Đồ án phân tích thực phẩm đề tài Nguyên liệu Súp Lớ xanh được nghiên cứu với các nội dung: Tổng quan về nguyên liệu Súp Lớ xanh, nội dung và phương pháp. Để nắm vững nội dung kiến thức đề tài mời các bạn cùng tham khảo tài liệu.
MỤC LỤC 247 DANH MỤC VIẾT TẮT TCVN Tiêu Chuẩn Việt Nam AOAC Association of Official Analytical Chemists (Hiệp hội các nhà phân tích hóa học Mỹ) V/V Thể tích/ Thể tích mmH20 (Pa) .milimet cột nước hecta (1 ha = 0,01 km2 = 10.000m2 Đồ án phân tích thực phẩm Trang 2 LỜI CẢM ƠN Sau một thời gian tìm hiểu và tham khảo em cũng đã hồn thành bài đồ án học phần với đề tài “ ngun liệu súp lơ xanh” của mình, dưới sự hướng dẫn tận tình của giáo viên cơ Hồ Thị Mỹ Hương Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc và chân thành nhất của em với giáo viên hướng dẫn vì đã giúp đỡ em hồn thành bài đồ án, cũng như giúp cho em có thêm được nhiều kiến thức hơn về rau, củ, quả để có thể áp dụng trong q trình học cũng như trong cuộc sống hằng ngày Trong q trình làm bài khơng thể khơng có những thiếu sót đáng kể, e mong cơ và các giáo viên trong khoa cơng nghệ thực phẩm đóng góp và cho em thêm nhiều nhận xét để em có thể hồn thiện mình hơn cũng như hồn thiện tốt các bài báo cáo sau này Đồ án phân tích thực phẩm Trang 3 Em xin chân thành cảm ơn các thầy, cơ ạ!LỜI MỞ ĐẦU Ngày nay, kinh tế xã hội ngày càng phát triển, cuộc sống con người ngày một nâng cao thì vấn đề an tồn lương thực càng được coi trong. Trong lịch sử phát triển của lồi người đã khẳng định “lương thực, thực phẩm là vấn đề sống còn của mỗi quốc gia. Lương thực thực phẩm cung cấp một phần đáng kể Gluxit, Protit, Lipit và các loại vitamin….cho con người và nâng cao đời sống cho người trực tiếp sản xuất.” Trong các loại rau, súp lơ xanh là loại rau giàu chất dinh dưỡng, chứa nhiều acid amin tự do rất cần thiết cho cơ thể người như triptophan, felanin, metonin, hispidin, Acginin và các vitamin A, B, C, E trong đó nhiều nhất là vitamin C. Ngồi ra chúng còn chứa các ngun tố khống Ca, K, Na P, S Do súp lơ xanh dễ chế biến, dễ nấu nướng, dễ ăn lại chứa nhiều chất dinh dưỡng, có thể đóng gói nên hiện nay các nước phát triển có khuynh hướng trồng súp lơ xanh thay thế cải bắp Súp lơ là một loại cải ăn được, thuộc lồi Brassica oleracea, họ Cải, mọc quanh năm, gieo giống bằng hạt. Phần sử dụng làm thực phẩm của súp lơ là tồn bộ phần hoa chưa nở, phần này rất mềm, xốp nên khơng chịu được mưa nắng. Phần lá và thân thường chỉ được sử dụng làm thức ăn cho gia súc Hiệp hội chống ung thư Hoa Kỳ khuyến cáo nên ăn súp lơ xanh và các loại rau thuộc họ cải, vì chúng có chứa chất phytochemicals chống ung thư Các nghiên cứu dịch tễ học cho thấy, một chế độ ăn có nhiều súp lơ xanh sẽ giúp cơ thể chống lại một số bệnh ung thư như ung thư vú, ung thư ruột kết và ung thư phổi Ngồi ra, súp lơ xanh là loại thực phẩm giàu axít folic giúp ngăn ngừa khuyết tật thần kinh ở thai nhi như tật nứt đốt sống. Trong suốt thai kỳ, các bà mẹ thường xun phải bổ sung axít folic, vì vậy, để đảm bảo sức khỏe thai nhi hãy thường xun ăn súp lơ xanh Đồ án phân tích thực phẩm Trang 4 Vì những vấn đề trên, em sẽ cùng tìm hiểu và nghiên cứu xem bên trong ngun liệu súp lơ xanh gồm những chất gì mà có những tác dụng tốt như trên Chương I: TỔNG QUAN VỀ NGUN LIỆU SÚP LƠ XANH Nguồn gốc và sự phân bố của cây súp lơ xanh Súp lơ xanh tên tiếng Anh: Broccoli. Tên khoa học: Brassica oleracea var. italica Plenck. Thuộc họ thập tù : Cruciferaceae Súp lơ là loại cây nằm trong nhóm Italica, nó là lo i cây tồn tại ở vùng Caribê như một cây bản địa. Cây này được du nhập vào Bắc Mỹ từ những người nhập cư. Italia là nước đầu tiên sử dụng súp lơ xanh làm rau khoảng 2000 năm về trước. Nó trở thành loại rau thơng dụng ở Mỹ sau khi giống súp lơ xanh thương mại đầu tiên được thu hoạch ở Broocklyn, New York. Ngày nay, nó được trồng nhiều ở Anh, Châu Âu, Châu Á Ngày nay súp lơ đã được trồng rộng khắp các khu vực ơn đới và cũng dần thích hợp với khí hậu nhiệt đới nóng ẩm. Các nước trồng súp lơ phổ biến hiện nay là các nước ở Châu Âu, Địa Trung Hải, Nga, Ấn Độ, Nhật Bản, Mỹ, Trung Quốc, Đài Loan, Thái Lan, Hàn Quốc, Việt Nam Súp lơ xanh Đồ án phân tích thực phẩm Trang 5 Súp lơ xanh (Broccoli) còn được gọi là giống súp lơ kép (giống sớm) hoa có màu xanh từ chùm tới cuống. Cây cao, lá thưa. Súp lơ xanh có hàm lượng