Chiết xuất, phân lập một số hợp chất từ cặn chiết ethyl acetat vỏ quả cây bảy lá một hoa (paris polyphylla var chinensis (franch ) h hara) trồng ở lào cai

Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC NGUYỄN THỊ BƢỞI CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CẶN CHIẾT ETHYL ACETAT VỎ QUẢ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) TRỒNG Ở LÀO CAI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Hà Nội – 2017 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƢỢC Ngƣời thực hiện: NGUYỄN THỊ BƢỞI CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CẶN CHIẾT ETHYL ACETAT VỎ QUẢ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) TRỒNG Ở LÀO CAI KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƢỢC HỌC Khóa: QH.2012.Y Ngƣời hƣớng dẫn: PGS.TS ĐỖ THỊ HÀ PGS.TS DƢƠNG THỊ LY HƢƠNG Hà Nội – 2017 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 LỜI CẢM ƠN Lời xin gửi lời cảm ơn đến Lãnh đạo, thầy cô Khoa Y – Dƣợc, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện cho đƣợc học tập, nghiên cứu, rèn luyện để hoàn thành chƣơng trình học tập suốt năm qua làm khóa luận tốt nghiệp Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Đỗ Thị Hà, PGS.TS Dƣơng Thị Ly Hƣơng, ThS Nguyễn Thị Duyên, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ hoàn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn tới cán nghiên cứu khoa Hóa thực vật – Viện Dƣợc liệu, lãnh đạo Viện Dƣợc liệu tạo điều kiện cho trình tiến hành thực nghiệm Viện Tôi xin cảm ơn hỗ trợ kinh phí từ đề tài Quỹ L'oreal National Fellowship – 2016 phần kinh phí từ đề tài cấp Bộ Y tế: “Nghiên cứu Bảy hoa (Paris polyphylla var chinensis Smith) theo hƣớng hỗ trợ điều trị ung thƣ vú, 2017-2019” Cuối xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ngƣời luôn quan tâm, giúp đỡ, động viên suốt thời gian qua Dù cố gắng, nhƣng kiến thức, kỹ thời gian thực hạn hẹp nên khóa luận không tránh khỏi thiếu sót Tôi mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp thầy cô để khóa luận đƣợc hoàn thiện Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, tháng 06 năm 2017 Sinh viên Nguyễn Thị Bƣởi Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa Ký hiệu BLMH Bảy hoa CC Sắc ký cột (Column Chromatography) DCM Diclomethan EtOAC Ethyl acetat EtOH Ethanol GI50 Nồng độ ức chế 50% gia tăng tế bào HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid Chromatography) IC50 Nồng độ ức chế 50% đối tƣợng thử LD50 Nồng độ gây chết 50% đối tƣợng thử M Khối lƣợng phân tử (Mass) MeOH Methanol MS Phổ khối (Mass Spectroscopy) NMR Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân (Nuclear Magnetic Resonance) PP Paris polyphylla PPC Paris polyphylla var chinensis PPY Paris polyphylla var yunnanensis SKLM Sắc ký lớp mỏng TGI Total growth inhibitor TLC Sắc lớp mỏng (Thin Layer Chromatography) TT Thuốc thử UV Phổ tử ngoại (Ultra Violet) VKH&CNVN Viện khoa học công nghệ Việt Nam v/v Thể tích/ Thể tích Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Các loài thuộc chi Paris L Việt Nam Bảng 1.2 Các flavonoid đƣợc phân lập từ chi Paris 10 Bảng 3.1 Kết định tính nhóm chất hữu vỏ PPC 27 Bảng 3.2 Hệ dung môi rửa giải sắc ký cột phân đoạn EtOAc 30 Bảng 3.3 Dữ liệu phổ hợp