Thăm dò khả năng kháng nấm trên chủng Candida albicans các bộ phận của cây ở các thời điểm khác nhau... Trước thực tế đó chúng tôi đã lựa chọn để nghiên cứu một trong số các cây thuốc na
Trang 1IỈỘ Y T Ễ
TRƯỜNG ĐẠĨ HỌC Dược IIẢ NỘI
GÓP PIIẨN NGHIÊN cứu ĐẶC «IỂ M I h ụ c v ậ t VÀc • <1
HOẠT TÍNH KHÁNG NẤM CỦA CÂY BẠCH HẠC
(RỉiỉNACANTHƯS NASUTƯS (L.) U N Ị) AIJ, ACANTHACEA E)
Ở VÙNG NÚI BA VÌ - VIỆT NAM
KHÓA LUẨN TỐT NGHIÊP D ư ơ c SỸ ĐAi HOC
1995-2000
Người thực hiện : sv ĩ)ỗ Đình Huy Người hướng clẫn : TS Nguyễn Thị Sinh Nơi thực hiện : Rộ môn Thực vật
Trường Đại học Dược Hà Nội Thời gian thực hiện: 03 / 2000 - 05 / 2000
Trang 2Tôi cũng xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo, kỹ thuật viên
Bộ môn Thực vật đã nhiệt tình giúp đd và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành khóa luận này đúng thời hạn.
Cuối cùng, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới toàn thể các thầy cô giáo, và cán bộ trong Trường về những giúp đỡ trong 5 năm học qua.
Hờ Nội, tháng 5 năm 2000
Sinh viên
Đỗ Đình Huy
Trang 3b Thăm dò khả năng kháng nấm trên chủng Candida
albicans các bộ phận của cây ở các thời điểm khác nhau
Trang 4Phần I : ĐẶT VẤN ĐỂ
Các bệnh nấm ở người trong vòng 20 năm trở lại đây phát triển mạnh
Đó là do điều kiện khí hậu của nước ta nóng ẩm, rất thích hợp cho sự phát triển của nấm Đồng thời còn do những tiến bộ trong y học như : Chiếu tia X, thay thế phủ tạng, sử dụng nhiều thuốc Corticoiđ, hóa trị liệu ung thư, do HI V Tuy nhiên, việc nghiên cứu các thuốc mới chữa nấm vẫn tiến triển rất chậm
Có những thuốc trị nấm từ những năm 40 đến nay, trải qua 60 năm vẫn được xem là chuẩn mực trong điều trị nấm
Trong khi đó, nước ta nguồn thuốc nam lại rất dồi dào, có nhiều cây thuốc được nhân dân ta sử dụng để chữa nấm rất phổ biến Trước thực tế đó chúng tôi đã lựa chọn để nghiên cứu một trong số các cây thuốc nam nliằm khẳng định giá trị chữa nấm đã được nhân dân ta quen dùng Đó là cây Bạch hạc, có tên khoa học : Rhinacanthus nasutus (L.) Lindau họ Ôrô Acanthaceae với các mục tiêu sau :
+ Mô tả đặc điểm cấu tạo hình thái và giải phẫu của cây Bạch hạc + Thử hoạt tính kháng nấm trên một sô chủng nấm bệnh.
+ Bước đầu so sánh khả năng kháng nấm bệnh vói một sô dạnẹthuỏc
tổng họỊ> chữa nấm p h ổ biến hiện nay.
Do thời gian quá ngắn, khóa luận còn nhiều vấn đề cần khảo sát, song chúng tôi cùng mong muốn được góp một phần nhỏ trong việc tìm kiếm và
bảo tồn nguồn tài nguyên làm thuốc ở nước ta.
