Ứng Dụng Phương Pháp Phân Tích Dna Góp Phần Chỉnh Lý Tên Chi (Bambusa Schreb.) Cho Ba Loài Tre Và Đánh Giá Đa Dạng Nucleotide Cho Tám Loài Tre Chưa Có Tên Khoa Học (Bambusa Sp.) Ở Việt Nam (2)

Header Page of 126 Số 1hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT VŨ THỊ THU HIỀN ỨNG DỤNG PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH DNA GÓP PHẦN CHỈNH LÝ TÊN CHI (BAMBUSA SCHREB.) CHO BA LOÀI TRE VÀ ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG NUCLEOTIDE CHO TÁM LOÀI TRE CHƢA CÓ TÊN KHOA HỌC (BAMBUSA SP.) Ở VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC HÀ NỘI - NĂM 201 Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 2hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ TSGS TS Lê Xu Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 3hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ MỞ ĐẦU Chi tre (Bambusa Schreb.) phân bố rộng rãi khắp nơi Việt Nam Đây nguồn tài nguyên có giá trị nhiều lĩnh vực công nghiệp, gia dụng, cảnh quan, thực phẩm,… Lần vào cuối kỷ XIX, nhà thực vật học người Pháp Balansa (1890) phân loại tre Việt Nam có chi loài, có loài Nhưng đến cuối kỷ XX công trình phân loại tre Lê Nguyên (1971) Phạm Hoàng Hộ (1972, 1993, 2000) công bố đầy đủ với số lượng lên tới 22 chi 123 loài Nguyễn Khắc Khôi Nguyễn Thị Đỏ (2005) công bố Danh lục loài tre trúc Việt Nam có 29 chi 127 loài Trong hợp tác nghiên cứu Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam với chuyên gia Trung Quốc công bố danh sách loài chi tre trúc Việt Nam có 25 chi 216 loài [10], chi tre (Bambusa Schreb.) có 67 loài, có tới 37 loài chưa định loại tên loài (dạng sp aff.)… Bên cạnh Lê Việt Lâm (2008) phát thêm loài mới, loài chưa xác định tên Hiện nay, việc phân loại đ ương pháp hình thái Tuy nhiên phương pháp đòi hỏi mẫu vật phải có đầy đủ đặc điểm phân loại đặc biệt , hầu hết đặc điểm quan sinh sản (hoa, quả) chu kỳ hoa tới vài chục năm Hơn số trường hợp, phương pháp phân loại hình thái khó thực nhầm lẫn mẫu mang đặc điểm trung gian đồng hình Khó khăn không Việt Nam mà giới Vì vậy, việc định loại tên loài chi tre nan giải cần có hỗ trợ kỹ thuật phân tích DNA Kỹ thuật phân tích DNA cho kết xác, giúp cho việc phát loài mới, giải mối nghi ngờ vị trí phân loại, đánh giá đầy đủ tính đa dạng di truyền, chủng loại phát sinh tiến hóa nhiều loài động vật, thực vật vi sinh vật So với phương pháp hình thái phương pháp DNA cho độ xác cao mà không lệ thuộc vào yếu tố môi trường Đối với thực vật, hai nhóm gen nhân gen lục lạp (cpDNA) thường sử dụng nghiên cứu tiến hoá, sinh thái phát sinh chủng loại thực vật [26], [33], [41], [46] So với gen nhân gen lục lạp có mức độ Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 4hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ bảo thủ việc thay vài nucleotide [34], [36], [39], [44] Nhờ có kỹ thuật này, mà ngân hàng Genbank (2012) lưu giữ 16542 trình tự nucleotide cho phân loại Họ phụ tre (Bambusoideae), có 607 trình tự nucleotide cho chi Bambusa, số nhiều loài có Việt Nam [24], [25] Đây sở cho nghiên cứu Ở Việt Nam có nhiều công trình công bố hiệu việc giải mã trình tự số vùng gen giúp cho việc định loại tên loài nhiều đối tượng sinh vật [1], [3], [12], loài tre có Nguyễn Minh Tâm (2006) sử dụng số thị isozyme để nhận dạng cho hai loài tre Việt Nam Mặc dù, kết thu nhận chưa nhiều sở để ứng dụng phương pháp phân tích DNA góp phần cho nghiên cứu để chỉnh lý tên chi đánh đa dạng nucleotide cho tám loài tre chưa có tên khoa học (Bambusa Schreb.) Việt Nam Xuất phát từ sở trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Ứng dụng phƣơng pháp phân tích DNA góp phần chỉnh lý tên chi (Bambusa Schreb.) cho ba loài tre đánh giá đa dạng nucleotide cho tám loài tre chƣa có tên khoa học (Bambusa sp.) Việt Nam”, với mục tiêu sau: - Chỉnh lý tên chi cho ba loài tre: Dùng cầu hai [Bambusa (Lingnania) sp.], Dùng phấn [Bambusa (Lingnania) chungii] Lùng hoá [Bambusa (Lingnania) longissima] thuộc chi Bambusa hay Lingnania - Đánh giá mức độ đa dạng nucleotide cho 08 loài tre chưa có tên khoa học (Bambusa sp.): Bạc mày, Mét ba vì, Mạy cượp, Mạy khô, Tre đông khê, Tre lục bình, Tre không gai tân an Tre trãi long an Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 5hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ CHƢƠNG TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC 1.1 Giới thiệu tổng quát chi tre (Bambusa Schreb.) Chi tre có danh pháp khoa học Bambusa Schreb thuộc họ Poaceae Tre phân bố