Mùa hè với các điều kiện tự nhiên thuận lợi, là thời điểm để các loại vi khuẩn có hại cho mắt phát triển, lan truyền và gây bệnh. Khác với những bệnh khác là có thể dùng thuốc bằng những đường sử dụng gián tiếp như đặt, uống, tiêm …, thì những bệnh về mắt chỉ có hiệu quả cao khi thuốc sử dụng được tiếp xúc trực tiếp với mắt, vì vậy đối với các bệnh về mắt thì thuốc nhỏ (tra, rửa) mắt là dạng bào chế thích hợp. Trong thuốc nhỏ mắt để trị các bệnh lây nhiễm do vi khuẩn, hai nhóm dược chất chính là nhóm kháng sinh và nhóm corticoid. Trong các kháng sinh trị nhiễm khuẩn ở mắt, tobramycin là kháng sinh được ưu tiên hàng đầu, với ưu điểm là sinh khả dụng cao và nhất là có hoạt tính mạnh đối với trực khuẩn mủ xanh Pseudomonas aeruginosae. Còn trong nhóm corticoid, dược chất có tác dụng kháng viêm mạnh là dexamethason base. Do dexamethason base không tan trong nước nên thuốc nhỏ mắt chứa dược chất này phải được bào chế dưới dạng hỗn dịch. Trên thị trường hiện nay, hỗn dịch nhỏ mắt chứa tobramcin và dexamethason base chỉ có biệt dược Tobradex của hãng Alcon với giá thành khá cao (trung bình khoảng 45.000 đồngchai). Còn trong nước, chưa có xí nghiệp dược phẩm nào sản xuất chế phẩm lọai này. Để giảm giá thành sản phẩm cũng như làm phong phú thêm nhóm sản phẩm thuốc nhỏ mắt do trong nước sản xuất, trong khuôn khổ khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ đại học, đề tài: Bước đầu nghiên cứu bào chế hỗn dịch nhỏ mắt tobramycin và dexamethason, được thực hiện. Mục tiêu cụ thể gồm: Xây dựng công thức tối ưu của dạng thuốc hỗn dịch nhỏ mắt chứa tobramycin và dexamethason. Đề nghị một số tiêu chuẩn chất luợng cho thành phẩm.
1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH PHẠM NGUYỄN GIANG CHÂU BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỖN DỊCH NHỎ MẮT TOBRAMYCIN & DEXAMETHASON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2010 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH PHẠM NGUYỄN GIANG CHÂU BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỖN DỊCH NHỎ MẮT TOBRAMYCIN & DEXAMETHASON KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Thầy hướng dẫn: PGS TS HUỲNH VĂN HĨA Thành phố Hồ Chí Minh – 2010 LỜI CẢM ƠN Khóa luận tốt nghiệp hoàn thành thời gian từ ngày 20-4-2010 đến ngày 20-7-2010, sư hướng dẫn thầy PGS TS Huỳnh Văn Hóa; phần điều chế kiểm nghiệm tiến hành Công ty Cổ Phần Dược Phẩm Dược Liệu Pharmedic – TP Hồ Chí Minh; phần “thiết kế tối ưu hóa cơng thức” thực mơn Vi tính dược, khoa Dược – Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến thầy PGS TS Huỳnh Văn Hóa, người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ truyền đạt nhiều kinh nghiệm quý báu để khóa luận thực thành cơng tốt đẹp Trân trọng cảm ơn Công Ty Cổ Phần Dược Phẩm Dược Liệu Pharmedic, tạo điều kiện thuận lợi nguyên liệu trang thiết bị để thực khóa luận Đặc biệt gửi lời cảm ơn đến dược