KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora capsici VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ

Sự phát triển mạnh mẽ của khoa học công nghệ, nhất là công nghệ gen và công nghệ tế bào đã đóng góp to lớn vào lĩnh vực cải tiến giống cây trồng nông nghiệp phục vụ cho nhu cầu của con ngƣời. Cây hồ tiêu (Piper nigrum L.) là một mặt hàng xuất khẩu trọng yếu, mang lại nhiều lợi nhuận cho ngƣời nông dân Việt Nam. Sau những năm 1998, 1999, khi giá hồ tiêu tăng cao (60.000 đồng/kg), nhiều địa phƣơng đã tăng rất nhanh diện tích trồng hồ tiêu. Đến năm 2003, Việt Nam có tổng diện tích cây tiêu cả nƣớc tăng gần 5.000 ha so với năm 2002, dẫn đầu về sản lƣợng xuất khẩu hồ tiêu trên thế giới với 85.000 tấn (IPC). Việt Nam chiếm tỷ trọng xuất khẩu cao nhƣng chủ yếu là mặt hàng tiêu đen cấp thấp, bình quân năm 2003 xuất với giá 1.419 USD/tấn. Tháng 4 đầu năm 2004, lƣợng tiêu xuất khẩu của Việt Nam giảm 28% so với cùng kỳ năm 2003, đồng thời giá xuất khẩu cũng giảm mạnh (Phạm Thị Chín và Nguyễn Xuân Vinh, 2005). Nguyên nhân là do những năm gần đây, năng suất hạt giảm đáng kể so với những năm trƣớc, có khi mất trắng. Mặt khác, giá tiêu khô cân tại vƣờn lại bấp bênh (khoảng từ 16.000 – 20.000 ngàn đồng/kg) làm ngƣời dân không tự tin để tiếp tục canh tác. Do đó, nếu không có những giải pháp đúng đắn, kịp thời, mặt hàng tiêu xuất khẩu của Việt Nam sẽ ngày càng giảm sút về số lƣợng lẫn chất lƣợng. Nhìn chung, hiện trạng trồng tiêu của Việt Nam đang gặp phải một số hạn chế cần đƣợc khắc phục. Trong số đó, quan trọng nhất là khâu giống, vì hiện nay phần lớn các giống tiêu đang đƣợc trồng ở nƣớc ta đã lâu đời, chƣa đƣợc phục tráng tuyển chọn nên không ổn định về năng suất và khả năng kháng bệnh kém. Bên cạnh đó, kỹ thuật chọn và nhân giống còn tự phát, đơn điệu, trồng dựa vào truyền thống

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC *****000***** KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora capsici VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ Ngành học: CƠNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: TÔ THỊ NHÃ TRẦM Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC *****000***** KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora capsici VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ Giáo viên hƣớng dẫn ThS NGUYỄN THỊ KIM LINH TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 Sinh viên thực TƠ THỊ NHÃ TRẦM MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY *****000***** EFFECTS OF Phytophthora capsici EXTRACT, CHEMICAL AND PHYSICAL FACTORS ON THE GROWTH AND MUTATION OF IN VITRO BLACK PEPPER (Piper nigrum L.) GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Supervisor MSc NGUYEN THI KIM LINH Dr LE DINH DON Student TO THI NHA TRAM TERM: 2003 - 2007 LỜI CẢM TẠ Tôi xin chân thành cảm ơn: - Ban Giám Hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện cho tơi suốt thời gian học tập - Các thầy cô Bộ môn Công Nghệ Sinh Học thầy cô trực tiếp giảng dạy suốt bốn năm qua - TS Lê Đình Đơn ThS Nguyễn Thị Kim Linh tận tình hƣớng dẫn động viên thời gian thực đề tài tốt nghiệp - Các anh chị phụ trách phòng 118 105 Khu Phƣợng Vỹ thuộc Bộ Môn Bảo Vệ Thực Vật - Đại học Nông Lâm TP HCM - Cám ơn Thầy chị thuộc Viện Nghiên Cứu Hạt Nhân Đà Lạt hƣớng dẫn giúp đỡ em tận tình - Thầy Trần Ngọc Hùng chị