surgical Neurology International 48 Naidoo S, Meyers AM (2015), "Drugs and the kidney", South African Medical Journal 105(4), pp 332-337 49 Nakamura H, Shimoda A, Ishii K, Kadokawa T (1986), "Central and peripheral analgesic action of non-acidic non-steroidal anti-inflammatory drugs in mice and rats", Archives internationales de pharmacodynamie et de therapie 282(1), pp 16-25 50 Organization, World Health (2000), "Working group on the safety and efficacy of herbal medicine", Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization 51 Pingsusaen Phornchai, Kunanusorn Puongtip, Khonsung Parirat, Chiranthanut Natthakarn, Panthong Ampai, Rujjanawate Chaiyong (2015), "Investigation of anti-inflammatory, antinociceptive and antipyretic activities of Stahlianthus involucratus rhizome ethanol extract", Journal of Ethnopharmacology 162, pp 199-206 52 Rang H.P et al (2007), Pharmacology 6th, Churchil Livingston 53 Rathee Permender, Chaudhary Hema, Rathee Sushila, Rathee Dharmender, Kumar Vikash, Kohli Kanchan (2009), "Mechanism of action of flavonoids as anti-inflammatory agents: a review", Inflammation & allergy-drug targets (formerly current drug targets-inflammation & allergy) 8(3), pp 229-235 54 Ribeiro Ronaldo A, Vale Mariana L, Thomazzi Sara M, Paschoalato Adriana BP, Poole Steve, Ferreira Sergio H, Cunha Fernando Q (2000), "Involvement of resident macrophages and mast cells in the writhing nociceptive response induced by zymosan and acetic acid in mice", European journal of pharmacology 387(1), pp 111-118 55 Robb CT, Regan KH, Dorward DA, Rossi AG (2016), Key mechanisms governing resolution of lung inflammation, Seminars in immunopathology, Springer, pp 425-448 56 Serafini Mauro, Peluso Ilaria, Raguzzini Anna (2010), "Flavonoids as antiinflammatory agents", Proceedings of the Nutrition Society 69(3), pp 273-278 57 Shrivastava Neeta, Patel Tejas, "Clerodendrum and healthcare: an overview", Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology 1(1), pp 142-150 58 Srivastava N, Patel T (2007), "Clerodendrum and healthcare: an overview-part II phytochemistry and biotechnology", Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology 1(2), pp 209-223 59 Swingle KF, Shideman FE (1972), "Phases of the inflammatory response to subcutaneous implantation of a cotton pellet and their modification by certain antiinflammatory agents", Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 183(1), pp 226-234 60 Tian Xiao-drong, Min Zhi-da, Xie Ning, Lei Yan, Tian Zi-yue, Zheng Qi-tai, Xu Ren-nan, Tanaka Toshiyuki, Ilmuna Munekazu, Mizuno Mizuo (1993), "Abietane diterpenes from Clerodendron cyrtophyllum", Chemical and pharmaceutical bulletin 41(8), pp 1415-1417 61 Vogel, Hans Gerhard (2008), Drug discovery and evaluation: pharmacological assays ed 62 Wang Peng, Sun Li, Tan Junjie, Xu Jinwen, Guo Fujiang, Li Yiming (2012), "Two new glycosidated coumaramides from Clerodendron cyrtophyllum", Fitoterapia 83(8), pp 1494-1499 63 Weber Christian, Belge KaiUwe, von Hundelshausen Philipp, Draude Georg, Steppich Birgit, Mack Mathias, Frankenberger Marion, Weber Kim SC, Ziegler Heitbrock HW Löms (2000), "Differential chemokine receptor