sĩ Nguyễn Xuân Thảo, dược sĩ Bùi Huỳnh Quốc Đạt, kỹ sư Trần Phi Vũ phòng Nghiên Cứu & Phát Triển; kỹ sư Nguyễn Hoàn Vũ, kỹ sư Nguyễn Thanh Phong phòng Kiểm Tra Chất Lượng, tập thể anh chị em hai phòng nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ hòan thành khóa luận Xin chân thành biết ơn thầy Đỗ Quang Dương – mơn Vi tính dược, cung cấp kiến thức thực công đoạn liên quan phần “thiết kế tối ưu hóa cơng thức” khóa luận Vơ biết ơn q thầy cô trường Đại học Y Dược TP HCM tận tâm dạy dỗ, truyền đạt kiến thức vơ q báu suốt năm khóa học Cuối cùng, xin nói lời cảm ơn đến thành viên lớp Dược 2005, quan tâm, động viên, giúp đỡ trình học tập thực khóa luận Phạm Nguyễn Giang Châu MỤC LỤC Trang TRANG BÌA .i TRANG PHỤ BÌA ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix DANH MỤC CÁC BẢNG x DANH MỤC CÁC HÌNH, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ xi Chương ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch 2.1.1 Định nghĩa .3 2.1.2 Đặc điểm giải phẫu sinh lý mắt .3 2.1.3 Các yêu cầu kỹ thuật chung thuốc nhỏ mắt .4 2.1.4 Các yêu cầu kỹ thuât riêng thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch 2.1.5 Các tá dược sử dụng 2.1.6 Các phương pháp điều chế 2.1.7 Bao bì 2.2 Tobramycin 10 2.2.1 Cấu trúc hóa học .10 2.2.2 Tính chất lý hóa 10 2.2.3 Tính chất dược lý 11 2.3 Dexamethason 11 2.3.1 Cấu trúc hóa học 11 2.3.2 Tính chất lý hóa 12 2.3.3 Tính chất dược lý 13 2.4 Phát triển thuốc trơ giúp vi tính 13 2.4.1 Thiết kế mô hình thực nghiệm 13 2.4.2 Tối ưu hóa cơng thức 14 2.5 Thẩm định qui trình định lượng 16 2.5.1 Tính tương thích hệ thống 16 2.5.2 Độ tuyến tính 16 2.5.3 Độ xác 17 2.5.4 Độ 17 2.6 Một số công thức thuốc tham khảo thị trường 18 Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 3.1 Nguyên liệu hóa chất 19 3.2 Máy móc, thiết bị phần mềm .19 3.3 Nghiên cứu công thức 20 3.3.1 Dược chất .20 3.3.2 Chất gây treo 21 3.3.3 Chất gây thấm 22 3.3.4 pH hệ đệm 22 3.3.5 Chất bảo quản 23 3.3.6 Chất chống oxi hóa 23 3.3.7 Chất thấm ướt bề mặt pha rắn 23 3.3.8 Chất đẳng trương hóa NaCl 23 3.4 Phương pháp điều chế .25 3.5 Thiết kế tối ưu hóa cơng thức 27 3.5.1 Thiết kế tối ưu hóa công thức .27 3.5.2 Thực nghiệm kiểm chứng .27 3.5.3 Đánh giá biến số yi 27 3.6 Thẩm định quy trình định lượng 28 3.6.1 Qui trình định lượng dexamethason .28 3.6.2 Thẩm định quy trình định lượng dexamethason .29 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 31 4.1 Lựa chọn thành phần công thức .31 4.1.1 Lựa chọn chất gây treo 31 4.1.2 Lựa chọn chất gây thấm 34 4.2 Thiết kế tối ưu hóa công thức 35 4.2.1 Các thành phần công thức 35 4.2.2 Mơ hình công thức 36 4.2.3 Dữ liệu thực nghiệm đầu vào 37 4.2.4 Tối ưu hóa cơng thức 38 4.2.5 Kiểm chứng cơng thức tối ưu hóa 40 4.3 Phân bố kích thước hạt 42 4.3.1 Mẫu pha chế 42 4.3.2 Mẫu Tobradex Alcon 43 4.4 Thẩm định quy trình định lượng dexamethason 44 4.4.1 Định lượng dexamethason 44 4.4.2 Thẩm định qui trình định lượng dexamethason 45 4.5 Đề nghị tiêu chuẩn chất lượng cho thành phẩm 48 4.5.1 Tiêu chuẩn chất lượng 48 4.5.2 Phương pháp thử 49 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Benzalkonium clorid Dược điển Hydroxypropyl cellulose BZKCl DĐ HPC Hydroxypropyl methylcellose HPMC Sắc ký lỏng áp suất cao HPLC Việt Nam VN DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Danh mục nguyên liệu sử dụng 19 Bảng 3.2 Danh mục máy móc, thiết bị sử dụng .20 Bảng 3.3 Danh mục phần mềm sử dụng 20 Bảng 3.4 So sánh dexamethason dạng muối dạng base 21 Bảng 3.5 Cơng thức sơ để tính tốn lượng NaCl dựa áp suất thẩm thấu 24 Bảng 4.6 Độ nhớt 20 oC chất gây treo khảo sát nước 31 Bảng 4.7 Chất gây treo khảo sát với nồng độ tương ứng chọn 32 Bảng 4.8 Công thức khảo sát chất gây treo 33 Bảng 4.9 Kết so sánh chất gây treo 34 Bảng 4.10 Công thức khảo sát chất gây thấm 34 Bảng 4.11 Kết khảo sát chất gây thấm 35 Bảng 4.12 Thành phần công thức .35 Bảng 4.13 Mô hình thực nghiệm 36 Bảng 4.14 Kết kiểm nghiệm tương ứng với mơ hình thực nghiệm .37 Bảng 4.15 Giá trị R2 luyện R2 thử mô hình thực nghiệm 38 Bảng 4.16 Cơng thức kiểm chứng .40 Bảng 4.17 Kết kiểm nghiệm lô thực nghiệm kiểm chứng cơng thức tối ưu hóa .41 Bảng 4.18 So sánh giá trị thực nghiệm với giá trị dự đoán 41 Bảng 4.19 Cơng thức tối ưu hóa 42 Bảng 4.20 Kết hàm lượng dexamthason chế phẩm 44 Bảng 4.21 Kết đánh giá tính tương thích hệ thống 45 Bảng 4.22 Sự tương quan diện tích đỉnh nồng độ mẫu chuẩn 46 Bảng 4.23 Kết thẩm định độ lặp lại 47 Bảng 4.24 Kết thẩm định độ 47 10 DANH MỤC HÌNH, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ Trang Hình 2.1 Giải phẫu mắt (mặt cắt ngang) .3 Hình 2.2 Câu trúc phân tử tobramycin 10 Hình 2.3 Câu trúc phân tử Dexamethason 11 Sơ đồ 3.1 Sơ đồ điều chế hỗn dịch .26 Đồ thị 4.1 Phân bố kích thước hạt mẫu thử 42 Đồ thị 4.2 Phân bố kích thước hạt mẫu Tobradex 43 Đồ thị 4.3 Sự liên quan tuyến tính diện tích đỉnh nồng độ dexamethason 46 Chương ĐẶT VẤN ĐỀ Mùa hè với điều kiện tự nhiên thuận lợi, thời điểm để loại vi khuẩn có hại cho mắt phát triển, lan truyền gây bệnh Khác với bệnh khác dùng thuốc đường sử dụng gián tiếp đặt, uống, tiêm …, bệnh mắt có hiệu cao thuốc sử dụng tiếp xúc trực tiếp với mắt, bệnh mắt thuốc nhỏ (tra, rửa) mắt dạng bào chế thích hợp Trong thuốc nhỏ mắt để trị bệnh lây nhiễm vi khuẩn, hai nhóm dược chất nhóm kháng sinh nhóm corticoid Kết thẩm định độ lặp lại quy trình định lượng dexamethason HPLC trình bày bảng 4.23 Bảng 4.23 Kết thẩm định độ lặp lại Mẫu thử Sđỉnh 4853685 4878756 4851900 4870134 4852499 4860582 H (mg/ml) 0,9111 0,9146 0,9073 0,9098 0,9032 0,9070 CV% 0,434% Do hệ số phân tán CV% = 0,434 < 2% nên quy trình định lượng dexamethason HPLC đạt yêu cầu độ lặp lại 4.4.2.4 Độ Kết thẩm định độ quy trình định lượng dexamethason HPLC, đánh giá dựa kết mức 80%, 100%, 120% lượng