Đánh giá tác dụng giảm đau, chống viêm và độc tính của chế phẩm tecan trên thực nghiệm

Hiện tượng ứ máu: Xảy ra sau sung huyết tĩnh mạch, nguyên nhân do thầnkinh vận mạch của huyết quản bị tê liệt và tác dụng của các chất giãn mạch như NO, đồng thời các chất hóa học trung

NGUYỄN THỊ THANH HOÀI

ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH CỦA

CHẾ PHẨM TECAN TRÊN

THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI - 2013

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ THANH HOÀI

ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH CỦA

Bộ môn Dược lực - trường Đại học

Dược Hà Nội

HÀ NỘI – 2013

dìu dắt và giúp đỡ để tôi có thể hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp của mình.

Trước hết, tôi xin được thể hiện lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc nhất tới Ts.

Đỗ Thị Nguyệt Quế, giảng viên bộ môn Dược lực Cô vừa là người chỉ bảo dạy dỗ

cho tôi kiến thức trong học tập, vừa sửa chữa cho tôi những sai sót, khuyết điểm củabản thân và cho tôi những lời khuyên quý giá trong cuộc sống thực tế, giúp tôi đủ tựtin để bước tiếp trên con đường phía trước Một lần nữa, tôi xin dành cho ngườithầy kính yêu sự biết ơn chân thành nhất của mình

Tôi xin chân thành cảm ơn Ths Nguyễn Thị Thu Hằng đã giúp đỡ và cho tôi

rất nhiều lời khuyên quý giá trong quá trình tôi thực hiện và hoàn thành khóa luậnnày

Tôi xin chân thành cảm ơn các anh chị kĩ thuật viên tại bộ môn Dược lực đã

tận tình hỗ trợ, giúp đỡ tôi rất nhiều trong quá trình tiến hành các thử nghiệmnghiên cứu

Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo trong bộ môn Dược lực đã

truyền thụ cho tôi những kiến thức bổ ích thông qua các bài giảng, tạo những điềukiện thuận lợi cho tôi được học tập và nghiên cứu tại bộ môn

Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, phòng Đào tạo và các thầy cô giáo

trường Đại học Dược Hà Nội đã tạo mọi điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tôi suốt 5

năm học tập

Cuối cùng, tôi xin bày tỏ sự yêu thương và biết ơn sâu sắc tới gia đình và bè

bạn, những người luôn ở bên chăm sóc, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt những

năm tháng cuộc đời

Hà nội, ngày 21 tháng 05 năm 2013

Sinh viên,Nguyễn Thị Thanh Hoài

1.1.1 Khái niệm viêm 3

1.1.2 Nguyên nhân gây viêm 3

1.1.3 Phân loại viêm 4

1.1.4 Sinh lý, cơ chế quá trình viêm 4

1.1.5 Các thuốc chống viêm 7

1.1.6 Các mô hình nghiên cứu tác dụng chống viêm của thuốc 9

1.2 Tổng quan về đau 11

1.2.1 Định nghĩa 11

1.2.2 Cơ chế của đau 11

1.2.3 Nguyên nhân gây đau 12

1.2.4 Phân loại đau 12

1.2.5 Thuốc giảm đau 14

1.2.6 Một số mô hình nghiên cứu tác dụng giảm đau của thuốc 14

1.3 Tổng quan về đối tượng nghiên cứu 14

1.3.1 Nguồn gốc và đặc điểm của tectoridin 14

1.3.4 Một số nghiên cứu về tác dụng sinh học của tectoridin và một số dịch

chiết từ xạ can

15

Chương 2: ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18

2.1.1 Động vật nghiên cứu 18

2.1.2 Dụng cụ, hóa chất nghiên cứu 18

2.2.1 Phương pháp đánh giá tác dụng giảm đau 19

2.3 Phương pháp xử lý số liệu 24

Chương 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25

3.1 Kết quả nghiên cứu 25

3.1.1 Kết quả đánh giá tác dụng giảm đau 25

3.1.2 Kết quả đánh giá tác dụng chống viêm 26

3.1.3 Kết quả đánh giá độc tính cấp tính 27

3.2.4 Kết quả đánh giá độc tính bán trường diễn 28

3.2.1 Bàn luận về tác dụng giảm đau của Tecan 34

3.2.2 Bàn luận về tác dụng chống viêm của Tecan 35

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT

anti-inflammatory drugs

2 Bảng 3.2 Tỉ lệ phù chân chuột tại các thời điểm. 26

3 Bảng 3.3 Cân nặng của động vật thí nghiệm. 28

4 Bảng 3.4 Ảnh hưởng của Tecan trên các thông số huyết học

HC, Hb và HCT của chuột thực nghiệm

29

5 Bảng 3.5 Ảnh hưởng của Tecan trên số lượng tiểu cầu và số

lượng bạch cầu của chuột thực nghiệm

30

6 Bảng 3.6 Ảnh hưởng của Tecan trên công thức bạch cầu. 31

7 Bảng 3.7 Ảnh hưởng của tectoridin đến hoạt độ SGPT, SGOT 31

8 Bảng 3.8 Ảnh hưởng của Tecan đến nồng độ cholesterol toàn

phần và protein toàn phần

32

9 Bảng 3.9 Ảnh hưởng của Tecan đến thông số creatinin huyết

thanh của chuột thực nghiệm

33

10 Hình 1.2 Cấu trúc hóa học của tectoridin. 15

11 Hình 3.1 Sự thủy phân tectoridin thành tectorigenin dưới tác

động của acid HCl và vi khuẩn Bacteriodes spercoris trong

đường ruột của người

34

ĐẶT VẤN ĐỀ

Viêm là quá trình bệnh lý phổ biến, có nhiều yếu tố cụ thể có thể gâyviêm, bất cứ cơ quan nào và mô nào cũng có thể bị viêm Viêm vừa là một phảnứng bảo vệ cơ thể chống lại yếu tố gây bệnh, vừa là phản ứng bệnh lý Quátrình viêm gây ra tổn thương, hoại tử, rối loạn chức năng cơ quan… Phản ứngviêm vì thế gây nhiều ảnh hưởng đến cơ thể Viêm nặng và cấp tính gây đauđớn, khiến bệnh nhân giảm ngon miệng, mất ngủ và ảnh hường xấu đến toàntrạng Vậy nên, bên cạnh việc điều trị nguyên nhân gây viêm, cần phải điều trịlàm giảm các triệu chứng viêm nhằm cải thiện chất lượng cuộc sống cho bệnhnhân [8]

