Đánh giá tác dụng giảm đau, chống viêm và độc tính của chế phẩm tecan trên thực nghiệm

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HOÀI ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH CỦA CHẾ PHẨM TECAN TRÊN THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2013 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THANH HOÀI ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, CHỐNG VIÊM VÀ ĐỘC TÍNH CỦA CHẾ PHẨM TECAN TRÊN THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: Ts Đỗ Thị Nguyệt Quế Nơi thực hiện: Bộ môn Dược lực - trường Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI – 2013 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian nghiên cứu, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lòng cảm ơn chân thành đến người hướng dẫn, dìu dắt giúp đỡ để tơi hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Trước hết, tơi xin thể lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới Ts Đỗ Thị Nguyệt Quế, giảng viên môn Dược lực Cô vừa người bảo dạy dỗ cho kiến thức học tập, vừa sửa chữa cho sai sót, khuyết điểm thân cho tơi lời khuyên quý giá sống thực tế, giúp đủ tự tin để bước tiếp đường phía trước Một lần nữa, tơi xin dành cho người thầy kính yêu biết ơn chân thành Tơi xin chân thành cảm ơn Ths Nguyễn Thị Thu Hằng giúp đỡ cho nhiều lời khun q giá q trình tơi thực hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn anh chị kĩ thuật viên mơn Dược lực tận tình hỗ trợ, giúp đỡ tơi nhiều q trình tiến hành thử nghiệm nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo môn Dược lực truyền thụ cho tơi kiến thức bổ ích thơng qua giảng, tạo điều kiện thuận lợi cho học tập nghiên cứu môn Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, phòng Đào tạo thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ suốt năm học tập Cuối cùng, xin bày tỏ yêu thương biết ơn sâu sắc tới gia đình bè bạn, người ln bên chăm sóc, động viên giúp đỡ suốt năm tháng đời Hà nội, ngày 21 tháng 05 năm 2013 Sinh viên, Nguyễn Thị Thanh Hoài Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi MỤC LỤC STT NỘI DUNG TRANG ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN Tổng quan viêm 1.1.1 Khái niệm viêm 1.1.2 Nguyên nhân gây viêm 1.1.3 Phân loại viêm 1.1.4 Sinh lý, chế trình viêm 1.1.5 Các thuốc chống viêm 1.1.6 Các mơ hình nghiên cứu tác dụng chống viêm thuốc Tổng quan đau 11 1.2.1 Định nghĩa 11 1.2.2 Cơ chế đau 11 1.2.3 Nguyên nhân gây đau 12 1.2.4 Phân loại đau 12 1.2.5 Thuốc giảm đau 14 1.2.6 Một số mơ hình nghiên cứu tác dụng giảm đau thuốc 14 1.3 Tổng quan đối tượng nghiên cứu 14 1.3.1 Nguồn gốc đặc điểm tectoridin 14 1.3.4 Một số nghiên cứu tác dụng sinh học tectoridin số dịch chiết từ xạ can 15 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 Đối tượng nghiên