expression and function in human monocyte subpopulations", Journal of leukocyte biology 67(5), pp 699-704 64 Winter, Charles A, Risley, Edwin A, and Nuss, George W (1962), "Carrageenin-induced edema in hind paw of the rat as an assay for antiinflammatory drugs", Proceedings of the society for experimental biology and medicine 111(3), pp 544-547 65 Zhang, Jun-Ming and An, Jianxiong (2007), "Cytokines, inflammation and pain", International anesthesiology clinics 45(2), pp 27 66 Ziegler‐Heitbrock, Loems (2007), "The CD14+ CD16+ blood monocytes: their role in infection and inflammation", Journal of leukocyte biology 81(3), pp 584-592 67 Zimmerman, Hyman J (1999), Hepatotoxicity: the adverse effects of drugs and other chemicals on the liver, Lippincott Williams & Wilkins 68 Co-operation, Organisation for Economic and Development (2008), Test No 407: Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents, OECD Publishing TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 Bộ Y tế - Viện Kiểm nghiệm (2005), Dự thảo hướng dẫn thử độc tính thuốc, Bộ, Editor^Editors Bộ Y Tế (2007), Dược lý học tập Bộ, ed Bộ, NXB Y học Hà Nội Đỗ Tất Lợi (1999), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, ed Lợi, NXB Y học Hà Việt Hải, Hồng Thanh Hương, and Nguyễn Hữu Khơi (2000), "Nghiên cứu khả chống ung thư thành phần flavonid chiết xuất từ số thuộc chi Clerodendron Việt Nam", Tạp chí Dược học(8), pp 10-13 Hà Việt Hải, Hồng Thanh Hương, Nguyễn Hữu Khơi, (2000), "Nghiên cứu khả kháng khuẩn flavonoid số loài Clerodendron thuộc họ Cỏ roi ngựa Việt Nam", Tạp chí Dược học(9), pp 12-14 Lê Đình Roanh and Nguyễn Đình Mão (1997), Bệnh học viêm nhiễm khuẩn, ed Roanh, NXB Y học Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, ed Đức, NXB Nông nghiệp Nguyễn Duy Cương (1999), Từ điển bách khoa dược học, ed Cương, NXB Từ điển bách khoa Nguyễn Duy Cương and Nguyễn Hữu Quỳnh (1999), Từ điển bách khoa dược học, ed Cương, NXB Từ điển bách khoa, tr 79-80 Nguyễn Thế Khánh and Phạm Tử Dương (2005), Xét nghiệm sử dụng lâm sàng, ed Khánh, NXB Y học Tào Duy Cần and Trần Sỹ Viên (2007), Cây thuốc vị thuốc thuốc Việt Nam, ed Cần, NXB Hà Nội Trần Thị Thanh Huyền, et al (2012), Tạp chí Nghiên cứu Dược thông tin thuốc(4) Trường đại học Dược Hà Nơi - mơn Hóa sinh (2005), Hóa sinh lâm sàng, ed Trường, Hà Nội Trường đại học Dược Hà Nội (2014), Hóa sinh học, ed Trường, Hà Nội Trường đại học Y Hà Nội (2005), Sinh lý học, ed Trường Trường đại học Y tế công cộng (2013), Sinh lý bệnh miễn dịch học, ed Trường, NXB Y học, Hà Nội Viện Dược liệu (2004), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, ed Viện, Vol Tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật Viện Dược liệu (2006), Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo, ed Viện, NXB Khoa học kỹ thuật Võ Văn Chi (1997), Từ điển thuốc Việt Nam, ed Chi, NXB Y học Võ Văn Chi (2002), Từ điển thực vật thông dụng, ed Chi, Vol Tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật Vũ Đình Hồng, et al (2006), "Nghiên cứu hóa học bọ mẩy (Clerodendron cyrtophyllum turcz.) Phần 1, Thành phần hóa học dịch chiết n-hexan rễ cây" Vũ Đình Hồng, et al (2006), "Nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa flavonoid từ Bọ mẩy (Clerodendron cyrtophyllum Turcz.)", Tạp chí Dược học(Số 367), pp 30-33 Vũ Xuân Phương (2007), Thực vật chí Việt Nam, ed Phương, Vol Tập 6, NXB Khoa học kỹ thuật Al Rehaily Adnan J, El Tahir Kamal EH, Mossa Jaber S, Rafatullah Syed (2001), "Pharmacological studies of various extracts and the major constituent, lupeol, obtained from hexane extract of Teclea nobilis in rodents", Natural Product Sciences 7(3), pp 76-82 Ancuta Petronela, Rao Ravi, Moses Ashlee, Mehle Andrew, Shaw Sunil K, Luscinskas F William, Gabuzda Dana (2003), "Fractalkine preferentially mediates 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 arrest and migration of CD16+ monocytes", Journal of Experimental Medicine 197(12), pp 1701-1707 Andersen Oyvind M, Markham Kenneth R (2005), Flavonoids: chemistry, biochemistry and applications, CRC press Boehm Olaf, Zur Berndt, Koch Alexander, Tran Nguyen, Freyenhagen Rainer, Hartmann Matthias, Zacharowski Kai (2007), "Clinical chemistry reference database for Wistar rats and C57/BL6 mice", Biological chemistry 388(11), pp 1255-1256 Bradley Peter P, Priebat Dennis A, Christensen Robert D, Rothstein Gerald (1982), "Measurement of cutaneous inflammation: estimation of neutrophil content with an enzyme marker", Journal of Investigative Dermatology 78(3), pp 206-209 Carl, Nathan (2006), "Neutrophils and immunity: challenges and opportunities", Nature reviews immunology 6(3), p 173 Chen Linlin, Deng Huidan, Cui Hengmin, Fang Jing, Zuo Zhicai, Deng Junliang, Li Yinglun, Wang Xun, Zhao Ling (2018), "Inflammatory responses and inflammationassociated diseases in organs", Oncotarget 9(6), p 7204 Cheng Huey-Hwa, Wang Hui-Kang, Ito Junko, Bastow Kenneth F, Tachibana Yoko, Nakanishi Yuka, Xu Zhihong, Luo Tsui-Yun, Lee Kuo-Hsiung (2001), "Cytotoxic Pheophorbide-Related Compounds from Clerodendrum c alamitosum and C cyrtophyllum", Journal of natural products 64(7), pp 915-919 Collier HOJ, Dinneen LC, Johnson Christine A, Schneider C (1968), "The abdominal constriction response and its suppression by analgesic drugs in the mouse", British journal of pharmacology and chemotherapy 32(2), pp 295-310 Di Rosa, Massimo (1972), "Biological properties of carrageenan", Journal of pharmacy and pharmacology 24(2), pp 89-102 Fujiwara Nagatoshi, Kobayashi Kazuo (2005), "Macrophages in inflammation", Current Drug Targets-Inflammation & Allergy 4(3), pp 281-286 Goodman, Louis Sanford (1996), Goodman and Gilman's the pharmacological basis of therapeutics, Vol 1549, McGraw-Hill New York Griswold DE, Webb E, Schwartz L, Hanna N (1987), "Arachidonic acid-induced inflammation: inhibition by dual inhibitor of arachidonic acid metabolism, SK&F 86002", Inflammation 11(2), pp 189-199 Huang Chifu, Šali Andrej, Stevens Richard L (1998), "Regulation and function of mast cell proteases in inflammation", Journal of clinical immunology 18(3), pp 169183 Jabbour Henry, Sales Kurt, Catalano Roberto, Norman Jane (2009), "Inflammatory pathways in female reproductive health and disease", Reproduction K.D.Rainsford (2007), Anti-inflammatory drugs in the 21st century, Biomedical Research Centre, Sheffield Hallam University, Howard