chất (500MHz-MeOD) viniferin 38 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc saponin spirostan chi Paris Hình 1.2 Cấu trúc saponin furostan Hình 1.3 Cấu trúc saponin pregnan Hình 1.4 Một số saponin steroid khác đƣợc phân lập từ loài thuộc chi Paris Hình 1.5 Cấu trúc hóa học saponin triterpen Hình 1.6 Các phận sinh dƣỡng sinh sản Bảy hoa – Paris polyphylla var chinenis Franchet đƣợc trồng Sapa, Lào Cai 12 Hình 2.1 Mẫu Bảy hoa thu hái Lào Cai 18 Hình 2.2 Nguyên tắc sắc ký 20 Hình 3.1 Sơ đồ chiết cao phân đoạn vỏ bảy hoa 29 Hình 3.2 Sắc ký đồ silica gel 60 F254 (Merck, 20x10 cm) cao ethyl acetat 29 Hình 3.3 Sơ đồ phân lập hợp chất từ cao phân đoạn PE phần vỏ 31 Hình 3.4 Sắc ký đồ TLC silica gel 60 F254 (Merck, 20x10 cm) cao phân đoạn EtOAc hợp chất phân lập đƣợc 32 Hình 3.5 Cấu trúc hóa học hợp chất 1-3 33 Hình 3.6 Phổ 1H-NMR hợp chất 34 Hình 3.7 Sắc ký đồ TLC silica gel 60 F254 (Merck, 20x10 cm) hợp chất chất chuẩn stigmasterol 34 Hình 3.8 Phổ 1H-NMR hợp chất 35 Hình 3.9 Phổ DEPT hợp chất 36 Hình 3.10 Phổ ESI-MS hợp chất 36 Hình 3.11 Phổ 1H-NMR hợp chất 37 Hình 3.12 Phổ 13C-NMR (A) HSQC (B) hợp chất 38 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC BẢNG BIỂU DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG – TỔNG QUAN .2 1.1 1.2 Tổng quan chi Paris 1.1.1 Phân loại thực vật phân bố chi Paris 1.1.2 Đặc điểm thực vật 1.1.3 Thành phần hóa học chi Paris 1.1.4 Độc tính .11 Tổng quan loài Bảy hoa .11 1.2.1 Vị trí phân loại tên gọi .11 1.2.2 Đặc điểm thực vật 12 1.2.3 Sinh thái, phân bố 13 1.2.4 Thành phần hóa học 13 1.2.5 Nghiên cứu hoạt tính sinh học 14 1.2.6 Cách trồng .16 1.2.7 Thu hái chế biến .16 1.2.8 Công dụng cách dùng .16 CHƢƠNG – ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tƣợng .18 2.2 Hoá chất, trang thiết bị 18 2.3 2.2.1 Hoá chất 18 2.2.2 Thiết bị 19 Phƣơng pháp nghiên cứu .19 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 2.3.1 Định tính phƣơng pháp hóa học 19 2.3.2 Chiết xuất, phân lập xác định cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc 19 CHƢƠNG – THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 21 3.1 Định tính nhóm chất 21 3.1.1 Đinh tính tanin 21 3.1.2 Định tính flavonoid .21 3.1.3 Định tính saponin 22 3.1.4 Định tính alcaloid 22 3.1.5 Định tính glycosid 23 3.1.6 Định tính coumarin .24 3.1.7 Định tính chất béo, caroten, sterol 25 3.1.8 Định tính đƣờng khử, acid amin, acid hữu 26 3.1.9 Định tính polysaccharid 26 3.2 Chiết xuất .28 3.3 Khảo sát phân lập hợp chất cao ethyl acetat 29 3.4 3.5 3.3.1 Khảo sát SKLM 29 3.3.2 Phân lập phƣơng pháp sắc ký cột 30 Xác định nhận dạng cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc 32 3.4.1 Hằng số vật lý kiện phổ hợp chất phân lập đƣợc 32 3.4.2 Xác định nhận dạng cấu trúc hợp chất phân lập đƣợc .33 Bàn luận .39 3.5.1 Về định tính 40 3.5.2 Về chiết xuất 40 3.5.3 Về phân lập, tinh chế nhận dạng cấu trúc hợp chất 40 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 ĐẶT VẤN ĐỀ Xã hội phát triển, chất lƣợng sống ngày đƣợc cải thiện Vì nhu cầu chăm sóc sức khỏe đƣợc trọng Hiện để đáp ứng nhu cầu đó, lĩnh vực dƣợc phẩm phát triển không ngừng Tận dụng lợi điều kiện tự nhiên kinh nghiệm việc sử dụng thuốc động vật làm thuốc từ lâu Nhiều dƣợc