Hai nhóm thuốc kháng viêm chính hiện nay đang được sử dụng nhiều làthuốc chống viêm không steroid (NSAIDs) và thuốc chống viêm steroid(glucocorticoid) Cả hai nhóm thuốc này đều có những tác dụng phụ thườnggặp như gây loét dạ dày, tá tràng, xuất huyết tiêu hóa… Sự ra đời của cácNSAID ức chế đặc hiệu cyclooxygenase-2 tưởng như là một giải pháp mớitrong điều trị viêm nhưng sau đó lần lượt rofecoxib, valdecoxib bị cấm lưuhành do gây tăng các yếu tố nguy cơ tim mạch [2] Vì vậy việc tìm kiếm nhữngloại thuốc giảm đau, chống viêm mới hiệu quả và an toàn hơn vẫn là vấn đề của

Y học hiện nay Bên cạnh việc phát minh những thuốc tân dược mới, tìm kiếmthuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên dựa trên kinh nghiệm điều trị của Y học cổtruyền cũng luôn được các nhà khoa học đào sâu nghiên cứu Flavonoid là hợpchất tự nhiên đã được biết đến với các tác dụng dược lý đáng chú ý như tácdụng chống khối u, tác dụng chống xơ vữa động mạch, chống viêm, chống dị

ứng, chống oxy hóa…[5] Thân rễ loài Xạ can (Belamcanda chinensis Lem.) chứa

nhiều loại isoflavonoid như irigenin, tectoridin, tectorigenin, belamcanidin,methylirisolidon, iristectoriginin A [12] Trong đó tecroridin phân lập từ dịch

chiết thân rễ Xạ can đã được chứng minh là có tác dụng chống viêm in vitro do

ức chế tổng hợp chất hóa học trung gian gây viêm prostaglandin E2 [31] Tuynhiên chúng tôi chưa tìm thấy nghiên cứu nào đánh giá tác dụng chống viêm

của tectoridin cũng như về tác dụng giảm đau và độc tính của tectoridin ở in

vivo Vì vậy, nghiên cứu được thực hiện với những mục tiêu sau:

- Đánh giá tác dụng chống viêm của Tecan trên mô hình gây viêm bànchân chuột bằng carageenin

- Đánh giá tác dụng giảm đau của Tecan trên mô hình gây đau quặnKostler

- Đánh giá độc tính cấp tính và độc tính bán trường diễn của Tecan trênthực nghiệm

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊM 1.1.1 Khái niệm viêm

Viêm là một phản ứng không đặc hiệu của mô do bị các yếu tố hóa học,vật lý hay sinh học tấn công [8] Biểu hiện bên ngoài của viêm ở da và niêmmạc đã được Celcus mô tả từ cách đây 2000 năm với 4 dấu hiệu điển hình gồm:Sưng, nóng, đỏ và đau [28] Viêm vừa là một phản ứng bảo vệ cơ thể chống lạiyếu tố gây bệnh vừa là phản ứng bệnh lý vì quá trình viêm gây ra tổn thương,hoại tử, rối loạn chức năng cơ quan…Phản ứng viêm có thể xuất hiện với nhiềumức độ khác nhau thậm chí rất nặng nề và nguy hiểm đến tính mạng [8]

1.1.2 Nguyên nhân gây viêm

Có thể xếp nguyên nhân gây viêm thành 2 nhóm lớn là nguyên nhân ngoạisinh và nguyên nhân nội sinh [8]:

1.1.2.1 Nguyên nhân ngoại sinh

Các nguyên nhân ngoại sinh gây viêm thường gặp như:

- Tác nhân cơ học: Từ xây sát nhẹ tới chấn thương nặng đều có thể gâyphá hủy tế bào và mô, làm giải phóng ra những chất gây viêm nội sinh

- Tác nhân vật lý: Nhiệt độ quá cao hay quá thấp làm thoái hóa protid tếbào gây tổn thương enzym Tia xạ (UV, tia X) do tạo ra các gốc oxy tự do gâyphá hủy một số enzym oxy hóa đều dẫn đến phản ứng viêm Ngoài ra tia xạ còngây tổn thương ADN của tế bào

- Tác nhân hóa học: Các acid mạnh, kiềm mạnh và các chất hóa học khácnhư thuốc trừ sâu, các độc tố… gây hủy hoại tế bào hoặc phong bế các hệenzym trong cơ thể

- Tác nhân sinh học: Là nguyên nhân phổ biến nhất, gồm virus, vi khuẩn,

ký sinh trùng đơn bào, đa bào hay nấm…

1.1.2.2 Nguyên nhân nội sinh

Thiếu oxy tại chỗ, hoại tử mô, xuất huyết, rối loạn thần kinh dinh dưỡng(tắc mạch) là các nguyên nhân gây viêm thường gặp Ngoài ra, viêm có thể do

phản ứng kết hợp giữa kháng nguyên – kháng thể (như khi viêm cầu thận, viêmtrong hiện tượng Arthus).

1.1.3 Phân loại viêm

Có nhiều cách phân loại viêm như [8]:

- Theo nguyên nhân gồm viêm nhiễm khuẩn và viêm vô khuẩn

- Theo vị trí viêm gồm viêm nông, viêm sâu (bên ngoài và bên trong)

- Theo dịch rỉ viêm gồm viêm thanh dịch, viêm tơ huyết, viêm mủ…tùytheo dịch viêm

- Theo diễn biến gồm viêm cấp và viêm mạn

- Theo tính chất viêm gồm viêm đặc hiệu và không đặc hiệu Viêm đặchiệu do hậu quả xấu của phản ứng miễn dịch; còn lại là viêm không đặc hiệu.Hai loại này chỉ khác nhau về cơ chế viêm mà không khác về bản chất

1.1.4 Sinh lý, cơ chế quá trình viêm

1.1.4.1 Giai đoạn viêm cấp tính

Viêm cấp: Khi thời gian diễn biến viêm ngắn (vài phút – vài ngày) và cócác đặc điểm như tiết dịch, dịch tiết chứa nhiều protein huyết tương và nhiềubạch cầu đa nhân trung tính Trong giai đoạn cấp tính của viêm, có ba biến đổichủ yếu là: Rối loạn tuần hoàn, rối loạn chuyển hóa, tổn thương mô và tăngsinh tế bào Trên thực tế, ba quá trình này đan xen và liên quan chặt chẽ đếnnhau [8]

