Nghiên cứu đặc điểm thực vật học của các mẫu giống giảo cổ lam và ảnh hưởng của phân bón đến năng suất giảo cổ lam

Tuy nhiên, một vấn ñề quan trọng là việc phân ñịnh ñặc ñiểm thực vật học và ñánh giá năng suất, chất lượng của các giống giảo cổ lam chưa ñược quan tâm, do ñó chưa ñưa ra ñược khuyến cáo

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO

TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

===***===

ðINH QUỐC CÔNG

NGHIÊN CỨU ðẶC ðIỂM THỰC VẬT HỌC CỦA CÁC MẪU GIỐNG GIẢO CỔ LAM VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA PHÂN BÓN ðẾN NĂNG SUẤT GIẢO CỔ LAM

LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP

Chuyên ngành: TRỒNG TRỌT

Mã số : 60 62 01 10

Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN HẠNH HOA

HÀ NỘI - 2012

LỜI CAM ðOAN

Tôi xin cam ñoan số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và chưa từng ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào Tôi xin cam ñoan mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cám ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn này ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc

Tác giả luận văn

ðinh Quốc Công

LỜI CẢM ƠN

ðể hoàn thành bản luận văn này, tôi ñã nhận ñược rất nhiều sự giúp ñỡ

từ phía gia ñình, nhà trường, các thầy cô giáo và bạn bè

Trước hết tôi xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Hạnh Hoa, người ñã tận tình chỉ bảo, hướng dẫn tôi hoàn thành luận văn này Tôi xin gửi lời cảm

ơn các thầy cô giáo trong khoa Nông học, bộ môn Thực vật trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã tận tình giúp ñỡ tôi cả về mặt vật chất lẫn tinh thần ñê hoàn thành luận văn một cách tốt nhất

Cuối cùng tôi xin chân thành cảm ơn gia ñình và bạn bè ñã tạo ñiều kiện thuận lợi, giúp ñỡ tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu Một lần nữa, tôi xin trân trọng cảm ơn!

Hà Nội, ngày tháng năm 2012

Tác giả luận văn

ðinh Quốc Công

MỤC LỤC

Trang

LỜI CAM ðOAN i

LỜI CẢM ƠN ii

MỤC LỤC iii

DANH MỤC BẢNG vi

DANH MỤC HÌNH vii

PHẦN I MỞ ðẦU 1

1.1 ðặt vấn ñề 1

1.2 Mục ñích và yêu cầu của ñề tài 1

1.2.1 Mục ñích 1

1.2.2 Yêu cầu của ñề tài 2

1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài 2

1.3.1 Ý nghĩa khoa học 2

1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn 2

PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Vị trí phân loại, nguồn gốc, phân bố, ñặc ñiểm thực vật học của 1 số loài cây thuốc có tên "Giảo cổ lam" 3

2.1.1 Giới thiệu chi Gynostemma Blume 3

2.1.2 Giới thiệu loài Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino 3

2.1.3 Giới thiệu loài Gynostemma laxum (Wall.) Cogn 4

2.2 Thành phần hóa học, tác dụng và giá trị làm thuốc của cây Giảo cổ lam 4

2.2.1 Thành phần hóa học của cây Giảo cổ lam 4

2.2.2 Tác dụng và giá trị làm thuốc của cây giảo cổ lam 5

2.2.3 Bộ phận giảo cổ lam sử dụng làm thuốc 7

2.3 Những nghiên cứu về dược liệu ở trên thế giới và ở Việt Nam 8

2.3.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới 8

2.3.2 Tình hình sản xuất và nghiên cứu cây thuốc ở nước ta 14

2.4 Kĩ thuật trồng và chăm sóc các giống Giảo cổ lam 15

2.4.1 Chọn vùng trồng 15

2.4.2 Giống 15

2.4.3 Thời vụ trồng 16

2.4.4 Kỹ thuật làm ựất và lên luống 16

2.4.5 Phân bón và kỹ thuật bón phân 16

2.4.6 Mật ựộ, khoảng cách, và kỹ thuật trồng 17

2.4.7 Chăm sóc và quản lý ựồng ruộng 17

2.4.8 Phòng trừ sâu bệnh 17

2.4.9 Thu hoạch, bảo quản và chế biến 17

PHẦN III đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 3.1 đối tượng nghiên cứu 19