chất dinh dưỡng cao nhưng năng suất thấp và khó bảo quản. Gồm các giống địa phương và các giống nhập nội có nguồn gốc từ Thái Lan, Đài Loan. Các giống này chịu được nhiệt độ cao, ít phản ứng với độ dài chiếu sáng trong ngày, hoa có kích thước trung bình, mỏng, chất lượng tốt Ngày nay từ các giống trên con người đã lai tạo ra rất nhiều giống súp lơ khác nhau cho năng suất cao. Trong đó có giống súp lơ xanh lai BI 15 do cơng ty Syngenta lai tạo năm 2001 đáng được quan tâm. Giống này cho năng suất cao, thời gian sinh trưởng 90 đến 95 ngày. Khơng đẻ chồi ở nách lá, khả năng chống chịu bệnh tốt, khơng bị đổ ngã. Năng suất 1,5 2 kg/cây,tức là khoảng 37 48 tấn/ha. Có thể trồng quanh năm, nên trồng thâm canh cao, khơng cần tỉa các chồi bên Giá trị của súp lơ Giá trị dinh dưỡng Cung cấp chất xơ, muối khống như canxi, magie, vitamin C, tiền vitamin A, những chất này có tác dụng rất tốt đến sức khoẻ của con người. Đồ án phân tích thực phẩm Giá trị kinh tế Là nguyên liệu quan trọng cho ngành cơng nghiệp chế biến như dạng súp lơ sấy Súp lơ mang lại lợi ích kinh tế và triển vọng cho xuất khẩu ở nhiều nước trên thế giới Trang 6 Giá trị y học Súp lơ không những được dùng để cung cấp vitamin, chất khống mà có nhiều tác dụng về mặt y học, nó còn có khả phòng chống số bệnh ung thư, giúp bảo vệ da Thành phần dinh dưỡng của súp lơ xanh Thà nh Mu phầ ối Vita n kho min Calo cho hoá áng (mg học (mg (g 100g %) %) %) P G N r l o u ớc ti x d it 2,5 4,9 90,9 xe T nl r ul P Fe B1 B2 A+ C 26 51 1,4 0,11 0,1 0,05 70 o o 0,9 Ca 0,8 30 Đặc điểm của cây súp lơ xanh Cây súp lơ xanh sản phẩm sử dụng là chùm hoa còn non chưa phát dục, có màu xanh từ chùm tới cuống hoa, súp lơ xanh có hàm lượng chất dinh dưỡng cao hơn súp lơ trắng. Bộ phận sử dụng được làm thực phẩm là các chất hữu cơ dự trữ được tích luỹ từ lá Do vậy, hoa chỉ được hình thành khi thân cây có từ 15 đến 20 lá phát triển. Để tăng khả năng phát triển của bộ lá và hình thành hoa, cần nhiệt độ khí hậu dịu mát. Nhiệt độ thích hợp cho sinh trưởng, phát triển là từ 15ºC đến 18ºC Đồ án phân tích thực phẩm Trang 7 Nhiệt độ lớn hơn 25ºC hoặc nhỏ hơn 10ºC, cây sinh trưởng chậm, lá nhỏ, hoa nhỏ và mau già Súp lơ thuộc loại cây ưa ẩm, nhưng nếu độ ẩm đất, khơng khí q cao (hơn 90%), cây dễ bị bệnh, giá trị thương phẩm kém, độ ẩm thích hợp là 60% đến 80% Đất trồng súp lơ phải nhẹ, nhiều mùn, pH = 6. Lượng phân bón thường phải cao hơn các cây cùng họ thập tự. Hơn 70% lượng chất dinh dưỡng tập trung vào thời kì hình thành hoa, nên việc bón thúc rất có hiệu quả Thành phần hố học Thành phần hố học của súp lơ cũng như rau quả nói chung bao gồm các chất vơ cơ hữu cơ hình thành nên rau quả. Có 2 thành phần cơ bản: nước và chất khơ a Nước: Trong súp lơ xanh nước chiếm khoảng 90,9% trọng lượng Nước chứa các chất dinh dưỡng và vận chuyển các chất từ cơ quan này sang cơ quan khác trong các tổ chức tế bào rau quả. Khi lượng nước giảm súp lơ sẽ bị héo và nhanh bị vàng hoa, rút ngắn thời hạn bảo quản b Gluxit Gluxit trong súp lơ bao gồm: + Các loại đường đơn, đường kép: saccarit, fructoza, glucoza, maltoza, galactoza… + Các polysaccarit: tinh bét, xenluloza, hemixenluloza… Các loại đường: Lượng đường tổng súp lơ khoảng 5,2% Chủ yếu đường fructoza, glucoza, saccaroza. Đồ án phân tích thực phẩm Trang 8 Tinh bột: Lượng tinh bột trong súp lơ khơng nhiều khoảng 0,1%. Dưới tác dụng của mơi trường axít hoặc enzym tinh bột bị phân giải thành dextrin, maltoza và cuối cùng là glucoza Xenluloza: Trong súp lơ có khoảng 0,9% xenluloza. Chúng được phân bố trong khắp các cơ quan của súp lơ nhưng nhiều nhất là ở líp vỏ của cuống hoa. Lượng xenluloza trong súp lơ càng nhiều thì hoa càng già, chất lượng càng thấp Chất xơ: Chất xơ trong súp lơ bao gồm xenluloza, hemixenluloza, pectin… chúng chiếm khoảng 2,5%. Khả năng liên kết xơ của hoa súp lơ xanh khoảng 5,9g nước/g xơ c Các axít hữu cơ Hàm lượng axit hữu cơ trong súp lơ và trong hầu hết các rau thường nhỏ hơn 1%, chúng còn có khả năng hạn chế tốc độ hoạt động của các enzym gây biến màu các sản phẩm cắt d Các hợp chất Nitơ: Hợp chất nitơ trong rau quả chủ yếu ở dạng protit đơn giản gọi là protein và dạng amin tự do. Trong súp lơ xanh protit chiếm khoảng 2,5 % khối lượng Protein trong rau quả dễ bị thuỷ phân ở nhiệt độ cao tạo ra các axit amin tù do, các chất này cũng dễ bị