Street Kang Dae Gill, Lee Yong Sup, Kim Hyoung Ja, Lee Yun Mi, Lee Ho Sub (2003), "Angiotensin converting enzyme inhibitory phenylpropanoid glycosides from Clerodendron trichotomum", Journal of Ethnopharmacology 89(1), pp 151-154 Kar Pallab, Goyal Arvind Kumar, Das Abhaya Prasad, Sen Arnab (2014), "Antioxidant and pharmaceutical potential of Clerodendrum L.: An overview", International Journal of Green Pharmacy (IJGP) 8(4) Koyasu Shigeo, Moro Kazuyo (2012), "Role of innate lymphocytes in infection and inflammation", Frontiers in immunology 3, p 101 Kumar Shashank, Pandey Abhay K (2013), "Chemistry and biological activities of flavonoids: an overview", The Scientific World Journal 2013 Liu Huan, Wang Lan, Wang Myeong-Hyeon (2011), "Antioxidant and nitric oxide release inhibition activities of methanolic extract from Clerodendrum cyrtophyllum Turcz", Horticulture, Environment, and Biotechnology 52(3), pp 309-314 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 Maleki N, Garjani A, Nazemiyeh H, Nilfouroushan N, Sadat AT Eftekhar, Allameh Z, Hasannia N (2001), "Potent anti-inflammatory activities of hydroalcoholic extract from aerial parts of Stachys inflata on rats", Journal of Ethnopharmacology 75(2-3), pp 213-218 Maria C, Bruno Maurizio, Rodríguez Benjamín, Savona Guiseppe (1992), "Abietane and 20-nor-abietane diterpenoids from the root of Meriandra benghalensis", Phytochemistry 31(11), pp 3953-3955 Maroon Joseph C, Bost Jeffrey W, Maroon Adara (2010), "Natural anti-inflammatory agents for pain relief", Surgical Neurology International Naidoo S, Meyers AM (2015), "Drugs and the kidney", South African Medical Journal 105(4), pp 332-337 Nakamura H, Shimoda A, Ishii K, Kadokawa T (1986), "Central and peripheral analgesic action of non-acidic non-steroidal anti-inflammatory drugs in mice and rats", Archives internationales de pharmacodynamie et de therapie 282(1), pp 16-25 Organization, World Health (2000), "Working group on the safety and efficacy of herbal medicine", Report of regional office for the western pacific of the World Health Organization Pingsusaen Phornchai, Kunanusorn Puongtip, Khonsung Parirat, Chiranthanut Natthakarn, Panthong Ampai, Rujjanawate Chaiyong (2015), "Investigation of antiinflammatory, antinociceptive and antipyretic activities of Stahlianthus involucratus rhizome ethanol extract", Journal of Ethnopharmacology 162, pp 199-206 Rang H.P et al (2007), Pharmacology 6th, Churchil Livingston Rathee Permender, Chaudhary Hema, Rathee Sushila, Rathee Dharmender, Kumar Vikash, Kohli Kanchan (2009), "Mechanism of action of flavonoids as antiinflammatory agents: a review", Inflammation & allergy-drug targets (formerly current drug targets-inflammation & allergy) 8(3), pp 229-235 Ribeiro Ronaldo A, Vale Mariana L, Thomazzi Sara M, Paschoalato Adriana BP, Poole Steve, Ferreira Sergio H, Cunha Fernando Q (2000), "Involvement of resident macrophages and mast cells in the writhing nociceptive response induced by zymosan and acetic acid in mice", European journal of pharmacology 387(1), pp 111-118 Robb CT, Regan KH, Dorward DA, Rossi AG (2016), Key mechanisms governing resolution of lung inflammation, Seminars