thuộc Trung tâm Công Nghệ Sinh Học Đại học Nông Lâm TP HCM - Các bạn Nguyễn Thị Ngọc Tú, Lê Thị Bích Uyển, Nguyễn Hồng Qn, Trần Nguyễn Mỹ Châu khoa Nơng Học thực hiên đề tài Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, bạn Văn Đào, Quốc Dũng CNSH30 Anh Khoa, Tuyết Nhung, Ngọc Lợi CNSH31 toàn thể lớp CNSH29 thân yêu hỗ trợ, giúp đỡ động viên suốt thời gian làm đề tài Thành kính ghi ơn ba mẹ ngƣời thân gia đình ln tạo điều kiện động viên suốt trình học tập trƣờng Sinh viên thực TƠ THỊ NHÃ TRẦM iii TĨM TẮT TƠ THỊ NHÃ TRẦM, Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 “KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora sp VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ” Giáo viên hƣớng dẫn: ThS NGUYỄN THỊ KIM LINH TS LÊ ĐÌNH ĐƠN Đề tài đƣợc thực Bộ môn Công nghệ sinh học Đại Học Nông Lâm Tp HCM đối tƣợng hồ tiêu (Piper nigrum L.) in vitro Những kết đạt đƣợc: Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng dịch nấm Phytophthora capsici đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo Ở nồng độ dịch nấm 30 40 % mơ sẹo bị chết hoàn toàn Nồng độ 20 % tạo nhiều tế bào bất thƣờng, mơ cịn khả sống sót nồng độ cho kết đột biến tế bào mơ nhiều Thí nghiệm 2: Ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo Nồng độ 10 mg/l BA kết hợp với mg/l IBA 20 mg/l BA với mg/l IBA cho kết tạo chồi cao tối ƣu BA sử dụng nồng độ 10 mg/l kết hợp với mg/l IBA Mặt khác, nồng độ 20 mg/l IBA kết hợp với mg/l BA 1mg/l IBA kết hợp với mg/l TDZ lại cho kết đột biến cao Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng tia phóng xạ gamma đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô tiêu Ở liều xạ 20 Gy thích hợp cho sinh trƣởng phát triển mô sẹo nhƣng để tạo đột biến liều xạ 40 Gy cho tỉ lệ biến dị cao Trên chồi liều xạ 20 Gy kích thích tạo sẹo nhiều mơ xốp nhƣng liều xạ 40 60 Gy cho nhiều thể đột biến tạo đƣợc nhiều mơ bất thƣờng cấu trúc tế bào thay đổi nhiều iv SUMMARY The thesis titled “EFFECTS OF Phytophthora capsici EXTRACT, CHEMICAL AND PHYSICAL FACTORS ON THE GROWTH AND MUTATION OF IN VITRO BLACK PEPPER (Piper nigrum L.)” was carried out at Biotechnology Department and Plant Protection Department – Nong Lam University, HCMC from March 2007 to August 2007 under the supervision of MSc Nguyen Thi Kim Linh and Dr Le Dinh Don The thesis contents three experiments The first experiment was “effects of Phytophthora capsici on the growth and mutation of in vitro black pepper” In vitro black pepper callus were cultured on MS medium with Phytophthora capsici extract at 20%, 30% and 40% for 21 days The results showed that: On the medium having Phytophthora capsici extract at 30% and 40%, the mutation ratio were highter than that on the third medium on the day 14t after culture However, on these two mediums all black pepper callus were died on the day 21st after culture The second experiment was “effects of growth regulator on the growth and mutation of in vitro black pepper” In vitro black pepper callus were cultured on MS medium with BA (10 mg/l, 20 mg/l) combined with IBA (1 mg/l); IBA (10 mg/l, 20 mg/l) combined with BA (1 mg/l); and TDZ (1 mg/l, mg/l) combined with IBA (1 mg/l) The results showed that: The medium supplemented with BA (10 mg/l) combined with IBA (1 mg/l) had highest shoot ratio The medium supplemented with IBA (1 