Nội dung bài viết với mục tiêu khảo sát độ ổn định viên hai lớp chứa metoprolol 50 MG phóng thích kéo dài và amlodipin 5 MG phóng thích nhanh trong điều kiện lão hóa cấp tốc và dài hạn theo hướng dẫn của Asean để dự đoán tuổi thọ của chế phẩm.
Trang 1KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH VIÊN HAI LỚP CHỨA METOPROLOL 50 MG PHÓNG THÍCH KÉO DÀI
VÀ AMLODIPIN 5 MG PHÓNG THÍCH NHANH
Nguyễn Thị Linh Tuyền * , Lê Quan Nghiệm * , Nguyễn Đức Tuấn **
TÓM TẮT
Mở đầu – Mục tiêu: Khảo s{t độ ổn định của viên hai lớp chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và
amlodipin phóng thích nhanh trong điều kiện lão hóa cấp tốc và dài hạn theo hướng dẫn của Asean để dự đo{n tuổi thọ của chế phẩm
Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Ba lô nghiên cứu viên nén bao phim chứa metoprolol 50 mg phóng
thích kéo dài và amlodipin 5 mg phóng thích nhanh, có số lô lần lượt là 001, 002, 003 Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ v| độ ẩm lên độ ổn định của viên nén bao phim chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và amlodipin
5 mg phóng thích nhanh đã được tiến hành trên 3 lô ở điều kiện lão hóa cấp tốc (nhiệt độ 40 o C ± 2 o C, độ ẩm tương đối 75% ± 5%) v| điều kiện dài hạn (nhiệt độ 30 o C ± 2 o C, độ ẩm tương đối 75% ± 5%) Các chỉ tiêu khảo sát bao gồm cảm quan, độ hòa tan v| định lượng hoạt chất trong viên Dựa vào kết quả khảo sát, dự đo{n tuổi thọ của viên nghiên cứu
Kết quả: Chế phẩm nghiên cứu đạt tất cả các chỉ tiêu khảo sát trong suốt thời gian thử nghiệm Kết quả khảo
sát cho thấy nhiệt độ và độ ẩm có ảnh hưởng đến khả năng giải phóng hoạt chất và sự giảm h|m lượng amlodipin
và metoprolol Kết quả dự đo{n tuổi thọ của viên nghiên cứu ở điều kiện lão hóa cấp tốc v| điều kiện dài hạn lần là 23,89 th{ng v| 24,68 th{ng khi được bảo quản ở 30 o C
Kết luận: Tuổi thọ dự đo{n của viên hai lớp chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và amlodipin 5 mg
phóng thích nhanh là 24,68 th{ng khi được bảo quản ở nhiệt độ 30 o C
Từ khóa: Metoprolol succinat, amlodipin besylat, viên hai lớp, khảo s{t độ ổn định
ABSTRACT
STABILITY TESTING OF BILAYER TABLET CONTAINING SUSTAINED RELEASE METOPROLOL 50 MG AND IMMEDIATE RELEASE AMLODIPINE 5 MG
Nguyen Thi Linh Tuyen, Le Quan Nghiem, Nguyen Duc Tuan
* Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement Vol 22 - No 1- 2018: 408 - 415
Background – Objectives: Stability of bilayer tablet containing sustained release metoprolol 50 mg and
immediate release amlodipine 5 mg was investigated basing on Asean guidelines to predict the life expectancy of this drug product
Method: The subject of this study was the bilayer tablet containing sustained release metoprolol 50 mg and
immediate release amlodipine 5 mg Method: investigation of temperature and humidity on stability of three pilot batches of the bilayer tablets at accelerated conditions (temperature of 40 o C 2 o C and relative humidity of 75%
5%) in six months and at long-term conditions (temperature of 30 o C 2 o C and relative humidity of 75% 5%)
in twelve months via testing the drug product’s appearance, dissolution, and quantification Estimation of the drug product’s life expectancy from the testing results.
