Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của lá sa kê

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ THUÝ AN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ SA KÊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2014... TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ THUÝ AN

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT

VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC

CỦA LÁ SA KÊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

HÀ NỘI - 2014

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ THUÝ AN

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT

VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC

CỦA LÁ SA KÊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ

được rất nhiều sự quan tâm, động viên và giúp đỡ tận tình từ các thầy cô, gia đình và bạn bè Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ sự kính trọng và lòng biết ơn sâu

sắc đến:

PGS.TS Nguyễn Thái An

người thầy đã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tận tình và tạo mọi điều kiện thuận

lợi để tôi có thể hoàn thành khóa luận

Đồng thời tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Ths Hoàng Thái

Hòa đã cho tôi những đóng góp quý báu về đề tài

Tôi xin gửi lời cảm ơn đến các thầy cô, các anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Dược liệu - Trường Đại học Dược Hà Nội, Viện Sinh thái & Tài nguyên sinh vật – Viện Hàn lâm khoa học & Công nghệ Việt Namđã hỗ trợ tôi trong quá trình nghiên cứu

Xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, cùng toàn thể các thầy cô giáo, các cán bộ Trường Đại học Dược Hà Nội đã tạo điều kiện để tôi có thể lĩnh hội những kiến thức quý giá về ngành Dược trong suốt 5 năm học

Cuối cùng, tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình, bạn bè đã luôn sát cánh, động viên tôi hoàn thành khóa luận này

Hà Nội, ngày 14 tháng 05 năm 2014 Sinh viên

Nguyễn Thị Thuý An

DANH MỤC BẢNG

DANH MỤC HÌNH

ĐẶT VẤN ĐỀ……… 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN………3

1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, PHÂN BỐ…… …3

1.1.1 Vị trí phân loại của chi Artocarpus J R Forst & G Forst………3

1.1.2 Đặc điểm thực vật của họ Dâu tằm (Moraceae)……….3

1.1.3 Đặc điểm thực vật của chi Artocarpus J R Forst & G Forst… 4

1.1.4 Đặc điểm thực vật của một số loài thuộc chi Artocarpus J R Forst & G Forst……….……… 4

1.1.5 Đặc điểm thực vật của loài Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg – Sa kê……… … ……… 6

1.1.6 Phân bố của Sa kê ………6

1.1.7 Bộ phận dùng của Sa kê………… ………7

1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA SA KÊ ……… 7

1.2.1 Quả……… 7

1.2.2 Lá………8

1.2.3 Rễ………9

1.2.4 Thân……… 10

1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ CỦA SA KÊ ……… ………11

1.3.1 Tác dụng chống oxy hóa……… …11

1.3.2 Tác dụng chống ung thư………11

1.3.3 Tác dụng chống viêm………12

1.3.4 Tác dụng chống xơ vữa động mạch……… 13

1.4 TÍNH VỊ, CÔNG NĂNG CỦA SA KÊ ……….14

1.5 CÔNG DỤNG CỦA SA KÊ………15

CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU………16

2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU……….16

2.1.1 Nguyên vật liệu nghiên cứu……… …………16

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu……….………… 16

2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU………16

2.2.1 Nghiên cứu về thực vật……….17

2.2.2 Nghiên cứu về hóa học……… 17

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU………17

2.3.1 Nghiên cứu về thực vật……… 17

2.3.2 Nghiên cứu về hóa học……… 17

CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ……….19

3.1 NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT……….19

3.1.1 Mô tả hình thái cây………19

3.1.2 Giám định tên khoa học……….19

3.1.3 Phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài về đặc điểm hình thái…… 21

3.1.4 Đặc điểm vi phẫu lá……… 22

3.1.5 Đặc điểm vi phẫu thân……… 22

3.1.6 Đặc điểm bột lá……… 24

3.1.7 Đặc điểm bột thân……… 24

3.2 NGHIÊN CỨU VỀ HÓA HỌC………24

3.2.1 Chiết xuất……… 24

3.2.4 Định tính cắn các phân đoạn……… … 37

BÀN LUẬN………47

KẾT LUẬN……….50

ĐỀ XUẤT………51 TÀI LIỆU THAM KHẢO

PHỤ LỤC

ACE Men chuyển angiotensin

Bảng 3.1 Phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài về một số đặc điểm

Hình 3.15 Sơ đồ chiết xuất cắn toàn phần và các cắn phân đoạn từ

Hình 3.16 Sắc kí đồ của cắn toàn phần khai triển với hệ dm số III 34 Hình 3.17 Sắc kí đồ của cắn H khai triển với hệ dm số III 38 Hình 3.18 Sắc ký đồ của cắn C khai triển với hệ dm số IV 41 Hình 3.19 Sắc ký đồ của cắn E khai triển với hệ dm số IV 44

ĐẶT VẤN ĐỀ

Ngày nay, cùng với sự phát triển của tổng hợp hóa dược, công tác nghiên cứu, phát triển thuốc và sản phẩm thiên nhiên mới có nguồn gốc cây cỏ đang

là vấn đề thu hút sự quan tâm của nhiều quốc gia trên thế giới

Nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa, với điều kiện tự nhiên đa dạng, Việt Nam là một trong những quốc gia trên thế giới có mức độ đa dạng sinh học cao với hơn 12.000 loài thực vật khác nhau Đặc biệt trong đó có gần 3.900 loài thực vật bậc cao cũng như bậc thấp được các cộng đồng dân tộc sử dụng trong chăm sóc sức khỏe, phòng và trị bệnh [6] Tuy nhiên phần lớn nguồn tài nguyên này được sử dụng theo kinh nghiệm dân gian hoặc theo Y học cổ truyền mà chưa được nghiên cứu đầy đủ

Cây Sa kê là loài cây quen thuộc ở miền Nam Việt Nam, có nguồn gốc

từ các đảo phía nam Thái Bình Dương, châu Đại Dương Quả của cây Sa kê được sử dụng phổ biến làm thực phẩm với nhiều cách chế biến khác nhau [8], [9], [19]

