Đánh giá một số chỉ số sinh hóa, huyết học trên những bệnh nhân nhiễm ấu trùng toxocara spp

Đứng trước tình hình ký sinh trùng từ động vật lây sang người như toxocara spp ngày càng được xã hội quan tâm, nhất là hiện nay chưa có một “tiêu chuẩn vàng” trong việc chẩn đoán bệnh này, từ đó nghiên cứu nhằm mục đích đánh giá được phần nào mối liên quan giữa yếu tố cận lâm sàng với những bệnh nhân nhiễm ký sinh trùng đường ruột mà ở đây là giun đũa chó/mèo toxocara spp.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ CHỈ SỐ SINH HÓA, HUYẾT HỌC TRÊN NHỮNG BỆNH NHÂN NHIỄM ẤU TRÙNG TOXOCARA SPP Đỗ Thị Phượng Linh*, Lương Trường Sơn*, Đặng Thị Nga*, Phạm Thị Thu Giang* TÓM TẮT Đặt vấn đề: Đứng trước tình hình ký sinh trùng từ động vật lây sang người Toxocara spp ngày xã hội quan tâm, chưa có “tiêu chuẩn vàng” việc chẩn đốn bệnh này, từ chúng tơi tiến hành nghiên cứu nhằm mục đích đánh giá phần mối liên quan yếu tố cận lâm sàng với bệnh nhân nhiễm ký sinh trùng đường ruột mà giun đũa chó/mèo Toxocara spp Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu tiến hành năm 2012 Viện SR – KST – CT Tp.HCM theo nghiên cứu cắt ngang bệnh nhân đến khám Trung tâm Khám bệnh chuyên ngành thuộc Viện Sốt rét – KST – CT Thành phố Hồ Chí Minh có dấu hiệu lâm sàng nghi ngờ nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp có độ tuổi từ 18 tuổi trở lên Kết quả: 21% trường hợp có huyết dương tính với Toxocara sp có tăng số lượng bạch cầu máu, 30% trường hợp nhiễm Toxocara sp có tăng số lượng bạch cầu toan máu Những trường hợp nhiễm Toxocara sp có AST, ALT cao trường hợp không nhiễm thay đổi số huyết học sinh hóa khơng khác có ý nghĩa thống kê hiệu giá kháng thể Kết luận: Số lượng bạch cầu, bạch cầu toan, ALT AST sử dụng để củng cố thêm cho chẩn đốn nhiễm Toxocara spp ngồi hiệu giá kháng thể ELISA Từ khóa: Giun đũa chó/mèo, bạch cầu toan, ALT, AST ABSTRACT ASSESSMENT OF HEMATOLOGY AND BIOCHEMISTRY VALUES ON PATIENTS AFFECTED BY TOXOCARA SPP Do Thi Phuong Linh, Luong Truong Son, Dang Thi Nga, Pham Thi Thu Giang * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 17 - Supplement of No - 2013: 105 - 109 Backgrounds: The diagnosis of zoonoses such as toxocariasis is presently more and more being concerned especially when there is no “gold standard” currently available for the diagnosis We carry out this study in order to assess the relationship between paraclinical factors in patients with toxocariasis Subjects and methods: This cross-sectional study was conducted in 2012 at the National Institute of Malarialogy - Parasitology and Entomology HCMC on the patients aged 18 years or older with clinical signs or suspected Toxocara spp Results: Leukocytosis and eosinophilia were observed in 21% and 30% of cases of toxocariasis, respectively Higher values of aspartate transaminase (ALT) and alanine transaminase (AST) were seen in toxocariasis comparing to the non-infected cases Among different titers of antibodies to toxocara spp, changes in hematology and biochemistry did not differ significantly Conclusions: The number of white blood cells, eosinophils, ALT and AST may reinforce the diagnosis of toxocariasis besides ELISA antibody titers Key words: Toxocara spp, eosinophil, ALT, AST * Viện Sốt rét – KST – CT TP.HCM Tác giả liên lạc: KS Đỗ Thị Phượng Linh, ĐT: 0935222712, Chuyên Đề Ký Sinh Trùng Email: dophuonglinh2712@gmail.com 105 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 ĐẶT VẤN ĐỀ Với điều kiện khí hậu vùng nhiệt đới, có Việt Nam bệnh ký sinh trùng, đặc biệt ký sinh trùng ký sinh gây bệnh hệ tiêu hóa lưu hành phổ biến khu nhiệt đới