Đang tải... (xem toàn văn)
Nghiên cứu tác dụng giảm đau, của bài thuốc An vị thang bằng sử dụng test đau quặn trên 40 chuột nhắt chia thành 4 lô: lô chứng, lô uống asperic liều 100mg/kg và uống An vị thang (liều 38,4/kg và 76,8 g/kg) kết quả cho thấy An vị thang liều 76,8 g/kg có tác dụng giảm đau (giảm số cơn đau quặn), kết quả này gần tương đương với khi uống asperic liều 100mg/kg.
NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG Đánh giá tác dụng giảm đau chống viêm loét tá tràng thuốc An vị thang thực nghiệm Đặng Thành Chung1, Bùi Thanh Hà2, Cấn Văn Mão1 Bộ môn Sinh lý bệnh, Học viện quân y Bộ môn, Khoa Y học cổ truyền, Bệnh viện Quân y 103, Học viện Quân y TÓM TẮT Nghiên cứu tác dụng giảm đau, thuốc An vị thang sử dụng test đau quặn 40 chuột nhắt chia thành lô: lô chứng, lô uống asperic liều 100mg/kg uống An vị thang (liều 38,4/kg 76,8 g/kg) kết cho thấy An vị thang liều 76,8 g/kg có tác dụng giảm đau (giảm số đau quặn), kết gần tương đương với uống asperic liều 100mg/kg Tương tự, đánh giá tác dụng chống viêm loét tá tràng thực 50 chuột cống trắng động vật chia thành nhóm: nhóm chứng, nhóm gây viêm tá tràng (bằng cysteamine hydrochloride (450 mg / kg) điều trị nước muối, nhóm gây viêm điều trị An vị thang (2 liều khác nhau: 22,4g/kg 44,8 g/kg) nhóm gây viêm điều trị Famotidin (liều 50mg/kg) ngày liên tục Kết nhận thấy: An vị thang (liều 44,8g/kg ) có tác dụng giảm viêm loét tá tràng (giảm số ổ loét, mức độ loét, số loét tăng phần trăm ức chế loét) chuột gây viêm loét tá tràng cysteamine hydrochloride Tác dụng An vị thang (liều 44,8g/kg) tương tự Famotidin (liều 50mg/kg) chuột Từ khóa: An vị thang, viêm loét tá tràng, giảm đau, bảo vệ niêm mạc tá tràng ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh viêm loét dày – tá tràng (VLDD- TT) bệnh phổ biến giới Việt Nam Hiện giới tỷ lệ mắc bệnh khoảng 5%10%; Liên xô cũ 3%-4% dân số; Mỹ 1000 dân có 19 người mắc bệnh Bệnh gặp lứa tuổi, thường kéo dài khiến người bệnh khó chịu, ảnh hưởng đến chất lượng sống công việc, làm giảm sút sức lao động toàn xã hội [1] Hiện viêm loét DD- HTT Helicobacter pylori dương tính điều trị nội khoa Các thuốc y học đại nhiều cho hiệu cao tỷ lệ kháng thuốc H.P chiếm tỷ lệ cao ảnh hưởng lớn đến hiệu điều trị Do việc tiếp tục tìm kiếm thuốc mới, đặc biệt thuốc có nguồn gốc từ thảo dược có hiệu quả, an tồn, giá thành rẻ nhu cầu cần thiết, hướng nghiên cứu nhà khoa học quan tâm [2],[3] Bài thuốc “An vị thang” gồm 13 vị thuốc sẵn có Ngày nhận bài: 06/08/2020 Ngày phản biện: 25/09/2020 Ngày chấp nhận đăng: 02/10/2020 TẠP CHÍ NỘI KHOA VIỆT NAM | SỐ 19+20/20200 125 NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG Việt Nam để điều trị viêm loét dày tá tràng Chúng tiến hành nghiên cứu với mục đích: Đánh giá tác dụng giảm đau, chống loét tá tràng An vị thang động vật thực nghiệm thực nghiệm, tạo tiền