Đánh giá sinh khả dụng trên thỏ của thuốc dán hấp thu qua da chứa clonidin 7,5 mg

Dạng bào chế thuốc dán hấp thu qua da chứa hoạt chất clonidin 7,5mg dùng điều trị tăng huyết áp được bào chế thành công tại Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh (ĐHYD TPHCM) và Khoa Dược, Đại học Sungkyunkwan Hàn Quốc. Bước tiếp theo của đề tài là nghiên cứu so sánh sinh khả dụng trên thỏ của chế phẩm này với thuốc đối chiếu Catapres–TTSɌ -3 chứa 7,5 mg clonidin do công ty Boehringer Ingelheim sản xuất, thông qua việc so sánh các thông số dược động học AUC, Cmax, Tmax.

Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học ĐÁNH GIÁ SINH KHẢ DỤNG TRÊN THỎ CỦA THUỐC DÁN HẤP THU QUA DA CHỨA CLONIDIN 7,5 mg Trần Quốc Thanh*, Lê Quan Nghiệm*, Huỳnh Văn Hóa*, Nguyễn Thiện Hải*, Lê Hậu*, Nguyễn Đức Tuấn* TÓM TẮT Mở đầu – Mục tiêu: Dạng bào chế thuốc dán hấp thu qua da chứa hoạt chất clonidin 7,5mg dùng điều trị tăng huyết áp bào chế thành công Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh (ĐHYD TPHCM) Khoa Dược, Đại học Sungkyunkwan Hàn Quốc Bước đề tài nghiên cứu so sánh sinh khả dụng thỏ chế phẩm với thuốc đối chiếu Catapres–TTSɌ-3 chứa 7,5 mg clonidin công ty Boehringer Ingelheim sản xuất, thông qua việc so sánh thông số dược động học AUC, Cmax, Tmax Đối tượng – Phương pháp nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu: Thuốc dán clonidin 7,5mg Phương pháp nghiên cứu: Khảo sát điều kiện xử lý mẫu huyết tương để tìm điều kiện xử lý mẫu thích hợp cho phát clonidin với nồng độ thấp pic clonidin tách hồn tồn Thẩm định quy trình định lượng clonidin huyết tương phương pháp HPLC với đầu dò PDA theo hướng dẫn FDA Hoa Kỳ Qui trình sau thẩm định ứng dụng để định lượng clonidin huyết tương thỏ So sánh sinh khả dụng thỏ chế phẩm với thuốc đối chiếu Catapres–TTSɌ-3 chứa 7,5 mg clonidin công ty Boehringer Ingelheim sản xuất, thông qua việc so sánh thông số dược động học AUC, Cmax, Tmax Kết quả: Đã xác định phương pháp xử lý mẫu huyết tương tủa protein acid percloric Qui trình định lượng clonidin huyết tương HPLC-PDA thẩm định đạt yêu cầu tiêu: tính phù hợp hệ thống, tính chọn lọc, khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, hiệu suất chiết, độ xác, độ độ ổn định dung dịch phân tích Qui trình sau thẩm định ứng dụng để định lượng clonidin huyết tương thỏ dán thuốc đối chiếu thuốc thử nghiệm Kết phân tích Anova cho thấy thuốc dán clonidin 7,5 mg thuốc đối chiếu có thơng số dược động học AUC, Cmax, Tmax không khác mặt thống kê tức sinh khả dụng thỏ hai thuốc tương đương Kết luận: Chế phẩm thuốc dán qua da chứa clonidin 7,5mg Khoa Dược, ĐHYD TPHCM bào chế có sinh khả dụng thỏ tương đương với thuốc dán Catapres-TTSR-3 chứa 7,5 mg clonidin công ty Boehringer Ingelheim sản xuất Từ khóa: Clonidin, huyết tương thỏ, thuốc dán qua da, sắc ký lỏng hiệu cao ABSTRACT EVALUATION OF CLONIDINE 7.5 MG TRANSDERMAL PATCHES’ BIOAVAILABILITY IN RABBIT Tran Quoc Thanh, Le Quan Nghiem, Huynh Van Hoa, Nguyen Thien Hai, Le Hau, Nguyen Duc Tuan * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: 293 - 301 Background - Objectives: The clonidine 7.5 mg transdermal patchesfor treatment of hypertension was successfully prepared by Faculty of Pharmacy, University of Medicine and Pharmacy, Ho Chi Minh City and