Sau khi tiến hành sắc ký cột pha thƣờng và pha đảo thu đƣợc 3 hợp chất, đƣợc nhận dạng cấu trúc là: stigmasterol (1), quercetin (2), (+)-trans-ε-viniferin (3). Việc phân lập đƣợc stigmasterol, quercetin, (+)-trans-ε-viniferin phù hợp với kết quả phân tích hóa học sơ bộ bằng các phản ứng định tính trƣớc đó.
Dự tính hoạt tính sinh học 3 hợp chất đã phân lập đƣợc:
Stigmasterol là một phytosterol, có nguồn gốc chủ yếu từ dầu đậu nành, có đặc tính làm giảm sự hấp thu cholesterol trong ruột, làm giảm nồng độ cholesterol huyết thanh và lypoprotein tỷ trọng thấp (LDL) ở ngƣời mà lipoprotein tỷ trọng cao (HDL) và triglycerid không bị ảnh hƣởng [46]. Stigmasterol có khả năng ức chế triiodothyronin huyết thanh (T3) và throxin (T4) tuyến giáp và tăng insulin làm hạ đƣờng huyết, giảm lipid peroxid trong gan và tăng hoạt tính của catalase, superoxid dismutase và glutathione (GSH) thấy tác dụng chống oxy hóa của stigmasterol [34].
Quercetin là một flavonol, cải thiện sức khỏe tim mạch, giảm nguy cơ ung thƣ, chống loãng xƣơng, chống viêm, chống dị ứng, chống độc và là chất chống oxy hóa tự nhiên có nguồn gốc thực vật và thƣờng thấy trong thực phẩm và có khả năng hấp thụ các gốc tự do [13].
(+)-trans-ε-viniferin một dimer của resveratrol chủ yếu trong nho, có nhiều tác dụng có lợi, chống oxy hóa, chống viêm, phòng ngừa ung thƣ, tăng cƣờng trí nhớ và cải thiện nhận thức [23].
Mặc dù hợp chất chính đã đƣợc các nghiên cứu chỉ ra trong Bảy lá một hoa là các hợp chất saponin, tuy nhiên qua nghiên cứu này việc phân lập đƣợc 3 hợp chất stigmasterol, quercetin, (+)-trans-ε-viniferin góp phần khẳng định thêm những tác dụng dân gian đã đƣợc sử dụng từ lâu của Bảy lá một hoa.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. Kết luận
Lần đầu tiên phân lập và xác định cấu trúc 3 hợp chất là stigmasterol (1), quercetin (2), (+)-trans-ε-viniferin (3) từ vỏ quả cây Bảy lá một hoa (Paris polyphylla var. chinensis (Franch.) H. Hara). Trong đó hợp chất 3 công bố lần đầu trong chi Paris.
2. Kiến nghị
Tiếp tục nghiên cứu về thành phần hóa học và nghiên cứu các tác dụng sinh học vỏ quả cây Bảy lá một hoa trồng ở Lào Cai góp phần làm giàu thêm cơ sở dữ liệu về thành phần hóa học và tác dụng sinh học của nguồn gen quý này định hƣớng sử dụng trong tƣơng lai của cây Bảy lá một hoa (Paris polyphylla var. chinensis
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt
1. Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng, Nguyễn Thƣợng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Pham Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2006), Cây Thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam, Tập 1, NXB khoa học và kỹ thuật, 182 - 184.
2. Bộ môn dƣợc liệu (2004), Bài giảng dược liệu, Tập 1, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội.
3. Bộ môn dƣợc liệu (2004), Bài giảng dược liệu, Tập 2, trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội.
4. Bộ môn dƣợc liệu (2006), Thực tập dược liệu - Phần Hóa học, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội, 19.
5. Bộ y tế (2007), Thực vật học, NXB Y học, 342, 402.
6. Võ Văn Chi (bộ mới), Từ điển cây thuốc Việt Nam Tập I, NXB y học, 134- 135.
7. Nguyễn Thị Đỏ (2007), Thực vật chí Việt Nam 8, NXB Khoa học và kỹ thuật, 311 - 321.
8. Nguyễn Duy Thuần (2006), Chiết xuất dược liệu - Nghiên cứu thuốc từ thảo dược (Giáo trình sau Đại học), NXB. Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội, 199- 222.