mg/l) combined with TDZ (1 mg/l) gave highest mutation ratio The last experiment was “effects of Gamma ray on the growth and mutation of in vitro black pepper” In vitro black pepper callus and shoot were treated by gamma ray at 20, 40 and 60 Gy The results showed that: Callus formation in 20 Gy treatment was higher than that the treatments of 40 and 60 Gy However, the mutation ratio in gamma ray at 40 and 60 Gy treatments were higher than that the treatments of 20 Gy v MỤC LỤC CHƢƠNG TRANG Trang tựa i Lời cảm tạ iii Tóm tắt iv Mục lục vi Danh sách bảng ix Danh sách hình x Danh sách chữ viết tắt xii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu yêu cầu 1.3 Giới hạn đề tài PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu khái quát tiêu 2.1.1 Đặc điểm tiêu 2.1.2 Tình hình phân bố 2.1.3 Tình hình sản xuất tiêu thụ giới nƣớc 2.1.3.1 Tình hình sản xuất 2.1.3.2 Tình hình tiêu thụ 2.1.4 Tình hình bệnh tiêu 2.1.4.1 Bệnh chết nhanh dây tiêu nấm Phytophthora capsici gây 2.1.4.2 Bệnh tuyến trùng 10 2.1.4.3 Bệnh khô đầu thối trái 10 2.1.4.4 Bệnh vằn virus 10 2.1.4.5 Các bệnh dinh dƣỡng bất thƣờng 11 2.1.5 Nhu cầu tiêu giống thực tế 11 2.2 Giới thiệu nấm Phytophthora capsici 12 2.3 Giới thiệu tia gamma ứng dụng thực vật 13 vi 2.3.1 Khái niệm xạ 13 2.3.2 Bức xạ gamma 14 2.3.3 Chất phóng xạ Coban (cobalt) 14 2.3.4 Cơ chế tác động xạ ion thể sống 14 2.3.5 Cơ chế gây đột biến xạ ion hóa 15 2.3.6 Những thành tựu nghiên cứu đột biến phóng xạ 16 2.3.6.1 Ngoài nƣớc 16 2.3.6.2 Trong nƣớc 17 2.4 Nhân giống vơ tính ni cấy mô tế bào tực vật 18 2.4.1 Khái niệm 18 2.4.2 Ứng dụng 18 2.4.3 Phƣơng pháp nhân phôi vô tính 19 2.4.3.1 Khái niệm 19 2.4.3.2 Ý nghĩa nuôi cấy mơ phơi vơ tính 19 2.4.3.3 Sự hình thành phơi vơ tính 19 2.4.3.4 Các kiểu phát sinh phôi soma 20 2.5 Vai trò chất điều hịa sinh truonwgr ni cấy mơ tế bào thực vật 21 2.5.1 Chất điều hòa sinh trƣởng 21 2.5.2 Một số chất điều hòa sinh tƣởng thƣờng dùng nuôi cấy mô 21 PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 24 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 24 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 24 3.3 Vật liệu nghiên cứu 24 3.3.1 Thiết bị dụng cụ nuôi cấy 24 3.3.1.1 Phịng chuẩn bị mơi trƣờng 24 3.3.1.2 Phòng cấy 24 3.3.1.3 Phòng cấy nấm 24 3.3.1.4 Phòng tăng trƣởng 24 3.3.2 Mẫu cấy điều kiện nuôi cấy 25 vii 3.3.3 Môi trƣờng nuôi cấy 25 3.3.4 Các công thức xử lý chiếu xạ 25 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 28 3.4.1 Chuẩn bị môi trƣờng nuôi cấy 28 3.4.2 Nội dung nghiên cứu 28 3.4.2.1 Khảo sát ảnh hƣởng dịch nấn Phytophthora capsici đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 28 3.4.2.2 Khảo sát ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 31 3.4.2.3 Khảo sát ảnh hƣởng tia phóng xạ gamma đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô tiêu 32 3.5 Phân tích thống kê 33 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 Ảnh hƣởng dịch chiết nấm Phytophthora capsicci đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 34 4.1.1 Tạo mô sẹo từ mẫu tiêu in vitro 34 4.1.2 Nuôi cấy mô sẹo tiêu mơi trƣờng có bổ sung dịch chiết nấm Phytophthora capsici 34 4.2 Ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 42 4.3 Ảnh hƣởng tia phóng xạ gamma đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo, chồi tiêu 51 4.3.1 Ảnh hƣởng