Nghiên cứu quy trình công nghệ chiết tách các chất flavonoid từ phế thải chè

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI - NGÔ HUY HIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ CHIẾT TÁCH CÁC CHẤT FLAVONOID TỪ PHẾ THẢI CHÈ LUẬN VĂN THẠC SỸ NGÀNH: CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: LÝ NGỌC TRÂM NGUYỄN THỊ MINH TÚ HÀ NỘI – 2010 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học Lời cảm ơn Tôi xin trân trọng cảm ơn Trung tâm Dầu Hương liệu & PGTP - Viện Công nghiệp thực phẩm; Bộ môn QLCL & Công nghệ nhiệt đới, trung tâm giáo dục phát triển sắc ký thuộc Trường Đại học Bách khoa Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi trình thực đề tài Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Lý Ngọc Trâm, người định hướng tận tình hướng dẫn để hoàn thành luận văn tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn PGS.TS Nguyễn Thị Minh Tú, TS Bùi Quang thuật tận tình bảo giúp đỡ trình nghiên cứu đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn anh chị em Trung tâm Dầu Hương liệu & PGTP - Viện Công nghiệp thực phẩm giúp đỡ trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn huy lãnh đạo Viện nghiên cứu ứng dụng Quân nhu - Cục Quân nhu - TCHC tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình học tập Hà Nội, tháng 11 năm 2010 Học viên Ngô Huy Hiệp Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan trước Hội đồng chấm luận văn cao học, nghiên cứu kết đạt đề tài hoàn toàn trung thực Do tiến hành nghiên cứu Các số liệu, kết nghiên cứu công trình nghiên cứu khác tham khảo có trích dẫn tài liệu tham khảo đầy đủ Hà Nội, tháng 10 năm 2010 Người viết cam đoan Ngô Huy Hiệp Xác nhận người hướng dẫn Hướng dẫn Hướng dẫn phụ TS Lý Ngọc Trâm PGS.TS Nguyễn Thị Minh Tú Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CK: Chất khô NL: Nguyên liệu DM: Dung môi HPLC: Sắc ký lỏng cao áp P/Ư: Phản ứng DM/ NL: Dung môi/nguyên liệu AH: Aryl hydrocarbon ĐH: Đại Học C: catechin EC: epicatechin GCG: gallocatechin gallate EGCG: epigallotechin gallate ECG: epicatechin gallate Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các chất flavonoid có chè đen……………………………………13 Bảng 1.2 Các chất flavonoid có chè xanh………………………………… 14 Bảng 3.1 Kết xác định hàm ẩm nguyên liệu……………… ………… ….38 Bảng 3.2 Định tính chất Flavonoid Polyphenol nguyên liệu .39 Bảng 3.3 Hàm lượng flavonoid tổng polyphenol tổng có nguyên liệu 40 Bảng 3.4 Ảnh hưởng độ mịn nguyên liệu đến trình trích ly flavonoid thô từ chè tươi (cuống chè già) 42 Bảng 3.5 Kết thu nhận flavonoid từ phế thải chè khai thác phương pháp trích ly với loại dung môi khác .43 Bảng 3.6 Ảnh hưởng số lần trích ly đến trình trích ly flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 45 Bảng 3.7 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/dung môi đến trình trích ly flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) .47 Bảng 3.8 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình trích ly flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 49 Bảng 3.9 Ảnh hưởng thời gian trích ly đến đến trình trích ly flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 51 Bảng 3.10 Khoảng biến đổi yếu tố ảnh hưởng 52 Bảng 3.11 Ma trận quy hoạch thực