ảnh hưởng của vi khuẩn pseudomonas stutzeri cố định đạm đến năng suất dưa leo trồng ngoài đồng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC ẢNH HƢỞNG CỦA VI KHUẨN PSEUDOMONAS STUTZERI CỐ ĐỊNH ĐẠM ĐẾN NĂNG SUẤT DƢA LEO TRỒNG NGOÀI ĐỒNG CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGS TS NGUYỄN HỮU HIỆP SƠN LÂM BÍCH LOAN MSSV: 3113723 LỚP: VSV K37 Cần Thơ, tháng 11/2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH VI SINH VẬT HỌC ẢNH HƢỞNG CỦA VI KHUẨN PSEUDOMONAS STUTZERI CỐ ĐỊNH ĐẠM ĐẾN NĂNG SUẤT DƢA LEO TRỒNG NGOÀI ĐỒNG CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGS TS NGUYỄN HỮU HIỆP SƠN LÂM BÍCH LOAN MSSV: 3113723 LỚP: VSV K37 Cần Thơ, tháng 11/2014 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN (ký tên) SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) PGS.TS NGUYỄN HỮU HIỆP SƠN LÂM BÍCH LOAN DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN Cần Thơ, ngày 17 tháng 11 năm 1014 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG (ký tên) LỜI CẢM TẠ Để hoàn thành Luận văn tốt nghiệp, nỗ lực cố gắng thân, nhận đƣợc nhiều giúp đỡ ngƣời Trƣớc tiên xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu phát triển Công nghệ Sinh học, trƣờng Đại học Cần Thơ tạo điều kiện cho học tập, nghiên cứu năm qua Quý Thầy cô thuộc Viện nghiên cứu phát triển Công nghệ sinh học tận tình dạy bảo, truyền đạt kiến thức bổ ích nhƣ kỹ thao tác nghiên cứu suốt trình theo học Viện PGS.Ts Nguyễn Hữu Hiệp, thầy hƣớng dẫn tận tình, cho lời khuyên bổ ích trình thực đề tài luận văn Các chị phòng thí nghiệm Vi sinh vật thuộc Viện nghiên cứu phát triển Công nghệ Sinh học tận tình giúp đỡ, hỗ trợ hoàn thành đề tài Gia đình chị Phụng tạo điều kiện cho hoàn thành đề tài Tất bạn lớp Vi sinh vật khóa 37 ngƣời bạn thân bên cạnh giúp đỡ, động viên suốt trình học tập khoảng thời gian làm luận văn Đặc biệt quan tâm, chia sẻ, động viên gia đình ngƣời thân suốt trình học tập Cần Thơ, ngày 17 tháng 11 năm 2014 Sinh viên thực Sơn Lâm Bích Loan Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT TÓM LƢỢC Nhằm khảo sát ảnh hưởng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri cố định đạm đến suất dưa leo, thí nghiệm thực đồng Huyện Thạnh Trị, tỉnh Sóc Trăng Kết thí nghiệm cho thấy nghiệm thức sử dụng 100%N giúp dưa leo tăng trưởng tốt nhất, khác biệt có ý nghĩa với nghiệm khác tất tiêu không ý nghĩa so với nghiệm thức bón 75%N + phun VK Ngày nở hoa dài ghi nhận đối chứng (32 ngày) ngắn nghiệm thức bón 100%N (26,25 ngày) không khác biệt với nghiệm thức bón 75%N + phun VK (26,75 ngày) Ngày thu hoạch dài 47,25 ngày đối chứng ngắn 38,75 ngày nghiệm thức 100%N, nghiệm thức 75%N + phun VK 39 ngày Chiều dài trái cao ghi nhận nghiệm thức bón 100%N (17,46 cm) khác biệt không ý nghĩa với nghiệm thức 75%N + phun VK (17,41 cm), thấp nghiệm thức đối chứng (13,88 cm) Đường kính trái thay đổi từ 11,38 cm nghiệm thức đối chứng lên 14,07 cm nghiệm thức bón 100%N Số trái cao nghiệm thức 100%N (8,25 trái/cây), nghiệm thức bón 75%N + phun VK (8,15 trái/cây) thấp đối chứng (5,90 trái/cây) Trọng lượng trái thấp nghiệm thức đối chứng (103,05 g), nghiệm thức 75%N + phun VK (199,85 g) cao nghiệm thức 100%N (201,40 g) Năng suất cao ghi nhận nghiệm thức 100%N (30,54 tấn/ha), nghiệm thức 75%N + phun VK (29,89 tấn/ha) thấp đối chứng (13,97 tấn/ha) Như vậy, với việc bón 75%N + phun Pseudomonas stutzeri (mật số 