Góp phần nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh từ streptomyces 21 123

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI m HOÀNG THỊ HỔNG CẨM GÓP PHẦN NGHIÊN cứu SINH TổNG HỢP KHÁNG SINH T ừ STREPTOMYCES 21.123 (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC sĩ KHOÁ 2001 - 2006) Người hướng dẫn: PGS.TS Cao Vãn Thu. Nơi thực hiện: Bộ môn Vi sinh - Sinh học. Trường Đại học Dược Hà Nội Thời gian thực hiện 2 - 5/2006. HÀ NỘI, THÁNG 5/2006 KL^jù2^ £ Ờ 3 ^ © c  M ( ỹ ì l ^Đầu tỉỀn tồ ỉ ætn íùiụ. ÌẦ i&nfj, h ỉê í fi*t ehătL t h à n h tìà iíì u ếMC itèn tk ầ ụ ạ ìá ii ^ aơ ('Oătt ^hiMr n ự itò ỉ thầụ . ỉtã irưtt t ìỉ ịt h ư ổ n ạ đ ẫ n tồ i t h u ’e hiÌM ũĩt Ịttìàn Ih àn h U iìú á lu ậ n nttụ,. Ç îê i æ in eh tìn th ù n k etíJtt íờt ^ hS- O tạM ụễ n ^Đình Măiựền. — mÄ*t ^ĩmạ^ n g h iỊệ i ^ưỢ4Lf Q íạ iíự ỉt i OụoMạ^ ^ ạ l — m ô n '3ỉ)ữu etỉ itá lă n tìn h g jú fi it ĩi i i h e à n th à n h k h o ú iu ả n n à ụ , Ç îê i æin ựủ'l í è i etỉm tổ i eắíi ihẵtỊ, eồ qiAtì^ oán Ịĩê kíỊ th u ậ t tĩiên đ a n ạ ạ iả ttụ doij^^ ià n t OÌẾẨÍ t a i bA m ồ n tt^fhiê^ ^Oứiỉe, hê n tôn 'Jùoá h ữ u f(íf, ỉm mú4t íT^i* s itih -S in h twe o il ^ h ò * iạ . t h í »tạ hiĩnt tắ m đ ã ụ ỉÚ Ịi ĩtẽ' t ô i irfttig th ồ i ạ iu n là m thựA ttạh lè m . Q th íìn dịp, HÙự t ồ i >0^1» ạ ử i iồ'i eấm tĩrt đếtt (B an ạ ỉÁ n t h iỀ ií eitnụ tũ iin ÌhỀ thầ ụ . eA ạJá ti t^ưòHq. ^ ạ i "^€Uỉ lỉf)à Q iệ i đ ã ta ơ đ iề u kiê n th u ậ n l ờ i ehjfi tồ ì ÍF^utq. iẦiết th ò i q ia n ỉt!Ỡíf táp, t ạ i ÇJêi æin Ịùtự. tẨ iồnq , h ỉỉ í ifn tẫ i q ia đ ìn h , h a n h ỉ ĩtã ụ lÚ Ịi ú ìi ủnạ. h ộ t ô i tm n ạ it t ứ t h à i ạ itm thự ít h ì in k h tìá lu ậ n . ^ )ê i íh ở i ffiart thư n ttạ h ỉỉiv t ũé han^ eh ẳií eh ắn U ltoá lu â n eĂM n hiề u th iê u iM . ÇÎÂi r ú i ntũnụ^ đ ư ốíí i ư ợép, ụ. eủa ih tìụ . ỊuLn h i đầềtạ. nụhÌỀặi ¿tề k h oă íutÌH hfiù n tít iỉn Ufỉ*t. Ç îà i ætn tfhùn fh íin it eảtn tín. 'JÔCL Qtệi^ *iụÁỊf. 19 tháng. 5 năm 2006. S in h oiiềt. 'Xíoănạ. '^ềnjạ. ^ẩền. MỤC LỤC Trang Đạt vẩn đ é 1 PHẨN 1 : TỔNG Q U A N 1 1.1. Đại cương về kháng sinh 2 1.1.2. Phân loại kháng sinh 2 1.1.3. Cơ chế tác dụng của kháng sin h 2 1.1.4. ứng dụng của kháng sinh 3 1.2. Đạỉ cương về xạ khuẩn 4 1.2.1. Lớp xạ khuẩn (Actinomycetes) 4 1.2.2. Đặc điểm xạ khuẩn chì Streptomyces 5 1.3. Tuyển chọn, cải tạo và bảo quản giống xạ khuẩn 6 1.3.1. Chọn chủng có hoạt tính cao bằng phép chọn lọc tự n hiên 6 1.3.2. Đột biến cải tạo giống xạ khuẩn sinh kháng sinh 6 1.3.3. Bảo quản giống xạ khuẩn 7 1.4. Lên men sinh tổng hợp kháng sinh 8 lA l. Giống v s v 8 1.4.2. Lên men 8 1.5. Chiết, tách và tinh chế kháng sinh từ dịch lên m en 9 1.5.1. Chiết x uất 10 1.5.2. Tách sản phẩm 10 1.5.3. Tinh chế 11 1.6. Quang phổ hồng ngoại (IR) 12 