Ở Nuven Caledoni, rễ cây được dùng trị hen và các rối loạn dạ dày ruột, một số rối loạn khi mang thai, đau răng miệng và trị bệnh về da Ở Papua Niu-Guinea, vỏ cây được dùng trị ghẻ, nhựa cây được dùng pha loãng uống trị tiêu chảy và lỵ [8], [9], [19]

Ở nước ta, dân gian dùng lá chữa phù thũng, hoặc dùng ngoài chữa mụn rộp, đinh nhọt, áp xe [19] Lá già sắc hạ huyết áp, trị tiêu chảy, đái đường [15]

Hiện nay, lá Sa kê đang được cộng đồng tìm kiếm và sử dụng để điều trị nhiều bệnh mà chưa được nghiên cứu kĩ Vì vậy, chúng tôi đã tiến hành thực

hiện đề tài “Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của lá

Sa kê” với những mục tiêu sau:

1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây Sa kê

2 Nghiên cứu về thành phần hóa học của lá Sa kê

Để thực hiện được mục tiêu đã đề ra, đề tài được tiến hành với các nội dung sau:

1 Giám định tên khoa học mẫu nghiên cứu

2 Nghiên cứu đặc điểm thực vật của cây Sa kê: Mô tả đặc điểm hình thái cây Sa kê, phân biệt cây Sa kê và cây Mít nài về đặc điểm hình thái; đặc điểm

vi phẫu lá, thân cây Sa kê; đặc điểm bột lá, bột thân cây Sa kê

3 Nghiên cứu thành phần hóa học của cây Sa kê: Định tính các nhóm chất hữu cơ thường gặp trong dược liệu bằng phản ứng hóa học và bằng sắc kí lớp mỏng đối với cắn toàn phần và cắn các phân đoạn của lá Sa kê

Chương 1 TỔNG QUAN

1.1 VỊ TRÍ PHÂN LOẠI, ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, PHÂN BỐ

1.1.1 Vị trí phân loại của chi Artocarpus J R Forst & G Forst

Theo hệ thống phân loại của Takhtajan, chi Artocarpus J R Forst &

G Forst nằm trong tông Mít (Artocarpeae) [4], họ Dâu tằm (Moraceae), bộ Gai (Urticales), liên bộ Gai (Urticanae), phân lớp Sổ (Dilleniidae), lớp Ngọc lan (Magnoliopsida), ngành Ngọc lan (Magnoliophyta) [4], [10] Vị trí của chi

Artocarpus J R Forst & G Forst trong hệ thống phân loại thực vật của

Takhtajan được tóm tắt như sau:

Chi Artocarpus J.R.Forst & G.Forst

1.1.2 Đặc điểm thực vật của họ Dâu tằm (Moraceae)

Cây gỗ hay cây bụi, ít khi là cây cỏ, dây leo Có khi có rễ phụ Các bộ phận có nhựa mủ trắng [4], [6], [9], [18]

Lá đơn, mọc so le Có lá kèm bọc lấy chồi, rụng sớm và để lại sẹo dạng nhẫn trên thân hoặc là hai lá kèm rụng sớm để lại hai vết sẹo trên thân [4], [6], [11], [18]

Hoa thường nhỏ, đơn tính cùng gốc hay khác gốc họp thành cụm hoa chùm, bông, tán, đầu hoặc các hoa cái phủ toàn bộ mặt trong của một đế cụm hoa lõm hình quả gioi [4], [6], [7] Hoa đực có 4 lá đài, không có cánh hoa, 4

nhị đứng đối diện với lá đài Bộ nhụy của hoa cái có 4 lá noãn, bầu trên hoặc

dưới 1 ô, đựng 1 noãn Quả kép [4], [6] Hạt thường có nội nhũ bột [7]

1.1.3 Đặc điểm thực vật của chi Artocarpus J R Forst & G Forst [9]

Cây gỗ cao 15-20m Lá mọc so le, nguyên hay chia thùy

Hoa cùng gốc, các hoa đực xếp thành bông đuôi sóc, các hoa cái tập hợp trên một đế hoa lồi Đài của hoa đực gồm 2 hay 4 phiến Một nhị có chỉ nhị ở giữa, với bao phấn 2 ô mở bởi 2 kẽ nứt Bao hoa cái dính liền, có lỗ ở đỉnh và có bầu không cuống ở gốc, ban đầu có 3 ô, sau đó chỉ còn 1 ô

Quả thật, tức là bầu đã chín, là một quả bế nhưng tổng thể tất cả các quả bế này được bao trong một chất bột của đế hoa, tạo thành một quả tụ

1.1.4 Đặc điểm thực vật của một số loài thuộc chi Artocarpus J R Forst

Hoa đơn tính cùng gốc, mọc ở đầu cành, với cụm hoa đực xuất hiện trước Cụm hoa đực hình đuôi sóc có đường kính 3cm, dài 25-35cm Cụm hoa cái hình cầu Quả kép, hình tròn hoặc hình trứng, kích thước 13-20 x 7-12cm,

vỏ màu xanh lục, gần chín có màu vàng xanh, có gai nhọn dài khoảng 15mm Thịt quả xốp, màu trắng hơi vàng, có mùi thơm khi chín Quả có rất nhiều hạt, có thể lên tới 150 hạt, chiếm khoảng 30-50% khối lượng quả Hạt gần tròn hoặc gần trụ, dài khoảng 2,5cm, có vỏ mỏng màu nâu với gân đen [32]

5-1.1.4.2 A.rigidus Blume – Mít nài, Da xóp

Cây gỗ lớn cao 10-25cm, dạng như một cây dầu, cành non có lông cứng vàng [8], [9], [14], sau nhẵn, màu xám [9]

Lá đơn nguyên, mọc so le; hình elip hoặc hình trứng ngược, kích thước 6,5-26 x 3,5-15cm [9], [32]; gân lá lông chim, lồi ở mặt dưới [32]; có phiến lá cứng, giòn, nhám ở mặt trên do có nhiều lông cứng [8], [9], [14], mặt dưới có lông tơ mềm, cuống lá dài 6-12mm, có lông ráp vàng [9] Lá kèm 1cm [8], [14], màu vàng bóng, hình tam giác, sớm rụng [9]