Results: The testing results showed that the drug product’s appearance, dissolution, and quantification
Trang 2complied with in-house specification during stability test, and temperature and humidity impacted on dissolution and content of metoprolol and amlodipine The life expectancy of the drug product from stability tests at accelerated and long-term condition was 23.89, and 24.68 months, respectively, when stored at 30 o C
Conclusion: The shelf-life of the bilayer tablet containing sustained release metoprolol 50 mg and immediate
release amlodipine 5 mg is estimated 24.68 months when stored at 30 o C
Keyword: metoprolol succinate, amlodipine besylate, stability test, bilayer tablet
ĐẶT VẤN ĐỀ
Metoprolol là chất đối kháng chọn lọc β1
-adrenergic không có hoạt tính nội tại giống
thần kinh giao cảm, được chỉ định trong điều
trị tăng huyết áp(2) Amlodipin là chất ức chế
kênh calci thuộc nhóm dihydropyridin có tác
dụng trong điều trị tăng huyết áp(2) Viên hai
lớp chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo
d|i v| amlodipin 5 mg phóng thích nhanh đã
được bào chế và tiêu chuẩn hóa thành công, có
độ giải phóng hoạt chất tương đương viên đối
chiếu Selomax® 50/5(3) Hiện nay, chế phẩm
n|y đã được nâng cấp cỡ lô để tiến hành khảo
s{t độ ổn định v| đ{nh gi{ tương đương sinh
học in vivo Trong nghiên cứu này, chúng tôi
công bố kết quả khảo s{t độ ổn định trong
điều kiện lão hóa cấp tốc và dài hạn theo
hướng dẫn của Asean để dự đo{n tuổi thọ của
viên hai lớp chứa metoprolol 50 mg phóng
thích kéo dài và amlodipin 5 mg phóng thích
nhanh
ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Đối tượng nghiên cứu
Ba lô nghiên cứu viên hai lớp chứa
metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và
amlodipin 5 mg phóng thích nhanh, có số lô lần lượt là 001, 002, 003
Nguyên vật liệu
Chất chuẩn
Metoprolol succinat, số lô 98418-47-4, hàm lượng 100,40% tính trên nguyên trạng do Fine Chemicals BU cung cấp Amlodipin besylat, số
lô QT.14508114, h|m lượng 100,26% tính trên nguyên trạng do Viện Kiểm nghiệm thuốc TPHCM cung cấp
Trang thiết bị
Máy thử độ hòa tan Pharmatest (Đức), máy sắc ký lỏng hiệu năng cao Hitachi (Nhật), bể siêu }m Elmasomic (Đức), cân phân tích 5 số Mettler (Đức), tủ vi khí hậu Caron (Mỹ)
Hóa chất và dung môi
Acetonitril đạt tiêu chuẩn dùng trong sắc
ký lỏng (Merck) Acid phosphoric, acid hydrocloric, kali dihydrophosphat đạt tiêu chuẩn phân tích
Phương pháp nghiên cứu
Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm
Nghiên cứu độ ổn định được thực hiện trên 3 lô được sản xuất ở quy mô pilot Điều kiện bảo quản và thời gian lấy mẫu được trình bày trong bảng 1(1) Các chỉ tiêu khảo sát bao gồm cảm quan, độ hòa tan v| định lượng hoạt chất trong viên
