Nghiên cứu bào chế viên meloxicam có sinh khả dụng cao

Thuốc kháng viêm không steroid (NSAID, viết tắt của NonSteroidal AntiInflammatory Drugs) là một trong ba nhóm thuốc được kê đơn rộng rãi nhất trên thế giới, cùng với các thuốc tim mạch và chống ung thư. Trong ngành khớp học, thuốc kháng viêm không steroid là thuốc thiết yếu, được chỉ định trong hầu hết các bệnh khớp cấp tính, mạn tính và viêm phần mềm cạnh khớp. Thuốc cũng được sử dụng rộng rãi trong các lĩnh vực khác để điều trị đau hậu phẫu, chấn thương thể thao, đau nửa đầu, cơn đau quặn thận, viêm họng, sau nhổ răng, đau sau sinh, đau bụng kinh... Theo một báo cáo gần đây, nước ta có khoảng 56 % dân số mắc các bệnh rối loạn về xương khớp, trong đó có số không nhỏ dùng NSAID. Bên cạnh tác dụng kháng viêm giảm đau rất tốt, các NSAID còn gây các tác dụng phụ, đáng kể là gây tổn hại niêm mạc dạ dàytá tràng, làm viêm loét và có thể gây xuất huyết tiêu hóa. Gần đây, các nhà điều trị có sự chọn lựa mới là sử dụng thuốc NSAID ức chế chọn lọc cyclooxygenase2 (COX2) để giảm thiểu nguy cơ bệnh nhân bị tổn hại niêm mạc dạ dàytá tràng do phải sử dụng dài hạn NSAID 4. Meloxicam là thuốc kháng viêm nonsteroid thuộc họ oxicam, được công nhận ức chế COX2 ưu thế hơn COX1 15, 16, 30, 38, có hoạt tính chống viêm khớp mạnh và phổ kháng viêm rộng cùng với đặc tính ít gây kích ứng dạ dày và các mô như da, ruột, mắt 13, 15, 16, 19, 30. Tuy nhiên, độ tan trong nước và tính thấm ướt (wettability) rất thấp của meloxicam có thể dẫn đến thay đổi sinh khả dụng, là căn nguyên của những khó khăn trong việc xây dựng công thức đường uống hoặc đường tiêm. Để khắc phục những hạn chế này, việc làm tăng độ tan trong nước của meloxicam là vấn đề quan trọng trong trị liệu. Một trong những phương pháp giúp làm tăng độ tan của meloxicam là kỹ thuật tạo phức hợp chủ thể khách thể (host – guest) giữa meloxicam với betacyclodextrin cho phép từng phân tử meloxicam phóng thích vào niêm mạc dạ dàyruột, thay vì ở dạng tinh thể kém tan. Khi gắn vào phân tử betacyclodextrin, tốc độ hòa tan trong nước của meloxicam được tăng lên đáng kể dẫn đến không chỉ cải thiện sinh khả dụng của thuốc mà còn xuất hiện sớm nồng độ thuốc trong huyết tương 18. Do đó, có thể làm cho tác dụng kháng viêm giảm đau của meloxicam nhanh và mạnh hơn. Dạng viên nén chứa meloxicam đã được sản xuất tại nhiều nhà máy dược phẩm trong nước, nhưng chưa có dạng bào chế nào có chứa phức hợp meloxicambetacyclodextrin. Do đó, đề tài “Nghiên cứu bào chế viên meloxicam có sinh khả dụng cao” được tiến hành trên cơ sở tạo phức hợp meloxicambetacyclodextrin có giá thành hợp lý và phù hợp với điều kiện nghiên cứu trong nước. Mục tiêu tổng quát của đề tài được cụ thể qua các mục tiêu sau: Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng meloxicam trong phức hợp meloxicambetacyclodextrin. Nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của các phương pháp tạo phức hợp meloxicambetacyclodextrin với các tỉ lệ khác nhau trên mức độ làm tăng độ hòa tan của hoạt chất meloxicam. Thiết kế mô hình và tối ưu hóa công thức điều chế viên nén chứa phức meloxicambetacyclodextrin.

MỞ ĐẦU

Thuốc kháng viêm không steroid (NSAID, viết tắt của Non-Steroidal Inflammatory Drugs) là một trong ba nhóm thuốc được kê đơn rộng rãi nhất trên thếgiới, cùng với các thuốc tim mạch và chống ung thư Trong ngành khớp học, thuốckháng viêm không steroid là thuốc thiết yếu, được chỉ định trong hầu hết các bệnhkhớp cấp tính, mạn tính và viêm phần mềm cạnh khớp Thuốc cũng được sử dụngrộng rãi trong các lĩnh vực khác để điều trị đau hậu phẫu, chấn thương thể thao, đaunửa đầu, cơn đau quặn thận, viêm họng, sau nhổ răng, đau sau sinh, đau bụng kinh Theo một báo cáo gần đây, nước ta có khoảng 56 % dân số mắc các bệnh rối loạn vềxương khớp, trong đó có số không nhỏ dùng NSAID Bên cạnh tác dụng khángviêm giảm đau rất tốt, các NSAID còn gây các tác dụng phụ, đáng kể là gây tổn hạiniêm mạc dạ dày-tá tràng, làm viêm loét và có thể gây xuất huyết tiêu hóa Gần đây,các nhà điều trị có sự chọn lựa mới là sử dụng thuốc NSAID ức chế chọn lọccyclo-oxygenase-2 (COX-2) để giảm thiểu nguy cơ bệnh nhân bị tổn hại niêm mạc

Anti-dạ dày-tá tràng do phải sử dụng dài hạn NSAID [4]

Meloxicam là thuốc kháng viêm non-steroid thuộc họ oxicam, được công nhận ứcchế COX-2 ưu thế hơn COX-1 [15], [16], [30], [38], có hoạt tính chống viêm khớpmạnh và phổ kháng viêm rộng cùng với đặc tính ít gây kích ứng dạ dày và các mônhư da, ruột, mắt [13], [15], [16], [19], [30] Tuy nhiên, độ tan trong nước và tínhthấm ướt (wettability) rất thấp của meloxicam có thể dẫn đến thay đổi sinh khảdụng, là căn nguyên của những khó khăn trong việc xây dựng công thức đườnguống hoặc đường tiêm Để khắc phục những hạn chế này, việc làm tăng độ tan trongnước của meloxicam là vấn đề quan trọng trong trị liệu

Một trong những phương pháp giúp làm tăng độ tan của meloxicam là kỹ thuật tạophức hợp chủ thể - khách thể (host – guest) giữa meloxicam với beta-cyclodextrincho phép từng phân tử meloxicam phóng thích vào niêm mạc dạ dày-ruột, thay vì ở

dạng tinh thể kém tan Khi gắn vào phân tử beta-cyclodextrin, tốc độ hòa tan trongnước của meloxicam được tăng lên đáng kể dẫn đến không chỉ cải thiện sinh khảdụng của thuốc mà còn xuất hiện sớm nồng độ thuốc trong huyết tương [18] Do đó,

có thể làm cho tác dụng kháng viêm giảm đau của meloxicam nhanh và mạnh hơn.Dạng viên nén chứa meloxicam đã được sản xuất tại nhiều nhà máy dược phẩmtrong nước, nhưng chưa có dạng bào chế nào có chứa phức hợp meloxicam-beta-

cyclodextrin Do đó, đề tài “Nghiên cứu bào chế viên meloxicam có sinh khả dụng cao” được tiến hành trên cơ sở tạo phức hợp meloxicam-beta-cyclodextrin có

giá thành hợp lý và phù hợp với điều kiện nghiên cứu trong nước

Mục tiêu tổng quát của đề tài được cụ thể qua các mục tiêu sau:

- Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng meloxicam trong phức hợpmeloxicam-beta-cyclodextrin

- Nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng của các phương pháp tạo phức hợp beta-cyclodextrin với các tỉ lệ khác nhau trên mức độ làm tăng độ hòa tan củahoạt chất meloxicam

meloxicam Thiết kế mô hình và tối ưu hóa công thức điều chế viên nén chứa phứcmeloxicam-beta-cyclodextrin

So sánh độ hòa tan với sản phẩm đối chiếu.Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1 THUỐC KHÁNG VIÊM KHÔNG STEROID [4]

Viêm được xem là hiện tượng tổng hợp các phản ứng xảy ra ở một nơi nào đó trong

cơ thể khi xuất hiện tác nhân gây viêm, biểu hiện bên ngoài là sưng, nóng, đỏ, đau,

… Nơi bị viêm có ở bất cứ chỗ nào nhưng thường nhất là các khớp xương, nội tạng,đặc biệt là các cơ quan ở vùng bụng, hệ thần kinh trung ương Tác nhân gây viêm

thuộc nhiều nguồn gốc khác nhau: sinh học (vi khuẩn, siêu vi, vi nấm, ký sinhtrùng…), cơ học (chấn thương), hóa học (vi tinh thể urat trong bệnh thống phong),miễn dịch (thoái hóa khớp, viêm đa khớp dạng thấp) Viêm có hai dạng: cấp tính vàmạn tính Nếu viêm cấp tính tự khu trú và khỏi trong thời gian ngắn thì đây là phảnứng có lợi của cơ thể như nhờ viêm đưa đến hiện tượng thực bào giúp bảo vệ cơ thểchống lại tác nhân gây viêm Nhưng thường trở thành có hại do tiến triển thành mạntính, như trong viêm khớp mạn tính đưa đến thoái hóa sụn làm giảm chức năngvận động.