Faculty of Pharmacy, Sungkyunkwan University in Korea This product is then compared its bioavailability in rabbit to Catapres-TTS-R-3’s one via evaluation of pharmacokinetics parameters such as AUC, Cmax, Tmax Method: The subject of this study was clonidine 7.5 mg patches Method: Treatment of rabbit plasma was *Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Tác giả liên lạc: ThS Trần Quốc Thanh ĐT: 0903 389 214 Chuyên Đề Dược Email: tranquocthanhdhyd@yahoo.com 293 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 investigated to find out the suitable condition so that clonidine can be detected at as low as possible concentration and separated at baseline, using HPLC-PDA The HPLC assay of clonidine in rabbit plasma was validated on the base of US FDA guideline The method was then applied for quantitation of clonidine in rabbit plasma This product is then compared its bioavailability in rabbit to Catapres-TTS-R-3’s one via evaluation of pharmacokinetics parameters such as AUC, Cmax, Tmax Results: The rabbit plasma containing clonidine was successfully treated by protein precipitation method, using perchloric acid The HPLC-PDA method was validated and satisfied all requirements on system suitability, selectivity, linear range, lower limit of quantification (LLOQ), recovery, precision, accuracy and stability of standard and test solutions This validated method was applied for quantitation of clonidine in plasma of rabbits patched test and reference drug Results from Anova test showed that the value of pharmacokinetic parameters of the clonidine 7.5 mg patch and reference drug is not statistically significance difference and as a result, the test and reference drug’s bioavailability in rabbit is equivalent Conclusion: The clonidine 7.5 mg transdermal patches prepared by Faculty of Pharmacy, University of Medicine and Pharmacy, Ho Chi Minh City and reference Catapres-TTSR-3 from Boehringer Ingelheim show equivalent bioavailability in rabbit Key words: Clonidine, rabbit plasma, transdermal patches, HPLC ứng tiêu chuẩn sở có hạn dùng khoảng 30 ĐẶT VẤN ĐỀ tháng Dạng bào chế thuốc dán hấp thu qua da Thuốc đối chiếu chứa hoạt chất clonidin 7,5mg dùng điều trị Thuốc dán Catapress-TTSɌ -3 chứa clonidin tăng huyết áp bào chế thành công 7,5 mg Công ty Boehringer Ingelheim Số Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ lô: 1005895 Hạn dùng: 05/2013 Chí Minh (ĐHYD TPHCM) Khoa Dược, Đại học Sungkyunkwan Hàn Quốc Bước đề tài nghiên cứu so sánh sinh khả dụng thỏ chế phẩm với thuốc đối chiếu Catapres–TTSɌ-3 chứa 7,5mg clonidin công ty Boehringer Ingelheim sản xuất, thông qua việc so sánh thông số dược động học AUC, Cmax, Tmax ĐỐITƯỢNG-PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU Đối tượng nghiên cứu Thuốc dán clonidin 7,5mg Nguyên vật liệu Động vật thử nghiệm Thỏ khỏe mạnh từ 12 – 14 tuần tuổi, trọng lượng 2,5 – kg Viện Pasteur cung cấp, dùng nghiên cứu không sử dụng loại thuốc Thuốc thử nghiệm Thuốc dán clonidin 7,5mg hấp thu qua da sản xuất tháng 8/2011 Lô thuốc đáp 294 Các mẫu thuốc thử thuốc đối chiếu có hàm lượng clonidin trung bình miếng thuốc dán khác không 1% Chất chuẩn Clonidin HCl Viện Kiểm nghiệm thuốc TPHCM cung cấp, số lô 20110429WA, hàm lượng 99,38%, hàm ẩm 0,11%, bảo quản 5oC