9. Ngô Vân Thu và Trần Hùng (2011), Dược liệu học, Tập I, NXB Y học. 10. Châu Thị Nhã Trúc, Lâm Bích Thảo, Trần Lê Quan và Trần Công Luận
(2015), "Phân lập một số steroid từ loài bảy lá một hoa thu hái tại KonTum",
Tạp chí dược liệu. tập 20, số 2/2015, 82-86.
11. Viện Dƣợc liệu (2015), "Nghiên cứu phân loại một số loài thuộc chi Paris
(Họ Trilliaceae) ở Việt Nam sử dụng đặc điểm hình thái và chỉ thị PCR- RELP", Báo cáo tổng kết đề tài cơ sở, 41-43.
Tài liệu Tiếng Anh
13. Bentz, A. B. (2009), "A review of quercetin: Chemistry, antioxidant properties, and bioavailability", Journal of young investigators. 19(10). 14. Chen, C. X., Lian, H. B., Li, Y. C. and Zhou, J. (1990a), "Steroid saponins
of the seed from Paris polyphylla var. yunnanensis", Acta. Bot. Yunnan. 12, 452.
15. Chen, C. X., Zhang, Y. T. and Zhou, J. (1983a), "Studies on the saponin components of plants in Yunnan. VI. Steroid glycosides of Paris polyphylla
SM. var. yunnanenis (FR.) HM. (2)", Acta Bot. Yunnan. 5, 91-97.
16. Chen, C. X.and Zhou, J. (1987), "The steroidal saponins of Paris axialis (2)",
Acta Bot. Yunnan. 9, 239-245.
17. Chen, C. X., Zhou, J., Nagasawa, H. and Suzuki, A. (1995b), "Two minor steroidal saponins from the aerial parts of Paris polyphylla var.
yunnanensis", Acta Bot. Yunnan. 17, 215-220.
18. Chen, C. X., Zhou, J., Zhang, Y. T. and Zhao, Y. Y. (1990b), "Steroid saponins of aerial parts of Paris polyphylla var. yunnanesis", Acta. Bot. Yunnan. 12, 323-329.
19. Dutt, A. T., Chatterjee, N. R., Ghpsh, S. and Chopra, R. N. (1938), "Chemische Untersuchung der Wurzeln von Paris polyphylla", I. Teil. Arch. Pharm. 276, 343-345.
20. Flora of China (2000), " Paris Linnaeus", Sp. 24, 89-90.
21. Gao, L. L., Li, F. R., Jiao, P., Yang, M. F., Zhou, X. J., Si, Y. H., Jiang, W. J. and Zheng, T. T. (2011), "Paris chinensis dioscin induces G2/M cell cycle arrest and apoptosis in human gastric cancer SGC-7901 cells", World J Gastroenterol. 17(39), 4389-4395.
22. Gao, L.L., Li, F. R., Jiao, P., Yao, S. T., Sang, H. and Si, Y. H. (2011), "Apoptosis of human ovarian cancer cells induced by Paris chinensis dioscin via a Ca (2+)-mediated mitochondrion pathway", Asian Pac J Cancer Prev. 12(5), 1361.
23. Groundwater, P. W., Hamid, K., Ng, I., Tallapragada, V. J., Hibbs, D. E. and Hanrahan, J. (2015), "The Differential Effects of Resveratrol and trans-ε-
Expressed in Xenopus Laevis Oocytes", Journal of Pharmacy & Pharmaceutical Sciences. 18(4), 328-338.
24. Jiang, H., Zhao, P., Feng, J., Su, D. and Ma, S. (2014), "Effect of Paris saponin I on radiosensitivity in a gefitinib‑resistant lung adenocarcinoma cell line", Oncology letters. 7(6), 2059-2064.