1.7. Một sô nghiên cứu mới về kháng s in h 12 PHẨN 2: THỰC N GHIỆM VÀ K ẾT Q U Ả 15 2.1. Nguyên vật liệu và phương pháp thực nghiệm 15 2.1.1. Nguyên vật liệu 15 2.1.2. Các phưcttig pháp thực nghiệm 18 2.2. Kết quả thực nghiêm và nhận xét 24 2.2.1. Kết quả chọn lọc ngẫu nhiên 24 2.2.2. Kết quả đột biến cải tạo giống lần 1 25 2.2.3. Kết quả đột biến cải tạo giống lần 2 27 2.2.4. Kết quả lên men sinh tổng hçfp kháng sin h 29 2.2.5. Ảnh hưởng của nhiệt độ đến độ bền vững của kháng sinh 31 2.2.6. Kết quả chiết xuất kháng s in h 31 2.2.7. Kết quả sắc ký lớp mỏng 32 2.2.8. Kết quả kiểm tra sự biến đổi của bột kháng sinh th ồ 33 2.2.9. Kết quả sắc ký lỏng trên cột 34 2.2.10. Kết quả kiểm tra sự biến đổi của kháng sinh đã tinh ch ế 35 2.2.11. Kết quả xác định nhiệt độ nóng chảy của kháng sinh đã tinh chế 38 2.2.12. Kết quả phân tích phổ hổng ngoại 38 PHẨN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ X UẤT 39 3.L K ết luận 39 3.2. Đề xuất 40 TÀI LIỆU TH AM KHẢO. PHẦN PH Ụ LỤC, ADN ARN B.subtilis P. mirabilis £)(mm) Gr(-) Gr(+) KS MT MT dd PL PTL s SKLM v s v CHÚ G IẢI CHỮ V IÊT TẮT Acid deoxyribonucleic. Acid ribonucleic. Bacillus subtilis ATCC 6633. Proteus mirabilis BV 108. Đường kính trung bình vòng vô khuẩn. Gram âm. Gram dương. Kháng sinh. Môi trường. Môi trường dung dịch. Phần phụ lục. Phân tử lượng. Độ lệch thực nghiêm chuẩn đã hiệu chỉnh. Sắc ký lớp mỏng. Vi sinh vât. ĐẶT VÂN ĐỂ « Việc phát hiện ra kháng sinh đánh dấu một bước ngoặt to lớn đối với đời sống con người ở thế kỉ 20, Trong y học kháng sinh được xem như là “thần dược ” giúp cho nhân loại thoát khỏi các vụ dịch, các bệnh nhiễm trùng hiểm nghèo. Một số kháng sinh còn được sử dụng rất hiệu quả trong nhiều ngành kinh tế khác và trong nghiên cứu khoa học. Song do nhiều nguyên nhân khác nhau nên hiện nay nhiều chủng vi khuẩn gây bệnh đã kháng lại kháng sinh, cho nên những kháng sinh kinh điển không còn tác dụng đối với một số bệnh nhiễm trùng nữa. Do đó, việc nghiên cứu tìm ra các kháng sinh mới bổ sung tác dụng, thay thế kháng sinh cũ không còn tác dụng nữa là rất cần thiết. Các kháng sinh có thể có nguồn gốc khác nliau như từ xạ khuẩn, nấm, vi khuẩn, trong đó chủ yếu có nguồn gốc từ xạ khuẩn. Từ các chủng xạ khuẩn thuộc chi Streptomyces các nhà khoa học đã phát hiện ra nhiều loại kháng sinh có hiệu quả cao trong điều trị. Hiện nay việc nghiên cứu xạ khuẩn, nhất là chi Strepĩomyces để tạo ra kháng sinh luôn thu hút sự quan tâm của cấc nhà khoa học thuộc các lĩnh vực khác nhau. ở Việt Nam, nghiên cứu Strepíomyces đang được tiến hành một cách rộng rãi nhằm phục vụ cho việc tìm kiếm những kháng sinh mới. Do đó chúng tôi chọn đề tài : “ Góp phần nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh từ Streptomyces 21.123 ” với những mục tiêu sau; - Nghiên cứu cải tạo giống nhằm nâng cao hiệu suất sinh tổng hợp kháng sinh, - Bước đầu xây dựng quy trình chiết tách và tinh chế kháng sinh, - Xác định một số tính chất vật lý của kháng sinh do Streptomyces 2Ỉ.