khảo sát sự hiện diện của vi khuẩn escherichia coli sinh men β lactamases phổ rộng trên gà khỏe tại một số nông hộ ở huyện tam bình và mang thít tỉnh vĩnh long

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y LÝ NGUYỄN ANH THƯ KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI SINH MEN β-LACTAMASES PHỔ RỘNG TRÊN GÀ KHỎE TẠI MỘT SỐ NÔNG HỘ Ở HUYỆN TAM BÌNH VÀ MANG THÍT - TỈNH VĨNH LONG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH THÚ Y CẦN THƠ, 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH THÚ Y KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI SINH MEN β-LACTAMASES PHỔ RỘNG TRÊN GÀ KHỎE TẠI MỘT SỐ NÔNG HỘ Ở HUYỆN TAM BÌNH VÀ MANG THÍT - TỈNH VĨNH LONG Giáo viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: ThS BÙI THỊ LÊ MINH LÝ NGUYỄN ANH THƯ MSSV: 3103061 Lớp: CN10Y4A1 Cần Thơ, 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài “Khảo sát diện vi khuẩn Escherichia coli sinh men βlactamases phổ rộng gà khỏe số nông hộ huyện Tam Bình Mang Thít, tỉnh Vĩnh Long” sinh viên Lý Nguyễn Anh Thư thực Bộ môn Thú Y, Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Trường Đại học Cần Thơ từ tháng năm 2014 đến tháng 12 năm 2014 Cần Thơ, ngày….tháng… năm Cần Thơ, ngày….tháng… năm Duyệt Bộ Môn Giáo viên hướng dẫn Bùi Thị Lê Minh Cần Thơ, ngày….tháng… năm Duyệt Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng i LỜI CẢM ƠN  Trong suốt thời gian học tập Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng trường Đại học Cần Thơ, nhận hướng dẫn tận tình quý thầy cô Thầy cô không truyền đạt cho kiến thức từ sách mà chia sẻ kiến thức, kinh nghiệm thực tế sống Tất điều hành trang cho bước vào tương lai Trong suốt trình học tập thực đề tài, phấn đấu thân nhận giúp đỡ nhiều người Nhân đây, muốn gửi lời cảm ơn chân thành đến người quan tâm, lo lắng hỗ trợ tận tình cho suốt thời gian qua Trước tiên, xin gửi lời tri ân sâu sắc đến ba mẹ người thân yêu gia đình Cám ơn ba mẹ không quản khó khăn vất vả cất bước đến trường, bên cạnh động viên chỗ dựa tinh thần vững để bước đến ngày hôm Xin gửi lời biết ơn đến quý thầy cô Bộ môn Thú Y Bộ môn Chăn nuôi hết lòng truyền đạt cho kiến thức kinh nghiệm quý báu suốt trình học tập trường Đặc biệt, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô Bùi Thị Lê Minh, người tận tâm bảo hỗ trợ nhiệt tình giúp hoàn thành luận văn tốt nghiệp Tôi xin cảm ơn anh chị cao học Thú y K19, bạn bè lớp Dược Thú y K36 giúp đỡ, chia động viên suốt khoảng thời gian thực đề tài Cuối xin kính chúc người thật dồi sức khỏe, hạnh phúc thành công sống! Lý Nguyễn Anh Thư ii TÓM LƯỢC Đề tài thực từ tháng đến tháng 12 năm 2014 nhằm khảo sát diện vi khuẩn E coli ESBL 48 mẫu swab phân lấy từ gà thịt gà đẻ khỏe mạnh số nông hộ huyện Tam Bình Mang Thít, tỉnh Vĩnh Long Bằng phương pháp đĩa kết hợp phân lập 21 mẫu E coli ESBL dương tính chiếm tỉ lệ 43,75% Trong đó, gà đẻ khỏe có tỉ lệ E coli ESBL 58,33% (14/24 mẫu), cao so với gà thịt khỏe 29,17% (7/24 mẫu) Kiểm tra tính nhạy cảm chủng E coli ESBL phân lập số loại kháng sinh phương pháp kháng sinh đồ dựa theo nguyên lý Kirby-Bauer Kết cho thấy vi khuẩn E coli ESBL đề kháng mạnh với kháng sinh ampicillin (93,02%), cefaclor (93,02%), cefuroxime (86,05%) nhạy cảm với amikacin (97,67%), doxycycline (93,02%), fosfomycin (86,05%) Bên cạnh đó, chủng E coli ESBL kiểm tra đề kháng đồng thời từ đến loại kháng sinh khác với 29 kiểu hình đa kháng Trong đó, E coli ESBL đồng kháng với đến loại kháng sinh chủ yếu với tỉ lệ 18,60% đồng kháng với loại kháng sinh có tỉ lệ thấp 4,65% iii MỤC LỤC Trang duyệt .i Lời cảm ơn .ii Tóm lược .iii Mục lục iv Danh sách chữ viết tắt vi Danh sách bảng vii Danh sách hình viii CHƯƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 2: CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tổng quan vi khuẩn E coli 2.1.1 Lịch sử vi khuẩn E coli 2.1.2 Đặc điểm hình thái cấu tạo 2.1.3 Đặc tính nuôi cấy 2.1.4 Đặc tính sinh hóa 2.1.5 Tính gây bệnh sức đề kháng 2.2 Khái quát men β-lactamases phổ rộng (ESBL) 2.2.1 Lịch sử phát ESBL 2.2.2 Khái niệm đặc tính ESBL 2.2.3 Các phương pháp phát ESBL 2.3 Kháng sinh 11 2.3.1 Định nghĩa 11 2.3.2 Sự đề kháng vi khuẩn kháng sinh 11 2.3.3 Một số nhóm kháng sinh thông dụng 12 2.4 Tình hình nghiên cứu nước 15 2.5 Tình hình chăn nuôi gà huyện Mang