Bảng 1: Điều kiện bảo quản và thời gian lấy mẫu
Cấp tốc
001
Nhiệt độ: 40 o
C ± 2oC
002
003 Dài hạn
001
Nhiệt độ: 30 o
C ± 2oC
002
003
Trang 3Áp dụng quy trình định lượng đồng thời
metoprolol và amlodipin trong chế phẩm và
trong môi trường hòa tan bằng phương ph{p
HPLC với đầu dò PDA đã được x}y dựng v|
thẩm định(3), với điều kiện sắc ký như sau: cột
sắc ký Restek UltraI C18 (250 x 4,6 mm; 5 µm),
đầu dò PDA, bước sóng phát hiện 230 nm, pha
động acetonitril - đệm phosphat pH 4 (32:68),
tốc độ dòng 0,6 ml/phút, nhiệt độ cột 55oC
Dung dịch chuẩn gốc amlodipin besylat có
nồng độ 500 µg/ml pha động Dung dịch
chuẩn gốc metoprolol succinat có nồng độ 500
µg/ml pha động Hỗn hợp chuẩn amlodipin 10
µg/ml và metoprolol 100 µg/ml: hút chính xác
1 ml dung dịch chuẩn gốc amlodipin besylat
và 10 ml dung dịch chuẩn gốc metoprolol
succinat, cho v|o bình định mức 50 ml, thêm
pha động đến vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc
milipore 0,45 µm trước khi tiến hành sắc ký
Dự đoán tuổi thọ của viên nén chứa metoprolol
50 mg phóng thích kéo dài và amlodipin 5 mg
phóng thích nhanh
X{c định hằng số tốc độ phản ứng (K) của
từng lô ở c{c điều kiện bảo quản theo công thức:
Trong đó: D t h|m lượng hoạt chất tại thời điểm t (%) D o
h|m lượng hoạt chất tại thời điểm ban đầu (%) t thời điểm
khảo sát (ngày)
Ước tính tuổi thọ của viên nghiên cứu dựa vào thử nghiệm cấp tốc Tuổi thọ của thuốc tính theo từng hoạt chất được tính theo công thức:
Trong đó: K tb là hằng số tốc độ phản ứng trung bình T o là thời gian tính từ lúc thuốc được sản xuất đến khi thử nghiệm (lô 001: 14 ngày, lô 002: 12 ngày, lô 003: 7 ngày)
Ước tính tuổi thọ của viên nghiên cứu dựa vào thử nghiệm dài hạn:
Nếu chênh lệch tuổi thọ của thuốc ở 2 lô lớn hơn 60 ng|y thì loại bỏ giá trị lớn Nếu chênh lệch tuổi thọ của thuốc ở 2 lô bé hơn hoặc bằng 60 ngày thì tính giá trị trung bình
So sánh tuổi thọ của thuốc tính theo từng hoạt chất, chọn giá trị nhỏ hơn l| tuổi thọ của viên nghiên cứu
KẾT QUẢ
Khảo sát ảnh hưởng của nhiệt độ và độ ẩm
Cảm quan của sản phẩm
Kết quả theo dõi chỉ tiêu cảm quan của sản phẩm được trình bày trong bảng 2
Bảng 2: Kết quả theo dõi chỉ tiêu cảm quan của viên nghiên cứu
Cấp tốc
Dài hạn
Nhận xét: Về mặt cảm quan, tất cả các viên
đều giữ được bề mặt nhẵn bóng, màu sắc hầu
như không thay đổi so với trước khi thử
nghiệm
Độ hòa tan của hoạt chất
Kết quả theo dõi chỉ tiêu độ hòa tan metoprolol v| amlodipin được trình bày trong bảng 3, bảng 4 và bảng 5
Trang 4Bảng 3: Kết quả theo dõi chỉ tiêu độ hòa tan metoprolol ở điều kiện lão hóa cấp tốc (% ± SD, n = 12)
Thời điểm
lấy mẫu Số lô
Thời gian theo dõi (tháng)
1 giờ
4 giờ
8 giờ
20 giờ
Bảng 4: Kết quả theo dõi chỉ tiêu độ hòa tan metoprolol ở điều kiện dài hạn (% ± SD, n = 12)
Thời điểm
lấy mẫu Số lô