nghiệm 53 Bảng 3.12 Phân tích phương sai 54 Bảng 3.13 Xác định giá trị hệ số hồi quy 54 Bảng 3.14 Ảnh hưởng tỷ lệ flavonoid thô/dung môi đến trình tinh chế 58 Bảng 3.15 Ảnh hưởng số lần chiết tách đến trình thu nhận flavonoid từ flavonoid thô .59 Bảng 3.16 Hàm lượng flavonoid polyphenol có sản phẩm tinh 62 Bảng 3.17 Kết phân tích thành phần chất flavonoid có sản phẩm tinh mẫu chè cám chè tươi 63 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 3.1 Đồ thị đường chuẩn xác định flavonoid tổng 39 Hình 3.2 Đồ thị đường chuẩn xác định polyphenol tổng .40 Hình 3.3 Biểu đồ ảnh hưởng độ mịn nguyên liệu đến trình trích ly flavonoid thô từ chè tươi (cuống chè già) 42 Hình 3.4 Kết phân tích flavonoid thu loại dung môi trích ly khác TLC .44 Hình 3.5 Biểu đồ biểu thị mối tương quan số lần trích ly hiệu suất thu nhận flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 45 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn mối tương quan tỷ lệ nguyên liệu/dung môi hiệu suất thu nhận flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 48 Hình 3.7 Đồ thị biểu diễn mối tương quan nhiệt độ trích ly hiệu suất thu nhận flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) 50 Hình 3.8 Đồ thị biểu diễn mối tương quan thời gian trích ly hiệu suất thu nhận flavonoid thô từ phế thải chè (chè cám) .51 Hình 3.9 Biểu đồ bề mặt đáp ứng hiệu suất trích ly flavonoid với tỷ lệ DM/NL, nhiệt độ thời gian trích ly .55 Hình 3.10 Biểu đồ biểu diễn mối tương quan tỷ lệ flavonoid thô/dung môi hiệu suất thu nhận flavonoid tinh .59 Hình 3.11 Biểu đồ biểu thị mối tương quan số lần chiết tách hiệu suất thu nhận flavonoid từ flavonoid thô 60 Hình 3.12: Sắc ký đồ HPLC phân tích thành phần chất flavonoid có phế thải chè cám 62 Hình 3.13 Sắc ký đồ HPLC phân tích thành phần chất flavonoid có phế thải chè tươi .63 Sơ đồ 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 37 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học Sơ đồ 3.1 Quy trình công nghệ trích ly flavonoid thô từ phế thải chè 57 Sơ đồ 3.2 Quy trình công nghệ tinh chế flavonoid 61 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cảm ơn……………………………………………………………… Lời cam đoan Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình vẽ, đồ thị MỞ ĐẦU CHƯƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chè 1.1.1 Tên khoa học, nguồn gốc, phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Phân bố, trồng trọt, thu hái 1.1.4 Thành phần hóa học chè 1.1.5 Tác dụng sinh học chè .6 1.2 Hợp chất Flavonoid 12 1.2.1 Cấu trúc hóa học 12 1.2.1.1 Khung Flavonoid 12 1.2.1.2 Cấu trúc hóa học Flavonoid .12 1.2.2 Các chất Flavonoid chè .13 1.2.2.1 Các nhóm Flavonoid có chè 13 1.2.2.2 Catechin 15 1.2.2.3 Theaflavin 16 1.2.2.4 Thearubigin 18 1.2.2.5 Flavonol 18 1.2.3 Tác dụng chung Flavonoid 19 1.2.3.1 Tác dụng flavonoid đời sống thực vật 19 1.2.3.2 Tác dụng sinh học 19 1.2.3.3 Tác dụng chống oxy hóa 20 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 1.2.3.4 Tác dụng enzym 20 1.2.3.5 Tác dụng chống độc .21 1.2.3.6 Tác dụng kháng sinh, chống viêm 21 1.2.3.7 Tác dụng hệ tim mạch 21 1.2.3.8 Tác dụng hệ thần kinh 22 1.3 Tình hình nghiên cứu sản xuất, tiêu thụ chè nước 22 1.4 Phương pháp chiết suất… … .23 1.4.1 Một số trình