Thuốc chống viêm nói chung được chia làm hai loại: NSAID và corticoid NSAID

có tác dụng chống viêm giảm đau do ức chế sự sinh tổng hợp các prostaglandinbằng cách ức chế enzym cyclo-oxygenase (Sơ đồ 1.1)

Khi có sự xuất hiện của tác nhân gây viêm, nơi đó sẽ bị kích thích đưa đến rối loạnmàng tế bào Sự rối loạn thể hiện ở chỗ, phospholipid có sẵn ở màng tế bào sẽ đượcenzym phospholipase xúc tác biến thành acid arachidonic Acid arachidonic sẽ tiếptục biến đổi thành leucotrien nhờ enzym lipooxygenase và thành các prostaglandinnhờ enzym cyclo-oxygenase Như vậy, có thể chống viêm, tức chống lại sự sinhtổng hợp các chất sinh học gây viêm là leucotrien và prostaglandin bằng cách ứcchế các enzym xúc tác phản ứng sinh ra các chất sinh học này Các thuốc corticoidchống viêm nhờ ức chế phospholipase, các thuốc kháng leucotrien ức chếlipooxygenase, NSAID ức chế COX

Tác nhân gây viêm

Kháng Leucotrien

Lipooxygenasee

NSAID

Sơ đồ 1.1 Cơ chế tác động của NSAID

Dựa vào cấu trúc hóa học, có thể phân loại NSAID vào các nhóm dẫn chất Trongmỗi nhóm, có thể số lượng thuốc dùng trong điều trị tương đối nhiều nhưng chỉ cóvài thuốc được thông dụng (Bảng 1.1)

Bảng 1.1 Các NSAID thông dụng

- Nhóm dẫn chất salicylat aspirin, diflunisal, salsalat

- Nhóm dẫn chất acid propionic fenbufen, flurbiprofen, ibuprofen,

ketoprofen, naproxen, acid tiaprofenic

- Nhóm dẫn chất fenamat acid mefenamic

- Nhóm dẫn chất acid acetic diclofenac, indomethacin, sulindac

- Nhóm dẫn chất pyrazolon phenylbutazone

- Nhóm các oxicam piroxicam, tenoxicam, meloxicam

- Nhóm sulfonanilid nimesulid, flosulid

- Nhóm coxib celecoxib, rofecoxib, valdecoxib

Khi sử dụng NSAID, đặc biệt phải dùng dài hạn, người bệnh luôn có nguy cơ bị tácdụng phụ do cơ chế ức chế COX như viêm loét dạ dày-tá tràng, rối loạn đông máu,phù, tăng huyết áp, suy thận cấp và mạn,… Hiện nay, các nhà điều trị có sự chọnlựa mới, dùng thuốc ức chế chọn lọc COX-2

Bảng 1.2 So sánh giữa COX-1 và COX-2

- Đồng dạng cấu tạo - Đồng dạng cảm ứng

- Có sẵn ở các mô, xúc tác tổng hợp - Chỉ hoạt động khi có yếu tố viêm

N H

O OH

CH3

N S O O

- Cấu trúc polypeptid - Cấu trúc polypeptid: 60 % vị trí là

các acid amin giống COX-1

Sơ đồ 1.2 Phân loại các chất ức chế chọn lọc COX-21.2 MELOXICAM

Misscellaneous(etodolac)

Thành phần phần trăm: C 47,85%, H 3,73%, N 11,96%, O 18,21%, S 18,25% Điểm chảy: 254 0 (dec)

pKa: 4,08 trong nước; 4,24 ± 0,01 trong nước/ethanol (1:1); 4,63 ± 0,03 trong

nước/ethanol (1:4)

Log P (octanol/nước): 3,02

Độc tính: LD50 đường uống trên chuột: 470 mg/kg

Tính chất: Bột màu vàng nhạt, hầu như không tan trong nước, khó tan trong aceton,

tan trong dimethylformamid, rất khó tan trong ethanol 96 % và methanol [11]

1.2.2 PHƯƠNG PHÁP KIỂM NGHIỆM

Phương pháp kiểm nghiệm của nguyên liệu meloxicam và dạng viên nén chứameloxicam đã được mô tả trong các chuyên luận dược điển Anh 2005 [10] và

2007 [11], dược điển Trung Quốc 2005 [14]

1.2.3 DƯỢC LỰC

Meloxicam là thuốc kháng viêm không steroid (NSAID) thuộc họ oxicam, có cácđặc tính kháng viêm, giảm đau và hạ sốt Meloxicam có tính kháng viêm mạnh chotất cả các loại viêm Cơ chế chung của những tác dụng trên là do meloxicam có khảnăng ức chế sinh tổng hợp các prostaglandin, chất trung gian gây viêm Ở cơ thể

sống (in vivo), meloxicam ức chế sinh tổng hợp prostaglandin tại vị trí viêm mạnh

hơn ở niêm mạc dạ dày hoặc ở thận Đặc tính an toàn cải tiến này do thuốc ức chếchọn lọc đối với COX-2 so với COX-1 So sánh giữa liều gây loét và liều kháng

viêm hữu hiệu trong thí nghiệm gây viêm ở chuột cho thấy thuốc có độ an toàn vàhiệu quả điều trị cao hơn các NSAID thông thường khác [5].

1.2.4 DƯỢC ĐỘNG HỌC [5]

- Hấp thu: sau khi uống, meloxicam có sinh khả dụng trung bình là 89% Nồng độ

trong huyết tương tỉ lệ với liều dùng: sau khi uống 7,5 mg và 15 mg, nồng độtrung bình trong huyết tương được ghi nhận tương ứng từ 0,4 đến 1 mg/l và từ0,8 đến 2 mg/l (Cmin và Cmax ở tình trạng cân bằng)

- Phân bố: meloxicam liên kết mạnh với protein huyết tương, chủ yếu là

albumin (99%)

- Chuyển hóa: thuốc được chuyển hóa mạnh, nhất là bị oxy hóa ở gốc methyl của

nhân thiazolyl

- Thải trừ: tỉ lệ sản phẩm không bị biến đổi được bài tiết chiếm 3% so với liều

dùng Thuốc được bài tiết phân nửa qua nước tiểu và phân nửa qua phân

Thời gian bán hủy đào thải trung bình là 20 giờ Tình trạng cân bằng đạt đượcsau 3-5 ngày

Độ thanh thải ở huyết tương trung bình là 8 ml/phút và giảm ở người lớn tuổi Thể tích phân phối thấp, trung bình là 11 lít và dao động từ 30 đến 40% giữa các

cá nhân Thể tích phân phối tăng nếu bệnh nhân bị suy thận nặng, trường hợpnày không nên vượt quá liều 7,5 mg/ngày

1.2.5 CHỈ ĐỊNH [5]

- Dạng viên: điều trị triệu chứng dài hạn các cơn viêm đau mãn tính trong viêm

đau xương khớp (hư khớp, thoái hóa khớp), viêm khớp dạng thấp, viêm cột sốngdính khớp

- Dạng tiêm: điều trị triệu chứng ngắn hạn các cơn viêm đau cấp tính.

1.2.6 CHỐNG CHỈ ĐỊNH [5]

- Tiền căn dị ứng với meloxicam hay bất kỳ tá dược nào của thuốc

- Có khả năng nhạy cảm chéo với acid acetylsalicylic và các thuốc kháng viêmkhông steroid khác.

- Không dùng cho những bệnh nhân từng có dấu hiệu hen, polyp mũi, phù mạchhoặc nổi mề đay sau khi dùng acid acetylsalicylic hay các thuốc kháng viêmkhông steroid khác, loét dạ dày tá tràng tiến triển, suy gan nặng, suy thận nặngkhông được thẩm phân, phụ nữ có thai hoặc cho con bú

- Dạng tiêm: Trẻ em dưới 15 tuổi (vì liều cho trẻ em chưa được xác định đối vớidạng tiêm), đang dùng thuốc kháng đông Dạng viên: Trẻ em dưới 12 tuổi

1.2.7 TÁC DỤNG NGOẠI Ý

Tác dụng ngoại ý hay gặp là: khó tiêu, buồn nôn, nôn, táo bón, đầy hơi, tiêu chảy,thiếu máu, ngứa, phát ban da, choáng váng, nhức đầu, phù Các tác dụng ngoại ýkhác là: bất thường thoáng qua của những thông số chức năng gan, rối loạn côngthức máu, khởi phát cơn hen cấp, chóng mặt, ù tai, ngủ gật, tăng huyết áp, đánhtrống ngực, đỏ bừng mặt, tăng creatinine huyết và/hoặc tăng urê huyết [5]

1.2.8 LIỀU LƯỢNG VÀ CÁCH DÙNG [5]

- Viêm khớp dạng thấp, viêm cột sống dính khớp: 15 mg/ngày Tùy đáp ứng điều

trị, có thể giảm liều còn 7,5 mg/ngày

- Thoái hóa khớp: 7,5 mg/ngày Nếu cần có thể tăng liều đến 15 mg/ngày.

