Mục tiêu của nghiên cứu này nhằm sàng lọc để lựa chọn chất dính và nồng độ clonidin phù hợp trong xây dựng công thức bào chế thuốc dán chứa clonidin có tính thấm tương tự hoặc cao hơn thuốc đối chiếu.
Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC CHẤT DÍNH VÀ LỰA CHỌN NỒNG ĐỘ DƯỢC CHẤT TRONG BÀO CHẾ THUỐC DÁN HẤP THU QUA DA CHỨA CLONIDIN Trần Quốc Thanh*, Lê Quan Nghiệm*, Nguyễn Thiện Hải*, Lê Hậu* TÓM TẮT Mục tiêu: Trong bào chế thuốc dán việc lựa chọn chất dính nồng độ dược chất phù hợp có ý nghĩa quan trọng bào chế hấp thu dược chất qua da Thuốc dán chứa clonidin phát triển với tên thương mại Catapres, nhiên nước chưa có nghiên cứu hấp thu thuốc qua da nói chung clonidin nói riêng Mục tiêu nghiên cứu nhằm sàng lọc để lựa chọn chất dính nồng độ clonidin phù hợp xây dựng công thức bào chế thuốc dán chứa clonidin có tính thấm tương tự cao thuốc đối chiếu Phương pháp: Nghiên cứu thực với 13 chất dính nhóm Durotak Thiết bị khảo sát tính thấm tế bào khuếch tán Franz kiểu đứng, sử dụng màng khuếch tán da chuột cống trắng giống Sprague-Dawley, trọng lượng 230 ± 20g, nuôi ổn định vài ngày trước thực thí nghiệm Kết quả: Kết khảo sát cho thấy clonidin, loại chất dính phù hợp Durotak 2510, nồng độ clonidin từ 5% đến 10% cho tốc độ thấm gần tương tự cao thuốc đối chiếu Catapres với tốc độ thấm (Flux) 4,71µg/cm2/giờ, 10,18 µg/cm2/giờ, tiềm thời (lag time) Tlag 7,28 4,97 Kết luận-đề nghị: Đề nghị sử dụng Durotak 2510 nồng độ clonidin từ 5% đến 10% xây dựng công thức bào chế thuốc dán hấp thu qua da với clonidin Từ khóa: Chất dính, tốc độ thấm, khả thấm qua da, clonidin ABSTRACT SCREENING SUITABLE ADHESIVE AND DRUG CONCENTRATION FOR FORMULATING TRANSDERMAL PATCH CONTAINING CLONIDIN Tran Quoc Thanh, Le Quan Nghiem, Nguyen Thien Hai, Le Hau * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Vol 15 - Supplement of No - 2011: 218 - 222 Objectives: In formulating transdermal patches, adhesive and drug concentration take an important role for preparation and transdermal drug absorption Transdermal patches containing clonidin have been launched into global market under trade name Catapres – TTS (Transdermal Therapeutic System) for a long time However, until now in Vietnam there has been no study on formulating transdermal patches containing clonidin Our aim target was to find out a suitable adhesive and concentration of clonidin for formulating a transdermal patches containing clonidin having flux almost higher equivalent to reference Catapres Method: Using Franz diffusion cell to survey permeation capacity through rat skin of clonidin Results: Among 13 studied adhesive belonging to Durotak group, Durotak 2510 was chosen and at the concentration of clonidin was 5%, the permeation through rat skin of test clonidin patch was almost equivalent to reference Catapres with permeation speed (Flux) was 4.71µg/cm2/hour and lag time (Tlag) was 7.28 hour, at 10% is 10.18µg/cm2/hour and 4.97 hour *Bộ môn Công nghiệp Dược – Khoa Dược – ĐH Y Dược TPHCM Tác giả liên lạc: ThS.Trần Quốc Thanh ĐT:0903389214 Email: tranquocthanhdhyd@yahoo.com 218 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 Nghiên cứu Y học Conclusion: We recommend using Durotak 2510 and the concentration of clonidin is from 5% to 10% in formulating transdermal patches containing clonidin Keywords: adhesive, flux, skin permeation, clonidin ĐẶT VẤN ĐỀ Trong bào chế thuốc dán, thành phần chất dính nồng độ dược chất có vai trò quan trọng việc bào chế hấp thu qua da dược chất Thuốc dán chứa dược chất clonidin để điều trị tăng huyết áp đưa thị trường với tên thương mại Catapres – TTS Trong năm qua có nhiều nghiên cứu chứng minh ưu điểm dạng thuốc so với clonidin dạng uống giảm tác