Trang 5Phần I I : TỔNG QUAN
2.1 Bệnh nấm và các thuốc điều t r ị :
• Các nấm gây bệnh phổ biến khắp thế giới dù là có những loại phân bố
ưu tiên ở những vùng địa lý nhất định [ 17 ] Bệnh nấm ở người có thể ở mức
độ ngoài da hay trong da đến mức độ xâm nhập và lan tỏa
Trong vòng khoảng 20 năm trở lại đây, bệnh nấm đột ngột tăng lên chính do những tiến bộ trong y học Những bệnh này thường gặp nhiều ở những người có hệ miễn địch suy yếu (do ghép cơ quan, do hóa trị liệu ung thư, do HIV), người được điều trị bằng tác nhân kháng khuẩn có hoạt phổ rộng hoặc đã được dùng các phương pháp điều trị xâm nhập (đặt ống dẫn lưu hay những dụng cụ ngoại lai .) [ 17 ] Đến nay, những bệnh về nấm có tỷ lệ cao và là nguyên nhân gây tử vong quan trọng trong số bệnh nhân nhập viện Tần suất của bệnh nấm Candida tăng lên 10 lần và trở thành một loại quần thể phân lập được trong máu hay gặp thứ tư Bệnh nấm Aspergillus xâm nhập ở phổi là nguyên nhân chủ yếu gây tử vong ở bệnh íĩRân ghép tủy Trong khi đó, bệnh viêm phổi do Pneumocystic carinii là nguyên nhân gây tử vong ở nhiều
bệnh nhân AIDS ở Bắc Mỹ và ở Châu Âu Nhiều trường hợp nhiễm nấm cơ
hội không thể chẩn đoán được bằng phương pháp nuôi cấy máu thông thường
và chỉ được điều trị theo kinh nghiệm ở những bệnh nhân suy giảm miễn dịch
nghiêm trọng
Có rất nhiều chủng nấm gây bệnh trên người [13] ở ngoài da, ở ngoại
biên và ở nội tạng như : Microsporum, Epidermophyton, Trichophyton, Candida, Aspergillus, Histoplasma Tuy nhiên, bệnh nấm trên niêm mạc và bệnh nấm ngoài da phổ biến thường do 2 chủng Trichophyton và Candida
Bệnh nấm Candida gây bệnh ở người chủ yếu là loài Candida albicans.Candida là một loại nấm men ký sinh bình thường ở ống tiêu hóa của người, ở
2
Trang 6những người bình thường, khỏe mạnh có thể phát hiện thấy vi nấm trong miệng (30%), trong ruột (38%), âm đạo (39%), các nếp gấp ở hậu môn (46%), phế quản (17%)[ 13] Dạng sống của Candida chủ yếu là hoại sinh và do có sự
cân bằng hệ vi sinh vật đường ruột nên số lượng vi nấm ở đây rất ít Trong một
số điều kiện nhất định, vi nấm Candida có thể chuyển từ dạng sống hoại sinh sang dạng sống ký sinh và gây bệnh Các điều kiện thuận lợi cho vi nấm Candida gây bệnh là:
- Yếu tố sinh lý : Khi phụ nữ có thai, do có sự gia tăng các hormon nên dãn đến thay đổi môi trường ở âm đạo, cộng thêm sự duy giảm miễn dịch tạm thời khiến vi nấm có điều kiện phát triển hơn
- Yếu tố bệnh lý : Như mắc chứng đái đường, chứng béo phì, suy đinh dưỡng
- Yếu tố thuốc men : Do lạm dụng kháng sinh dùng không đúng quy định, dùng các loại Corticoid liều cao và lâu dài, các loại thuốc ức chế miễn địch, các thuốc điều trị ung thư, do HIV, cấy ghép cơ quan
Đãy là một bệnh nấm nội tạng có thể biểu hiện cấp tính hay mãn tính Các bộ phận tổn thương có thể là da, niêm mạc, máu, nội tâm mạc và màng não Bệnh Candida phổ biến khắp nơi trên thế giới, bệnh thuộc mọi lứa tuổi, mọi chủng tộc và ở cả 2 giới nam và nữ
Bệnh nấm Trichophyton ký sinh trên tóc, lông, da nhẵn, móng tay móng chân[13] Trichophyton mentagrophytes là một loại nấtn sợi gây bệnh ở
da khô, da mịn và các vùng khác trên cơ thể, nhất là tổn thương mưng mủ ở
lâu, ở da đầu, ở chânf 16] Ngoài ra có thể gây ra một số bệnh: Chốc đầu mưng
mủ, bệnh hắc lào, nấm bẹn, nấm móng
• Các thuốc trị nấm : Nấm có thể gây bệnh bên ngoài hoặc bên trong cơ thể
Do vậy, người ta chia các bệnh do nấm làm 2 loại :
- Bệnh nấm bề mặt (như nấm da, tóc, móng .)