Thít huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long 17 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 Phương tiện thí nghiệm 19 iv 3.1.1 Thời gian, địa điểm đối tượng nghiên cứu 19 3.1.2 Dụng cụ trang thiết bị thí nghiệm 19 3.1.3 Hóa chất môi trường thí nghiệm 19 3.2 Phương pháp nghiên cứu 19 3.2.1 Phương pháp lấy mẫu 19 3.2.2 Phương pháp nuôi cấy phân lập vi khuẩn 20 3.2.3 Phương pháp kiểm tra tính nhạy cảm E coli ESBL kháng sinh 23 3.2.4 Phương pháp xử lý số liệu 24 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt khỏe 25 4.2 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ khỏe 26 4.3 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính địa điểm lấy mẫu 27 4.4 Kết kháng sinh đồ 27 4.5 Sự đa kháng vi khuẩn E coli ESBL loại kháng sinh 30 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 5.1 Kết luận 32 5.2 Đề nghị 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ CHƯƠNG 37 v DANH SÁCH CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ E coli Escherichia coli ESBL Extended Spectrum β-Lactamases CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute CFU Colony Forming Unit MC MacConkey Agar NA Nutrient Agar MHA Mueller-Hinton Agar MR Methyl Red VP Voges Proskauer et al et alii ctv Cộng tác viên vi DANH SÁCH BẢNG Bảng Tựa bảng Trang 3.1 Đặc tính sinh hóa vi khuẩn E coli 21 3.2 Tiêu chuẩn đường kính vòng kháng khuẩn số kháng sinh với vi khuẩn họ Enterobacteriaceae 23 4.1 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt khỏe 25 4.2 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt gà đẻ khỏe 26 4.3 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL địa điểm lấy mẫu 27 4.4 Kết kháng sinh đồ chủng E coli ESBL phân lập 28 4.5 Kết kiểm tra tính đa kháng chủng E coli ESBL phân lập loại kháng sinh 30 vii DANH SÁCH HÌNH Hình Tựa hình Trang 2.1 Vi khuẩn E coli bắt màu gram âm 2.2 Vị trí địa lý tỉnh Vĩnh Long 18 3.1 Phương pháp đĩa kết hợp phát E coli ESBL 21 3.2 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn E coli ESBL 22 4.1 Kết kháng sinh đồ 29 4.2 So sánh tỉ lệ đa kháng số loại kháng sinh vi khuẩn E coli ESBL 31 viii CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt khỏe Qua tiến hành kiểm tra diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt khỏe mạnh tuần tuổi tháng tuổi phương pháp đĩa kết hợp cho kết bảng sau Bảng 4.1 Tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt khỏe Số mẫu kiểm tra (con) Số mẫu dương tính (con) Tỉ lệ dương tính (%) Gà tuần tuổi 12 41,67 Gà tháng tuổi 12 16,67 Tổng cộng 24 29,17 Đối tượng P = 0,329 Bảng 4.1 cho thấy kết phân lập 24 mẫu swab phân gà thịt khỏe mạnh có tỉ lệ dương tính với E coli ESBL 29,17% Trong đó, gà tuần tuổi có tỉ lệ dương tính với E coli ESBL cao gà tháng tuổi (41,67% so với 29,17%) qua kết phân tích thống kê cho thấy khác biệt lứa tuổi ý nghĩa thống kê (P = 0,329) Theo Lưu Hữu Mãnh Đỗ Võ Anh Khoa (2012) nghiên cứu giống gà Ross 308 tỉnh Đồng Nai, tỉ lệ nhiễm E coli phân gà bị bệnh tiêu chảy giai đoạn 0-2 tuần tuổi cao (87%) có khuynh hướng giảm từ 2-4 tuần tuổi (74%) Điều cho thấy E coli nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy gà, đặc biệt gà từ 0-2 tuần tuổi Mặt khác, qua kết bảng 4.1 cho thấy gà thịt khỏe giai đoạn tuần tuổi có tỉ lệ E coli ESBL dương tính cao (41,67%) Qua chứng tỏ vi khuẩn E coli có sẵn ruột gà thịt khỏe mạnh từ nhỏ với tỉ lệ tương đối cao tác động gây bệnh sức đề kháng vật giảm sút, người chăn nuôi không đảm bảo điều kiện chăm sóc nuôi dưỡng hợp lí thường xuyên vệ sinh môi trường chăn nuôi dịch bệnh xảy khó khăn việc sử dụng kháng sinh để điều trị Theo Leverstein-van Hall et al (2011) cho thấy lây lan vi khuẩn đường ruột sinh ESBL thực phẩm có nguồn gốc từ động vật thịt bán lẻ bị nhiễm khuẩn góp phần làm gia tăng tỉ lệ mắc bệnh nhiễm trùng người vi khuẩn sinh men ESBL gây Kết nghiên cứu tác giả 25 cho biết số vi khuẩn sinh ESBL phân lập từ mẫu thịt gà bán lẻ, có 39% E coli mang kiểu gen tương tự với kiểu gen phân lập mẫu bệnh phẩm người Điều chứng tỏ lan truyền gen kháng thuốc vi khuẩn sang người thông qua chuỗi thức ăn Đồng thời, kết diện E coli ESBL gà thịt khỏe bảng 4.1 có tỉ lệ tương đối cao (29,17%), mà gà thịt nguồn thực phẩm phổ biến người, cần ý khâu vệ sinh quy trình giết mổ an toàn thực phẩm để tránh vấy nhiễm