tia gamma đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 51 4.3.2 Ảnh hƣởng tia gamma đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến chồi tiêu 58 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 64 5.1 Kết luận 64 5.2 Đề nghị 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 PHỤ LỤC 69 viii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng Trang Bảng 21: Thị trƣờng số lƣợng hạt tiêu xuất từ 1996 đến tháng đầu năm 2000 (Tại cảng Sài Gịn - Thành phố Hồ Chí Minh) Bảng 2.2: Sản lƣợng tiêu quốc gia sản xuất tiêu từ 1991-1996 Bảng 2.3: Tình hình sản xuất hồ tiêu tỉnh trọng điểm (1997 – 1999) Bảng 2.4: Năng suất sản lƣợng tiêu từ năm 1995 đến năm 1999 11 Bảng 3.1: Mơ tả thí nghiệm chủng dịch nấm Phytophthora capsici môi trƣờng nuôi cấy mô sẹo tiêu 30 Bảng 3.2: Mơ tả thí nghiệm mơi trƣờng có chất kích thích sinh trƣởng ni cấy mô sẹo tiêu 31 Bảng 3.3: Mơ tả thí nghiệm liều xạ tia gamma ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 32 Bảng 3.4: Mơ tả thí nghiệm liều xạ tia gamma ảnh hƣởng đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến chồi tiêu 33 Bảng 4.1: Ảnh hƣởng dịch nấm Phytophthora capsici đến tỉ lệ sống mô sẹo 37 Bảng 4.2: Ảnh hƣởng dịch nấm Phytophthora capsici lên mô sẹo sau tuần nuôi cấy 38 Bảng 4.3: Ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến tỉ lệ sống mơ sẹo 42 Bảng 4.4: Ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến khả tạ o phơi mô sẹo tiêu 43 Bảng 4.5: Ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến khả tạo chồi mô sẹo tiêu 44 Bảng 4.6: Ảnh hƣởng liều chiếu xạ tia γ đến khả sống sót mô sẹo tiêu 51 Bảng 4.7: Ảnh hƣởng liều xạ gamma đến khả tạo phôi mô sẹo 52 Bảng 4.8: Ảnh hƣởng liều xạ gamma đến tỉ lệ sống chồi tiêu 58 Bảng 4.9: Ảnh hƣởng liều xạ gamma đến tỉ lệ tạo chồi chồi tiêu 59 ix 2.3 Tỉ lệ tạo chồi (%) Data: TLC.HA TUAN Level codes: TLC.NTHUC Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2154.2857 359.04762 471.250 0000 Within groups 10.6667 14 76190 -Total (corrected) 2164.9524 20 missing value(s) have been excluded Table of means for TLC.HATU by TLC.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -0 24.000000 5773503 5039526 23.235516 24.764484 24.000000 5773503 5039526 23.235516 24.764484 35.000000 5773503 5039526 34.235516 35.764484 3 30.000000 5773503 5039526 29.235516 30.764484 1.000000 0000000 5039526 235516 1.764484 24.000000 5773503 5039526 23.235516 24.764484 16.333333 3333333 5039526 15.568849 17.097817 -Total 21 22.047619 1904762 1904762 21.758671 22.336567 Multiple range analysis for TLC.HATU by TLC.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 1.000000 X 16.333333 X 24.000000 X 24.000000 X 24.000000 X 3 30.000000 X 35.000000 X contrast difference +/limits - 0.00000 1.52897 - -11.0000 1.52897 * - -6.00000 1.52897 * - 23.0000 1.52897 * - 0.00000 1.52897 - 7.66667 1.52897 * * denotes a statistically significant difference Data: TLC.BA TUAN Level codes: TLC.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 4782.0000 797.00000 1287.462 0000 Within groups 8.6667 14 61905 -Total (corrected) 4790.6667 20 missing value(s) have been excluded Table of means for TLC.BATU by TLC.