- Bệnh nấm toàn thân (phế quản, phổi, ru ộ t )
Trang 7Dựa vào tác dụng của thuốc, người ta có thể chia thuốc trị nấm thành 2 nhóm: Nhóm 1 : Các thuốc chữa nấm bề mặt (Caprylat Na, Acid Ưndecyleic,
Econazol n itra t )Nhóm 2 : Các thuốc chữa nấm toàn thân (Ketoconazol, Amphotericin B,
Griseofulvin .)
Theo cấu trúc hóa học của các thuốc kháng nấm, người ta có thể chia các thuốc này thành các nhóm sau :
Nhóm 1 : Các thuốc chống nấm tổng hợp như : Các acid béo, các dẫn chất
acid thơm và phenol, các dẫn chất của Imidazol và Triazol
Nhóm 2 : Các kháng sinh chống nấm (Amphotericin B, Nystatin,
Candicidin )
Thuốc chống nấm đã được sử dụng trên lãm sàng chia làm 3 nhóm chất chủ yếu sau [17] : Các kháng sinh Polyen, các dẫn chất azoỉ, các Allylamin thiocarbarhat
• Cơ chế tác dụng của các thuốc trị nấm : VỊ trí tác dụng của các thuốc
gây chết tế bào Đối với các chất azol, nó có tác dụng diệt nấm ở nồng độ cao
4
Trang 8nhưng lại gây hại cho tế bào cơ thể Ớ nồng độ thấp, các chất này có tác dụng kìm hãm nấm Các azol [12] tác dụng chủ yếu vào sự sinh tổng hợp Ergosterol, nó có tác dụng ức chê các Enzym gắn ở màng tế bào nấm là : Các Cytochrome P450 Oxydase cần thiết cho sự Demethyl hóa của các 14a - methyl sterol bằng quá trình oxydase ; Cytochrome c - oxydase ở ty lạp thể và ATPase cần cho sự hô hấp của tế bào.
Các chất Aỉlylamin [17] ức chế enzym squalenepioxyđase dẫn đến kết quả là sự thiếu hụt ergosterol làm tổn hại đến cấu trúc màng và chức năng của
Ketoconazol [12] thuộc nhóm chất azol là thuốc trị nấm có hoạt phổ lộng và có hoạt lực mạnh đùng để điều trị một số bệnh nấm bề mặt đường tiêu
hóa và nấm toàn thân Ngoài ra còn được dìing để phòng bệnh nấm ở bệnh
nhãn bị suy giảm miễn dịch và phòng nấm ký sinh
2.2 Kliảo sát sơ bộ các cây thuốc có khả năng kháng nấm.
Các cãy thuốc có tác dụng kháng nấm tương đối phổ biến và có mặt ở
nhiều họ thực vật Theo các tác giả Đỗ Tất Lợi [7], Phạm Hoàng Hộ [6], Võ Văn Chi [3] và tài liệu của Viện Dược liệu, trong hệ cây thuốc Việt Nam có khoảng 59 họ và 131 loài thực vật có khả năng kháng nấm, trong đó có nhiều cây đã xác định được hoạt chất kháng nấm Ba họ thực vật có số loài có tác dụng kháng nấm nhiều nhất là :
- Họ đậu (Fabaceae) có 14 loài
- Họ thầu dầu (Euphorbiaceae) có 12 loài
Trang 9trong hai loài đó là Rhinacanthus nasutus (L.) Lindau được nhân dân ta sử dụng rộng rãi và là đối tượng chúng tôi khảo sát trong khoá luận này.