Hóa chất, dung mơi Acid hydrocloric, acid phosphoric, natri 1heptansulfonat, acid percloric, kali hydroxyd đạt tiêu chuẩn phân tích (Merck) Methanol acetonitril đạt tiêu chuẩn sắc ký lỏng (Merck) Trang thiết bị Hệ thống sắc ký lỏng hiệu cao Waters Alliance 2695, đầu dò dãy diod quang 2996 Cân phân tích Sartorius CP 224S(Đức) Máy đo pH Metrohm 744(Mỹ) Máy vortexVX100 (Mỹ) Bể siêu âm Elma (Đức) Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Phương pháp nghiên cứu Quy trình thử nghiệm Khảo sát điều kiện xử lý mẫu huyết tương Áp dụng phương pháp tủa protein huyết tương methanol, acid percloric phương pháp chiết pha rắn để tìm điều kiện xử lý mẫu thích hợp cho phát clonidin với nồng độ thấp pic clonidin tách hoàn toàn Ngày 1: thỏ cạo lông vùng bên lưng trước ngày thử nghiệm Sau giữ ổn định 10 Các thỏ cung cấp đầy đủ thức ăn, nước uống thời gian làm nghiên cứu Thẩm định qui trình định lượng clonidin huyết tương phương pháp HPLC-PDA Điều kiện sắc ký để định lượng clonidin thuốc dán áp dụng để định lượng clonidin huyết tương Điều kiện sắc ký: cột sắc ký Phenomenex Luna C18 (150 x 4,6 mm; µm), pha động: hòa tan 1,21 g natri heptansulfonat 600 ml nước, thêm 400 ml methanol ml acid phosphoric, điều chỉnh đến pH dung dịch KOH 30%, tốc độ dòng ml/ phút, đầu dò PDA với bước sóng phát 210 nm, thể tích tiêm mẫu 100 µl(2) Tiến hành thẩm định quy trình định lượng clonidin huyết tương phương pháp HPLC với đầu dò PDA theo hướng dẫn FDA Hoa Kỳ(3) Ứng dụng qui trình định lượng clonidin huyết tương thỏ Qui trình định lượng clonidin sau thẩm định áp dụng để định lượng clonidin huyết tương thỏ số thời điểm sau dán thuốc đối chiếu thuốc thử nghiệm Chọn thú thử nghiệm Thỏ khỏe mạnh từ 12– 14 tuần tuổi, trọng lượng 2,5 – kg Viện Pasteur cung cấp, dùng nghiên cứu không sử dụng loại thuốc Thiết kế nghiên cứu: Tiến hành nghiên cứu giai đoạn dùng mô hình song song, chia thỏ làm lơ, lơ thỏ, lô dán thuốc thử, lô dán thuốc đối chiếu, tiếp tục lấy mẫu lô theo thời điểm quy định Chuyên Đề Dược Ngày 2: Giữ thỏ khung giữ chuyên dùng (không cho phép gậm nhấm miếng dán), lấy mẫu Dán thuốc thử thuốc đối chiếu theo thiết kế: lô dán thuốc thử, lô dán thuốc đối chiếu, tiếp tục lấy mẫu lô theo thời điểm quy định Lấy mẫu, xử lý bảo quản mẫu Các mẫu máu lấy thời điểm 0, 3, 6, 12, 24, 36, 48, 60, 72 78 giờ; sau dán thuốc Mỗi mẫu lấy ml máu Lấy máu qua tĩnh mạch vành tai thỏ Các mẫu máu cho vào ống nghiệm có chứa chất chống đông EDTA Các mẫu máu ly tâm tốc độ 5000 vòng/phút 10 phút, thu khoảng 0,5 ml huyết tương, mẫu huyết tương bảo quản -200 C để chờ phân tích Các ống đựng mẫu huyết tương dán nhãn ghi rõ thông tin: số hiệu thỏ, số hiệu mẫu thuốc dán, thời điểm lấy mẫu… Theo dõi trình thử nghiệm Quan sát ghi nhận bất thường thỏ có Xác định thơng số dược động học đánh giá kết Nồng độ clonidin huyết tương thỏ thời điểm lấy máu xác định phương pháp HPLC thẩm định Từ vẽ đồ thị biểu diễn biến thiên nồng độ thuốc máu theo thời gian, xác định thông số dược động học Cmax, Tmax tính diện tích đường cong AUC (Area Under Curve) phương pháp hình thang(1) (C  C2 ) (C  Cn ) AUCOt      n1 (t  t1 ) (t n  t n1 ) 295 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Trong đó: AUC 0-t (g/ml.h): diện tích đường cong nồng độ hoạt chất theo thời gian từ thời