Nghiên cứu ảnh hưởng của một số cơ chất đến sinh trƣởng phát triển và năng suất nấm đông trùng hạ thảo (cordyceps militaris) tại trƣờng đại học hồng đức

TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC KHOA NÔNG LÂM NGƢ NGHIỆP LÕ THỊ TÁM BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ CƠ CHẤT ĐẾN SINH TRƢỞNG PHÁT TRIỂN VÀ NĂNG SUẤT NẤM ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO (CORDYCEPS MILITARIS) TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC Ngành đào tạo: Nơng học THANH HĨA, 2019 TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC KHOA NÔNG LÂM NGƢ NGHIỆP BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ CƠ CHẤT ĐẾN SINH TRƢỞNG PHÁT TRIỂN VÀ NĂNG SUẤT NẤM ĐÔNG TRÙNG HẠ THẢO (CORDYCEPS MILITARIS) TẠI TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC Sinh viên: Lò Thị Tám Lớp: K18 – Nơng Học Khố: 2015 - 2019 Giảng viên hƣớng dẫn: ThS Nguyễn Thị Thu Hƣờng THANH HÓA, NĂM 2019 LỜI CẢM ƠN Trong trình thực tập cuối khóa, đồng thời nội dung hồn thành chƣơng trình học nhà trƣờng, tơi nhận đƣợc quan tâm giúp đỡ Ban Giám hiệu, Ban chủ nhiệm thầy cô giáo Khoa Nông - Lâm - Ngƣ nghiệp Trƣờng Đại học Hồng Đức Tôi xin bày tỏ lịng biết ơn tới: - Cơ giáo: Nguyễn Thị Thu Hƣờng - Các thầy cô giáo môn Khoa học Cây trồng - Ban chủ nhiệm khoa Nông - Lâm - Ngƣ nghiệp, Trƣờng Đại học Hồng Đức Đã tận tình giúp đỡ, hƣớng dẫn, đóng góp ý kiến, tạo điều kiện thuận lợi để thực hồn thành báo cáo khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cô giáo khu thí nghiệm thực hành Trƣờng Đại học Hồng Đức giúp đỡ tơi q trình tơi thực tập khu thí nghiệm Tơi xin chân thành cảm ơn! Thanh Hóa, ngày……tháng……năm 2019 Sinh viên Lị Thị Tám i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU iii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Lý chọn đề tài 1.2 Mục tiêu, yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu: 1.2.2 Yêu cầu cần đạt 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu nấm đông trùng hạ thảo 2.2 Gía trị dƣợc liệu Đơng trùng hạ thảo 2.2.1.Thành phần hóa học 2.2.2 Các thành phần có giá trị dƣợc liệu 2.2.3 Tác dụng Đông trùng hạ thảo 2.3 Các yếu tố ảnh hƣởng đến sinh trƣởng nấm Đông trùng hạ thảo 2.3.1 Ảnh hƣởng dinh dƣỡng 2.3.2 Ảnh hƣởng nuôi cấy 10 2.4.Các nghiên cứu Đông trung hạ thảo Việt Nam giới 11 2.4.1.Các nghiên cứu Việt Nam 11 2.4.2 Các nghiên cứu giới 13 PHẦN 3.VẬT LIỆU, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Vật liệu nghiên cứu 15 3.2 Nội dung nghiên cứu 15 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 15 3.3.1 Thời gian, địa điểm 15 3.3.2 Cơng thức thí nghiệm 15 3.3.3 Quy trình kỹ thuật ni trồng nấm Đông trùng hạ thảo 16 3.3.4 Chỉ tiêu theo dõi phƣơng pháp theo dõi tiêu 16 3.3.5 Hiệu nuôi trồng 17 3.3.6 Phƣơng pháp xử lý số liệu 17 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 18 ii 4.1 Sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 18 4.2 Ảnh hƣởng chất đến thời gian sinh trƣởng, phát triển nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 19 4.3 Ảnh hƣởng môi trƣờng tổng hợp đến tỷ lệ nhiễm mốc nấm đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris 21 4.4 Ảnh hƣởng chất đến khả sinh trƣởng, phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 22 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến suất nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 23 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 24 PHẦN KẾT LUẬN- KIẾN NGHỊ 26 5.1 Kết luận 26 5.2 Kiến nghị 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO 27 iii DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 4.1 Sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm 18 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng chất đến thời gian sinh trƣởng, phát triển nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 20 Bảng 4.3 Tỷ lệ nhiễm bệnh nấm Đông trùng hạ thảo 21 Bảng 4.4 Ảnh hƣởng chất đến khả sinh trƣởng, phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 22 Bảng 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến suất nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 24 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) 25 iii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Lý chọn đề tài Trong năm gần đây, nuôi trồng nấm nấm dƣợc liệu có bƣớc phát triển nhảy vọt nhiều nƣớc có Việt Nam Trong số loại nấm dƣợc liệu, nấm Đông trùng hạ thảo đƣợc xem vị thuốc có nhiều tác dụng chữa bệnh đồng thời đƣợc sử dụng cách rộng rãi nhƣ thực phẩm chức để tăng cƣờng hệ miễn dịch, hỗ trợ cho sức khỏe giúp gia tăng tuổi thọ Ngày nay, loại dƣợc phẩm ngày phổ biến diện thị trƣờng khắp giới Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) lồi nấm ký sinh trùng đƣợc sử dụng nhƣ loại dƣợc liệu quý y học cổ truyền Trung Quốc t xa xƣa đến Đông trùng hạ thảo chứa nhiều hoạt chất sinh học quý nhƣ nucleosides, cordycepin, adenosine, polysaccharides, ergosterol, mannitol… có giá trị y học cao, có khả ức chế phát triển tế bào ung thƣ, cải thiện sản xuất insulin, kháng viêm, chống oxi hóa ức chế phát triển tế bào Leukemia U937 Trên giới, nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) đƣợc nhà khoa học nghiên cứu thu đƣợc nhiều thành tựu có giá trị, đặc biệt nghiên cứu điều kiện ảnh hƣởng nuôi cấy thành công môi trƣờng nhân tạo để tạo hoạt chất cordycepin adennosine t hệ sợi nấm Giống nấm (Cordyceps militaris) đƣợc nuôi cấy phổ biến môi trƣờng tổng hợp (nhộng tằm gạo lứt) môi trƣờng nhộng tằm nguyên Việc nuôi cấy trực tiếp nhộng tằm nguyên đòi hỏi kĩ thuật cao phức tạp tỷ lệ phát triển thành công tƣơng đối thấp, khoảng 30% Ngoài nhộng tằm nguyên gạo lứt, nhiều chất hữu khác nhƣ bột cám, bột ngô, hạt kê, hạt hƣớng dƣơng, lúa mì… đƣợc sử dụng để thay Vì vậy, nghiên cứu ni trồng Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) chất hợp chất hữu khác nhƣ đánh giá tình hình sinh trƣởng, phát triển suất loại nấm nhằm tăng quy mô sản xuất, nâng cao suất, chất lƣợng góp phần giảm giá thành sản phẩm đáp ứng nhu