106 cfu/ml) giúp tiết kiệm 25% lượng phân hóa học sử dụng cho suất tương đương với bón 100%N Từ khóa: cố định đạm, dưa leo, Pseudomonas stutzeri Chuyên ngành Vi sinh vật học i Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT MỤC LỤC Trang KÝ TÊN HỘI ĐỒNG LỜI CẢM TẠ TÓM LƢỢC i MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vi CHƢƠNG I ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG II LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU .3 2.1 Vi khuẩn Pseudomonas stutzeri 2.1.1 Đặc điểm vi khuẩn Pseudomonas stutzeri .3 2.1.2 Những nghiên cứu vi khuẩn Pseudomonas stutzeri 2.2 Vai trò đạm trồng chế cố định đạm 2.2.1 Vai trò đạm trồng 2.2.2 Cơ chế cố định đạm sinh học 2.3 Đặc tính sinh học kỹ thuật trồng dƣa leo 11 2.3.1 Đặc tính sinh học 11 2.3.2 Kỹ thuật trồng dƣa leo 13 2.3.3 Điều kiện sinh thái 15 CHƢƠNG III PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP 17 3.1 Phƣơng tiện 17 3.1.1 Vật liệu 17 3.1.2 Thiết bị 17 3.2 Phƣơng pháp .17 Chuyên ngành Vi sinh vật học ii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT 3.2.1 Bố trí thí nghiệm 18 3.2.2 Quy trình trồng dƣa leo 19 3.2.3 Các tiêu thu thập xử lý kết thí nghiệm 21 CHƢƠNG IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 23 4.1 Kết thí nghiệm 23 4.1.1 Màu sắc hình ảnh dƣa leo 10 ngày, 20 ngày, 30 ngày sau trồng 23 4.1.2 Các tiêu chiều dài trái, đƣờng kính trái, số trái trọng lƣợng trái dƣa leo 30 4.1.3 Các tiêu ngày nở hoa, ngày thu hoạch suất trái 34 4.1.4 Hiệu kinh tế mô hình trồng dƣa leo 36 4.2 Thảo luận 39 CHƢƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 40 5.1 Kết luận .40 5.2 Đề nghị .40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 PHỤ LỤC Phụ lục Bảng kết thí nghiệm Phụ lục Kết phân tích thống kê Chuyên ngành Vi sinh vật học iii Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng Kết phân tích tiêu đất trồng dƣa leo 17 Bảng Thành phần nghiệm thức 18 Bảng Lƣợng phân bón sử dụng cho nghiệm thức trồng dƣa leo 21 Bảng Ảnh hƣởng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri đến chiều dài trái đƣờng kính trái 31 Bảng Ảnh hƣởng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri đến ngày nở hoa ngày thu hoạch dƣa leo 35 Bảng Chi phí đầu tƣ cho nghiệm thức (8m2) .37 Bảng Hiệu kinh tế việc phun vi khuẩn, bón phân vô dƣa leo 38 Chuyên ngành Vi sinh vật học iv Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Trang Hình Các dạng khuẩn lạc Pseudomonas stutzeri Hình Vi khuẩn Pseudomonas stutzeri Hình Sơ đồ giả thuyết đƣờng trình cố định N2 Hình Cây dƣa leo .12 Hình Đất trồng dƣa leo đƣợc chuẩn bị 19 Hình Các bƣớc ngâm hạt giống 20 Hình Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 24 Hình Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 25 Hình Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 26 Hình 10 Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 27 Hình 11 Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 28 Hình 12 Màu sắc hình ảnh dƣa leo nghiệm thức 100 29 Hình 13 Chiều dài trái dƣa leo 32 Hình 14 Biểu đồ biểu diễn số trái nghiệm thức 33 Hình 15 Biểu đồ biểu diễn trọng lƣợng trái nghiệm thức 34 Hình 16 Biểu đồ biểu diễn suất trái nghiệm thức 36 Chuyên ngành Vi sinh vật học v Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Chú thích Cfu Colony forming unit NSKG Ngày sau gieo VK Vi khuẩn VNĐ Việt Nam đồng Chuyên ngành Vi sinh vật học