cận nhiệt đới, đồng thời xem bệnh thường gặp nước phát triển phát triển Các bệnh từ động vật lây sang người (zoonosis) ngày trọng đường phát triển người thường vào ngõ cụt nên khó chẩn đốn kỹ thuật thường quy xét nghiệm phân tìm ký sinh trùng, mà phải nhờ đến kỹ thuật miễn dịch (Trần Vinh Hiển cs., 2008)(1) Các kỹ thuật ngày hoàn thiện nên phát bệnh nhiều Trong bệnh có bệnh ấu trùng giun đũa chó, mèo mà bệnh cảnh lâm sàng người nhiều khơng có triệu chứng rõ ràng khơng xét nghiệm tìm ký sinh trùng phân Theo điều tra khảo sát tình hình nhiễm ấu trùng giun đũa chó xã Thạnh Tân, thị xã Tây Ninh năm 2009 cho thấy tỷ lệ huyết dương tính với Toxocara canis 20,6%, điều tra xã Chư Pả H‘Bông, tỉnh Gia Lai cho thấy tỷ lệ nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo 50% (Nguyễn Thị Khả Ái cs., 2009; Phan Anh Tuấn cs., 2006) (2,3) Để đánh giá phần mối liên quan yếu tố cận lâm sàng với bệnh nhân nhiễm ký sinh trùng đường ruột mà giun đũa chó/mèo Toxocara sp, chúng tơi thực đề tài “Đánh giá số số sinh hóa, huyết học bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp” ĐỐI TƯỢNG -PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Địa điểm thời gian Trung Tâm Khám Bệnh Chuyên Ngành – Viện Sốt Rét - KST – CT – TPHCM Từ tháng 06/2012 – 10/2012 Đối tượng nghiên cứu Bệnh nhân có độ tuổi từ 18 tuổi trở lên đến khám bệnh Trung Tâm Khám Bệnh Chuyên 106 Ngành thuộc Viện Sốt Rét – KST – CT Thành phố Hồ Chí Minh xác định nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp phương pháp chẩn đoán huyết miễn dịch ELISA(8) Cỡ mẫu: 200 mẫu (gồm 100 bệnh nhân có huyết xác định dương tính với ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp 100 bệnh nhân có huyết âm tính với ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp) Phương pháp thu thập mẫu Huyết thanh: Lấy 1ml máu tĩnh mạch cho vào tube nắp đỏ, quay ly tâm tốc độ 3500 vòng/ phút 10 phút  Hút dịch thu huyết Huyết sau ly tâm cho vào tube eppendorf bảo quản 00C 48 Tiến hành phương pháp chẩn đoán huyết miễn dịch ELISA – 48 sau tách huyết Phương pháp phân tích Xét nghiệm cơng thức máu (bằng máy huyết học 18 thông số Celltac α, Nihon Koden + soi lam): Số lượng bạch cầu bình thường: 4,0 – 9,0 ì 10 /àl mỏu Xỏc nh t l bạch cầu toan (Eosinophil) cách lấy máu giọt mỏng, nhuộm giêm sa, soi lam tính theo cơng thức: % Eosinophil = (Số được/100 bạch cầu) × 100% Eosinophil đếm Sau đếm tỷ lệ bạch cầu toan giọt máu mỏng nhuộm Giemsa, sau quy số lượng tuyệt đối dựa vào số lượng bạch cầu Tỷ lệ bạch cầu toan bình thường: 1–4 %, Số lượng bạch cầu toan bình thường: 40 – 350/ µl máu Các mức độ tăng bạch cầu toan: nhẹ (350 – 1500/µl máu), trung bình (> 1500 – 5000/µl máu), cao (> 5000/µl máu) (Franklin cs., 1998) (7) Xét nghiệm sinh hóa máu (bằng máy sinh hóa tự động A15 Biosystem) - Giá trị AST bình thường: – 40 U/L Chuyên Đề Ký Sinh Trùng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 - Giá trị ALT bình thường: – 41 U/L Xét nghiệm Toxocara sp kỹ thuật ELISA gián tiếp Sử dụng kit 96 giếng chẩn đoán Toxocara spp Cty Việt Sinh Quy trình thực hiện: - Kháng nguyên gắn sẵn vào giếng - Rửa lần dung dịch rửa - Thêm kháng thể (trong huyết bệnh nhân) - Ủ 450C 30 phút, rửa lần dung dịch rửa - Bổ sung thêm kháng kháng thể có gắn enzyme - Ủ 450C 30 phút, rửa lần dung dịch rửa - Thêm chất tạo màu - Cho chất ngừng phản ứng - Đọc kết sau 5- 30 phút Kết luận: Đọc kết cách quan sát màu giếng bệnh nhân so với màu giếng chứng âm chứng dương - Âm tính: Màu giếng bệnh nhân màu chứng âm - Dương tính: Nếu màu giếng bệnh nhân màu chứng dương  Ghi hiệu giá kháng thể 1/3200, nhạt màu chứng dương, ghi hiệu