cầu thị trƣờng địa phƣơng nƣớc cần thiết Xuất phát t sở lý luận thực tiễn trên, tiến hành thực đề tài “Nghiên cứu ảnh hưởng số chất đến sinh trưởng, phát triển suất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) trường Đại học Hồng Đức” 1.2 Mục tiêu, yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục tiêu: Xác định ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris), tạo sở phổ biến nhân rộng, góp phần giảm giá thành sản phẩm nâng cao thu nhập địa bàn tỉnh Thanh Hóa 1.2.2 Yêu cầu cần đạt - Xác định đƣợc tiêu sinh trƣởng, phát triển suất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) số chất; - Đánh giá đƣợc hiệu kinh tế mơ hình ni trồng nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) số chất 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học Kết nghiên cứu đề tài góp phần cung cấp liệu khoa học mối quan hệ chất nuôi cấy với khả sinh trƣởng, phát triển suất nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) trƣờng Đại học Hồng Đức 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn Kết nghiên cứu đề tài sở để khuyến cáo, nhân rộng mô hình ni trồng nấm Đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris), góp phần giảm giá thành sản phẩm nâng cao thu nhập cho ngƣời dân địa bàn tỉnh Thanh Hóa PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Giới thiệu nấm đông trùng hạ thảo Nấm dƣợc liệu t lâu phần quan trọng văn hóa văn minh nhân loại, đặc biệt loài giống Cordyceps đƣợc đánh giá cao chứa nhiều hợp chất dƣợc liệu (McKenna cộng sự., 2002) Giống Cordyceps có hai lồi đƣơc nghiên cứu nhiều chiết xuất sản xuất có giá tri dƣợc liệu gía trị kinh tế cao (Liu cộng sự., 2001; Li cộng sự., 2006) Nấm đông trùng hạ thảo Ophiocordyceps sinensis (hay gọi Cordyceps sinensis) loại nấm dƣợc liệu có phân bố hạn chế tƣ nhiên đƣợc nuôi trồng điều kiện hoang dã, lồi nấm chƣa đƣơc ni trồng thành cơng mơi trƣờng nhân tạo, sản lƣơng nấm thu đƣợc không đáp ứng đủ nhu cầu thị trƣờng (Livà cộng 2006; Stone 2008; Zhang cộng 2012) Lồi đơng trùng hạ thảo Cordyceps militaris (thƣờng đƣợc gọi nấm cam sâu bƣớm), chứa hợp chất hóa học tƣơng tự nhƣ O.sinensis, nhƣng dễ dàng ni trồng mơi trƣờng nhân tạo (Li cộng 1995; Dong cộng sự., 2012) Hiên nay, có nhiều nghiên cứu quy tr quy trình ni trồng nấm C militarisis nhằm thay cho lồi O Sinensis có nhiều nghiên cứu quan trọng gen, nhu cầu dinh dƣỡng, môi trƣờng ni cấy, đặc tính sinh hóa dƣợc lý củ a nấm C militaris Gần đây, gen hoàn chỉnh C militaris cũ ng đƣợc giải trình tự làm sở cho nhiều nghiên cứu sâu loai nấm nà y (Zheng cộng sự, 2011) Có 400 phân lồi Cordycepss tìm thấy mơ tả, nhiên có khoảng 36 lồi đƣợc ni trồng điều kiện nhân tạo để sản xuất thể (Wang, 1995; Sung, 1996; Li cộng sự, 2006) Trong số lồi này, có lồi C militaris đƣợc trồng quy mơ lớn có dƣợc tính tốt có thời gian sản xuất ngắn (Li cộng sự, 2006) Quả thể nấm Cordyceps militaris dùng làm thực phẩm, dùng hầm, súp, trà nƣớc Đông Nam Á nhƣ Hongkong, Đài Loan, Trung Quốc Lƣơng an toàn