thuỷ phân thành nitơ tự do. Vì vậy q trình gia nhiệt lâu dài hồn tồn bất lợi cho sự bảo tồn protein e Các chất màu: Đồ án phân tích thực phẩm Trang 9 Màu của hoa súp lơ được tạo thành từ các sắc tố khác nhau thuộc nhóm clorofyl, carotinoid, flavonoid… Clorofyl: màu xanh tạo bởi sắc tố clorofyl bao gồm chủ yếu là: clorofyl a và clorofyl b Clorofyl a: (C32H30O4Mg)(COOCH3)(COOC20H39) Clorofyl b: (C32H28O2N4Mg)(COOCH3)(COOC20H39) Carotinoid bao gồm carotin, licopin, xantofyl. Carotin (tiền vitamin A) có màu vàng, bao gồm α carotin và βcarotin [4] f Các vitamin Trong súp lơ xanh có rất nhiều loại vitamin nhưng nhiều nhất vẫn là vitamin C còn gọi là axít ascorbic, tồn tại ở 3 dạng: dạng tự do là axít ascorbic; dạng oxy hóa dehydro ascorbic dạng liên kết với protit ascorbigen Vitamin C bền vững trong môi trường axit và dễ bị thuỷ phân trong môi trường kiềm, O2 , ánh sáng, nhiệt độ cao. Vitamin C là một trong những chất quý có trong rau quả do đó nó là chỉ tiêu đánh giá hiệu quả của các biện pháp bảo quản, chế biến. Hàm lượng vitamin của súp lơ xanh A+ βcaroten E++ B1 B2 PP B6 C 150μg 920μg 1,3mg 0,07mg 0,12mg 0.6mg 0,16mg 83mg g Các chất khống Đồ án phân tích thực phẩm Trang 10 RAU, QUẢ VÀ SẢN PHẨM RAU, QUẢ XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CADIMI PHẦN 2: PHƯƠNG PHÁP ĐO PHỔ HẤP THỤ NGUN TỬ NGỌN LỬA Fruits, vegetables and derived products – Determination of cadmium content Part 2: Method using flame atomic absorption spectrometry 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này qui định phương pháp xác định hàm lượng cadimi trong rau, quả và sản phẩm rau, quả bằng đo phổ hấp thụ ngun tử ngọn lửa CHÚ THÍCH: Phương pháp này dùng để xác định cadimi trong rau, quả và sản phẩm rau, quả dựa trên phương pháp phân tích chính thức của AOAC [1] 2. Ngun tắc Phương pháp này dựa trên việc phá hủy các chất hữu cơ được bằng HNO 3, H2SO4 và H2O2, chiết cadimi bằng dithizonCHCl 3 pH 9, và xác định cadimi bằng quang phổ hấp thụ nguyên tử ngọn lửa 3. Thuốc thử Các thuốc thử được sử dụng phải là loại tinh khiết phân tích và nước được sử dụng phải là nước cất hai lần bằng thiết bị cất thủy tinh bo silicat hoặc tối thiểu là nước có độ tinh khiết tương đương, trừ khi có qui định khác 3.1. Axit nitric, đậm đặc (p20 = 1,38 g/ml) 3.2. Axit sulfuric, đậm đặc (p20 = 1,84 g/ml) 3.3. Axit clohydric, lỗng, 0,2 mol/l Cho 16,5 ml axit clohydric đậm đặc (p20 = 1,19 g/ml) vào bình định mức một vạch dung tích 1 000 ml và pha lỗng bằng nước đến vạch. Trộn đều 3.4. Hydro peroxit, đậm đặc (50 %) 3.5. Axit xitric ngậm một phân tử nước 3.6. Natri hydroxit, dung dịch 0,05 mol/l 3.7. Chỉ thị xanh thymol Nghiền 0,1 g chất chỉ thị xanh thymol trong cối mã não với 4,3 ml dung dịch natri hydroxit (3.6). Pha lỗng bằng nước đến 200 ml trong bình cầu 3.8. Dung dịch amoniac, dung dịch 28 % đến 30 % 3.9. Cloroform Đồ án phân tích thực phẩm Trang 241 3.10. Dithizon, dung dịch 1,0 mg/ml Cho 0,2 g dithizon vào bình định mức 200 ml và thêm cloroform đến vạch 3.11. Dithizon, dung dịch 0,2 mg/ml Pha lỗng một thể tích dung dịch dithizon (3.10) với 4 thể tích cloroform (3.9). Chuẩn bị dung dịch mới trong ngày sử dụng 3.12. Dung dịch cadimi chuẩn, tương đương với nồng độ cadimi 1,0 mg/ml 4. Thiết bị, dụng cụ Dụng cụ thủy tinh sử dụng phải được rửa trước bằng axit nitric 8 mol/l, sau đó tráng kỹ bằng nước Đậy các cốc có mỏ bằng mặt kính đồng hồ trong suốt q trình thao tác Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm thơng thường và cụ thể sau: 4.1 Máy nghiền cơ, có lớp lót lưỡi dao bên làm từ polytetraflorơetylen (PTFE) 4.2. Bình đáy tròn, dung tích 1 500 ml 4.3. Cốc có mỏ, dung tích 400 ml 4.4. Bình định mức một vạch, dung tích 50 ml, 100 ml và 1 000 ml 4.5. Pipet, dung tích thích hợp 4.6. Dụng cụ phân tách, dung tích 125 ml và 250 ml 4.7 Máy đo quang phổ hấp thụ nguyên tử, có đầu đốt khơng khí/axetylen (10 cm), thích hợp để xác định ở bước sóng 228,8 nm 4.8. Đầu đốt hoặc măng xơng đốt 4.9. Bếp điện 4.10. Cân phân tích 5. Lấy mẫu Điều quan trọng là mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải đúng là mẫu đại diện và khơng bị hư hỏng hoặc biến đổi trong suốt q trình vận chuyển và bảo quản Việc lấy mẫu khơng quy định trong tiêu chuẩn này. Nếu khơng có tiêu chuẩn quy định riêng cho sản phẩm thì các bên có liên quan cần thỏa thuận về