2.3 Cây Bạch hạc.
Cây Bạch hạc còn có tên gọi khác là : Kiến cò, cây Lác, Chòm Phồn (Nùng), Nam uy linh tiên Có tên khoa học Rhinacanthus nasutus (L.) Lindau họ Ôrô Acanthaceae [2,5]
Cây Bạch hạc là cây bụi, mọc hoang ở nhiều tỉnh miền Bắc nước ta Còn
9 rS
thấy mọc ở An Độ, Malaysia, Lào, Thái Lan, đông Châu Phi Có khi được trồng làm cảnh, hiện được trồng làm thuốc [3, 7, 21 ]
Bộ phận dùng là rễ tươi hny khô Rễ tươi mới đào bẻ đôi để một lúc lâu
sẽ có màu đỏ [I], Lớp vỏ ngoài lất dễ bong ra, có mùi hắc nhẹ, vị ngọt tựa mùi sắn rừng Ngoài ra, người ta còn dùng các bộ phận khác của cây để làm thuốc như : thân và lá Mùa thu hái dược liệu quanh năm, nhưng tốt nhất vào mùa đông [2, 3, 7]
Thành phần hóa học [4, 7] : Từ năm 1881 Liborius đã nghiên cứu bấy trong rễ cây này có 1,87% chất gần giống acid Cryzophanic và acid Frnngulic Tác giả cho đó là hoạt chất của cây và gọi là rinacantin C)4H l80 4 (theo Phnnn Zeitcho fur Russl) đây là một chất màu đỏ anh đào, không mùi, không vị, tan trong cồn và dung dịch kiềm, khi đun sôi với acid Clohydric không cho Glucoza
Tính vị, tác dụng [5, 14] : Cây có vị ngọt dịu, tính bình có tấc dụng chống ho, sát trùng, chống ngứa, trừ phong thấp
Thường dùng trị : Lao phổi khởi phát, ho, viêm phế quản cấp và mạn tính, phong thấp, tê bại, nhức gân đau xương, viêm khớp, huyết áp cao Liều dùng : 9-15 gam, dạng thuốc sắc [3]
Dùng ngoài trị bệnh V Ecpet mảng tròn, eczema, hắc lào, ngứa lở bằngcách lấy lá tươi giã đắp hoặc lấy nước rửa[5, 4], ở Trung Quốc [5], người ta dùng cành lá tươi sắc lên hòa thêm đường phèn uống chữa viêm phổi hay lao
6
Trang 10xơ nhiễm Lá tươi giã với dầu hỏa hay rượu dùng xát đắp chữa hắc lào và mẩn ngứa Nhân dân ta dùng rễ tươi ngñm rượu hay ngâm giấm 7 - 1 0 ngày chữa hắc lào, chốc lở hay eczema mạn tính Sau khi đã rửa sạch với nước nóng, có thể nấu thành cao để dùng[7] Rễ Bạch hạc còn được dùng để chữa phong thấp với tên Nam uy linh tiên phối hợp với Thiên niên kiện, Thổ phục linh, Tỳ giải,
Cỏ xước, Cẩu tích, Cốt toái bổ mỗi vị 10 - 15 gam sắc uống [5]
Lá tươi hay khô cây Bạch hạc [1] (5 cái) rửa sạch hãm với 50ml nước sôi trong 30 phút uống một lần để hạ huyết áp Viện Quân y 108 và bệnh viện Sùng Chính Thành Phố Hồ Chí Minh còn nấu lá Bạch hạc thành cao lỏng rồi cho uống liền trong 15 -3 0 ngày Người bệnh đùng cao lỏng này thấy dễ chịu hơn là dùng Reserpin Viện Y học Dãn tộc Đà Nẩng phối hợp lá cây Bạch hạc với rễ cây Xấu hổ, lá Vú sữa, cỏ Mần trầu, rễ Nhàu hay thân lá Dừa cạn với liều lượng bằng nhau nấu nước uống hàng ngày để chữa cao huyết áp Cứ sau
10 ngày đi kiểm tra lại một lần
Tuy nhiên, cũng chưa có một cơ sở nào nghiên cứu về tác đụng trị nấm ngoài da một cách chi tiết của cñy này, mặc dù trong dân gian nhắc đến tên cñy này hầu như ai cũng biết đó là cây thuốc trị nấm