t 2.5 g kg thể (Che cộng sự, 2003) Quả thể sinh khối nấm đƣợc sử dung làm thuốc bồi bổ sức khỏe nhƣ nƣớc uống, viên nhộng, rƣợu, dấm, trà , yogurt, nƣớc chấm (Wang cộng sự, 2006) Các loại thuốc t nấm dùng trì chức thận, phổi, chống lão hóa, điều hịa giấc ngủ , viêm phế quản mãn tính (Das cộng sự., 2010) Hiện có 30 loai sản phẩm chăm sóc sức khỏe t C militaris thi trƣờng (Huang cộng sự., 2010) Hình Nấm đơng trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Nấm Cordyceps militaris thuộc giới Nấm, chi Ascomycota, lớp Sordariomycetes, Hypocreales, họ Cordycipitaceae, giống Cordyceps loài C Militaris Tên khoa học Cordyceps militaris Nấm đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris loài nấm ký sinh bƣớm sâu bƣớm, có màu cam, chiều dài 8-10 cm Đầu thể nấm có đốm màu cam sáng Quả thể nấm nhô lên t xác ấu trùng nhộng Các nang bào tử dài t 300510 micro met, bề rộng micro met Các nang bào tử hình sợi, khơng màu phân đoạn kích thƣớc 3.5 -6 × 1- 1.5 micro mét Các nang bào tử điều kiện nghèo dinh dƣỡng đứt nảy chồi tạo bào tử thứ cấp Hình 2: Quá trình phát triển nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) tự nhiên Theo kết điều tra công ty Công nghệ Baoli Laoning (Trung Quốc) cho thấy thực phẩn chức t nấm có tiềm lớn Trung Quốc đạt doanh thu 70 tỷ nhân dân tệ, Nhật Bản đạt 3,6 tỷ USD năm 1990, Mỹ đạt 3,5 tỷ USD năm 1990 - Phƣơng pháp bố trí thí nghiệm: Mỗi cơng thức thí nghiệm bố trí 20 bình ni trồng; nhắc lại lần, điều kiện nuôi cấy đảm bảo ổn định giống nhau, lƣợng giống cấy 5% bình Sử dụng bóng đèn huỳnh quang để cung cấp ánh sáng 3.3.3 Quy trình kỹ thuật nuôi trồng nấm Đông trùng hạ thảo Áp dụng quy trình cơng nghệ ni trồng nấm Đơng trùng hạ thảo phổ biến cụ thể nhƣ sau: Giống gốc Nhân giống cấp Nhân giống cấp Cấy giống môi trƣờng nuôi trồng Ƣơm sợi điều kiện tối hồn tồn Kích bật mầm thể Ni thể điều kiện phù hợp Thu hoạch 3.3.4 Chỉ tiêu theo dõi phương pháp theo dõi tiêu Tỷ lệ nhiễm mốc: Trong giai đoạn ƣơm sợi, định kỳ hàng ngày kiểm tra tình hình nhiễm mốc để loại bỏ bình ni trồng nấm bị nhiễm mốc Tính tỷ lệ nhiễm: Tỷ lệ nhiễm = (Tống số bình bị nhiễm) (tổng số bình ni trồng) x 100 16 Thời gian ƣơm sợi (ngày): Số ngày t ngày cấy giống đến có 50% số bình ni trồng có hệ sợi nấm lan trắng kín tồn bình ni trồng Thời gian hình thành thể (ngày): Số ngày t cấy giống đến có 50% số bình nuôi trồng xuất thể nấm Thời gian thu hoạch (ngày): Số ngày t cấy giống đến thu hoạch Số lƣợng thể (quả thể/bình): Đếm số lƣợng thể bình thu hoạch tính số lƣợng thể trung bình bình Chiều dài thể (mm): Đo t điểm gốc sát giá thể đến đỉnh thể dài bình thu hoạch tính chiều dài trung bình Năng suất (kg/vụ): Cân khối lƣợng thể bình sau thu hoạch 3.3.5 Hiệu nuôi trồng Lãi (VNĐ) = Tổng thu – Tổng chi Tổng thu (triệu đồng kg) = Năng suất x giá bán Tổng chi (triệu đồng kg) = Tổng chi phí (Giống, nguyên vật liệu, tiền công) 3.3.6 Phương pháp xử lý số liệu Kết thí nghiệm đƣợc xử lý chƣơng trình Excel 17 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 