chất chuẩn thêm vào so với lượng mẫu thử chế phẩm, trình bày bảng 4.24 Bảng 4.24 Kết thẩm định độ STT %Cchuẩn Hlý thuyết Hthực nghiệm Độ lệch thêm vào (mg/ml) (mg/ml) (%) 1,8 1,7727 80% 1,8 1,7512 0,639% 1,8 1,7563 2,0135 100% 2,0106 0,189% 2,0059 2,2 2,1735 120% 2,2 2,1801 0,224% 2,2 2,1830 Trong Hthực nghiệm tính công thức (*) với Tỉ lệ phục hồi (%) 98,49% 97,29% 97,57% 100,67% 100,53% 100,30% 98,80% 99,09% 99,23% C: nồng độ mẫu chuẩn 0,04 mg/ml rs: giá trị trung bình diện tích đỉnh mẫu chuẩn 5348928 V: thể tích mẫu thử ml, để hàm lương dexamethason nằm khoảng tuyến tính Từ bảng 4.23 ta ghi nhận: - Các giá trị độ lệch thực nghiệm CV% < 2% - Các tỷ lệ hồi phục nằm khỏang 95 – 105% Do quy trình định lương dexamethason HPLC đạt yêu cầu độ Kết luận: Qui trình định lượng dexamethason HPLC đạt yêu cầu thẩm định 4.5 ĐỀ NGHỊ TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG CHO THÀNH PHẨM 4.5.1 Tiêu chuẩn chất lượng Hình thức: Thể lỏng, khơng mùi, nhớt, màu trắng đục lắc; hay suốt trên, cặn trắng lắng để yên thời gian dài Chế phẩm lắng đọng để yên phải dễ dàng phân tán đồng lắc phải trì phân tán đồng nhỏ thuốc để sử dụng liều Độ nhớt: khoảng 18 – 22 cP 20 oC pH: khoảng – 25 oC Chỉ số khúc xạ: n20D khoảng 1335 – 1338 Tỷ trọng: d khoảng 1,0108 – 1,0122 28 oC Giới hạn cho phép thể tích: + 10% Thử vơ khuẩn: Đạt u cầu thử vơ khuẩn Định tính tobramycin: Rf(mâu thử) = Rf(mâu chuẩn) sắc ký lớp mỏng Định lượng tobramycin: Hàm lượng tobramycin phải đạt từ 0,27 – 0,36 g C18H37N5O9 Định tính dexamethason: Thời gian lưu đỉnh mẫu thử phải trùng với thời gian lưu đỉnh mẫu chuẩn sắc ký đồ chạy HPLC Đinh lượng dexamethason: Hàm lượng dexamethason phải đạt từ 0,09 – 0,11 g C22H29FO5 Kích thước tiểu phân: Khơng có q 10 tiểu phân có kích thước lớn 10 µm Khơng có q tiểu phân có kích thước lớn 20 µm Khơng có tiểu phân có kích thước lớn 30 µm Các tiêu chuẩn pH, định tính tobramycin, định lượng tobramycin, định tính dexamethason, định lượng dexamethason xây dựng dựa DĐ Mỹ USP 32 – chuyên luận thuốc hỗn dịch nhỏ mắt Dexamethason Tobramycin trang 3761 4.5.2 Phương pháp thử Hình thức: Thử cảm quan Độ nhớt: Thử theo phương pháp III, dùng nhớt kế quay phụ lục 6.3 – DĐVN IV pH: Thử theo phụ lục 6.2 – DĐVN IV Chỉ số khúc xạ: Thử theo phụ lục 6.1 – DĐVN IV Tỷ trọng: Thử theo phương pháp dùng picnomet phụ lục 6.5 – DĐVN IV Giới hạn cho phép thể tích: Thử theo phụ lục 11.1 – DĐVN IV Thử vô khuẩn: Thử theo phụ lục 13.7 – DĐVN IV Định tính Tobramycin [13] - Mẫu thử: Cho ml hỗn dịch nhỏ mắt vào ống nghiệm, thêm 100 mg natri sulphat, phân tán cách lắc đem ly tâm, lấy phần phía cắng (tobramycin mg/ml) Lấy dịch thử cô đặc áp suất giảm để dung dịch thử có nồng độ mg/ml tobramycin (giảm 1/2 thể tích đem đặc) - Mẫu chuẩn: pha dung dịch chuẩn tobramycin nước có nồng độ mg/ml - Mẫu đối chiếu: trộn đồng lượng mẫu thử mẫu chuẩn - Pha tĩnh: bảng silica