Trang 11Phần III : THỤC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ
3.1 Nguyên liệu và phương pháp.
3.1.1 Nguyên liệu.
• Cây Bạch hạc Rhinacanthus nasutus (L.) Lindau, Acanthaceae mọc hoang
ở nhiều tỉnh phía Bắc nước ta Trong phần thực nghiệm này cây Bạch hạc được chúng tôi chọn để nghiên cứu lấy ở xã Ba Vì, huyện Ba Vì, tỉnh Hà
Tây Bộ phận để nghiên cứu : Toàn cây mang hoa
• Chủng vi sinh vật kiểm định : Chúng tôi chọn :
- Trichophyton mentagrophyt.es (mẫu của Viện Da liễu - Bệnh viện Bạch Mai)
- Candiđa albicans (Mẫu của tổ môn Vi nấm - Kháng sinh Trường Đại học Dược Hà Nội)
• Môi trường : Chúng tôi sử dụng môi trường Sabouraund :
Pepton 1,0 %Glucose 2,0 %
• Mô tả đặc điểm hình thái : Quan sát cãy tại nơi mọc, mô tả hình thái, chụp
ảnh cây, cành mang hoa và lá
• Phân tích hoa : Xem xét cấu tạo đầy đủ một hoa, xác định kích thước hoa
và các bộ phậnkhác của hoa dưới kính hiển vi soi nổi
8
Trang 12• Vi phẫu rễ, thân, lá : c ắ t vi phẫu rễ, thân và lá của cây Tiến hành nhuộm kép theo tài liệu [10] Quan sát đặc điểm vi học, vẽ chi tiết một phần vi phẫu rễ, thân, lá qua kính hiển vi (qua vật kính 40).
lì Phương pháp điểu chê các dịch nguyên liệu [8,9,11 ]
Dịch ép tươi : Các bộ phận của cây sau khi rửa sạch để ráo nước Tiến hành giã nát ép lấy dịch lỏng lọc qua bông (phần thân được sử dụng để ép lấy dịch là phần thân non)
• Dịch ngâm giấm : Dược liệu tươi thân, rễ, lá rửa sạch, để ráo Chia nhỏ, dùng cối giã dập ngâm trong dung dịch acid Acetic 5% với tỷ lệ Dược liệu: Dung môi = 1: 5 Sau 7-10 ngày (thỉnh thoảng lắc để cho hoạt chất phân tán đều) Ta đem ép và lọc lấy phần dịch chiết để sử dụng
* Nước sắc : Dược liệu thân, rễ, lá được cắt nhỏ cho vào dụng cụ sắc đổ ngập
nước (30 gam dược liệu / ÍOOml nước) Tiến hành đun nhỏ lửa 30 - 60 phút
gạn lấy nước sắc để làm thí nghiệm
* Cao lỏng : Dược liệu tươi, thân, rễ, lá sau khi cắt nhỏ giã đập, ngổm trong cồn 70° với tỷ lệ Dược liệu : Dung môi = 1 : 5 Sau 7-.1 0 ngày gạn ép lọc
ta thu toàn bộ dịch ngâm sau đó ta đem cô bằng cách đun cách thủy để được cao lỏng có tỷ lệ Dược liệu : Dung môi = 1 : 1 (g/ml)
* Pha dung dịch Ketoconazol í % : Dùng cồn 70° để pha chế dung dịch
Ketoconazol 1% theo công thức :
Ketoconazol [%
Cồn 70° vừa đủ
c Phương pháp thủ tác dụng kháng nârn của cây.