vi khuẩn cách trực tiếp gián tiếp từ gà sang người môi trường xung quanh 4.2 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ khỏe Tỉ lệ tạo kiểu hình dương tính với E coli ESBL đối tượng gà thịt gà đẻ khỏe mạnh thể bảng 4.2 Bảng 4.2 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL gà thịt gà đẻ khỏe Số mẫu kiểm tra (con) Số mẫu dương tính (con) Tỉ lệ dương tính (%) Gà thịt 24 29,17a Gà đẻ 24 14 58,33b Tổng cộng 48 21 43,75 Đối tượng P = 0,042 Các chữ a, b cột khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Kết bảng 4.2 cho thấy, tỉ lệ diện E coli ESBL tổng số 48 gà khỏe mạnh kiểm tra tương đối cao (43,75%) Trong đó, gà đẻ khỏe có tỉ lệ E coli ESBL dương tính 58,33%, cao so với gà thịt khỏe 29,17% Kết phân tích thống kê cho thấy có khác biệt tỉ lệ dương tính với E coli ESBL đối tượng gà (P = 0,042) Kết cao so với kết Duru et al (2013) nghiên cứu phân gà thịt, gà tây gà thả vườn với tỉ lệ diện E coli ESBL 22,2% nghiên cứu Gao et al (2014) với tỉ lệ E coli ESBL phân gà 10,7% Điều giải thích gà đẻ có đời sống thời gian khai thác lâu gà thịt nên gà đẻ tiêu thụ lượng kháng sinh lớn thời gian dài, điều làm cho E coli có điều kiện hình thành nên khả kháng thuốc nhiều hơn, cụ thể sinh men ESBL Bên cạnh đó, theo Hồ Thị Việt Thu Nguyễn Đức Hiền (2012) cho thấy lây nhiễm E coli từ trứng phổ biến nguyên nhân gây tỉ lệ chết cao cho gia cầm nở, có khoảng 26,5% gà mái nhiễm E coli đẻ trứng có vi khuẩn E coli, người chăn nuôi cần 26 trọng vệ sinh sát trùng kỹ lưỡng trình ấp nở trứng để tránh vấy nhiễm vi khuẩn từ gà mẹ sang 4.3 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính địa điểm lấy mẫu Tỉ lệ diện E coli ESBL số nông hộ thuộc huyện Mang Thít huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long thể bảng 4.3 Bảng 4.3 Kết diện vi khuẩn E coli ESBL địa điểm lấy mẫu Số mẫu kiểm tra (con) Số mẫu dương tính (con) Tỉ lệ dương tính (%) Mang Thít 24 14 58,33a Tam Bình 24 29,17b Tổng cộng 48 21 43,75 Huyện P = 0,042 Các chữ a, b cột khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Dựa vào bảng 4.3 cho thấy tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ huyện Mang Thít 58,33% cao huyện Tam Bình 29,17%, khác biệt có ý nghĩa thống kê (P = 0,042) Theo báo cáo sơ kết công tác chăn nuôi-thú y tháng đầu năm 2014 Chi cục Thú y tỉnh Vĩnh Long, huyện Mang Thít có số lượng tổng đàn gà cao với 1.008.300 cao huyện Tam Bình với 717.200 Bên cạnh đó, theo Hồ Thị Việt Thu Nguyễn Đức Hiền (2012), ống tiêu hóa gia cầm có mật độ E coli khoảng 106 CFU/g lây nhiễm qua phân cách lây truyền quan trọng Vì nơi có quy mô đàn lớn lượng phân gà thải môi trường nhiều, đồng thời hộ chăn nuôi quy trình vệ sinh sát trùng chưa xử lý chặt chẽ, tạo điều kiện cho vi khuẩn lây truyền rộng rãi đàn gà Điều cho thấy tỉnh Vĩnh Long huyện khác nhau, với quy mô đàn điều kiện chăm sóc nuôi dưỡng, vệ sinh sát trùng khác ảnh hưởng đến diện E coli ESBL 4.4 Kết kháng sinh đồ Qua khảo sát 48 mẫu swab phân gà khỏe số nông hộ huyện Mang Thít Tam Bình tỉnh Vĩnh Long, có 21 mẫu dương tính với E coli ESBL, chọn 43 chủng điển hình mang tính đại diện tổng số chủng E coli ESBL phân lập để tiến hành phân tích tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn kỹ thuật khuếch tán thạch theo phương pháp Kirby-Bauer Kết trình bày bảng 4.4 27 Bảng 4.4 Kết kháng sinh đồ chủng E coli ESBL phân lập Số chủng kiểm tra (n = 43) Nhạy Nhóm kháng sinh Trung gian Kháng Số lượng Tỉ lệ (%) Số lượng Tỉ lệ (%) Số lượng Tỉ lệ (%) Ampicillin 0,00 6,98 40 93,02 Cefuroxime 11,63 2,33 37 86,05 Cefaclor 6,98 0,00 40 93,02 Gentamycine 17 39,53 4,65 24 55,81 Streptomycine 18,60 13,95 29 67,44 Kanamycin 25 58,14 4,65 16 37,21 Amikacin 42 97,67 2,33 0,00 Tetracyline 32 74,42 10 23,26 2,33 Doxycyline 40 93,02 6,98 0,00 Norfloxacin 16 37,21 11,63 22 51,16 Fosfomycin 37 86,05 2,33 11,63 Ofloxacin 16 37,21 11,63 22 51,16 14 32,56 4,65 27 62,79 Trimethoprim+ sulfamethoxazole Dựa vào bảng 4.4 cho thấy 13 loại kháng sinh kiểm tra theo tiêu chuẩn CLSI 2014, E coli ESBL đề kháng với hầu hết loại kháng sinh nhóm β-lactam với tỉ lệ cao ampicillin (93,02%), cefaclor (93,02%) cefuroxime (86,05%) Đồng thời vi khuẩn đề kháng với kháng sinh khác nhóm streptomycine (67,44%) trimethoprim+ sulfamethoxazole (62,79%) Kết phù hợp với kết nghiên cứu Duru et al (2013) cho thấy E coli ESBL gà đề kháng với nhiều loại kháng sinh cefotaxime, ceftazidime, ampicillin, trimethoprim+ sulphamethoxazole, nghiên cứu Việt Nam E coli ESBL người kết luận vi khuẩn đề kháng với loại kháng sinh Điều giải thích men ESBL sinh đột biến cảm ứng từ việc sử dụng cephalosporin phổ rộng hệ 3, dẫn đến E coli sinh ESBL kháng hầu hết kháng sinh nhóm β-lactam (Paterson and Bonomo, 2005) Mặt khác, gen đề kháng kháng sinh nằm plasmid, plasmid có nhiều gen 28 gen xác định tính đề kháng với loại kháng sinh, plasmid có khả đề kháng nhiều loại kháng sinh lúc (Trần Đức Hậu, 2007) Bên cạnh đó, kháng sinh tác động vào vi khuẩn phải ngang qua màng tế bào vi khuẩn theo cách thức khuếch tán thụ động qua kênh màng Các loại kháng sinh khác qua kênh, biến đổi kênh màng tế bào vi khuẩn làm cho E coli có khả đồng kháng với nhiều loại kháng sinh (Nguyễn Thị Thu Ba, 2011) Từ kết cho thấy, người chăn nuôi cần sử dụng kháng sinh hợp lý theo hướng dẫn nhà sản xuất bác sĩ thú y, không sử dụng kháng sinh nhiễm trùng nhằm mục đích kích thích tăng trưởng, không tự ý kết hợp nhiều kháng sinh không cần thiết để hạn chế tối đa gia tăng vi khuẩn đề kháng kháng sinh Tuy nhiên, E coli ESBL nhạy cảm với amikacin (97,67%), doxycycline (93,02%) fosfomycin (86,05%) nên sử dụng loại kháng sinh để điều trị bệnh cho gà nhiễm khuẩn E coli Ak Ge Te Kn Sm Hình 4.1 Kết kháng sinh đồ Chú thích: Ge: gentamycin Sm: streptomycin Kn: kanamycin Ak: amikacin Te: tetracycline 29 4.5 Sự đa kháng vi khuẩn E coli ESBL loại kháng sinh Qua phân tích tính đa kháng kiểu đa kháng 13 loại kháng sinh 43 chủng vi khuẩn E coli ESBL phân lập cho thấy chủng không đề kháng với nhiều loại kháng sinh mà tạo nhiều kiểu hình đa kháng với tỉ lệ thể bảng sau Bảng 4.5 Kết kiểm tra tính đa kháng chủng E coli ESBL phân lập loại kháng sinh Số chủng kiểm tra (n = 43) Số loại Kiểu hình đa kháng Số chủng Tỉ lệ Tỉ lệ chung kháng sinh đa kháng (%) (%) Cr+Bt 2,33 4,65 Cr+Fo 2,33 Cr+Sm+Bt 2,33 6,98 Am+Cu+Cr 4,65 Am+Cu+Cr+Sm 2,33 Am+Cu+Cr+Ge 2,33 6,98 Am+Ge+Kn+Bt 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm 4,65 Am+Cu+Cr+Ge+Bt 2,33 Am+Cu+Cr+Nr+Of 2,33 Am+Cu+Cr+Sm+Fo 2,33 18,60 Am+Cu+Ge+Sm+Kn 2,33 Am+Cu+Ge+Kn+Fo 2,33 Am+Cr+Kn+Fo+Bt 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Kn 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Nr 2,33 Am+Cu+Cr+Sm+Nr+Of 2,33 18,60 Am+Cu+Cr+Sm+Kn+Fo 2,33 Am+Cu+Cr+Nr+Bt+Of 6,98 Am+Cr+Sm+Kn+Nr+Bt 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Kn+Fo 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Kn+Bt 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Nr+Of 2,33 16,28 Am+Cu+Cr+Sm+Nr+Bt+Of 6,98 Am+Cu+Cr+Kn+Nr+Bt+Of 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Kn+Bt+Of 2,33 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Nr+Bt+Of 2,33 16,28 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Te+Bt+Of 11,63 Am+Cu+Cr+Ge+Sm+Kn+Nr+Bt+Of 11,63 11,63 Am: ampicillin, Cu: cefuroxime, Cr: cefaclor, Ge: gentamycin, Sm: streptomycin, Kn: kanamycin, Ak: amikacin, Te: tetracycline, Dx: doxycycline, Nr: norfloxacin, Of: ofloxacin, Fo: fosfomycin, Bt: trimethoprim+ sulfamethoxazole Kết bảng 4.5 cho thấy 43 chủng E coli ESBL kiểm tra kháng đồng thời với loại kháng sinh nhiều loại kháng sinh với 29 kiểu hình đa kháng khác Trong đó, E coli ESBL đồng kháng với 30 đến loại kháng sinh chủ yếu với tỉ lệ 18,60% có kiểu hình đa kháng đa dạng nhất, đến loại kháng sinh với tỉ lệ 16,28%, loại kháng sinh 11,63%, đến loại kháng sinh 6,98% thấp loại kháng sinh có tỉ lệ 4,65% Từ kết cho thấy, E coli ESBL đồng kháng với nhiều loại kháng sinh mà tạo nhiều kiểu hình đa kháng đa dạng phức tạp, điều khiến cho việc phối hợp kháng sinh để phòng điều trị bệnh cho gà trở nên khó khăn Bên cạnh đó, kháng sinh ampicillin, cefaclor cefuroxime thường xuyên diện kiểu hình đa kháng theo kết kháng sinh đồ bảng 4.4 kháng sinh bị vi khuẩn E coli ESBL đề kháng với tỉ lệ cao, người chăn nuôi cần ý sử dụng phối hợp loại kháng sinh Theo nghiên cứu Gao Lili et al (2014) cho thấy phổ biến vi khuẩn kháng thuốc từ trang trại chăn nuôi mối đe dọa tiềm ẩn sức khỏe cộng đồng, người chăn nuôi cần cân nhắc lựa chọn kháng sinh kỹ trước sử dụng, tránh tình trạng lạm dụng kháng sinh mức gây tổn thất kinh tế mà không đem lại hiệu quả, nguy