Liều khuyến cáo của meloxicam dạng tiêm là 15 mg một lần mỗi ngày

Liều meloxicam tối đa được khuyên dùng mỗi ngày: 15 mg

1.3 CYCLODEXTRIN

1.3.1 TÍNH CHẤT, ĐẶC ĐIỂM

1.3.1.1 Đặc điểm của các cyclodextrin thiên nhiên

Cyclodextrin (CD) là các oligosaccharid vòng có nguồn gốc từ tinh bột, được khámphá cách đây khoảng 100 năm, chứa 6 (α-CD), 7 (β-CD), 8 (γ-CD), 9 (δ-CD),

10 (ε-CD) hoặc nhiều hơn các đơn vị α-D-glucopyranose liên kết với nhau bằng cầunối (α-1,4) Do cấu dạng ghế của các đơn vị glucopyranose, các CD có dạng hìnhnón cụt hoặc đế hoa hơn là dạng trụ (Hình 1.1) Các nhóm chức hydroxyl hướng rangoài hình nón với các nhóm hydroxyl bậc một của phần đường ở cạnh hẹp và cácnhóm hydroxyl bậc hai ở cạnh rộng hơn Khoang trung tâm của phân tử CD tươngđối thân dầu, được liên kết bởi các carbon và các oxygen còn lại của glucose Tínhphân cực của khoang được ước tính tương đương với dung dịch ethanol Trongdung dịch nước, các nhóm hydroxyl hình thành các liên kết hydrogen bao quanh cácphân tử nước tạo thành lớp hydrat hóa xung quanh phân tử CD hòa tan [9], [10],[26], [28], [29], [31], [39]

Kích thước (nm) Chiều

cao kính ngoài Đường kính trong Đường

Các nhóm hydroxylbậc hai

γ-CD 8 0,78 1,69 0,95

1.3.1.2 Các cyclodextin biến đổi hóa học

Các CD thiên nhiên, đặc biệt là β-CD, có độ tan trong nước bị giới hạn, nghĩa là cácphức hợp hình thành từ sự tương tác của các chất thân dầu và các CD này cũng cóthể kém tan dẫn đến sự kết tủa của các phức hợp CD rắn trong nước và các hệ thốngnước khác Thật vậy, độ tan trong nước của các CD thiên nhiên thấp hơn nhiều sovới các dextrin không vòng Điều này là do liên kết hydrogen nội phân tử tương đốimạnh trong mạng lưới tinh thể Khi thay thế bất kỳ nhóm hydroxyl tạo cầu nốihydrogen, thậm chí bằng các nhóm thân dầu, cũng có thể cải thiện rất nhiều độ tan.Các dẫn chất CD được ưa chuộng trong ngành dược (Hình 1.2, Bảng 1.4) bao gồmcác dẫn chất hydroxypropyl của β-CD và γ-CD (HP-β-CD và HP-γ-CD),β-CD methyl hóa ngẫu nhiên (RM-β-CD), sulfobutylether β-CD (SBE-β-CD),maltosyl-β-CD (G2-β-CD) [9], [25], [26]

Hình 1.2 Cấu trúc hóa học của cyclodextrin (A) và cấu dạng hình nón của β-CD

β-CD 1 −H 1135 18,52-Hydroxypropyl-β-

1.3.1.3 Các nghiên cứu về tính an toàn của các cyclodextrin thiên nhiên

CD có khối lượng phân tử lớn từ khoảng 1000 đến trên 2000 Daltons và thân nước,với số lượng đáng kể các nhóm cho và nhận H+, do đó không hấp thu ở hệ tràng vị ởdạng không đổi Các α-CD và β-CD thiên nhiên, không giống với γ-CD, không bịthủy phân bởi amylase của nước bọt và dịch tụy của người Tuy nhiên, cả α-CD vàβ-CD có thể được lên men bởi hệ vi khuẩn ruột kết [9], [26], [31]

α-CD có thể tìm thấy ở dạng dung dịch tiêm và các công thức viên nén trên thịtrường Nhìn chung, khi dùng đường uống, α-CD dung nạp tốt và không liên quanđến các phản ứng bất lợi Sự chuyển hóa của γ-CD rất giống tinh bột và dextrinmạch thẳng Chỉ một phần nhỏ α-CD và γ-CD được hấp thu dạng nguyên vẹn trong

hệ tràng vị và được thải trừ chủ yếu ở dạng không đổi trong nuớc tiểu sau khi tiêmtĩnh mạch Khi uống 8 g γ-CD hoặc 8 g maltodextrin không thấy bất kỳ sự khácnhau nào về sự dung nạp dạ dày ruột của hai oligosaccharid này [9]

β-CD có thể được tìm thấy các dạng liều uống với số lượng lớn trên thị trường cũngnhư trong các công thức có tác dụng tại chỗ, đường miệng và trực tràng β-CDkhông dùng cho đường tiêm do độ tan trong nước thấp và các phản ứng phụ (độctính trên thần kinh) nhưng không độc khi dùng đường uống Sau khi dùng đường

uống, mức không độc của β-CD được xác định là 0,7–0,8 g/kg/ngày trên chuột vàkhoảng 2 g/kg/ngày trên chó [9].

1.3.1.4 Các sản phẩm trên thị trường

Trên thế giới, hiện có khoảng 35 sản phẩm khác nhau trên thị trường trong thànhphần có chứa phức hợp CD ở dạng rắn hoặc dung dịch (Bảng 1.5) [9], [26], [28],[29], [31], [43] Trong các sản phẩm này, các CD được sử dụng nhằm tăng độ tancủa các thuốc kém tan trong nước, tăng sinh khả dụng và độ ổn định [9], [29].Ngoài ra, các CD có thể được sử dụng nhằm làm giảm hoặc ngăn ngừa sự kích ứng

dạ dày – ruột và mắt, giảm hoặc hạn chế mùi hoặc vị khó chịu, ngăn ngừa sự tươngtác thuốc – thuốc hoặc thuốc – tá dược, cũng như ngăn ngừa các thuốc dạng dầu vàdạng lỏng chuyển thành dạng bột vi tinh thể hoặc vô định hình [9]

Bảng 1.5 Các chế phẩm trên thị trường có chứa cyclodextrin [9], [26], [28], [29],

PGE1 Prostavastin Dung dịch tiêm Ono (Nhật); Schwarz (châu Âu)

β-Cyclodextrin (β-CD)

Benexate HCl Ulgut, Lonmiel Viên nang Capsule Teikoku và Shionogi (Nhật)Cephalosporin Meiact Viên nén Meiji Seika (Nhật)Cetirizin Cetrizin Viên nhai Losan Pharma (Đức)

Hoạt chất/CD Biệt dược Dạng bào chế Công ty (nước) β-Cyclodextrin (β-CD) (tiếp theo)

Chlordiazepoxid Transillium Viên nén Gador (Argentina)Dexamethason Glymesason Thuốc mỡ, viên nén Fujinaga (Nhật)

Dextromethorphan Rynathisol Synthelabo (châu Âu)

Diphenhydramin và

chlortheophyllin Stada-Travel Viên nhai Stada (châu Âu)

Meloxicam Mobitil Viên nén và thuốc đạn Medical Union Phar-maceuticals (Ai Cập)Nicotin Nicorette Viên ngậm Pfizer (châu Âu)Nimesulid Nimedex Viên nén Novartis (châu Âu)Nitroglycerin Nitropen Viên ngậm Nihon Kayaku (Nhật)Omeprazol Omebeta Viên nén Betafarm (Europe)

Piroxicam Brexin, Flogene, Cicladon Viên nén, thuốc đạn Chiesi (châu Âu); Aché (Brazil)Tiaprofenic acid Surgamyl Viên nén Roussel-Maestrelli (châu Âu)

2-Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD)

Cisaprid Propulsid Thuốc đạn Janssen (châu Âu)Hydrocortison Dexocort Dung dịch Actavis (châu Âu)Indomethacin Indocid Thuốc nhỏ mắt Chauvin (châu Âu)Itraconazol Sporanox Dung dịch

uống và i.v

Janssen (châu Âu, Mỹ)

Mitomycin MitoExtra,Mitozytrex Dịch truyền i.v Novartis (châu Âu)

Sulfobutylether β-cyclodextrin sodium salt (SBE-β-CD)

Aripiprazol Abilify Dung dịch i.m Bristol-Myers Squibb;

Otsuka Pharm (Mỹ)Maropitant Cerenia Dung dịch tiêm Pfizer Animal Health(Mỹ)Voriconazol Vfend Dung dịch i.v Pfizer (Mỹ, châu Âu,Nhật)Ziprasidon mesylat Geodon, Zeldox Dung dịch i.m Pfizer (Mỹ, châu Âu)

Randomly methylated β-cyclodextrin (RM-β-CD)

17β-Estradiol Aerodiol Khí dung mũi Servier (châu Âu)Cloramphenicol Clorocil Thuốc nhỏ mắt Oftalder (châu Âu)

2-Hydroxypropyl-γ-cyclodextrin (HP-γ-CD)

Diclofenac sodium Voltaren Thuốc nhỏ mắt Novartis (châu Âu)Tc-99 Teoboroxim CardioTec Dung dịch i.v Bracco (Mỹ)

1.3.2 HIỆU QUẢ CỦA CD

CD có thể làm giảm những đặc tính không mong muốn của các thuốc hữu hiệu tronglâm sàng nhưng bị hạn chế bởi tính tan trong nước thấp, của các thuốc không ổnđịnh về các tính chất vật lý hay hóa học hoặc kích ứng tại chỗ sau khi sử dụng [12]

1.3.2.1 Hiệu quả trên độ tan và hoà tan của thuốc

Các CD tương tác với các chất kém tan trong nước để làm tăng độ tan biểu kiến củachúng Độ tan biểu kiến gia tăng có thể xảy ra với các dạng dung dịch như dạngtiêm i.v và dung dịch uống Ngoài ra, sự tăng độ tan biểu kiến của thuốc có thể làmtăng tốc độ hòa tan của thuốc và các hợp chất mà sinh khả dụng bị giới hạn bởi độtan hoặc tốc độ hòa tan, có thể làm tăng sinh khả dụng đường uống [9] Đối với cácthuốc có phân tử lượng không thích hợp để tạo phức, CD đóng vai trò là một chấtmang thân nước CD cũng sẽ là chất làm tăng độ hoà tan của các thuốc có hàmlượng cao, khó có thể tạo phức hợp thuốc-CD như paracetamol CD cũng được xem

là chất làm tăng tốc độ phóng thích một số hoạt chất từ khung matrix (naproxen,ketoprofen, theophyllin )