Chúng tôi sử dụng phương pháp đục lỗ trên đĩa thạch đặc để thử tác dụng kháng nấm của cây Bạch hạc [9,15]
• Nguyên tắc : Trên lớp thạch dinh dưỡng đã cấy vi sinh vật kiểm định ta cho dịch thử vào các lỗ thạch (đã được đục) Trong thời gian nuôi cấy, hoạt chất kháng vi sinh vật sẽ khuếch tán trên lớp thạch ức chế sự phát triển của
9
Trang 13vi sinh vật kiểm định để tạo thành vòng vô khuẩn, vòng vô khuẩn càng lớn chứng tỏ hoạt tính càng lớn.
- Chuẩn bị đĩa thạch và thử hoạt tính : Môi trường ở bình nón sau khi
tiệt trùng để nhiệt độ giảm xuống còn khoảng 40-50°, đượcphân tán vào các hộp lổng 2 lần Lần I : Lượng môi trường đổ vào hộp khoảng 10ml để làm lớp nền Sau khi lớp nền đông lại, tiếp tục đổ thêm khoảng 20ml nữa Để thạch đông lại dùng ống đục lỗ ((ị) « 0,8 cm), đục trên đĩa thạch 3, 4, 6 lỗ tuỳ theo yêu cầu thí nghiệm và để khô mặt thạch
Trang 14Nhỏ vào mỗi đĩa thạch Iml dung dịch treo bào tử nấm, láng đều Sau đó cho vào các lỗ thạch đã được đục 0,lm l dịch thử Đât toàn hộ các (fia thạch này vào tủ lạnh để địch thử khuyếch tán Nuôi cấy ở nhiệt độ 28 - 30° c và theo dõi theo thang thời gian 24 h, 48 h và 72 h.
Hình I : Sơ đồ đục lỗ của 1 dịch cần thử
*
Hình 2, Hình 3 : Sơ đổ đục lỗ so sánh tác dụng của các dịch Ihử khác
nhau
• Đánh giá hoạt tính kháng nấm : Hoạt tính kháng nấm được đánh giá bằng
độ lớn của vòng vỏ khuẩn trên đĩa thạch Các số liệu đã được xử lỷ bằng phương pháp thống kê
nhẫn, mặt Uüó'i hơi có lông
mill, cụm Hoa nhỏ màu
trắng, hơi điểm hồng hình
xitn ở kẽ lá hay đẩu cành non
như đàn hạc đang bay nên
gọi là cây Bạch hạc Quả
nang có lông, phía dưới dẹp
không chứa hạt, phía trên có
2 - 4 hạt Hạt hình trứng Ảnh ì : Cây Bạch học mọc hoang ở Ra 17
Trang 15Phân tích hoa : Hoa mọc
thành chùm ở ngọn, lá bắc
hình chỉ có lông dài khoảng
1-5 mm Đài 5 hình chỉ có
lông, gần đều nhau rời từ gốc
có màu xanh dài 4,5 rnm
Tràng màu trắng, hơi điểm
hổng ống tràng dài có rất
nhiều lông, trên ống tràng có
hình các sợi dọc, ống tràng
dài khoảng 26 mm, rộng 1,8
min Phía liên tràng xẻ 2 môi
khác nhau rõ rệt, môi trên
nhỏ hình mác khía làm 2
tlùiv, môi dưới to khía làm 3
thùy Hai nhị đính vào ống
tràng, chỉ nhị ngắn khoảng Ánh 2 : Cành mang hoa của cây Bạch hạc
4mm bao phấn 2 ô tù, không có nhị lép Hoa mang báu trên 2 lá noãn, bàu cao khoảng 1,7 mm Nhụy hoa đài khoảrtg 2.1 mm
• Cấu tạo giải phẫu rễ cây : Lát cắt ngang rỗ có tiết diện hình tròn Ngoài cùng là lớp biểu bì Mô mềm vỏ khá dày với 2 - 3 lớp tế hào ở ngoài xếp
đều đặn, các lớp ở trong tê bào to hơn xếp không sít nhau đổ hở nhiều
khoảng gian bào Có thể thấy rõ vòng tế bào nội bì và trụ bì xếp xen ke nhau rải rác có các tế bào đá Hệ (hống dẫn xếp liên tục quanh trục, phía ngoài gồm 4-5 lớp tế bào Libe hình đa giác đều đặn, phía trong là bó gỏ gồm một số mạch gỗ nằm rải rác, đặc biệt mô mềm gỗ có màng rất dày xếp đều đặn thành dẫy từ ngoài vào Trong cùng là mô mềm một chiếm ty
12
Trang 16lệ nhỏ so với toàn bộ tiêu bản (Hình 4) với nhiều tinh thể canxi oxalat nằm trong tế bào.