vùng nhiệt đới, nhiệt đới ôn đới Châu Á nơi có số loài nhiều với 65 chi 900 loài, châu Mỹ 20 chi 45 loài, châu Phi chi loài, châu Đại Dương chi loài, châu Âu tre Trung Quốc quốc gia chiếm nhiều chi, loài cá thể với 39 chi 500 loài, tiếp đến Nhật Bản 13 chi 237 loài, Việt Nam 25 chi 216 loài, Ấn Độ 23 chi 125 loài,…[10], [18] Cuối kỉ XIX, tre Việt Nam phân loại có chi loài, có loài [15] Đến cuối kỷ XX tre Việt Nam có tới 22 chi 123 loài [4], [5], [6] Năm 2005 theo Nguyễn Khắc Khôi Nguyễn Thị Đỏ cho tre Việt Nam có 29 chi 127 loài [8] Năm 2006, hợp tác nghiên cứu Viện Khoa học Lâm nghiệp Việt Nam với chuyên gia Trung Quốc lại công bố danh sách loài chi tre trúc Việt Nam có 25 chi 216 loài [10], chi tre (Bambusa Schreb.) có 67 loài, có tới 37 loài chưa định loại tên loài (dạng sp aff.) Vị trí phân loại chi tre (Bambusa Schreb.) theo phân loại hệ thống cổ điển, tre thuộc: Giới (regnum): Plantae Ngành (division): Magnoliophyta Lớp (classic): Liliopsida Bộ (ordo): Poales Họ (familia): Poaceae Phân họ: Bambusoideae Chi ( genus): Bambusa schreb 1.1.1 Một số đặc điểm sinh học ba loài cần chỉnh lý tên chi a) Dùng cầu hai (Bambusa (Lingnania) sp.) Thân ngầm mọc cụm, thân khí sinh cao 12-13 cm, đường kính 4-5,8 cm, tròn màu xanh; thân non phủ phấn trắng đốt phía Lóng dài, 50-55 cm, vách dày mm Vòng mo nhô cao, phủ lớp lông màu dày cao mm, phía có vòng phấn Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 6hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ trắng cao mm Mỗi đốt thân mang nhiều cành to gần nhau, cỡ mm Bẹ mo hình thang, đáy rộng 21,7 cm, cao 22-27 cm, đáy rộng 11,2 cm, rụng sớm Phiến mo cụp phía sau Tai mo rộng 3,5 cm, cao phía mm; mép thò dài cm, cao mm, có hàng lông tua dài cm Lưỡi mo nhỏ cao giữa, cao 1,5 mm, mép có cưa thấp 0,5 mm Phiến hình giáo, dài 22-24 cm, rộng 2,4-2,5 cm, đầu nhọn, gốc tròn hay tim lệch Tai bên to (rộng mm) mang lông dài 1,1 cm; bên nhỏ thấp, mang lông, dài cm Cuống dài mm, rộng mm Măng tháng 6-8 [10] b) Dùng phấn (Bambusa (Lingnania) chungii Mc Clure) Thân ngầm dạng củ, mọc cụm thưa, thân khí sinh đứng thẳng, cong, cao 5-10 (18) m, đường kính 3-5 (7) cm Lóng dài 30-45(100) cm, vách dày 3-5 mm, non phủ dày phấn sáp màu trắng, nhẵn Vòng thân phẳng Mo thân có bẹ mo hình thang, cao 30-35 cm, đáy rộng 23-26 cm, cao 27-30 cm; đáy rộng 5,5-6,5 cm, hai đầu nhô cao; mỏng, cứng; màu vàng nhạt Tai mo hình dải hẹp; mép có lông mi màu nhạt, dài mảnh có ánh bóng Lưỡi mo cao 1,5 mm Phiến mo hình lưỡi mác hay trứng; đầu nhọn, mép cuộn vào trong; gốc hình tròn thu hẹp; đáy rộng khoảng 1/5 đầu bẹ mo (dài 2,5-3 cm, cao 9-12 cm); màu lục-vàng nhạt Tai mo cao 2-3 mm, dài 2-2,5 cm; mép có hàng lông thô cứng, cao 1,2 cm; mặt có lông mềm dày Sự phân cành phía cao thân, khoảng đốt thứ trở lên; hay nhiều cành, mọc cụm, kích thước gần nhau, nhẵn, có phủ sáp Dùng phấn khác với loài tre khác, đốt mang nhiều cành phát triển từ gốc giống Nứa Phiến hình lưỡi mác đến lưỡi mác dài, già hình dải, dài 10-16 (20) cm, rộng 1-2 cm, hai bên gốc không đối xứng, đầu nhọn, gốc tròn hay gần tròn, dày; mặt nháp, phần có lông; mặt non phủ lông nhỏ, già nhẵn; gân cấp có 5-6 đôi Thìa lìa mm Tai thấp, có lông cứng thưa, 5-6 cái, dài 1,5 cm Bẹ nhẵn Măng vào mùa thu [10] c) Lùng hoá (Bambusa (Lingnania) longissima) Thân ngầm mọc cụm dày, thân khí sinh đứng thẳng hay cong; cao 10-20 m, đường kính 6-10 cm Lóng dài 50-80 (100) cm, 140-160 cm, tròn đều; non màu xanh lục, có phấn trắng; già màu xanh vàng, không phấn trắng; vách dày 6-7 mm Mắt nhỏ, tròn, đường kính cm Vòng đốt không phình to, vòng rễ; vòng Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 7hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ mo nhô cao, rộng mm, phía nhiều lông màu tím dài mm Phân cành từ khoảng 1/2 thân trở lên, đốt 10-11; nhiều cành gần nhau, góc chia cành 60º Bẹ mo hình chuông hay thang, đáy rộng 31 cm, cao 20-30 cm, đáy rộng 7-8 cm Tai mo nhỏ, nhăn nheo, cong, nhiều lông mi Phiến mo hình tam giác dài, thon, dài 67 cm, rộng 2-3 cm, thường lật phía sau Phiến hình mũi mác-thuôn hay giáo, dài 18-20 cm, rộng 2,5-3 cm; đầu nhọn, gốc nhọn; mặt màu xanh thẫm, mặt màu xanh nhạt, gân 8-9 đôi Bẹ có lớp lông vàng nhạt hay bạc nửa phía trên, gân khoảng 18 Tai có 9-10 đôi lông nhô ngoài, màu bạc, dài mm Cuống dài mm Ở nơi khô hạn có kích thước nhỏ (dài 15 cm, rộng cm) [10] 1.1.2 Một số đặc điểm sinh học tám loài tre chƣa có tên khoa học (Bambusa sp.) a) Bạc mày (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày, thân