vấn đề Đồ án phân tích thực phẩm Trang 242 6. Cách tiến hành 6.1. Chuẩn bị mẫu thử Trộn kỹ mẫu phòng thử nghiệm. Nếu cần, trước hết loại vỏ hạt, vỏ cứng của hạt và cho mẫu phòng thử nghiệm qua máy nghiền cơ (4.1) Cho sản phẩm lạnh đơng hoặc lạnh đơng sâu tan băng trong bình kín và chuyển tồn bộ nước tan ra vào máy trộn 6.2. Phần mẫu thử Cân 50 g mẫu thử (6.1), chính xác đến 0,01 g, cho vào bình cầu đáy tròn 1 500 ml (4.2) 6.3. Phân hủy Nếu phần mẫu thử có chứa etanol, thì trước tiên phải loại bỏ hết etanol bằng cách làm bay hơi Thêm vài mảnh hoặc hạt chống trào và cẩn thận thêm 25 ml axit nitric (3.1). Đậy nắp và làm ấm nhẹ sử dụng đầu đốt hoặc măng xông đốt (4.8) để phản ứng bắt đầu Khi phản ứng đã giảm, thêm 25 ml axit nitric (3.1), làm ấm trở lại và tiếp tục tiến hành như vậy cho đến khi bổ sung hết 100 ml axit nitric (3.1). Hoặc là, cẩn thận chuyển ln 100 ml axit nitric (3.1) vào phần mẫu thử một lần và để n ở nhiệt độ phòng qua đêm Đun nóng cho đến khi phần lớn khói NO thốt ra hết; kiểm sốt tránh tạo bọt q mức bằng cách làm lạnh hoặc làm giảm nóng bằng nước từ bình rửa Thêm 20 ml axit sulfuric đậm đặc (3.2) vào dung dịch. Pha lỗng đến xấp xỉ 300 ml bằng nước và làm bay hơi sử dụng đầu đốt hoặc măng xơng đốt (4.8) cho đến khi bắt đầu than hóa. Khi sự than hóa xảy ra mãnh liệt, cẩn thận thêm hydro peroxit (3.4), 1ml cho một lần thêm. Để phản ứng giảm trước khi thêm phần chất oxi hóa tiếp theo, khơng thêm q 1 ml cho một lần. Tiếp tục thêm hydro peroxit cho đến khi thu được dung dịch khơng màu Đun mạnh cho đến khi tạo khói SO3, thêm nhiều hydro peroxit (3.4) hơn nếu cần, để loại bỏ than. Đun mạnh để đuổi hết hydro peroxit còn sót lại. Làm lạnh dịch phân hủy khơng màu đến nhiệt độ phòng 6.4. Phép thử trắng Tiến hành phép thử trắng, sử dụng cùng q trình phân hủy như trong 6.3, nhưng thay phần mẫu thử bằng một lượng nước thích hợp tùy thuộc vào lượng mẫu thử được lấy để phân tích 6.5. Chiết Đồ án phân tích thực phẩm Trang 243 CẢNH BÁO – Phương pháp được mơ tả trong phần này u cầu sử dụng cloroform, đây là một chất độc và giải phóng ra khí ozon. Tránh hít phải và tiếp xúc với dung mơi này. Tiến hành trong tủ hút khi làm việc với dung mơi này và các dung dịch của nó. Cần loại bỏ cloroform thải ra và các dung dịch bằng phương thức thích hợp Thêm 2 g axit xitric (3.5) vào dung dịch phân hủy mẫu hoặc dung dịch thử trắng đã được làm lạnh và pha loãng cẩn thận bằng nước đến khoảng 25 ml. Thêm 1 ml chất chỉ thị xanh thymol (3.7) trong khi vẫn làm lạnh trong bể đá và điều chỉnh pH đến 8,8 bằng cách từ từ bổ sung dung dịch amoni (3.8), cho đến khi dung dịch chuyển từ màu xanh vàng sang màu xanh lục. Chuyển lượng này vào dụng cụ phân tách (4.6) và pha lỗng bằng nước đến khoảng 150 ml Làm lạnh dung dịch và chiết bằng dung dịch dithizon đậm đặc (3.10) hai lần mỗi lần 5 ml, lắc 1 min đến 2 min cho mỗi lần thêm. Tiếp tục chiết bằng dung dịch dithizon lỗng (3.11) mỗi lần 5 ml cho đến khi dịch chiết dithizon khơng đổi màu. Trộn các dịch chiết dithizon trong dụng cụ phân tích 125 ml (4.6); rửa bằng 50 ml nước, và chuyển dung mơi vào dụng cụ phân tácch 125 ml khác Chiết nước rửa bằng 5 ml cloroform (3.9) và chuyển vào dịch chiết dithizon Thêm 50 ml axit clohydric lỗng (3.3) vào dịch chiết dithizon đã trộn lẫn, lắc kỹ trong 1 min và để phân lớp; loại bỏ dithizon. Rửa dịch lỏng bằng 5 ml cloroform (3.9) và loại bỏ cloroform Chuyển hết lượng dịch lỏng vào một cốc có mỏ 400 ml (4.3), thêm vài mảnh chống trào và làm bay hơi cẩn thận trên bếp điện (4.9) cho đến khi khơ hẳn Tráng rửa cẩn thận các mặt của cốc có mỏ bằng 10 ml đến 20 ml nước và để bay hơi tiếp cho đến khơ. Hòa tan phần cặn khơ trong 5,0 ml dung dịch axit clohydric (3.3) 6.6. Xác định 6.6.1. Xây dựng đường chuẩn Pha lỗng dung dịch cadimi chuẩn (3.12) bằng axit clohydric (3.3) để thu được bốn dung dịch có nồng độ cadimi là 0,1 , 0,5 , 1,0 và 2,0 Phun lần lượt từng dung dịch này vào ngọn lửa của máy quang phổ (4.7) sử dụng 4 lần đến 10 lần thang mở rộng để thu được giá trị hấp thụ tối đa cho dung dịch có nồng độ cadimi 2,0 . Sử dụng axit clohydric (3.3) làm mẫu trắng Cẩn thận giữ tốc độ phun khơng đổi trong suốt q trình phun từng dịch chuẩn Dập tắt đầu đốt bằng nước sau mỗi lần đo Đồ án phân tích thực phẩm Trang 244 Ghi lại các giá trị tương ứng của độ hấp thụ và vẽ đồ thị