hiểm ảnh hưởng đến sức khỏe người Tỉ lệ (%) 20 18,6 18,6 18 16,28 16 16,28 14 11,63 12 10 6,98 6,98 4,65 2 Số loại kháng Hình 4.2 So sánh tỉ lệ đa kháng số loại kháng sinh vi khuẩn E coli ESBL 31 CHƯƠNG KÉT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua thời gian khảo sát diện vi khuẩn E coli gà khỏe số nông hộ huyện Mang Thít huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long đề tài có số kết luận sau: - Vi khuẩn E coli ESBL phân lập gà trạng thái khỏe mạnh huyện Mang Thít Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long có tỉ lệ cao (43,75%) Trong đó, gà đẻ khỏe có tỉ lệ E coli ESBL dương tính 58,33% cao so với gà thịt khỏe 29,17% - Các chủng E coli ESBL phân lập đề kháng với kháng sinh nhóm β-lactam với tỉ lệ cao ampicillin (93,02%), cefaclor (93,02%) cefuroxime (86,05%) Đồng thời vi khuẩn đề kháng với kháng sinh khác nhóm streptomycine (67,44%) trimethoprim+ sulfamethoxazole (62,79%) Tuy nhiên, E coli ESBL nhạy với amikacin (97,67%), doxycycline (93,02%) fosfomycin (86,05%) - Các chủng E coli ESBL kiểm tra kháng từ đến loại kháng sinh với 29 kiểu hình đa kháng khác nhau, đồng kháng với đến loại kháng sinh chủ yếu 5.2 Đề nghị Qua kết nghiên cứu đề tài đưa đến số đề nghị sau: - Khảo sát loài động vật khác để có thông tin tình hình diện E coli ESBL vật nuôi cách toàn diện - Nghiên cứu thêm diện vi khuẩn E coli ESBL gà khỏe nhiều nơi khác với điều kiện tự nhiên phương thức chăn nuôi khác - Với tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà khỏe tương đối cao nên người chăn nuôi cần ý thực tốt quy trình chăm sóc nuôi dưỡng, thường xuyên vệ sinh chuồng trại môi trường xung quanh để hạn chế tối đa phát triển lây lan mầm bệnh Bên cạnh đó, sử dụng loại kháng sinh nhạy cảm cao với E coli ESBL amikacin, doxycycline fosfomycin để mang lại hiệu điều trị tốt 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng việt Bùi Thị Tho, Phạm Kim Đăng, Nguyễn Tú Nam, Phạm Hồng Ngân, Lương Xuân Thế; 2012 Điều tra tình hình sử dụng kháng sinh chăn nuôi gà thành phố Hải Phòng Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, Hội thú y Việt Nam 19 (5): 92-98 Chi cục Thú y tỉnh Vĩnh Long: Báo cáo sơ kết công tác chăn nuôi – thú y tháng đầu năm 2014 kế hoạch tháng cuối năm 2014 Báo cáo số 91/BC-CCTY ngày 12/6/2014 Hoàng Thị Phương Dung, Nguyễn Thanh Bảo, Võ Thị Chi Mai; 2008 Khảo sát trực khuẩn gram âm sinh men β-lactamases phổ rộng phân lập Bệnh viện Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh Y học thành phố Hồ Chí Minh, tập 14, số 2-2010, tr 202-205 Hồ Thị Việt Thu Nguyễn Đức Hiền, 2012 Giáo trình Bệnh truyền nhiễm gia súc gia cầm Nhà xuất trường Đại học Cần Thơ Huỳnh Kim Diệu, 2012 Giáo trình Dược lý Thú Y Nhà xuất trường Đại học Cần Thơ Lưu Hữu Mãnh, 2009 Giáo trình Vi sinh Thú Y Nhà xuất trường Đại học Cần Thơ Lưu Hữu Mãnh Đỗ Võ Anh Khoa, 2012 Ảnh hưởng nhiệt độ ẩm độ chuồng nuôi lên sức khỏe gà Ross 308 Tạp chí khoa học trường Đại học Cần Thơ 2012: 22c 83-95 Nguyễn Đức Hiền, 2009 Giáo trình Bệnh truyền nhiễm gia cầm Nhà xuất Trường Đại học Cần Thơ Nguyễn Thái Sơn, Nguyễn Văn Việt, Lê Thu Hồng, Hà Thị Thu Vân, 2009 Nghiên cứu đặc điểm kháng kháng sinh vi khuẩn sinh ESBL phân lập bệnh viện 103 giai đoạn 2007-2009 Báo cáo y học 10 Nguyễn Thanh Bảo, Võ Thị Chi Mai, Cao Minh Nga, Phạm Hùng Vân, Hoàng Tiến Mỹ, Nguyễn Việt Lan, Nguyễn Năng Thiện; 2009 Vi khuẩn học Nhà xuất y học 11 Nguyễn Thị Khánh Ly, 2013 Sàng lọc vi khuẩn sinh β-Lactamases phổ rộng phân lập Bệnh viện đa khoa trung ương Thái Nguyên kỹ thuật Multiplex PCR Luận văn thạc sĩ Công nghệ sinh học Trường Đại học Thái Nguyên 12 Nguyễn Tuấn Minh, 2008 Nghiên cứu vi khuẩn sinh β-Lactamases hoạt phổ rộng gây nhiễm khuẩn hô hấp bệnh nhân thở máy Luận văn thạc sĩ y học Học viện quân y 33 13 Nguyễn Xuân Bình, 2005 109 bệnh gia cầm cách phòng trị Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội 14 Phạm Ngọc Kiếu, Nguyễn Thị Hãnh, Phạm Ngọc Dũng; 2012 Khảo sát vi khuẩn gram âm sinh men β-lactamases phổ rộng phân lập Bệnh viện đa khoa trung tâm An Giang Kỷ yếu hội nghị khoa học 10/2012, Bệnh viện An Giang, tr 156-163 15 Trần Đức Hậu, 2007 Hóa dược - tập Nhà xuất Y học 16 Võ Thị Chi Mai, Ngô Thị Quỳnh Hoa, Huỳnh Công Lý, Lê Kim Ngọc Giao, Hoàng Thị Phương Dung; 2008 Trực khuẩn đường ruột tiết βlactamases