25. Li, W. W., Ding, L. S., Li, B. G. and Chen, Y. Z. (1996), "Oligostilbenes from Vitis heyneana", Phytochemistry. 42(4), 1163-1165.
26. Liang Songyunand Soukuppp, V. G. (2000), "Paris Linnaeus", Flora of China 24, 88-95.
27. Liang Songyunand Victor G.Soukup (2013), Flora of China, 1753.
28. Manoheiran K. P., Beving T. K. H. and Yang D. N. (2003), Phytochemitry 66, 2304-2308.
29. Matsuda, H., Pongpiriyadacha, Y., Morikawa, T., Kishi, A., Kataoka, S. and Yoshikawa, M. (2003), "Protective effects of steroid saponins from Paris polyphylla var. yunnanensis on ethanol-or indomethacin-induced gastric mucosal lesions in rats: structural requirement for activity and mode of action", Bioorganic & medicinal chemistry letters. 13(6), 1101-1106.
30. Mimaki, Y., Kuroda, M., Obata, Y., Sashida, Y., Kitahara, M., Yasuda, A., Naoi, N., Xu, Z. W., Li, M. R. and Lao, A. N. (2000), "Steroidal saponins from the rhizomes of Paris polyphylla var. chinensis and their cytotoxic activity on HL-60 cells", Natural Product Letters. 14(5), 357-364.
31. Miyamura, M., Nakano, K., Nohara, T., Tomimatsu, T. and Kawasaki, T. (1982), "Steroidal saponins from Paris polyphylla Sm. – supplement", Chem. Pharm. Bull. 30, 712–718.
32. Negi J. S., Bisht V. K., Bhandari A. K., Bhatt V. P., Singh P. and Singh N. (2014), "Paris polyphylla: chemical and biological prospectives", Anti- Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents). 14(6), 833-839.
33. Nohara, T., Ito, Y., Seike, H., Komori, T., Moriyama, M., Gotmita, Y. and Kawasaki, T. (1982), "Study on the constituents of Paris quadriforia L",
34. Panda, S., Jafri, M., Kar, A. and Meheta, B. (2009), "Thyroid inhibitory, antiperoxidative and hypoglycemic effects of stigmasterol isolated from
Butea monosperma", Fitoterapia. 80(2), 123-126.
35. Qin, X. J., Yu, M. Y., Ni, W., Yan, H., Chen, C. X., Cheng, Y. C., He, L. and Liu, H. Y. (2016), "Steroidal saponins from stems and leaves of Paris polyphylla var. yunnanensis", Phytochemistry. 121, 20-29.
36. Qin, X. J., Chen, C. X., Ni, W., Yan, H. and Liu, H. Y. (2013), "C 22- steroidal lactone glycosides from stems and leaves of Paris polyphylla var.
yunnanensis", Fitoterapia. 84, 248-251.
37. Qin, X. J., Sun, D. J., Ni, W., Chen, C. X., Hua, Y., He, L. and Liu, H. Y. (2012), "Steroidal saponins with antimicrobial activity from stems and leaves of Paris polyphylla var. yunnanensis", Steroids. 77(12), 1242-1248.
38. Selvaraj, K., Chowdhury, R. and Bhattacharjee, C. (2013), "Isolation and structural elucidation of flavonoids from aquatic fern Azolla microphylla and evaluation of free radical scavenging activity", Int J Pharm Pharm Sci. 5(3), 743.
39. Seshadri, T.and Vydeeswaran, S. (1972), "Constitution of pariphyllin, a saponin isolated from the tubers of Paris polyphylla", Indian journal of chemistry.
40. Shah, S. A., Mazumder, P. and Choudhury, M. D. (2012), "Medicinal properties of Paris polyphylla Smith: a review", J herbal med Toxicol. 6, 27- 33.
41. Shu, C. Y., He, Y., Chun, C., Zeng, Y., Xue, D., Yan, W. F., Wang, L., Hao, Z. and Rong, D. J. (2014), "Growth inhibition by pennogenyl saponin from Rhizoma paridis on hepatoma xenografts in nude mice", Steroids. 83, 39-44. 42. Singh, S. B.and Thakur, R. S. (1982), "Structure and stereochemistry of
paristerone. A novel phytoecdysone from the tubers of Paris polyphylla",
Phytochemistry. 38, 2189–2194.