in immunopathology, Springer, pp 425448 Serafini Mauro, Peluso Ilaria, Raguzzini Anna (2010), "Flavonoids as antiinflammatory agents", Proceedings of the Nutrition Society 69(3), pp 273-278 Shrivastava Neeta, Patel Tejas, "Clerodendrum and healthcare: an overview", Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology 1(1), pp 142-150 Srivastava N, Patel T (2007), "Clerodendrum and healthcare: an overview-part II phytochemistry and biotechnology", Medicinal and Aromatic Plant Science and Biotechnology 1(2), pp 209-223 Swingle KF, Shideman FE (1972), "Phases of the inflammatory response to subcutaneous implantation of a cotton pellet and their modification by certain antiinflammatory agents", Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 183(1), pp 226-234 Tian Xiao-drong, Min Zhi-da, Xie Ning, Lei Yan, Tian Zi-yue, Zheng Qi-tai, Xu Rennan, Tanaka Toshiyuki, Ilmuna Munekazu, Mizuno Mizuo (1993), "Abietane diterpenes from Clerodendron cyrtophyllum", Chemical and pharmaceutical bulletin 41(8), pp 1415-1417 Vogel, Hans Gerhard (2008), Drug discovery and evaluation: pharmacological assays ed 62 63 64 65 66 67 68 Wang Peng, Sun Li, Tan Junjie, Xu Jinwen, Guo Fujiang, Li Yiming (2012), "Two new glycosidated coumaramides from Clerodendron cyrtophyllum", Fitoterapia 83(8), pp 1494-1499 Weber Christian, Belge KaiUwe, von Hundelshausen Philipp, Draude Georg, Steppich Birgit, Mack Mathias, Frankenberger Marion, Weber Kim SC, Ziegler Heitbrock HW Löms (2000), "Differential chemokine receptor expression and function in human monocyte subpopulations", Journal of leukocyte biology 67(5), pp 699-704 Winter, Charles A, Risley, Edwin A, and Nuss, George W (1962), "Carrageenininduced edema in hind paw of the rat as an assay for antiinflammatory drugs", Proceedings of the society for experimental biology and medicine 111(3), pp 544547 Zhang, Jun-Ming and An, Jianxiong (2007), "Cytokines, inflammation and pain", International anesthesiology clinics 45(2), p 27 Ziegler‐Heitbrock, Loems (2007), "The CD14+ CD16+ blood monocytes: their role in infection and inflammation", Journal of leukocyte biology 81(3), pp 584-592 Zimmerman, Hyman J (1999), Hepatotoxicity: the adverse effects of drugs and other chemicals on the liver, Lippincott Williams & Wilkins Co-operation, Organisation for Economic and Development (2008), Test No 407: Repeated Dose 28-day Oral Toxicity Study in Rodents, OECD Publishing ... ( 6,4 - 9,9 ) ( 5,1 - 8,2 ) ( 3,9 - 8,2 ) 9,5 1 0,4 9,2 1 0,5 9,5 9,4 ( 8,6 -1 3,5 ) ( 8,3 -1 3,7 ) ( 4,3 -1 0,8 ) ( 8,7 -1 3,9 ) ( 7,8 -1 1,0 ) (5-1 2,4 ) 3 3,1 3 8,0 3 2,4 3 5,4 3 4,5 3 2,7 (3 0,2 -5 1,0 ) (2 9,5 -5 0,5 ) (1 5,0 -3 9,1 ) (3 0,3 -4 9,4 )... 4,5 5,2 ( 3,8 - 6,1 ) Chứng Cao chiết ethanol Bọ mẩy 4.8g/kg 14.4g/kg 10 10 10 5,5 5,4 5,2 5,6 ( 2,6 - 8,1 ) ( 2,3 - 8,7 ) ( 4,1 - 8,6 ) ( 3,1 - 6,9 ) ( 3,2 - 7,6 ) 6,5 7,4 6,6 6,7 7,0 6,6 ( 5,8 - 8,8 ) ( 5,8 - 9,1 ) ( 3,3 - 7,4 )... (3 0,3 -4 9,4 ) (2 6,3 -4 3,1 ) 5 2,9 5 2,3 4 9,3 5 2,9 5 0,5 (4 9,3 -5 8,0 ) (4 8,9 -5 5,4 ) (4 5,2 -5 5,9 ) (4 6,1 -5 5,4 ) (4 5,3 -5 3,0 ) 1 5,0 1 4,3 (1 3,8 -1 6,1 ) (1 3,5 -1 5,2 ) 2 8,3 2 7,7 1 4,3 (13-1 5,9 ) 2 8,5 1 4,9 1 4,0 * (1 3,2 -1 6,0 )