phổ rộng (ESBL) gây nhiễm khuẩn chiếm cư đường ruột phân lập Bệnh viện Chợ Rẫy Y học thành phố Hồ Chí Minh, tập 14, số 2-2010, tr 685-689 17 Võ Thị Trà An, 2010 Dược lý Thú Y Nhà xuất Nông nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh Tiếng Anh 18 Abraham E P, Chain E; 1940 An enzyme from bacteria able to destroy penicillin Natural 46: 837 19 Andrea J Linscott and William J Brown, 2005 Evaluation of Four Commercially Available Extended-Spectrum β-Lactamases Phenotypic Confirmation Tests J Clin Microbiol., 43 (3): 1081-1085 20 CLSI, 2014 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Twenty-Fourth Informational Supplement M100-S24 Vol.34, No.1 21 Cormican M G, Marshall S A, Jones R N; 1996 Detection of extendedspectrum β-lactamases (ESBL)-producing strains by the Etest ESBL screen Journal of Clinical Microbiology 34 (8): 1880–1884 22 Datta, N., and P Kontomichalou; 1965 Penicillinase synthesis controlled by infectious R factors in Enterobacteriacae Natural 208: 239-241 23 Duru Carissa, Nwanegbo Edward, Adikwu Michael, Ejikeugwu Chika, Esimone Charles, 2013 Extended-Spectrum β-Lactamases-Producing Escherichia coli Strains of Poultry Origin in Owerri, Nigeria World Journal of Medical Sciences (4): 349-354, 2013 24 Gao L., Hu J., Zhang X., Ma R., Gao J., Li S., Zhao M., Miao Z., Chai T., 2014 Dissemination of ESBL-Producing Escherichia coli of Chicken Origin to the Nearby River Water Journal of Molecular Microbiolology and Biotechnolology 2014, 24 (4): 279-285 25 Knother H, Shah P, Kremery V; 1983 Transferable resitance to cefotaxime, cefoxitin, cefamandole and cefuroxime in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae and Seratia marcescen Infection 1983; 11: 315-317 34 26 Jacoby George A, Han P, 1996 Detection of extended-spectrum βlactamasess in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli Journal Clinical Microbiology, 34: 908–911 27 Jarlier V, Nicolas M, Fournier G, Philippon A, 1988 Extended broadspectrum β-lactamasess conferring transferable resistance to newer β-lactam agents in Enterobacteriaceae: hospital prevalence and susceptibility patterns Rev Infect Dis,10: 867–878 28 Kola A., Eisele A., Waigwa C., Pfeiffer Y., Witte W., Gastmeier P.; 2011 ESBL-producing Enterobacteria in retail chicken meat, Berlin, Germany Antibiotic use and antibiotic stewardship 29 Leverstein-van Hall, M A; Dierikx, C M; Cohen Stuart, J; Voets, G M; van den Munckhof, M P; van Essen-Zandbergen, A; Platteel, T; Fluit, A C; van de Sande-Bruinsma, N; Scharinga, J; Bonten, M J M; Mevius, D J; 2011 Dutch patients, retail chicken meat and poultry share the same ESBL genes, plasmids and strains Clinical Microbiology and Infection, 17 (6): 873-880 30 Leverstein-van Hall M A, Fluit A C., Paauw A., Box A T., Brisse S., Verhoef J.; 2002 Evaluation of the E-test ESBL and the BD Phoenix, Vitek and Vitek automated instrucments for detection of Extended-spectrum β– lactamases in multiresistant Escherichia coli and Klebsiella spp J Clin Microbiol 40 (10): 3703-3711 31 Li L, Jiang ZG, Xia LN, Shen JZ, Dai L, Wang Y, Huang SY, Wu CM; 2010 Characterization of antimicrobial resistance and molecular determinants of β-lactamases in Escherichia coli isolated from chickens in China during 1970-2007 Vet Microbiol, 144 (3-4): 505-510 32 Midori Hiroi, Fumie Yamazaki, Tetsuya Harada, Naomi Takahashi, Yoshihiro Noda, Miya Yagi, Tomohiro Nishio, Takashi Kanda, Natsuko Iida, Fumihiko Kawamori, Kanji Sugiyama, Takashi Masuda, Yukiko Hara-Kudo, Norio Ohashi; 2011 Prevalence of Extended-Spectrum β-LactamasesProducing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in Food-Producing Animals J Vet Med Sci 74(2): 189–195, 2012 33 Monaghan W M., 2004 Detection of extended-spectrum β-lactamasess ESBL: An evaluation of the VITEK ESBL test in conjunction with confirmatory phenotypic disc diffusion tests Australian Journal of Medical Science 25(1): 20-26 34 Nadine Geser, Roger Stephan and Herbert Hächler, 2012 Occurrence and characteristics of Extended-spectrum β-lactamases (ESBL) producing Enterobacteriaceae in food producing animals, minced meat and raw milk BMC Veterinary Research 2012, 8:21 35 35 Paterson David L, Bonomo Robert A; 2005 Extended-Spectrum β– lactamasess: a clinical update Clinical