Hệ thống phân loại sinh dược học (Biopharmaceutical Classification System -BCS)phân chia các thuốc thành 4 nhóm dựa trên các đặc điểm về độ tan và tính thấm củachúng (Bảng 1.6) [26], [46], ảnh hưởng của sự hình thành phức hợp thuốc-CD trênsinh khả dụng đường uống đối với từng nhóm như sau [9], [26], [28], [29]:

Các thuốc nhóm I: tương đối tan trong nước và sinh khả dụng tuyệt đối ≥ 90% Các

thuốc này thấm dễ dàng qua lớp khuếch tán và có đủ tính thân dầu để thấm quamàng nhày dạ dày-ruột Nhìn chung, các CD thân nước không có khả năng cải thiệnsinh khả dụng của các thuốc nhóm I Tuy nhiên, CD có thể được sử dụng để làmgiảm sự kích ứng tại chỗ và làm tăng tốc độ hấp thu của thuốc

Các thuốc nhóm II: có độ tan thấp, tính thấm cao nên sự hấp thu đường uống bị giới

hạn bởi độ tan và tốc độ hòa tan của thuốc Tuy nhiên, một khi trong dung dịch, cácthuốc này thấm qua màng sinh học tương đối dễ dàng, dẫn đến sinh khả dụng tuyệtđối ≥ 90% Như vậy, độ tan trong nước thấp sẽ cản trở tốc độ hòa tan và khả năngthấm của thuốc qua lớp khuếch tán tại bề mặt màng nhày cũng sẽ giảm Phức hợp

CD tan trong nước của các thuốc nhóm này sẽ làm tăng khả năng khuếch tán đến bềmặt màng nhày dẫn đến tăng sinh khả dụng đường uống

Các thuốc nhóm III: tan trong nước, nhưng không dễ dàng thấm qua màng sinh học

do kích thước và/hoặc mức độ hydrat hóa của chúng Đối với các thuốc này, yếu tốgiới hạn tốc độ hấp thu là khả năng thấm qua màng Do đó, sự hình thành phức hợpthuốc-cyclodextrin thân nước sẽ không làm tăng sinh khả dụng đường uống

Các thuốc nhóm IV: có độ tan thấp và tính thấm thấp kết hợp các hạn chế của cả

nhóm II và nhóm III Nhóm này có thể bao gồm các chất có cấu trúc dạng ion lưỡngtính (zwitterion) không tan trong nước hoặc các phân tử thân dầu tương đối lớn Cácchất không tan trong nước thân nước như các dạng ion lưỡng tính không dễ hìnhthành phức hợp cyclodextrin, do đó, các CD thân nước gần như không cải thiện sinhkhả dụng đường uống của chúng Tuy nhiên, CD có khả năng cải thiện độ tan trongnước của một vài phân tử thân dầu kích thước lớn dẫn đến tăng khả dụng của thuốctại bề mặt màng nhày Điều này thường dẫn đến tăng sinh khả dụng đường uống

Do đó, sự can thiệp của CD thì thích hợp nhất với các thuốc nhóm II và nhóm IV vàviệc sử dụng các CD có thể thay đổi đặc tính của các thuốc nhóm này để chúng trởnên giống như các thuốc nhóm I

Bảng 1.6 Hệ thống phân loại sinh dược học và hiệu quả của sự hình thành phức

hợp thuốc-cylodextrin trên sinh khả dụng đường uống [26]

trên sinh khả dụng

của thuốc Có thể giảm Có thể tăng Có thể giảm Có thể tăng

1.3.2.2 Hiệu quả trên sinh khả dụng của thuốc

CD cải thiện sinh khả dụng của các thuốc không tan bằng cách làm tăng độ tan, độhòa tan và/hoặc tính thấm của thuốc CD làm tăng tính thấm của các thuốc thân dầu,không tan trong nước bằng cách làm cho thuốc hiện diện tại bề mặt của các hàng

rào sinh học như da, màng nhầy hay giác mạc, từ đó thuốc đi vào trong màng màkhông gây phá vỡ các lớp lipid màng Trong trường hợp này, chỉ cần dùng đủ lượng

CD để hòa tan thuốc trong chất dẫn thân nước vì lượng dư sẽ làm giảm khả dụngcủa thuốc [12]

Đối với các thuốc tan trong nước, CD làm tăng tính thấm bằng cách tác động trựctiếp lên màng (hóa lỏng và làm lõm màng) và gia tăng sự hấp thu và/hoặc sinh khảdụng của thuốc

1.3.2.3 Hiệu quả trên tính an toàn của thuốc

Bằng cách làm tăng độ tan của thuốc, CD giúp tăng hiệu quả trị liệu nên làm giảmđộc tính của thuốc do chỉ sử dụng ở liều thấp nhất

Các độc tính có liên quan đến sự kết tinh lại của các thuốc kém tan trong dạngthuốc tiêm có thể được giảm thiểu bằng cách tạo phức hợp thuốc-CD dễ tan.Ngoài ra, CD kết hợp với thuốc ở mức độ phân tử nên hạn chế được sự tiếp xúc trựctiếp của thuốc với màng sinh học, do đó làm giảm tác dụng không mong muốn(giảm lượng thuốc đi vào các tế bào của các mô không phải là mô đích) và sự kíchứng tại chỗ mà không ảnh hưởng đến hiệu quả trị liệu Phức hợp thuốc-CD cũnglàm giảm kích ứng mắt do làm giảm nồng độ thuốc tự do tại vùng tiền sừng đếnmức thấp nhất [12]

1.3.2.4 Hiệu quả trên độ ổn định của thuốc

CD có thể cải thiện độ ổn định của các thuốc nhạy cảm với các phản ứng dehydrathóa, thủy phân, oxy hóa và phân hủy bởi ánh sáng, do vậy làm tăng tuổi thọ củathuốc Các nghiên cứu đã cho thấy rằng CD làm tăng độ ổn định bằng cách ngănchặn sự tương tác của thuốc với chất dẫn và/hoặc ức chế sự sinh chuyển hóa thuốctại vị trí hấp thu Trong phức hợp, CD che chở các thuốc kém bền dưới dạng phân

tử và như vậy cách ly chúng khỏi các tiến trình phân hủy [12]

1.3.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP TẠO PHỨC [39]

- Phương pháp đồng kết tủa (Co-precipitation): CD được hòa tan trong nước,

khuấy đều, thêm hoạt chất vào Gia nhiệt có thể làm tăng độ tan của CD lên 20%

nếu hoạt chất chịu được nhiệt Dung dịch thuốc-CD được khuấy đều cho đến khinguội và tủa hình thành Tủa có thể được tách ra bằng cách lắng gạn, ly tâm haylọc và rửa Nhược điểm chính của phương pháp này có liên quan đến việc nângcấp cỡ lô sản xuất

- Phương pháp tạo bùn nhão (Slurry complexation): CD được cho vào nước, ở tỉ

lệ chất rắn chiếm 50-60% hỗn hợp và khuấy đều Pha nước sẽ được bão hòabằng CD trong dung dịch Phân tử hoạt chất sẽ tạo phức với CD và phức tạothành sẽ bão hòa pha nước nên kết tinh hay kết tủa lại

- Phương pháp tạo bột nhão (Paste complexation hay Kneading method): Một

lượng nhỏ nước được cho vào hoạt chất để tạo bột nhão, sau đó trộn đều hỗnhợp với CD bằng chày và cối Phức tạo thành có thể đem sấy khô và xay thànhbột mịn

- Phương pháp hãm (Damp mixing): Hoạt chất và CD được trộn kỹ và cho vào

một thiết bị hàn kín lại sau khi thêm một ít nước Hỗn hợp được gia nhiệt đến

100 oC, lấy ra và sấy khô

- Phương pháp đùn (Extrusion): CD, hoạt chất và nước được trộn đều trước khi

cho vào máy đùn hạt Phức tạo thành có thể để khô tự nhiên hay cho vào tủ sấy.Các chất nhạy với nhiệt có thể bị phân hủy

- Phương pháp trộn khô (Dry mixing): Một vài hoạt chất có thể được tạo phức

bằng cách trộn đơn giản với CD Phương pháp này thích hợp cho các chất lỏnghay dầu

- Phương pháp đồng bay hơi (Co-evaporating): Cho CD và hoạt chất vào trong

nước hoặc dung dịch ethanol 50 %, khuấy cho đến khi hòa tan hoàn toàn và bốchơi dung môi dưới áp suất giảm ở 45 oC Sản phẩm được đem nghiền và rây qua

cỡ rây thích hợp, để trong tủ sấy 45 oC trong 48 giờ

- Phương pháp đông khô (Freeze-drying): Hòa tan CD vào trong nước, thêm hoạt

chất Hỗn dịch được khuấy ở nhiệt độ phòng trong 48 giờ Lọc qua màng 0,45 µm

để loại phần hoạt chất không tan Lấy dung dịch thu được đem đi đông khô Sảnphẩm rắn được rây qua cỡ rây thích hợp, để trong tủ sấy 45 oC trong 48 giờ

- Phương pháp sấy phun sương (Spray-drying): Hoạt chất được hòa tan trong

dung dịch ethanol 96 %, CD được hòa tan trong nước Hỗn hợp hai dung dịchđược trộn đều bằng siêu âm trong 20 phút Dung dịch thu được sẽ trong suốt vàđược sấy phun sương

1.3.4 BETA-CYCLODEXTRIN

1.3.4.1 Tính chất, đặc điểm

β-CD có một số tính chất cơ bản sau [7], [19]:

Công thức phân tử: C42H70O35 Khối lượng phân tử: 1135 Thành phần phần trăm:

C 44,45 %, H 6,22 %, O 49,34 % Điểm chảy: 255 – 265 0C pKa: 12,2

Hàm ẩm: 13 – 15 % Độ tan: tan trong 200 phần propylen glycol, trong 50 phần

nước ở 20 0C, trong 20 phần nước ở 50 0C, đặc biệt không tan trong aceton,ethanol 95 % và methylen clorid

β-CD có độ tan trong nước thấp do các phân tử CD liên kết tương đối mạnh trongtrạng thái kết tinh (năng lượng mạng lưới tinh thể tương đối cao) Ngoài ra, β-CDhình thành liên kết hydro nội phân tử giữa các nhóm hydroxyl bậc hai làm giảm sốlượng nhóm hydroxyl có khả năng hình thành liên kết hydro với các phân tử nướcxung quanh Trong số ba CD thiên nhiên, β-CD được sử dụng nhiều nhất trongngành dược mặc dù độ tan thấp nhất do có khả năng tạo phức với nhiều loại phân tửthuốc, giá thành thấp, dễ kiếm và các tính chất khác [25]

β-CD được xem như không độc khi dùng đường uống, do đó được sử dụng chủ yếutrong các công thức viên nén và nang cứng Trong công thức viên nén, β-CD được

sử dụng trong cả xát hạt ướt và dập thẳng Ngoài ra, β-CD còn được dùng trong cácdạng bào chế khác như dung dịch, thuốc đạn, thuốc mỡ,…, trong thực phẩm và mỹphẩm β-CD được mô tả trong các chuyên luận của dược điển Mỹ (USP/NF), Anh(BP), châu Âu (Ph.Eur) và Nhật (JP) [9], [10], [11], [17], [28], [29], [31], [45]

β-CD không được dùng trong các công thức thuốc tiêm do độc tính trên thận Khidùng đường tiêm, β-CD không được chuyển hóa nhưng tích lũy ở thận dưới dạngphức cholesterol không tan.

1.3.4.2 Cơ chế hình thành phức hợp thuốc-β-CD

Trong môi trường nước, β-CD hình thành phức hợp với nhiều phân tử thuốc thândầu bằng quá trình mà ở đó các phân tử nước bên trong trung tâm khoang được thaythế bằng toàn bộ phân tử thuốc, hoặc phổ biến hơn, phần thân dầu của phân tử [25].Các liên kết không cùng hóa trị được hình thành hoặc tách ra trong quá trình hìnhthành phức hợp thuốc-β-CD [9], [29], các phân tử thuốc trong phức hợp nhanhchóng cân bằng với các phân tử tự do trong dung dịch [25], [29]

Vì môi trường bên trong khoang β-CD tương đối không phân cực [9], [25], nên cácphân tử nước trong khoang không thể đáp ứng khả năng liên kết hydrogen, chúng

có năng lượng cao hơn các phân tử nước trong môi trường Toàn bộ động lực cho sựhình thành phức hợp xuất hiện để phóng thích các phân tử nước giàu enthalpy từkhoang của β-CD, làm giảm đi năng lượng của hệ thống (Hình 1.3) [25]

Hình 1.3 Cơ chế hình thành phức hợp giữa β-CD và thuốc (acid salicylic) [31]

Do đó, các lực hình thành phức hợp bao gồm sự phóng thích các phân tử nước giàunăng lượng từ khoang trung tâm, tương tác tĩnh điện, tương tác van der Waals’,tương tác kỵ nước, cầu nối hydrogen, [25], [29]

Tốc độ hình thành và tách ra của phức hợp thuốc-β-CD rất gần với các giới hạnkhuếch tán có kiểm soát và phức hợp thuốc-β-CD liên tục được hình thành và tách ra[9], [25], [28], [29] Do đó, sự hiện diện của các phức hợp thuốc-β-CD tan trongnước ngay tại bề mặt biểu mô được hydrat hóa sẽ làm tăng khả dụng của các phân tửthuốc đã hòa tan, đặc biệt đối với các chất thân dầu có độ tan trong nước thấp [28]

Hầu hết phức hợp thuốc-β-CD có dạng phức thể vùi (inclusion), nhưng β-CD cũnghình thành các phức hợp không phải thể vùi và phức dạng kết tụ lỏng lẻo có khảnăng hòa tan các thuốc thông qua cấu trúc giống micell [9], [29]

1.3.4.3 Động học của sự kết hợp và tách ra của phức hợp

Khi sự hình thành phức hợp với tỉ lệ mol 1:1 xảy ra, sự kết hợp thông thường được

mô tả bằng Hình 1.4 [42]:

Hình 1.4 Sự hình thành phức hợp với tỉ lệ mol 1:1

Hai thông số quan trọng có thể được xác định cho quá trình tạo phức hợp thể vùi:

- Thứ nhất là lực hoặc hằng số hình thành phức hợp (K c) được xác định bằng công thức : Kc = k f / k r = [D-CD] / ([Df] x [CDf])

trong đó [Df] và [CDf] là nồng độ của thuốc và cyclodextrin tự do

- Thứ hai là thời gian tồn tại (lifetime – τ) của phức hợp, được đolường khi sự cân bằng bị xáo trộn và được xác định bằng công thức:

k obs = l / τ = kf x ([CDf] + [Df]) + kr

Hằng số kf và kr là các hằng số tốc độ thuận và nghịch, và kobs là hằng số tốc độ được

quan sát khi tái thiết lập lại sự cân bằng sau khi bị xáo trộn

Nhiều phương pháp khác nhau đã được phát triển trong việc xác định lực và thờigian tồn tại của phức hợp Các nghiên cứu cho rằng sự kết hợp và tách ra của cácphân tử thuốc với cyclodextrin là các quá trình động học, nhờ đó phân tử khách thể

(thuốc) và chủ thể (β-CD) liên tục kết hợp và tách ra Các phản ứng xảy ra với tốc

độ rất nhanh đối với cả phức hợp mạnh và yếu với thời gian tồn tại của các phân tửtrong khoang chủ thể trung bình khoảng từ micro đến milli giây hay ngắn hơn Vớicác quá trình xảy ra với tốc độ như thế, thì dược động của sự phóng thích các phân

tử thuốc từ khoang của cyclodextrin không phải là yếu tố giới hạn

1.3.4.4 Sự phân phối thuốc qua màng sinh học

Cấu trúc hóa học của β-CD với nhiều nhóm cho và nhận hydrogen, khối lượngphân tử 1135 Daltons và hệ số phân chia octanol/nước rất thấp (log P o/wkhoảng - 3 đến 0,00) là các đặc tính của các chất không dễ thấm qua màng sinh học.Thật vậy, các nghiên cứu cho thấy rằng chỉ có một lượng không đáng kể β-CD vàphức hợp thuốc-β-CD có khả năng thấm qua màng thân dầu (lipophilic) như da vàmàng nhày dạ dày-ruột Chỉ có dạng tự do của thuốc cân bằng với phức hợpthuốc-β-CD mới có khả năng thấm qua màng [29]

Lớp nước Lớp khuếch tán Màng thân dầu Hệ thống tuần hoàn

Hình 1.5 Sự phân phối thuốc từ phức hợp β-CD qua màng sinh học [29]

Hầu hết các màng sinh học có tính thân dầu với một lớp cấu trúc nước bên ngoàingay tại bề mặt màng, kế đến là lớp khuếch tán Nếu tính thấm của thuốc qua lớpkhuếch tán là giai đoạn giới hạn sự thấm của thuốc qua màng, β-CD thông thường

có thể làm tăng tính thấm Tuy nhiên, trong nhiều trường hợp, β-CD không có khảnăng làm tăng tính thấm của các thuốc tan trong nước qua màng thân dầu Nóichung, β-CD giúp hòa tan các thuốc thân dầu không tan trong nước và gia tăng sựvận chuyển các phân tử thuốc đến lớp khuếch tán, tại đây, các phân tử thuốc tách rakhỏi khoang của β-CD và đi vào màng thân dầu [25], [29]

1.4 PHỨC HỢP MELOXICAM-BETA-CYCLODEXTRIN

1.4.1 CƠ SỞ VIỆC TẠO PHỨC HỢP ME-β-CD

Giống như các thuốc kháng viêm non-steroid khác, meloxicam gần như không tantrong nước Meloxicam có thể được xếp vào nhóm II theo hệ thống phân loại sinhdược học (BCS), nghĩa là độ tan thấp và hấp thu nhanh (tính thấm cao) qua

dạ dày-ruột [33], [36], [40] Độ tan trong nước và tính thấm ướt (wettability) thấpcủa meloxicam gây ra nhiều vấn đề trong việc xây dựng công thức đường uốnghoặc đường tiêm Hầu hết các thuốc không tan trong nước khi dùng đường uống thìtốc độ hấp thu bị giới hạn bởi độ hòa tan Độ hòa tan và sinh khả dụng của cácthuốc này thông thường có thể được cải thiện bằng nhiều kỹ thuật khác nhau nhưphun sấy, phương pháp lỏng siêu tới hạn, nhiều chất mang polymer nhưpolyvinylpyridin (PVP), polyethylen glycol (PEG) và các chất mang silica giúp đưacác thuốc ít tan vào cấu trúc nano hay chuyển thành trạng thái vi tinh thể và vô địnhhình [40], và điều chế các hệ thống cặp đôi (binary system) với chất mang thânnước (như β-CD) bằng các phương pháp trộn, làm tan chảy, dùng dung môi, [36]

β-CD được dùng như một hệ thống phân phối thuốc hữu hiệu cho một vài thuốckháng viêm non-steroid (NSAIDs): nimesulid, piroxicam, diclofenac,… [8]