chuyển chất nguyên liệu chiết xuất 25 1.4.1.1 Khuếch tán 25 1.4.1.2 Quá trình thẩm thấu 26 1.4.1.3 Quá trình thẩm tích 27 1.4.2 Phân loại phương pháp chiết xuất 27 1.4.2.1 Căn vào nhiệt độ chiết 27 1.4.2.2 Căn vào chế độ làm việc 27 1.4.2.3 Căn vào chuyển động tương hỗ hai pha 27 1.4.2.4 Căn vào áp suất làm việc 28 1.4.2.5 Căn vào trạng thái làm việc hai pha 28 1.4.2.6 Dựa vào biện pháp kỹ thuật đặc biệt 28 CHƯƠNG II NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Nguyên liệu hóa chất phục vụ nghiên cứu.…… 29 2.1.1 Nguyên liệu 29 2.1.2 Hóa chất thí nghiệm .29 2.1.3 Thiết bị thí nghiệm .29 2.2 Phương pháp nghiên cứu 30 2.2.1 Phương pháp phân tích thành phần nguyên liệu 30 2.2.1.1 Phương pháp xác định độ ẩm 30 2.2.1.2 Định tính flavonoid, polyphenol 30 2.2.1.3 Định lượng flavonoid,polyphenol nguyên liệu .31 2.2.1.4 Định tính flavonoid, polyphenol TLC .32 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 2.2.2 Phương pháp trích ly flavonoid từ phế thải chè 32 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu chế độ xử lý nguyên liệu trước trich ly .31 2.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố công nghệ đến trình trích ly 34 2.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố công nghệ đến trình tinh chế 35 2.2.6 Phương pháp phân tích đánh giá chất lượng flavonoid 35 2.2.7 Tối ưu hóa trinh phương pháp quy hoạch thực nghiệm 36 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 38 3.1 Kết khảo sát chung nguyên liệu 38 3.1.1 Độ ẩm nguyên liệu………………………………………… 38 3.1.2 Xác định hàm lượng flavonoid, polyphenol có nguyên liệu 38 3.1.2.1 Định tính chất flavonoid polyphenol .38 3.1.2.2 Định lượng chất flavonoid polyphenol 39 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chế độ xử lý nguyên liệu đến trình trích ly flavonoid từ phế thải chè .41 3.3 Kết nghiên cứu lựa chọn dung môi trích ly flavonoid từ phế thải chè 42 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố công nghệ đến trình trích ly flavonoid từ phế thải chè 45 3.4.1 Kết nghiên cứu lựa chọn số lần trích ly thích hợp 45 3.4.2 Kết nghiên cứu lựa chọn tỷ lệ nguyên liệu/dung môi thích hợp 47 3.4.3 Kết nghiên cứu lựa chọn nhiệt độ trích ly thích hợp .48 3.4.4 Kết nghiên cứu lựa chọn thời gian trích ly thích hợp 50 3.5 Tối ưu hóa công nghệ trích ly flavonoid từ phế thải chè phương pháp quy hoạch thực nghiêm 52 3.6 Quy trình công nghệ khai thác flavonoid từ phế thải chè .55 3.7 Kết nghiên cứu công nghệ tinh chế flavonoid 58 3.7.1 Kết nghiên cứu lựa chọn tỷ lệ flavonoid thô/dung môi thích hợp 58 3.7.2 Kết nghiên cứu lựa chọn số lần trích ly dung môi etyl axetat để thu nhận flavonoid tinh 59 3.8 Quy trình công nghệ tinh chế flavonoid 60 10 Hiệu suất thu nhận flavonoid so với tổng lượng flavonoid thô (%) Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 72.84 74 72.98 72 70 68 66 63.65 64 62 60 58 1lần 2lần 3lần Số lần chiết tách (lần) Hình 3.11 Biểu đồ biểu thị mối tương quan số lần chiết tách hiệu suất thu nhận flavonoid từ flavonoid thô Qua bảng kết 3.15 hình 3.11 ta thấy số lần chiết tách tăng hiệu suất thu nhận flavonoid tăng Tuy nhiên so với số lần chiết tách lần số lần chiết tách lần cho hiệu suất thu nhận flavonoid tăng không đáng kể Do thấy cần chiết tách