khí sinh cao 13-18 m, đường kính 13-15 cm, cong xuống Lóng uốn khúc, dài 26-35 (40) cm; vách dày 2,80-3,00 cm; non có lông màu nâu, thưa; già nhẵn; vòng đốt không phồng, có rễ khí sinh mọc rải rác; đốt có lông dài 1,4-1,5 mm, màu nâu; phía đốt có vòng lông tơ vòng mo Phân cành từ đốt 8-10, có vài cành hướng lên; cành dài đốt dài 4-5 m, gốc cành phồng có rễ Bẹ mo hình thang, cao 25-32 cm, có đáy rộng 40-42 cm, đáy rộng 20-22 cm, cao 35-37 cm; mặt lưng có lông cứng 2/3 phía trên; rụng sớm Tai mo nhỏ Thìa lìa cao 4-6 mm, mép có lông tua Phiến mo hình tam giác rộng, đáy rộng 3-4 cm, cao 6-8 cm, 1/2 chiều rộng đáy bẹ mo, đầu nhọn; phiến thẳng, tồn Phiến hình lưỡi mác-thuôn, dài 16-28 cm, rộng 3-4 cm; mặt màu xanh; mặt màu xanh nhạt; gân thứ cấp 9-10; gân ngang nhỏ không rõ; mép có lông Bẹ màu vàng Tai cong hình lưỡi liềm, dài 3-5 mm Thìa lìa cao 1mm Mùa măng tháng 7-9 [10] b) Mạy cượp (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày, 20-30 bụi, mọc sát Thân khí sinh cao 8-10 m, đường kính 8-10 cm, không thẳng, uốn cong Lóng dài 34-38 (50) cm, vách dày 2-3 cm; non có lông màu bạc; vòng đốt nổi, có vòng tròn Phân cành từ gốc thân; đốt có cành to nhiều cành nhỏ, cành dài rủ xuống Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 8hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ Bẹ mo hình thang, cao 12-25 cm, đoạn thân phía có đáy rộng 30-36 cm, cao 14-18 cm; đáy lõm, rộng 7-10 cm; mặt có lông thưa màu nâu đen Tai mo rộng 3-3,5 cm, cao 2-2,5 cm; mép lượn sóng, có lông cứng dài mm, thưa Thìa lìa cao mm, có lông cứng dài mm, rụng lại cưa Phiến mo đáy rộng 33,3 cm, cao 5-5,6 cm, mặt có lông Phiến hình mũi giáo, dài 23-30 cm, rộng 4,54,8 cm; gốc tù Bẹ cao mm, có lông dài mm, thưa, sớm rụng Cuống dài 2-3 mm c) Mạy khô (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm thưa, thân khí sinh cao 13-15 m, đường kính 4-5 (7) cm; lóng dài 20-25 cm, tròn đều, vách dày 2-3 cm Phân cành từ gốc: đốt có cành to nhiều cành nhỏ, nhiều cành nhỏ mọc dày bao quanh thân Bẹ mo hình thuôn đứng hay hình thang cao 25-32 cm, mép mỏng, có gân mịn dày, đáy lượn sóng, đáy nhỏ cao lõm ngoài; mặt có lông màu đen, thưa, sớm rụng Đoạn thân phía bẹ mo có đáy rộng 29-30 cm, cao 20-21 cm, đáy rộng 15-17 cm; đoạn thân phía bẹ mo có đáy rộng 22-26 cm, cao 11-14 cm, đáy rộng 12-13 cm, tai mo bên xuôi xuống nhô ngoài; tai đứng, rộng cm cao cm, có lông dày dài đến mm, thìa lìa cao mm; có lông mịn thấp, dài mm Phiến mo đoạn thân phía có đáy rộng 1,5 cm, cao cm; có lông thưa, ngắn; đoạn thân phía có đáy rộng cm, cao 1,2 cm; có lông thưa dày, dài đến mm Phiến hình nêm, dài 7,5-8,5 (14) cm, rộng 1,5 (2) cm; gốc bằng, cắt ngang; gân 5-6 đôi Tai có lông thưa, dài mm Bẹ không lông Cuống dài mm Măng có vào tháng mùa mưa [10] d) Mét ba (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm, thân khí sinh cao 9-12 m, đường kính 7-8 cm, cong xuống Lóng dài 30-35 cm, uốn cong; non có lông thưa; già nhẵn; vách dày 1,5-2,0 cm; vòng đốt cao 6-10 mm, phồng lên với vòng rễ, vòng mo có vòng màu xám, chồi mắt phồng lên Phân cành từ thấp; đốt phía gốc có cành; đốt phía có đến vài cành, cành to dài rõ rệt Bẹ mo hình thang, cao 30-35 cm, có đáy dài 40 cm, cao 30 cm, đáy dài 18 cm Tai mo rõ, có lông cao 6-8 Footer Page of 126 Header Page of 126 Số 9hóa Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn/ mm Thìa lìa dài 8-10 mm, mép có lông rìa Phiến mo lật ngược phía ngoài, tồn tại, hình tam giác-trái xoan hay giáo, đáy rộng 3-4 cm dài 1/3 đáy bẹ mo, cao 20-22 cm gốc có tơ màu nâu mặt Phiến hình mũi mác-thuôn, dài 14-20 (28) cm, rộng 2-3 (8) cm mặt màu xanh, mặt màu xanh nhạt; gân cấp hai có 78, gân ngang nhỏ không rõ; mép có lông Tai cong lưỡi liềm Thìa lìa cao mm Mùa măng tháng 4-9 [10] e) Tre đông khê (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày, thân khí sinh cao 10-13 m, đường kính 4,5-6 cm, đứng thẳng hay hình chữ chi (Zic Zắc) phía gốc; nhiều lông màu nâu thẫm phấn trắng; lóng dài, dài 85-90 cm; vòng thân nổi; vòng đốt có lông dài màu nâu thẫm cong xuống; vách mỏng, dày 2-3 mm Phân cành: có cành to nhiều cành nhỏ Bẹ mo hình chuông, thuôn, cao 25-35 cm, có đáy rộng 12-32 cm, cao 28-32 cm; dạng lượn sóng, lõm; đáy rộng 11-13 cm phồng to nhô hai mép, dạng lượn sóng, mép to mép nhỏ, mép nhỏ 1/2 mép to Tai mo lệch, rộng 3-6 cm, cao 3-4 mm, tai cao tai bằng; có lông cao đến mm, cứng, thưa Thìa lìa cao đến mm, có lông thưa dài đến cm Phiến mo hình tam giác, dài 14-15 