Trong số các CD thiên nhiên, hiệu quả làm tăng độ tan của các CD đối vớimeloxicam theo thứ tự β-CD > α-CD > γ-CD Kích thước khoang của β-CD có vẻnhư tối ưu cho việc đánh bẫy phân tử meloxicam và do đó cho hiệu quả tan cao

nhất Hằng số bền (K1:1) của phức hợp ME với α-CD, β-CD và γ-CD lần lượt là82,12 ± 2,21, 109,97 ± 1,97, 78,67 ± 1,93 M-1 Hằng số bền với β-CD lớn nhất chothấy rằng ME tương tác mạnh hơn với CD này [34]

1.4.2 MỘT SỐ NGHIÊN CỨU VỀ PHỨC HỢP MELOXICAM VÀ β-CD

Ở Việt Nam, chưa có nghiên cứu nào được công bố về phức hợp meloxicam vàβ-CD Ở nước ngoài, có thể kể đến một số công trình nghiên cứu như sau:

1.4.2.1 Nghiên cứu về phức hợp meloxicam và β-CD

Sự hình thành phức hợp của meloxicam với beta-cyclodextrin ở trạng thái lỏng vàtrạng thái rắn đã được công bố trong nhiều công trình nghiên cứu gần đây Ba hệthống gắn kết meloxicam-beta cyclodextrin bao gồm trộn khô, nghiền ướt, và đồngbay hơi ở các tỉ lệ mol 1:1 và 1:2 cho thấy độ tan trong nước và tốc độ hòa tan của

ME được cải thiện và cao hơn khi so sánh với ME tinh khiết, trong đó tỉ lệ 1:2 ưuthế hơn [34] Kết quả nghiên cứu của Rawat S và Jain S K cũng cho thấy rằng vớiphương pháp nghiền ướt, tốc độ hòa tan của ME tăng theo sự tăng nồng độ củaβ-CD trong phức hợp, độ hòa tan của ME ở tỉ lệ mol ME:β-CD 1:0,25 < 1:0,5 < 1:1

< 1:2 [39] Trong khi Banerjee R và cộng sự cho rằng tỉ lệ kết hợp ME:β-CD là 1:1,

và không phải là 1:2 [8] thì Abdoh A A và cộng sự công bố rằng khi phân tích cặn

kẽ biểu đồ pha hòa tan thì tỉ lệ tạo phức của ME và β-CD là 1:2 [6] Mới đây,tháng 07/2008, bằng các phương pháp đo nhiệt vi sai (Differential scanningcalorimetry-DSC), nhiễu xạ tia X (X-ray diffractometry) và quang phổ hồng ngoạibiến đổi Fournier (FTIR), nhóm nghiên cứu Jain S.K xác nhận tỉ lệ mol phối hợpcủa ME:β-CD là 1:2 [21]

1.4.2.2 Nghiên cứu về viên nén chứa phức hợp meloxicam và β-CD

Đã có nghiên cứu công thức viên nén chứa ME và β-CD tỉ lệ mol 1:1 có độ hòa tancao hơn viên chỉ chứa ME [18] Công thức viên nén 2 lớp (lớp ngoài phóng thích

tức thời và lớp trong phóng thích biến đổi) chứa phức hợp ME-β-CD tỉ lệ mol 1:1

đã được nghiên cứu [23] Chưa thấy có chế phẩm chứa phức hợp ME-β-CD trên thịtrường Việt Nam Tuy nhiên, đã có viên chứa phức hợp ME-β-CD tỉ lệ 1:1,5 với tênbiệt dược là Mobitil dạng viên nén và viên đặt trực tràng do Medical UnionPharmaceuticals (Ai Cập) sản xuất

1.4.2.3 Nghiên cứu về hấp thu, tiền lâm sàng và sinh khả dụng

Nghiên cứu của nhóm Rawat S cho thấy rằng có sự tương quan mạnh giữa độ hòa

tan in vitro và độ hấp thu in vitro của phức hợp ME-β-CD trên ruột bò cô lập Kết

quả nghiên cứu cũng cho thấy khi tăng nồng độ của CD cũng làm tăng tốc độ hấpthu của thuốc trong phức hợp, và tốc độ hấp thu của ME trong phức hợp ME-β-CDtrộn ướt cao hơn ME tinh khiết và hỗn hợp trộn khô đơn thuần (Hình 1.6) [39]

Hình 1.6 Độ hấp thu của meloxicam và các phức hợp ME-β-CD qua ruột bò cô lập.

Meloxicam (--), phức trộn khô tỉ lệ mol 1:1 (--), phức nghiền ướt vớicác tỉ lệ mol1:0,25 (--), 1:0,5 (--), 1:1 (--), 1:2 (--) [39]

Kết quả nghiên cứu tiền lâm sàng trên chuột thử nghiệm cho thấy phức hợp

ME-β-CD làm tăng hiệu quả giảm đau có ý nghĩa so với ME, điều này có thể do sự cảithiện sinh khả dụng sau khi dùng thuốc [22] Nghiên cứu sinh khả dụng của viênnén có chứa ME và β-CD với tỉ lệ 1:1 bằng phương pháp dập trực tiếp cũng cho

thấy có sự cải thiện đáng kể sinh khả dụng của thuốc so với viên nén chỉ có ME, cácgiá trị Cmax, Tmax, AUC đều khác nhau có ý nghĩa (Bảng 1.7) [18].

Bảng 1.7 Hiệu quả của sự tạo phức với beta-cyclodextrin đối với các thông số dược

động của meloxicam trên người tình nguyện khi uống liều duy nhất [18]

- Ngoài ra, phân tích khối phổ (MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) cũngđược sử dụng để đánh giá sự hình thành phức hợp ở trạng thái lỏng [34]

1.4.3.2 Đánh giá sự hình thành phức hợp ở trạng thái rắn

- Phương pháp phân tích nhiệt vi sai (Differential scanning calorimetry-DSC)[21], [34]:dựa vào sự xuất hiện của đỉnh nội nhiệt tương ứng của từng chất Nếu

có sự tương tác tạo phức giữa ME và β-CD thì trên nhiệt đồ của các phức sẽ thấy

sự biến mất hẳn hoặc giảm cường độ đỉnh nội nhiệt của hoạt chất

- Quang phổ hồng ngoại (IR) [21]: nếu có sự tương tác tạo phức giữa hoạt chất vàβ-CD thì trên phổ hồng ngoại của các phức sẽ thấy sự biến mất hoặc thay đổi sốsóng đỉnh đặc trưng của ME

- Độ tan: lượng dư ME hoặc lượng phức chứa ME tương ứng cho vào các lọ cócùng thể tích dung môi, thực hiện tiếp các bước tương tự như phân tích pha tan,sau đó so sánh độ hòa tan của ME nguyên liệu và ME trong các phức

- Thử độ hòa tan [34], [39]: so sánh độ hòa tan của ME nguyên liệu và ME trongcác phức bằng máy thử độ hòa tan kiểu cánh khuấy trong 900 mL đệm phosphat

pH 7,4, tốc độ khuấy 50 vòng/phút, ở 37 ± 0,5 oC Định lượng phần trăm MEhòa tan tại các thời điểm bằng phương pháp đo UV

1.4.4 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG PHỨC HỢP ME-β-CD

Phương pháp định lượng phức hợp ME-β-CD hiện chưa thấy trình bày trong chuyênluận của bất cứ Dược điển nào Tuy nhiên, có thể tìm thấy phương pháp định lượngphức hợp ME-β-CD trong các công trình nghiên cứu công bố gần đây:

- Phương pháp đo quang phổ UV-Vis: định lượng ME trong phức hợp ME-β-CD[35] và ME-β-CD trong các dịch thử độ hòa tan pH 7,4 [18], [34], [39]

- Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC): định lượng ME trong phứchợp ME-β-CD viên nén và thuốc đạn [48], trong dịch huyết tương [18]

1.5 THỬ NGHIỆM ĐỘ HÒA TAN

Thử nghiệm độ hòa tan được chính thức đưa vào USP XVIII năm 1970 Cho đếnnay, thử nghiệm độ hòa tan được phát triển và trở thành phương tiện chuẩn để kiểmsoát chất lượng dược phẩm rắn trong nhiều Dược điển Các dạng thuốc cần phải thử

độ hòa tan bao gồm: dạng thuốc phóng thích tức thời (thuốc bột, thuốc cốm/vi hạt,viên nén, viên nang), dạng thuốc phóng thích có kiểm soát, hệ trị liệu qua da vàdạng thuốc cấy [24]

Mục đích của thử nghiệm nhằm đánh giá khả năng hòa tan và sẵn sàng hấp thu củathuốc trong ống tiêu hóa, do đó các điều kiện thử nghiệm độ hòa tan cần được thiếtlập sao cho gần với điều kiện trong cơ thể (nhiệt độ, môi trường, pH, tốc độ khuấy,

…) để giảm đến mức tối thiểu sự khác biệt giữa thử in vitro và quá trình thực sự

trong cơ thể [3]

Trong nghiên cứu phát triển thuốc, thử nghiệm độ hòa tan được ứng dụng trong cáctrường hợp:

- Nghiên cứu lựa chọn tá dược để xây dựng công thức bào chế

- So sánh các chế phẩm trong quá trình nghiên cứu

- Đánh giá chất lượng của thuốc ngay sau khi sản xuất và theo dõi chất lượngtrong quá trình bảo quản

- Đánh giá chất lượng của thuốc sau khi có những thay đổi về công thức hoặc quytrình sản xuất

- Khảo sát tương đương sinh học của các chế phẩm thuốc khác nhau

- Dự đoán tốc độ phóng thích in vivo căn cứ và tương quan in vitro – invivo.