lần đủ 3.8 Quy trình công nghệ tinh chế tinh flavonoid Từ kết nghiên cứu đưa quy trình công nghệ tinh flavonoid thích hợp sau (sơ đồ 3.2): Mô tả quy trình công nghệ tinh chế flavonoid từ flavonoid thô Flavonoid thô sau trình trích ly rửa chất màu, clorofin, cafein, cloroform (3 lần dịch clorofrom không màu), sau đựơc trích ly lần với dung môi etyl axetat thiết bị trích ly Tỷ lệ flavonoid thô/dung môi 1/14 Dịch trích ly phân ly đến Tách lấy phần (phần etyl axetat chứa flavonoid tinh sạch) Phần lần gộp lại làm khô Na2SO4 khan Sau phần flavonoid tan dung môi cô đặc thiết bị cô quay chân không đến khối lượng không đổi, ta thu sản phẩm flavonoid tinh Dung môi thu hồi tái sử dụng cho lần tinh chế 71 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học FLAVONOID THÔ Clorofom+Nước Trích Phân ly Lớp Clorofom Lớp Nước chứa flavonoid - Loại chất màu - Loại cafein - Loại Clorofin Thu hồi dung môi - Trích ly Số lần trích ly: lần Tỷ lệ flavonoid thô/ dung môi Phân ly Lớp etyl axetat Lớp nước Làm khô Cô đặc Sơ đồ 3.2 Quy trình công nghệ tinh chế flavonoid 72 FLAVONOID Tinh Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 3.9 Phân tích, đánh giá chất lượng Flavonoid 3.9.1 Xác định hàm lượng Flavonoid Polyphenol sản phẩm tinh Hàm lượng polyphenol flavonoid sản phẩm sau tinh chế xác định phương pháp xác định hàm lượng polyphenol tổng flavonoid tổng (phương pháp nêu phần 2.2.1) Bảng 3.16 Hàm lượng flavonoid polyphenol có sản phẩm tinh Mẫu Hàm lượng flavonoid, polyphenol (%) sản phẩm Flavonoid Polyphenol Chè cám 97,85 97,48 Chè tươi 96,67 96,59 Từ kết bảng 3.16 cho thấy sản phẩm sau tinh chế có hàm lượng flavonoid polyphenol cao > 96% 3.9.2 Xác định thành phần chất có sản phẩm tinh Flavonoid tinh thu sau trình tinh chế chè cám chè tươi, phân tích phương pháp sắc ký lỏng cao áp HPLC Phương pháp tiến hành đựơc trình bày phần 2.2.5 Kết thể hình 3.12 3.13 Hình 3.12: Sắc ký đồ HPLC phân tích thành phần chất flavonoid có sản phẩm chè tươi 73 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học Hình 3.13 Sắc ký đồ HPLC phân tích thành phần chất flavonoid có sản phẩm chè cám Với chất chuẩn sử dụng (+)-catechin (C), (-)-epicatechin (EC), ()-gallocatechin gallate (GCG), (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) So sánh thời gian lưu chất sắc ký đồ hình 3.13 hình 3.14 với thời gian lưu chất chuẩn sắc ký đồ phần phụ lục cho thấy thành phần chất có sản phẩm flavonoid tinh gồm: (+)-catechin (C), (-)-epicatechin (EC), (-)gallocatechin gallate (GCG) (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) Kết thể bảng 3.10 Bảng 3.17 Kết phân tích thành phần chất flavonoid có sản phẩm tinh mẫu chè cám chè tươi Chất chuẩn Tên chất Chè tươi Chè cám Thời gian Thời gian Diện tích Thời gian Diện tích lưu lưu peak lưu peak (phút) (phút) (ppm) (phút) (ppm) C 3.39 3.50 23.82 3.45 127.54 EC 3.98 - - 3.99 88.98 EGCG 6.73 7.09 4845.23 7.03 7340.43 GCG 8.58 8.94 54.14 8.76 2213.49 74 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học Từ kết phân tích cho thấy chất flavonoid phế thải chè bao gồm (+)-catechin(C), (-)-epicatechin(EC), (-)-gallocatechin gallate (GCG), (-)-epigallocatechin gallate (EGCG), EGCG thành phần phế thải chè Sản phẩm flavonoid tinh chè cám bao gồm EGCG