4.1 Sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Giống nấm đông trùng hạ thảo cấp đƣợc chuyển sang môi trƣờng nuôi giống cấp chứa nhộng tằm, chất (gạo lứt cám gạo cám ngô) khoai tây, nƣớc d a, giá đỗ, KH2PO4, KNO3, MgSO4.7H2O, triamonicitrat, inositol, pepton, glucose, cao nấm men, vitamin B1, agar Môi trƣờng sau chủng giống đƣợc nuôi nhiệt độ 220C điều kiện tối hoàn toàn để hệ sợi nấm phát triển Kết thời gian sợi nấm phủ kín bề mặt mơi trƣờng ni cấy thể bảng 4.1 Bảng 4.1 Sự sinh trƣởng phát triển hệ sợi nấm Công Thời gian thức mọc kín Đặc điểm hệ sợi nấm Sau ngày Sau ngày Hệ sợi phát triển CT1 CT2 CT3 9,8 10,2 Sau 10 ngày Hệ sợi ăn T mô hệ sợi cấy mạnh ăn lan bề kín bề mặt ban đầu, hệ sợi bắt mặt mơi trƣờng, môi trƣờng, đầu ăn lan xung dày,dai, màu dày , dai, quanh, mỏng màu trắng bông, bề màu trắng trắng mặt hệ sợi mịn bông, bề mặt 10,8 hệ sợi mịn Thời gian sợi nấm phủ kín bề mặt môi trƣờng nuôi cấy công thức thí nghiêm dao động t 9,8 ngày đến 10,8 ngày ngắn cơng thức (cơng thức đối chứng), dài công thức (công thức sử dụng bột ngơ) Khơng có khác biệt nhiều đặc điểm hệ sợi nấm công thức Cụ thể, ngày sau chủng nấm, sợi nấm bắt đầu ăn lan xung quanh có màu trắng Sau khoảng 10 ngày, hệ sợi ăn kín bề mặt mơi trƣờng, sợi dày, 18 dai, màu trắng bông, bề mặt hệ sợi mịn Kết cho thấy, nhiệt độ 220C, môi trƣờng phân lập khác nhau, hệ sợi nấm Cordyceps militaris phát triển bình thƣờng chứng tỏ thành phần dinh dƣỡng môi trƣờng tƣơng đối phù hợp với sinh trƣởng, phát triển nấm đơng trùng hạ thảo Hình 3a: Giống nấm cấp Hình 3b: Nấm sau giai đoạn ƣơm sợi 4.2 Ảnh hƣởng chất đến thời gian sinh trƣởng, phát triển nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Nấm sau chủng giống đƣợc nuôi nhiệt độ 220C điều kiện tối hoàn toàn để tơ nấm phát triển Khi tơ nấm lan đầy môi trƣờng, nhiệt độ ánh sáng đƣợc điều chỉnh nhằm kích thích hình thành thể nấm Trong nghiên cứu này, sử dụng loại chất bao gồm gạo lứt, cám gạo, bột ngô Cả ba công thức bổ sung 15% nhông tằm Ảnh hƣởng chất đến thời gian sinh trƣởng, phát triển nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) thể bảng 4.2 19 Bảng 4.2 Ảnh hƣởng chất đến thời gian sinh trƣởng, phát triển nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Công thức Thời gian hệ sợi Thời gian bắt Thời gian thu ăn kín bề mặt đầu hình thành hoạch (ngày) (ngày) thể (ngày) CT1 9,8 20 60 CT2 10,2 22 60 CT3 10,8 22 60 Kết nghiên cứu cho thấy, môi trƣờng nuôi trồng nấm khác nhau, tình hình sinh trƣởng phát triển nấm khác Thời gian hệ sợi ăn kín bề mặt công thức 1, 2, lần lƣợt 9,8; 10,2; 10,8 ngày Cả ba công thức xuất thể Tuy nhiên, có sai khác thời gian xuất thể cụ thể: công thức xuất sau 20 ngày; công thức xuất sau 22 ngày Thời gian thu hoạch đồng ba công thức 60 ngày sau chủng giống Hình 4a: Nấm chuyển vàng sau kích sáng 20 Hình 4b: Quả thể nấm 4.3 Ảnh hƣởng môi trƣờng tổng hợp đến tỷ lệ nhiễm mốc nấm đông trùng hạ thảo Cordyceps militaris Trong trình ni trồng nấm