chất làm thuốc có nguồn gốc từ dƣợc liệu nhƣ: rutin, berberin, taxol, artermisinin Xu hƣớng nghiên cứu cấu trúc hoạt tính sinh học hợp chất thiên nhiên để phát triển nguồn tài nguyên dƣợc liệu theo hƣớng đại ngày đƣợc trọng Bảy hoa (Paris polyphylla var chinenis) loài khác chi thuốc quý hiếm, thƣờng đƣợc sử dụng dân gian để tiêu sƣng nhọt, chữa rắn cắn…[6], từ lâu Trung Quốc sử dụng vị thuốc để điều trị ung thƣ Hiện nay, tác dụng dƣợc lý đặc biệt tác dụng chống ung thƣ Bảy hoa đƣợc nhà khoa học giới sâu nghiên cứu Một số tác dụng dƣợc lý loài Paris tác dụng chống ung thƣ, điều hòa miễn dịch, cầm máu, chống oxy hóa, kháng virus, kháng nấm, chống ký sinh trùng, hạ sốt, giảm đau, an thần,….[1] Về thành phần hóa học, hợp chất phân lập đƣợc từ số loài Paris saponin, flavonol, sphingolypid glycosid khác [7] Tại Việt Nam có số nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng dƣợc lý phận mặt đất, dƣới mặt đất, thân rễ, nhiên chƣa có nghiên cứu phần vỏ Bảy hoa Vì vậy, để làm sáng tỏ thành phần hóa học nhƣ giá trị sử dụng loài Paris polyphylla var chinenis nên tiến hành thực đề tài: “Chiết xuất, phân lập số hợp chất từ cặn chiết ethyl acetat vỏ Bảy hoa (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) trồng Lào Cai” với mục tiêu phân lập xác định cấu trúc hợp chất hóa học từ cặn chiết ethyl acetat vỏ Bảy hoa thông qua việc thực nội dung sau: - Định tính nhóm hợp chất có vỏ phản ứng hóa học đặc trƣng Chiết xuất phân lập hợp chất Xác định nhận dạng cấu trúc số chất phân lập đƣợc phân đoạn ethyl acetat Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 10 of 169 CHƢƠNG – TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chi Paris 1.1.1 Phân loại thực vật phân bố chi Paris Phân loại thực vật Hiện nay, hệ thống phân loại thực vật chi Paris chƣa có thống Theo hệ thống phân loại Takhtajan (1987), vị trí phân loại chi Paris: Phân giới thực vật bậc cao Ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp Hành (Liliopsida) Phân lớp Loa kèn (Lilidae) Bộ củ nâu (Dioscoreales) Họ Bảy hoa (Trọng lâu) (Trilliaceae) Chi Bảy hoa, Tảo hƣu (Paris) [5] Phân bố Chi Paris chi nhỏ, phân bố vùng cận nhiệt đới ôn đới, chủ yếu châu Á (Trung Quốc, Ấn Độ, Butan, Nê Pan, Pakistan, Mianma, Thái Lan), châu Âu châu Mỹ [7] Thực vật chí Trung Quốc mô tả hình thái xếp chi Paris vào họ Loa kèn (Liliaceae) với 22 loài, 17 thứ, có 12 loài đặc hữu [20,26] Ở Việt Nam, chi Paris gặp, phân bố chủ yếu số tỉnh vùng núi phía bắc vùng núi cao Tây Nguyên, theo Nguyễn Thị Đỏ nghiên cứu mô tả chi tiết có khóa phân loại kèm hình ảnh chi Paris L có loài theo bảng 1.1 [7] 1.1.2 Đặc điểm thực vật Cây thảo nhiều năm; thân rễ thƣờng hình trụ, nạc, nằm ngang; phần thân mặt đất thẳng đứng, đơn độc không phân nhánh phân nhánh, nảy mầm vào mùa xuân, tàn lụi vào mùa đông Lá mọc đối mọc vòng thân, 10 lá; phiến màu lục, có vệt tím không, hình mũi giáo, hình thuôn, hình trứng ngƣợc, mềm, gân bên rõ, cuống có cuống dài ngắn Hoa thƣờng đơn độc vài hoa mọc đỉnh, to, màu lục, đều, lƣỡng tính, mẫu 5, cuống dài, thẳng đứng Đài (2) - (10), rời nhau, hình mũi giáo, màu lục màu trắng, thƣờng to cánh hoa, xếp lợp vặn Cánh hoa (3) - (10), dạng dải hình trứng, nhau, màu sắc khác Nhị - 22 chiếc, phần