GCG, chè tươi có EGCG Cùng lượng mẫu bơm vào nhau, sản phẩm tinh từ phế thải chè cám có hàm lượng EGCG lớn phế thải chè tươi, khác chè cám chế biến từ búp chè, chè tươi đuợc lấy từ cuộng chè già 75 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu thu bước đầu, rút số kết luận sau: Đã phân tích đánh giá chất lượng nguyên liệu phế thải chè gồm cám chè chè tươi (cuộng chè già), phù hợp cho mục đích thu nhận flavonoid Lựa chọn dung môi trích ly etanol 70% Xác định công nghệ trích ly flavonoid thô từ phế thải chè (sơ đồ 3.1) với chế độ xử lý nguyên liệu điều kiện công nghệ trích ly sau: - Độ mịn nguyên liệu: Đối với chè cám không cần phải xử lý, chè tươi xử lý đưa độ mịn khoảng 2mm < d ≤ 3mm - Số lần trích ly: lần - Tỷ lệ nguyên liệu/dung môi : 1/20 (g/ml) - Nhiệt độ trích ly: 800C - Thời gian trích ly: 2h Xác định công nghệ thích hợp cho việc tinh chế flavonoid (sơ đồ 3.2), với điều kiện công nghệ: - Dung môi trích ly lại: dung môi clorofom etylaxetat - Số lần trích ly lại: lần - Tỷ lệ flavonoid thô/dung môi : 1/14 (g/ml) Với công nghệ trích ly tinh chế chất flavonoid cho hiệu suất thu nhận flavonoid thô đạt: 82,08 %, flavonoid tinh đạt 72,84 % so với lượng flavonoid thô Sản phẩm flavonoid thu đựơc có chất lượng cao 4.2 KIẾN NGHỊ Đề tài bước đầu thu kết khả quan, có điều kiện thuận lợi tiếp tục hoàn thiện quy mô xưởng thực nghiệm nghiên cứu ứng dụng sản xuất số sản phẩm thực phẩm, dược phẩm 76 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học TÀI LIỆU THAM KHẢO I TIẾNG VIỆT Nguyễn Thị Chung, Nghiên cứu chiết xuất dạng bào chế flavonoid từ vỏ số loài thuộc chi citrus Việt Nam, Nhà xuất khoa học Y Dược, 1990 Đỗ Tất Lợi (1995), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học kỹ thuật Ngô Xuân Mạnh, Vũ Đình Bảng, Vũ Thị Thư, Giáo trình thực tập hóa sinh, Trường Đại học Nông nghiệp I Hà Nội, 2001 Hoàng Văn Phương Chế biến chè Nhà xuất Đại học Giáo dục chuyên nghiệp,1991 Phạm Thành Quân, Tống Văn Hằng, Nguyễn Hải Hà Microwave- assited extraction of polyphenols from frest tea shoot University of Technology VNU-TPHCM, 2006 Ngô Văn Thu, Bài Giảng Dược Liệu I &II Nhà xuất Y-Dược Hà Nội, 2006 Đặng Thị Thu, Nguyễn Thị Xuân Sâm, Tô Thị Kim Anh, Thí nghiệm hóa sinh, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội, 1997 PGS.TS Nguyễn Duy Thịnh, Giáo Trình Công Nghệ Chè.2004 Lý Ngọc Trâm, Chiharu Hazama, Makoto Shimoyamada,Hiromune Ando, Koji Kato, Ryo Yamauchi Antioxidative Compounds from the Outer Scales of Onion Journal of Agricultural and food Chermistry, năm 2005 10 GS.TSKH Nguyễn Minh Tuyền Quy hoạch thực nghiệm, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội.2005 11 Tổng cục đo lường chất lượng Việt Nam, Bộ TCVN 5613-1999 12 Viện Dược liệu (2006), Nghiên cứu thuốc từ thảo dược (Giáo trình sau đại học), Bộ GD&ĐT, Bộ Y tế, NXB Khoa học Kỹ thuật (TS Nguyễn Duy Thuẫn, PIII, chiết xuất dược liệu 77 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học II TIẾNG ANH 13 Smith, C., Lombard, K., Peffley E., Liu, W (2003), “Genetic Analysis of Quercetin in onion Lady Raider”, J Agriculture and Natural Resource 16, pp 24-28 14 Ji Young Kim, Kyung Jin Jung, Jae Sue Choi, Hae Young Chung (2004), “Hesperetin: a Potent Antioxidant Againt Peroxynitrite”, Taylor & Francis, 38(7) 15 Shin Ogata, Yoshiaki Miyake, Kanefumi Yamamoto, Katsuzumi Okumura (2000), Apoptosis Induced by the Flavonoid from Lemon Fruit (Citrus limon Burm f.) and Its Metabolites in HL-60 Cells, Japan 16 Emine Malkoc, Yasar Nuhoglu (2006), “Removal of Ni(II) ions from aqueous solutions using waste of tea factory: Adsorption on a fixed-bed column”, Hazardous Materials B135, pp 328-336 17 Makoto Kondo, Kazumi Kita, Hiro-omi Yokota (2004), “Feeding value to goats of whole-crop oat ensiled with green tea waste”, Animal Feed Science and Technology 113, pp 71-81 18 Reza Farhoosh, Gholam A Golmovahhed, Mohammad H.H.Khodaparast (2007), “Antioxidant activity of various extracts of old tea leavesand black tea wastes (Camellia sinensis L.)”, Food Chemistry 100, pp 231-236 19 Nurulain T Zaveri (2006), “Green tea and its polyphenolic catechins:Medicinal uses in cancer and noncancer applications”, Life Sciences 78, pp 2073-2080 20 Won Jo Cheong, Moon Hee Park, Gyoung Won Kang, Joung Ho Ko, and You Jin Seo (2005), “Determination of Catechin Compounds in Korean Green Tea Infusions under Various Extraction Conditions by High Performance Liquid Chromatography”, Bull Korean Chem Soc 26(5) 21 Yinzhe Jin and Kyung Ho Row (2007), “Solid-Phase Extraction of Caffeine and Catechin Compounds from Green Tea by Caffeine Molecular Imprinted Polymer”, Bull Korean Chem Soc 28(2) 78 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 22 Zhen-Yu Chen, Qin Yan Zhu, David Tsang, and Yu Huang (2001), “Degradation of Green Tea Catechins in Tea Drinks”, J Agric Food Chem 49, pp 477-482 23 Qin Yan Zhu, Anqi Zhang, David Tsang, Yu Huang, and Zhen-Yu Chen (1997), “Stability of Green Tea Catechins”, J Agric Food Chem 4, pp 46244628 III MẠNG INTERNET 24 http://en.wikipedia.org/wiki/Onion 25 http://jn.nutrition.org/cgi/content/full/138/5/885 26 http://www.ienica.net/italyseminar/posters/greenchem/marotti.pdf 2.7.Catechin - Wikipedia, the free encyclopedia.htm 2.8.Đặc tinh trà cà phê.htm 29 Những lợi ích việc uống trà.htm 30 K43T Portal - Tác dụng chè xanh.htm 31 Thành phần hóa học chè.htm 32 Trà xanh ngừa bệnh ung thư.htm 33 Thị trường XK chè VN.htm 79 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học PHỤ LỤC Kết phân tích HPLC Mẫu phế thải chè cám 80 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học 81 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học Mẫu phế thải chè tươi 82 Ngô Huy Hiệp Mẫu chuẩn: Quy hoạch thực nghiêm: Luận văn thạc sĩ khoa học Titre de l’étude Toi uu hoa qua trinh trich ly flavonoid tu phe thai che Modèle Y = b0 + b1 * X1 + b2 * X2 + b3 * X3 + b11 * (X1*X1) + b22 * (X2*X2) + b33 * (X3*X3) + b12 * (X1*X2) + b13 * (X1*X3) + b23 * (X2*X3) Caractéristiques du problème Objectif de l’étude Etude dans un domaine expérimental: Surface de Réponses Nombre de variables Nombre d’expériences 13 Nombre de coefficients 10 Nombre de réponses Domaine Expérimental Facteur Unité Centre Pas de variation U1 Ty le DM/NL 20.00 4.00 U2 Nhiet trich ly C 0.00 20.00 83 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học U3 Thoi gian Gio 2.00 1.00 Réponse(s) expérimentale(s) Réponse Unité Y Hieu suat % Matrice d’expériences N°Exp X1 X2 X3 Y 1.0000 