vi Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Hình 16 Biểu đồ biểu diễn suất trái nghiệm thức Ghi chú: giá trị trung bình lần lặp lại, giá trị theo sau có chữ khác khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 4.1.4 Hiệu kinh tế mô hình trồng dƣa leo - Tổng chi phí (VNĐ/192m2)  Chi phí hạt giống, thuốc BVTV, phân lân phân kali đƣợc tính chung theo mức kinh phí đầu tƣ nghiệm thức với tổng diện tích nghiệm thức là: + Tiền hạt giống: gói x 50 000 VNĐ = 150 000 VNĐ + Phun thuốc trừ sâu Virtako: gói x 19 000 VNĐ = 38 000 VNĐ + Màng phủ: 192 m x 1000 VNĐ = 192 000 VNĐ + Lƣới làm giàn: kg x 75 000 VNĐ = 225 000 VNĐ + Xới đất, đào rãnh: ngày x ngƣời x 100 000 VNĐ = 400 000 VNĐ + Chi phí sử dụng vi khuẩn: 0,064 lít x 50 000VNĐ/lít = 200 VNĐ + Phân supe lân: 10,68 kg x 000 = 42 720 VNĐ + Phân kali clorua: 3,84 kg x 10 000 = 38 400 VNĐ  Chi phí sử dụng phân đạm đƣợc tính riêng cho nghiệm thức: giá thành loại phân bón (tháng 8/2014)- Urê 11000 VNĐ/kg, KCl 10000 VNĐ/kg, Supe lân 4000 VNĐ/kg Chuyên ngành Vi sinh vật học 36 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT +Tổng thu nhập (VNĐ/ha): suất thƣơng phẩm x giá bán thời điểm thu hoạch Với mức giá dƣa leo 5000 VNĐ/kg (tháng 10/2014), ta tính đƣợc tổng số tiền bán dƣa leo nghiệm thức dựa vào suất thƣơng phẩm dƣa leo +Lợi nhuận đƣợc tính theo công thức Lợi nhuận/ha = Tổng số tiền bán dưa leo (tổng thu) - Tổng chi phí đầu tư Trong tổng chi phí đầu tƣ = chi phí phân đạm + chi phí phun VK + chi phí khác (tiền giống + tiền công + thuốc hóa học + màng phủ + lƣới + phân lân phân kali) Bảng Chi phí đầu tƣ cho nghiệm thức (8m2) Nghiệm thức Phân đạm (VNĐ) Vi khuẩn Chi phí khác (VNĐ) (VNĐ) Chi phí đầu tƣ/8m2 (VNĐ) 0 45 388 45 388 200 45 388 45 588 385 200 45 388 45 973 770 200 45 388 46 358 155 200 45 388 46 743 100 540 45 388 47 128 Chuyên ngành Vi sinh vật học 37 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Bảng Hiệu kinh tế việc phun vi khuẩn, bón phân vô dƣa leo Nghiệm thức Chi phí đầu tƣ/ha Năng suất (VNĐ) thƣơng phẩm Tổng thu/ha Lợi nhuận/ha (VNĐ) (VNĐ) (VNĐ) 56 735 000 13,97 68 850 000 12 115 000 56 985 000 16,11 80 550 000 23 565 000 57 466 250 20,33 101 650 000 44 183 750 57 947 500 26,06 130 300 000 72 352 500 58 428 750 29,90 149 500 000 91 071 250 100 58 910 000 30,54 152 700 000 93 790 000 Ghi chú: giá dưa leo 5000 VNĐ/kg Chuyên ngành Vi sinh vật học 38 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT 4.2 Thảo luận Phân bón hóa học vấn đề toàn cầu, nhà nghiên cứu giới tìm giải pháp cho vấn đề cho thấy tác dụng phụ ngƣời môi trƣờng Nông dân sử dụng phân bón hóa học nông nghiệp gây tác động tiêu cực số trồng môi trƣờng, làm suy giảm đa dạng sinh học Hơn nữa, giá phân bón hóa học ngày tăng thời gian sẵn cho ngƣời nông dân Thay phần toàn phân bón hóa học hữu ích để khắc phục tác hại giảm chi phí sản xuất Phân bón sinh học giải pháp tốt để thay phân bón hóa học Phân bón sinh học có nhiều lợi loại phân bón hóa học, chúng không gây ô nhiễm, không đắt tiền, sử dụng nguồn tài nguyên tái tạo Bên cạnh cung cấp N2 cho trồng, chúng cung cấp chất dinh dƣỡng khác nhƣ vitamin chất tăng trƣởng Thí nghiệm cho thấy vai trò Pseudomonas stutzeri việc cố định đạm từ khích thích tăng trƣởng tăng suất dƣa leo, kết thay đƣợc 25% phân bón hóa học Năm 2010, Basel M Salhia nghiên cứu ảnh hƣởng vi khuẩn Azotobacter chroococcum đến phát triển suất dƣa leo, kết