điểm đến thời điểm t C1 (g/ml): nồng độ hoạt chất huyết tương thời điểm thứ (0 giờ) C2 (g/ml): nồng độ hoạt chất huyết tương thời điểm thứ Cn-1 (g/ml): nồng độ hoạt chất huyết tương thời điểm kế cuối Cn (g/ml): nồng độ hoạt chất huyết tương thời điểm cuối t1 (giờ): thời điểm lấy máu lần thứ (0 giờ) t2 (giờ): thời điểm lấy máu lần thứ tn-1 (giờ): thời điểm lấy máu kế lần cuối tn (giờ): thời điểm lấy máu cuối Diện tích đường cong tồn thể tính theo công thức: AUC0    AUC0  t  Cn Ke (1) Trong đó: AUC 0-  (g/ml.h): diện tích đường cong nồng độ hoạt chất theo thời gian từ thời điểm đến vô cực Ke: số tốc độ thải trừ, độ dốc đường thẳng biểu diễn logarit nồng độ thuốc theo thời gian Phân tích thống kê thơng số dược động học Cmax, AUC0-,Tmax phương pháp ANOVA yếu tố để chứng minh khác khơng có ý nghĩa liệu với giá trị p > 0,05 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Khảo sát điều kiện xử lý mẫu huyết tương Kết khảo sát cho thấy phương pháp kết tủa protein huyết tương methanol có ưu điểm xử lý mẫu nhanh, sau tuần khảo sát, tỷ lệ methanol/huyết tương để tủa hoàn toàn protein 3:1 Tuy nhiên nồng độ clonidin bị pha lỗng, mẫu huyết tương sau xử lýcòn lẫn nhiều tạp nên tiến hành sắc ký, pic clonidin khơng tách hồn tồn; Phương pháp chiết pha rắn có thời gian xử lý mẫu lâu hơn, mẫu huyết tương sau xử lý nhiều tạp pic clonidin khơng tách hồn 296 tồn với pic tạp khác; Với phương pháp tủa protein acid percloric, tỷ lệ huyết tương/acid percloric để tủa hoàn toàn protein 10:1, thời gian xử lý mẫu nhanh, mẫu huyết tương tạp so với phương pháp tiến hành sắc ký, pic clonidin tách hồn tồn phát với nồng độ mẫu thấp (45 ng/ml) Do phương pháp xử lý mẫu huyết tương acid percloric lựa chọn Chuẩn bị mẫu Mẫu huyết tương thêm chuẩn Cân xác 11,8 mg chuẩn clonidin HCl, cho vào bình định mức 100 ml, hòa tan bổ sung dung dịch KOH 0,0025% (g/ml) đến vạch, lắc Pha loãng dung dịch thu với nước để thu dung dịch chuẩn mức nồng độ cho nồng độ clonidin sau xử lý mẫu huyết tương 45 ng/ml, 400 ng/ml 800 ng/ml Cho 0,01 ml dung dịch chuẩn clonidin vào 0,49 ml huyết tương trắng, lắc rung (vortex) phút, thêm 0,05 ml dung dịch HCl 0,2%, lắc rung phút, tiếp tục thêm 0,05 ml dung dịch acid percloric 70%, lắc rung phút Ly tâm 14.000 vòng/phút 10 phút, lọc dịch qua màng lọc 0,45 µm, tiến hành sắc ký Mẫu thử Lấy 0,5 ml huyết tương thỏ, thêm 0,05 ml dung dịch HCl 0,2%, lắc rung phút, thêm 0,05 ml dung dịch acid percloric 70%, lắc rung phút Ly tâm 14.000 vòng/phút 10 phút, lọc dịch qua màng lọc 0,45 µm, tiến hành sắc ký Thẩm định qui trình định lượng clonidin huyết tương phương pháp HPLC-PDA Khảo sát tính phù hợp hệ thống Kết phân tích lặp lại lần mẫu huyết tương thêm chuẩn clonidin trình bày bảng RSD thông số sắc kýđều < 2%, chứng tỏ qui trình đạt tính phù hợp hệ thống Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Bảng 1: Kết khảo sát tính phù hợp hệ thống mẫu huyết tương thêm chuẩn (n=6) Diện tích Thời gian Hệ số bất Số đĩa lý Độ phân pic (µAu x lưu (phút) đối (As) thuyết (N) giải (Rs) giây) TB 334818 12,014 1,2 26891 4,25 RSD 1,03% 0,27% 0,87% 1,92% 0,92% Tính chọn lọc Tiến hành sắc ký mẫu chuẩn, mẫu huyết tương thêm chuẩn mẫu huyết tương trắng theo điều kiện sắc ký chọn Kết cho thấy: phổ UV-Vis thời gian lưu pic clonidin (a) Nghiên