0.0000 0.0000 83.05 -1.0000 0.0000 0.0000 69.67 0.5000 0.8660 0.0000 80.51 -0.5000 -0.8660 0.0000 69.58 0.5000 -0.8660 0.0000 74.59 -0.5000 0.8660 0.0000 72.40 0.5000 0.2887 0.8165 79.21 -0.5000 -0.2887 -0.8165 65.67 0.5000 -0.2887 -0.8165 71.68 10 0.0000 0.5774 -0.8165 75.73 11 -0.5000 0.2887 0.8165 72.25 12 0.0000 -0.5774 0.8165 78.79 13 0.0000 0.0000 0.0000 82.80 Plan d’expérimentation N°Exp Rand Ty le DM/NL Nhiet trich ly Thoi gian H ie u suat CGio% 24.00 70.00 2.00 83.05 16.00 70.00 2.00 69.67 22.00 87.32 2.00 80.51 18.00 52.68 2.00 69.58 22.00 52.68 2.00 74.59 18.00 87.32 2.00 72.40 22.00 75.77 2.82 79.21 18.00 64.23 1.18 65.67 22.00 64.23 1.18 71.68 10 20.00 81.55 1.18 75.73 11 18.00 75.77 2.82 72.25 12 20.00 58.45 2.82 78.79 13 20.00 70.00 2.00 82.80 Estimations et statistiques des coefficients : réponse Y : Hieu suat Ecart Type de la réponse 0.148 R2 0.999 PRESS N.D Nombre de degrés de liberté Nom Coefficient F.Inflation Ecart-Type t.exp Signif % b0 82.800 0.148 557.74 < 0.01 *** b1 6.606 1.00 0.074 89.00 < 0.01 *** b2 2.469 1.00 0.074 33.26 < 0.01 *** 84 Ngô Huy Hiệp Luận văn thạc sĩ khoa học b3 3.505 1.00 0.074 47.22 < 0.01 *** b11 -6.440 1.90 0.182 -35.42 < 0.01 *** b22 -9.227 1.90 0.182 -50.75 < 0.01 *** b33 -9.450 2.03 0.177 -53.48 < 0.01 *** b12 1.790 1.11 0.171 10.44 0.129 ** b13 -0.051 1.11 0.192 -0.27 80.0 b23 -8.138 1.11 0.192 -42.46 < 0.01 *** Tableau des résidus : réponse Y : Hieu suat N°Exp Yexp Ycalc Différence Normée dU 83.050 82.966 0.084 0.564 0.750 69.670 69.754 -0.084 -0.564 0.750 80.510 80.486 0.024 0.160 0.750 69.580 69.604 -0.024 -0.160 0.750 74.590 74.660 -0.070 -0.472 0.750 72.400 72.330 0.070 0.472 0.750 79.210 79.318 -0.108 -0.725 0.750 65.670 65.562 0.108 0.725 0.750 71.680 71.694 -0.014 -0.092 0.750 10 75.730 75.824 -0.094 -0.632 0.750 11 72.250 72.236 0.014 0.092 0.750 12 78.790 78.696 0.094 0.632 0.750 13 82.800 82.800 0.000 0.000 1.000 Etude graphique en D Etude graphique en D Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Variation de la réponse - Hieu suat dans le plan : Ty le DM/NL, Nhiet trich ly FACTEURS FIXES : - Thoi gian = 2.00 Gio Etude graphique en D Etude graphique en D Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Variation de la réponse - Hieu suat dans le plan : Nhiet trich ly, Thoi gian FACTEURS FIXES : - Ty le DM/NL = 20.00 U Etude graphique en D Etude graphique en D Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Inclure Ici le fichier Image C:\LPRAI\NemrodW\Data.BMP Variation de la réponse - Hieu suat dans le plan : Thoi gian, Ty le DM/NL FACTEURS FIXES : - Nhiet trich ly = 70.00 C 85 ... giá chất lượng nguyên liệu phế thải chè - Nghiên cứu công nghệ khai thác hợp chất flavonoit từ phế thải chè - Nghiên cứu công nghệ tinh chế chất flavonoit từ phế thải chè ♦ Phương pháp nghiên cứu: ... - Xây dựng quy trình công nghệ khai thác hợp chất flavonoit từ phế thải chè - Xây dựng quy trình công nghệ tinh chế chất flavonoit từ phế thải chè ♦ Nội dung nghiên cứu: - Nghiên cứu phân tích... liệu đến trình trích ly flavonoid từ phế thải chè .41 3.3 Kết nghiên cứu lựa chọn dung môi trích ly flavonoid từ phế thải chè 42 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố công nghệ đến trình trích