làm tăng khoảng 6% sản lƣợng, 31% trọng lƣợng khô rễ, 11% toàn trọng lƣợng khô cây, 14% chiều dài cây, 10% số nhánh , 27% số 18% phần trăm nitơ rễ so với đối chứng Chủng vi khuẩn A chroococcum giúp tăng suất khoảng 6%, trọng lƣợng khô rễ 31%, 18% trọng lƣợng rễ , 14% chiều dài cây, 10% số nhánh, 27%, tỷ lệ phần trăm nitơ chồi tăng 15%, tăng 18% tỷ lệ phần trăm nitơ rễ so với đối chứng Kết chứng minh Azotobacter chroococcum vi khuẩn sử dụng để sản xuất phân sinh học giúp gia tăng sản lƣợng dƣa leo Chuyên ngành Vi sinh vật học 39 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT CHƢƠNG V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Kết thí nghiệm cho thấy nghiệm thức sử dụng 75%N + phun VK giúp gia tăng đáng kể chiều dài , đƣờng kính, trọng lƣợng suất trái, rút ngắn ngày nở hoa ngày thu hoạch, khác biệt không ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức bón 100%N Nhƣ vậy, với việc bón 75%N + phun Pseudomonas stutzeri (mật số 106 cfu/ml) giúp tiết kiệm 25% lƣợng phân hóa học sử dụng 5.2 Đề nghị Triển khai thí nghiệm ảnh hƣởng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri dƣa leo vùng sinh thái khác trƣớc đƣa vào ứng dụng đại trà Chuyên ngành Vi sinh vật học 40 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Cao Ngọc Điệp, Ngô Thanh Phong, Trần Thúy Huỳnh Phan Kim Định 2011 Xác định mức độ thay phân đạm vi khuẩn pseudomonas sp bt1 bt2 với lúa cao sản trồng chậu Tạp chí khóa học 2011: 20a 92-99 Trƣờng Đại học Cần Thơ Cao Ngọc Điệp, Phan Trƣờng Khanh Nguyễn Thị Xuân Mỵ 2008 Phân lập vi khuẩn Pseudomonas stutzeri đất Đồng song Cửu Long Tạp chí Công nghệ Sinh học 6(2): 191-195 Đào Duy Cầu 2004 Giáo trình công nghệ trồng trọt Nxb Lao động xã hội Hà Nội Trang 141-154 Ngô Thanh Phong 2010 Giống (chi) vi khuẩn Pseudomonas loài giống có khả cố định đạm Chuyên đề nghiên cứu sinh, khoa khoa học tự nhiên Trƣờng Đại học Cần Thơ Nguyễn Nhƣ Hà 2006 Giáo trình thổ nhưỡng nông hóa, NXB Hà nội, trang 7, 8, 47 Nguyễn Thanh Bình 2008 Hỏi- Đáp sử dụng phân bón Nxb Khoa học tự nhiên & Công nghệ Trang 48-53 Nguyễn Thanh Hùng 1984 Các loại phân bón thâm canh Nxb Đồng Nai Trang Nguyễn Thanh Hùng 1984 Các loại phân bón thâm canh Nxb Đồng Nai, 105 trang Trần Cẩm Vân 2001 Giáo trình vi sinh vật học môi trường Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội Trang 96, 97 Trần Khắc Thi Trần Ngọc Hùng 2003 Kỹ thuật trồng rau Nxb Nông nghiệp Trang 100-105 Trần Thị Ba, Trần Văn Hai Phạm Hồng Cúc 2001 Kỹ thuật trồng rau Nxb Nông nghiệp Tp Hồ Chí Minh Trang 16-18, 79, 81, 82 Trần Thị Ba, Trần Văn Hai Võ Thị Bích Thủy 2009 Giáo trình kỹ thuật sản xuất rau Tủ sách Đại học Cần Thơ Trang 21-23 Chuyên ngành Vi sinh vật học 41 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Tiếng Anh Basel M Salhia 2010 The Effect of Azotobacter chrococcum as Nitrogen biofertilizer on the growth and yield of Cucumis Sativus 94 Bennasar A, Guasp C and Lalucat J 1998 Molecular methods for the detection and identification of Pseudomonas stutzeri in pure culture and environmental samples Microb Ecol 35: 22-33 Bennasar, A., C Guasp and J Lalucat 1998b Molecular methods for detection and identification of Pseudomonas stutzeri in pure culture and environmental samples, Microb Ecol 35: 22-33 Burri, R., and A Stutzer 1895 Ueber Nitrat zerstörende Bakterien und den durch dieselben bedingten Stickstoffverlust Zentbl Bakteriol