cứu 18 2.1.1 Động vật nghiên cứu 18 2.1.2 Dụng cụ, hóa chất nghiên cứu 18 Phương pháp nghiên cứu 19 Phương pháp đánh giá tác dụng giảm đau 19 1.1 1.2 2.1 2.2 2.2.1 2.2.2 Phương pháp đánh giá tác dụng chống viêm cấp 20 2.2.3 Phương pháp đánh giá độc tính cấp tính 21 2.2.4 Phương pháp đánh giá độc tính bán trường diễn 22 Phương pháp xử lý số liệu 24 Chương 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 25 Kết nghiên cứu 25 3.1.1 Kết đánh giá tác dụng giảm đau 25 3.1.2 Kết đánh giá tác dụng chống viêm 26 3.1.3 Kết đánh giá độc tính cấp tính 27 3.2.4 Kết đánh giá độc tính bán trường diễn 28 Bàn luận 34 3.2.1 Bàn luận tác dụng giảm đau Tecan 34 3.2.2 Bàn luận tác dụng chống viêm Tecan 35 3.2.3 Bàn độc tính Tecan 36 Chương 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 Kết luận 40 4.1.1 Về tác dụng giảm đau 40 4.1.2 Về tác dụng chống viêm cấp tính 40 4.1.3 Về độc tính cấp tính 40 4.1.4 Về độc tính bán trường diễn 40 Kiến nghị 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 2.3 3.1 3.2 4.1 4.2 Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT ADN Acid deoxyribo Nucleic NSAIDs Non steroidal antiinflammatory drugs TNFα Tumor necrosis factor alpha PAF Platelet Activating Factor UV Ultra violet radiation DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ HÌNH VẼ TT Tên bảng/hình vẽ Trang Bảng 3.1 Số đau quặn chuột thời điểm 25 Bảng 3.2 Tỉ lệ phù chân chuột thời điểm 26 Bảng 3.3 Cân nặng động vật thí nghiệm 28 Bảng 3.4 Ảnh hưởng Tecan thông số huyết học 29 HC, Hb HCT chuột thực nghiệm Bảng 3.5 Ảnh hưởng Tecan số lượng tiểu cầu số 30 lượng bạch cầu chuột thực nghiệm Bảng 3.6 Ảnh hưởng Tecan công thức bạch cầu 31 Bảng 3.7 Ảnh hưởng tectoridin đến hoạt độ SGPT, SGOT 31 Bảng 3.8 Ảnh hưởng Tecan đến nồng độ cholesterol toàn 32 phần protein toàn phần Bảng 3.9 Ảnh hưởng Tecan đến thông số creatinin huyết 33 chuột thực nghiệm 10 Hình 1.2 Cấu trúc hóa học tectoridin 15 11 Hình 3.1 Sự thủy phân tectoridin thành tectorigenin tác 34 động acid HCl vi khuẩn Bacteriodes spercoris đường ruột người Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi ĐẶT VẤN ĐỀ Viêm q trình bệnh lý phổ biến, có nhiều yếu tố cụ thể gây viêm, quan mơ bị viêm Viêm vừa phản ứng bảo vệ thể chống lại yếu tố gây bệnh, vừa phản ứng bệnh lý Quá trình viêm gây tổn thương, hoại tử, rối loạn chức quan… Phản ứng viêm gây nhiều ảnh hưởng đến thể Viêm nặng cấp tính gây đau đớn, khiến bệnh nhân giảm ngon miệng, ngủ ảnh hường xấu đến toàn trạng Vậy nên, bên cạnh việc điều trị nguyên nhân gây viêm, cần phải điều trị làm giảm triệu chứng viêm nhằm cải thiện chất lượng sống cho bệnh nhân [8] Hai nhóm thuốc kháng viêm sử dụng nhiều thuốc chống viêm không steroid (NSAIDs) thuốc chống viêm steroid (glucocorticoid) Cả hai nhóm thuốc có tác dụng phụ thường gặp gây loét dày, tá tràng, xuất huyết tiêu hóa… Sự đời NSAID ức chế đặc hiệu cyclooxygenase-2 tưởng giải pháp điều trị viêm sau rofecoxib, valdecoxib bị cấm lưu hành gây tăng yếu tố nguy tim mạch [2] Vì việc tìm kiếm loại thuốc giảm đau, chống viêm hiệu an toàn vấn đề Y học Bên cạnh việc phát minh thuốc tân dược mới, tìm kiếm thuốc có nguồn gốc từ thiên nhiên dựa kinh nghiệm điều trị Y học cổ truyền nhà khoa học đào sâu nghiên cứu Flavonoid hợp chất tự nhiên biết đến với tác dụng dược lý đáng ý tác dụng chống khối u, tác dụng chống xơ vữa động mạch, chống viêm, chống dị ứng, chống oxy hóa…[5] Thân rễ loài Xạ can (Belamcanda chinensis Lem.) chứa nhiều loại isoflavonoid irigenin, tectoridin, tectorigenin, belamcanidin, methylirisolidon, iristectoriginin A [12] Trong tecroridin phân lập từ dịch chiết thân rễ Xạ can chứng minh có tác dụng chống viêm in vitro ức chế tổng hợp chất hóa học trung gian gây viêm prostaglandin E2 [31] Tuy nhiên chúng tơi chưa tìm thấy nghiên cứu đánh giá tác dụng chống viêm tectoridin tác dụng giảm đau độc tính tectoridin in vivo Vì vậy, nghiên cứu thực với mục tiêu sau: - Đánh giá tác dụng chống viêm Tecan mơ hình gây viêm bàn chân chuột carageenin - Đánh giá tác dụng giảm đau Tecan mơ hình gây đau quặn Kostler - Đánh giá độc tính cấp tính độc tính bán trường diễn Tecan thực nghiệm Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ VIÊM 1.1.1 Khái niệm viêm Viêm phản ứng không đặc hiệu mô bị yếu tố hóa học, vật lý hay sinh học cơng [8] Biểu bên viêm da niêm mạc Celcus mô tả từ cách 2000 năm với dấu hiệu điển hình gồm: Sưng, nóng, đỏ đau [28] Viêm vừa phản ứng bảo vệ thể chống lại yếu tố gây bệnh vừa phản ứng bệnh lý trình viêm gây tổn thương, hoại tử, rối loạn chức quan…Phản ứng viêm xuất với nhiều mức độ khác chí nặng nề nguy hiểm đến tính mạng [8] 1.1.2 Nguyên nhân gây viêm Có thể xếp nguyên nhân gây viêm thành nhóm lớn nguyên nhân ngoại sinh nguyên nhân nội sinh [8]: 1.1.2.1 Nguyên nhân ngoại sinh Các nguyên nhân ngoại sinh gây viêm thường gặp như: - Tác nhân học: Từ xây sát nhẹ tới chấn thương nặng gây phá hủy tế bào mơ, làm giải phóng chất gây viêm nội sinh - Tác nhân vật lý: Nhiệt độ cao hay q thấp làm thối hóa protid tế bào gây tổn thương enzym Tia xạ (UV, tia X) tạo gốc oxy tự gây phá hủy số enzym oxy hóa dẫn đến phản ứng viêm Ngồi tia xạ gây tổn thương ADN tế bào - Tác nhân hóa học: Các acid mạnh, kiềm mạnh chất hóa học khác thuốc trừ sâu, độc tố… gây hủy hoại tế bào phong bế hệ enzym thể - Tác nhân sinh học: Là nguyên nhân phổ biến nhất, gồm virus, vi khuẩn, ký sinh trùng đơn bào, đa bào hay nấm… 1.1.2.2 Nguyên nhân nội sinh Thiếu oxy chỗ, hoại tử mô, xuất huyết, rối loạn thần kinh dinh dưỡng (tắc mạch) nguyên nhân gây viêm thường gặp Ngồi ra, viêm 30 (N28) thơng số khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với lô chứng (p>0,05) (bảng 3.4) Ảnh hưởng Tecan số lượng tiểu cầu số lượng bạch cầu sau: Bảng 3.5 Ảnh hưởng Tecan thông số huyết học PLT BC chuột thực nghiệm Mẫu thử Lô 1: NaCMC Lô 2: Tecan 60 180 mg/kg N14 573,78 475,67 N28 N0 565,44 13,44 ± 56,12 ± 70,72 ± 34,44 ± 2,65 308,24 N14 N28 17,56 15,89 ± 2,85 ± 1,59 485,34 14,67 15,53 12,36 ± 37,08 ± 1,67 ± 2,03 ± 1,35 418,66 16,89 13,41 9,46 ± 53,22 ± 45,57 ± 35,83 ± 1,18 ± 2,08 ± 2,01 ± 41,26 ± 34,12 507,67 BC N0 569,22 mg/kg Lô 3: Tecan PLT n * 314,11 Chú thích: (*) p0,05) - Tại thời điểm ngày thứ 14, số lượng tiểu cầu lô thử (uống tectoridin 60mg/kg cân nặng) thấp rõ rệt so với thời điểm trước uống thuốc (p0,05) (bảng 3.4) Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 31 Ảnh hưởng Tecan tỉ lệ bạch cầu lympho (LYM), tỷ lệ bạch cầu hạt sau: Bảng 3.6 Ảnh hưởng Tecan công thức bạch cầu chuột thực nghiệm Công thức bạch cầu n Lô/ Mẫu thử Lô 1: NaCMC Lô 2: Tecan 60 mg/kg Lô 3: Tecan 180 mg/kg LYM (%) Bạch cầu hạt (%) N0 N14 N28 N0 N14 N28 86,56 82,44 84,11 8,82 8,32 10,29 ± 2,65 ± 2,85 ± 1,59 ± 0,81 ± 1,83 ± 1,19 85,33 74,53 77,76 6,59 6,77 9,65 ± 1,67 ± 2,03 ± 1,35 ± 0,45 ± 0,81 ± 2,02 83,11 59,59 65,79 6,84 4,76 6,49 ± 1,18 ± 2,08 ± 2,01 ± 1,14 ± 1,39 ± 1,36 Nhận xét: Tại thời điểm nghiên cứu, khơng thấy có khác biệt công thức bạch cầu lô thực nghiệm (p>0.05) (bảng 3.5) 3.1.4.3 Kết đánh giá ảnh hưởng Tecan đến chức gan:  Kết định lượng SGPT, SGOT, cholesterol toàn phần, protein toàn phần thời điểm nghiên cứu trình bày bảng 3.6 bảng 3.7 Bảng 3.7 Ảnh hưởng tectoridin đến hoạt độ SGPT, SGOT Lô/ Mẫu thử Lô 1: NaCMC Lô 2: Tecan 60 mg/kg Lô 3: Tecan 180 mg/kg SGPT (U/L) n 9 SGOT (U/L) N0 N14 N28 N0 N14 N28 75,53 80,39 64,94 222,37 309,50 229,48 ± 13,63 ± 12,35 ± 8,84 ± 12,64 ± 8,12 ± 20,87 55,92 73,38 46,44 196,46 290,6 215,34 ± 6,79 ± 12,06 ± 2,98 ± 15,39 ± 24,44 ± 15,69 85,98 83,40 62,13 270,19 263,83 244,64 ± 10,38 ± 23,83 ± 6,23 ± 21,60 ± 20,46 ± 17,46 32 Nhận xét: Tại thời điểm nghiên cứu, không thấy có khác biệt hoạt độ SGPT SGOT lô thử nghiệm (p> 0,05)  Ảnh hưởng Tecan lên nồng độ protein toàn phần huyết tương nồng độ cholesterol toàn phần thể bảng 3.7 Bảng 3.8 Ảnh hưởng Tecan đến nồng độ cholesterol toàn phần protein toàn phần Chỉ số nghiên cứu Lơ/ Mẫu n Protein tồn phần Cholesterol tồn phần (g/dL) (mmol/L) thử Lơ 1: NaCMC Lơ 2: Tecan 60 mg/kg Lô 3: Tecan 180 mg/kg N0 N14 N28 N0 N14 N28 38,93 35,11 52,32 2,30 1,81 1,43 ± 5,54 ± 1,71 ± 1,37 ± 0,49 ± 0,08 ± 0,08 33,11 33,20 58,00 1,73 1,50 1,56 ± 0,09 ± 0,11 ± 0,05 2,11 1,76 1,71 ± 0,38 ± 1,23 32,79 39,69 ± 1,61 ± 3,66 ± 4,05 *# 57,56 ± 2,51 *# ± 0,08 ± 0,11 * ± 0,11 Chú thích: (*) p < 0,05 so sánh với thời điểm trước cho uống mẫu thử (#) p < 0,05 so sánh