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 35.000000 5773503 4542568 34.310903 35.689097 45.000000 5773503 4542568 44.310903 45.689097 54.666667 3333333 4542568 53.977570 55.355763 3 45.000000 5773503 4542568 44.310903 45.689097 16.333333 3333333 4542568 15.644237 17.022430 16.333333 3333333 4542568 15.644237 17.022430 16.333333 3333333 4542568 15.644237 17.022430 -Total 21 32.666667 1716929 1716929 32.406213 32.927121 Multiple range analysis for TLC.BATU by TLC.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 16.333333 X 16.333333 X 16.333333 X 35.000000 X 45.000000 X 3 45.000000 X 54.666667 X contrast difference +/limits - -10.0000 1.37819 * - -19.6667 1.37819 * - -10.0000 1.37819 * - 18.6667 1.37819 * - 18.6667 1.37819 * - 18.6667 1.37819 * * denotes a statistically significant difference Data: TLC.BO TUAN Level codes: TLC.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 8657.8095 1442.9683 2754.758 0000 Within groups 7.3333 14 5238 -Total (corrected) 8665.1429 20 missing value(s) have been excluded Table of means for TLC.BOTU by TLC.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -0 54.666667 3333333 4178554 54.032790 55.300543 45.000000 5773503 4178554 44.366123 45.633877 45.000000 5773503 4178554 44.366123 45.633877 3 30.000000 5773503 4178554 29.366123 30.633877 1.000000 0000000 4178554 366123 1.633877 16.333333 3333333 4178554 15.699457 16.967210 1.000000 0000000 4178554 366123 1.633877 -Total 21 27.571429 1579345 1579345 27.331846 27.811011 Multiple range analysis for TLC.BOTU by TLC.NTHUC -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 1.000000 X 1.000000 X 16.333333 X 3 30.000000 X 45.000000 X 45.000000 X 54.666667 X contrast difference +/limits - 9.66667 1.26775 * - 9.66667 1.26775 * - 24.6667 1.26775 * - 53.6667 1.26775 * - 38.3333 1.26775 * - 53.6667 1.26775 * * denotes a statistically significant difference Thí nghiệm 3: Chiếu tia phóng xạ Gamma 3.1 Chiếu xạ mơ sẹo 3.1.1 Tỉ lệ sống sau chiếu xạ (%) Data: TLX.HAI TUAN Level codes: TLX.NTHUC Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1240.2500 413.41667 826.833 0000 Within groups 4.0000 50000 -Total (corrected) 1244.2500 11 missing value(s) have been excluded Table of means for TLX.HATUA by TLX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean -0 89.000000 5773503 4082483 88.334128 89.665872 64.333333 3333333 4082483 63.667461 64.999206 64.333333 3333333 4082483 63.667461 64.999206 3 69.333333 3333333 4082483 68.667461 69.999206 Total 12 71.750000 2041241 2041241 71.417064 72.082936 Multiple range analysis for TLX.HATUA by TLX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 64.333333 X 64.333333 X 3 69.333333 X 89.000000 X contrast difference +/limits - 24.6667 1.33174 * - 24.6667 1.33174 * - 19.6667 1.33174 * - 0.00000 1.33174 - -5.00000 1.33174 * - -5.00000 1.33174 * * denotes a statistically significant difference Data: TLX.BA TUAN Level codes: TLX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2261.5833 753.86111 1130.792 0000 Within groups 5.3333 66667 -Total (corrected) 2266.9167 11 missing value(s) have been excluded Table of means for TLX.BATU by TLX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 89.000000 5773503 4714045 88.231117 89.768883 64.333333 3333333 4714045 63.564450 65.102217 60.000000 5773503 4714045 59.231117 60.768883 3 52.333333 3333333 4714045 51.564450 53.102217 -Total 12 66.416667 2357023 2357023 66.032225 66.801108 Multiple range analysis for TLX.BATU by TLX.NTHUC -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 52.333333 X 60.000000 X 64.333333 X 89.000000 X contrast difference +/limits - 24.6667 1.53777 * - 29.0000 1.53777 * - 36.6667 1.53777 * - 4.33333 1.53777 * - 12.0000 1.53777 * - 7.66667 1.53777 * * denotes a statistically significant difference Data: TLX.BO TUAN Level codes: TLX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 4408.9167 1469.6389 2204.458 0000 Within groups 5.3333 6667 -Total (corrected) 4414.2500 11 missing value(s) have been excluded Table of means for TLX.BOTU by TLX.NTHUC Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 89.000000 5773503 4714045 88.231117 89.768883 60.000000 5773503 4714045 59.231117 60.768883 48.333333 3333333 4714045 47.564450 49.102217 3 37.666667 3333333 4714045 36.897783 38.435550 Total 12 58.750000 2357023 2357023 58.365558 59.134442 Multiple range analysis for TLX.BOTU by TLX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 37.666667 X 48.333333 X 60.000000 X 89.000000 X contrast difference +/limits - 29.0000 1.53777 * - 40.6667 1.53777 * - 51.3333 1.53777 * - 11.6667 1.53777 * - 22.3333 1.53777 * - 10.6667 1.53777 * * denotes a statistically significant difference 3.1.2 Tỉ lệ tạo phôi sau chiếu xạ (%) Data: PX.HA TUAN Level codes: PX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 991.33333 330.44444 495.667 0000 Within groups 5.33333 66667 -Total (corrected) 996.66667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for PX.HATU by PX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 25.666667 3333333 4714045 24.897783 26.435550 48.666667 3333333 4714045 47.897783 49.435550 45.000000 5773503 4714045 44.231117 45.768883 3 34.000000 5773503 4714045 33.231117 34.768883 Total 12 38.333333 2357023 2357023 37.948892 38.717775 Multiple range analysis for PX.HATU by PX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 25.666667 X 3 34.000000 X 45.000000 X 48.666667 X contrast difference +/limits - -23.0000 1.53777 * - -19.3333 1.53777 * - -8.33333 1.53777 * - 3.66667 1.53777 * - 14.6667 1.53777 * - 11.0000 1.53777 * -* denotes a statistically significant difference Data: PX.BA TUAN Level codes: PX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1345.0000 448.33333 538.000 0000 Within groups 6.6667 83333 -Total (corrected) 1351.6667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for PX.BATU by PX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 34.000000 5773503 5270463 33.140362 34.859638 56.000000 5773503 5270463 55.140362 56.859638 48.666667 3333333 5270463 47.807029 49.526304 3 30.000000 5773503 5270463 29.140362 30.859638 -Total 12 42.166667 2635231 2635231 41.736848 42.596485 Multiple range analysis for PX.BATU by PX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 30.000000 X 34.000000 X 48.666667 X 56.000000 X contrast difference +/limits - -22.0000 1.71928 * - -14.6667 1.71928 * - 4.00000 1.71928 * - 7.33333 1.71928 * - 26.0000 1.71928 * - 18.6667 1.71928 * * denotes a statistically significant difference Data: PX.BO TUAN Level codes: PX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 411.00000 137.00000 137.000 0000 Within groups 8.00000 1.00000 -Total (corrected) 419.00000 11 missing value(s) have been excluded Table of means for PX.BOTU by PX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 45.000000 5773503 