Parasitenkd Abt II 1:257-265, 350-364, 392-398, 422-432 Cladera AM, Bennasar A, Barcelo M, Lalucat J and Garcia-Valdes E 2004 Comparative genetic diversity of Pseudomonas stutzeri genomovars, clonal structure and phylogeny of the species Appl Eviron Microbiol 186: 5239-5248 Garcia-Valdes E, Cozar E, Rotger R, Lalucat J and Ursing J 1988 New naththlenedegrading marine Pseudomonas strain Appl Environ Microbiol 54: 2478-2485 Holmes, B 1986 Indentification and distribution of Pseudomonas stutzeri in Clinical material Allp Bacteriol., 60: 401-411 Lalucat, J., A Bennasar, R Bosch, E García-Valdés, and N J Palleroni 2006 Biology of Pseudomonas stutzeri Microbiol Mol Biol Rev 70 (2): 510-547 Lee, Han-Woong., Soo-Youn Lee., Jin-Woo Lee., Jong-Bok Park.,Eui-So Choi., and Yong Keun Park 2002 Molecular characterization of microbial community in nitrate-removing activated sludge FEMS Microbiology Ecology 41(2002): p.85-94 Musa Saymen, Onder Turkmen, Atilla Dursun, M Figen Donmez and Mustafa Paksoy 2010 Effects of Bacterium Inoculation on Yield and Yield Components of Cucumber (Cucumis sativus) Bulletin UASVM Horticulture, 67(1)/2010 Print ISSN 1843-5254; Electronic ISSN 1843-5394 Chuyên ngành Vi sinh vật học 42 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Obradors N and Aguillar J 1991 Efficient biodegradation of high-molecular-weight polyethylene glycols by pure culture of Pseudomonas stutzeri Appl Environ Microbiol 57: 2383-2388 Rius, N., M C Fusté, C Guasp, J Lalucat, and J G Lorén 2001 Clonal population structure of Pseudomonas stutzeri , a species with exceptional genetic diversity, Bacteriol., 183: 736-744 Rossello, R., E Garcia – Valdes, J Lalucat and J Ursing 1991 Genotypic and phenotypic diversity of Pseudomonas stutzeri, Syts Appl Microbiol., 14 150157 Sazakli, E., M Leotsinidis, A Vantarakis and M Papapetropoulou, 2005 Comparative typing of Pseudomonas species isolated from the aquatic environment in Greece by SDS-PAGE and RAPD analysis Journal of Applied Microbiology, 99: 1191-1203 Sikorski J, Mohle M and Waskernagel W 2002 Indentification of complex composition, strong strain diversity and directional selection in local Pseudomonas stutzeri population from marine sediments and soil Environ Microbiol 4: 465-476 Sikorski, J., N Teschner., and Wilfried Wackernagel 2002 Highly different levels of natural transformation are associated with genome subgroups within a local population of pseudomonas stutzeri from soil Appl Microbiol 68: 865-873 Sikorski, J., R Rosselló-Mora, and M G Lorenz 1999 Analysis of genotypic diversity and relationships among Pseudomonas stutzeri strains by PCR-based genomic fingerprinting and multilocus enzyme electrophoresis Syst Appl Microbiol 22:393-402 Tisdall, J.M and Oades, J.M., 1982 Organic matter and water slatle aggresgates in soil, pp 141-163 Tisdall, J.M and Oades, J.M., 1982 Organic matter and water slatle aggresgates in soil, pp 141-163 van Niel, C B., and M B Allen 1952 A note on of Pseudomonas stutzeri Bacteriol 64: 413-422 Chuyên ngành Vi sinh vật học 43 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Zumfit G 1997 Cell biology and molecular basis of denitrification Microbilo Mol Biol Rev 61: 533-536 Trang Web http://www.dongyhongduc.com/, ngày 10/8/2014 https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Pseudomonas_stutzeri, ngày 12/8/2014 