• Đặc điểm cấu tạo giải phẫu thân cây : Thân cây với lát cắt ngang có tiếtdiện hình đa giác với 6 góc lồi đều đặn Ngoài cùng là lớp biểu bì gồm những tế bào hình chữ nhật xếp sít nhau Phía trên có một lớp cutin mỏng
Ở những chỗ lồi của thân tập trung nhiều lớp tế bào mô dày với các góc dày lên rõ rệt có thể nhìn thấy cả vân tăng trưởng Mô mềm vỏ gồm nhiều lớp tế bào đa giác, không đều, xếp lộn xộn, để hở nhiều khoảng gian bào
và có nhiều tinh thể canxi oxalat nằm rải rác; Vòng tế bào nội hì chỉ có một lớp xếp xen kẽ với lớp trụ bì Các hổ libe gỗ nằm riêng rẽ, phía trên là libe gồm 3 - 4 lớp tế bào nhỏ bắt màu hổng sẫm, được ngăn cách với bó gỗ bằng 2-3 lớp lế bào có màng mỏng xếp sít nhau, đó là tầng phát sinh libe
gỗ cấp 2 Bó gỗ gồm nhiều mạch gỗ nhỏ nằm xen kẽ với mô mềm gỗ có màng dày và bắt màu xanh Trong cùng là mô mềm ruột khá lớn với những
tế bào đa giác to xếp lộn xộn (Hình 5)
• Đặc điểm cấu tạo giải phẫu lá cây : Cấu tạo lá cây được chia làm 2 phần :
Phần gân lá và phần phiến lá Gân lá lồi đều lên cả phía trôn và phííí
dưới Ngoài cùng là lớp tế bào biểu bì ít khi thấy có lỗ khí Dưới biểu bì là mô dày góc gồm nhiều lớp tế bào ở một số lá già, mô day phía trên không tao thành một cung liên tục mà chia thành 2 đám ở 2 phía, ở giữa là mô mềm Đặc biệt, dưới lớp *TIÔ dày cổ một hàng mô dậu chạy liên tục từ phiến lá sang Tiếp đến là mô mềm vỏ Rất ít khi nhìn thấy các tế hào mô cứng ở đây Hệ thống dẫn gồm có 3 bó libe gỗ, bó lớn ở giữa, 2 bó nhỏ 2 bên nhưng gần như xếp liền nhau và thường libe ở phía dưới, gỗ nằm ở phía trên tạo thành một hình cung Phần phiến lá không có gì đặc biệt, ngoài cùng là biểu bì, lỗ khí lập trung nhiều ở biểu bì dưới Có I -2 lớp tế bào mô dậu nằm ngay dới lớp hiểu
bì trên, tiếp đến là mô xốp với nhiều khoảng gian bào (Hình 6)
13
Trang 18Hình 5: Cấu tạo chi tiết một phần vi phẫu thân cây
4 Tinh thể canxi oxalat 10 Mạch gỗ
15