ELISA Enzymelinked immunosorbent assay hay còn gọi là EIAenzyme immunoassay là một kĩ thuật y sinh dùng để phát hiện kháng nguyên hay kháng thể có trong một mẫu.Đối với thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem gen chuyển vào cây trồng có sinh ra protein hay không, và protein có đúng hay không.
Trang 1ELISA
(Enzyme-linked immunosorbent
assay)
1 Nguy n Th Kim Anh - 20140161 ễn Thị Kim Anh - 20140161 ị Kim Anh - 20140161
3 Nguy n Th Ng c Anh - 20140168 ễn Thị Kim Anh - 20140161 ị Kim Anh - 20140161 ọc Anh - 20140168
Trang 2N i dung chính ội dung chính
Trang 3• ELISA- Enzyme-linked immunosorbent assay hay còn g i là EIA- ọc Anh - 20140168
enzyme immunoassay là m t kĩ thu t y sinh dùng đ phát hi n kháng ội dung chính ật y sinh dùng để phát hiện kháng ể phát hiện kháng ện kháng nguyên hay kháng th có trong m t m u ể phát hiện kháng ội dung chính ẫu.
• Đ i v i th c ph m bi n đ i gen, ELISA là kĩ thu t đ xác đ nh xem ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ật y sinh dùng để phát hiện kháng ể phát hiện kháng ị Kim Anh - 20140161 gen chuy n vào cây tr ng có sinh ra protein hay không, và protein có ể phát hiện kháng ồng có sinh ra protein hay không, và protein có đúng hay không.
Ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp
đích ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp
1 Giới thiệu phương pháp
Trang 4Các b ưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c chính t o GMO ạo GMO
Trang 5• Đ th c hi n đ ể phát hiện kháng ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c ELISA c n có s b t c p đ c hi u ần có sự bắt cặp đặc hiệu ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ắt cặp đặc hiệu ặp đặc hiệu ặp đặc hiệu ện kháng
gi a m t kháng th và m t kháng nguyên c th ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể ội dung chính ể phát hiện kháng ội dung chính ục ể phát hiện kháng
2 C ch c a ph ơng Quang Hoàng - 20141742 ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ủa phương pháp Elisa ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp Elisa
3 Các thi t b c n có ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ị Kim Anh - 20140161 ần có sự bắt cặp đặc hiệu
Trang 6Đĩa ELISA 96 gi ng đến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c s d ng nhi u nh t trong ử dụng nhiều nhất trong ục ều nhất trong ất trong ELISA thường là polystyrene hoặc các dẫn xuất của ng là polystyrene ho c các d n xu t c a ặp đặc hiệu ẫu ất trong ủa phương pháp Elisapolystyrene
Ph bi n nh t là đĩa 96 gi ng đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ất trong ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c t ch c thành 8 ức thành 8 hàng và 12 c t M i gi ng gi kho ng 350 µl th tích ội dung chính ỗi giếng giữ khoảng 350 µl thể tích ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể ảng 350 µl thể tích ể phát hiện kháng
v i m t khu v c bên trong kho ng 2,5 cmới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ội dung chính ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ảng 350 µl thể tích 2
Trang 7- Có 2 lo i pipet thạo GMO ường là polystyrene hoặc các dẫn xuất của ng được ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ử dụng nhiều nhất trong ục c s d ng là pipet đa kênh và pipet đ n kênh Pipet ơng Quang Hoàng - 20141742
đ n kênh chia làm 2 d ng: c đ nh th ơng Quang Hoàng - 20141742 ạo GMO ị Kim Anh - 20140161 ể phát hiện kháng tích và đi u ch nh th tích (1- 20 ml, 10- ều nhất trong ỉnh thể tích (1- 20 ml, 10- ể phát hiện kháng
100 ml, 20- 200 ml ), còn pipet đa kênh
thường là polystyrene hoặc các dẫn xuất của ng được ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c dùng là lo i 8 đ u tip và 12 ạo GMO ần có sự bắt cặp đặc hiệu