http://www.abc.net.au/science/news/stories/s886276.htm, ngày 12/8/2014 Chuyên ngành Vi sinh vật học 44 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ lục Bảng kết thí nghiệm Chiều dài trái đƣờng kính trái Bảng Bảng số liệu chiều dài trái đƣờng kính trái STT Đƣờng kính trái Chiều dài trái TB TB TB TB TB TB TB TB 13,86 13,96 13,88 13,82 11,04 11,20 11,86 11,40 14,10 14,34 14,10 14,38 11,70 11,22 11,72 10,98 14,83 14,54 14,44 14,50 11,72 12,90 12,80 12,40 16,12 16,46 16,22 15,98 13,32 12,20 13,58 12,28 17,02 17,70 17,70 17,22 13,74 13,94 13,50 14,00 17,70 17,36 17,32 17,46 14,36 13,74 13,98 14,20 Trọng lƣợng trái số trái Bảng Bảng số liệu trọng lƣợng trái số trái Trọng lƣợng trái STT Số trái TB TB TB TB TB TB TB TB 101,40 101,40 104,60 104,80 6,00 5,60 5,80 6,20 109,00 98,00 112,20 98,00 6,60 5,80 6,60 6,40 115,40 135,40 128,80 131,20 7,00 7,20 6,40 7,40 167,40 154,20 182,60 143,60 7,80 8,00 7,80 7,60 193,80 209,60 197,60 198,40 7,80 8,00 8,60 8,20 206,60 205,00 196,80 197,20 8,00 8,40 8,40 8,20 Ngày nở hoa ngày thu hoạch Bảng 10 Bảng số liệu ngày nở hoa ngày thu hoạch dƣa leo STT Ngày nở hoa TB Ngày thu hoạch TB TB TB TB TB TB TB 33 32 31 32 46 49 47 47 30 33 30 32 45 47 46 47 30 28 31 30 43 44 43 45 28 28 29 30 41 40 41 43 25 28 28 26 38 40 38 40 26 27 25 27 38 39 38 40 Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học T Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Năng suất trái Bảng 11 Bảng số liệu suất trái Năng suất trái (tấn/ha) STT TB TB 14,34 15,11 13,07 13,35 15,30 16,10 15,92 17,13 21,48 19,51 19,80 20,53 25,56 26,40 26,38 25,89 31,34 29,55 29,45 29,23 30,88 29,60 29,86 31,83 Chuyên ngành Vi sinh vật học TB TB Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Phụ lục Kết phân tích thống kê Kết phân tích phƣơng sai tiêu dƣa leo Chiều dài trái One-way ANOVA: Chiều dài trái versus Nghiệm thức Source Nghiệm thức Error Total DF 18 23 S = 0.2014 R-Sq = 98.61% Level a b c d e f N 4 4 4 Mean 13.880 14.230 14.575 16.195 17.410 17.460 SS 51.8876 0.7302 52.6178 StDev 0.059 0.151 0.168 0.202 0.345 0.170 MS 10.3775 0.0406 F 255.81 P 0.000 R-Sq(adj) = 98.23% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (-*) (-*) (*-) (-*-) (-*-) (-*) + -+ -+ -+ 14.4 15.6 16.8 18.0 Pooled StDev = 0.201 Grouping Information Using Fisher Method Nghiệm thức f e d c b a N 4 4 4 Mean 17.4600 17.4100 16.1950 14.5750 14.2300 13.8800 Grouping A A B C D E Means that not share a letter are significantly different Đƣờng kính trái One-way ANOVA: Đường kính trái versus Nghiệm thức Source Nghiệm thức Error Total DF 18 23 S = 0.4417 R-Sq = 88.22% Level a b c d e f N 4 4 4 Mean 11.375 11.405 12.455 12.845 13.795 14.070 SS 26.315 3.512 29.827 StDev 0.355 0.366 0.536 0.707 0.226 0.270 Chuyên ngành Vi sinh vật học MS 5.263 0.195 F 26.97 P 0.000 R-Sq(adj) = 84.95% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( * ) ( * -) ( -* ) ( * ) ( * -) -+ -+ -+ -+ -11.0 12.0 13.0 14.0 Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Pooled StDev = 0.442 Grouping Information Using Fisher Method Nghiệm thức f e d c b a N 4 4 4 Mean 14.0700 13.7950 12.8450 12.4550 11.4050 11.3750 Grouping A A B B C C Means that not share a letter are significantly different Trọng lƣợng trái One-way ANOVA: Trọng lượng trái versus Ngiệm thức Source Ngiệm thức Error Total DF 18 23 S = 9.035 R-Sq = 96.48% Level a b c d e f N 4 4 4 SS 40237.4 1469.4 