dụng phụ gây khô miệng, buồn nôn hay rối loạn chức sinh dục Khả giảm tác dụng phụ cho tác dụng kéo dài ngày giúp bệnh nhân dễ tuân thủ tiện dụng so với dạng thuốc uống Do ưu điểm tính hiệu điều trị với triển vọng phát triển dạng thuốc này, dạng thuốc dán hấp thu qua da chứa hoạt chất clonidin nên nghiên cứu ứng dụng phát triển Việt Nam Vấn đề khó khăn nghiên cứu phát triển dạng thuốc dán hấp thu qua da khắc phục cản trở hấp thu làm tăng tính thấm hoạt chất qua da Việc lựa chọn chất dính nồng độ dược chất phù hợp có vai trò quan trọng bào chế đảm bảo tính thấm dược chất chuyển thành dạng clonidin base; 13 loại chất dinh nhóm Durotak: Duro-Tak 87-2051, DuroTak 2353, Duro-Tak 87- 2196, Duro-Tak 87- 2852, Duro-Tak 87- 2074, Duro-Tak 87-4098, Duro-Tak 87- 9301, Duro-Tak 87- 6430, Duro-Tak 87-3500, Duro-Tak 87-2510, Duro-Tak 87- 2516, Duro-Tak 87- 2287, Duro-Tak 87- 2525 Các hóa chất dung môi khác đạt tiêu chuẩn tinh khiết tinh khiết phân tích phù hợp với mục đích sử dụng Thuốc đối chiếu: Catapres- TTS®-3 lơ 005885, hạn dùng đến 5/2013, công ty Boehringer Ingelheim Dụng cụ: thiết bị đo độ khuếch tán kiểu tế bào Franz, thiết bị phân tích HPLC Phương pháp nghiên cứu Qui trình định lượng clonidin phương pháp HPLC dịch thử tính thấm thực theo quy trình xác định nhóm nghiên cứu Thử nghiệm tế bào Franz với màng khuếch tán da chuột cống trắng xử lý phù hợp(1,2): Khoang cho: miếng dán điều chế với thành phần nghiên cứu, dán màng da chuột xử lý phù hợp Đề tài “Nghiên cứu sàng lọc chất dính lựa chọn nồng độ dược chất bào chế thuốc dán hấp thu qua da chứa clonidin” tiến hành với mục tiêu: tìm nhóm chất dính nồng độ clonidin phù hợp đảm bảo thấm qua da chế phẩm tương tự với thuốc đối chiếu Catapres Khoang nhận: chứa dung dịch đệm phosphat pH 7,4, nhiệt độ 370C ± ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Quy trình xử lý da chuột: Chuột giết ether Cạo lông phần lưng không làm tổn hại lớp sừng Cắt rời phần da lưng, loại bỏ lớp mỡ máu da tránh làm thủng tổn thương đến da, dùng giấy thấm ép để loại hết máu Đặt da lên hộp petri lớp sừng Nguyên liệu Các nguyên liệu hoá chất dùng thử nghiệm Dược chất: Clonidin hydroclorid Chuyên Đề Dược Khoa Thanh khuấy từ: khuấy trộn liên tục, 600 vòng/phút Màng da: Chuột cống trắng giống SpragueDawley, trọng lượng 230 ± 20g, nhanh nhẹn, khỏe mạnh, không bị bệnh da 219 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 hướng lên Có thể bảo quản miếng da tủ lạnh ngăn đá không ngày trước sử dụng Từ lượng clonidin thấm qua da chuột theo thời gian, vẽ đồ thị phóng thích dược chất theo thời gian hình 1: Lấy mẫu: 200 μl dung dịch khoang nhận 24 thời điểm: 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20, 24 Bổ sung 200 μl dung dịch đệm pH 7,4 sau lần lấy mẫu Tốc độ thấm qua da chuột hoạt chất tính theo cơng thức: 3.Tính lượng thuốc thấm qua da, tốc độ thấm xác định tiềm thời Hàm lượng hoạt chất thấm qua da chuột theo thời gian: V m=Cx S Hàm lượng hoạt chất thấm qua da (µg/cm2) m: lượng clonidin thấm qua da chuột theo thời gian (µg/cm2); C: nồng độ clonidin tính từ phương trình đường chuẩn dựa vào chiều cao đỉnh; V: thể tích khoang nhận (15,5 ml); S: diện tích khuếch tán qua da từ khoang cho vào dung dịch khoang nhận (3,14 cm2) JS = ⎛ dm ⎞ ⎜ ⎟ A ⎝ dt ⎠ SS Js (flux): Tốc độ thấm qua da hoạt chất (µg/cm2/giờ); A: diện tích bề mặt khuếch tán da (cm2); (dm/dt)ss: lượng clonidin thấm qua da theo thời gian (µg/giờ) Tốc độ thấm hoạt chất Js ngoại suy từ đồ thị giá trị slope phương trình đường thẳng tuyến tính biểu cho tốc độ thấm định theo thời gian Tiềm thời (lag time) suy từ đồ thị giao điểm đường thẳng tuyến tính với trục hồnh(2) Tiềm thời (lag time) Thời gian (giờ) Hình Đồ thị biểu diễn lượng hoạt chất thấm