đ u tip đ phù h p v i s lần có sự bắt cặp đặc hiệu ể phát hiện kháng ợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ng hàng và
c t c a đĩa ELISA ội dung chính ủa phương pháp Elisa
- V thao tác có th chia thành pipet ều nhất trong ể phát hiện kháng phân ph i bán t đ ng và pipet phân ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ội dung chính
ph i hoàn toàn t đ ng.ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ội dung chính
ELISA Pipet
Trang 8• H th ng máy r a ELISA có th ện kháng ử dụng nhiều nhất trong ể phát hiện kháng chia thành các lo i nh sau: có ạo GMO ư
th r a m t hàng ho c c t t i ể phát hiện kháng ử dụng nhiều nhất trong ội dung chính ặp đặc hiệu ội dung chính ạo GMO
m t th i đi m, có th r a m t ội dung chính ờng là polystyrene hoặc các dẫn xuất của ể phát hiện kháng ể phát hiện kháng ử dụng nhiều nhất trong ội dung chính lúc c đĩa ho c r a m t l n ảng 350 µl thể tích ặp đặc hiệu ử dụng nhiều nhất trong ội dung chính ần có sự bắt cặp đặc hiệu nhi u đĩa Tùy thu c vào m c ều nhất trong ội dung chính ục đích công vi c mà ta l a ch n ện kháng ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ọc Anh - 20140168
lo i máy phù h p.ạo GMO ợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu
H th ng máy r a ệ thống máy rửa ống máy rửa ửa
Máy đ c k t qu ELISA ọc kết quả ELISA ết quả ELISA ả ELISA
Tương Quang Hoàng - 20141742ng t máy r a ELISA, máy đ c ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ử dụng nhiều nhất trong ọc Anh - 20140168ELISA cũng chia thành 3 nhóm: có
th đ c m t hàng ho c c t trong ể phát hiện kháng ọc Anh - 20140168 ội dung chính ặp đặc hiệu ội dung chính
m t l n, có th đ c k t qu c a ội dung chính ần có sự bắt cặp đặc hiệu ể phát hiện kháng ọc Anh - 20140168 ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ảng 350 µl thể tích ủa phương pháp Elisa
c đĩa cùng m t l n ho c đ c k t ảng 350 µl thể tích ội dung chính ần có sự bắt cặp đặc hiệu ặp đặc hiệu ọc Anh - 20140168 ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
qu nhi u đĩa cùng m t lúc. ảng 350 µl thể tích ều nhất trong ội dung chính
Trang 9Kháng th và kháng nguyên ể và kháng nguyên Kháng th ể và kháng nguyên là các phân t immunoglobulin (có b n ch t glycoprotein), do các t bào ử dụng nhiều nhất trong ảng 350 µl thể tích ất trong ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem lympho B cũng nh các tư ương Quang Hoàng - 20141742ng bào ti t ra đ h mi n d ch nh n bi t và vô hi u hóa các ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ể phát hiện kháng ện kháng ễn Thị Kim Anh - 20140161 ị Kim Anh - 20140161 ật y sinh dùng để phát hiện kháng ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng tác nhân l , ch ng h n các vi khu n ho c virus M i ạo GMO ẳng hạn các vi khuẩn hoặc virus Mỗi ạo GMO ẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ặp đặc hiệu ỗi giếng giữ khoảng 350 µl thể tích kháng thể và kháng nguyên ch có th nh n di n ỉnh thể tích (1- 20 ml, 10- ể phát hiện kháng ật y sinh dùng để phát hiện kháng ện kháng
m t epitope kháng nguyên duy nh t.ội dung chính ất trong
Kháng nguyên là phân t kích thích đáp ng mi n d ch c a c th , đ c bi t là s n ử dụng nhiều nhất trong ức thành 8 ễn Thị Kim Anh - 20140161 ị Kim Anh - 20140161 ủa phương pháp Elisa ơng Quang Hoàng - 20141742 ể phát hiện kháng ặp đặc hiệu ện kháng ảng 350 µl thể tích
xu t kháng th Thông thất trong ể phát hiện kháng ường là polystyrene hoặc các dẫn xuất của ng kháng nguyên là m t protein hay m t polysaccharide, ội dung chính ội dung chính
nh ng nó cũng có th là b t c lo i phân t nào.ư ể phát hiện kháng ất trong ức thành 8 ạo GMO ử dụng nhiều nhất trong