Microbiology Reviews, 18: 657-686 36 Sanders C C, Peyret M, Moland E S, Shubert C, Thomson K S, Boufgras J-M, Sanders W E Jr.; 2000 Ability of the VITEK Advanced Expert system to identify β-lactam phenotypes in isolates of Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa Journal of Clinical Microbiology, 38 (2): 570–574 Internet 37 Bùi Văn Nghĩa, 2012 Tìm hiểu chế chủ yếu kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn http://bvdkquangnam.vn/tin-tc/thong-tin-thuc/369-tim-hiu-c-chch-yu-khang-thuc-khang-sinh-ca-vi-khun.html, ngày cập nhật 9/12/2014 38 Đình Tú, Thạch Bình, 2011 http://www.kinhtenongthon.com.vn/Phattrien-ben-vung-nganh-chan-nuoi-Can-da-dang-hoa-kinh-te-trang-trai-10827759.html, ngày cập nhật 9/12/2014 39 Nguyễn Thị Thu Ba, 2011 Cơ chế đề kháng kháng sinh số vi khuẩn gây bệnh kháng thuốc http://www.hoanmy.com/saigon/co-che-dekhang-khang-sinh-cua-mot-so-vi-khuan-gay-benh-khang-thuoc, ngày cập nhật 20/12/2014 40 Nguyễn Văn Kính, 2009 Báo cáo sử dụng kháng sinh kháng kháng sinh 15 bệnh viện Việt Nam năm 2008-2009 Báo cáo Bộ Y tế -Việt Nam phối hợp với Dự án Hợp tác toàn cầu kháng kháng sinh GARP-Việt Nam Đơn vị Nghiên cứu Lâm sàng Đại học Oxford http://benhnhietdoi.vn/tin-tuc/Su-dung-khang-sinh/bao-cao-su-dung-khangsinh-va-khang-khang-sinh-tai-15-benh-vien-nam-20082009_7866.html, ngày cập nhật 5/12/2014 41 Tổng cục Thống kê, 2014 Thông cáo báo chí tình hình kinh tế - xã hội tháng đầu năm 2014 https://gso.gov.vn/Default.aspx?tabid=382&ItemID =13984, ngày cập nhật 11/11/2014 42 http://channuoivietnam.com/tinh-hinh-san-xuat-chan-nuoi-thang112014/ 43 http://www.about-ecoli.com 44 http://www.bacteriainphotos.com/Escherichia%20coli%20light%20mic roscopy.html 45 http://www.chinhphu.vn/portal/page/portal/chinhphu/cactinhvathanhph o/tinhvinhlong/thongtintinhthanh?view=introduction&provinceId=1388 46 http://www.vinhlong.gov.vn/Portals/0/Home/Channel_information/vlm ap.gif 36 PHỤ CHƯƠNG Một số hình ảnh thực trình nghiên cứu đề tài (1) (2) (3) Hình Kết sinh hóa vi khuẩn E coli Chú thích: (1) Môi trường sinh hóa ban đầu (2) Kết sinh hóa E coli dương tính: Indole (+), Methyl Red (+), VP (-), Citrate (-) (3) Kết sinh hóa E coli âm tính: Indole (-), Methyl Red (-), VP (+), Citrate (+) Hình E coli môi trường MC Hình Phương pháp đĩa kết hợp phát E coli ESBL 37 Kết phân tích thống kê So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt khỏe tuần tuổi tháng tuổi Đối tượng Số mẫu dương tính Số mẫu âm tính Tổng hàng Gà 1tuần tuổi 12 Gà tháng tuổi 10 12 Tổng cột 17 24 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự P (Ho) = 0,32876 0,95378 NS Kết luận: Tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt khỏe tuần tuổi tháng tuổi khác ý nghĩa thống kê (P = 0,329) So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ khỏe Đối tượng Số mẫu dương tính Số mẫu âm tính Tổng hàng Gà thịt 17 24 Gà đẻ 14 10 24 Tổng cột 21 27 48 Chi-Square Test: dương tính, âm tính Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts dương 10,50 1,167 âm 17 13,50 0,907 Total 24 14 10,50 1,167 10 13,50 0,907 24 Total 21 27 48 Chi-Sq = 4,148 DF = P-Value = 0,042 Kết luận: Tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ khỏe khác có ý nghĩa thống kê (P = 0,042) 38 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính địa điểm lấy mẫu Huyện Số mẫu dương tính Số mẫu âm tính Tổng hàng Tam Bình 14 10 24 Mang Thít 17 24 Tổng cột 21 27 48 Chi-Square Test: dương tính, âm tính Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts dương 14 10,50 1,167 âm 10 13,50 0,907 Total 24 10,50 1,167 17 13,50 0,907 24 Total 21 27 48 Chi-Sq = 4,148 DF = P-Value = 0,042 Kết luận: Tỉ lệ E coli ESBL dương tính gà thịt gà đẻ khỏe khác có ý nghĩa thống kê (P = 0,042) 39 [...]