cm, rộng 5-6 cm; đầu có mũi nhọn dài, đáy lõm; mặt phía có lông dày, màu nâu bạc Phiến hình dải, thuôn dài, dài 22-24 cm, rộng 2-2,4 (4) cm; gốc nhọn lệch; gân 67 đôi; mặt nhiều lông nhung màu bạc; mặt lông thưa Tai rộng 2-3 mm, cao mm; có nhiều lông dài đến mm, cứng, thưa Thìa lìa cao đến mm, có lông mịn Bẹ có gân rõ nhiều lông mịn màu nâu Mùa măng tháng 8-9; măng có màu bạc-đỏ, nhiều phấn trắng dày đặc [10] f) Tre không gai tân an (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày đặc, thân khí sinh cao 8-12 m, đường kính 5-5,5 cm, đứng thẳng Lóng dài 28-33 (45) cm, tròn đều; non màu xanh thẫm, già mẫu xanh xám; vách dày 5-7 mm; vòng đốt Phân cành với đốt cành to, dài, vươn cao, gốc cành có rễ khí sinh; nhiều cành nhỏ Bẹ mo hình chuông rộng, cao 18-20 cm, có đáy rộng 22-23 (28) cm, cao 15-18 (35) cm, đáy rộng 3-3,5 (5) cm; đoạn thân phía trên, bẹ mo có đáy nhỏ (chỉ rộng 16-22 cm), cao (cao 22-23 cm), đáy Footer Page of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 10 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ lớn (rộng 4-5,5 cm); mặt có lông màu đen, thưa Tai mo lõm, có lông tua dài Thìa lìa cao đến mm, có lông tua cứng Phiến mo đoạn thân phía đáy rộng 1,2-2 cm, cao 4-7 cm; đoạn thân phía rộng 2,5-3 cm, cao 12-16 cm Phiến dài 9-11 (15) cm, rộng 1,8-2 cm; gốc tròn hay hình nêm, cắt ngang; mép có cưa nhỏ; gân 5-6 đôi Tai có lông ngắn, màu trắng Thìa lìa ngắn, có lông dài Cuống dài 1-2 mm [10] g) Tre lục bình (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày đặc, thân khí sinh cao 5-7 m đường kính 3-4,5 cm Lóng dài 30-32 cm, tròn đều; non hình chữ chi (Zic zắc), màu xanh, nhẵn bóng; vách mỏng, dày 3-5 mm; vòng đốt Phân cành với đốt có cành to hay nhiều cành nhỏ Bẹ mo hình thang cao, cao 15-20 cm, đoạn thân phía bẹ mo có đáy rộng 1215(17) cm, cao 11-12 (23) cm, đáy rộng 4-4,5 (7) cm; đoạn thân phía bẹ mo có đáy rộng 13-15 cm, cao 22-24 cm, đáy rộng 6-6,5 cm Tai mo rộng 2-4 mm, cao 3-10 mm Thìa lìa cao 1-2 mm; lông tua dài, thưa Phiến mo đáy rộng 3-3,5 cm, cao 4,5-8 (15) cm Phiến hình nêm hay giáo dài, dài 8-9 (17) cm, rộng 0,5-1 (2) cm; gốc nhọn; gân 5-6 đôi Tai thấp, có lông thưa, sớm rụng Cuống dài mm [10] h) Tre trãi long an (Bambusa sp.) Thân ngầm mọc cụm dày đặc, thân khí sinh cao 10-12 m, đường kính 4,5-5 cm, đứng thẳng Lóng dài 35-39 cm; vách dày 1-1,5 cm; vòng đốt nổi; chồi mặt hình tam giác; phía chồi mặt lóng có vết lõm chạy dài gần hết lóng Phân cành với cành to 12 cành nhỏ hay nhỏ; gốc cành to phù lên có rễ khí sinh; gần vòng đốt có vòng màu vàng, mo rụng có màu nâu bạc Bẹ mo hình thang cao 15-20 cm, có đáy rộng 2022 cm, cao 17-18 cm; đáy rộng 2,2-3 cm, lõm; mặt có lông đen mịn dày bên, lông sớm rụng; mặt bóng láng Tai mo có lông tua Thìa lìa cao mm, có lông tua dài mm Phiến mo đáy rộng 1,1-1,2 cm, cao 3-3,5 cm; có lông tua cứng, thưa Phiến hình nêm, dài 12-13 cm, rộng 1,7-1,8 cm, gốc tù hay hình nêm Tai cao mm, có lông thưa dài đến 0,4 cm Bẹ nhẵn, cuống dài mm [10] 1.2 Một số vƣớng mắc phân loại phƣơng pháp hình thái tre - Các loài tre cần chỉnh lý tên chi: Các loài thuộc chi Bambusa Lingnania có số đặc điểm hình thái giống thân ngầm mọc cụm, thân khí sinh cao 1010 Footer Page 10 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 58 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ (GU063100); B chungii (GU063099); B grandis (GU063098); B vulgaris (GU063097); B yunnanensis (GU063095); B surrecta (GU063094); B cerosissima (GU063093); B oldhamii (GU063089); B beecheyana (GU063088); B multiplex (GU063085); B pervariabilis (GU063084); B tuldoides (GU063083); B remotiflora (GU063082); B sinospinosa (GU063077); B bambos (GU063074); B ventricosa (GU063074); B distegia (GU063081); B textilis (GU063079) B polymorpha (GU063078); B blumeana (GU063076); B cornigera (GU063073)) ((Các trình tự sử dụng để so sánh vùng gen matK có mã hiệu: B tuldoides (HM448948); B dolichomenithalla (HM448935); B emeiensis (HM448948); B pachinensis (HM448936); B chungii (HM448934); B multiplex (EF125166); B membranacea (EU434252); B tulda (EU434246); B oldhamii (EU434246); B beecheyana (EU434244); B oliveriana (EU434247); B malingensis (EU434245); B bambos (EU434243)); ((trình tự sử dụng để so sánh vùng gen rpoC2 có mã hiệu: B vulgaris (U90824)); ((Các trình tự sử dụng để so sánh vùng gen PIF có mã hiệu: B multiplex (DQ861457); B bambos (DQ861455); B chungii (DQ861456)) vùng gen tám loài tre cần xác định tên khoa học - Đã xác định trình