lớn Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 10 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 50 of 169 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Lần phân lập xác định cấu trúc hợp chất stigmasterol (1), quercetin (2), (+)-trans-ε-viniferin (3) từ vỏ Bảy hoa (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) Trong hợp chất công bố lần đầu chi Paris Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu thành phần hóa học nghiên cứu tác dụng sinh học vỏ Bảy hoa trồng Lào Cai góp phần làm giàu thêm sở liệu thành phần hóa học tác dụng sinh học nguồn gen quý định hƣớng sử dụng tƣơng lai Bảy hoa (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 50 of 169 42 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 51 of 169 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng, Nguyễn Thƣợng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Pham Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2006), Cây Thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập 1, NXB khoa học kỹ thuật, 182 184 Bộ môn dƣợc liệu (2004), Bài giảng dược liệu, Tập 1, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ môn dƣợc liệu (2004), Bài giảng dược liệu, Tập 2, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội Bộ môn dƣợc liệu (2006), Thực tập dược liệu - Phần Hóa học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, 19 Bộ y tế (2007), Thực vật học, NXB Y học, 342, 402 Võ Văn Chi (bộ mới), Từ điển thuốc Việt Nam Tập I, NXB y học, 134135 Nguyễn Thị Đỏ (2007), Thực vật chí Việt Nam 8, NXB Khoa học kỹ thuật, 311 - 321 Nguyễn Duy Thuần (2006), Chiết xuất dược liệu - Nghiên cứu thuốc từ thảo dược (Giáo trình sau Đại học), NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, 199222 Ngô Vân Thu Trần Hùng (2011), Dược liệu học, Tập I, NXB Y học 10 Châu Thị Nhã Trúc, Lâm Bích Thảo, Trần Lê Quan Trần Công Luận (2015), "Phân lập số steroid từ loài bảy hoa thu hái KonTum", Tạp chí dược liệu tập 20, số 2/2015, 82-86 11 Viện Dƣợc liệu (2015), "Nghiên cứu phân loại số loài thuộc chi Paris (Họ Trilliaceae) Việt Nam sử dụng đặc điểm hình thái thị PCRRELP", Báo cáo tổng kết đề tài sở, 41-43 12 Bùi Xuân Vững, Cơ sở phân tích sắc ký, 2-3 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 51 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 52 of 169 Tài liệu Tiếng Anh 13 Bentz, A B (2009), "A review of quercetin: Chemistry, antioxidant properties, and bioavailability", Journal of young investigators 19(10) 14 Chen, C X., Lian, H B., Li, Y C and Zhou, J (1990a), "Steroid saponins of the seed from Paris polyphylla var yunnanensis", Acta Bot Yunnan 12, 452 15 Chen, C X., Zhang, Y T and Zhou, J (1983a), "Studies on the saponin components of plants in Yunnan VI Steroid glycosides of Paris polyphylla SM var yunnanenis (FR.) HM (2)", Acta Bot Yunnan 5, 91-97 16 Chen, C X.and Zhou, J (1987), "The steroidal saponins of Paris axialis (2)", Acta Bot Yunnan 9, 239-245 17 Chen, C X., Zhou, J., Nagasawa, H and Suzuki, A (1995b), "Two minor steroidal saponins from the aerial parts of Paris polyphylla var yunnanensis", Acta Bot Yunnan 17, 215-220 18 Chen, C X., Zhou, J., Zhang, Y T and Zhao, Y Y (1990b), "Steroid saponins of aerial parts of Paris polyphylla