với lô chứng Nhận xét: - Tại thời điểm ngày thứ 14: Không thấy khác biệt thông số protein tồn phần cholesterol tồn phần lơ thực nghiệm (p> 0,05) - Tại thời điểm ngày thứ 28: Chỉ số nồng độ protein tồn phần lơ thử (Tecan 60mg/kg) lô thử (Tecan 180 mg/kg) khác biệt có ý nghĩa so với số lô chứng thời điểm trước uống mẫu thử (p< 0,05) Cụ thể: Protein toàn phần lô uống thuốc thử tăng nhẹ tương ứng 10.8% 10% Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 33 Như vậy: Nếu sử dụng tectoridin kéo dài tuần làm ảnh hưởng đến chức tổng hợp protein gan  Kết quan sát đại thể gan chuột sau 28 ngày uống thuốc sau: Ở lô uống mẫu thử lô uống tá dược pha thuốc gan chuột có đặc điểm mặt gan nhẵn, mật độ bình thường, màu đỏ, khơng có xung huyết, khơng có dấu hiệu tổn thương 3.1.4.4 Kết đánh giá ảnh hưởng Tecan đến chức thận  Kết định lượng creatinin lơ thí nghiệm trình bày bảng 3.8: Bảng 3.9 Ảnh hưởng Tecan đến thông số creatinin huyết chuột thực nghiệm Lô/ Mẫu thử Lô 1: NaCMC Lô 2: Tecan 60 mg/kg Lô 3: Tecan 180 mg/kg n Creatinin (µmol/L) N0 N14 N28 68,95 ± 5,79 71,32 ± 3,14 59,01 ± 2,54 70,16 ± 1,82 69,31 ± 2,77 56,49 ± 3,20 73,59 ± 2,49 65,33 ± 3,37 58,42 ± 1,42 Nhận xét: Sau tuần uống Tecan, hàm lượng creatinin máu chuột khơng có thay đổi khác biệt so với lô chứng (p>0,05)  Kết đại thể chuột sau 28 ngày uống mẫu thử cho thấy thận mức bình thường, mật độ bình thường, màu đỏ thẫm, mặt nhẵn, màu đỏ, không thấy đám sung huyết đám tổn thương  Kết quan sát cấu trúc vi thể thận chuột sau 28 ngày: Cầu thận bình thường, khơng có dấu hiệu tổn thương 34 3.2 BÀN LUẬN 3.2.1 Về tác dụng giảm đau Tecan Để đánh giá tác dụng giảm đau mẫu thử thực nghiệm, thí nghiệm thường tiến hành động vật gây đau nhiều phương pháp khác như: Gây đau nhiệt (phương pháp mâm nóng), gây đau cách kẹp đi, gây đau hóa chất (bradykinin, prostaglandin, acid acetic…) Trong gây đau quặn phương pháp thường dùng để khảo sát tác dụng thuốc giảm đau [13] Trong nghiên cứu này, cho chuột uống Tecan với mức liều 100 mg/kg 300 mg/kg Kết nghiên cứu cho thấy hai mức liều 100 mg/kg 300 mg/kg cân nặng chuột nhắt, Tecan cho hiệu giảm đau tương đương (p>0.05) Như nghiên cứu tiếp theo, đề xuất mức liều Tecan 100 mg/kg chuột nhắt Tectoridin glycosid chiết tách từ dịch chiết thân rễ Xạ can Khi bị thủy phân, tectoridin bị phần glucose để trở thành dạng genin tectorigenin (Hình 4.1) [5][19][26] Bacteriodes spercoris đường ruột người Hình 3.1: Sự thủy phân tectoridin thành tectorigenin tác động acid HCl vi khuẩn Bacteriodes spercoris đường ruột người [19][26] Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 35 Trong nghiên cứu Ths Đỗ Thị Nguyệt Quế cộng tectorigenin thể tác dụng giảm số đau quặn ba mức liều 50mg/kg, 100mg/kg 200mg/kg liều 100mg/kg cho hiệu giảm đau tốt [1] Chưa thể