tự nucleotide cho tất 24 mẫu thuộc loài tre có độ dài 939 nucleotide, 621 nucleotide, 1537 nucleotide, 500 nucleotide 442 bp vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF, tương ứng 100% năm vùng gen trnLtrnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF - Mức độ đa dạng nucleotide loài tre dao động từ 0,000 đến 0,002%; từ 0,000 đến 0,003%; từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,011% từ 0,000 đến 0,009% tương ứng với năm vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF - Loài Tre không gai tân an cho mức độ đa dạng nucleotide cao năm vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF từ 0,000 đến 0,002%; từ 0,001 đến 0,003%; từ 0,003 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,006% từ 0,005 đến 0,009%, tương ứng - Mức độ đa dạng nucleotide loài với loài thuộc chi Bambusa Genbank dao động từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,003%; từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,011% từ 0,000 đến 0,571% tương ứng với vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF - Duy có Tre không gai tân an giống với loài Tre long an vùng gen psbA-trnH không giống với loài tre ngân hàng Genbank vùng gen 56 Footer Page 58 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 59 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ KẾT LUẬN Đã nhân thành công tất vùng gen với mẫu tre nghiên cứu có kích thước dự đoán (450 bp vùng gen PIF, 1000 bp vùng gen trnL-trnF, 1560 bp vùng gen matK, 680 bp vùng gen psbA-trnH 600 bp vùng gen rpoC2) Không có sai khác so sánh trình tự nucleotide mẫu loài tre phân tích tất năm vùng gen nghiên cứu (giống 100%) So sánh mức độ tương đồng nucleotide ba loài tre cần chỉnh lý tên chi (Dùng cầu hai, Dùng phấn Lùng hoá) với loài thuộc chi Bambusa công bố trình tự ngân hàng Genbank cho kết quả: + Mức độ tương đồng nucleotide loài Dùng cầu hai với loài thuộc chi Bambusa Genbank dao động từ 63,6 đến 99,8% vùng gen PIF; 99,2 đến 100% vùng gen psbA-trnH; 99,7 đến 99,9% vùng gen matK từ 98,4 đến 100% vùng gen trnL-trnF + Mức độ tương đồng nucleotide loài Dùng phấn với loài thuộc chi Bambusa Genbank dao động từ 63,6 đến 99,8% vùng gen PIF; 98,7 đến 100% vùng gen psbA-trnH; 99,7 đến 99,9% vùng gen matK từ 98,9 đến 99,9% vùng gen trnL-trnF + Mức độ tương đồng nucleotide loài Lùng hoá với loài thuộc chi Bambusa Genbank dao động từ 63,0 đến 99,9% vùng gen PIF; 99,0 đến 100% vùng gen psbA-trnH; 99,7 đến 99,9% vùng gen matK từ 99,0 đến 99,9% vùng gen trnL-trnF Các kết nhận được, cho ph Bambusa So sánh mức độ đa dạng nucleotide loài tre chưa có tên khoa học thuộc chi Bambusa với loài thuộc chi Bambusa công bố trình tự ngân hàng Genbank cho kết quả: 57 Footer Page 59 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 60 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ + Mức độ đa dạng nucleotide loài tre dao động từ 0,000 đến 0,002%; từ 0,000 đến 0,003%; từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,011% từ 0,000 đến 0,009% tương ứng với năm vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF + Mức độ đa dạng nucleotide loài với loài thuộc chi Bambusa Genbank dao động từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,003%; từ 0,000 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,011% từ đến 0,571% tương ứng với vùng gen trnL-trnF, psbAtrnH, matK, rpoC2 PIF + Loài Tre không gai tân an cho mức độ đa dạng nucleotide cao năm vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH, matK, rpoC2 PIF từ 0,000 đến 0,002%; từ 0,001 đến 0,003%; từ 0,003 đến 0,005%; từ 0,000 đến 0,006% từ 0,005 đến 0,009%, tương ứng + Duy có Tre không gai tân an giống với loài Tre trãi long an vùng gen psbA-trnH không giống với loài tre ngân hàng Genbank vùng gen Thông qua kết phân tích phân tử cho phép nhận định loài Tre không gai tân an loài Việt Nam ĐỀ NGHỊ - Thống viết tên chi Bambusa cho ba loài Dùng cầu hai, Dùng phấn Lùng hóa (bỏ Lingnania) - Để có sở khoa học cho việc xác định tên khoa học cho loài tre dạng sp Việt Nam nói chung loài khác nói riêng cần phải có kết hợp thật chặt chẽ nhà phân loại học nhà nghiên cứu sinh học phân tử (đặc điểm hình thái với đặc điểm phân tử) - Tiếp tục xác định thêm trình tự số vùng gen để khẳng định tên khoa học cho loài tre dạng sp nghiên cứu Đây sở cho việc xác định tên khoa học loài tre dạng sp khác chi Bambusa nói riêng phân họ tre nói chung (Bambusoideae) 58 Footer Page 60 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 