qua da theo thời gian 220 Chuyên Đề Dược Khoa Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Kết khảo sát khả thấm clonidin qua da chuột với loại Durotak khác Kết khảo sát tính thấm trình bày bảng Nghiên cứu Y học Nhận xét Có thể hòa tan clonidin bào chế thuốc dán clonidin với loại Durotak nêu bảng 1, loại Durotak khác không phù hợp Mẫu thuốc dán dùng Durotak 2510 cho lượng tốc độ thấm qua da chuột clonidin lớn nhất, Durotak 2510 dùng cho nghiên cứu Bảng Lượng tốc độ thấm qua da theo thời gian clonidin với loại chất dính khác AP2852 AP2510 Giờ (µg/cm2) (µg/cm2) 0 0,04 0,05 0,08 0,22 0,13 1,08 0,43 4,64 10 0,96 11,24 12 1,24 22,35 16 2,76 41,84 20 3,96 59,89 24 4,72 62,75 Flux (µg/cm2/giờ) 0,27 4,71 Tlag (giờ) 6,34 7,28 AP2287 (µg/cm2) 0 0,19 0,5 1,48 2,06 6,09 10,37 16,66 20,49 1,19 6,91 AP2525 (µg/cm2) 0 0,12 0,3 1,32 2,41 7,33 12,75 20,26 24,07 1,00 7,02 Kết khảo sát nồng độ clonidin Bào chế thuốc với chất dính Durotak 2510 với clonidin nồng độ 2,5%, 5% 10% Kết so sánh lượng tốc độ thấm qua da clonidin so sánh với thuốc đối chiếu Catapres trình bày bảng Bảng Lượng tốc độ thấm qua da clonidin từ miếng dán với nồng độ khác so sánh với thuốc đối chiếu Catapres Giờ 10 12 16 20 24 Flux (µg/cm2/giờ) Tlag (giờ) 2,5% 0 1,18 0,90 0,28 4,70 11,75 11,53 28,92 5% 0,05 0,22 1,08 4,64 11,24 22,35 41,84 59,89 62,75 10% 0 11,18 17,17 26,80 48,02 101,19 149,13 261,56 Catapres 0 5,65 12,88 17,86 22,94 30,57 48,85 75,94 105,59 1,16 4,71 10,18 4,33 4,12 7,28 4,97 3,21 Chuyên Đề Dược Khoa AP2051 (µg/cm2) 0 0,42 1,19 3,45 6,29 9,69 18,45 26,02 26,68 1,83 6,12 AP2516 µg/cm2) 0 0,2 0,61 2,05 4,48 7,38 16,37 26,16 27,11 2,05 7,76 AP9301 (µg/cm2) 0 0,08 0,18 0,54 1,37 2,38 5,88 9,76 11,78 0,75 8,06 AP2074 (µg/cm2) 0 0,08 0,11 0,2 0,21 0,08 0 0,19 0,05 3,56 AP2353 (µg/cm2) 0 0,06 0,09 0,1 0 0,12 0,02 2,00 Nhận xét: Mẫu thuốc dán với nồng độ clonidin 5% có tốc độ thấm gần tương đương với thuốc đối chiếu Catapres Còn nồng độ clonidin 10% có tốc độ thấm cao thuốc đối chiếu Do khuyến nghị chọn nồng độ clonidin từ 5% đến 10% xây dựng công thức thuốc dán để thu nhỏ lại diện tích miếng thuốc dán chứa clonidin KẾT LUẬN - Đã khảo sát 13 loại chất dính nhóm Durotak, có loại hòa tan clonidin bào chế dạng thuốc dán - Trong loại Durotak khảo sát, Durotak 2510 cho lượng tốc độ thấm qua da chuột clonidin lớn nhất, với Flux 4.71 μg/cm2/giờ Tlag 7,28 - Khảo sát nồng độ clonidin 2,5%, 5% 10% Nồng độ clonidin 5% cho tốc độ thấm gần tương đương với thuốc đối chiếu Catapres nồng độ 10% cao gấp đơi 221 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Tập 15 * Phụ Số * 2011 ĐỀ NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẢO Chọn chất dính Durotak 2510 nồng độ clonidin từ 5% đến 10% xây dựng công thức bào chế dạng thuốc dán qua da với clonidin 222 Moser K, Kriwet K, Naik A, Kaila YN., RH Guy (2001) Passive skin penetration enhancement and its quantification in vitro, Eur J Pharm Biopharm., 52:103-112 Nguyen Thien Hai, Chi Sang-Cheol (2005) Investigation of the effect of vehicles on skin permeation of Benztropine, Proceeding of Pharma Indochina IV, pp 363- 368 Chuyên Đề Dược Khoa ... permeation, clonidin ĐẶT VẤN ĐỀ Trong bào chế thu c dán, thành phần chất dính nồng độ dược chất có vai trò quan trọng việc bào chế hấp thu qua da dược chất Thu c dán chứa dược chất clonidin để... dính lựa chọn nồng độ dược chất bào chế thu c dán hấp thu qua da chứa clonidin tiến hành với mục tiêu: tìm nhóm chất dính nồng độ clonidin phù hợp đảm bảo thấm qua da chế phẩm tương tự với thu c. .. nghiên cứu phát triển dạng thu c dán hấp thu qua da khắc phục cản trở hấp thu làm tăng tính thấm hoạt chất qua da Việc lựa chọn chất dính nồng độ dược chất phù hợp có vai trò quan trọng bào chế