Ỉ23 sinh tổng hợp, - Sơ bộ dự đoán một số nhóm chức trong cấu Irúc phân tử của kháng sinh đo Streptomyces 2Ỉ.Ỉ23 sinh tổng hợp. PHẦNl TỔNG QUAN 1.1. ĐẠI CƯƠNG VỂ KHÁNG SINH: 1.1.ỉ. Định nghĩa kháng sinh [9],[10]. Kháng sinh là những sản phẩm đặc biệt nhận được từ vi sinh vật hay các nguồn tự nhiên khác có hoạt tính sinh học cao, có tác dụng kìm hãm hoặc tiêu diệt một cách có chọn lọc lên một nhóm vi sinh vật xác định (vi khuẩn, nâừn, nguyên sinh động vật v.v ) hay tế bào ung thư ở nồng độ thấp. 1.1.2. Phân loại kháng sinh [3],[4],[10]. Có thể phán loại kháng sinh theo nguồn gốc (kháng sinh do xạ khuẩn, vi khuẩn, nấm) tạo ra; theo cơ chế tác dụng (kháng sinh lác dụng lên thành tế bào, lên tổng hợp protein, tổng hợp ADN, ARN v.v ) và phân loại theo cấu trúc hoá học. Phân loại kháng sinh theo cấu trúc hoá học là khoa học nhất, gồm các nhóm: - Nhóm beta lactam. - Nhóm aminoglycosid (aminosid). - Nhóm macrolid. - Nhóm lincosamid. - Nhóm phenicol. - Nhóm letracyclin. - Nhóm peptid. - Nhóm quinoỉon. - Nhóm co-trimoxazol. - Các kháng sinh khác: Riíamicin, kháng sinh chống nấm, chống ung thư. 1.1.3, Cơ chế tác dụng của kháng sinh: [3]. Các kháng sinh thường tấc dụng lên vi khuẩn theo các cơ chế sau: - Úc chế tổng hợp vách tế bào vi khuẩn. - ức chế tổng hợp protein của vi khuẩn. - Úc chế tổng hợp acid nhân. - Thay đổi tính thấm của màng. - Kháng chuyên hoá (úc chế tổng hợp acid folic). - Úc chế trao đổi chất hô hấp. 1.1.4. ứng dụng của kháng sinh [1],[2],[9],[10], ❖ ứng dụng kháng sinh trong lĩnh vực y học: Trong lĩnh vực ỵ học, kháng sinh được sử dụng phổ biến để điều trị các bệnh nhiễm khuẩn hiểm nghèo. Từ nửa cuối thế kỷ 20, với sự phát minh ra vaccin và đặc biệt là kháng sinh, là vũ khí hữu hiộu tiêu diệt các vi khuẩn, virus, tuổi thọ của con người đã tăng từ 35 lên đến khoảng 70 tuổi. Do đó, viộc sử dụng các chất kháng sinh vào y học để phòng và điều trị các bệnh nhiễm trùng có ý nghĩa thực tiễn lớn hcm bất kì một ứng dụng nào khác. ❖ ứng dụng kháng sinh ngoài ỉĩnh vực J học: - Kháng sinh dùng trong chăn nuôi: + ứng dụng kháng sinh để điều trị các bệnh đo v s v gây ra cho động vật. Kháng sinh griseoviriđin dùng điều trị bệnh viêm phổi cấp, viêm vú của trâu, bò. + Kháng sinh còn được sử dụng làm chất kích thích tăng trọng cho đàn gia súc, gia cầm, giảm chi phí thức ăn; kích thích tăng sản lượng trứng ở gà, vịt. Mỹ, các nước Tây Âu và Nhậl dùng bacitracin, flavomycin, avoparxin, monenzin làm chất kích thích tăng trọng. - Kháng sinh dùng trong trồng trọt: Kháng sinh