3.2 Nội dung nghiên cứu 19

3.3 địa ựiểm nghiên cứu 19

3.4 Thời gian nghiên cứu 19

3.5 Phương pháp nghiên cứu và bố trắ thắ nghiệm 20

3.6 Các chỉ tiêu theo dõi 25

3.6.1 Theo dõi các ựặc ựiểm hình thái học thực vật 25

3.6.2 Theo dõi các chỉ tiêu nông học: 26

3.6.3 Chỉ tiêu về theo dõi sâu bệnh hại, các sâu và bệnh hại chắnh trên giảo cổ lam 27

3.7 Phương pháp xử lý số liệu 27

PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 28

4.1 đặc ựiểm hình thái và giải phẫu các mẫu giống giảo cổ lam 28

4.1.1 đặc ựiểm hình thái, giải phẫu và kắch thước các cơ quan sinh dưỡng 28

4.1.2 đặc ựiểm hình thái, giải phẫu và kắch thước các cơ quan sinh sản 48

4.2 đánh giá năng suất của các mẫu giống giảo cổ lam 64

4.3 Ảnh hưởng của phân bón ựến năng suất giảo cổ lam 64

4.3.2 Ảnh hưởng của phân bón ñến ñộng ñộng thái tăng trưởng chỉ số

diện tích lá của giảo cổ lam 69

4.3.3 Ảnh hưởng của phân bón ñến ñộng thái tích lũy chất khô của các mẫu giống giảo cổ lam 71

4.3.4 Ảnh hưởng của phân bón ñến năng suất thu hoạch của các mẫu giống giảo cổ lam 75

PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 78

5.1 Kết luận 78

5.2 ðề nghị 79

TÀI LIỆU THAM KHẢO 81

PHỤ LỤC 87

DANH MỤC BẢNG

Trang

Bảng 4.1 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp 3 mẫu giống giảo cổ lam 28

Bảng 4.2 ðặc ñiểm hình thái, giải phẫu thân của 3 mẫu giống giảo cổ lam 33

Bảng 4.3 Kích thước các phần mô trong cấu tạo giải phẫu thân của 3 mẫu giống Giảo cổ lam nghiên cứu 34

Bảng 4.4 Kích thước lá của 3 mẫu giống giảo cổ lam 40

Bảng 4.5 ðặc ñiểm cấu tạo giải phẫu phiến lá của 3 mẫu giống giảo cổ lam 42

Bảng 4.6 ðặc ñiểm cấu tạo giải phẫu bó dẫn gân chính của lá ở 3 mẫu giống Giảo cổ lam 43

Bảng 4.7 Kích thước các thành phần của hoa ñực 49

Bảng 4.8 Kích thước các thành phần của hoa cái 56

Bảng 4.9 ðường kính quả và kích thước hạt của 3 mẫu giống 61

Bảng 4.10 Năng suất của các mẫu giống giảo cổ lam 64

Bảng 4.11 Ảnh hưởng của phân bón ñến ñộng thái ñẻ nhánh của giảo cổ lam 66

Bảng 4.12 Ảnh hưởng của phân bón ñến ñộng thái tăng trưởng chỉ số diện tích lá của các mẫu giống giảo cổ lam 69

Bảng 4.13 Ảnh hưởng của phân bón ñến ñộng thái biến ñộng chất khô của các mẫu giống 72