Cụm hoa đực ở ngọn nhánh, tròn hay tròn dài cỡ 1cm [8], [9], [14], không có cuống chung, mang nhiều hoa phủ lông tơ, bao hoa hình ống chia 2 thùy [9] Cụm hoa cái tròn, đường kính 2,5cm [8], [9], [14], không cuống, mọc ở đầu cành, bao hoa hình ống, có lông cứng, bầu có vòi hình sợi, ẩn sâu trong bao hoa [9] Quả to, đường kính 7cm [8], [14]; có gai sắc nhọn dài 7-9mm [9], [32]; múi quả khi chín màu vàng, mùi thơm, vị chua ngọt [9], [32]; hạt to, kích thước 12 x 8mm [8], [14]

1.1.4.3 A.melinoxyla Gagn - Mít gỗ mật, Mít nài lá nhọn

Cây gỗ cao 9-15m, cành non có lông tơ vàng, sau nhẵn [9], [14]

Lá hình bầu dục, gốc lá tròn, đầu lá thuôn tù, dài 20-30 cm, có lông tơ ở gân, gân phụ 10-12 cặp, cuống dài 2cm, có lông tơ vàng [9], [14] Lá kèm dài 5-6cm, có lông vàng, nhọn đầu, sớm rụng [9]

Cụm hoa đực hình bầu dục, dài 2cm; bao hoa hình lục lạc, tiểu nhụy 1 [9], [14], lá bắc hình khiên [9] Cụm hoa cái hình cầu, bao hoa hình ống chia thùy, bầu có vòi hình sợi, ẩn sâu trong bao hoa [9] Quả tròn, đường kính 7cm, có gai tù, thấp, hạt có kích thước 15 x 10mm [9], [14]

1.1.5 Đặc điểm thực vật của loài Artocarpus altilis (Parkinson) Fosberg –

Tên nước ngoài: Breadfruit (Anh); A Pain (Pháp) [19]

Tên Việt Nam khác: Xa kê, Bánh mỳ [19]

Sa kê là cây gỗ lớn, có nhựa mủ trắng, có thân to, cao đến 12-15m [8], [9], [13], [14], [19] Các nhánh và các thân non hơi khúc khuỷu, có vỏ màu nâu, phủ nhiều lông trắng [9] Thân cây có đường kính khoảng 90cm [13]

Lá mọc so le, có lá kèm, rất rộng, hình trái xoan, thuôn, phủ nhiều lông ráp [8], [9], [13], [14], [19] Lá thường nguyên lúc non, sau đó xẻ lông chim

và xẻ sâu thành những đoạn thuôn nhọn, màu lục đậm ở mặt trên, dài từ 80cm đến 1m và rộng tới 50cm, cuống lá thường ngắn [19] Lá kèm mau rụng dài 12-13cm [8], [9], [14]

Cụm hoa đực có hình chùy và chỉ có một nhị [8], [9], [13] Cũng có khi hoa đực tụ họp nom như đuôi con sóc dài tới 20cm [9], [13] Cụm hoa cái hình cầu, có khi hình ống Quả kép rất to, gần như tròn hoặc hơi hình trứng,

có đường kính 12-20cm, vỏ màu xanh lục nhạt hay vàng nhạt, có gai, thịt quả rất nạc và trắng, chứa nhiều bột [8], [15], [9], [13], [19] Quả mọc thành chùm vài ba quả không có hạt nhưng cũng có quả có hạt chìm ngập trong thịt quả [13] Hạt có đường kính 1cm [8], [9], [14], màu vàng nhạt [19]

1.1.6 Phân bố của Sa kê

Sa kê có nguồn gốc từ các đảo phía nam Thái Bình Dương, châu Đại Dương [8], [9], [13], [19] Hiện đã di thực vào các đảo Giava, Sumatra

(Indonexia), Malayxia, các vùng Đông Nam Á Cây cũng đã được trồng ở một

số nước nhiệt đới ở châu Phi [13]

Ở nước ta, Sa kê được trồng phổ biến tại các tỉnh phía nam, trong các vườn, công viên,…[8], [9], [13]

1.1.7 Bộ phận dùng của Sa kê

Quả chín được dùng như thực phẩm [9] hay quả chưa chín thái thành lát, sau đó phơi hoặc sấy khô [13]

Vỏ thân, rễ, nhựa và lá được sử dụng nhiều để làm thuốc [8], [9]

1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA SA KÊ

Bằng kĩ thuật HPLC, Golden KD và Williams OJ đã xác định được các acid béo và acid amin có trong quả Sa kê gồm:

- Acid béo: acid caproic, acid capric, acid lauric, acid myristic, acid linolenic, acid palmitic, acid oleic, acid linoleic, acid stearic, acid arachidic, acid behenic và acid petroselinic

- Acid amin: acid aspartic, acid glutamic, hydroxyprolin, serin, glycin, histidin, arginin, threonin, alanin, prolin, tyrosin, valin, methionin, isoleucin, leucin, phenylalanin, lysin, norleucin [28]

Từ cao n-hexan của quả Sa kê, Nguyễn Trung Nhân và cộng sự đã phân lập được 4 hợp chất: 2-formyl-5-hydroxymetylfural, acid galic, 5-hydroxy-7,4’-dimetoxyflavon và epifriedelanol Cấu trúc các hợp chất được xác định

bởi các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR và so sánh với tài liệu tham khảo [17]

Một số flavonoid cũng được phân lập từ dịch chiết methanol quả Sa kê gồm: 8-geranyl-3’,4’,7-trihydroxy flavon; arcommunol A; arcommunol B; lespeol; santhoangelol; 3’-geranyl-2’,3,4,4’-tetrahydroxy chalcon; 8-geranyl-4′,5,7-trihydroxy flavon [26]