61 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Lê Trần Bình, Phan Văn Chi, Nông Văn Hải, Trương Nam Hải, Lê Quang Huấn (2003), Áp dụng kỹ thuật phân tủ nghiên cứu tài nguyên sinh vật Việt Nam, Nxb Khoa Học Kỹ Thuật Hà Nội Hồ Huỳnh Thùy Dương (2008), Sinh học phân tử, Nxb Giáo dục, Hà Nội Vũ Thị Thu Hiền, Lưu Đàm Cư, Đinh Thị Phòng (2009), Xác định trình tự đoạn gen tRNA –Leu cho hai loài D tonkinensis D conchinchinensis phục vụ việc phân loại mẫu vật Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam, Tạp chí Công nghệ sinh học, (4), tr 471-477 Phạm Hoàng Hộ (1972), Bambusoideae, Cây cỏ miền Nam Việt Nam, Bộ giáo dục, trung tâm học liệu, Sài Gòn, (2), tr 844-869 Phạm Hoàng Hộ (1993), Bambusoideae, Cây cỏ Việt Nam, (3), tr 742-774 Phạm Hoàng Hộ (2000), Bambusoideae, Cây cỏ Việt Nam, Nxb Trẻ, Thành phố Hồ Chí Minh, (3), tr 600-627 Nguyễn Khắc Khôi (2007), Bambusoideae, Danh lục đỏ Việt Nam, Nxb Khoa học tự nhiên Công nghệ, Hà Nội, tr 346-347 Nguyễn Khắc Khôi, Nguyễn Thị Đỏ (2005), Bambusoideae, Danh lục loài thực vật Việt Nam, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội, tr 750-773 Võ Thị Thương Lan (2009), Sinh học phân tử tế bào ứng dụng, Nxb Giáo dục, Hà Nội 10 Nguyễn Hoàng Nghĩa (2006), Tre trúc Việt Nam, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 11 Lê Nguyên (1971), Nhận biết, gây trồng, bảo vệ khai thác tre trúc, Nxb Nông thôn, Hà Nội, tr 75 12 Đinh Thị Phòng, Nguyễn Văn Hùng, Dương Văn Tăng, Trần Thị Việt Thanh, Vũ Thị Thu Hiền (2011), Ứng dụng phương pháp phân tích DNA vào việc định loại mẫu vật quý Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam, Proceeding Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ hệ thống Bảo tàng Thiên nhiên Việt Nam, tr 195-201 13 Nguyễn Minh Tâm (2006), Đa dạng di truyền hai loài tre có giá trị kinh tế cao Việt Nam, Báo cáo tổng kết dự án hợp tác với Nhật (IPGRI), Hà Nội TIẾNG ANH 14 Alvarez I., Wendel J F (2003), Ribosomal ITS sequences and plant phylogenetic inference, Mol Phylogenet Evol, 29 (3), pp 34-417 15 Balansa B (1890), Catalogue des Gramine’es de I’ Indo-chine Francaise: Bambuse’es, J Bot Appl, (Desvaux), 4, pp 27-32 59 Footer Page 61 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 62 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 16 Baldwin B G., Sanderson M J., Porter J M., Wojciechowski M F., Campbell C S., Donoghue M J (1995), The ITS region of nuclear ribosomal DNA: a valuable source of evidence on angiosperm phylogeny, Ann Missouri Bot Gard, 82, pp 247–277 17 Baldwin B G (1993), Molecular phylogenetics of Calycadenia (Compositae) based on ITS sequences of nuclear ribosomal DNA: chromosomal and morphological evolution reexamined, American Journal Botany, 80, pp 222– 238 18 Biswas S (1995), Diversity and genetic resources of Indian bamboos and the strategies for their conservation, Rao and Rao (eds), Bamboos and Rattan Genetic Resources and Use, IPGRI and INBAR, pp 29-34 19 Chia L C., Fung H L (1980), On the validity of th egenera Sinocalamus McClure and Lingnania McClure, Acta Phytotax Sin, 18, pp 211–216 20 Doyle J J., Doyle J (1987), A rapid DNA isolation procedure for small quantities of fresh leaf tissue, Phytochemical Bulletin, 19, pp 11-15 21 Goh W L., Chandran S., Lin R S., Xia N H., Wong K M (2010), Phylogenetic relationships among Southeast Asian climbing bamboos (Poaceae: Bambusoideae) and the Bambusa complex, Biochemical Systematics and Ecology, 38, pp 764-773 22 Hillils D M., Moitz C., Mable B K (1996), Molecular Systematics, Sinauer Associates, Inc., Second edition 23 Hollingsworth, Graham, Little (2011), Choosing and using a plant DNA barcode, PLoSONE 6, e19254 24 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore?term=Bambusa 25 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore?term=Bambusoideae 26 Kim S C., Chunghee L., Mejias J A (2007), Phylogenetic analysis of chloroplast DNA matK gene and ITS of rDNA sequences reveals polyphyly of the genus Sonchus and new relationships among the subtribe Sonchinae (Asteraceae: Cichorieae), Mol Phylogenet Evol, 44(2), pp 578-597 27 Kress W J., Wurdack K J., Zimmer E A., Lee A., Janzen D H (2005), Use of DNA barcodes to identify flowering plants, Proc Natl Acad Sci USA, 102(23), pp 8369-8374 28 Le Viet Lam (2008), A Taxonomic Revision of the genus Bambusa (PoaceaeBambusoideae) from North Vietnam A thesis submitted for the Degree of Doctoral at the graduate school of the Chinese