gel dùng cho sắc ký dày 0,25 mm - Pha động: methanol: nhôm hydroxy : chloroform tỉ lệ 60 : 30 : 25 - Thuốc thử: dung dịch ninhydrin (1/100) hỗn hợp butyl alcohol : pyridin (100 : 1) - Tiến hành: Chấm riêng µl dung dịch Triển khai sắc ký, đến dung môi 3/4 chiều dài bảng mỏng Lấy bảng mỏng để khơ ngồi khơng khí, làm nóng đến 110 oC 15 phút Phun bảng mỏng nóng với thuốc thử tobramycin cho vết màu hồng; vết từ dung dịch thử từ hỗn hợp dung dịch thử chuẩn phải tách rời, tương ứng với vết dung dịch chuẩn tính từ vạch xuất phát Rf = a b Trong : a khoảng cách từ điểm xuất phát đến tâm vết (cm) b khoảng cách từ điểm xuất phát đến mức dung môi đo đường vết (cm) Rf : Chỉ có giá trị từ đến Định lượng tobramycin: [13] Pha động: Hòa tan 2,0 g Tris(hydroxymethyl)aminomethan vào khoảng 800 ml nước Thêm vào 20 ml dung dịch acid sulfuric 1N, bổ sung acetonitril để 2000 ml dung dịch, trộn Để nguội lọc qua lọc 0,2 µm Điều chỉnh lại cần Thuốc thử 2,4-Dinitrofluorobenzen: chuẩn bị dung dịch 2,4-dinitrofluorobenzen cồn chứa 10mg/ml Dung dịch dùng ngày giữ lạnh không sử dụng Thuốc thử Tris(hydroxymethyl)aminomethan: chuẩn bị dung dịch trữ Tris(hydroxymethyl)aminomethan nước chứa 15 mg/ml Dung dịch trữ dùng tháng giữ lạnh không sử dụng Chuyển 40 ml dung dịch trữ vào bình định mức 200 ml thêm dimethyl sulfoxid, trộn đều, thêm dimethyl sulfoxid tới vạch trộn Dùng thuốc thử vòng [Ghi chú: nhúng chìm nước đá 10 oC, thuốc thử sử dụng lên đến giờ] Mẫu chuẩn: Cân xác khoảng 55 mg tobramycin chuẩn, cho vào bình định mức 50 ml, thêm ml acid sulfuric N thêm đủ nước để hòa tan, thêm nước đến vạch, trộn Chuyển 10 ml dung dịch vào bình định mức 50 ml thứ hai, thêm nước đến vạch, trộn Dung dịch chứa khoảng 0,22 mg/ml tobramycin chuẩn Mẫu thử: Cho 1,5 ml chế phẩm (tương đương với 4,5 mg tobramycin) vào bình định mức 50 ml, thêm nước cất đến vạch, lắc Tạo dẫn xuất tobramcin: [Ghi chú: Đun tất dung dịch nhiệt độ xấp xỉ nhau, khoảng thời gian theo dẫn Chuyển tất bình vào bể ổn nhiệt 60 oC khoảng thời gian nhau] Chuyển 4,0 ml mẫu chuẩn, 10,0 ml mẫu thử, 4,0 ml nước vào bình định mức 50 ml Ở bình thêm 10 ml Thuốc thử 2,4-Dinitrofluorobenzen 10 ml Thuốc thử Tris(hydroxymethyl)aminomethan, lắc đậy nắp Đặt bình vào bể ổn nhiệt nhiêt độ 60 ± oC, vòng 50 ± phút Lấy bình khỏi bể, để yên 10 phút Thêm acetonitril đến vạch 50 ml khoảng ml, để nguội nhiệt độ phòng, sau thêm acetonil đến vạch trộn Các dung dịch thu tương ứng dẫn xuất mẫu chuẩn, dẫn xuất mẫu thử mẫu trắng Dung dịch kiểm tra hiệu cột: chuẩn bị dung dịch p-naphtholbenzein acetonitrile, nồng độ 0,24 mg/ml Chuyển ml dung dịch vào bình định mức 10 ml, thêm dẫn xuất mẫu chuẩn đến vạch sử dụng Hệ thống sắc ký: Đầu dò UV với bước sóng 365 nm Cột: 3,9 mm x 30 cm chứa gói L1 Tốc độ dòng : ml/phút Chạy sắc ký mẫu trắng, ghi lại đáp ứng Nhận dạng đỉnh dung môi thuốc thử (làm base line) Chạy sắc ký dung dịch kiểm