Từ dịch chiết ethylacetat và methanol quả Sa kê, Amarasinghe NR và cộng sự còn phân lập được 12 hợp chất gồm: oxyresveratrol; artoindonsianin F; (3-methyl-2-butenyl)-(E)-2,3’,4,5’-stilbentetrol; norartocarpanon; moracin M; norartocarpetin; isoartocarpesin; 2’,4’,5,7-tetrahydroxy-6-(3-methyl-2-butenyl)flavon; 3β-acetoxyolean-12-en-11-on; cycloartenyl acetate; sitosterol; sitosterol β-D-glucopyranosid [21]

1.2.2 Lá

Bằng phương pháp GC-MS, Phạm Thị Thanh Huệ đã xác định được cấu trúc của một số hợp chất có trong dịch chiết ethanol lá Sa kê, gồm: 2-methoxy-4-vinyl phenol, cyclo hexen-2-on, megastigmatrienon, 4,4,7- trimethyl-5, 6,7,7-tetrahydro-4H-benzofuran-2-on [15]

Năm 2011, Nguyễn Hữu Duy Khang đã phân lập được 8 hợp chất từ dịch chiết chloroform của lá Sa kê Bằng các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR, 1D, 2D-NMR, DEPT & MS và HR-ESI-MS, cấu trúc của các hợp chất trên được xác định là: 1-(2,4-dihidroxy phenyl)-3-[2-(2,7-dimethyl-3-methylen

oct-6-enyl)-3,4-dihydroxy phenyl] propan-1-on (DK-1); 1-(2,4-dihydroxy phenyl)-3-(7-hydroxy benzo furan-4-yl) propan-1-on (DK-2); C25H28O6 (DK-

3); 1-(2,4-dihydroxy phenyl)-3-[8-hydroxy-2-methyl-2-(4-methyl

pent-3-enyl)-2H-1-benzo pyran-5-yl] propan-1-on (DK-4); tetrahydroxy dihydrochalcon (DK-5); 1-(2,4-dihydroxy phenyl)-3-[3,4-

2-geranyl-2’,3,4,4’-dihydro-3,8-dihydroxy-2-methyl-2-(4-methyl pent-3-enyl)-2H-1-benzo

pyran-5-yl] propan-1-on (DK-6); 8-geranyl-4’,5,7-trihydroxy flavon (DK-8); cycloaltilisin 7 (DK-7) Trong đó DK-5, DK-8 là những hợp chất lần đầu tiên được phát hiện trong lá Sa kê; DK-1, DK-2 và DK-3 là những hợp chất lần

đầu tiên được công bố trên thế giới [16]

Ba dẫn xuất geranyl chalcon bao gồm isolespeol; trihydroxy chalcon và 3,4,2',4'-tetrahydroxy-3'-geranyldihydro chalcon, cùng với hai hợp chất được biết đến là lespeol và santhoangelol, được phân lập từ dịch chiết methanol lá Sa kê Các cấu trúc đã được nhận dạng dựa vào phổ

5'-geranyl-2',4',4-UV, IR, 1H-NMR, 13C-NMR, và so sánh với thư viện phổ [27]

Từ dịch chiết ethylacetat lá Sa kê, Wang Y và cộng sự đã phân lập được β-sitosterol, và 6 flavonoid gồm: 8-geranyl-4′,5,7-trihydroxy flavon; cyclochampedol; 2-geranyl-2′,3,4,4′-tetrahydroxydihydrochalcon; 2′,4′,5-trihydroxy-7-methoxy-8-prenylflavon; 2′-geranyl-3′,4′,7-tirhydroxyflavon và 1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-[8-hydroxy-2-methyl-2-(4-methyl-3-pentenyl)-2H -1-benzo pyran-5-yl]-1-propanon [43]

Năm 2012, Trần Thu Hương và cộng sự đã phân lập từ dịch chiết methanol lá Sa kê được một prenylated auron: artocarpauron; hai prenylated chalcon: 1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-[8-hydroxy-2-methyl-2-(4-methyl-3-pentenyl)-2H-1-benzo pyran-5-yl] propan-1-on, 2-geranyl-2’,3,4,4’-tetra hydroxy dihydrochalcon; ba prenylated flavanon: cycloaltilisin 7, (±)-sophoraflavanon A, 2’-geranyl-3’,4’,7-trihydroxyflavanon và ba triterpen: 3β-acetoxycycloart-25-en-24-on, 3β-acetoxycycloart-25-methoxy-23-en, và 3β-acetoxy-urs-12-en-11-on [30]

1.2.3 Rễ

Theo một số tài liệu, trong rễ có prenyl flavonoid gồm: artocommunols

CA (4′-O-methylcyclomorusin); artocommunols CB geranyl-7,8-(2,2-dimethyl-6H-pyrano)-6-prenyl flavon); artocommunols CC;

(5,2′,4′-trihydroxy-3-artocommunols CD (5,7,2′,4′-tetrahydroxy-3-geranyl-8-prenylflavon) và artocommunols CE (5,2′,4′-trihydroxy-7,8-(2,2-dimethyl-6H-pyrano)-3-(9-hydroxy) prenyl flavon) [24]; cyclo geracommunin; artoflavon A; artochamin D; artochamin B; artomunoisoxanthon và dihydroartomunoxanthon [36]; artoindonsianin V; hydroxyartocarpin [39]; artocarpin; cycloartobiloxanthon; cycloartocarpin A; morusin [23], [39]; chaplashin; cudraflavon B; artonin E; cudraflavon C và artobiloxanthon [23]

Từ vỏ rễ, Shieh WL và Lin CN đã phân lập được hai hợp chất đã biết: β-sitosterol và cudraflavon A; este triterpenoid: acetate lupeol [40]; hai pyranodihydrobenzoxanthon: artomunoxanthon [40], cycloartomunoxanthon [33], một dẫn xuất quinonoid pyranobenzoxanthon: artomunosanthentrion [40], bốn pyrano flavonoid: cyclomulberrin, cyclocommunol, cyclocommunin

và dihydro isocyclo artomunin [35], hai prenyl flavonoid: dihydro cyclo artomunin và cycloartomunin [33], một dẫn xuất của pyrano dihydro benzo xanthon epoxid: artomunoxanthotrion epoxy [34]