var yunnanesis", Acta Bot Yunnan 12, 323-329 19 Dutt, A T., Chatterjee, N R., Ghpsh, S and Chopra, R N (1938), "Chemische Untersuchung der Wurzeln von Paris polyphylla", I Teil Arch Pharm 276, 343-345 20 Flora of China (2000), " Paris Linnaeus", Sp 24, 89-90 21 Gao, L L., Li, F R., Jiao, P., Yang, M F., Zhou, X J., Si, Y H., Jiang, W J and Zheng, T T (2011), "Paris chinensis dioscin induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis in human gastric cancer SGC-7901 cells", World J Gastroenterol 17(39), 4389-4395 22 Gao, L.L., Li, F R., Jiao, P., Yao, S T., Sang, H and Si, Y H (2011), "Apoptosis of human ovarian cancer cells induced by Paris chinensis dioscin via a Ca (2+)-mediated mitochondrion pathway", Asian Pac J Cancer Prev 12(5), 1361 23 Groundwater, P W., Hamid, K., Ng, I., Tallapragada, V J., Hibbs, D E and Hanrahan, J (2015), "The Differential Effects of Resveratrol and trans-εViniferin on the GABA-Induced Current in GABAA Receptor Subtypes Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 52 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 53 of 169 Expressed in Xenopus Laevis Oocytes", Journal of Pharmacy & Pharmaceutical Sciences 18(4), 328-338 24 Jiang, H., Zhao, P., Feng, J., Su, D and Ma, S (2014), "Effect of Paris saponin I on radiosensitivity in a gefitinib‑resistant lung adenocarcinoma cell line", Oncology letters 7(6), 2059-2064 25 Li, W W., Ding, L S., Li, B G and Chen, Y Z (1996), "Oligostilbenes from Vitis heyneana", Phytochemistry 42(4), 1163-1165 26 Liang Songyunand Soukuppp, V G (2000), "Paris Linnaeus", Flora of China 24, 88-95 27 Liang Songyunand Victor G.Soukup (2013), Flora of China, 1753 28 Manoheiran K P., Beving T K H and Yang D N (2003), Phytochemitry 66, 2304-2308 29 Matsuda, H., Pongpiriyadacha, Y., Morikawa, T., Kishi, A., Kataoka, S and Yoshikawa, M (2003), "Protective effects of steroid saponins from Paris polyphylla var yunnanensis on ethanol-or indomethacin-induced gastric mucosal lesions in rats: structural requirement for activity and mode of action", Bioorganic & medicinal chemistry letters 13(6), 1101-1106 30 Mimaki, Y., Kuroda, M., Obata, Y., Sashida, Y., Kitahara, M., Yasuda, A., Naoi, N., Xu, Z W., Li, M R and Lao, A N (2000), "Steroidal saponins from the rhizomes of Paris polyphylla var chinensis and their cytotoxic activity on HL-60 cells", Natural Product Letters 14(5), 357-364 31 Miyamura, M., Nakano, K., Nohara, T., Tomimatsu, T and Kawasaki, T (1982), "Steroidal saponins from Paris polyphylla Sm – supplement", Chem Pharm Bull 30, 712–718 32 Negi J S., Bisht V K., Bhandari A K., Bhatt V P., Singh P and Singh N (2014), "Paris polyphylla: chemical and biological prospectives", AntiCancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents) 14(6), 833-839 33 Nohara, T., Ito, Y., Seike, H., Komori, T., Moriyama, M., Gotmita, Y and Kawasaki, T (1982), "Study on the constituents of Paris quadriforia L", Chemical and Pharmaceutical Bulletin 30(5), 1851-1856 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 53 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 54 of 169 34 Panda, S., Jafri, M., Kar, A and Meheta, B (2009), "Thyroid inhibitory, antiperoxidative and hypoglycemic