tra độ phân giải, ghi lại đáp ứng: Thời gian lưu khoảng 0,6 p-naphtholbenzein 1,0 tobramycin độ phân giải, R, đỉnh khơng 4,0 Chạy sắc ký dẫn xuất mẫu chuẩn, ghi lại đáp ứng: độ lệch chuẩn tương đối cho lần tiêm lặp lại không vượt 2,0 % (RSD ≤ 2%) Qui trình: tiêm thể tích (khoảng 20 µl) dẫn xuất mẫu chuẩn, dẫn xuất mẫu thử vào hệ sắc ký, ghi lại sắc ký đồ, tính diện tích đỉnh Tính lượng tobramycin (mg) phần chế phẩm lấy theo công thức sau : 0,02CE(rv/rs) C: nồng độ tobramycin mẫu chuẩn (mg/ml) E: Đương lượng tobramycin (µg/mg) ru, rs : diện tích đỉnh dẫn xuất mẫu chuẩn dẫn xuất mẫu thử Định tính Dexamethason: Dựa vào sắc ký đồ tiêu chuẩn định lượng Dexamethason HPLC.[13] Định lượng Dexamethason:[13] Chuẩn bị mẫu thử: lắc chai thuốc, loại bỏ bọt khí Chuyển 4ml chế phẩm (tương đương mg dexamethason) vào bình định mức 100 ml, bổ sung đến vạch methanol, lắc Chuẩn bị mẫu chuẩn: cân xác khoảng 25 mg dexamethason chuẩn, cho vào bình định mức 25 ml, hồ tan bổ sung đến vạch methanol, lắc Hút xác ml dung dịch vào bình định mức 100 ml, bổ sung đến vạch methanol, lắc Dung dịch chứa khoảng 0,04 mg/ml dexamethason chuẩn Pha động: Hỗn hợp nước : acetonitril tỉ lệ 55 : 45, lọc qua màng lọc thích hợp với kích thước µm nhỏ hơn, khử khí Điều chỉnh cần thiết Hệ thống sắc ký: Đầu dò UV với bước sóng 254 nm Cơt: 3,9 mm x 25 cm chứa gói L1 Tốc độ dòng : ml/phút Tiến hành sắc ký dung dịch chuẩn tính diện tích đỉnh đáp ứng; yếu tố kéo (tailing factor) đỉnh phân tích khơng lớn 1,5, suất cột khơng 1400 đĩa lý thuyết độ lệch chuẩn tương đối cho lần tiêm lặp lại không vượt 2% (RSD ≤ 2%) Tiến hành: Tiêm thể tích (khoảng 20 µl) mẫu chuẩn mẫu thử vào hệ sắc ký, đo mức đáp ứng đỉnh Tính lượng dexamethason (mg) ml hỗn dịch theo công thức sau : 100(C/V)(ru/rs) C: Nồng độ mẫu chuẩn (mg/ml) V : Thể tích chế phẩm (ml) ru, rs: diện tích đỉnh mẫu thử mẫu chuẩn Kích thước tiểu phân: Lắc mạnh chuyển 10 µl chế phẩm (tương đương với khoảng 10 µg pha rắn) vào buồng đếm lên phiến kính thích hợp quan sát kính hiển vi có độ phóng đại 100, thử theo phụ lục 11.8, phần A – DĐVN IV Đóng gói – Ghi nhãn - Bảo quản Đóng gói: đóng 5ml hỗn dịch vào chai lọ kín có dung tích lớn thể tích thuốc Nhãn: Đúng qui cách, có thêm thơng tin khơng sử dụng tuần sau mở nắp phải có thêm dòng chữ “Lắc trước dùng” Bảo quản: nơi thoáng mát Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Với thời gian làm thực nghiệm tương đối ngắn (3 tháng: từ 20 – đến 20 – 7) có nhiều khó khăn, đề tài “bước đầu nghiên cứu bào chế thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch chứa tobramycin dexamethason” thực đạt kết sau: - Xây dựng công thức thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch chứa tobramycin dexamethason, có u cầu đặc tính bào chế cao nhất, tương ứng với nguồn nguyên liệu có - Ứng dụng phần mềm máy tính (Design-Expert v 6.0.6 BC-Pharsoft) việc tìm cơng thức tối