kết luận tectoridin hay tectorigenin có hiệu giảm đau tốt hai thử nghiệm khơng tiến hành song song tác dụng giảm đau tectoridin có liên quan đến dạng chuyển hóa có hoạt tính tectorigenin 3.2.2 Bàn luận tác dụng chống viêm Để nghiên cứu tác dụng chống viêm, lựa chọn mơ hình gây viêm bàn chân chuột carragenin, mơ hình thử nghiệm tác dụng chống viêm cấp kinh điển, tiến hành đơn giản, thuận tiện, thời gian tiến hành nhanh Carrageenin chất tan nước tạo thành dung dịch, tiêm liều xác, tạo độ phù ổn định [6] Mặt khác, sau tiêm carrageenin, đáp ứng viêm tiến triển theo pha, pha đặc trưng giải phóng histamin, serotonin kinin, pha thứ hai đặc trưng giải phóng prostaglandin, chất trung gian gây phù bàn chân chuột Vì mơ hình nghiên cứu tác dụng giảm phù carrageenin phù hợp để nghiên cứu chất có tác dụng ức chế riêng lẻ đồng thời chất trung gian hóa học [24] Cơ chế phù hợp với chế chống viêm (tiến hành in vitro) báo cáo tectoridin ức chế tổng hợp prostaglandin E2 [18][30] Kết nghiên cứu Tecan liều 60mg/kg thể tác dụng chống viêm cấp thời điểm 5h, 6h 7h sau gây viêm, tác dụng tương đương với indomethacin 10mg/kg thời điểm 6h 7h sau gây viêm Việc lựa chọn liều Tecan 60 mg/kg cân nặng kết phép tính ngoại suy từ liều thuốc thể tác dụng giảm đau chuột nhắt (liều giảm đau chuột nhắt 100 mg/kg cân nặng, hệ số hiệu chỉnh sang chuột cống 7/12 [13]) Theo Yong Pil Kim cộng sự, tectoridin tectorigenin có tác dụng chống viêm ức chế tổng hợp prostaglandin E2 (PGE2 ) Như kết 36 nghiên cứu in vivo chúng tơi hồn tồn phù hợp với kết tác giả Đồng thời, nghiên cứu tectorigenin có hiệu lực ức chế PGE2 mạnh tectoridin [30] Một nghiên cứu khác Kwang Seok Ahn cộng phát irigenin chiết xuất từ rễ lồi Belamcanda chinensis có tác dụng chống viêm đại thực bào chuột Kết nghiên cứu Irigenin ức chế tổng hợp nitric oxit cyclooxygenase mRNAs đồng thời lại không gây độc tế bào Như irigenin chiết xuất từ rễ Xạ can có tác dụng chống viêm [19] Theo [4] thân rễ Xạ can có tác dụng chống viêm mơ hình gây phù bàn chân chuột với kaolin, gây u hạt thực nghiệm với amian chuột cống trắng Flavonoid tồn phần xạ can có tác dụng ức chế yếu hoạt tính men polyphenoloxydase huyết người in vitro Hoạt tính men huyết người tăng rõ rệt bệnh nhiễm khuẩn, trạng thái viêm cấp mạn tính, bệnh bạch cầu, xơ gan tăng tuyết giáp 3.2.3 Bàn luận độc tính Tecan • Độc tính cấp Cho chuột nhắt trắng uống Tecan tới liều 5g/kg chuột (là liều cao nên thử hoạt chất tinh khiết theo OECD [23]) khơng thấy có thay đổi bất thường hoạt động chuột, khơng có chuột chết vòng 72 ngày sau uống thuốc thử Vì theo bảng phân loại OECD Tecan chất khơng có độc tính • Độc tính bán trường diễn Trong suốt thời gian thí nghiệm kéo dài tuần liên tục, chuột cống trắng lô (lô uống dung môi pha mẫu thử, lô uống Tecan liều 