 Sự rối loạn tuần hoàn tại ổ viêm [8]:

Rối loạn tuần hoàn tại ổ viêm thường xảy ra sớm, ngay khi yếu tố gâyviêm tác động lên cơ thể Theo Conheim, có thể quan sát thấy 4 hiện tượng củarối loạn tuần hoàn gồm: Rối loạn vận mạch, tạo dịch rỉ viêm, bạch cầu xuyênmạch và hiện tượng thực bào

Rối loạn vận mạch: Ngay khi yếu tố viêm tác động, tại ổ viêm lần lượt có

các hiện tượng sau:

Hiện tượng co mạch: Xảy ra rất sớm và rất ngắn Co mạch có tính phản xạ,

do thần kinh co mạch hưng phấn làm các tiểu động mạch co lại

Hiện tượng sung huyết động mạch: Xảy ra ngay sau hiện tượng co mạch,đầu tiên do cơ chế thần kinh và sau đó được duy trì và phát triển bằng cơ chếthể dịch Cơ chế thể dịch chính là sự giải phóng các enzym từ lysosom của tếbào chết, các chất trung gian (như histamin, bradykinin, prostaglandin,leucotrien…) từ tế bào mast và bạch cầu hay các sản phẩm từ hoạt động thựcbào của bạch cầu (như protease, ion H+, K+…), các cytokin, yếu tố hoại tử khối

u (TNFα), interleukin 1 (IL-1), yếu tố hoạt hóa tiểu cầu (PAF), đặc biệt là sự

có mặt của nitric oxyd (NO) do NO synthetase của các tế bào viêm bị hoạt hóa,sinh ra Ở giai đoạn này, động mạch vi tuần hoàn dãn rộng, tăng cả lưu lượnglẫn áp lực máu đến ổ viêm Ổ viêm được tưới một lượng máu lớn giàu oxy phùhợp với yêu cầu năng lượng của các tế bào thực bào và sự chuyển hóa ái khícủa chúng Nhờ sung huyết động mạch, bạch cầu được cung cấp oxy và glucose

để tạo ra năng lượng dùng cho quá trình thoát mạch, di chuyển và thực bào, dovậy làm nhiệt độ tại ổ viêm tăng lên Các tác nhân gây dãn mạch (histamin,bradykinin, prostaglandin…) tích lại làm tăng tính thấm thành mạch và gâythoát dịch ra ngoài lòng mạch [8]

Histamin là chất hóa học trung gian được tìm thấy đầu tiên liên quan đếnquá trình viêm Mặc dù có một số thuốc ức chết cạnh trạnh với histamin (đốivận H1 histamin receptor) có tác dụng trong viêm nhẹ ở giai đoạn đầu.Bradykinin và 5-hydroxytryptamin (serotonin, 5-HT) cũng có vai trò trongviêm, nhưng chất đối kháng của chúng chỉ có đáp ứng trong một số viêm nhấtđịnh Leucotrien (LT) tham gia giai đoạn tiền viêm, các chất đối kháng LT-receptor được dùng để điều trị hen Tổng hợp prostanoid tăng rõ rệt trong viêm.Prostaglandin E2 (PGE2) và prostacyclin (PGI2) là những prostanoid chính liênquan đến phản ứng viêm, có tác dụng tăng lưu lượng máu ở tổ chức tổn thương,tăng tính thấm thành mạch và tăng bạch cầu đến tổ chức tổn thương [14]

Hiện tượng sung huyết tĩnh mạch: Khi đã dọn sạch về cơ bản các tế bàochết, các yếu tố gây viêm (đối tượng thực bào), quá trình thực bào bắt đầuyếu đi, sung huyết động mạch giảm dần và chuyển sang sung huyết tĩnh mạch

Biểu hiện bên ngoài ổ viêm thay đổi: Bớt nóng, phù chủ yếu do tăng tính thấmnên độ căng giảm, giảm cảm giác đau, chuyển sang đau âm ỉ do các chất hóahọc trung gian và ion K+, H+ tích lại Vai trò sinh lý của sung huyết tĩnh mạch

là dọn sạch ổ viêm, chuẩn bị cho quá trình sửa chữa và cô lập ổ viêm, ngăn cản

sự lan rộng của tác nhân gây bệnh [8]

Hiện tượng ứ máu: Xảy ra sau sung huyết tĩnh mạch, nguyên nhân do thầnkinh vận mạch của huyết quản bị tê liệt và tác dụng của các chất giãn mạch như

NO, đồng thời các chất hóa học trung gian như: Histamin, prostaglandin,leucotrien… làm tăng tính thấm thành mạch gây thoát huyết tương ra khỏimạch máu đến mức máu đặc quánh Những nguyên nhân khác gây nên hiệntượng này có thể kể đến như bạch cầu bám vào thành mạch cản trở lưu thôngdòng máu, tế bào nội mạc mạch máu hoạt hóa và phì đại cản trở sự vận chuyểnmáu, nước tràn vào mô kẽ gây phù và chèn ép thành mạch, sự hình thành huyếtkhối gây tắc mạch Hiện tượng ứ máu có vai trò cô lập ổ viêm, làm yếu tố gâybệnh không thể lan rộng, đồng thời tăng cường quá trình sửa chữa [8]

Hình thành dịch viêm: Dịch viêm là các sản phẩm xuất tiết tại ổ viêm.Dịch rỉ viêm xuất hiện ngay từ khi sung huyết động mạch Dịch viêm hìnhthành do 3 yếu tố chính là: Do tăng áp lực thủy tĩnh trong các mạch máu tại ổviêm, do tác động của các chất trung gian hóa học làm tăng tính thấm thànhmạch, giãn các khe giữa các tế bào nội mô thành mạch gây thoát protein và yếu

tố cuối cùng là do tăng áp lực thẩm thấu trong ổ viêm, hậu quả của sự tích lạicác ion và các chất phân tử nhỏ như K+, H+… [8]

Bạch cầu xuyên mạch: Khi tính thấm thành mạch tăng, có sự thoát mạch,

máu chảy chậm, lúc đó bạch cầu rời khỏi dòng trục, xuyên mạch và di chuyểnđến ổ viêm [8]

Bạch cầu thực bào: Sau khi tập chung đến ổ viêm, bạch cầu sẽ tiếp cận với

đối tượng thực bào, bắt giữ và tiêu hóa đối tượng Đối tượng bị thực bào gồmcác vi sinh vật và các mảnh tế bào bị phân hủy tại ổ viêm Hiện tượng thực bào

có vai trò dọn sạch ổ viêm, tạo điều kiện cho quá trình hồi phục [8]