So sánh độ hòa tan

So sánh biểu đồ hòa tan thường được dùng để đánh giá chất lượng của thuốc sau khi

có những thay đổi về công thức hoặc quy trình cũng như so sánh các chế phẩm(thuốc thử và thuốc đối chiếu) trong quá trình nghiên cứu thuốc Khi đó, theo hướngdẫn của FDA, mô hình độc lập sử dụng hai yếu tố là yếu tố khác biệt (f1) và yếu tốtương tự (f2) thì thích hợp nhất để so sánh độ hòa tan khi có từ 3 đến 4 hay nhiềuhơn thời điểm lấy mẫu [46]

Yếu tố khác biệt (f1) tính toán phần trăm khác nhau giữa hai đường biểu diễn độ hòatan tại mỗi thời điểm và là phép đo sai số tương đối giữa hai đường biễu diễn:

100

x R

TR

1

1 1

t

i t t f

Yếu tố tương tự (f2) là chuyển sang dạng logarit của nghịch đảo tổng bình phươngsai số và là phép đo sự tương tự nhau trong phần trăm hòa tan giữa hai đường biểudiễn:

11log

x 50

5 , 0 1

2 2

t i

t t f

trong đó:

- n: số thời điểm

- Rt: độ hòa tan của thuốc đối chiếu tại thời điểm t

- Tt: độ hòa tan của thuốc thử tại thời điểm t

Thông thường, giá trị f1 lên đến 15 (0 < f1 < 15) chứng tỏ hai đường biểu diễn độ hòa tan không khác nhau và giá trị f2 lớn hơn 50 (50 < f2 < 100) đã đủ đảm bảo sự tương tự nhau của hai đường biễu diễn độ hòa tan của hai chế phẩm

1.6 THIẾT KẾ VÀ TỐI ƯU HÓA CÔNG THỨC VỚI TRỢ GIÚP

VI TÍNH

Phát triển thuốc với sự trợ giúp vi tính (Computer-Aided Drug Development) là mộtlĩnh vực mới xuất hiện trong ngành Dược trên thế giới vào thập niên vừa qua, nổibật nhất là sự áp dụng các phần mềm thông minh [1]

1.6.1 THIẾT KẾ MÔ HÌNH THỰC NGHIỆM

Việc tối ưu hóa hay dự đoán dựa trên mô hình nhân quả được xây dựng từ dữ liệuthực nghiệm Do đó, vấn đề thiết kế mô hình thực nghiệm chiếm vai trò rất quantrọng trong quá trình thành lập công thức

Thiết kế mô hình thực nghiệm là việc xây dựng mô hình thực nghiệm trong đó có

sự xem xét các yếu tố ảnh hưởng bao gồm nồng độ của các nguyên liệu và điều kiệnpha chế (nhân) đối với các tính chất của sản phẩm (quả)

- Biến độc lập X (nhân) bao gồm: thành phần công thức (loại nguyên liệu, lượngnguyên liệu), điều kiện sản xuất (kỹ thuật bào chế, thiết bị sản xuất)

- Biến phụ thuộc Y (quả) là các tính chất sản phẩm: chỉ tiêu lý hóa, sinh khả dụng

in vitro/in vivo, giá thành sản phẩm.

Các loại mô hình thực nghiệm trong công nghiệp dược:

- Mô hình hỗn hợp hay mô hình công thức: thiết kế thành phần của các nguyênliệu (loại và lượng nguyên liệu), đây là loại mô hình có ràng buộc Công thứcbào chế có thể được xem như một “hỗn hợp” có n thành phần với tỷ lệ x1, x2, …

và xn+ 1; với x1 + x2 + … + xn = 1 hay 100% và 0 ≤ xi ≤ 1 Không gian yếu tốđược thiết kế như khoảng không gian bên trong của một hình có n đỉnh và (n-1)chiều để biểu thị mọi khả năng phối hợp Các mô hình công thức bao gồm:simplex centroid design, simplex lattice design, hybrid design,…

- Mô hình yếu tố hay mô hình quy trình: thiết kế các điều kiện pha chế (kỹ thuậtbào chế, thiết bị sản xuất), đây là loại mô hình không có ràng buộc Mô hình yếu

tố đầy đủ có ưu điểm là cho phép người nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng của cácyếu tố cũng như tương tác của chúng Tuy nhiên, mô hình yếu tố đầy đủ cần có

số thí nghiệm rất lớn khi số yếu tố tăng lên Mô hình phân đoạn cho phép giảmbớt rất nhiều số thí nghiệm mà vẫn khảo sát được một số ảnh hưởng của các yếu

tố Các mô hình yếu tố phân đoạn được phân biệt bởi cách giải (resolution, đượcviết là Res) Các mô hình yếu tố phân đoạn hay gặp: D-Optimal, Taguchi OA,…

- Mô hình kết hợp: mô hình công thức kết hợp với mô hình quy trình

1.6.2 TỐI ƯU HÓA CÔNG THỨC

Tối ưu hóa một công thức là sự xác định giá trị tối ưu của các nồng độ nguyên liệutrong công thức cũng như điều kiện pha chế đối với công thức ấy sao cho sản phẩm

có thể hoàn thiện hơn về tiêu chuẩn chất lượng; về sinh khả dụng, tương đương sinhhọc; đạt yêu cầu về giá thành,…

Trước đây, phương pháp tối ưu hóa truyền thống được thực hiện bởi các phươngpháp đơn hình, toán thông kê,… với các đặc điểm hạn chế như mỗi lần cho vài giátrị xi, một giá trị yi và cần mô hình toán học Ngày nay, phương pháp tối ưu hóathông minh có nhiều ưu điểm như có thể tối ưu hóa cùng lúc nhiều giá trị xi, nhiềugiá trị yi, không cần mô hình toán học, thích hợp với dữ liệu phức tạp và có thể dựđoán chính xác

Ý nghĩa của việc tối ưu hóa công thức

Việc thành lập mô hình nhân quả để làm cơ sở cho việc tối ưu hóa công thức có liênquan đến hai loại biến số: biến độc lập X (nhân) và biến phụ thuộc Y (quả)

Nếu như biến phụ thuộc Y chỉ có một giá trị y thì nhà bào chế có thể chọn các giá trịcủa biến độc lập X (x1, x2…) sao cho giá trị y được tối đa (maximum), tối thiểu(minimum) hay đạt theo dự tính

Trong thực tế mỗi sản phẩm có rất nhiều tính chất, tức biến phụ thuộc Y có nhiềugiá trị (y1, y2…) Các giá trị y1, y2 thường hay mâu thuẫn với nhau Do đó nhà bàochế phải tối ưu hóa nhiều biến phụ thuộc (multiple optimization), tức dung hòa cácgiá trị x1, x2… sao cho các giá trị y1, y2 … đạt được tối ưu (optimum) thay vì tối đahay tối thiểu.

Quy trình tối ưu hóa với phần mềm thông minh INForm

Có thể tóm tắt quy trình tối ưu hóa công thức theo Sơ đồ 1.3

Sơ đồ 1.3 Quy trình tối ưu hóa với phần mềm thông minh INForm.

Đánh giá công thức tối ưu

Công thức tối ưu hóa có thể được đánh giá thông qua:

- Sản xuất thử với công thức tối ưu (từ 2 – 3 lần)

- So sánh các giá trị dự đoán (từ công thức được tối ưu hóa bởi phần mềm thôngminh) với các giá trị thực nghiệm

Đánh giá mô hình

ĐẠT

Mô hình nhân quả

Dự đoán (ŷi)Tối ưu hóa (xi)

Công thức tối ưu

Luyện mạng

KHÔNG

Dữ liệu thực nghiệm

Việc so sánh các giá trị dự đốn với các giá trị thực nghiệm cĩ thể được thực hiệntheo một trong hai cách: xem xét hệ số tương quan Ry.ŷ hoặc trắc nghiệm giả thuyết(phân tích phương sai hai yếu tố).

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG & PHƯƠNG PHÁP

2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, HOÁ CHẤT VÀ THIẾT BỊ

Các nguyên phụ liệu, hóa chất và dung môi, thiết bị bàochế, thiết bị kiểm nghiệm và phần mềm chuyên dụng dùngtrong điều chế phức hợp PBC và viên nén chứa phức hợp PBC(gọi tắt là viên PBC) lần lượt được trình bày trong các Bảng2.1, Bảng 2.2, Bảng 2.3

Bảng 2.1 Danh sách các nguyên liệu và hoá chất

Tên nguyên liệu, hoá

Tiêu chuẩnphân tích

Trung quốcPháp

Trung QuốcTrung QuốcViệt NamTrung Quốc

BP 2001

BP 2001PhEur 2003PhEur 2002PhEur 2002PhEur 2002

Trung QuốcPháp

ĐứcPhápHà Lan

Bảng 2.2 Danh sách các thiết bị được dùng trong điều chế

và kiểm nghiệm

Máy trộn hình lập

phương

Máy trộn ướt

Cân phân tích

Cân kĩ thuật

Máy thử độ hoà tan

Máy quang phổ UV-Vis

Máy quang phổ hồng

Precisa XB 220ASartorius TE 142Erweka DT

Shimadzu 2550Shimadzu FTIR8210

Netzsch TASC

414-3 JMD4

ĐứcĐứcĐứcĐứcĐứcNhậtNhậtĐức Ấn Độ

Bảng 2.3 Danh sách các phần mềm thiết kế và phần

mềm thông minh

Design - Expert v6.06 Thiết kế mô Intelligensys Ltd., UK

Phức hợp PBC được điều chế với quy mô 100 gam/ mẻtheo 3 phương pháp sau:

Trộn đơn thuần

Nghiền ướt

Đồng bay hơi

2.3 ĐỊNH LƯỢNG PIROXICAM TRONG PHỨC HỢP PBC

Cân chính xác một lượng bột phức tương ứng với 10 mg

Px cho vào bình định mức 100 mL Thêm 70 mL methanol,

khuấy từ 15 phút, thêm cùng dung môi đến vạch, trộnđều Ly tâm ở tốc độ 5000 vòng / phút trong 5 phút.Hút chính xác 10 mL dịch bên trên cho vào bình định mức

100 mL, pha loãng vừa đủ thể tích bằng dung dịch đệm pH7,4 và trộn đều Đo độ hấp thu của dung dịch thu được ởbước sóng 354 nm, dùng mẫu trắng là đệm 7,4

Tính hàm lượng C15H13N3O4S theo đường chuẩn đã xây dựng sẵn

2.4 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

2.4.1 ĐỘ CHÍNH XÁC VÀ ĐỘ ĐÚNG

Dung dịch chuẩn: Cân chính xác khoảng 30 mg Px chuẩn

cho vào bình định mức 100 mL, thêm 40 mL methanol đểhoà tan, pha loãng bằng nước cất đến vạch, lắc đều.Lấy chính xác 10 mL dung dịch này cho vào bình định mức

100 mL khác, pha loãng bằng dung dịch đệm phosphat pH7,4 được dung dịch có nồng độ 30 µg/ mL (dung dịch A)

Dung dịch thử: Cân chính xác khoảng một lượng phức tương

ứng với 10 mg Px cho vào bình định mức 100 mL Thêm 70 mLmethanol, khuấy từ 15 phút, thêm cùng dung môi đến vạch,trộn đều Ly tâm ở tốc độ 5000 vòng/ phút trong 5 phút.Hút chính xác 10 mL dịch bên trên cho vào bình định mức 100

mL, pha loãng vừa đủ thể tích bằng dung dịch đệm pH 7,4 vàtrộn đều (dung dịch thu được có nồng độ khoảng 10µg/ mL).Chuẩn bị 9 dung dịch thử có nồng độ khoảng 10µg/ mL chia 3nhóm Sau đó thêm vào mỗi nhóm lượng Px chuẩn tương ứng

90 %, 100 % và 110 % lượng Px có trong dung dịch thử được 3nhóm dung dịch có nồng độ 19, 20 và 21 µg/ mL

Đo độ hấp thu của các dung dịch thu được ở bước sóng 354

nm, dùng mẫu trắng là đệm pH 7,4

Xác định tỷ lệ phục hồi % trung bình và hệ số phân tán (CV

%) của dữ liệu

2.4.2 TÍNH TUYẾN TÍNH

Cân chính xác khoảng 20 mg Px chuẩn cho vào bình định mức

100 mL, thêm 40 mL methanol để hoà tan, pha loãng bằng nướccất đến vạch, lắc đều được dung dịch X (200 µg/ mL) Lấy chínhxác 10 mL dung dịch này cho vào bình định mức 100 mL khác,pha loãng bằng dung dịch đệm phosphat pH 7,4 được dung dịchcó nồng độ 20 µg/ mL (dung dịch Y)

Tiến hành pha các gam mẫu có nồng độ 4-28 µg/ mL Đo độhấp thu ở bước sóng 354 nm, dùng mẫu trắng là đệm pH 7,4.Xây dựng phương trình đường chuẩn biểu diễn mối quan hệgiữa nồng độ Px và độ hấp thu, tính hệ số R2, đánh giá tínhtương thích của phương trình và ý nghĩa của hệ số bo

2.5 ĐÁNH GIÁ SỰ HÌNH THÀNH PHỨC HỢP

2.5.1 PHA HOÀ TAN

Cho một lượng dư Px vào 6 bình nón đựng 40 mL đệm pH 7,4 cóchứa β-CD với nồng độ tăng dần từ 0-0,014 M Lắc 6 bình

trên trong vòng 72 giờ Sau đó lọc qua lọc 0,45µm, pha loãngbằng dung dịch đệm pH 7,4, đo độ hấp thu ở bước sóng 354

nm Xây dựng đồ thị biểu diễn mối tương quan giữa nồng độ

Px hoà tan và nồng độ β-CD trong dung dịch đệm pH 7,4

2.5.2 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH NHIỆT VI SAI (DSC)

Nhiệt đồ của Px, β-CD và các phức được ghi bởi máy NetzschTASC 414-3 Thiết bị này được hiệu chỉnh với indium, kẽmtrước khi phân tích mẫu dưới dòng khí nitơ

Cân một lượng chính xác khoảng 10 mg Px, β-CD, các phức chovào đĩa nhôm hàn kín, quét với tốc độ 10 oC/ phút trongkhoảng nhiệt độ từ 30-250 oC Phân tích nhiệt đồ dựa vào sựxuất hiện của đỉnh nội nhiệt tương ứng với nhiệt độ nóngchảy của từng chất

2.5.3 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH PHỔ HỒNG NGOẠI (IR)

Mẫu chuẩn: nghiền khoảng 2 mg Px chuẩn hay β-CD vớikhoảng 200 mg KBr, trộn đều, dập viên và ghi phổ hồng ngoại

ở số sóng 400-4000 cm-1

Mẫu thử: nghiền lượng phức hợp PBC có chứa khoảng 2 mg Px

với khoảng 200 mg KBr, trộn đều, dập viên và ghi phổ hồngngoại ở số sóng 400-4000 cm-1

.

Phân tích và đánh giá sự thay đổi các đỉnh đặc trưngcủa Px dạng nguyên liệu so với đỉnh của Px trong cácphức hợp PBC

2.5.4 ĐỘ TAN

Cho một lượng dư Px (150 mg) hoặc lượng phức PBC chứa lượng

Px tương ứng vào trong các bình nón nút mài có chứa 40 mLđệm pH 7,4 Lắc đều các bình trong 72 giờ, sau đó lọc qua lọc0,45µm, pha loãng thích hợp bằng đệm pH 7,4, đo độ hấp thucủa các dung dịch ở bước sóng 354 nm Xác định độ tan của

Px nguyên liệu và Px trong các phức PBC trong môi trườngđệm pH 7,4

2.5.5 ĐỘ HOÀ TAN

Độ hoà tan của Px nguyên liệu và các phức PBC được đánhgiá trong các điều kiện như sau:

- Thiết bị: máy thử độ hoà tan kiểu cánh khuấy

- Môi trường: 500 mL dung dịch đệm pH 7,4

- Tốc độ cánh khuấy: 100 vòng/ phút

- Nhiệt độ: 37 oC ± 2

Quy trình

50 mg Px hoặc lượng phức chứa lượng Px tương ứng được rắcđều trên bề mặt môi trường 10 mL mẫu được rút ở thờiđiểm sau 1, 3, 5, 7, 10 và 15 phút Bổ sung lại bằng dung dịchđệm pH 7,4 sau mỗi lần rút mẫu Pha loãng mẫu thích hợpbằng đệm pH 7,4 và đo độ hấp thu ở bước sóng 354 nm

Phần trăm Px đã hoà tan vào môi trường tại các thời điểmđược tính theo đường chuẩn đã xây dựng

Công thức tính độ hoà tan của Px ở từng thời điểm:

10 a

1 (%)

Trong đó:

Dj: độ hoà tan của Px (%) ở thời điểm lấy mẫu phút thứ ja: lượng Px (mg) cho vào

Cj: nồng độ của Px (µg/ mL) ở thời điểm j

Ci: nồng độ của Px (µg/ mL) ở thời điểm i

2.6 NÂNG CẤP QUY MÔ ĐIỀU CHẾ PHỨC HỢP PBC

Dựa vào kết quả phân tích nhiệt vi sai DSC và phổ hồng ngoại

IR, sự cải thiện về độ tan và độ hoà tan của các phức PBC, 1trong 3 phương pháp điều chế phức sẽ được chọn lựa để tiếptục khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến tính chất phức trongquá trình điều chế Tiếp theo sau, phương pháp này sẽ đượckhảo sát khả năng nâng cấp cỡ lô để có thể đáp ứngđược yêu cầu điều chế viên nén chứa phức hợp PBC

2.7.3 KIỂM NGHIỆM VIÊN NÉN PBC

Viên nén PBC (bán thành phẩm) sau khi điều chế sẽđược kiểm nghiệm theo các chỉ tiêu sau:

2.7.3.1 Độ cứng, độ mài mòn, độ đồng đều khối lượng

Tiến hành theo DĐVN III (2002), phụ lục 1 phần viên nén

[1]

2.7.3.2 Định lượng viên PBC

Theo phương pháp đã mô tả trong mục 2.3 , thay thế lượng bột

phức bằng lượng bột viên tương ứng

2.7.3.3 Độ hoà tan

Độ hoà tan của viên PBC được thực hiện trong các điều kiệnnhư sau:

- Thiết bị: máy thử độ hoà tan kiểu cánh khuấy

- Môi trường: 500 mL dung dịch đệm pH 7,4

- Tốc độ cánh khuấy: 50 vòng/ phút

- Nhiệt độ: 37 oC ± 2

- Thời điểm lấy mẫu: sau 1, 2, 3 phút

- Định lượng: quang phổ UV ở bước sóng 354 nm

2.8 NGHIÊN CỨU CÔNG THỨC VỚI TRỢ GIÚP VI TÍNH

2.8.1 THIẾT KẾ MÔ HÌNH CÔNG THỨC

Phần mềm: Design-Expert v6.06 (Stat-Ease Inc., USA).

Mô hình: D-Optimal gồm 14 công thức.

Biến độc lập:

- x1: lượng Kollidon CL (mg): 3 mức (6, 12 và 18)

- x2: loại tá dược G hay C