5773503 44.058314 45.941686 41.000000 5773503 5773503 40.058314 41.941686 34.000000 5773503 5773503 33.058314 34.941686 3 30.000000 5773503 5773503 29.058314 30.941686 Total 12 37.500000 2886751 2886751 37.029157 37.970843 Multiple range analysis for PX.BOTU by PX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 30.000000 X 34.000000 X 41.000000 X 45.000000 X contrast difference +/limits - 4.00000 1.88337 * - 11.0000 1.88337 * - 15.0000 1.88337 * - 7.00000 1.88337 * - 11.0000 1.88337 * - 4.00000 1.88337 * * denotes a statistically significant difference 3.2 Chiếu xạ mô chồi 3.2.1 Tỉ lên sống sau chiếu xạ (%) Data: LX.HA TUAN Level codes: LX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1330.2500 443.41667 532.100 0000 Within groups 6.6667 83333 -Total (corrected) 1336.9167 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LX.HATUA by LX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 89.333333 3333333 5270463 88.473696 90.192971 73.000000 5773503 5270463 72.140362 73.859638 78.000000 5773503 5270463 77.140362 78.859638 3 60.000000 5773503 5270463 59.140362 60.859638 Total 12 75.083333 2635231 2635231 74.653515 75.513152 Multiple range analysis for LX.HATUA by LX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -3 60.000000 X 73.000000 X 78.000000 X 89.333333 X contrast difference +/limits - 16.3333 1.71928 * - 11.3333 1.71928 * - 29.3333 1.71928 * - -5.00000 1.71928 * - 13.0000 1.71928 * - 18.0000 1.71928 * * denotes a statistically significant difference Data: LX.BA TUAN Level codes: LX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2042.0000 680.66667 816.800 0000 Within groups 6.6667 83333 -Total (corrected) 2048.6667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LX.BATU by LX.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 88.666667 3333333 5270463 87.807029 89.526304 69.000000 5773503 5270463 68.140362 69.859638 73.000000 5773503 5270463 72.140362 73.859638 3 52.000000 5773503 5270463 51.140362 52.859638 Total 12 70.666667 2635231 2635231 70.236848 71.096485 Multiple range analysis for LX.BATU by LX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 52.000000 X 69.000000 X 73.000000 X 88.666667 X contrast difference +/limits - 19.6667 1.71928 * - 15.6667 1.71928 * - 36.6667 1.71928 * - -4.00000 1.71928 * - 17.0000 1.71928 * - 21.0000 1.71928 * * denotes a statistically significant difference Data: LX.BO TUAN Level codes: LX.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 3460.2500 1153.4167 1384.100 0000 Within groups 6.6667 8333 -Total (corrected) 3466.9167 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LX.BOTU by LX.NTHUC Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 89.000000 5773503 5270463 88.140362 89.859638 69.000000 5773503 5270463 68.140362 69.859638 57.000000 5773503 5270463 56.140362 57.859638 3 42.666667 3333333 5270463 41.807029 43.526304 Total 12 64.416667 2635231 2635231 63.986848 64.846485 Multiple range analysis for LX.BOTU by LX.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 42.666667 X 57.000000 X 69.000000 X 89.000000 X contrast difference +/limits - 20.0000 1.71928 * - 32.0000 1.71928 * - 46.3333 1.71928 * - 12.0000 1.71928 * - 26.3333 1.71928 * - 14.3333 1.71928 * * denotes a statistically significant difference 3.2.2 Tỉ lệ tạo chồi sau chiếu xạ (%) Data: LXC.HA TUAN Level codes: LXC.