đường chuẩn (độ hấp thụ theo nồng độ cadimi tính theo microgam trên mililít) 6.6.2. Đo quang phổ Đặt dụng cụ đo vào điều kiện tối ưu đã đặt trước, sử dụng ngọn lửa oxi hóa khơng khíaxetylen và ở bước sóng cộng hưởng 228,8 nm Phun vào ngọn lửa quang phổ kế (4.7) dung dịch thử (6.5) và dung dịch trắng (6.4) với cùng tốc độ phun cách tiến hành để xây dựng đường chuẩn (6.6.1). Ghi lại độ hấp thụ tương ứng Nếu độ hấp thụ của dung dịch thử lớn hơn độ hấp thụ lớn nhất của dung dịch chuẩn sử dụng để xây dựng đường chuẩn (6.6.1), thì pha lỗng dung dịch thử bằng axit clohydric (3.3) và đo độ hấp thụ 7. Tính tốn Hàm lượng cadimi trong mẫu, biểu thị bằng miligam trên kilogam, tính theo cơng thức sau đây: x F (1) trong đó: c là nồng độ cadimi của dung dịch thử đọc được từ đường chuẩn, tính bằng microgam trên mililít; ctrắng là nồng độ cadimi của dung dịch mẫu trắng đọc được từ đường chuẩn, tính bằng microgam trên mililít; m là khối lượng của phần mẫu thử, tính bằng gam; F là hệ số pha lỗng, nếu cần 8. Độ chụm Độ chụm của phương pháp đã được kiểm chứng bằng các nghiên cứu kết hợp trong việc xác định cadimi trong rau diếp và khoai tây; xem tài liệu tham khảo [2] Các thơng số thống kê đã được tính tốn theo TCVN 6910 (ISO 5725); xem tài liệu tham khảo [3] Đồ án phân tích thực phẩm Trang 245 Bảng 1 – Kết quả độ lặp lại Loại mẫu Rau diếp Khoai tây a Hàm cadimi lượng s rb mg/kg mg/kg mg/kg 0,1 0,04 0,01 0,5 0,17 0,06 1,5 0,26 0,09 0,05 0,009 0,003 0,2 0,05 0,02 1,0 0,09 0,03 r là giới hạn lặp lại b sr là độ lệch chuẩn của độ lặp lại Bảng 2 – Kết quả độ tái lập Loại mẫu Rau diếp Khoai tây a Hàm cadimi lượng Ra mg/kg mg/kg mg/kg 0,1 0,05 0,02 0,5 0,17 0,06 1,5 0,29 0,10 0,05 0,025 0,09 0,2 0,07 0,02 1,0 0,19 0,07 R là giới hạn tái lập b sRb sR là độ lệch chuẩn của độ tái lập 9. Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) mọi thơng tin cần thiết để nhận biết đầy đủ về mẫu thử; b) phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết; Đồ án phân tích thực phẩm Trang 246 c) phương pháp thử nghiệm đã dùng cùng với viện dẫn tiêu chuẩn này; d) mọi chi tiết thao tác khơng được quy định trong tiêu chuẩn này hoặc những điều được coi là tùy ý cũng như các sự cố bất kỳ mà có thể ảnh hưởng đến kết quả; e) kết quả thu được, nếu đáp ứng được u cầu về độ lặp lại thì nêu kết quả cuối cùng thu được Thư mục tài liệu tham khảo [1] AOAC Offical Methods of Analysis (1995). AOAC 973.64. Cadmium in Food [2] Gajan R.J., Gould J.H., Watts J.O., Fiorino J.A Collaborative study of a method for the atomic absorption spectrophotometric and potarographic determination of cadmium in food. J Assoc Off. Anal. Chem., 56, No. 4, 1973. pp. 876881 [3] ISO 5725:1986. Precision of test methods – Detemination of repeatability and reproducibility for a standard test method by interlaboratory tests [nay đã hủy] [4] TCVN 69101:2001 (ISO 57251:1994), Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp đo và kết quả đo. Phần 1: Nguyên tắc và định nghĩa chung [5] TCVN 69102:2001 (ISO 57252:1994), Độ chính xác (độ đúng và độ chụm) của phương pháp đo và kết quả đo. Phần 2: Phương pháp cơ bản xác định độ lặp lại và độ tái lập của phương pháp đo tiêu chuẩn Phụ lục 16: TCVN 8319 : 2010 RAU QUẢ XÁC ĐỊNH ĐA DƯ LƯỢNG THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT – PHƯƠNG PHÁP SẮC KÍ KHÍ Vegetables and fruits – Determination of pesticide multiresidues – Gas chromatographic method 1. Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn này quy định phương pháp xác định đồng thời dư lượng thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) trong rau quả, bao gồm acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion, trichlorfon, endosulfan, endosulfan, iprodion, cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, cyhalothrin, permethrin, difenoconazole, propiconazole, chlorothalonil, fipronil và indoxacarb bằng sắc kí khí 2. Tài liệu viện dẫn Đồ án phân tích thực phẩm Trang 247 Các tài liệu viện dẫn sau rất cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn này. Đối với các tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố thì áp dụng phiên bản được nêu. Đối với các tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố thì áp dụng phiên bản mới nhất, bao gồm cả các sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 4851 (ISO 