đề cho việc mở rộng phạm vi ứng dụng thuốc lâm sàng, đồng thời góp phần làm phong phú thêm phương pháp điều trị viêm loét dày - tá tràng ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Đánh giá tác dụng giảm đau - Chuột nhắt trắng 40 chia ngẫu nhiên thành lô, lô 10 Lô (chứng): Uống nước cất liều 0,2 ml/10g/ ngày ngày Lô 2: Uống aspégic liều 100mg/kg lần trước gây đau Lô 3: Uống An vị thang liều 38,4g dược liệu/kg/ ngày ngày Lô 4: Uống An vị thang liều 76,8g dược liệu/kg/ ngày ngày Đánh giá tác dụng chống loét tá tràng An vị thang Chuột cống trắng 40 chia thành lô + Lô chứng: Uống d2 NaCl 0,9% (1ml/100g) ngày + Lơ mơ hình: Uống d2 NaCl 0,9% (1ml/100g) ngày Ngày thứ 4, uống d2 NaCl 0,9%, sau 30 phút, uống cysteamine hydrochloride (450 mg/kg) + Lô tham chiếu: Uống famotidine (liều 50mg/ kg) ngày Ngày thứ 4, uống famotidine, sau 30 phút, uống cysteamine hydrochloride (liều 450 mg / kg) + Lô trị 1: Uống An vị thang (liều 22,4g dược liệu /kg) ngày Ngày thứ 4, uống thuốc An vị thang, sau 30 phút, uống cysteamine hydrochloride 126 TẠP CHÍ NỘI KHOA VIỆT NAM | SỐ 19+20/2020 (liều 450 mg / kg) + Lô trị 2: Uống An vị thang (liều 44,8g dược liệu /kg) ngày Ngày thứ 4, uống thuốc An vị thang, sau 30 phút, uống cysteamine hydrochloride (liều 450 mg / kg) Phương pháp nghiên cứu Phương tiện, dụng cụ, hóa chất nghiên cứu * Dụng cụ nghiên cứu - Kính hiển vi soi Zeiss Stemi DV4 (Zeiss, Đức) Hình Kính hiển vi soi mâm theo dõi hành vi - Mâm theo dõi hành vi hãng Ugo-Basile (Italy) - Cốc chia vạch, bơm kim tiêm 1ml… * Thuốc, hóa chất nghiên cứu tác dụng dược lý - Bài thuốc An vị thang: sắc dạng cao chiết với nồng độ cô đặc tối đa 4g/ml Thành phần thuốc sau: Bảng Công thức thuốc An vị thang Tên vị Tên khoa học Khối lượng (gam) Hoàng liên Rhizoma Coptidis 12 Hương phụ Rhizoma Cyperi 12 Ngô thù Fructus Evodiae 06 NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG Bạch truật Rhizoma Atractylodis Macrocephalae 12 Hoàng kỳ Radix Astragali 15 Cam thảo Radix Glycyrrhizae 08 Huyền hồ Rhzoma Corydalis 12 Ô tặc Cốt Endoconcha Sepiae 12 Concha Ostreae 20 Ngải tượng Stephania rotunda lour 12 Bạch thược Radix Paconiae Alba 15 Radix Bupleuri 12 Rhizoma Curcumae 12 Mẫu lệ Sài hồ Nga truật - Cysteamine hydrochloride 400mg - Famotidin 40mg (viên nén), Công ty Cổ phần Dược phẩm TW Vidipha - Aspégic gói 10mg Sanofi-Synthelabo - Dung dịch Fomaldehyd 10%, d2 acid acetic 1% Phương pháp tiến hành nghiên cứu Đánh giá tác dụng giảm đau với phương pháp gây quặn đau acid acetic (phương pháp Koster) - Chuột lô 1, uống nước cất thuốc thử ngày lần vào buổi sáng ngày liên tục - Ngày thứ năm sau uống thuốc giờ, tiêm vào ổ bụng chuột 0,2 ml dung dịch acetic 1% Đếm số đau quặn chuột phút hết phút thứ 30 sau tiêm acid acetic Đánh giá tác dụng chống viêm loét tá tràng Đánh giá tác dụng chống loét tá tràng An vị thang mơ hình thực