DƯỢC LIỆU CHỨA GLYCOSID TIM

Các phản ứng định tính glycosid tim chủ yếu được thực hiện trên phần đường 2-desoxy và vòng lacton 5 cạnh - Phản ứng với phần đường 2-desoxy và nhân steroid được tiến hành trong môi trườ

BỘ MÔN DƯỢC LIỆU- DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN

--BÀI BÁO CÁO THỰC HÀNH DƯỢC LIỆU

DƯỢC LIỆU CHỨA GLYCOSID TIM

GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN: ThS Đỗ Văn Mãi

TIỂU NHÓM 2 – LIÊN THÔNG CĐ-ĐH DƯỢC 13A

1 Nguyễn Lê Nhật Linh

2 Trần Ngọc Thiên Vy

3 Đặng Thị Thùy Dung

4 Hồ Linh Phương

5 Đỗ Công Hậu

6 Dương Thị Ngọc Em

Cần Thơ, 2019

A CƠ SỞ LÝ THUYẾT

Glycosid tim là một nhóm hợp chất có cấu tạo đặc trưng và có tác dụng đặc hiệu trên tim theo quy tắc 3R của Potair

Cấu tạo chung của glucosid tim gồm 2 phần:

- Phần đường: các đường gặp trong glycosid tim có thể là những đường hexose và

pentose thông thường (như glucose, rhamnose…) hay những đường desoxy thường gặp trong các glycosid tim (đường 2-desoxy, 2,6-desoxy hexose)

- Phần aglycon gồm có 2 phần:

 Khung hydrocarbon có cấu trúc steroid (nhân androstan)

 Vòng lacton 5 hay 6 cạnh gắn vào vị trí C17 (hướng β) của khung

Các phản ứng định tính glycosid tim chủ yếu được thực hiện trên phần đường 2-desoxy

và vòng lacton 5 cạnh

- Phản ứng với phần đường 2-desoxy và nhân steroid được tiến hành trong môi trường

acid

- Phản ứng với vòng lacton 5 cạnh thường được thực hiện trong môi trường kiềm

Thuốc thử cho các phản ứng này thường là các dẫn chất nitro thơm

Các glycosid tan được trong cồn, nước nóng; ít tan trong dung môi kém phân cực, tính tan của dạng aglycon thì ngược với tính tan của dạng glycosid

Trong định tính, có thể chiết glycosid tim bằng 2 phương pháp sau:

- Chiết bằng cồn thấp độ (25%) ngâm qua đêm

- Chiết bằng cồn cao độ, thu hồi dung môi, hoà tan cao cồn trong cồn thấp độ.

Các tạp chất ảnh hưởng tới định tính thường được loại bằng dung dịch chì acetat

B NỘI DUNG THỰC HÀNH

1 Nguyên vật liệu thí nghiệm

1.1 Dung môi, hóa chất và thuốc thử

- Cồn 25%, cồn 96%

- DCM

- Dung dịch chì acetat 30%

- Dung dịch natri sulfat 15%

- H2SO4 đậm đặc

- Anhydrid acetic

- Dung dịch NaOH 10% trong cồn

- Thuốc thử Xanthydrol

- Thuốc thử Keller-Kiliani

- Thuốc thử Raymond – Marthoud

- Thuốc thử Kedde

- Thuốc thử Legal

- Thuốc thử Baljet

1.2 Dược liệu

Trúc đào (Folium Nerii) là lá cây trúc đào (Nerium oleander L., Apocynaceae)

2 Chiết xuất glycosid tim từ lá trúc đào

BM đã chuẩn bị sẵn dịch chiết từ 5g bột lá Trúc đào chiết cùng ethanol 25%

Lấy 30ml dịch chiết trúc đào vào cốc

1, thêm 10ml dung dịch chì acetat 30% khuấy kỹ, để lắng 10 - 15 phút rồi lọc qua giấy lọc cho vào cốc 2 (khoảng 20ml) Kiểm tra việc loại tạp bằng các nhỏ thêm vào dịch đã lọc ở cốc 2, 1 giọt dung dịch chì acetat, nếu có xuất hiện tủa thì phải cho thêm dung dịch chì acetat vào dịch đã lọc và lọc lại