giá kháng thể 1/1600, nhạt ghi hiệu giá kháng thể 1/800 Xử lý số liệu: - Sau thu thập số liệu, tất số liệu hợp lệ thống kê phân tích để đánh giá - Các phép thống kê mơ tả dùng để tính u cầu đề tài - Nhập số liệu Epi Data xử lý số liệu phần mềm STATA 10.0 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Mối liên quan số huyết học với tình trạng nhiễm Toxocara spp Số lượng bạch cầu bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Chuyên Đề Ký Sinh Trùng Nghiên cứu Y học Bảng Số lượng bạch cầu bệnh nhân nhiễm Toxocara spp (N= 100) Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Tần suất Có số lượng bạch cầu mức bình 79 thường Có số lượng bạch cầu tăng 21 Tỷ lệ (%) 79 21 Nhận xét: Bảng cho thấy, 100 bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp có 21 trường hợp bệnh nhân có số lượng bạch cầu tăng (mức tăng cao 16.800/µl), 79 trường hợp lại bạch cầu mức bình thường Số lượng bạch cầu toan bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Bảng Số lượng bạch cầu toan bệnh nhân nhiễm Toxocara spp (N=100) Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Tần suất Tỷ lệ (%) Có số lượng bạch cầu toan mức 70 70% bình thường Có số lượng bạch cầu toan tăng 30 30% Bảng Mức tăng bạch cầu toan bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp có số Tần lượng bạch cầu toan tăng suất Có số lượng bạch cầu toan tăng nhẹ 29 (350 – 1500/µl) Có số lượng bạch cầu toan tăng trung bình (>1500 - 5000/µl) Có số lượng bạch cầu toan tăng cao (>5000/µl) Tỷ lệ (%) 96,67 3,33 Nhận xét: Bảng cho thấy, 100 bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp có 68 trường hợp lại bạch cầu toan mức bình thường, Trong 30 trường hợp bệnh nhân có số lượng bạch cầu toan tăng 29 trường hợp tăng mức nhẹ Có trường hợp mức tăng cao 2030/ µl mức tăng trung bình Mối liên quan số lượng bạch cầu, bạch cầu toan với tình trạng nhiễm Toxocara spp bệnh nhân Bảng Mối liên quan số lượng bạch cầu, bạch cầu toan với tình trạng nhiễm Toxocara spp bệnh nhân Số lượng bạch Số lượng bch cu cu (ì103/àl) ỏi toan (ì103/àl) 107 Y Hc TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 Nghiên cứu Y học Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Bệnh nhân không nhiễm Toxocara spp P 7,67 ± 2,44 3,15± 3,94 7,04 ± 1,49 1,37± 2,08 0,0015 0.0000 Nhận xét: Bảng cho ta thấy số lượng bạch cầu bạch cầu toan bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo bệnh nhân khơng nhiễm có khác biệt đáng kể mặt thống kê học (P< 0,05) Số lượng bạch cầu bạch cầu toan tăng bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó mèo Mối liên quan bạch cầu toan hiệu giá kháng thể bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp Bảng Hiệu giá kháng thể bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp (N=100) Mức hiệu giá kháng thể 1/800 1/1600 1/3200 Tần suất 07 24 69 Tỷ lệ 07 % 24% 69% Nhận xét: Bảng cho thấy bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó, mèo hiệu giá 1/800, 1/1600, 1/3200 chiếm tỷ lệ 7%, 24% 69% Điều cho ta thấy đa số bệnh nhân bị nhiễm ấu trùng giun đũa chó, mèo mức hiệu giá kháng thể 1/3200 Bảng Mối liên quan số lượng bạch cầu, bạch cầu toan Eosinophil hiệu giá kháng thể bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo Toxocara spp Hiệu giá kháng thể 1/800 1/1600 1/3200 P Số lượng bch cu (ì10 /àl) 6,70 1,80 7,40 2,40 7,80 ±2,50 0.4512 Số lượng bạch cầu toan (×10 / µl) 0,18±0,11 0,36± 0,45 0,30± 0,25 0.3731 tình trạng nhiễm Toxocara spp Bảng Mối liên quan số sinh hóa (AST, ALT) với tình trạng nhiễm Toxocara spp bệnh nhân Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Bệnh nhân không nhiễm Toxocara spp P