 Rối loạn chuyển hóa trong ổ viêm

Viêm gây rối loạn chuyển hóa glucid, tạo ra nhiều acid lactic Acid lactictích lại trong ổ viêm, làm pH giảm dần từ rìa vào trong trung tâm ổ viêm Viêmnặng có thể gây nhiễm toan toàn cơ thể Rối loạn glucid muộn gây tăng chuyểnhóa yếm khí rối loạn chuyển hóa lipid và protid [8]

 Tổn thương mô

Thường có hai loại tổn thương: Tổn thương tiên phát do nguyên nhân gâyviêm tạo ra và tổn thương thứ phát do các rối loạn tại ổ viêm tạo nên [8]

 Tăng sinh tế bào và quá trình làm lành vết thương

Viêm bắt đầu bằng tổn thương và kết thúc bằng quá trình tái tạo Mô xơ vàcác mạch máu mới là cơ sở hình thành sẹo thay thế cho mô tổn thương, làmlành vết thương [8]

1.1.4.2 Giai đoạn viêm mạn tính

Viêm mạn diễn biến từ vài ngày đến hàng tháng thậm chí đến hàng năm

Về mô học có sự xâm nhập của lympho bào và đại thực bào, mức tổn thươngngang bằng với mức độ sửa chữa tổn thương

Giai đoạn mạn tính của phản ứng viêm gồm phản ứng tế bào phát triểnchậm và sự hình thành mô tạo keo Sự di cư tế bào nguồn gốc từ máu hoặc từtrung mô vẫn tiếp diễn ở ổ viêm rất lâu sau sự can thiệp của yếu tố tấn công Ổviêm có thể diễn tiến tới chỗ làm mủ hoặc hoại tử Sự tăng sinh nguyên bào sợi

và tân tạo mao mạch tạo thành u hạt U hạt khi tiến triển, mất các thành phần tếbào và các mao mạch đồng thời mô tạo keo xuất hiện dần dần [13]

1.1.5 Các thuốc chống viêm

Hiện nay thuốc chống viêm gồm có 2 nhóm: thuốc chống viêm khôngsteroid (các NSAID) và thuốc chống viêm steroid (các glucocorticoid)

1.1.5.1 Thuốc chống viêm không steroid (NSAIDs)

 Cơ chế chống viêm: Các thuốc chống viêm không steroid đều ức chế

enzym cyclooxygenase (COX), ngăn cản tổng hợp prostaglandin là chất trunggian hóa học gây viêm, do đó làm giảm quá trình viêm Ngoài ra NSAIDs còn

đối kháng với hệ enzym phân hủy protein, ngăn cản quá trình biến đổi làm bềnvững màng lysosom và đối kháng tác dụng của các chất trung gian hóa học nhưbradykinin, histamin, serotonin, ức chế hóa ứng động bạch cầu, ức chế sự dichuyển của bạch cầu tới ổ viêm [4][14].

Một số thuốc thuộc nhóm NSAID như: Aspirin, indomethacin, meloxicam,peroxicam, diclofenac, celecoxib, ibuprofen, nimesulid… Ngoài tác dụngchống viêm các NSAID còn có tác dụng hạ sốt và giảm đau [4][14]

 Chỉ định chung: Các dạng viêm cấp và mạn (viêm khớp dạng thấp,

viêm thấp khớp cấp, viêm cột sống dính khớp, bệnh gout…) [4]

 Tác dụng không mong muốn: Chủ yếu liên quan đến ức chế tổng hợp

prostaglandin [4] Trên tiêu hóa gây kích ứng, đau thượng vị, nặng hơn có thểloét dạ dày tá tràng, xuất huyết tiêu hóa… Trên máu gây kéo dài thời gian chảymáu do ức chế kết tập tiểu cầu, giảm tiểu cầu và giảm prothrombin, hậu quảgây kéo dài thời gian đông máu, mất máu không nhìn thấy qua phân, tăng nguy

cơ chảy máu Trên thận, giảm sức lọc cầu thận, ứ nước, tăng kali máu, viêmthận kẽ… Trên hô hấp gây cơn hen giả

Các tác dụng không mong muốn khác: Mẫn cảm, gây độc với gan, dị tật ởthai nhi nếu dùng thuốc trong ba tháng đầu của thai kì…

1.1.5.2 Thuốc chống viêm steroid (glucocorticoid)

Glucocorticoid bao gồm glucocorticoid tự nhiên do vùng bó vỏ thượngthận sản xuất ra (hydrocortison và cortison) và glucocorticoid tổng hợp nhưpredinisolon, methyprednisolon, triamcinolon, dexamethason Ngoài raglucocorticoid còn có tác dụng ức chế miễn dịch, chống dị ứng, tác động trênquá trình chuyển hóa glucid, protid, lipid, chuyến hóa muối nước [4]

 Cơ chế chống viêm: Glucocorticoid có tác dụng chống viêm là do ức

chế phospholipase A2 thông qua kích thích tổng hợp lipocortin, làm giảm tổnghợp cả leucotrien và prostaglandin Ngoài ra nó còn có tác dụng ức chế dòngbạch cầu đơn nhân, đa nhân, lympho bào đi vào mô để gây khởi phát phản ứngviêm Thuốc có tác dụng chống viêm do mọi nguyên nhân [4]

 Chỉ định trong điều trị viêm: Điều trị viêm mũi dị ứng, mày đay, viêm

da tiếp xúc, viêm cơ, khớp, viêm da…[4]

 Chống chỉ định: Loét dạ dày tá tràng, mẫn cảm với thuốc, nhiễm nấm,

virus, đang dùng vaccin sống [4]

 Tác dụng không mong muốn: Phù, tăng huyết áp do giữ natri và nước;

Loét dạ dày, tá tràng; Vết thương chậm lên sẹo, dễ nhiễm trùng; Tăng đườnghuyết hoặc làm nặng thêm bệnh đái tháo đường; Nhược cơ, teo cơ, mỏi cơ;Loãng xương, xốp xương, rối loạn phân bố mỡ, suy thượng thận cấp khi dùngthuốc đột ngột…[4]

1.1.6 Các mô hình nghiên cứu tác dụng chống viêm của thuốc

Căn cứ vào các giai đoạn trong quá trình viêm, có thể chia các mô hìnhthử nghiệm tác dụng chống viêm của một thuốc thành hai nhóm, bao gồm các

mô hình gây viêm cấp và bán cấp và các mô hình gây viêm mạn [29].Trong phạm vi khóa luận này, chúng tôi chỉ tổng quan về các mô hình gây viêmcấp và bán cấp