cứu Y học mẫu huyết tương thêm chuẩn mẫu chuẩn giống (hình1), thời gian lưu pic mẫu huyết tương thêm chuẩn (hình4) tương đương với thời gian lưu pic clonidin mẫu chuẩn (hình 5), mẫu huyết tương trắng (hình2) khơng có pic trùng với pic clonidin, sử dụng chức kiểm tra độ tinh khiết pic cho thấy pic clonidin mẫu huyết tương thêm chuẩn tinh khiết (hình 3) Do đó, khẳng định qui trình phân tích có tính chọn lọc (b) Hình 1: (a) Phổ UV-Vis thời gian lưu pic clonidin mẫu chuẩn (b) mẫu huyết tương thêm chuẩn Hình 4: Sắc ký đồ mẫu huyết tương trắng thêm dung dịch chuẩn Hình 2: Sắc ký đồ mẫu huyết tương trắng Hình 5: Sắc ký đồ mẫu chuẩn Hình 3: Sắc ký đồminh họa độ tinh khiết pic clonidin mẫu huyết tương thêm chuẩn Khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, độ xác, độ đúng, hiệu suất chiết, độ ổn định Bảng : Kết khảo sát khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, độ xác, độ đúng, hiệu suất chiết độ ổn định Chỉ tiêu thẩm định Clonidin HCl Phương trình hồi qui Ŷ = 472,9X; R = 0,9999 Khoảng tuyến tính (ng/ml) 45 – 800 Giới hạn định lượng (ng/ml) 45 Hiệu suất chiết* 73,1% - 77,0% ; RSD = 0,65% - 5,20% Chuyên Đề Dược 297 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học Chỉ tiêu thẩm định Độ xác ngày khác ngày* (RSD, n= 18) Độ ngày khác ngày* (tỷ lệ hồi phục, n=18) Độ ổn định* Clonidin HCl 2,42% - 18,25% 92,80% - 115,85% (**) *Được thực nồng độ khác 45 ng/ml, 400 ng/ml 800 ng/ml **Dung dịch chuẩn gốc ổn định sau ngày bảo quản – 4oC Mẫu huyết tương chứa clonidin bảo quản nhiệt độ phòng 24 giờ, bảo quản 70oC khoảng tháng, ổn định sau chu kỳ đông, rã đông sau xử lý mẫu 12 tiếng nhiệt độ phòng Nhận xét: Dựa vào kết thực nghiệm thu được, phương pháp định lượng clonidin huyết tương thỏ đạt yêu cầu thẩm định quy trình phân tích thuốc dịch sinh học tính phù hợp hệ thống, tính chọn lọc, hiệu suất chiết, giới hạn định lượng dưới, tính tuyến tính, độ độ xác, độ ổn định theo hướng dẫn FDA Hoa Kỳ (3) Ứng dụng qui trình định lượng clonidin huyết tương thỏ, xác định thông số dược động học Bảng bảng trình bày kết định lượng clonidin huyết tương thỏ số thời điểm sau dán thuốc thử nghiệm thuốc đối chứng Hình minh họa đường biểu diễn nồng độ clonidin huyết tương thỏ theo thời gian sau dán thuốc clonidin 7,5 mg thuốc dán Catapres 7,5 mg Bảng 3: Nồng độ clonidin huyết tương thỏ dán thuốc thử nghiệm(n=2) Giờ 12 24 36 48 60 72 78 Cmax(ng/ml) Tmax(giờ) AUC12-60(ng/ml.h) Nồng độ clonidin huyết tương thỏ dán thuốc thử nghiệm (ng/ml) Thỏ Thỏ Thỏ Thỏ Thỏ Thỏ TB 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 60,78 49,45 43,78 54,36 49,72 48,62 51,12 70,43 63,76 75,89 62,17 64,96 65 67,04 62,56 78 59,11 76,39 70,65 72,96 69,95 56,83 65,38 59,67 66,43 62,98 66,27 62,93 36,23 41,35 36,89 45,23 38,63 42,11 40,07 0 0 0 0 0 0 0 70,43 78 75,89 76,39 70,65 72,96 74,05 24 36 24 36 36 36 32 2589,90 3030,48 2820,06 3057,42 2913,2 2995,1 2946,03 Bảng 4: Nồng độ clonidin huyết tương thỏ dán thuốc đối chiếu (n=2) Giờ 12 24 36 48 60 72 78 Cmax(ng/ml) Tmax(giờ) AUC1260(ng/ml.h) 298 Thỏ 0 48,9 65,3 68,31 64,84 36,83 0 68,31 36 2895,78 Nồng độ clonidin huyết tương thỏ dán thuốc đối chiếu (ng/ml) Thỏ Thỏ Thỏ Thỏ Thỏ 0 0 0 0 0 0 0 49,38 48,11 56,98 48,34 50,02 63,6 62,36 66,77 64,51 65,52 69,31 70,26 73,21 70,27 69,94 64,7 