... sinh sao cho hợp lí và đạt hiệu quả tối đa Xuất phát từ những vấn đề nêu trên, đề tài Khảo sát sự hiện diện của vi khuẩn Escherichia coli sinh men β- lactamases phổ rộng trên gà khỏe tại một số nông hộ ở huyện Tam Bình và Mang Thít - tỉnh Vĩnh Long được thực hiện Mục tiêu của đề tài: Xác định tỉ lệ hiện diện của vi khuẩn E coli ESBL trên gà thịt và gà đẻ khỏe tại một số nông hộ ở huyện Mang Thít và. .. tránh vấy nhiễm vi khuẩn một cách trực tiếp hoặc gián tiếp từ gà sang người và ra môi trường xung quanh 4.2 So sánh tỉ lệ E coli ESBL dương tính trên gà thịt và gà đẻ khỏe Tỉ lệ tạo kiểu hình dương tính với E coli ESBL trên 2 đối tượng là gà thịt và gà đẻ khỏe mạnh thể hiện ở bảng 4.2 Bảng 4.2 Kết quả sự hiện diện của vi khuẩn E coli ESBL trên gà thịt và gà đẻ khỏe Số mẫu kiểm tra (con) Số mẫu dương tính... những kháng sinh này lên các vi khuẩn tiết men β- lactamases Cơ chế tác động của nhóm β- lactam: - Ức chế enzyme tham gia vào quá trình tổng hợp peptidoglycan (thành phần chính của vách tế bào vi khuẩn) - Hoạt hóa hệ thống thủy giải ở tế bào vi khuẩn, gây tổn thương và giết chết vi khuẩn Cơ chế đề kháng của vi khuẩn với kháng sinh nhóm β- lactam: - Đề kháng enzyme: vi khuẩn tiết ra men β- lactamases, thủy... LUẬN 4.1 Kết quả sự hiện diện của vi khuẩn E coli ESBL trên gà thịt khỏe Qua tiến hành kiểm tra sự hiện diện của vi khuẩn E coli ESBL trên gà thịt khỏe mạnh ở 1 tuần tuổi và 1 tháng tuổi bằng phương pháp đĩa kết hợp cho kết quả ở bảng sau Bảng 4.1 Tỉ lệ E coli ESBL dương tính trên gà thịt khỏe Số mẫu kiểm tra (con) Số mẫu dương tính (con) Tỉ lệ dương tính (%) Gà 1 tuần tuổi 12 5 41,67 Gà 1 tháng tuổi... rộng rãi trên người, nhưng trên gà vẫn còn rất hạn chế Trong khi đó, tình hình 1 kháng thuốc của vi khuẩn E coli được phân lập từ gà đang ngày một gia tăng và gây tổn thất không ít cho người chăn nuôi gà nói riêng và cho ngành chăn nuôi gia cầm ở Vi t Nam nói chung Do đó, vi c xác định sự hiện diện và khả năng đề kháng kháng sinh của vi khuẩn E coli ESBL trên gà thịt và gà đẻ khỏe mạnh là điều cần thiết,... fluoroquinolone và chưa có đề kháng với imipenem Các kháng sinh đã bị vi khuẩn đề kháng với tỉ lệ trên 50% như ciprofloxacin, doxycycline, gentamycin, kanamycin 2.5 Tình hình chăn nuôi gà tại huyện Mang Thít và huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long Tỉnh Vĩnh Long nằm ở trung tâm Đồng bằng sông Cửu Long, có diện tích tự nhiên 1.475,19 km2, bằng 0,4% diện tích cả nước Nếu so sánh với toàn quốc và vùng Đồng bằng sông Cửu Long. .. thập 48 con gà khỏe mạnh được lấy ngẫu nhiên ở các hộ chăn nuôi tại huyện Mang Thít và huyện Tam Bình tỉnh Vĩnh Long, trong đó gà thịt 1 tuần tuổi là 12 con, 1 tháng tuổi là 12 con và gà đẻ là 24 con Trước khi lấy mẫu, dùng cồn sát trùng xung quanh hậu môn gà, sau đó dùng tăm bông vô trùng ngoáy vào lỗ huyệt của gà rồi cho vào môi trường vận chuyển Cary Blair Sau đó, ghi ký hiệu cho từng mẫu và bảo quản... kháng sinh dài Phổ kháng khuẩn rộng (trừ streptomycin), tập trung chủ yếu là vi khuẩn gram âm và một số vi khuẩn gram dương Cơ chế tác động của nhóm aminogycoside: Các kháng sinh nhóm aminoglycoside là thuốc diệt khuẩn, tác động bằng cách ức chế sinh tổng hợp protein của vi khuẩn Aminoglycoside gắn vào tiểu thể 30S ribosom của vi khuẩn, gây vi c đọc nhầm tín hiệu dẫn đến sản xuất protein lạ khiến vi khuẩn. .. và huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long Kiểm tra tính nhạy cảm của các chủng E coli ESBL phân lập được đối với một số loại kháng sinh 2 CHƯƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tổng quan về vi khuẩn E coli 2.1.1 Lịch sử vi khuẩn E coli E coli được xếp vào giới: Bacteria, ngành: Proteobacteria, lớp: Gramma Proteobacteria, bộ: Enterobacteriales, họ: Enterobacteriaceae Vi khuẩn E coli do bác sĩ Thoedore Escherich phát hiện. .. Hậu (2007) và Huỳnh Kim Diệu (2012), cơ chế tác động và cơ chế đề kháng của vi khuẩn đối với một số loại kháng sinh như sau: Nhóm β- lactam Theo cấu trúc hóa học các kháng sinh nhóm β- lactam được chia thành 4 nhóm gồm penicillin, cephalosporin, carbapenem, monobactam Đặc điểm chung của nhóm này là có vòng β- lactam Kháng sinh nhóm β- lactam được sử dụng rộng rãi vì có phổ kháng khuẩn đa dạng và ít độc ... KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài Khảo sát diện vi khuẩn Escherichia coli sinh men lactamases phổ rộng gà khỏe số nông hộ huyện Tam Bình Mang Thít, tỉnh Vĩnh Long sinh vi n... khảo sát diện vi khuẩn E coli gà khỏe số nông hộ huyện Mang Thít huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh Long đề tài có số kết luận sau: - Vi khuẩn E coli ESBL phân lập gà trạng thái khỏe mạnh huyện Mang Thít. .. KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH THÚ Y KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI SINH MEN β- LACTAMASES PHỔ RỘNG TRÊN GÀ KHỎE TẠI MỘT SỐ NÔNG HỘ