dùng để tiêu diệt nấm và vi khuẩn gây bệnh cho cây trồng như bệnh khô vằn, vàng lụi ở lúa (vandimycin, blasticidin, kasugamycin, v.v ) Kháng sinh còn kích thích nảy mầm của hạt. Thưòíng ngâm hạt trong dung dịch kháng sinh trước khi gieo vừa để kích thích nảy mầm, vừa tiêu diệt mầm bệnh có trong hạt. Có thể phun dung dịch kháng sinh cho cây trồng đang bị bệnh, hoặc trộn các v s v sinh kháng sinh vào trong đất để tiêu diệt mầm bệnh có trong đất. - Kháng sinh dùng trong công nghiệp thực phẩm: Dùng kháng sinh trong thực phẩm đóng hộp sẽ bảo quản được lâu hơn, khử trùng ở nhiệt độ thấp hơn nên chất lượng thực phẩm giữ được tốt hcm. Kháng sinh lisin thường được dùng để bảo quản thực phẩm đóng hộp như cà chua, đậu xanh, bắp cải, và các loại rau khác và đặc biệt là phomat. 1.2. ĐẠI CƯƠNG VỂ XẠ KHUẨN: 1.2.1. Lớp xạ khuẩn {Actínomycetes) [6],[7],[13]. > Đặc điểm chung: Xạ khuẩn là một nhóm vi khuẩn thật {Eubacíerìa), phân bố rất rộng rãi trong tự nhiên. Phần lớn xạ khuẩn là các tế bào Gram(+), hiếu khí, hoại sinh, phát triển tốt ở nhiệt độ 24-32^’C. Xạ khuẩn có khả năng sản sinh nhiều sản phẩm trao đổi chất quan trọng như: kháng sinh, enzỵm, một số vitamin và acid hữu cơ. Phần lớn xạ khuẩn không gây bệnh cho người và động vật. > Đặc điểm hình thái của xạ khuẩn: Xạ khuẩn phát triển ờ dạng sd nhỏ, dài, phân nhánh gọi là khuẩn ty. Hệ sợi của chúng chia thành khuẩn ty cơ chất và khuẩn ty khí sinh. Loại khuẩn ty không mang bào tử gọi chung là khuẩn ty dinh dưỡng. Khuẩn ty của xạ khuẩn không có vách ngăn và không tự đứt đoạn, màu có thể là tráng, vàng, da cam, đỏ, hoặc tím nâu, đen Khuẩn ty cơ chất có thể tiết ra môi trường một số loại sác tố có thể tan trong nước hoặc chí tan trong dung môi hữu cơ. Khuẩn ty cơ chất phát triển một thời gian thì dài ra trong không khí thành khuẩn ty khí sinh. Sau một thời gian trên đỉnh khuẩn ty xuất hiện các sợi bào tử có thể có nhiều hình dạng : thẳng, lượn, sóng, mọc đcm, mọc vòng Một số xạ khuẩn có sinh nang bào tử bên trong có chứa các bào tử nang. Khuẩn lạc của xạ khuẩn không trơn ướt mà có dạng thô ráp, dạng phấn, khồng trong suốt, có các nếp toả ra theo hình phóng xạ, Đặc điểm cấu tạo tế bảo: - Thành tế bào: dạng lưới, dày khoảng 10-12cm. - Màng tế bào chất: chủ yếu là phospholipid và protein, dày 7,5-10 nm. - Mezosom: hình phiến, hình bọng hay hình ống. - Các thể ẩn nhập trong tế bào chất :gổm các hạt polyphosphat, các hạt polysaccarid. 