AST (U/L) ALT (U/L) 25.31±10,88 24.84± 15,91 20.95± 6,69 20.34± 9,61 0,0004 0,0082 Nhận xét: Bảng cho ta thấy số AST, ALT bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo bệnh nhân khơng nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo có khác biệt đáng kể mặt thống kê học (P0,05) Do phải dựa vào số huyết học, sinh hoá khác số lượng bạch cầu nói chung bạch cầu toan thường nhiễm ký sinh trùng có gia tăng bạch cầu toan (Roldan cs, 2008) (5) Mối liên quan số sinh hóa với Trong nghiên cứu 21% trường hợp có 108 Chuyên Đề Ký Sinh Trùng Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ Số * 2013 tăng số lượng bạch cầu máu 30% có tăng bạch cầu toan Ngồi trường hợp nhiễm Toxocara spp có men gan ALT AST cao trường hợp không nhiễm Do chu kỳ phát triển ấu trùng Toxocara có giai đoạn ấu trùng chưa trưởng thành di chuyển đến mô lâm sàng kinh điển “hội chứng ấu trùng di chuyển nội tạng” (VLM) tuỳ thuộc vào số lượng ấu trùng, hội chứng VLM người bệnh bị sốt, ho, khò khè, đau bụng, gan to… (Trần Thị Hồng cs., 1997) (6) Như số lượng bạch cầu, bạch cầu toan, ALT AST củng cố thêm cho chẩn đốn nhiễm Toxocara spp ngồi hiệu giá kháng thể ELISA Tuy số lượng bạch cầu bạch cầu toan có giá trị chẩn đốn giun đũa chó/mèo khơng nên tin tưởng vào xét nghiệm bạch cầu toan mà đề định bệnh Bởi lẽ số bạch cầu toan tăng cao khơng ngun nhân mà lúc đa yếu tố đa bệnh lý tác động Để chẩn đốn xác bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó mèo cần phải phối hợp tiêu chuẩn lâm sàng cận lâm sàng TÀI LIỆU THAM KHẢO KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Các trường hợp nhiễm Toxocara spp có 21% tăng số lượng bạch cầu có 30% tăng số lượng bạch cầu toan máu Những trường hợp nhiễm Toxocara spp có ALT AST cao bình thường Những thay đổi huyết học sinh hoá khơng khác có ý nghĩa thống kê hiệu giá kháng thể Toxocara spp Đề nghị Nghiên cứu Y học Trần Vinh Hiển, Trần Thị Kim Dung (2008), Ký sinh trùng liên quan thú người Nhà xuất Y học, 2008; tr 92-93 Nguyễn Thị Khả Ái, Nguyễn Thị Thanh Hà cs (2009), “Khảo sát tình hình nhiễm ấu trùng giun đũa chó yếu tố liên quan cộng đồng xã Thạnh Tân, thị xã Tây Ninh”, Kỷ yếu cơng trình nghiên cứu khoa học Viện SR - KST - CT TP Hồ Chí Minh 2011: tr 343-347 Phan Anh Tuấn, Trần Thị Kim Dung cs (2006), Tình hình nhiễm Toxocara sp cư dân hai xã Chư Pã H’ Bông tỉnh Gia Lai Tạp chí Y học quân - Học viện Quân Y 3(2): tr 89 – 93 Chira O., Badea R., Dumitrascu D., Serban A., Branda H., Hajjar N., Chiorean E And Cruciat C (2005), Eosinophilic Ascites In a Patient with Toxocara Canis Infection A Case Report Romanian Journal of Gastroenterology 14 (4): pp 397 – 400 Roldan W.H et al (2008), Frequently of Eosinophilia and Risk Factors and their Association with Toxocara Infection in Schoolchildren During A Health Survey in the North of Lima, Peru 50 (5): pp 273 – 278 Trần Thị Hồng, Trần Vinh Hiển (1997), Biểu lâm sàng bệnh ấu trùng giun đũa chó Toxocara canis người.Y học Tp Hồ Chí Minh (1): tr 121 – 124 Franklin H.E (1998), Eosinophilia.The New England Journal of Medicine 338:1592-1600 Cục Y tế dự phòng, Bộ Y tế (2012), Toxocara, www.vncdc.gov.vn Tiếp tục nghiên cứu với số lượng cỡ mẫu lớn Chuyên Đề Ký Sinh Trùng 109 ... 0.3731 tình trạng nhiễm Toxocara spp Bảng Mối liên quan số sinh hóa (AST, ALT) với tình trạng nhiễm Toxocara spp bệnh nhân Bệnh nhân nhiễm Toxocara spp Bệnh nhân không nhiễm Toxocara spp P AST (U/L)... thấy số AST, ALT bệnh nhân nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo bệnh nhân khơng nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo có khác biệt đáng kể mặt thống kê học (P