Academy of Sciences 29 McClure F A (1938), Bambusa ventricosa a new species with a teratological bent, Lingnan Science Journal, 17, pp 57-63 30 Mort M E., Levsen N., Randle R P., Jaarseld E V., Palmer A (2005), Phylogenetics and versification of Cotyledon (Crassulaceae) inferred from 60 Footer Page 62 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 63 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ nuclear and chloroplast DNA sequences data, American Journal of Botany, 92 (7), pp 1170-1176 31 Mort M E., Soltis D E., Soltis P S., Francisco-Ortega J., Santos-Guerra A (2001), Phylogenetic relationships and evolution of Crassulaceae inferred from matK sequence data, American Journal of Botany, 88, pp 76-91 32 Saitou N., Nei M (1987), The neighbor-joining method: A new method for reconstructing phylogenetic trees, Molecular Biology Evolution, 4, pp 406-425 33 Sang T., Crawford D J., Stuessy T F (1997), Chloroplast DNA phylogeny, reticulate evolution, and biogeography of Paeonia (Paeoniaceae), American Journal of Botany, 84(8), pp 1120 – 1136 34 Sato S., Nakamura Y., Kaneko T., Asamizu E., Tabata S (1999), Complete Structure of the Chloroplast Genome of Arabidopsis thaliana, DNA Research, 6, pp 283-290 35 Shaw J E., Small R L (2005), Chloroplast DNA phylogeny and phylogeography of the North American plums (Prunus subgenus Prunus section Prunocerasus, Rosaceae), American Journal of Botany, 92, pp 2011-2030 36 Son J H., Park K C., Kim T W., Park Y J., Kang J H., Kim N S (2010), Sequence diversification of 45S rRNA ITS, trnH-psbA spacer, and matK genic regions in several Allium species, Genes & Genomics, 32(2), pp 165-172 37 Stapleton C M A., Xia N H (1996), A new combination in Bambusa (Gramineae-ambusoideae), Kew Bull, 52, pp 235–238 38 Sun Y., Xia N., Lin R (2005), Phylogenetic analysis of Bambusa (Poaceae: Bambusoideae) based on internal transcribed spacer sequences of nuclear ribosomal AND, Biochemical Genetics, 43(11-12), pp 12-603 39 Taberlet P., Coissac E., Pompanon F., Gielly L., Miguel C., Valentini A., Vermat T., Corthier G., Brochmann C., Willerslev E (2006), Power and limitations of the chloroplast trnL (UAA) intron for plant DNA barcoding, Nucleic Acid Research, 35, pp 14 40 Tate J A., Simpson B B (2003), Paraphyly of Tarasa (Malvaceae) and diverse origins of the polyploidy species, Systemtatic Botany, 28, pp 723-737 41 Weiguo Z., Yile P., Shihai Z J., Xuexia M., Yongping H (2005), Phylogeny of the genus Morus (Urticales: Moraceae) inferred from ITS and trnL-F sequences, African Journal of Biotechnology, (6), pp 563-569 42 Wu F H., Kan D P., Lee S B., Daniell H., Lee Y W., Lin C C., Lin N S., Lin C S (2009), Complete nucleotide sequence of Dendrocalamus latiflorus and Bambusa oldhamii chloroplast genomes, Tree Physiology 29(6), pp 56 – 847 43 Yang H Q., Sheng P., Zhu L D (2007), Generic delimitations of Schizostachyum and its allies (Gramineae: Bambusoideae) inferred from GBSSI and trnL-Fsequence phylogenies, Taxon, 56 (1), pp 45-54 61 Footer Page 63 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 64 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ 44 Yang H Q., Yang J B., Peng Z H., Gao J., Yang Y M., Peng S., Li D Z (2008), A molecular phylogenetic and fruit evolutionary analysis of the major groups of the paleotropical woody bamboos (Gramineae: Bambusoideae) based on nuclear ITS, GBSSI gene and plastid trnL-F DNA sequences, Molecular Phylogenetics and Evolution, 48(3), pp 24-809 45 Yang J B., Yang H Q., Li D Z., Wong K M., Yang Y M (2010), Phylogeny of Bambusa and its allies (Poaceae: Bambusoideae) inferred from nuclear GBSSI gene and plastid psbA-trnH, rpl32-trnL and rps16 intron DNA sequences, Taxon, 59 (4), pp 1102-1110 46 Zhang Y J., Ma P F., Li D Z (2011), High-throughput sequencing of six Bamboo Chloroplast genomes: Phylogenetic implications for temperate woody Bamboos (Poaceae: Bambusoideae), Plos one, 6(5) 47 Zhou M B., Lu J J., Zhong H., Liu X M., Tang D Q (2010), Distribution and diversity of PIF-like transposable elements in the Bambusoideae subfamily, Plant Science, 179, pp 257-266 62 Footer Page 64 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 65 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ PHỤ LỤC Hình ảnh 11 loài tre nghiên cúu A B C D Ảnh Nguyễn Khắc Khôi, 2012 Hình Dùng cầu hai (Bambusa (Lingnania) sp.) số hiệu K3001 (A:bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) A B C D Hình Dùng