nghiệm gây loét tá tràng cysteamin chuột cống trắng theo phương pháp Szabo cộng có cải tiến [6] * Quy trình nghiên cứu: Sau ngày uống mẫu thử nghiệm dùng cho động vật.Ngày thứ sau 30 phút uống thuốc an vị thang famotidine Chuột từ lô 2-5 gây loét tá tràng uống cysteamine hydrochloride với liều 450 mg/kg Sau kể từ uống cysteamine, tất chuột gây mê thiopental, mổ bụng, bộc lộ dày tá tràng Phần ống tiêu hóa từ thực quản (sát tâm vị) đến ruột non (cách môn vị - cm) cắt riêng, mở tá tràng dạy kéo nhỏ theo đường đối diện với bờ mạc treo Rửa nước muối sinh lý, thấm bề mặt vết loét formaldehyd 10%, cố định dày tá tràng xốp ghim nhỏ *Đánh giá đại thể Quan sát kính hiển vi độ phóng đại 10 lần, chụp ảnh kính với độ phóng đại 25 lần để đánh giá số sau: - Đếm số ổ loét bề mặt tá tràng (n: number) - Mức độ loét (Ulcer score- S) theo cách tính Reddy cộng 2012 [….] Bảng Thang điểm đánh giá mức độ ổ loét Mức độ loét Thang điểm Bình thường Xung huyết (red coloration) 0,5 Chấm loét(spot ulcer) Vệt xuất huyết (hemorrhagic streak) 1,5 Loét sâu (deep ulcers) Thủng (perforation) - Chỉ số ổ loét tính theo cơng thức Vogel [20]: UI= UN+US+ UP.10-1 Trong đó: + UI ( Ulcer Index): Chỉ số loét + UN (Ulcer Number): Số ổ loét trung bình chuột + US (Ulcer Score): Mức độ loét trung bình chuột + UP( Ulcer Percentage): Phần trăm số chuột TẠP CHÍ NỘI KHOA VIỆT NAM | SỐ 19+20/20200 127 NGHIÊN CỨU LÂM SÀNG có lt lơ chuột - Phần trăm ức chế loét tính theo công thức: % Ức chế = 100 x [(UI lô mơ hình-UI lơ uống thuốc)/UI lơ mơ hình] * Đánh giá vi thể: Tại lô chọn ngẫu nhiên con, vùng tá tràng có chứa ổ loét chuột lấy cố định formon 10% sau đánh giá tổn thương vi thể nhuộm HE BM Giải phẫu bệnh, Viện 103 Các mẫu đánh giá kính hiển vi độ phóng đại 25 đến 40 lần Phương pháp xử lý số liệu Các số liệu xử lý theo phương pháp thống kê y sinh học, so sánh Anova test sử dụng phần mềm SPSS 22.0 Số liệu biểu diễn dạng X ± SD Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê p < 0,05 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Kết tác dụng giảm đau theo phương pháp gây đau quặn bụng acid acetic Một sau cho chuột uống dung dịch NaCl 0,9% thuốc nghiên cứu, gây quặn đau cách tiêm vào màng bụng chuột dung dịch acid acetic 2% đếm số quặn đau 25 phút đầu Kết trình bày bảng Sau tiêm axít acetic vào ổ bụng, tất chuột lô có đau quặn với biểu thóp bụng lại, áp bụng xuống sàn, duỗi dài thân chân sau Bảng Số đau quặn (lần) chuột thời điểm n 0-5 phút 5-10 phút 10-15 phút 15-20 phút 20-25 phút 25-30 phút Lô 1(a) 10 4,00 ± 1,05 8,30 ± 1,70 8,20 ± 1,87 6,70 ± 1,34 5,40 ± 0,97 3,90 ± 1,29 Lô 2(b) 10 2,10 ± 0,74 5,10 ± 1,37 4,20 ± 1,03 3,70 ± 1,34 2,70 ± 0,82 1,50 ± 0,71 Lô 3(c) 10 3,20 ± 1,14 7,60 ± 2,41 7,70 ± 2,11 6,80 ± 1,48 4,30 ± 0,95 3,40 ± 0,97 Lô 4(d) 10 3,20 ± 1,32 6,20 ± 1,23 5,90 ± 0,74 4,60 ± 0,70 3,20 ± 0,63 2,30 ± 0,95 pa,b