Các mô hình gây viêm cấp và bán cấp

 Mô hình gây phù bàn chân chuột [13][22][28]:

Nguyên tắc tiến hành: Sau khi tiêm vào bàn chân sau của chuột các tác

nhân gây viêm như formaldehyd, dextrin, albumin trứng, kaolin, sulfatpolysaccharid (carrageenin, naphthoyheparamin…), các chất này sẽ kích hoạtphản ứng viêm, gây giãn mạch và tăng tính thấm thành mạch Kết quả của quátrình viêm này là hiện tượng phù bàn chân chuột Các thuốc có tác dụng chốngviêm sẽ có khả năng ức chế hiện tượng phù

Trong quá trình gây viêm bằng carragenin, mức độ viêm tối đa trongkhoảng thời gian 3-4 giờ, đối với aerosil và kaolin thời gian gây viêm có thểkéo dài đến 24 giờ hay 2 ngày Do đó cần lựa chọn tác nhân gây viêm phù hợpvới mục đích nghiên cứu, không chỉ theo tác dụng chống viêm mạnh hay yếu

mà còn phụ thuộc vào thời gian thuốc có tác dụng

Các chỉ tiêu đánh giá: So sánh mức độ phù chân chuột ở cùng thời điểm

sau khi gây viêm giữa lô động vật được dùng mẫu thử và lô chứng để đánh giátác dụng chống viêm của mẫu thử

Mô hình gây phù chân chuột bằng carragenin được sử dụng bởi nhiều nhànghiên cứu và được chứng minh phù hợp với mục đích sàng lọc đánh giá tácdụng chống viêm của thuốc chống viêm không steroid, steroid, thuốc khánghistamin, kháng serotonin

Mô hình gây phù bàn chân chuột là mô hình đơn giản, dễ tiến hành viêmcấp đáp ứng trong vài giờ, thời gian tiến hành ngắn

 Mô hình gây ban đỏ bằng tia tử ngoại ở chuột lang [13][28]:

Nguyên tắc: Mô hình gây ban đỏ bằng tia tử ngoại được Wilhelmi mô tả

lần đầu tiên (1949), ông đã nhận thấy khả năng làm chậm sự phát triển của ban

đỏ do tia tử ngoại của phenylbutazon và các thuốc chống viêm không steroid.Nồng độ prostaglandin E tăng lên trong suốt thời gian 24 giờ sau khi da chuộttiếp xúc với tia cực tím bức xạ 280-320 nm Ban đỏ là dấu hiệu đầu tiên củaviêm, khi phản ứng viêm chưa đi kèm với phù nề và tăng tiết dịch

Chỉ tiêu đánh giá: Đánh giá mức độ viêm bằng cách đo diện tích ban đỏ Phạm vi áp dụng: Phương pháp này có thể áp dụng để nghiên cứu tác

dụng của thuốc chống viêm steroid

 Mô hình gây phù tai chuột bằng oxazolon [22][28]:

Nguyên tắc: Mô hình gây phù tai chuột bằng oxazolon được mô tả đầu tiên

bởi Evans và cộng sự (1971) là mô hình dựa trên phản ứng quá mẫn muộn của

cơ thể gây ra bởi oxazolon Kết quả của sự phơi nhiễm với oxazolon là làm vỡmàng tế bào mast, giải phóng ra các chất trung gian gây phù

Đánh giá: Tính tỉ lệ % tặng khối lượng của tai phải so với tai trái rồi tính

giá trị trung bình tỉ lệ % tăng khối lượng tai chuột trong mỗi lô Sau đó tính tỉ

lệ phần trăm ức chế phù của lô thử so với lô chứng

Phạm vi áp dụng: Mô hình này cho phép đánh giá khả năng chống viêm

tại chỗ của thuốc Đây cũng là phương pháp phù hợp để đánh giá tác dụngchống viêm của thuốc chống viêm steroid và không steroid

Ưu điểm: Áp dụng cho cả thuốc chống viêm không steroid và steroid Nhược điểm: Quá trình tiến hành kéo dài, tốn nhiều thời gian.

 Mô hình đo mức độ thẩm thấu mạch máu [22][28]:

Nguyên tắc: Các chất trung gian hóa học gây viêm như là histamin,

prostaglandin và leucotrien được giải phóng sau khi tế bào bạch cầu mast bịkích thích gây giãn các tiểu động mạch, làm tăng tính thấm mạch máu Kết quả

là dịch và protein huyết tương thoát ra gây phù Những tác động này bị ức chếbởi những thuốc kháng histamin, thuốc ức chế sự chuyển hóa của acidarachidonic và thuốc ức chế thụ thể của leucotrien

Đánh giá: Đánh giá tác dụng chống tăng tính thấm của thuốc thông qua

nồng độ chất nhuộm xanh Evans khi tiêm dưới da

Phạm vi áp dụng: Thử nghiệm này được dùng để đánh giá tác dụng của

các thuốc chống lại sự thẩm thấu mạch máu gây ra bởi các chất gây viêm

1.2 TỔNG QUAN VỀ ĐAU

1.2.1 Định nghĩa:

Đau là cảm giác cục bộ có thể từ hơi khó chịu đến dữ dội không chịu nổi.Đau là do sự kích thích vào đầu dây thần kinh cảm giác đau, thường sau chấnthương hoặc bệnh [9].Đau là cơ chế tự vệ của cơ thể chống lại những kích thích

có hại, cũng có khi là triệu chứng báo trước của một bệnh nào đó Tuy nhiên,

có những trường hợp đau chỉ do xúc cảm, tự kỉ ám thị của bệnh nhân [9]

1.2.2 Cơ chế của đau

Trên da có nhiều đầu tận cùng dây thần kinh biệt hóa (các thụ thể) Kíchthích vào những thụ thể này sẽ dẫn đến việc truyền các tín hiệu đau đến não.Các thụ thể có độ nhậy cảm khác nhau, một số chỉ phản ứng khi bị kích thíchmạnh như cắt, nhiệt nóng trên da, những loại khác phản ứng với những kíchthích vừa phải như lực đè của vật rắn, kéo dãn hoặc nhiệt chưa đủ để gây bỏng

Cũng có thụ thể đau tại các cấu trúc khác ngoài da, bao gồm các mạch máu vàgân Phần lớn các cơ quan nội tạng có ít thụ thể [9].