3696), Nước dùng để phân tích trong phòng thí nghiệm – u cầu kỹ thuật và phương pháp thử 3. Ngun tắc Dư lượng các thuốc BVTV trong mẫu thử được chiết bằng hỗn hợp dung mơi axeton và được xác định bằng thiết bị sắc kí khí với detector quang hóa ngọn lửa (FPD) và detector cộng kết điện tử (ECD) 4. Thuốc thử Chỉ sử dụng các thuốc thử loại tinh khiết phân tích, nước loại 3 của TCVN 4851 (ISO 3696), trừ khi có quy định khác 4.1. Axeton, tinh khiết phân tích 4.2. Diclometan, tinh khiết phân tích 4.3. Ete dầu mỏ, nhiệt độ sơi từ 40 oC đến 60 oC 4.4. Toluen, tinh khiết phân tích 4.5. Hỗn hợp dung mơi, chứa hexan và toluen với tỉ lệ thể tích 9 : 1 4.6. Natri sulfat khan, hoạt hóa ở 130 oC trong 8 h, để nguội trong bình hút ẩm, bảo quản trong bình kín 4.7. Các chất chuẩn acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion, trichlorfon, endosulfan, endosulfan, iprodion, cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, cyhalothrin, permethrin, difenoconazole, propiconazole, chlorothalonil, fipronil và indoxacarb, đã biết độ tinh khiết 4.8. Dung dịch chuẩn gốc, nồng độ 1 000 g/ml Dùng cân phân tích (5.7) cân 0,01 g từng chất chuẩn (4.7), chính xác đến 0,01 mg, cho vào các bình định mức dung tích 10 ml (5.1), thêm toluen đến vạch và trộn 4.9 Dung dịch 4.9.1. Dung dịch chuẩn trung gian 1 chuẩn trung gian Dùng micropipet (5.3) lấy 500 l dung dịch chuẩn gốc acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion, Đồ án phân tích thực phẩm Trang 248 dùng pipet (5.2) lấy 2 ml dung dịch chuẩn gốc trichlorfon cho vào bình định mức dung tích 50 ml (5.1), thêm hỗn hợp dung mơi (4.5) đến vạch và trộn Trong dung dịch chuẩn trung gian 1, hoạt chất acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion có nồng độ 10 g/ml, hoạt chất trichlorfon có nồng độ 40 g/ml 4.9.2. Dung dịch chuẩn trung gian 2 Dùng micropipet (5.3) lấy 500 l các dung dịch chuẩn gốc difenoconazole và permethrin; 400 l các dung dịch chuẩn gốc cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, indoxacarb iprodion; 200 l dung dịch chuẩn gốc chlorothalonil, cyhalothrin, endosulfan, endosulfan, fipronil, propiconazole cho vào bình định mức dung tích 50 ml (5.1), thêm hỗn hợp dung mơi (4.5) đến vạch và trộn Trong dung dịch chuẩn trung gian 2, hoạt chất difenoconazole và permethrin có nồng độ 10 g/ml, hoạt chất cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, indoxacarb và iprodion có nồng độ 8 g/ml, các hoạt chất chlorothalonil, cyhalothrin, endosulfan, endosulfan, fipronil và propiconazole có nồng độ 4 g/ml 4.10. Dung dịch chuẩn làm việc Pha lỗng liên tục dung dịch chuẩn trung gian 1(4.9.1) và dung dịch chuẩn trung gian 2 (4.9.2) để thu được 6 dung dịch chuẩn làm việc với các mức nồng độ như sau: Dung dịch chuẩn làm việc 1: các hoạt chất acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion có nồng độ 1 g/ml, hoạt chất trichlorfon có nồng độ 4 g/ml; Dung dịch chuẩn làm việc 2: các hoạt chất acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion có nồng độ 0,5 g/ml, hoạt chất trichlorfon có nồng độ 2 g/ml; Dung dịch chuẩn làm việc 3: các hoạt chất acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion có nồng độ 0,02 g/ml, hoạt chất trichlorfon có nồng độ 0,08 g/ml; Dung dịch chuẩn làm việc 4: các hoạt chất difenoconazole và permethrin có nồng độ 2 µg/ml, các hoạt chất cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, indoxacarb và iprodion có nồng độ 1,6 µg/ml, các hoạt chất chlorothalonil, cyhalothrin, endosulfan, endosulfan, fipronil và propiconazole có nồng độ 0,8 µg/ml; Dung dịch chuẩn làm việc 5: các hoạt chất difenoconazole và permethrin có nồng độ 0,4 µg/ml, hoạt chất cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, Đồ án phân tích thực phẩm Trang 249 indoxacarb và iprodion có nồng độ 0,32 µg/ml, các hoạt chất chlorothalonil, cyhalothrin, endosulfan, endosulfan, fipronil và propiconazole có nồng độ 0,16 µg/ml; Dung dịch chuẩn làm việc 6: các hoạt chất difenoconazole và permethrin có nồng độ 0,025 µg/ml, hoạt chất cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, indoxacarb và iprodion có nồng độ 0,02 µg/ml, các hoạt chất chlorothalonil, cyhalothrin, endosulfan, endosulfan, fipronil và propiconazole có nồng độ 0,01 µg/ml; Các dung dịch chuẩn làm việc được bảo quản ở 4 oC và có thời hạn sử dụng là 6 