1.2.2. Đặc điểm xạ khuẩn chi Streptomyces [6],[7]^[19]. > Đặc điểm hình thái: Có các đạc điểm của hình thái lớp xạ khuẩn Actinomycetes ở trên. > Đậc điểm sinh ìỷ: Streptomyces ỉà v s v dị dưỡng, nguồn cacbon thường dùng là đường, tinh bột và nhiêu chất hữu cơ khác; nguồn nitơ hữu cơ là protein, pepton, cao ngô, cao nấm men; nguồn nitơ vô cơ ỉà nitrat, muối amoni, Khả năng đổng hoá ở các loài khác nhau là khác nhau. Strepĩomyces là loài xạ khuẩn hô hấp hiếu khí. Nhiệt độ tối im của chúng ihường là 25‘*c - 30^’c, một số loài có thể mọc tốt ở nhiệt độ cao hơn, pH tối ưu thường tù 6,8 - 7,5. > Khả nãng tạo sắc tố: sắc tố được tạo thành từ Streptomyces được chia làm 4 loại: sắc tố hoà tan, sắc tố của khuẩn ty khí sinh, sắc tố của khuẩn ty cơ chất và sắc tố melanoid. > Pháìi h ại Streptomyces: Hội nghị vi sinh vật thế giới lần thứ 10 được tổ chức tại Mêxicô vào năm 1970 chọn khoá phân loại của E.B Shirling & D.Gottlieb làm khoá phân loại chính để phân loại chi Sírepĩomyces và đặt tên là Internationa! Síreptomyces Project (ISP). Khoá phân loại này dựa trên các đặc điểm: [...]... lẽn men sinh tổng hợp kháng sinh : > Kết quả chọn môi trường lên men tốt nhất: Trong công nghệ lên men ngoài các yếu tố như nhiệt độ, áp suất, tốc độ khuấy trộ n thì môi trường lên men cũng có ảnh hưởng mạnh đến hiệu suất sinh tổng hợp kháng sinh Do đó chúng tỏi khảo sát khả năng sinh tổng hợp kháng sinh của Streptomyces 2 ỉ ỉ 23 trên các môi trường lên men khác nhau Đánh giá hoạt tính kháng sinh ciia... thời gian xác định 1.5 CHIẾT, TÁCH VÀ TINH CHẾ KHÁNG SINH TỪ DỊCH LÊN MEN:[5],[11],[14] Kháng sinh là sản phẩm trao đổi thứ cấp, đo đó kết thúc quá trình lên men kháng sinh có thể nằm trong sinh khối hoặc trong dịch lên men đồng thời có thể có nhiều thành phần kháng sinh khác nhau và bị lẫn nhiều tạp chất khác Vì vậy, cần phải chiết tách để lấy kháng sinh linh khiết 1.5.1 Chiết xuất: Định nghĩa: Chiết... của kháng sinh Hoạt lực kháng sinh Kết quả p mirabais %biến D đổi hoạt (mm) B.subtiỉis %biến D đổi hoạt (mm) tính tính Đun sôi 18,03 0,12 93,96 18,93 0,51 101,28 Đun sôi cách thuỷ 30 phút 19,45 0,81 101,35 19,22 0,19 102,84 19,19 0,57 100,00 18,69 0,49 100,00 Dịch lọc (chứng) ỉ^hận xét: Hoạt tính kháng sinh do chủng Streptomyces 21. 123 sinh tổng hợp khá bền vững với nhiệt độ 2.2.6 Kết quả chiết xuất kháng. .. chế nhảy sinh tổng hợp chuỗi polyketid đối với các modul PKS PHẦN 2 THựC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THựC NGHIỆM: 2.1.1 Nguyên vật liệu: > Giống xạ khuẩn : Chủng xạ khuẩn Sírepiomyces 21. 123 đã được phân lập và tuyển chọn có khả năng sinh tổng hợp kháng sinh, phổ tác dụng rộng trên vi khuẩn, cố đặc tính di truyền ổn định Chủng giống Síreptomyces 2 L Ỉ2 3 do Bộ môn Vi sinh- SÌnh... cấy và giữ giống: Giống Streptomyces 2 Ị 123 được cấy trên ống thạch nghiêng M Tl, ủ cho phát triển ở 30”c , trong 7-10 ngày Giống Streptomyces 21. 