1.2.3 Nguyên nhân gây đau

Tác nhân gây đau rất đa dạng: hóa học, vật lý, cơ học… Các tác nhân nàykích thích vào ngọn sợi cảm giác và truyền xung động về trung ương, báo cho

cơ thể biết mỗi nguy hiểm để rời bỏ nguyên nhân gây đau Tại các mô bị tổnthương, các chất trung gian hóa học (bradykinin, kinin, prostaglandin,serotonin…) tiết ra lại góp phần làm tăng cảm giác đau., tăng tốc độ dẫn truyềncảm giác đau và làm đau nặng thêm [2]

1.2.4 Phân loại đau

 Đau thực thể:

Kích thích gây cảm giác đau thường rõ ràng Đau thường khu trú rõ, có thểqui chiếu được đau nội tạng Cảm giác đau giảm nếu dùng thuốc chống viêmhoặc thuốc giảm đau gây ngủ [7]

 Đau do bệnh thần kinh:

Không có một kích thích rõ ràng nào gây đau cả Đau thường không khutrú rõ rệt Cảm giác đau thất thường Dùng thuốc giảm đau gây ngủ chỉ giảmđau một phần [7]

1.2.5 Thuốc giảm đau

Thuốc giảm đau có tác dụng làm giảm hoặc mất cảm giác đau mà khôngtác dụng lên nguyên nhân gây đau, không làm mất cảm giác khác và không làmmất ý thức Các thuốc giảm đau được phân biệt với thuốc gây tê, là chất ngăncản sự dẫn truyền kích thích có hại từ điểm áp dụng đến hệ thần kinh trungương Các thuốc giảm đau được chia làm 2 loại: Thuốc giảm đau trung ương(thuốc giảm đau gây ngủ) và thuốc giảm đau ngoại vi (không gây ngủ) Ngoài

ra còn có thêm nhóm thuốc hỗ trợ trong điều trị đau [13]

1.2.5.1 Thuốc giảm đau trung ương

•Cơ chế giảm đau: Các thuốc thuộc nhóm này có tác dụng giảm đau do ức

chế trung tâm đau ở não và ngăn cản dẫn truyền cảm giác đau từ tủy sống lên

não Tác dụng giảm đau thường kèm tác dụng gây ngủ và gây nghiện [3] Nhómnày được phân làm 2 nhóm theo mức độ giảm đau [2]:

- Loại giảm đau mạnh: Morphin, meperidin, fentanyl, methadon…

- Loại giảm đau trung bình: Codein, tramadol, propoxyphen…

•Chỉ định trong điều trị đau: Các trường hợp đau nặng như gẫy xương

đùi, đau sau mổ, cơn nhồi máu cơ tim, ung thư giai đoạn cuối… [3]

•Tác dụng không mong muốn: Gây táo bón, buồn nôn và nôn, ức chế hô

hấp, gây nghiện, hội chứng kích thích, tụt huyết áp… [3]

1.2.5.2 Thuốc giảm đau ngoại vi

Một số thuốc thuộc nhóm giảm đau ngoại vi như: Aspirin, diclofenac,indomethacin, ibuprofen, naproxen…[2]

•Cơ chế giảm đau của các NSAID: Các thuốc giảm đau ngoại vi ức chế

COX do đó ức chế sự tổng hợp prostaglandin, chất trung gian hóa học khởiphát nhiều quá trình sinh lý và bệnh lý của cơ thể Prostaglandin sẽ khơi màocho việc tạo ra các chất trung gian hóa học khác như serotonin, bradikinin,histamin… ở ngọn sợi cảm giác (ngoại vi) nên các thuốc nhóm này được xếpvào nhóm giảm đau ngoại vi [2]

Thuốc giảm đau ngoại vi bao gồm: thuốc giảm đau - hạ sốt - chống viêm

và paracetamol

•Chỉ định trong điều trị đau: Đau ở mức độ nhẹ và vừa: đau đầu, đau

bụng kinh, đau khớp… [4]

•Tác dụng không mong muốn: Loét dạ dày, suy thận, chảy máu…một số

thuốc như aspirin gây mẫn cảm (phù Quinck, ban da) [2]

1.2.5.3 Thuốc hỗ trợ điều trị đau

Thuốc chống động kinh (carbamazeplin, phenytoin…), thuốc an thần(diazepam, clonazepam…), thuốc giãn cơ (dantrolen, baclifen…), corticoid,thuốc chống trầm cảm (amitripty, imipramin,…) thuốc chống loạn nhịp… được

sử dụng để tăng tác dụng giảm đau trong nhiều trường hợp đau mạn tính, đau

do thần kinh [2]

1.2.6 Một số mô hình nghiên cứu tác dụng giảm đau của thuốc

 Thử nghiệm trên sự đau quặn gây bởi hóa chất [13][22][28]:

Nguyên tắc: Koster và cộng sự đã sử dụng tác nhân gây đau là acid acetic

1% Acid acetic kích thích giải phóng các chất trung gian như bradykinin,prostaglandin và các cytokin như IL, TNF… gây cơn đau do viêm Nếu thuốc

có tác dụng giảm đau thì số lượng cơn đau quặn sẽ giảm

Phạm vi áp dụng: Thử nghiệm gây đau quặn là thử nghiệm thường dùng

nhất để khảo sát tác dụng của các thuốc giảm đau không gây ngủ

Ưu điểm: Đơn giản, dễ áp dụng.

Nhược điểm: Việc đếm số cơn đau quặn phụ thuộc vào người quan sát.

 Thử nghiệm mâm nóng [13]:

Nguyên tắc: Đặt chuột lên máy đo phản xạ bằng bản nhiệt có nhiệt độ ổn

định là 55±1 độ C Dùng đồng hồ bấm giây xác định thời gian phản ứng đaucủa từng con (là khoảng thời gian tính từ lúc đặt chuột lên máy đến khi chuột

có phản ứng liếm chân sau hoặc nhảy lên cao để tìm cách trốn khỏi tấm kimloại nóng) Nếu thuốc thử nghiệm có tác dụng giảm đau thì chuột sẽ không cóhoặc chậm xuất hiện các phản xạ trên

Đánh giá: Xác định thời gian phản ứng đau trung bình của động thí

nghiệm So sánh kết quả giữa lô thử và lô chứng

Phạm vi áp dụng: thử nghiệm tác dụng của thuốc giảm đau trung ương.