1.2.4 Thân

Ba prenylflavon mới: isocyclo morusin, isocyclo mulberrin, và cyclo altilisin, cùng với ba flavonoid đã được biết đến là cyclomorusin, cyclomulberrin, và engeletin, được phân lập từ thân cây Cấu trúc của các prenylflavon mới được xác định bằng các dữ liệu phổ 1H-NMR, 13C-NMR, so sánh với các hợp chất có liên quan đã biết [25]

Một chalcon prenylated mới, trihydroxychalcon được phân lập từ dịch chiết methanol thân cây Hai dẫn xuất flavonoid, (-) cycloartocarpin và (-) cudraflavon A cũng được phân lập Ngoài ra, tám flavonoid đã được biết đến, isobacachalcon, morachalcon A, gemichalcons B và C, artocarpin, cudraflavon C, licoflavon, và (2S) euchrenon-a7, cũng được phân lập từ dịch chiết thân cây lần đầu tiên [29]

3'',3''-dimethylpyrano-[3',4']-2,4,2'-Từ dịch chiết ether lõi gỗ cây Sa kê, Shimizu K, Kondo R, và Sakai K

đã phân lập được một stilben với vòng dimethylchromen: 6”,6”-dimethyl-pyrano-(3”,2”,4,5)-trans-stilben, được đặt tên là artocarben [41]

3,2’,4’-trihydroxy-1.3 TÁC DỤNG DƯỢC LÝ CỦA SA KÊ

1.3.1 Tác dụng chống oxy hóa

Hai prenylflavonoid mới, cyclogeracommunin (1) và artoflavon (2), đã

được phân lập từ dịch chiết chloroform vỏ rễ của A.communis Hợp chất (2)

có khả năng thu dọn các gốc 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl với mức liều IC50

là 24,28 ± 0,8µM, trong khi hợp chất (1) có tác dụng ức chế xanthin oxidase với mức liều IC50 là 73,3 ± 19,1µM [36]

IC50 lần lượt là 3,1 ± 0,1; 3,3 ± 0,6; 5,5 ± 0,05; 3,3 ± 1,1; 5,2 ± 0,4; 4,1 ± 0,04; 4,1 ± 0,04; 2,9 ± 0,5; 4,9 ± 0,2 (µg/ml) [23]

Một prenylated flavonoid, methyl-2-(4-methyl-3-pentenyl)-2H-1-benzopyran-5-yl]-1-propanon từ dịch chiết dichloromethan lá cho thấy khả năng gây độc đối với tế bào bạch cầu P-

1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-[8-hydroxy-2-388 ở chuột với mức liều IC50 là 6,7µg/ml [37]

Ba geranyl dihydrochalcon được phân lập từ phân đoạn ethylacetat của dịch chiết methanol lá gồm: 1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-{4-hydroxy-6,6,9-

trimethyl-6a,7,8,10a-tetrahydro-6H-dibenzo[b,d]pyran-5-yl}-1-propanon; [6-hydroxyl-3,7-dimethylocta-2(E),7-dienyl]-2’,3,4,4’-tetrahydroxy dihydro chalcon và 1-(2,4-dihydroxyphenyl)-3-[3,4-dihydro-3,8-dihydroxy-2-methyl-2-(4-methyl-3-pentenyl)-2H-1-benzo pyran-5-yl]-1-propanon có khả năng gây độc đối với các dòng tế bào gây ung thư ở người: SPC-A-1 (tế bào ung thư phổi), SW-480 (tế bào ung thư ruột kết) và SMMC-7721 (tế bào ung thư biểu

2-mô gan) [44]

Một geranyl chalcon, isolespeol, được phân lập từ phân đoạn dichloromethan trong dịch chiết methanol lá cho thấy khả năng ức chế cao đối với sự phát triển của tế bào ung thư mô mỡ SW 872 ở mức liều IC50 là 3,8mM Nghiên cứu cho thấy sự tác động của isolespeol lên tế bào SW 872 là thông qua việc làm tăng tác động của protein p53 – một protein ảnh hưởng đến sự chết của tế bào [27]

Dịch chiết ethylacetat từ gỗ của cây có khả năng gây độc đối với tế bào ung thư vú ở người (T47D) phụ thuộc vào nồng độ, với dịch chiết ở IC50 là

6,19µg/ml Thử trên in vitro, dịch chiết với chủ yếu là artocarpin làm giảm

khả năng sống của tế bào T47D bằng cách gây ra cái chết tế bào và hình thành pha phụ G [22]

1.3.3 Tác dụng chống viêm

Tác dụng chống viêm của các flavonoid được phân lập từ A.communis

và A.heterophyllus, gồm cycloartomunin (1), cyclomorusin (2), dihydrocycloartomunin (3), dihydroisocycloartomunin (4), cudraflavon A (5), cyclocommunin (6), artomunoxanthon (7), cycloheterohyllin (8), artonins A (9) và B (10), artocarpanon (11), artocarpanon A (12), heteroflavanons A

(13), B (14) và C (15 ), được tiến hành thử in vitro bằng cách xác định tác

dụng ức chế của các chất trên các chất trung gian hóa học được giải phóng từ

tế bào mast, bạch cầu trung tính và đại thực bào Hợp chất (4) ức chế đáng kể

việc giải phóng α-glucuronidase và histamin từ tế bào mast ở chuột khi bị kích thích bởi P-methoxy-N- methylphenthylamin với liều ID50 tương ứng là 72,6 ± 2,5µM; 70,2 ± 3,2µM Hợp chất (11) ức chế đáng kể việc giải phóng lysozyme từ bạch cầu trung tính ở chuột khi bị kích thích bởi formyl-Met-Leu-Phe (fMLP) với liều ID50 46,5 ± 5,1µM Các hợp chất (8), (10), và (11)