tháng 4.11. Khí ni tơ, có độ tinh khiết khơng nhỏ hơn 99,999 % 4.12. Khí hydro, có độ tinh khiết khơng nhỏ hơn 99,999 % 4.13. Khơng khí nén dùng cho thiết bị sắc kí khí 5. Thiết bị, dụng cụ Sử dụng các thiết bị, dụng cụ của phòng thử nghiệm như sau: 5.1. Bình định mức, dung tích 10 ml, 50 ml và 100 ml 5.2. Pipet, dung tích 2 ml, 5 ml và 10 ml, chia vạch đến 0,1 ml. 5.3. Micropipet, dung tích từ 50 µl đến 200 µl và từ 200 µl đến 1 000 µl 5.4. Cốc ly tâm, dung tích 250 ml 5.5. Ống đong, dung tích 50 ml 5.6. Ống nghiệm, dung tích 15 ml 5.7. Xyranh, dung tích 10 l, được chia vạch đến 1 l 5.8. Cân phân tích, có thể cân chính xác đến 0,01 mg 5.9. Cân kỹ thuật, có thể cân chính xác đến 0,01 g 5.10. Thiết bị đồng hóa UltraTurrax, tốc độ khơng nhỏ hơn 13 500 r/min 5.11. Thiết bị thổi khí nitơ 5.12. Máy nghiền mẫu 5.13. Máy ly tâm, tốc độ khơng nhỏ hơn 2 000 r/min, có ống ly tâm dung tích 250 ml 5.14. Thiết bị sắc ký khí 1, được trang bị như sau: Buồng bơm mẫu chia dòng và khơng chia dòng; Đồ án phân tích thực phẩm Trang 250 Detector quang kế ngọn lửa, kính lọc phospho (FPD/P); Cột mao quản DB5, có chiều dài 30 m, đường kính 0,32 mm, chiều dày pha tĩnh 0,25 m, hoặc loại tương đương; Máy vi tính 5.15. Thiết bị sắc ký khí 2, được trang bị như sau: Buồng bơm mẫu chia dòng và khơng chia dòng; Detector cộng kết điện tử (ECD); Cột mao quản DB5, có chiều dài 30 m, đường kính 0,32 mm, chiều dày pha tĩnh 0,25 m, hoặc loại tương đương; Máy vi tính 6. Lấy mẫu Việc lấy mẫu khơng được quy định trong tiêu chuẩn này. Nên lấy mẫu theo TCVN 5139:2008 (CAC/GL 331999) Phương pháp khuyến cáo lấy mẫu để xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật phù hợp với các giới hạn dư lượng tối đa (MRL) 7. Cách tiến hành 7.1. u cầu chung Tồn bộ quy trình phân tích cần được thực hiện trong ngày. Nếu khơng phân tích được trong ngày thì phải bảo quản dịch mẫu ở 4 oC 7.2. Chuẩn bị mẫu Mẫu thử được nghiền trong máy nghiền mẫu (5.12) đến khi đồng nhất 7.3. Chuẩn bị phần mẫu thử Dùng cân (5.9) cân khoảng 20 g mẫu thử (m) đã được đồng nhất (xem 7.2), chính xác đến 0,01g, vào cốc ly tâm dung tích 250 ml (5.4). Thêm vào cốc 40 ml axeton, đồng hóa trong 30 s bằng thiết bị UltraTurrax (5.10) với tốc độ 13 500 r/min, thêm lần lượt 40 ml ete dầu mỏ, 40 ml diclometan, 5 g natri sulfat khan, đồng hóa trong 30 s bằng thiết bị UltraTurrax (5.10) với tốc độ 13 500 r/min, sau đó ly tâm bằng thiết bị ly tâm (5.13) với tốc độ 2 000 r/min trong 10 min, thu tồn bộ dịch chiết và ghi lại thể tích (V1). Dùng pipet dung tích 10 ml (5.2) lấy chính xác 8 ml (V2) dịch lỏng thu được cho vào ống nghiệm (5.6) và thổi khơ hồn tồn bằng thiết bị thổi khí nitơ (5.11). Hòa tan phần cặn với 2 ml ( VE) hỗn hợp dung mơi (4.5) để thu được phần mẫu thử 7.4. Chuẩn bị phần mẫu trắng Đồ án phân tích thực phẩm Trang 251 Mẫu trắng mẫu biết khơng có dư lượng acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion, trichlorfon, endosulfan, endosulfan, iprodion, cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, cyhalothrin, permethrin, difenoconazole, propiconazole, chlorothalonil, fipronil và indoxacarb, được chuẩn bị theo quy trình trong 7.3 7.5. Chuẩn bị phần mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi Dùng cân (5.9) cân khoảng 20 g mẫu trắng đã được đồng nhất theo 7.2, chính xác đến 0,01 g, vào cốc ly tâm dung tích 250 ml (5.4). Dùng micropipet (5.3) thêm 200 l dung dịch chuẩn trung gian 1 và 200 l dung dịch chuẩn trung gian 2, để n trong nhiệt độ phòng tối thiểu 15 min. Tiếp tục thực hiện theo 7.3 7.6. Điều kiện phân tích 7.6.1. Thiết bị sắc ký khí 1 Nhiệt độ buồng bơm mẫu: 240 oC; Thể tích bơm mẫu: 2 l, khơng chia dòng; Nhiệt độ cột tách: Nhiệt độ ban đầu 80 oC giữ 1 min, tăng 40 oC/min đến nhiệt độ 160 o C, tăng 3 oC/min đến 250 oC, tăng 10 o C/min đến nhiệt độ cuối 280 oC và giữ trong 10 min; Tốc độ khí mang (N2): 2 ml/min; Nhiệt độ detector FPD: 220 oC; Tốc độ khí hydro (H2): 75 ml/min; Tốc dộ dòng khơng khí: 100 ml/min; Tốc độ nitơ bổ trợ: 60 ml/min 7.6.1. Thiết bị sắc ký khí 2 Nhiệt độ buồng bơm mẫu: 240 oC; Thể tích bơm mẫu: 1 l, khơng chia dòng; Nhiệt độ cột tách: Nhiệt độ ban đầu 80 oC giữ 1 min, tăng 40 oC/min đến nhiệt độ 160 o C, tăng 3 oC/min đến 250 oC, tăng 10 o C/min đến nhiệt độ cuối 280 oC và giữ trong 10 min; Đồ án phân tích thực phẩm Trang 252 