effects of stigmasterol isolated from Butea monosperma", Fitoterapia 80(2), 123-126 35 Qin, X J., Yu, M Y., Ni, W., Yan, H., Chen, C X., Cheng, Y C., He, L and Liu, H Y (2016), "Steroidal saponins from stems and leaves of Paris polyphylla var yunnanensis", Phytochemistry 121, 20-29 36 Qin, X J., Chen, C X., Ni, W., Yan, H and Liu, H Y (2013), "C 22steroidal lactone glycosides from stems and leaves of Paris polyphylla var yunnanensis", Fitoterapia 84, 248-251 37 Qin, X J., Sun, D J., Ni, W., Chen, C X., Hua, Y., He, L and Liu, H Y (2012), "Steroidal saponins with antimicrobial activity from stems and leaves of Paris polyphylla var yunnanensis", Steroids 77(12), 1242-1248 38 Selvaraj, K., Chowdhury, R and Bhattacharjee, C (2013), "Isolation and structural elucidation of flavonoids from aquatic fern Azolla microphylla and evaluation of free radical scavenging activity", Int J Pharm Pharm Sci 5(3), 743 39 Seshadri, T.and Vydeeswaran, S (1972), "Constitution of pariphyllin, a saponin isolated from the tubers of Paris polyphylla", Indian journal of chemistry 40 Shah, S A., Mazumder, P and Choudhury, M D (2012), "Medicinal properties of Paris polyphylla Smith: a review", J herbal med Toxicol 6, 2733 41 Shu, C Y., He, Y., Chun, C., Zeng, Y., Xue, D., Yan, W F., Wang, L., Hao, Z and Rong, D J (2014), "Growth inhibition by pennogenyl saponin from Rhizoma paridis on hepatoma xenografts in nude mice", Steroids 83, 39-44 42 Singh, S B.and Thakur, R S (1982), "Structure and stereochemistry of paristerone A novel phytoecdysone from the tubers of Paris polyphylla", Phytochemistry 38, 2189–2194 43 Singh, S B., Thakur, R S and Schulten, H R (1980), "Spirostanol saponins from Paris polyphylla, structures of polyphyllin C, D, E and F", Phytochemistry 21(12), 2925-2929 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 54 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 55 of 169 44 Uprety, Y., Asselin, H., Boon, E K., Yadav, S and Shrestha, K K (2010), "Indigenous use and bio-efficacy of medicinal plants in the Rasuwa District, Central Nepal", Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine 6(1), 45 Wang, Q., Xu, G and Jiang, Y (1990), "Analgesic and sedative effects of the Chinese drug rhizoma Paridis", Chinese materia medica 15(2), 109-11, 128 46 Wester, I (2000), "Cholesterol-lowering effect of plant sterols", European Journal of Lipid Science and Technology 102(1), 37-44 47 Wu, X., Wang, L., Wang, H., Dai, Y., Ye, W C and Li, Y L (2012), "Steroidal saponins from Paris polyphylla var yunnanensis", Phytochemistry 81, 133-143 48 Xiao C M., H J., Tan X Y., Tang M., Zhang H (2009), "Chemical constituents of Paris polyphylla var pseudothibetica", West China J Pharm 24, 7–9 49 Xu X M.and Zhong Z C (1988), "Studies on chemical constituents of Paris polyphylla var chinensis", Chin Tradit Herb Drugs 15, 138-140 50 Zhang, J Y., Wang, Y Z., Zhao, Y L., Yang, S B., Zuo, Z T., Yang, M Q., Zhang, J., Yang, W Z., Yang, T M and Jin, H (2011), "Phytochemicals and bioactivities of Paris species", Journal of Asian Natural Products Research 13(7), 670-681 51 Zhao, Y., Kang, L P., Liu, Y X., Zhao, Y., Xiong, C Q., Ma, B P and Dong, F T (2007), "Three new steroidal saponins