63,98 66,49 65 65,27 37 36,47 38,79 36,02 37,05 0 0 0 0 0 69,31 70,26 73,21 70,27 69,94 36 36 36 36 36 2889,60 2866,68 3052,26 2904,60 2931,18 TB 0 50,29 64,68 70,22 65,05 37,03 0 70,22 36 2932,35 Chuyên Đề Dược Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nồng độ (ng/ml) Nghiên cứu Y học Giờ Hình 6: Đồ thị biểu diễn nồng độ clonidin huyết tương thỏ theo thời gian sau dán thuốc clonidin 7,5 mg thuốc dán Catapres 7,5 mg liệu trung bình AUC12-60, Cmax,Tmax tính tốn Nhận xét: Sau dán thuốc giờ, chưa phát dựa số liệu thử nghiệm clonidin huyết tương Nồng độ clonidin huyết tương tăng từ 12 đến 36 giờ, sau giảm dần khơng phát sau 72 Cả hai thuốc đối chiếu thuốc thử nghiệm có Tmax 36 với Cmax 70,22ng/ml 69,95 ng/ml Phân tích thống kê đánh giá sinh khả dụng Bảng 5: Các thơng số dược động học trung bình thuốc thử nghiệm clonidin thuốc đối chiếu Catapres Thuốc thử nghiệm clonidin AUC (ng/ml.h) 2946,03 Tmax(giờ) 32 Cmax(ng/ml) 74,05 Thuốc đối chiếu Catapres 2923,35 36 70,22 Các số liệu dược động học AUC12-60, Cmax,Tmax phân tích phương pháp thống kê Anova yếu tố Khoảng tin cậy 90% số Bảng 6: Kết phân tích phương sai số liệu dược động học Nguồn biến thiên Bậc tự AUC12-60, Cmax ,Tmax Thuốc thử nghiệm clonidin Catapres Sai số Tổng số 2 Tổng bình phương 11073118,59 84,45 188,075 11073391,11 Kết phân tích Anova cho thấy FA= 0,898043 < F0,05 = 18,51282 nên thuốc thử nghiệm clonidin thuốc đối chứng Catapres có thơng số dược động học khơng khác mặt thống kê, tức có sinh khả dụng thỏ tương đương KẾT LUẬN Chế phẩm thuốc dán qua da chứa clonidin 7,5 mg Khoa Dược, ĐHYD TPHCM bào chế có sinh khả dụng thỏ tương đương với Chuyên Đề Dược Bình phương trung bình 5536559,29 84,45 94,037 F P F 58875,88 0,898043 1,7.10 0,443332 -5 19 18,51282 thuốc dán Catapres-TTSR-3 chứa 7,5 mg clonidin công ty Boehringer Ingelheim sản xuất TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Quan Nghiệm (2007), Sinh khả dụng hệ thống trị liệu mới, Nhà xuất Y học, thành phố Hồ Chí Minh, tr 13 – 49 Tran Quoc Thanh, Le Quan Nghiem, Huynh Van Hoa, Le Hau, Nguyen Duc Tuan (2011), “Quantitative Determination of Clonidine in Transdermal Patches By High Performance Liquid Chromatography with Photodiode Array Detector”, Proceeding of the seventh Indochina Conference on Pharmaceutical Sciences, Bangkok, Thailand, December 14-16, 2011, 439-442 299 Nghiên cứu Y học 300 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 US Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (2001), Guidance for Industry:Bioanalytical method validation, pp – 15 Ngày nhận báo: Ngày phản biện nhận xét báo: Ngày báo đăng: 30/10/2015 20/11/2015 20/02/2016 Chuyên Đề Dược ... nghiệm Thu c dán clonidin 7, 5mg hấp thu qua da sản xuất tháng 8/2011 Lô thu c đáp 294 Các mẫu thu c thử thu c đối chiếu có hàm lượng clonidin trung bình miếng thu c dán khác không 1% Chất chuẩn Clonidin. .. nghiệm thu c đối chứng Hình minh họa đường biểu diễn nồng độ clonidin huyết tương thỏ theo thời gian sau dán thu c clonidin 7,5 mg thu c dán Catapres 7,5 mg Bảng 3: Nồng độ clonidin huyết tương thỏ. .. biểu diễn nồng độ clonidin huyết tương thỏ theo thời gian sau dán thu c clonidin 7,5 mg thu c dán Catapres 7,5 mg liệu trung bình AUC12-60, Cmax,Tmax tính tốn Nhận xét: Sau dán thu c giờ, chưa