phấn (Bambusa (Lingnania) chungii) số hiệu K3002 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 63 Footer Page 65 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 66 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ A B C D Hình Lùng hoá (Bambusa (Lingnania) longissima) số hiệu K3003 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) A B C D Hình Bạc mày (Bambusa sp.) số hiệu K3004 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 64 Footer Page 66 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 67 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ B A D C Hình Mạy cượp (Bambusa sp.) số hiệu K3009 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) A B D C Hình Mạy khô (Bambusa sp.) số hiệu K3010 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 65 Footer Page 67 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 68 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ B A C D Hình Mét ba (Bambusa sp.) số hiệu K3007 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) A B D C Hình Tre đông khê (Bambusa sp.) số hiệu K3012 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 66 Footer Page 68 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 69 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ A B C D Hình Tre không gai tân an (Bambusa sp.) số hiệu K3014 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) A B D C Hình 10 Tre lục bình (Bambusa sp.) số hiệu K3013 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 67 Footer Page 69 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 70 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ A B C C Hình 11 Tre trãi long an (Bambusa sp.) số hiệu K3015 (A: bụi cây; B: đoạn thân; C: D: mo) 68 Footer Page 70 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 71 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ PHỤ LỤC Các báo đăng 1) Vũ Thị Thu Hiền, Trần Thị Việt Thanh, Nguyễn Khắc Khôi, Đinh Thị Phòng “Làm sáng tỏ tên khoa học cho số loài thuộc chi tre (Bambusa Schreb.) Việt Nam dựa sở giải trình tự vùng gen trnL-trnF, psbA-trnH matK” Tạp chí Khoa học Công nghệ, 50 (4), 2012 2) Đinh Thị Phòng, Vũ Thị Thu Hiền, Nguyễn Thị Thuý Hằng, Nguyễn Đăng Tôn, Nông Văn Hải – “Góp phần xác định tên khoa học dạng biến đổi hình thái cho hai loài thuộc chi tre (Bambusa Schreb.) sở giải trình tự gen PIF” Tạp chí Công nghệ Sinh học, 10 (3), 2012 3) Đinh Thị Phòng, Vũ Thị Thu Hiền, Trần Thị Việt Thanh, Trần Thị Liễu, Nguyễn Tường Vân, Nguyễn Khắc Khôi – “Góp phần chỉnh lý tên chi cho ba loài tre Việt Nam sở xác định trình tự vùng gen trnL-trnF psbA-trnH” Hội nghị Khoa học toàn quốc nghiên cứu giảng dạy sinh học Việt Nam lần thứ tháng 12, 2012 4) Vũ Thị Thu Hiền, Đinh Thị Phòng, Nguyễn Tường Vân, Nguyễn Khắc Khôi – “Đa dạng nucleotide bốn vùng gen loài tre thuộc chi Bambusa Schreb chưa xác định tên khoa học Hội nghị khoa học Thanh niên lần thứ 12 Viện KH&CNVN; 69 Footer Page 71 of 126 Header Page 126.Trung tâm Học liệu Số 72 hóaofbởi http://www.lrc-tnu.edu.vn/ PHỤ LỤC Các mã trình tự đăng ký ngân hàng Genbank STT 10 11 12 13 14 17 18 19 20 21 22 25 26 27 28 29 30 31 32 33 Tên loài Bambusa sp Bambusa chungii Mã hiệu mẫu VNMNB000197 VNMNB000201 VNMNB000202 VNMNB000218 VNMNB000221 VNMNB000222 VNMNB000197 VNMNB000201 VNMNB000202 VNMNB000218 VNMNB000221 VNMNB000222 VNMNB000197 VNMNB000201 VNMNB000202 VNMNB000218 VNMNB000221 VNMNB000222 VNMNB000203 VNMNB000206 VNMNB000212 VNMNB000203 VNMNB000206 VNMNB000212 VNMNB000203 VNMNB000206 VNMNB000212 70 Footer Page 72 of 126 Vùng gen trnL-trnF psbA-trnH matK trnL-trnF psbA-trnH matK Mã số đăng ký Genbank KC734465 KC734466 KC734467 KC734471 KC734472 KC734473 KC734456 KC734457 KC734458 KC734462 KC734463 KC734464 KC734447 KC734448 KC734449 KC734453 KC734454 KC734455 KC734468 KC734469 KC734470 KC734459 KC734460 KC734461 KC734450 KC734451 KC734452 ... nhận dạng cho hai loài tre Việt Nam Mặc dù, kết thu nhận chưa nhiều sở để ứng dụng phương pháp phân tích DNA góp phần cho nghiên cứu để chỉnh lý tên chi đánh đa dạng nucleotide cho tám loài tre chưa. .. có tên khoa học (Bambusa Schreb.) Việt Nam Xuất phát từ sở trên, tiến hành nghiên cứu đề tài: Ứng dụng phƣơng pháp phân tích DNA góp phần chỉnh lý tên chi (Bambusa Schreb.) cho ba loài tre đánh. .. cho ba loài tre đánh giá đa dạng nucleotide cho tám loài tre chƣa có tên khoa học (Bambusa sp.) Việt Nam , với mục tiêu sau: - Chỉnh lý tên chi cho ba loài tre: Dùng cầu hai [Bambusa (Lingnania)