Ưu điểm: tiến hành và quan sát dễ dàng Sơ bộ sàng lọc được tác dụng

giảm đau trung ương của thuốc

Nhược điểm: Không xác định được mức liều tối ưu.

1.3 Tổng quan về đối tượng nghiên cứu

1.4.1 Nguồn gốc và đặc điểm của tectoridin

Tecan là một flavonoid có chứa 95% tectoridin được chiết xuất từ thân rễ

Xạ can Xạ can hay còn gọi là Rẻ quạt, tên khoa học Belamcanda chinensis

Lem., họ La dơn - Iridaceae Xạ can là cây thảo, sống nhiều năm, cao 0,50-1m.Thân rễ mọc bò, phân nhánh nhiều Thân ngắn bao bọc bởi những bẹ lá Lá

hình dải, dài 30 cm, rộng 2 cm, gốc ốp lên nhau, đầu nhọn, gân song song, haimặt nhẵn, gần như cùng màu, toàn bộ các lá xếp thành mặt phẳng và xòe ra nhưcái quạt Cụm hoa phân nhánh, dài 30-40 cm, lá bắc dạng vảy; hoa có cuốngdài, xếp trên nhánh như những tán đơn, màu vàng cam điểm những đốm tía; dài

có răng nhỏ hình mũi mác; tràng có cánh rộng và dài hơn lá đài; nhị 3, dính ởgốc cánh hoa, bầu 3 ô Quả nang, hình trứng; hạt nhiều, màu đen bóng [11]

Từ thân rễ Xạ can đã chiết được belamcandin (C24H24O12) và tectoridin(C22H22O11), và các glycosid khác như iridin (C24H28O4 ) và shekarin [5]

Tectoridin thủy phân bởi hệ vi khuẩn đường ruột sẽ cho glucose vàtectorigenin (tinh thể hình phiến, độ chảy 227-230 độ C) [5]

Tectoridin có trong thân rễ Xạ can với hàm lượng 1,5% [5]

Hình 1.2: Cấu trúc hóa học của tectoridin.

1.4.2 Một số nghiên cứu về tác dụng sinh học của tectoridin và một số dịch chiết từ Xạ can

 Các nghiên cứu về tác dụng chống viêm:

Kết quả nghiên cứu của Hong J và cộng sự cho thấy tectoridin,

tectorigenin chiết từ rễ của loài Belamcanda chinensis và một số các chất chiết

xuất từ các loài thảo dược truyền thống khác như plantycodin, imperatorin… cótác dụng ức chế sự cảm ứng COX-2, vì thế chúng có tác dụng ức chế sự tạothành prostaglandin E2 (một chất trung gian hóa học liên quan đến hai quá trìnhviêm và đau) trên đại thực bào chuột [19]

Một nghiên cứu khác của Yong Pil Kim và cộng sự cũng chỉ ra rằng cơchế chống viêm của tectoridin và tectorigenin là thông qua việc ức chế tổng

hình dải, dài 30 cm, rộng 2 cm, gốc ốp lên nhau, đầu nhọn, gân song song, haimặt nhẵn, gần như cùng màu, toàn bộ các lá xếp thành mặt phẳng và xòe ra nhưcái quạt Cụm hoa phân nhánh, dài 30-40 cm, lá bắc dạng vảy; hoa có cuốngdài, xếp trên nhánh như những tán đơn, màu vàng cam điểm những đốm tía; dài

có răng nhỏ hình mũi mác; tràng có cánh rộng và dài hơn lá đài; nhị 3, dính ởgốc cánh hoa, bầu 3 ô Quả nang, hình trứng; hạt nhiều, màu đen bóng [11]

Từ thân rễ Xạ can đã chiết được belamcandin (C24H24O12) và tectoridin(C22H22O11), và các glycosid khác như iridin (C24H28O4 ) và shekarin [5]

Tectoridin thủy phân bởi hệ vi khuẩn đường ruột sẽ cho glucose vàtectorigenin (tinh thể hình phiến, độ chảy 227-230 độ C) [5]

Tectoridin có trong thân rễ Xạ can với hàm lượng 1,5% [5]

Hình 1.2: Cấu trúc hóa học của tectoridin.

1.4.2 Một số nghiên cứu về tác dụng sinh học của tectoridin và một số dịch chiết từ Xạ can

 Các nghiên cứu về tác dụng chống viêm:

Kết quả nghiên cứu của Hong J và cộng sự cho thấy tectoridin,

tectorigenin chiết từ rễ của loài Belamcanda chinensis và một số các chất chiết

xuất từ các loài thảo dược truyền thống khác như plantycodin, imperatorin… cótác dụng ức chế sự cảm ứng COX-2, vì thế chúng có tác dụng ức chế sự tạothành prostaglandin E2 (một chất trung gian hóa học liên quan đến hai quá trìnhviêm và đau) trên đại thực bào chuột [19]

Một nghiên cứu khác của Yong Pil Kim và cộng sự cũng chỉ ra rằng cơchế chống viêm của tectoridin và tectorigenin là thông qua việc ức chế tổng

hình dải, dài 30 cm, rộng 2 cm, gốc ốp lên nhau, đầu nhọn, gân song song, haimặt nhẵn, gần như cùng màu, toàn bộ các lá xếp thành mặt phẳng và xòe ra nhưcái quạt Cụm hoa phân nhánh, dài 30-40 cm, lá bắc dạng vảy; hoa có cuốngdài, xếp trên nhánh như những tán đơn, màu vàng cam điểm những đốm tía; dài

có răng nhỏ hình mũi mác; tràng có cánh rộng và dài hơn lá đài; nhị 3, dính ởgốc cánh hoa, bầu 3 ô Quả nang, hình trứng; hạt nhiều, màu đen bóng [11]

Từ thân rễ Xạ can đã chiết được belamcandin (C24H24O12) và tectoridin(C22H22O11), và các glycosid khác như iridin (C24H28O4 ) và shekarin [5]

Tectoridin thủy phân bởi hệ vi khuẩn đường ruột sẽ cho glucose vàtectorigenin (tinh thể hình phiến, độ chảy 227-230 độ C) [5]

Tectoridin có trong thân rễ Xạ can với hàm lượng 1,5% [5]

Hình 1.2: Cấu trúc hóa học của tectoridin.