đơng trùng hạ thảo, đặc biệt giai đoạn ƣơm sợi, việc nấm nhiễm bệnh tƣợng không mong muốn ảnh hƣởng lớn đến thành công, suất chất lƣợng nấm Do môi trƣờng nuôi cấy nấm giàu dinh dƣỡng nên nấm dễ dàng bị lây nhiễm với nhiều loại vi khuẩn, nấm khác Trong nghiên cứu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo, giai đoạn ƣơm sợi tỷ lệ nhiễm nấm mốc thể bảng 4.3 biểu đồ Bảng 4.3 Tỷ lệ nhiễm bệnh nấm Đông trùng hạ thảo TT Chỉ tiêu theo dõi Số bình nhiễm (bình vụ) Tỷ lệ nhiễm (%) Cơng thức CT1 CT2 CT3 14/30 16/30 19/30 46,6% 53,3% 63,3% Tỷ lệ nhiễm mốc cao tất công thức lần lƣợt 46,6%; 53,3%; 63,3% Nguyên nhân tƣợng q trình trùng, vệ sinh dụng cụ phịng ni cấy chƣa đảm bảo, thao tác cấy chƣa thành thục Bên cạnh đó, việc sử dụng nấm giống thời gian dài làm cho giống dần bị thối hóa, khó kích bật thể dễ bị nhiễm mốc Do vậy, cần khắc phục đồng thời tất yếu tố để giảm tỷ lệ nhiễm bệnh xuống mức tối thiểu góp phần nâng cao hiệu ni trồng nấm đơng trùng hạ thảo 21 Hình 5: Nấm bị nhiễm mốc giai đoạn ƣơm sợi 4.4 Ảnh hƣởng chất đến khả sinh trƣởng, phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Ở mơi trƣờng ni trồng nấm khác yếu tố ảnh hƣởng đến tình hình sinh trƣởng phát triển nấm khác Ở đây, chất bổ sung vào môi trƣờng nuôi trồng công thức 1, lần lƣợt gạo lứt, cám gạo bột ngô Kết so sánh đƣợc thể nhƣ bảng 4.4 biểu đồ Bảng 4.4 Ảnh hƣởng chất đến khả sinh trƣởng, phát triển thể nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Công thức CT1 CT2 CT3 Số lƣợng thể trung bình (quả thể/bình) 25,2 Kích thƣớc thể TB Chiều Đƣờng dài kính (mm) (mm) 52,4 1,4 Đặc điểm thể Trọng lƣợng tƣơi thể/hộp (g) 21,2 Qủa thể nấm to v a phải, màu vàng cam 22,6 48,8 1,2 18,8 Qủa thể nấm mảnh, dài v a phải, màu vàng cam 21,4 46,2 1,2 18,2 Qủa thể nấm mảnh, dài v a phải, màu vàng cam 22 Hình 6: Nấm đơng trùng hạ thảo thời điểm thu hoạch Số lƣợng thể nấm C.militaris phu thuộc vào chất bổ sung vào môi trƣờng nuôi cấy Số lƣợng thể đạt cao công thức 1, sử dụng chất gạo lứt, 25,2 thể hộp nuôi Số lƣợng thể giảm xuống cịn 22,6 thể hộp ni cơng thức 21,4 thể hộp nuôi công thức Mặc dù ba công thức xuất thể nhƣng tiêu sinh trƣởng phát triển khác đông trùng hạ thảo bao gồm kích thƣớc, đƣờng kính thể trọng lƣợng thể hộp nuôi công thức cám gạo bột ngô thấp công thức sử dụng gạo lứt Cụ thể, tiêu chiều dài có giá trị công thức 1, 2, lần lƣợt 52,4; 48,8; 46,2cm Chỉ tiêu đƣờng kính cơng thức có giá trị 1,4mm; cơng thức cơng thức 1,2mm Chỉ tiêu trọng lƣợng thể hộp cao công thức đạt 21,2 g, tiếp đến công thức 18,8 g công thức 18,2 g Điều chứng tỏ chất dinh dƣỡng gạo lứt phù hợp cho sinh trƣởng phát triển nấm đông trùng hạ thảo so với cám gạo bột ngô 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến suất nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Năng suất nấm mục tiêu nhà nghiên cứu ứng dụng sản xuất kinh doanh Năng suất nấm Đông trùng hạ thảo cao hay thấp phụ thuộc nhiều vào yếu tố nhƣ: điều kiện nhiệt độ, độ ẩm môi trƣờng, môi trƣờng dinh