Loại chì acetat thừa bằng cách cho 10ml dung dịch natri sulfat 15% vào cốc 2, khuấy kỹ để yên 3- 5 phút rồi lọc qua bông vào cốc 3 (khoảng 15ml)

Kiểm tra lại bằng cách nhỏ 1 giọt natri sulfat 15% vào dịch lọc ở cốc 3, nếu có xuất hiện tủa thì phải cho thêm dung dịch natri sulfat 15% vào dịch đã lọc và lọc lại

Cho 15ml dịch lọc ở cốc 3 vào bình lắng gạn, lắc với dung dịch DCM 2 lần, mỗi lần 10ml Sau đó để yên, lọc lấy dịch lớp dưới vào erlen khô rồi bọc lại bằng màng bọc thực phẩm

3

Làm khan dịch lọc bằng Na2SO4 khan, cho ¼ muỗng Na2SO4 khan vào dịch lọc nghiên nhẹ nếu thấy có vài hạt muối rời rạc thì dịch lọc đã hết nước còn không thấy thì tiếp tục cho thêm từ từ muối đến khi hết nước

Chia đều dịch lọc đã làm khan vào 6 ống nghiệm (đánh số 1–2–3–4–5-6 ) Đem 4 ống nghiệm (1 – 2 – 3 – 4) đun cách thủy cho đến cắn khô

3 Các phản ứng định tính glycosid tim

3.1 Phản ứng Liebermann – Burchard

Cho 1ml anhydrid acetic vào ống nghiệm ống 5 có chứa sẵn 1ml dung dịch glycosid tim trong CHCl3, lắc đều Để ống nghiệm nghiêng vào giá, cho nhẹ nhàng theo thành ống

nghiệm khoảng 1ml acid sulfuric đậm đặc, để yên (không được lắc ống)

Mô tả: giữa hai lớp thuốc thử có xuất hiện 1 vòng ngăn cách, sát phía dưới vòng này

có màu hồng, phía trên vòng này có màu xanh lá

Nhận xét: phản ứng dương tính

Kết luận: Dịch chiết có khung steroid

3.2 Phản ứng Baljet

Cho 1ml thuốc thử Baljet ( 10 giọt Baljet 1 + 10 giọt Baljet 2) vào ống nghiệm ống 1

có chứa cắn glycoside tim, lắc đều và một ống 1’ làm ống chứng chỉ chứa thuốc thử Baljet

dung dịch

hiện màu

đậm hơn so với ống chứng ống 1’

Nhận xét: phản ứng dương tính

Kết luận: Dịch chiết có vòng lacton

3.3 Phản ứng Legal

Cho vào ống nghiệm ống 2 có chứa cắn glycoside tim và ống chứng ống 2’ lần lượt:

4 giọt cồn 96% để hoà tan cắn, thêm vào đó 2 giọt dung dịch NaOH 10% trong cồn, them tiếp 3 giọt dung dịch natri nitroprussiat 0,5%

5

Mô tả: dung dịch ống 2 xuất hiện màu cam đậm hơn ống chuẩn 2’

Nhận xét: phản ứng dương tính

Kết luận: Dịch chiết có vòng lacton

3.4 Phản ứng Keller – Kiliani

Cho vào ống nghiệm ống 3 có chứa cắn glycosid tim 1ml thuốc thử Keller, khuấy kỹ cho tan Thêm nhẹ nhàng 1ml thuốc thử Kiliani dọc theo thành ống nghiệm, để yên

(không được lắc ống)

Mô tả: mặt ngăn cách của 2 lớp thuốc thử xuất hiện 1 vòng màu đỏ nâu và có màu

xanh lá khuếch tán dần lên lớp trên

Nhận xét: phản ứng dương tính

Kết luận: Dịch chiết có nhóm đường

KẾT QUẢ ĐỊNH TÍNH DỊCH CHIẾT TRÚC ĐÀO

Tổng hợp kết quả phản ứng định tính glycosid tim,

Tên phản ứng Nhận xét Kết luận

Liebermann – Burchard dương tính có khung steroid

Baljet dương tính có vòng lacton

Legal dương tính

7