123 sau khi phát triển được cất giữ trong tủ lạnh định kỳ 3-6 tháng cấy truyền > Dánh giá hoạt tính kháng sinh bằng phương pháp khuyếch tán: Nguyên tắc Mẫu thử được đưa lên lớp thạch dinh dưỡng đã cấy vi sinh vậi kiểm định Kháng sinh từ mẫu thử sẽ khuyếch... mới có thể làm tăng hoạt tính một cách đáng kể Ngoài ra, đột biến còn nhằm mục đích tăng hiệu suất sinh tổng hợp kháng sinh; cải tạo các đặc tính lên men theo chiều hướng tốt hơn, rút ngắn thời gian lên men, ít tạo bọt hcfn ;chỉ sinh tổng hợp một sản phẩm để chiết tách, tinh chế thuận lợi hơn; sinh tổng hợp được các sản phẩm mới, tạo các liên kết mới, nhóm chức mới Tác nhân gây đột biến có thể là hoá... của kháng sinh sau khi cất chân không và kiểm tra sự tinh khiết về mặt sắc ký của kháng sinh > Dự đoán một sô' nhóm chức trong cấu trúc phản tử của kháng sinh bằng ■ phố hồng ngoại(IR): Bột kháng sinh đã tinh chế sau khi xác định là đã tinh khiết sắc ký, đem ghi phổ hồng ngoại Dựa trên các pic thu được ta dự đoán các nhóm chức trong phân tử kháng sinh thu được > Xác định nhiệt độ nóng chảy của bột kháng. .. 28,25 0,94 131,64 123, 94 27,44 0,45 127,87 26,25 0,34 0,65 131,96 27,55 27,95 0,36 128,38 27,98 0,93 132,11 26,17 1,43 121, 95 130,83 28,01 27,71 0,40 0,30 130,52 130,17 27,57 0,56 128,47 27,57 0,77 128,99 27,25 27,32 0,32 0,34 126,98 26,87 0,81 126,86 27,30 0,90 127 ,21 21,18 0,94 100,00 21, 46 0,80 100,00 Nhận xét: Các biến chủng 3.7, 3.12, 3.25 có % biến đổi hoạt tính sinh tổng hợp kháng sinh cao được... 1,13 105,5 28 ,21 0,90 102,4 28,75 0,35 104,4 27,55 0,30 100,0 Nhận xét: Sau khi tiến hành đột biến cải tạo giống lần 2, chúng tôi thấy các biến chủng 3.7.19, 3.7.20, 3.7.23 có % biến đổi hoạt tính cao, có khả năng trở thành những giống tốt để lên men sinh tổng hợp kháng sinh Biểu đổ hình 2 thể hiện sự liên hệ giữa tần suất xuất hiên và %biến đổi hoạt tính kháng sinh của Strepíomyces 21. 123 sau đột biến... chứa kháng sinh cần tách: Hoạt tính kháng sinh của các phân đoạn được kiểm tra bằng phưcíng pháp khoanh giấy lọc Các phân đoạn có hoạt tính kháng sinh được đem chấm lên các bản mỏng đã được hoạt hoá để tiến hành SKLM với hệ dung môi mà tách tốt nhất đã nghiên cứu trước Phân đoạn chính được xác định từ khi bắt đầu xuất hiện vết đến khi không còn vết có R, tương ứng với mẫu chứng và vẫn có hoạt tính kháng . việc tìm kiếm những kháng sinh mới. Do đó chúng tôi chọn đề tài : “ Góp phần nghiên cứu sinh tổng hợp kháng sinh từ Streptomyces 21. 123 ” với những mục tiêu sau; - Nghiên cứu cải tạo giống nhằm. của kháng sinh đo Streptomyces 2Ỉ.Ỉ23 sinh tổng hợp. PHẦNl TỔNG QUAN 1.1. ĐẠI CƯƠNG VỂ KHÁNG SINH: 1.1.ỉ. Định nghĩa kháng sinh [9],[10]. Kháng sinh là những sản phẩm đặc biệt nhận được từ. CẨM GÓP PHẦN NGHIÊN cứu SINH TổNG HỢP KHÁNG SINH T ừ STREPTOMYCES 21. 123 (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC sĩ KHOÁ 2001 - 2006) Người hướng dẫn: PGS.TS Cao Vãn Thu. Nơi thực hiện: Bộ môn Vi sinh - Sinh