ưu hóa - Kết thực nghiệm kiểm chứng phù hợp với kết dự đốn cúa máy tính - Xác định phân bố kích thước hạt chế phẩm máy đếm hạt chuyên dụng đạt yêu cầu DĐVN IV - Quy trình định lượng dexamethason HPLC theo USP 32, thẩm định lại cho phù hợp điều kiện xí nghiệp; cho kết tốt - Đã xây dựng đề nghị số tiêu chuẩn cho thành phầm Nhưng thời gian nghiên cứu có hạn q trình thực chắn có sai sót, nên chúng tơi đề nghị phần đề tài cần thực công việc sau, để công thức thuốc đưa vào qui mô sản xuất công nghiệp: - Nghiên cứu độ ổn định chế phẩm phương pháp theo dõi tự nhiên kết hợp với phương pháp lão hóa cấp tốc - Nghiên cứu dạng bao bì để việc tái phân tán hỗn dịch sau lắng dễ - Nghiên cứu tác dụng dược lý chế phẩm - Nghiên cứu qui trình sản xuất cơng nghiệp cho chế phẩm - Hoàn chỉnh tiêu chuẩn sở cho thành phẩm để nâng cao chất lượng chế phẩm phù hợp với điều kiện xí nghiệp TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Bộ môn Bào chế (2007), Bào chế sinh dược học – tập I, Nhà xuất y học, đại học y dược TP.HCM, tr.190-213 Bộ môn Bào chế (2007), Bào chế sinh dược học – tập II, Nhà xuất y học, đại học y dược TP.HCM, tr.32-47 Bộ môn Hóa dược (2007), Hóa dược I, Đại học y dược TP.HCM, tr.111 Bộ mơn Hóa dược (2007), Hóa dược II, Đại học y dược TP.HCM, tr.444-445, 457- 458 Bộ mơn Hóa phân tích – kiểm nghiệm (2009), Giáo trình lý thuýêt kiểm nghiệm thuốc, Đại học y dược TP Hồ Chí Minh, tr.96-126 Bộ y tế (2009), Dược điển Việt Nam IV , Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.617-618, 208-209, PL-21, PL-12, PL-352 Bộ y tế, Dược thư quốc gia (2002), Nhà xuất y học, Hà Nội, tr.356-359, 928- 930 Đặng Văn Giáp (2002), Thiết kế tối ưu hóa cơng thức quy trình, Nhà xuất Y học, TP Hồ Chí Minh, tr.1-97 Đặng Văn Giáp (2003), Phân tích thống kê kiểm nghiệm dược phẩm, Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh TIẾNG ANH 10 David B.Troy, Remington (2006), Remington – The Science and Practice of Pharmacy – 21 st Edition, Lippincott Williams & Wilkins, USA, pp.260-265 11 Harry G.Brittain (2007), Profiles of Drug Substances, Excipients, and Related Methodology - Volume 33, Academic Press, USA, pp.612 12 Raymond C Rowe, Paul J Sheskey and Marian E Quinn (2010), Handbook of Pharmaceutical Excipients, Sixth edition, Pharmaceutical Press, London – Chicago, pp.317-322 13 U.S Pharmacopoeia (2009), USP 32 – NF 27 – Volume II , United Brook Press, The United States, pp.3761 Các trang web sử dụng 14 http://www.accessdata.fda.gov/scripts/cder/iig/getiigWEB.cfm Hình 15 http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/imagepages/9553.htm PHỤ LỤC Phụ lục I: khảo sát chất gây treo HPC LF 3% Nisso L 4% HPC EF 2% Chất gây treo A 0,25% Benecel M 2% Plasdon C17 10% Plasdon C30 10% Mẫu Tobradex Hình So sánh lượng chất lắng chất gây treo sau ngày Phụ lục II: khảo sát chất gây thấm Hình Lượng chất lắng tween 80 (trên) tween 20 (dưới) sau 14 ngày Phu lục III: Phiếu kết thử nghiệm phân bố kích thước hạt Filename: Mẫu thử Form of Distribution Manual Sampling Times 100 Calc Level 50 Distribution Base Area Particle Refractive Index 1.400 - 0.000i Dispersant Refractive Index 1.333 Measurement Temperature 24.6( 24.5- 24.6)(°C) Temperature Sensor Holder Sensor Scattering Light Intensity(Static) 153.20 Scattering Light Intensity(Dynamic) 77.04 Gain LOW Axis Selection LogX-LogY ISO 9276-1 Format OFF S.P Area 21843(cm2/cm3) Median 2681.5(nm) Mean 2746.9(nm) Variance 6.1719E+5(nm2) Mode 2779.6(nm) Diffusion Coefficient 1.5704E-14 (m2/s) R Parameter 2.4848E-2 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 Diameter 1.1 1.3 1.5 1.7 2.2 2.6 2.9 3.4 3.8 4.4 5.8 6.6 7.6 8.7 10 11.4 13.1 15 17.1 19.6 22.5 25.7 29.5 33.8 38.7 44.3 50.7 q (%) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Undersize 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 Diameter 87.3 100 114.5 131.2 150.3 172.1 197.1 225.8 258.6 296.2 339.3 388.6 445.1 509.8 583.9 668.7 766 877.3 1004.8 1150.9 1318.2 1509.9 1729.4 1980.8 2268.7 2598.5 2976.3 3409 3904.5 q (%) 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1.358 2.572 4.741 8.117 12.428 16.51 18.469 16.371 11.47 Undersize 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1.358 3.93 8.671 16.788 29.215 45.726 64.194 80.566 92.036 30 31 32 58.1 66.6 76.2 0 0 0 62 63 64 4472.1 5122.3 6000 5.729 1.872 0.364 97.764 99.636 100 Filename: Mẫu Tobradex Form of Distribution Manual Sampling Times 100 Calc Level 50 Distribution Base Area Particle Refractive Index 1.400 - 0.000i Dispersant Refractive Index 1.333 Measurement Temperature 24.7( 24.6- 24.7)(°C) Temperature Sensor Holder Sensor Scattering Light Intensity(Static) 149.24 Scattering Light Intensity(Dynamic) 83.77 Gain LOW Axis Selection LogX-LogY ISO 9276-1 Format OFF S.P Area 15091(cm2/cm3) Median 3980.2(nm) Mean 3975.8(nm) Variance 6.8119E+5(nm2) Mode 4153.5(nm) Diffusion Coefficient 1.5744E-14 (m2/s) R Parameter 2.0175E-2 10 11 12 13 14 Diameter 1004.8 1150.9 1318.2 1509.9 1729.4 1980.8 2268.7 2598.5 2976.3 3409 3904.5 4472.1 5122.3 6000 q (%) 0 0 0.691 1.356 2.931 6.488 12.984 21.848 26.173 19.519 8.01 Undersize 0 0 0.691 2.047 4.978 11.466 24.45 46.298 72.471 91.99 100 ... kháng viêm mạnh dexamethason base Do dexamethason base không tan nước nên thuốc nhỏ mắt chứa dược chất phải bào chế dạng hỗn dịch Trên thị trường nay, hỗn dịch nhỏ mắt chứa tobramcin dexamethason. .. đầu nghiên cứu bào chế hỗn dịch nhỏ mắt tobramycin dexamethason, thực Mục tiêu cụ thể gồm: - Xây dựng công thức tối ưu dạng thuốc hỗn dịch nhỏ mắt chứa tobramycin dexamethason - Đề nghị số tiêu... THUỐC NHỎ MẮT DẠNG HỖN DỊCH 2.1.1 Định nghĩa Thuốc nhỏ mắt dạng hỗn dịch dạng thuốc lỏng, vô khuẩn, dùng để nhỏ vào mắt, hay nhiều dược chất, có dược chất rắn khơng hòa tan, phân tán dạng hạt nhỏ