Tốc độ khí mang (N2): 2 ml/min; Nhiệt độ detector ECD: 300 oC; Tốc độ nitơ bổ trợ: 60 ml/min 7.7. Dựng đường chuẩn Dựng đường chuẩn của các thuốc BVTV (tương quan giữa diện tích/chiều cao píc và nồng độ chất chuẩn) tại 3 điểm có nồng độ tương ứng trong dung dịch chuẩn làm việc 1, dung dịch chuẩn làm việc 2 và dung dịch chuẩn làm việc 3 trên thiết bị sắc ký 1 (5.14) Dựng đường chuẩn của các thuốc BVTV (tương quan giữa diện tích/chiều cao píc và nồng độ chất chuẩn) tại 3 điểm có nồng độ tương ứng trong dung dịch chuẩn làm việc 4, dung dịch chuẩn làm việc 5 và dung dịch chuẩn làm việc 6 trên thiết bị sắc ký 2 (5.15) 7.8. Xác định Bơm lần lượt dung dịch mẫu trắng (7.4), dung dịch mẫu thử (7.3), dung dịch mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi (7.5) vào thiết bị sắc kí khí (5.14) và thiết bị sắc kí khí 2 (5.15). Xác định nồng độ của mẫu thử và mẫu kiểm tra hiệu suất thu hồi bằng đường chuẩn. Nếu nồng độ của mẫu thử nằm ngồi đường chuẩn thì điều chỉnh bằng cách pha lỗng dung dịch phần mẫu thử (khơng pha lỗng lượng mẫu bơm) 8. Tính kết quả Dư lượng thuốc BVTV (4.7), X, biểu thị miligam kilogam (mg/kg), được tính theo cơng thức: X = Xo x Trong đó: Xo là nồng độ từng thuốc BVTV (4.7) trong mẫu thử được xác định theo 7.8, tính bằng microgam trên mililit ( g/ml); VE là thể tích phần mẫu thử thu được (xem 7.3), tính bằng mililit (ml); V1 là thể tích dịch chiết thu được (xem 7.3), tính bằng mililít (ml); V2 là thể tích dịch chiết được lấy ra để thổi khơ (xem 7.3), tính bằng mililít (ml); m là khối lượng mẫu thử, tính bằng gam (g); P là độ tinh khiết của chất chuẩn, tính bằng phần trăm (%) Đồ án phân tích thực phẩm Trang 253 9. Hiệu suất thu hồi và giới hạn xác định 9.1. Hiệu suất thu hồi của phương pháp: từ 70 % đến 110 % 9.2. Giới hạn định lượng của phương pháp (LOQ) Đối với acephate, chlorpyriphos, diazinon, dimethoate, fenitrothion, profenophos, methidathion, iprodion, cyfluthrin, cypermethrin, fenvalerate, permethrin, difenoconazole, indoxacarb: 0,05 mg/kg; Đối với chlorothalonil, endosulfan, endosulfan, fipronil, lambda cyhalothrin, propiconazole: 0,02 mg/kg 10. Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) Mọi thông tin cần thiết về việc nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) Phương pháp lấy mẫu đã sử dụng, nếu biết; c) Phương pháp thử đã sử dụng và viện dẫn tiêu chuẩn này; d) Mọi thao tác không được quy định trong tiêu chuẩn này, hoặc những điều được coi là tự chọn, và bất kỳ chi tiết nào có ảnh hưởng đến kết quả e) Kết quả thử nghiệm thu được THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] British Crop Protection Council 2003, The Pesticide Manual [2] Food and Drug Aministration of USA, 1994, Pesticide Analysis Manual, Volume I, Section 302, E4 TÀI LIỆU THAM KHẢO Trung tâm kĩ tuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng 3_ các tiêu chẩn Việt Nam http://giaoduc.net.vn/Suckhoe/Chongungthungannguathieumaunhosuplo xanhpost137342.gd http://www.doko.vn/luanvan/nghiencuuquytrinhsochevabaoquansuplo xanhdangcatfreshcut34785 http://tieuchuan.vn/ http://www.doko.vn/timkiem/tukhoa/th%E1%BB%B1ctr%E1%BA%A1ngt %C3%ACnhh%C3%ACnhs%E1%BA%A3nxu%E1%BA%A5tc%C3%A2ys %C3%BApl%C6%A1 Đồ án phân tích thực phẩm Trang 254 https://www.google.com.vn/search? newwindow=1&biw=1366&bih=662&site=webhp&tbm=isch&sa=1&q=s %C3%BAp+l%C6%A1+xanh&oq=s%C3%BAp+l %C6%A1+xanh&gs_l=img.3 0l2j0i24l8.7115.7115.0.7488.1.1.0.0.0.0.207.207.2 1.1.0 1c.1.43.img 0.1.205.m0dRHA5BIeE Đồ án phân tích thực phẩm Trang 255 ... Trung Quốc, Đài Loan, Thái Lan, Hàn Quốc, Việt Nam Súp lơ xanh Đồ án phân tích thực phẩm Trang 5 Súp lơ xanh (Broccoli) còn được gọi là giống súp lơ kép (giống sớm) hoa có màu xanh từ chùm tới cuống. Cây cao, lá thưa. Súp lơ xanh có hàm lượng ... mẹ thường xun phải bổ sung axít folic, vì vậy, để đảm bảo sức khỏe thai nhi hãy thường xun ăn súp lơ xanh Đồ án phân tích thực phẩm Trang 4 Vì những vấn đề trên, em sẽ cùng tìm hiểu và nghiên cứu xem bên trong ngun liệu súp lơ xanh gồm những chất gì mà có những tác dụng tốt như trên... Chương I: TỔNG QUAN VỀ NGUN LIỆU SÚP LƠ XANH Nguồn gốc và sự phân bố của cây súp lơ xanh Súp lơ xanh tên tiếng Anh: Broccoli. Tên khoa học: Brassica oleracea var. italica Plenck. Thuộc họ thập tù : Cruciferaceae Súp lơ là loại cây nằm trong nhóm Italica, nó là lo