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 866.25000 288.75000 866.250 0000 Within groups 2.66667 33333 -Total (corrected) 868.91667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LXC.HATU by LXC.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 77.666667 3333333 3333333 77.122984 78.210349 65.666667 3333333 3333333 65.122984 66.210349 60.333333 3333333 3333333 59.789651 60.877016 3 54.666667 3333333 3333333 54.122984 55.210349 Total 12 64.583333 1666667 1666667 64.311492 64.855175 Multiple range analysis for LXC.HATU by LXC.NTHUC -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -3 54.666667 X 60.333333 X 65.666667 X 77.666667 X -contrast difference +/limits - 12.0000 1.08737 * - 17.3333 1.08737 * - 23.0000 1.08737 * - 5.33333 1.08737 * - 11.0000 1.08737 * - 5.66667 1.08737 * * denotes a statistically significant difference Data: LXC.BA TUAN Level codes: LXC.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1708.3333 569.44444 854.167 0000 Within groups 5.3333 66667 -Total (corrected) 1713.6667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LXC.BATU by LXC.NTHUC -Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 78.000000 5773503 4714045 77.231117 78.768883 73.000000 5773503 4714045 72.231117 73.768883 54.666667 3333333 4714045 53.897783 55.435550 3 49.666667 3333333 4714045 48.897783 50.435550 Total 12 63.833333 2357023 2357023 63.448892 64.217775 Multiple range analysis for LXC.BATU by LXC.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 49.666667 X 54.666667 X 73.000000 X 78.000000 X contrast difference +/limits - 5.00000 1.53777 * - 23.3333 1.53777 * - 28.3333 1.53777 * - 18.3333 1.53777 * - 23.3333 1.53777 * - 5.00000 1.53777 * * denotes a statistically significant difference Data: LXC.BO TUAN Level codes: LXC.NTHUC Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 3904.3333 1301.4444 1952.167 0000 Within groups 5.3333 6667 -Total (corrected) 3909.6667 11 missing value(s) have been excluded Table of means for LXC.BOTU by LXC.NTHUC Stnd Error Stnd Error 95 % LSD Level Count Average (internal) (pooled s) intervals for mean 78.000000 5773503 4714045 77.231117 78.768883 73.000000 5773503 4714045 72.231117 73.768883 44.666667 3333333 4714045 43.897783 45.435550 3 35.666667 3333333 4714045 34.897783 36.435550 Total 12 57.833333 2357023 2357023 57.448892 58.217775 Multiple range analysis for LXC.BOTU by LXC.NTHUC Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 35.666667 X 44.666667 X 73.000000 X 78.000000 X contrast difference +/limits - 5.00000 1.53777 * - 33.3333 1.53777 * - 42.3333 1.53777 * - 28.3333 1.53777 * - 37.3333 1.53777 * - 9.00000 1.53777 * -* denotes a statistically significant difference ... đề tài: “KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora capsici VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ” 1.2 Mục tiêu u cầu... 3.4.2.1 Khảo sát ảnh hƣởng dịch nấn Phytophthora capsici đến sinh trƣởng phát triển khả tạo đột biến mô sẹo tiêu 28 3.4.2.2 Khảo sát ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng đến sinh trƣởng. .. SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA DỊCH NẤM Phytophthora sp VÀ CÁC TÁC NHÂN HÓA LÝ ĐẾN SỰ SINH TRƢỞNG VÀ KHẢ NĂNG TẠO ĐỘT BIẾN CỦA CÂY TIÊU (Piper nigrum L.) NUÔI CẤY MÔ” Giáo viên hƣớng dẫn: ThS NGUYỄN THỊ KIM