from the rhizome of Paris polyphylla", Magnetic Resonance in Chemistry 45(9), 739-744 52 Zhou, Anhuan, Huang, Yongming, Li, Xun, Ni and Dazhou (1984), "Identification and quantitative determination of amino acids in Yun Mu Xiang (Sausurea lappa) and manyleaf paris (Paris polyphylla)", Zhongcaoyao 15, 496-497 53 Zhou, L.and Yang, C Z (2003), "Heptasaccharide and octasaccharide isolated from Paris polyphylla var yunnanensis and their plant growthregulatory activity", Plant Sci 165, 571–575 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 55 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 56 of 169 54 Yun, H., Lijian, C., Wenhong, Z., Yuhong, D., Yongli, W., Qiang, W and Ding, Z (2007), "Separation and identification of steroidal compounds with cytotoxic activity against human gastric cancer cell lines in vitro from the rhizomes of Paris polyphylla var chinensis", Chemistry of Natural Compounds 43(6), 672-677 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 56 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 57 of 169 PHỤ LỤC GIẤY GIÁM ĐỊNH KHOA HỌC MẪU THỰC VẬT VÀ PHỔ CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƢỢC Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 57 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 58 of 169 Phụ lục Kết giám định tên loài thực vật Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 58 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 59 of 169 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PE30 Phụ lục Phổ hợp chất PE33 Phụ lục 3.1 Phổ 1H-NMR hợp chất PE33 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 59 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 60 of 169 Phụ lục 3.2 Phổ 13C-NMR hợp chất PE33 Phụ lục 3.3 Phổ DEPT hợp chất PE33 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 60 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 61 of 169 Phụ lục Phổ hợp chất PE31 Phụ lục 4.1 Phổ 1H-NMR hợp chất PE31 Phụ lục 4.2 Phổ 13C-NMR hợp chất PE31 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 61 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 62 of 169 Phụ lục 4.3 Phổ DEPT hợp chất PE31 Phụ lục 4.4 Phổ COSY hợp chất PE31 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 62 of 169 Phụ lục 4.6 Phổ HMBC hợp chất PE31 Phụ lục 4.5 Phổ HSQC hợp chất PE31 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 63 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 63 of 169 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 64 of 169 Phụ lục 4.4 Phổ khối hợp chất PE31 Tail lieu,luan van thac si , luan an tien si 64 of 169 ... KHOA Y DƢỢC Ngƣời thực hiện: NGUYỄN THỊ BƢỞI CHIẾT XUẤT, PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT TỪ CẶN CHIẾT ETHYL ACETAT VỎ QUẢ CÂY BẢY LÁ MỘT HOA (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) TRỒNG Ở. .. ethyl acetat vỏ Bảy hoa (Paris polyphylla var chinensis (Franch.) H Hara) trồng Lào Cai với mục tiêu phân lập xác định cấu trúc hợp chất hóa học từ cặn chiết ethyl acetat vỏ Bảy hoa thông qua... hầu hết hợp chất đƣợc phân lập từ Paris polyphylla var yunnanensis 20 hợp chất đƣợc phân lập từ PPC saponin sterol gồm saponin diosgenin (12 hợp chất) , saponin pennogenin (6 hợp chất) , hợp chất