Thời gian theo dõi (tháng)
1 giờ
4 giờ
8 giờ
20 giờ
Bảng 5: Kết quả theo dõi chỉ tiêu độ hòa tan amlodipin ở điều kiện lão hóa cấp tốc v| điều kiện dài hạn
(%±SD, n = 12)
Thời điểm
lấy mẫu Số lô
Thời gian theo dõi ở điều kiện lão hóa cấp tốc (tháng)
30 phút
Thời điểm
lấy mẫu Số lô
Thời gian theo dõi ở điều kiện dài hạn (tháng)
30 phút
Trang 5Hàm lượng hoạt chất trong chế phẩm
Kết quả theo dõi h|m lƣợng metoprolol và
amlodipin ở điều kiện lão hóa cấp tốc v| điều
kiện dài hạn đƣợc trình bày trong bảng 6 và bảng 7 Hình 1 và hình 2 minh họa sắc ký đồ chế phẩm lô 001
Bảng 6: Kết quả theo dõi h|m lượng metoprolol và amlodipin ở điều kiện lão hóa cấp tốc
Thời gian theo dõi
(tháng)
(g)
Hình 1: Sắc ký đồ chế phẩm khảo s{t độ ổn định lô 001 ở điều kiện lão hóa cấp tốc a 0 tháng, b 1 tháng, c 2 tháng,
d 3 tháng, e 4 tháng, f 5 tháng, g 6 tháng
Trang 6(a) (b)
Hình 2: Sắc ký đồ chế phẩm khảo s{t độ ổn định lô 001 ở điều kiện dài hạn
a 0 tháng, b 1 tháng, c 3 tháng, d 6 tháng, e 9 tháng, f 12 tháng
Bảng 7: Kết quả theo dõi h|m lượng metoprolol và amlodipin ở điều kiện dài hạn
Thời gian theo dõi
(tháng)
Dự đoán tuổi thọ của viên nén chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và amlodipin 5 mg phóng thích nhanh
Thử nghiệm lão hóa cấp tốc
Bảng 8: Kết quả ước tính tuổi thọ của thuốc nghiên cứu ở điều kiện lão hóa cấp tốc
Thời gian theo dõi
(ngày)
Trang 7Thử nghiệm dài hạn
Bảng 9: Kết quả ước tính tuổi thọ của thuốc nghiên cứu ở điều kiện dài hạn
Thời gian theo dõi
(ngày)
BÀN LUẬN
Về chỉ tiêu độ hòa tan, tất cả c{c viên đều đạt
về tốc độ phóng thích hoạt chất metoprolol và
amlodipin tại các thời điểm Kết quả phân tích
thống kê Anova 2 yếu tố có lặp ( = 0,05; độ tin
cậy 95%) cho thấy nhiệt độ, độ ẩm và thời gian
bảo quản có ảnh hưởng đến khả năng giải phóng
hoạt chất metoprolol và amlodipin Riêng độ
phóng thích hoạt chất metoprolol ở thời điểm 20
giờ ở điều kiện lão hóa cấp tốc (p = 0,65) v| điều
kiện dài hạn (p = 0,1) không ảnh hưởng đến sự
giảm h|m lượng vì ở thời điểm này hoạt chất
phóng thích gần như ho|n to|n
Về chỉ tiêu định lượng hàm lượng hoạt chất
trong chế phẩm, tất cả c{c viên đều đạt chỉ tiêu
định lượng Kết quả phân tích thống kê phân
tích Anova 2 yếu tố có lặp ( = 0,05; độ tin cậy
95%) cho thấy nhiệt độ, độ ẩm và thời gian bảo
quản có ảnh hưởng đến sự giảm h|m lượng
metoprolol và amlodipin
Thử nghiệm lão hóa cấp tốc
Với metoprolol: số ngày chênh lệch giữa lô 002
với lô 001 và lô 003 lần lượt là 119,52 ngày và
108,34 ngày (> 60 ngày) nên loại bỏ giá trị của lô
002, số ngày chênh lệch giữa lô 001 với lô 003 là
13,18 ngày (< 60 ng|y) Do đó, gi{ trị trung bình
của lô 001 với lô 003 được dùng để ước tính tuổi
thọ của thuốc nghiên cứu, cụ thể là: (751,70 +
Với amlodipin: số ngày chênh lệch giữa lô 003