41706.8 Mean 103.05 104.30 127.70 161.95 199.85 201.40 StDev 1.91 7.39 8.64 16.86 6.80 5.13 MS 8047.5 81.6 F 98.58 P 0.000 R-Sq(adj) = 95.50% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ ( * -) ( * ) ( -* ) ( * ) ( -* ) ( * ) -+ -+ -+ -+ 120 150 180 210 Pooled StDev = 9.04 Grouping Information Using Fisher Method Ngiệm thức f e d c b a N 4 4 4 Mean 201.40 199.85 161.95 127.70 104.30 103.05 Grouping A A B C D D Means that not share a letter are significantly different Ngày nở hoa One-way ANOVA: Ngày nở hoa versus Nghiệm thức Source Nghiệm thức Error Total S = 1.196 DF 18 23 SS 108.88 25.75 134.63 R-Sq = 80.87% Chuyên ngành Vi sinh vật học MS 21.77 1.43 F 15.22 P 0.000 R-Sq(adj) = 75.56% Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Level a b c d e f N 4 4 4 Mean 32.000 31.250 29.750 28.750 26.750 26.250 StDev 0.816 1.500 1.258 0.957 1.500 0.957 Trường ĐHCT Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+ 25.0 27.5 30.0 32.5 Pooled StDev = 1.196 Grouping Information Using Fisher Method Nghiệm thức a b c d e f N 4 4 4 Mean 32.000 31.250 29.750 28.750 26.750 26.250 Grouping A A B B C C D D Means that not share a letter are significantly different Ngày thu hoạch One-way ANOVA: Ngày thu hoạch versus Nghiệm thức Source Nghiệm thức Error Total S = 1,099 Level a b c d e f N 4 4 4 DF 18 23 SS 263,21 21,75 284,96 MS 52,64 1,21 R-Sq = 92,37% Mean 47,250 46,250 43,750 41,250 39,000 38,750 StDev 1,258 0,957 0,957 1,258 1,155 0,957 F 43,57 P 0,000 R-Sq(adj) = 90,25% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( -* -) ( -* -) ( * -) ( -* -) ( -* -) -+ -+ -+ -+ -39,0 42,0 45,0 48,0 Pooled StDev = 1,099 Grouping Information Using Fisher Method Nghiệm thức a b c d e f N 4 4 4 Mean 47,250 46,250 43,750 41,250 39,000 38,750 Grouping A A B C D D Means that not share a letter are significantly different Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Năng suất trái One-way ANOVA: Năng suất trái versus Ngiệm thức Source Ngiệm thức Error Total S = 0.8548 DF 18 23 Level a b c d e f N 4 4 4 SS 998.578 13.153 1011.731 MS 199.716 0.731 R-Sq = 98.70% Mean 13.968 16.114 20.329 26.056 29.893 30.541 StDev 0.935 0.762 0.878 0.409 0.976 1.020 F 273.31 P 0.000 R-Sq(adj) = 98.34% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ (-*-) (-*-) (-*) (-*-) (-*-) (-*-) + -+ -+ -+ 15.0 20.0 25.0 30.0 Pooled StDev = 0.855 Grouping Information Using Fisher Method Ngiệm thức f e d c b a N 4 4 4 Mean 30.541 29.893 26.056 20.329 16.114 13.968 Grouping A A B C D E Means that not share a letter are significantly different Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học [...]... lƣợng đạm cố định đƣợc khác nhau ở mỗi đối tƣợng Để góp phần làm phong phú đối tƣợng mà Pseudomonas stutzeri có khả năng cố định đạm thì đề tài “ Ảnh hƣởng của vi khuẩn Pseudomonas stutzeri cố định đạm với cây dƣa leo trồng ngoài đồng đƣợc thực hiện Mục tiêu: xác định ảnh hƣởng của vi c ứng dụng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri lên sinh trƣởng và năng suất dƣa leo Chuyên ngành Vi sinh vật học 2 Vi n NC... quá trình cố định đạm sinh học Tuy nhiên, ở vi khuẩn lam, quá trình cố định đạm không xảy ra ở bất kỳ tế bào nào mà chỉ có thể xảy ra ở dị bào (Desnoues et al., 2003) Khả năng cố định đạm sinh học hay các sinh vật mang hệ thống gen nif đƣợc phân phối ở nhiều loài vi khuẩn thực (eubacteria) và vi khuẩn cổ (archae) (Yan et al., 2008) N2 + 8H + 6e- 2 NH3 + H2 Sự cố định đạm sinh học giới hạn ở vi sinh vật... 2.2 Vai trò của đạm đối với cây trồng và cơ chế cố định đạm 2.2.1 Vai trò của đạm đối với cây trồng Trong số các nguyên tố hóa học cấu tạo thành phần thực vật, đạm là nguyên tố cần thiết cho các loại cây nhƣng trong đất lại chứa ít đạm Nguồn gốc của đạm ở trong đất không phải từ các khoáng và đá mà từ các tàn dƣ sinh vật và phân bón, từ hoạt động của vi sinh vật cố định đạm, do tác dụng của sấm sét,... hình ảnh cây dƣa leo của nghiệm thức 1 Ghi chú: (a) Màu sắc lá dưa leo (b), (c), (d) cây dưa leo 10, 20, 30 ngày sau khi trồng Chuyên ngành Vi sinh vật học 25 Vi n NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT a b c d Hình 9 Màu sắc lá và hình ảnh cây dƣa leo của nghiệm thức 2 Ghi chú: (a) Màu sắc lá dưa leo (b), (c), (d) cây dưa leo 10, 20, 30 ngày sau khi trồng. .. KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Vi khuẩn Pseudomonas stutzeri 2.1.1 Đặc điểm vi khuẩn Pseudomonas stutzeri Pseudomonas thƣờng là vi khuẩn Gram âm, hình que, có chiên mao ở cực, có khả năng di chuyển tốt trong nƣớc, có khả năng tạo bào tử Pseudomonas là vi khuẩn sống tự do, chúng hiện diện khắp nơi nhƣ trong đất, trong nƣớc, thực vật, động vật, cơ thể ngƣời, một số làm hƣ thực phẩm, chúng có khả năng hô hấp hiếu khí... thƣờng cao hơn vi sinh vật hiếu khí - Tìm thấy hợp chất loại khử khi nuôi các vi sinh vật cố định nitơ phân tử Quá trình cố định nitơ phân tử là quá trình đồng hóa nitơ của không khí thành đạm amon dƣới tác dụng của một số nhóm vi sinh vật có hoạt tính Nitrogenase Bản chất của quá trình cố định nitơ phân tử đƣợc Hellrigel và Uynfac tìm ra năm 1886 Cả 2 nhóm vi sinh vật tham gia đó là: nhóm vi sinh vật... cao năng suất và chất lƣợng nông sản, giảm thiểu lƣợng phân bón hóa học đang đƣợc khuyến cáo đến nông dân Ngƣời ta đầu tƣ nghiên cứu phân vi sinh chứa các vi sinh vật sống có khả năng cố định đạm; hòa tan lân; tiết ra kích thích tố tăng trƣởng nhƣ IAA (indole-3-acetic acid), IBA (indole-3- butyric acid), ABA (abscisic acid) cho cây trồng Trong đó, các loài thuộc giống Pseudomonas có khả năng cố định đạm. .. định đạm đã đƣợc xác định từ những năm 1994, cố định đạm sinh học trên lúa làm tăng đạm tổng số lên 20-25%, giảm lƣợng đạm hóa học cho nông nghiệp, giảm chi phí sản xuất, ô nhiễm môi trƣờng và không gây hại cho thiên địch Chuyên ngành Vi sinh vật học 1 Vi n NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 - 2014 Trường ĐHCT Khả năng cố định đạm sinh học của Pseudomonas stutzeri đã đƣợc thực... nghiệm là 45cm Bao gồm các nghiệm thức sau: (0) Đối chứng âm (không bón đạm, không phun vi khuẩn) (1) Không bón đạm + phun vi khuẩn (2) 25% N + phun vi khuẩn (3) 50% N + phun vi khuẩn (4) 75% N + phun vi khuẩn (100) Đối chứng dƣơng (bón 100% N theo công thức khuyến cáo) Bảng 2 Thành phần các nghiệm thức STT Nghiệm thức Phun vi khuẩn %N % (P và K) 1 NT0 (âm) Không 0 100 2 NT1 Có 0 100 3 NT2 Có 25 100... al., 1999) Gần đây, vi khuẩn Pseudomonas stutzeri còn đƣợc phân lập từ nƣớc thải chăn nuôi heo (Su et al., 2001), có biên độ về nhiệt độ tăng trƣởng rộng nhƣng nhiệt độ tối hảo cho vi khuẩn tăng trƣởng khoảng 35oC (RossellosMora và Amann, 2001), pH tối thích khoảng 7 nhƣng có thể sinh trƣởng ở pH 9 (van Niel và Allen, 1952) Một số dòng vi khuẩn Pseudomonas stutzeri có khả năng cố định đạm (Lalucat et al.,