ức chế đáng kể sự hình thành anion superoxide trong bạch cầu trung tính chuột khi bị kích thích bởi fMLP trong khi các hợp chất (2), (3), (5) và (6) lại kích thích quá trình sản sinh anion superoxide Hợp chất (11) cho thấy có tác dụng ức chế đáng kể lên việc hình thành nitric oxide và hoạt động của protein iNOS (inducible nitric oxide synthase) trong đại thực bào chuột (dòng tế bào RAW 264,7) bị kích thích bởi lipopolysaccharid [45]

Một chalcon prenylated 3'',3''-dimethyl pyrano[3',4']2,4,2'-trihydroxy chalcon và năm flavonoid gồm isobacachalcon, morachalcon A, gemichalcon

B, artocarpin, (2S)-euchrenon a được phân lập từ dịch chiết thân cây cho thấy hoạt động ức chế mạnh sự hình thành nitric oxide trong đại thực bào chuột (dòng tế bào RAW 264,7) bị kích thích bởi lipopolysaccharid với liều IC50 lần lượt là 18,8; 6,4; 16,4; 9,3; 18,7 và 12,3 µM [29]

1.3.4 Tác dụng chống xơ vữa động mạch

Dịch chiết ethylacetat lá Sa kê cho thấy có tác dụng bảo vệ tế bào đối với dòng tế bào U937 đang ủ bệnh do LDL bị oxi hóa (OxLDL) Trong dịch chiết ethylacetat phân lập được β-sitosterol và 6 flavonoid cho thấy có tác dụng bảo vệ tế bào U937 [43]

1.3.5 Tác dụng hạ đường huyết

Ba auron được phân lập từ dịch chiết methanol lá Sa kê, altilisin H, I,

và J cho thấy có tác dụng ức chế α-glucosidase với mức liều IC50 lần lượt là 4,9 ± 0,1; 5,4 ± 0,3; 5,1 ± 0,1 µM, mức liều thấp hơn nhiều so với acarbose (IC50=241,8µM), là một chất ức chế α-glucosidase được sử dụng trong điều trị bệnh tiểu đường [38]

1.3.6 Tác dụng kháng khuẩn

Dịch chiết methanol vỏ cây và các hợp chất được phân lập: artonin E (4) và 2-[(3,5-dihydroxy)-(Z)-4-(3-methyl but-1-enyl)phenyl]benzo furan-6-ol

(5) được thử tác dụng kháng khuẩn trên các chủng vi khuẩn là: Providencia

stuartii, P.aeruginosa, Klebsiella pnumoniae, S.aureus, S.typhi, E.coli và

chủng vi nấm C.albicans Kết quả cho thấy cả dịch chiết và hợp chất 4, 5 đều

có khả năng ngăn cản sự phát triển của các chủng vi khuẩn và vi nấm thử nghiệm Nồng độ ức chế tối thiểu MIC của dịch chiết là 64mg/ml đối với

S.aureus và E.coli Nồng độ ức chế tối thiểu MIC khoảng 32mg/ml cho các

hợp chất 4 và 5 trên P.aeruginosa và hợp chất 5 trên E.coli Tác dụng ức chế của hợp chất 4, 5 đối với P.aeruginosa mạnh hơn chloramphenicol [31]

1.3.7 Tác dụng ức chế men chuyển angiotensin (ACE)

Lá Sa kê được chiết xuất bằng nhiều dung môi khác nhau, và đem tiến hành nghiên cứu khả năng ức chế ACE Trong số các dịch chiết, dịch chiết ethanol nóng cho thấy khả năng ức chế ACE mạnh với mức liều IC50 là 54,08

± 0,29mg/ml, tiếp theo là dịch chiết ethylacetat lạnh với mức liều IC50 là 85,44 ± 0,85mg/ml, dịch chiết nước nóng cho thấy khả năng ức chế ACE kém với mức liều IC50 là 765,52 ± 11,97mg/ml Phân tích thành phần hóa học sơ

bộ cho thấy có mối liên quan giữa khả năng ức chế ACE với các hợp chất glycosid và phenolic có nhiều trong dịch chiết [42]

1.4 TÍNH VỊ, CÔNG NĂNG CỦA SA KÊ

Theo Đông y, rễ Sa kê có tính bình, trị ho [8], [20]; vỏ có tác dụng sát trùng; lá có tác dụng tiêu viêm, tiêu độc, lợi tiểu [8], [19], [20]

Thịt quả Sa kê có tác dụng bổ tỳ, ích khí Hạt có tác dụng bổ trung ích khí, lợi trung tiện [19]

1.5 CÔNG DỤNG CỦA SA KÊ

Thịt quả thường được dùng để ăn Quả còn xanh có bột dùng làm thực phẩm, với nhiều cách chế biến [8], [9], [19] Hạt luộc hoặc rang, ăn có tác dụng lợi trung tiện, kích dục [19]

Ở nước ta, dân gian dùng lá chữa phù thũng [8], [9], [19], hoặc dùng ngoài chữa mụn rộp, đinh nhọt, áp xe [19] Lá già sắc hạ huyết áp, trị tiêu chảy, đái đường [15]

Ở Nuven Caledoni, rễ cây được dùng trị hen, các rối loạn dạ dày ruột, một số rối loạn khi mang thai, đau răng miệng và trị bệnh về da [8], [9], [19]

Ở Papua Niu-Guinea, vỏ cây được dùng trị ghẻ, nhựa cây được dùng pha loãng uống trị tiêu chảy và lỵ [8], [9], [19]

Một số bài thuốc có lá Sa kê:

‐ Trị bệnh gout và sỏi thận: 100g lá Sa kê tươi, 100g dưa leo, 50g cỏ xước khô Tất cả nấu nước uống trong ngày [20]

‐ Trị tiểu đường tuýp 2: 100g lá Sa kê tươi, 100g trái đậu bắp tươi, 50g

lá ổi non, nấu nước uống trong ngày [20]