với lô 001 và lô 002 lần lượt là 96,68 ngày và 151,45 ngày (> 60 ngày) nên loại bỏ giá trị của lô
003, số ngày chênh lệch giữa lô 001 với lô 002 là 54,77 ng|y (< 60 ng|y) Do đó, gi{ trị trung bình của lô 001 v| lô 002 được dùng để ước tính tuổi thọ của thuốc nghiên cứu, cụ thể là: (743,88 +
689,22)/2 = 716,60 ngày
Như vậy tuổi thọ ước đo{n của viên nghiên cứu từ các kết quả khảo sát ở điều kiện lão hóa
cấp tốc là 716,60 ngày ( 23,89 tháng) khi được
bảo quản ở 30oC
Thử nghiệm dài hạn
Với metoprolol: số ngày chênh lệch giữa lô 002
với lô 001 và lô 003 lần lượt là 245,79 ngày và 220,05 ngày (> 60 ngày) nên loại bỏ giá trị của lô
002, số ngày chênh lệch giữa lô 001 với lô 003 là 25,74 ng|y (< 60 ng|y) Do đó, gi{ trị trung bình của lô 001 v| lô 003 được dùng để ước tính tuổi thọ của thuốc nghiên cứu, cụ thể là: (768,70 +
794,44)/2 = 781,57 ngày
Với amlodipin: số ngày chênh lệch giữa lô 001
với lô 002 và lô 003 lần lượt là 109,13 ngày và 99,78 ngày (> 60 ngày) nên loại bỏ giá trị của lô
001, số ngày chênh lệch giữa lô 002 với lô 003 là 9,35 ng|y (< 60 ng|y) Do đó, giá trị trung bình của lô 002 v| lô 003 được dùng để ước tính tuổi thọ của thuốc nghiên cứu, cụ thể là: (735,59 +
Trang 8Như vậy tuổi thọ ước đo{n của viên
nghiên cứu từ các kết quả khảo sát ở điều kiện
dài hạn là 740,26 ngày ( 24,68 tháng) khi được
bảo quản ở 30oC
KẾT LUẬN
Khảo s{t độ ổn định của viên nén bao
phim chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo
d|i v| amlodipin 5 mg phóng thích nhanh đã
được tiến hành trên 3 lô ở điều kiện lão hóa
cấp tốc (nhiệt độ 40oC ± 2oC, độ ẩm tương đối
75% ± 5%) v| điều kiện dài hạn (nhiệt độ 30oC
± 2oC, độ ẩm tương đối 75% ± 5%) Các chỉ tiêu
theo dõi bao gồm cảm quan, độ hòa tan và
h|m lượng hoạt chất trong viên nghiên cứu
đều đạt trong suốt thời gian khảo sát Kết quả
khảo sát cho thấy nhiệt độ v| độ ẩm có ảnh
hưởng đến khả năng giải phóng hoạt chất và
sự giảm h|m lượng amlodipin và metoprolol
Dựa theo kết quả khảo s{t độ ổn định ở điều kiện dài hạn, tuổi thọ ước đo{n của viên nghiên cứu l| 24,68 th{ng khi được bảo quản ở nhiệt độ 30oC
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1 ASEAN (2013), Asean guideline on stability study of drug product
2 Bộ Y tế (2009), Dược thư Quốc gia Việt Nam, Nhà xuất bản Y học,
Hà Nội, tr 207-213, 2275-2286
3 Nguyễn Thị Linh Tuyền, Đỗ Quang Dương, Lê Thị Cẩm Thúy, Nguyễn Đức Tuấn, Lê Quan Nghiệm (2016), “Nghiên cứu bào chế v| đ{nh gi{ tương đương độ hòa tan in vitro viên bao phim chứa metoprolol 50 mg phóng thích kéo dài và amlodipin 5 mg phóng thích nhanh với viên đối chiếu Selomax ® 50/5”, Tạp chí dược học, 6, 38-42
Ngày nhận bài báo: 18/10/2017 Ngày phản biện nhận xét bài báo: 01/11/2017 Ng|y b|i b{o được đăng: 15/03/2018