dƣỡng, độ thông thống, nấm bệnh, trùng … Các chất khác 23 bổ sung vào môi trƣờng nuôi cấy điều kiện sinh trƣởng phát triển khác dẫn đến sai khác suất nấm Ảnh hƣởng số chất đến suất nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) thể bảng 4.5 biểu đồ Bảng 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến suất nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Số bình cho thu Khối lƣợng Năng suất nấm hoạch (hộp/tổng nấm tƣơi thu tƣơi (g/tổng hộp bình ni trồng) hoạch (g/hộp) ni trồng) CT1 16 21,2 339,2 CT2 14 18,8 263,2 CT3 11 18,2 200,2 Cơng thức Trong nghiên cứu chúng tơi bố trí 10 bình cơng thức, nhắc lại lần, nấm đƣợc thu hoạch sau 60 ngày chủng nấm Số bình cho thu hoạch cao công thức sử dụng gạo lứt 16 bình, cơng thức bổ sung cám gạo 14 bình cơng thức bột ngơ 12 bình Năng suất nấm tƣơi đƣợc tính số lƣợng bình cho thu hoạch nhân với khối lƣợng nấm tƣơi trung bình hộp giá trị cơng thức 1, 2, tƣơng ứng 339,2; 263,2 200,2g Nhìn chung, thể nấm đƣợc hình thành ba công thức nhƣng công thức 1, có tỷ lệ nhiễm nấm mốc cao hơn, chiều dài đƣờng kính nấm bé nên suất nấm tƣơi thấp so với công thức cách rõ rệt 4.5 Ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Hiệu kinh tế yếu tố quan trọng định mục đích cuối để đƣa thực tế sản xuất Tính đƣợc hiệu kinh tế giúp lựa chọn mức đầu tƣ hợp lý, tránh tƣợng đầu tƣ mức gây lãng phí Đồng thời giúp xác định đƣợc loại chất phù hợp v a mang lại hiệu giá trị kinh tế cao v a tiết kiệm tối đa chi phí đầu vào Kết 24 ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) thể bảng 4.6 Bảng 4.6 Ảnh hƣởng số chất đến hiệu nuôi trồng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Cơng thức Tổng chi phí Năng suất Giá thành Tổng thu Lãi Thuần (đồng/g) (đồng) (đồng) (đồng) (g) CT1 559.200 339,2 10.000 3.392.000 2.832.800 CT2 543.200 263,2 10.000 2.632.000 2.088.800 CT3 543.200 200,2 10.000 2.002.000 1.458.800 (Ghi chú: Giá 1kg gạo lứt: 40.000 VNĐ; 1kg cám gạo bột ngơ: 2000 VNĐ, kg nhộng: 120.000VNĐ; chi phí khoai tây, nước dừa hóa chất/1CT: 30.000 VNĐ; chi phí giống/CT: 300.000VNĐ; giá thành 1g đông trùng hạ thảo: 10.000VNĐ) Kết bảng 4.6 cho thấy với giá 1kg gạo lứt: 40.000 VNĐ; 1kg cám gạo bột ngô: 2000 VNĐ, kg nhộng: 120.000VNĐ; chi phí khoai tây, nƣớc d a hóa chất CT: 30.000 VNĐ; chi phí giống CT: 300.000VNĐ; giá thành 1g đơng trùng hạ thảo: 10.000VNĐ, công thức cho lãi cao 2.832.800 VNĐ; công thức 2.088.800VNĐ, thấp công thức 1.458.800 VNĐ 25 PHẦN KẾT LUẬN- KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Việc sử dụng chất khác có sai khác không đáng kể đến tỷ lệ nhiễm nấm thời gian sinh trƣởng nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) Các tiêu số lƣợng, chiều dài, đƣờng kính trọng lƣợng thể trung bình nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) đạt giá trị lớn công thức sử dụng gạo lứt Các giá trị công thức lần lƣợt 25,2 thể hộp; 52,4mm; 1,4mm 21,2g hộp Năng suất nấm tƣơi (g tổng hộp nuôi trồng) ba công thức đạt giá trị tƣơng ứng 339,2; 