1.4.2 Một số nghiên cứu về tác dụng sinh học của tectoridin và một số dịch chiết từ Xạ can

 Các nghiên cứu về tác dụng chống viêm:

Kết quả nghiên cứu của Hong J và cộng sự cho thấy tectoridin,

tectorigenin chiết từ rễ của loài Belamcanda chinensis và một số các chất chiết

xuất từ các loài thảo dược truyền thống khác như plantycodin, imperatorin… cótác dụng ức chế sự cảm ứng COX-2, vì thế chúng có tác dụng ức chế sự tạothành prostaglandin E2 (một chất trung gian hóa học liên quan đến hai quá trìnhviêm và đau) trên đại thực bào chuột [19]

Một nghiên cứu khác của Yong Pil Kim và cộng sự cũng chỉ ra rằng cơchế chống viêm của tectoridin và tectorigenin là thông qua việc ức chế tổng

hợp PGE2 tại tế bào viêm Nghiên cứu cũng phát hiện cả 2 chất đều không ứcchế sự giải phóng acid arachidonic [31].

 Các nghiên cứu khác:

Yu Xionga và cộng sự đã nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan của tectoridin

và cơ chế của nó Trong nghiên cứu này tectoridin được chiết xuất từ hoa của

P lobata (Willd.) Ohwi Nghiên cứu được tiến hành trên chuột gây độc gan

bằng ethanol (với liều 5g/kg cân nặng/12h/1 lần), tổng cộng ba liều 1h sau khiđộng vật nghiên cứu nhận liều ethanol cuối cùng, cho chuột uống tectoridin(25, 50 và 100mg/kg) năm lần trong ba ngày liên tiếp Lấy máu và giết chuộttại thời điểm 4h sau khi điều trị bằng tectoridin để làm giải phẫu gan Kết quảcủa nghiên cứu cho thấy điều trị bằng tectoridin làm giảm độc tính của ethanoltrên gan, cụ thể: Tectoridin ức chế tăng serum glutamo-oxalo transaminase(SGOT) và serum glutamo-pyruvic transaminase (SGPT), triglycerid và ức chế

sự rối loạn chức năng ty thể ở gan Hơn nữa, tectoridin cũng làm giảm mức độbiểu hiện của PPARα và các gen mục tiêu, bao gồm cả acyl-CoAdehydrogenase chuỗi trung bình (MCAD), acyl-CoA oxidase (ACO) và 4Acytochrome P450 (CYP 4A) mRNA và gây giảm hoạt động của enzym này.Điều đó chứng tỏ tectoridin có tác dụng bảo vệ gan, giảm nhiễm mỡ gan doethanol chủ yếu là thông qua việc gây gián đoạn con đường điều hòa PPARα vàcải thiện chức năng của ty lạp thể tại gan [32]

Sang Hoon Jung và cộng sự cũng đã tiến hành đánh giá tác dụng ức chếtổn thương gan gây bởi carbon tetrachlorid (CCl4) của tectorigenin và tectoridin

phân lập từ thân rễ Belamcanda chinensis cả in vitro và in vivo Tectorigenin và

tectoridin đều làm giảm đáng kể hoạt độ enzym transaminase huyết thanh củachuột nhiễm độc CCI4 Cả hai hợp chất này cũng làm gia tăng mạnh mẽ cácenzym chống oxy hóa như hepatic-ytosolic superoxide dismutase (SOD),catalase và glutathione peroxidase (GSH-px) Những kết quả này gợi ý rằng

tectorigenin và tectoridin phân lập từ thân rễ của B chinensis không chỉ có tác

dụng chống oxy hóa mà còn có tác dụng bảo vệ gan chuột trong trường hợp bịnhiễm độc bởi CCI4 [26].

Nghiên cứu khác của Sang Hoon Jung và cộng sự về tác dụng chống tạomạch và chống khối u của tectoridin và tectorigenin cho thấy cả 2 chất đều cótác dụng làm giảm quá trình tạo mạch và ức chế đáng kể sự tăng khối lượngkhối u trên chuột gây u bằng tế bào, tương ứng là 24.8% và 44.2% [27]

Ngoài ra, trên in vitro cao cồn thân rễ Xạ can có tác dụng ức chế các chủng vi khuẩn: Streptococcus pneumonia, Streptococcus pneumonia, Bordetella

pertussis, Bacillus subtilis; và có tác dụng yếu đối với các chủng vi khuẩn: Staphylococcus aureus, Shigella dysenteriae, Sh.shigae, Enterococcus Lá Xạ

can không thể hiện tác dụng ức chế các chủng vi khuẩn trên [12]

Theo tác giả Đỗ Tất Lợi, thân rễ Xạ can có tác dụng chống viêm trong môhình gây phù bàn chân bằng kaolin và gây u hạt thực nghiệm bằng amian ởchuột cống trắng, và có độc tính thấp Flavonoid toàn phần của Xạ can có tácdụng ức chế yếu hoạt tính của men polypheniloxydase huyết thanh người Hoạttính của men này trong huyết thanh người tăng rõ rệt trong các bệnh nhiễmkhuẩn, trong viêm cấp tính hoặc mạn tính [12]

CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

2.1.1 Động vật nghiên cứu

Chuột nhắt trắng, chủng Swiss, khoẻ mạnh, cả hai giống, khối lượng trungbình 18-20g (để nghiên cứu tác dụng giảm đau và độc tính cấp) do Viện Vệsinh dịch tễ trung ương cung cấp

Chuột cống trắng cả hai giống, khoẻ mạnh, khối lượng 180 – 220g đểnghiên cứu tác dụng chống viêm và đánh giá độc tính bán trường diễn do Việnquân Y cung cấp

Động vật thí nghiệm sau khi mua về được nuôi ổn định 5 ngày trước khithí nghiệm, được ăn thức ăn chuẩn do Viện vệ sinh dịch tễ Hà Nội cung cấp,uống nước tự do

2.1.2 Dụng cụ, hóa chất nghiên cứu

 Thuốc và hóa chất nghiên cứu:

- Chế phẩm Tecan ở dạng bột khô màu vàng, hàm lượng tectoridin 95%,chiết xuất từ thân rễ Xạ can do Ts Lê Minh Hà, viện Hóa Học các hợp chất tựnhiên cung cấp

- Indomethacin bột tinh khiết, lọ 200 mg do Viện Kiểm Nghiệm – Bộ Y tếcung cấp

- Aspegic bột pha dung dịch uống, hàm lượng 100 mg/gói do Công tySanofi Synthelabo cung cấp

- Các hóa chất đạt tiêu chuẩn phòng thí nghiệm như ether, NaCMC,carrageenin, dung dịch acid acetic 1%