60 mg/kg cân nặng lô uống Tecan liều 180 mg/kg cân nặng) khơng có biểu bất thường mức 60 mg/kg chuột nghiên cứu không đạt mức tăng cân lô chứng liều cao (180mg/kg) Tecan lại tác dụng Ket-noi.com Ket-noi.com kho kho tai tai lieu lieu mien mien phi phi 37 Do đó, chưa thể kết luận Tecan có gây ảnh hưởng đến cân nặng động vật nghiên cứu cho uống liên tục 28 ngày Số lượng chất lượng tế bào máu phản ánh tình trạng quan tạo máu Nếu thuốc tác động đến quan tạo máu làm thay đổi số lượng chất lượng tế bào máu [13] Vì để đánh giá độc tính bán trường diễn Tecan hệ tạo máu, tiến hành định lượng số lượng hồng cầu, hemoglobin, hematocrit, số lượng tiểu cầu số lượng bạch cầu Kết sau tuần theo dõi, ba thời điểm nghiên cứu, số số lượng hồng cầu, nồng độ hemoglobin, tỷ lệ hematocrit số lượng bạch cầu khác biệt có ý nghĩ thống kê lô thử nghiệm Như Tecan liều 60 mg/kg cân nặng chuột cống trắng (liều có tác dụng dược lý động vật thử nghiệm) liều gấp lần 180mg/kg cân nặng khơng có độc tính chức tạo máu chuột cống trắng Khi đánh giá ảnh hưởng Tecan lên chức thận chuột, đánh giá thơng qua nồng độ creatinin huyết urê huyết Creatinin huyết thành phần ổn định máu, không phụ thuộc vào chế độ ăn thay đổi sinh lý, mà phụ thuộc vào khả đào thải thận Khi cầu thận bị tổn thương, nồng độ creatinin huyết tăng sớm urê huyết Creatinin huyết tiêu tin cậy nên thường dùng để theo dõi đánh giá chức thận Vì nghiên cứu lựa chọn thông số creatinin để đánh giá chức thận Kết đánh giá chuột cống trắng sau tuần tuần uống Tecan liên tục, nồng độ creatinin máu chuột khơng có thay đổi khác biệt so với lơ chứng Như tectoridin liều tương đương với liều có tác dụng dược lý liều gấp lần không ảnh hưởng đến nồng độ creatinin, nên uống Tecan không ảnh hưởng đến chức lọc cầu thận chuột cống trắng Kết phù hợp với hình ảnh quan sát đại thể cấu trúc vi thể thận Để đánh giá ảnh hưởng mẫu thử lên chức gan – quan đảm nhận nhiều chức quan trọng thể, tiến hành theo 38 dõi, định lượng hoạt độ SGOT, SGPT định lượng nồng độ cholesterol, protein toàn phần máu chuột Nếu thuốc gây tổn thương tế bào gan hoạt độ SGOT, SGPT máu tăng Mặt khác thuốc ảnh thưởng đến chức chuyển hóa lipid, chuyển hóa protein thơng số cholesterol protein tồn phần bị ảnh hưởng [13] Kết đánh giá ảnh hưởng Tecan chức gan chuột cống trắng sau tuần uống mẫu thử cho thấy Tecan mức liều 60 mg/kg 180 mg/kg không gây tổn thương tế bào gan, hoạt độ SGOT SGPT khơng có khác biệt lơ thử nghiệm (p>0.05) Tecan không ảnh hưởng đến chức tổng hợp lipid gan, phản ánh thông qua nồng độ cholesterol tồn phần khơng có khác biệt lô Xem xét tác động thuốc chức tổng hợp protein gan, kết thời điểm ngày thứ 28 nghiên cứu, số nồng độ protein tồn phần lơ thử lơ thử cao có ý nghĩa so với lô chứng so với thời điểm trước cho uống mẫu thử (p