262,2 200,2 g Công thức bổ sung chất gạo lứt môi trƣờng nuôi cấy nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) cho lãi cao 2.832.800 đồng 5.2 Kiến nghị Cần thử nghiệm nuôi cấy nấm đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) chất khác với tỷ lệ phối trộn khác để có kết xác 26 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Phạm Quang Thu Lê Thị Xuân, Nguyễn Mạnh Hà (2009), "nghiên cứu đặc điểm sinh học hệ sợi môi trƣờng nuôi cấy khiết chủng nấm đông trùng hạo thảo Cffrtfaceps miliiaris Hồng Tiến Cơng (2010), Nghiên cứu thành phần loài nấm ĐTHT khu bảo tồn thiên nhiên Tây Yên Tử, huyện Sơn Động, tinh Bắc Giang, luận văn thạc sỹ, Đại học Thái Nguyên Nguyễn Thị Minh Hằng, Bùi Văn Thắng (2017) Nghiên cứu nuôi trồng nấm Đông trùng hạ thảo (Cordyceps militaris) giá thể tổng hợp nhộng tằm Tạp chí Khoa học Công nghệ lâm nghiệp, 4: 10-16 Trần Văn Tú (2011), Nghiên cứu thành phần loài nấm ĐTHT Vườn Quốc gia Hoàng Liên - Lào Cai, luận văn thạc sỹ, Đại học Thái Nguyên 5.Phạm Thị Thùy (2010), “Nghiên cứu phát triển nguồn nấm Beauveria Metarhizium để ứng dụng phòng tr sâu hại trồng, r ng phát nguồn nấm Cordyceps sp làm thực phẩm chức cho ngƣời”, Hội thảo Quốc gia Bệnh hại Thực vật Việt Nam, Nxb Nông nghiệp, tr.224- 231 Tài liệu nước Cha S.H., Kim J.K., Lim J.S., Yoon C.S., Koh J.H., Chang H.I., Kim S.W (2006), “Morphological characteristics of Cordyceps sinensis 16 and production of mycelia and exo-biopolymer from molasses in submerged culture”, Journal of Industrial and Engineering Chemistry, 12(1), pp.115- 120 Số hóa Trung tâm Học liệu - ĐHTN http: www.lrc-tnu.edu.vn/ 55 Choi J.N., Kim J., Lee M.Y., Park D.K., Hong Y.S., Lee C.H (2010), “Metabolomics revealed novel isoflavones and optimal cultivation time of Cordyceps militaris fermentation”, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 58, pp 4258-4267 27 Das S.K (2009), Production of anti-cancer agent cordycepin from the medicinal mushroom Cordyceps militaris, A Dissertation of Doctor of Engineering, University of Fukui, Japan 11 Hodge K.T (2003), “Clavicipitaceous anamorphs” In: Clavicipitalean fungi: Evolutionary biology, Chemistry, Biocontrol and Cultural Impacts Marcel Dekker Inc., New York, pp.75-123 12 Holliday J., Cleaver P., Loomis-Powers M., Patel D (2004), “Analysis of Quality and Techniques for Hybridization of Medicinal Fungus Cordyceps sinensis”, International Journal of Medicinal Mushrooms, 6, pp 147-160 13 Hung L.T., Keawsompong S., Hanh V.T., Sivichai S., N.L HywelJones (2009), “Effect of Temperature on Cordycepin Production in Cordyceps militaris, Thai Journal of Agricultural Science, 42 (4), pp.219-225 14 Kobayasi Y (1982), “Keys to the taxa of the genera Cordyceps and Torrubiella, Transactions of the Mycological Society of Japan, 23, pp.329- 364 15 Lee H., Kim Y.J., Kim H.W (2006), “Induction of apoptosis by Cordyceps militaris through activation of caspase-3 in leukemia HL-60 cells”, Biol Pharm Bull, 29(4), pp.670-674 28 29