‐ Chữa viêm gan, vàng da: 100g lá Sa kê tươi, 50g diệp hạ châu tươi, 50g củ móp gai tươi, 20-50g cỏ mực khô Tất cả để chung nấu nước uống trong ngày [20]

‐ Trị chứng huyết áp cao dao động: 2 lá Sa kê vàng vừa mới rụng, 50g rau ngót tươi, 20g lá chè xanh tươi, để chung nấu nước uống trong ngày [20]

- Trị bệnh mụn rộp: lá Sa kê đốt thành than, tán mịn, phối hợp với dầu dừa và nghệ tươi, giã nát, làm thành bánh, đắp [19]

- Chữa sưng háng, mụn nhọt, áp xe: lá Sa kê và lá đu đủ để tươi, lượng bằng nhau, giã với vôi tôi cho đến khi có màu vàng, rồi đắp [8], [9], [19]

Chương 2 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP

NGHIÊN CỨU

2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU, THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU

2.1.1 Nguyên vật liệu nghiên cứu

 Mẫu nghiên cứu cây Sa kê:

- Mẫu cây tươi để giám định tên khoa học

- Mẫu cây tươi mang lá, thân cây để nghiên cứu về mặt thực vật

- Lá cây tươi phơi se, sấy trong tủ sấy ở 50°C đến khô, làm nhỏ, bảo quản trong túi nilon kín, để chỗ mát làm nguyên liệu nghiên cứu về mặt hóa học

 Mẫu nghiên cứu cây Mít nài:

- Mẫu cây tươi để phân biệt với cây Sa kê về đặc điểm hình thái

 Nơi thu hái: Thủ Đức – Thành phố Hồ Chí Minh

 Thời gian thu hái: tháng 11 năm 2013

2.1.2 Thiết bị nghiên cứu

 Các dụng cụ thí nghiệm thường quy (bình nón, bình gạn, cốc có mỏ, pipet…)

 Tủ sấy Shellab

 Cân phân tích Precisa

 Máy cất quay Buchi Rotavapor R-200

 Kính hiển vi Leica Wetzlar GmbH, máy ảnh Canon IXUS 115 HS

 Bản mỏng Silicagel GF254 của Merck (Đức) tráng sẵn

 Đèn tử ngoại

 Hóa chất sử dụng trong nghiên cứu đạt tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam III, IV

2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU

2.2.1 Nghiên cứu về thực vật

- Mô tả hình thái cây, phân biệt với cây Mít nài về đặc điểm hình thái và

giám định tên khoa học của mẫu nghiên cứu

- Nghiên cứu đặc điểm vi học của mẫu

2.2.2 Nghiên cứu về hóa học

Định tính các nhóm chất hữu cơ trong dược liệu và các phân đoạn bằng

phản ứng hóa học thường quy và sắc kí lớp mỏng

2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.3.1 Nghiên cứu về thực vật

 Mô tả hình thái thực vật

Mô tả đặc điểm hình thái cây và phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài về đặc điểm hình thái theo phương pháp ghi trong tài liệu “Thực tập thực vật và nhận biết cây thuốc” [5]

 Giám định tên khoa học của mẫu nghiên cứu

Đối chiếu với mô tả trong tài liệu chuyên sâu về thực vật như:

 Từ điển thực vật thông dụng [9]

 Cây cỏ Việt Nam [14]

 Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam [19]

 Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam [13]

 Nghiên cứu đặc điểm vi học

Quan sát cấu tạo vi phẫu lá, thân và soi bột lá, bột thân bằng kính hiển vi,

chụp ảnh các đặc điểm vi học bằng máy ảnh theo các tài liệu:

 Thực tập thực vật và nhận biết cây thuốc [5]

 Thực tập dược liệu [1]

2.3.2 Nghiên cứu về hóa học

Định tính các nhóm chất hữu cơ thường gặp trong dược liệu bằng các phản ứng hóa học thường quy và bằng sắc ký lớp mỏng theo tài liệu:

 Bài giảng dược liệu, tập I và II [2], [3]

 Thực tập dược liệu [1]

 Phương pháp nghiên cứu hóa học cây thuốc [12]

Chương 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

3.1 NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT

3.1.1 Mô tả hình thái cây

Cây gỗ lớn, cao khoảng 10m Thân to, đường kính khoảng 80-90cm, phân cành cao, các nhánh khúc khuỷu, vỏ màu nâu, sần sùi, có nhựa mủ trắng (hình 3.1) Thân non màu xanh, có phủ nhiều lông trắng (hình 3.2)

Lá mọc so le, xếp xoắn, mọc thẳng từ đầu ngọn cành, có lá kèm Hai lá kèm lớn, dài khoảng 15-20cm, ban đầu dính vào nhau, bọc lấy lá như búp cây,

lá cuộn ở bên trong, sau đó tách dần để lá cây bung ra, rụng sớm, có màu xanh chuyển vàng khi rụng (hình 3.3) Lá màu xanh lục, bóng (khi non), đậm

và chuyển màu vàng (khi rụng); màu lục đậm ở mặt trên, mặt dưới màu lục nhạt, phủ nhiều lông ráp Lá xẻ lông chim, 9-11 thùy, mép nguyên, chóp nhọn, đầu thuôn tù Lá dài 40-50cm, rộng 30-40cm, cuống lá ngắn 2-5cm (hình 3.4)

Hoa đực tụ họp lại, hình chùy, dài 15-20cm (hình 3.5) Quả kép, gần như hình tròn hoặc hơi hình trứng, cỡ 10-15 x 15-25cm, vỏ màu xanh lục nhạt, có gai tù, thịt quả trắng, chứa nhiều bột, thường không có hạt (hình 3.6)

3.1.2 Giám định tên khoa học

Dựa vào các đặc điểm quan sát, phân tích về đặc điểm hình thái, đối chiếu với các tài liệu tham khảo và được sự giúp đỡ của PGS.TS Nguyễn Khắc Khôi – Viện Sinh thái và Tài nguyên sinh vật, cây Sa kê dùng để nghiên

cứu đã được giám định tên khoa học là Artocarpus communis J R Forst &

G Forst., tên đồng nghĩa là Artocarpus altilis (Park.) Fosb hay Artocarpus

incisus (Thunb.) L., họ Dâu tằm (Moraceae)