43. Singh, S. B., Thakur, R. S. and Schulten, H. R. (1980), "Spirostanol saponins from Paris polyphylla, structures of polyphyllin C, D, E and F",
44. Uprety, Y., Asselin, H., Boon, E. K., Yadav, S. and Shrestha, K. K. (2010), "Indigenous use and bio-efficacy of medicinal plants in the Rasuwa District, Central Nepal", Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine. 6(1), 3.
45. Wang, Q., Xu, G. and Jiang, Y. (1990), "Analgesic and sedative effects of the Chinese drug rhizoma Paridis", Chinese materia medica. 15(2), 109-11, 128.
46. Wester, I. (2000), "Cholesterol-lowering effect of plant sterols", European Journal of Lipid Science and Technology. 102(1), 37-44.
47. Wu, X., Wang, L., Wang, H., Dai, Y., Ye, W. C. and Li, Y. L. (2012), "Steroidal saponins from Paris polyphylla var. yunnanensis",
Phytochemistry. 81, 133-143.
48. Xiao C. M., H. J., Tan X. Y., Tang M., Zhang H. (2009), "Chemical constituents of Paris polyphylla var. pseudothibetica", West China J. Pharm. 24, 7–9.
49. Xu X. M.and Zhong Z. C. (1988), "Studies on chemical constituents of Paris polyphylla var. chinensis", Chin. Tradit. Herb. Drugs. 15, 138-140.
50. Zhang, J. Y., Wang, Y. Z., Zhao, Y. L., Yang, S. B., Zuo, Z. T., Yang, M. Q., Zhang, J., Yang, W. Z., Yang, T. M. and Jin, H. (2011), "Phytochemicals and bioactivities of Paris species", Journal of Asian Natural Products Research. 13(7), 670-681.
51. Zhao, Y., Kang, L. P., Liu, Y. X., Zhao, Y., Xiong, C. Q., Ma, B. P. and Dong, F. T. (2007), "Three new steroidal saponins from the rhizome of Paris polyphylla", Magnetic Resonance in Chemistry. 45(9), 739-744.
52. Zhou, Anhuan, Huang, Yongming, Li, Xun, Ni and Dazhou (1984), "Identification and quantitative determination of amino acids in Yun Mu Xiang (Sausurea lappa) and manyleaf paris (Paris polyphylla)",
Zhongcaoyao 15, 496-497.
53. Zhou, L.and Yang, C. Z. (2003), "Heptasaccharide and octasaccharide isolated from Paris polyphylla var. yunnanensis and their plant growth- regulatory activity", Plant. Sci. 165, 571–575
54. Yun, H., Lijian, C., Wenhong, Z., Yuhong, D., Yongli, W., Qiang, W. and Ding, Z. (2007), "Separation and identification of steroidal compounds with cytotoxic activity against human gastric cancer cell lines in vitro from the rhizomes of Paris polyphylla var. chinensis", Chemistry of Natural Compounds. 43(6), 672-677.
PHỤ LỤC
GIẤY GIÁM ĐỊNH KHOA HỌC MẪU THỰC VẬT VÀ PHỔ CÁC HỢP CHẤT PHÂN LẬP ĐƢỢC
Phụ lục 2. Phổ 1H-NMR của hợp chất PE30
Phụ lục 3. Phổ của hợp chất PE33
Phụ lục 3.2. Phổ 13C-NMR của hợp chất PE33
Phụ lục 4. Phổ của hợp chất PE31
Phụ lục 4.1. Phổ 1H-NMR của hợp chất PE31
Phụ lục 4.3. Phổ DEPT của hợp chất PE31
Ph ụ lụ c 4. 5 . Ph ổ HSQ C c ủa h ợp ch ất PE 31 Ph ụ lụ c 4. 6 . Ph ổ HMB C c ủa h ợp ch ất PE 31