4 Phân lo i ph ạo GMO ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp elisa
Trang 10Phân lo i ại
Ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp ELISA tr c ti p đ ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c coi là lo i đ n gi n nh t trong ạo GMO ơng Quang Hoàng - 20141742 ảng 350 µl thể tích ất trong các ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp ELISA
Trang 12Phân lo i ại
ELISA sandwich
Ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp ELISA sandwich là m t lo i ít ph bi n c a kỹ thu t ELISA, ội dung chính ạo GMO ổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ủa phương pháp Elisa ật y sinh dùng để phát hiện kháng
nh ng r t hi u qu trong vi c phát hi n kháng nguyên trong m u H n ư ất trong ện kháng ảng 350 µl thể tích ện kháng ện kháng ẫu ơng Quang Hoàng - 20141742
n a, nhi u b kit th ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể ều nhất trong ội dung chính ương Quang Hoàng - 20141742 ng m i ELISA đ ạo GMO ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c xây d ng d a trên lo i ELISA ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ạo GMO này.
Trang 13Phân lo i ại
Ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp ELISA c nh tranh là quá trình g n c nh tranh th c hi n b i ạo GMO ắt cặp đặc hiệu ạo GMO ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng ởi
nguyên/kháng th thêm vào (đã đc g n v i enzym) Quy trình c a ể phát hiện kháng ắt cặp đặc hiệu ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ủa phương pháp Elisa
ph ương Quang Hoàng - 20141742 ng pháp ELISA c nh tranh khác m t vài đi m so v i ELISA gián ti p, ạo GMO ội dung chính ể phát hiện kháng ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ELISA sandwich và ELISA tr c ti p ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
Trang 14Ưu điểm ể phát hiện kháng Ít t n th i gianờng là polystyrene hoặc các dẫn xuất của
Ít bưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c ti n hànhến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
Tránh ph n ng ảng 350 µl thể tích ức thành 8 chéo gi a các KT ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể
Đ nh y khá caoội dung chính ạo GMOLinh đ ngội dung chính
Ti t ki mến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng
Đ nh y và linh ội dung chính ạo GMO
đ ng caoội dung chính
Đ đ c hi u caoội dung chính ặp đặc hiệu ện kháng
M u không c n ẫu ần có sự bắt cặp đặc hiệu
ph i tinh s ch ảng 350 µl thể tích ạo GMO
trưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c phân tích
Thích h p cho ợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu
m u ph c t pẫu ức thành 8 ạo GMO
Phát hi n đc ện kháng
m u v i lẫu ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ng KN/KT ít
Nhược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu c
đi mể phát hiện kháng Đ nh y th pội dung chính ạo GMO ất trong
Ít linh đ ngội dung chính
Có th x y ra ể phát hiện kháng ảng 350 µl thể tích
ph n ng chéo ảng 350 µl thể tích ức thành 8
gi a các kháng ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể
th th c p => ể phát hiện kháng ức thành 8 ất trong
t o nhi uạo GMO ễn Thị Kim Anh - 20140161
Khá nhi u công ều nhất trong
đo nạo GMO
Ít phù h p đ ợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ể phát hiện kháng xác đ nh kháng ị Kim Anh - 20140161thể phát hiện kháng
Khó khăn trong
vi c đ c k t ện kháng ọc Anh - 20140168 ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
qu => sd máy ảng 350 µl thể tích
Trang 15Mô hình sandwich kháng th - ể phát hiện kháng kháng nguyên (pr) – kháng thể phát hiện kháng
5 Quy trình th c hi n elisa ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng
Trang 16=> Quan sát hi n t ện kháng ược ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ng và đ c k t qu đ a ra k t lu n ọc Anh - 20140168 ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ảng 350 µl thể tích ư ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ật y sinh dùng để phát hiện kháng
Trang 17Mô hình sandwich kháng th - ể phát hiện kháng kháng nguyên (pr) – kháng thể phát hiện kháng
5 Quy trình th c hi n elisa ực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng
Trang 18B ưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c 1: Chu n b đĩa elisa c đ nh kháng th s ẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ị Kim Anh - 20140161 ị Kim Anh - 20140161 ể phát hiện kháng ơng Quang Hoàng - 20141742
c p ất trong
liên k t v i các ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem kháng th (pr) ể phát hiện kháng theo nguyên t c ắt cặp đặc hiệu
k nị Kim Anh - 20140161 ưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c
phá v vòng benzene ỡ vòng benzene
l các nhóm OH- và ội dung chính COOH- t ương Quang Hoàng - 20141742 ng tác v i ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem các kháng th theo ể phát hiện kháng
t ương Quang Hoàng - 20141742 ng tác u n ư ưới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem c
tăng kh năng ảng 350 µl thể tích dính c a đĩa đ i ủa phương pháp Elisa
v i kháng th ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ể phát hiện kháng
Đĩa
elisa
Trang 19Kĩ thu t ph gi ng ật y sinh dùng để phát hiện kháng ủa phương pháp Elisa ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
• Cho 1 th tích nh t đ nh kháng th vào đĩa ể phát hiện kháng ất trong ị Kim Anh - 20140161 ể phát hiện kháng polysityren v i n ng đ phù h p ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ồng có sinh ra protein hay không, và protein có ội dung chính ợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu
+ V i đĩa elisa th h cũ : 100 – 200 ng IgG/cm2ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng + V i đĩa elisa th h m i: 400 -500 ng IgG/cm2ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ện kháng ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
• Ủ qua đêm ở 4 độ C khoảng 2 giờ qua đêm 4 đ C kho ng 2 giởi ội dung chính ảng 350 µl thể tích ờng là polystyrene hoặc các dẫn xuất của
+ pH= 7- 9 phù h p v i prợc ELISA cần có sự bắt cặp đặc hiệu ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
Trang 20Y u t nh h ết quả ELISA ống máy rửa ả ELISA ưởng quá trình phủ giếng ng quá trình ph gi ng ủ giếng ết quả ELISA
• Th i gian ờng là polystyrene hoặc các dẫn xuất của
• Đ tinh khi t ội dung chính ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
• Nhi t đ ện kháng ội dung chính
• N ng đ kháng th ồng độ kháng thể ộ kháng thể ể và kháng nguyên
Trang 21Kĩ thu t khóa gi ng ật y sinh dùng để phát hiện kháng ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem
Khóa gi ng = ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem (BSA) c a bò , s a g y hay huy t thanh c a th , gelatin c a ủa phương pháp Elisa ử dụng nhiều nhất trong ần có sự bắt cặp đặc hiệu ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ủa phương pháp Elisa ỏ, gelatin của ủa phương pháp Elisa
cá đ che đi nh ng ch mà không liên k t v i kháng th , tránh kháng th ể phát hiện kháng ữa một kháng thể và một kháng nguyên cụ thể ỗi giếng giữ khoảng 350 µl thể tích ến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ể phát hiện kháng ể phát hiện kháng
sẽ tương Quang Hoàng - 20141742ng tác v i thành ph n khác sau này s d ng ới thực phẩm biến đổi gen, ELISA là kĩ thuật để xác định xem ần có sự bắt cặp đặc hiệu ử dụng nhiều nhất trong ục