Hình 3.1 Ảnh cây Sa kê Hình 3.2 Ảnh đầu ngọn cành Sa kê

Hình 3.3 Ảnh tán lá Sa kê

Hình 3.4 Ảnh lá Sa kê

Hình 3.5 Ảnh hoa đực Sa kê Hình 3.6 Ảnh quả Sa kê

3.1.3 Phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài về đặc điểm hình thái

Cây Sa kê và cây Mít nài có các đặc điểm hình thái chung của chi

Artocarpus J R Forst & G Forst.: Cây gỗ cao 15-20m; lá mọc so le, chia

thùy; hoa đơn tính cùng gốc, các hoa đực xếp thành bông đuôi sóc, các hoa cái tập hợp trên một đế hoa lồi; quả kép

Một số đặc điểm hình thái để phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài được trình bày ở bảng 3.1

Bảng 3.1 Phân biệt cây Sa kê với cây Mít nài về một số đặc điểm hình thái

Lông tơ dày, ngắn ở phiến lá;

lông cứng ở gân lá màu xám

Gai tù, hầu như không nhô ra

Bột trắng, chiếm hầu hết quả

Hầu như không có, nếu có chỉ có

3.1.4 Đặc điểm vi phẫu lá

Quan sát tiêu bản vi phẫu lá (hình 3.11), nhận thấy:

Phần gân lá: Mặt trên và mặt dưới đều lồi, tuy nhiên mặt dưới lồi

nhiều hơn Tế bào biểu bì (1) gồm nhiều tế bào hình chữ nhật, có một số tế bào biến thành lông che chở đơn bào (6) Mô dày (2) được cấu tạo bởi các tế bào hình trứng có thành dày, mặt trên có nhiều lớp tế bào hơn mặt dưới Mô mềm (3) gồm các tế bào thành mỏng, hình tròn Các bó mạch nằm trong khối

mô mềm, phân bố thành hai phần: phần ngoài tạo thành vòng cung khép kín, phần trong nằm rải rác tạo thành các cánh cung Trong mỗi bó mạch, phần libe (4) nằm ở ngoài, phần gỗ (5) ở trong Ngoài ra, trên cả hai lớp biểu bì đều

có nhiều lông tiết (7), tinh thể calci oxalat nằm rải rác ở mô mềm

Phần phiến lá: Tế bào biểu bì (8) hình chữ nhật, mặt dưới có lông che

chở Mô giậu (9) chiếm một phần tư chiều dày phần thịt lá, gồm 1-3 lớp tế bào chứa nhiều hạt diệp lục Phía dưới là mô khuyết (10) Mô giậu và mô khuyết bị phân cách thành các phần bởi các mạch dẫn của gân phụ (11) Tinh thể calci oxalat nằm rải rác trong vùng mô giậu và mô khuyết

3.1.5 Đặc điểm vi phẫu thân

Quan sát tiêu bản vi phẫu thân (hình 3.12), nhận thấy:

Thân cây có cấu tạo vi phẫu cấp hai: Ngoài cùng là bần (1) gồm 3-5 lớp

tế bào sắp xếp lộn xộn Tiếp theo là tầng phát sinh bần-lục bì, và lục bì (2) gồm 4-6 lớp tế bào hình đa giác Mô mềm vỏ (3) gồm các tế bào hình trứng, kích thước không đều nhau Các bó libe cấp 1 (4) nằm rải rác trong mô mềm

vỏ Libe cấp 2 (5) gồm mô mềm libe và sợi libe Tiếp theo là gỗ cấp 2 (6) và

gỗ cấp 1(7) Tâm là mô mềm vỏ (8), chiếm một phần hai chiều dày thân Tinh thể calci oxalat rải rác ở mô mềm vỏ, libe và mô mềm ruột

Hình 3.11 Ảnh vi phẫu lá cây Sa kê

1 Tế bào biểu bì gân lá 2 Mô dày

7 Lông tiết 8 Tế bào biểu bì phiến lá

3.2 NGHIÊN CỨU VỀ HÓA HỌC

3.2.1 Chiết xuất

Cân 1kg dược liệu đã làm nhỏ, cho nước ngập dược liệu (cách bề mặt dược liệu khoảng 2cm), đun sôi trong 30 phút Sau 30 phút, lấy dịch chiết ra, lọc nóng được dịch lọc Bã dược liệu được dùng để chiết tiếp lần 2, lần 3 Gộp các dịch lọc lại, lấy một phần đem cô đến cắn (cắn toàn phần) Phần còn lại bay hơi bớt dung môi rồi chuyển vào bình gạn Tiến hành chiết lỏng – lỏng với các dung môi có độ phân cực tăng dần lần lượt là: n-hexan, chloroform và ethyl acetat Dịch chiết các phân đoạn được cất thu hồi dung môi dưới áp suất giảm đến cắn lần lượt là n-hexan (cắn H), chloroform (cắn C) và cắn ethyl acetat (cắn E)

Hình 3.15 mô tả sơ đồ chiết xuất cắn toàn phần và các cắn phân đoạn từ

lá Sa kê

Hình 3.13 Ảnh một số đặc điểm bột lá Sa kê

1 Lông che chở đơn bào 2 Mảnh biểu bì mang lỗ khí

3 Tinh thể calci oxalat hình cầu gai 4 Hạt tinh bột 5 Mảnh mô mềm

6 Mảnh mô giậu 7 Các mảnh mang màu 8 Mảnh mạch xoắn

9 Mảnh mạch vạch 10 Sợi

Hình 3.14 Ảnh một số đặc điểm bột thân Sa kê

1 Mảnh biểu bì 2 Mô mềm 3 Mảnh mạch điểm

4 Mảnh mạch xoắn 5 Sợi gỗ 6 Hạt tinh bột 7 Tinh thể calci oxalat

8 Mảnh mang màu