Bảng 4.14 Ảnh hưởng của phân bón ñến năng suất của các mẫu giống 75

DANH MỤC HÌNH

Trang

Hình 1 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 5 lá chét 30

Hình 2 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 7 lá ché 31

Hình 3 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 9 lá chét 32

Hình 4 Cấu tạo giải phẫu thân (mẫu chưa tiến hành nhuộm kép) 36

Hình 5 Cấu tạo giải phẫu thân và bó mạch mẫu giống 5 lá chét 37

Hình 7 Cấu tạo giải phẫu thân và bó mạch mẫu giống 9 lá chét 39

Hình 8 Hình thái lá của các mẫu giống Giảo cổ lam 41

Hình 9 Cấu tạo giải phẫu lá mẫu giống 5 lá chét 45

Hình 10 Cấu tạo giải phẫu lá mẫu giống 7 lá chét 46

Hình 11 Cấu tạo giải phẫu lá mẫu giống 9 lá chét 47

Hình 12 Cấu tạo hoa ñực mẫu giống 5 lá chét 51

Hình 13 Cấu tạo hoa ñực mẫu giống 7 lá chét 53

Hình 14 Cấu tạo hoa ñực mẫu giống 9 lá chét 55

Hình 15 Cấu tạo hoa cái mẫu giống 7 lá chét 58

Hình 16 Cấu tạo hoa cái mẫu giống 9 lá chét 60

Hình 17 Quả Giảo cổ lam và lát cắt ngang quả 62

Hình 18 Hạt giảo cổ lam 63

tên khoa học là Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino ðây là loài

ñược ghi nhận với lá kép chân vịt có 5 lá chét Tuy nhiên trong thiên nhiên tồn tại nhiều cây có ñặc ñiểm hình thái tương tự nhưng với số lá chét là 7 hoặc 9 ñang ñược nhân dân thu hái và bán cùng với tên gọi là giảo cổ lam Với những nghiên cứu về giá trị trong y học ñã ñược công bố, giảo cổ lam ngày càng ñược sử dụng phổ biến với giá tiêu dùng khá cao ðiều ñó thúc ñẩy việc thu hái giảo cổ lam với số lượng lớn làm trữ lượng trong tự nhiên suy giảm nhanh chóng Thực tiễn ñó ñòi hỏi phát triển vùng trồng giảo cổ lam nguyên liệu phục vụ sản xuất và tiêu dùng Hiện tại ñã có nghiên cứu cơ bản

về kỹ thuật trồng trọt giảo cổ lam bên cạnh các nghiên cứu về thành phần hóa học và tác dụng dược lý Tuy nhiên, một vấn ñề quan trọng là việc phân ñịnh ñặc ñiểm thực vật học và ñánh giá năng suất, chất lượng của các giống giảo

cổ lam chưa ñược quan tâm, do ñó chưa ñưa ra ñược khuyến cáo sử dụng giống nào phục vụ sản xuất cho năng suất cao và ñảm bảo chất lượng

ðể góp phần giải quyết vấn ñề trên chúng tôi tiến hành thực hiện ñề tài

“Nghiên cứu ñặc ñiểm thực vật học của các giống giảo cổ lam và ảnh hưởng của phân bón ñến năng suất giảo cổ lam.”

1.2 Mục ñích và yêu cầu của ñề tài

1.2.1 Mục ñích

- So sánh ñặc ñiểm thực vật học các mẫu giống, ñánh giá các tính trạng ñặc trưng phân biệt của các giống, tránh sự nhầm lẫn trong thu hái và sử

- Xác ựịnh công thức bón phân cho các mẫu giống giảo cổ lam ựạt năng suất cao

1.2.2 Yêu cầu của ựề tài

- So sánh, ựánh giá các tắnh trạng ựặc trưng của các mẫu giống, xác ựịnh giống giảo cổ lam chuẩn phục vụ sản xuất

- đánh giá ảnh hưởng của phân bón ựến sinh trưởng, phát triển

- Xác ựịnh công thức bón phân cho các mẫu giống giảo cổ lam ựạt năng suất cao

1.3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ựề tài

PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Vị trí phân loại, nguồn gốc, phân bố, ñặc ñiểm thực vật học của 1 số loài cây thuốc có tên "Giảo cổ lam"

Một số loài cây thuốc có tên "Giảo cổ Lam" thuộc chi

Gynostemma Blume thuộc họ Bầu bí - Cucurbitaceae, bộ Bầu bí -

Cucurbitales, phân lớp Sổ - Dilleniidae, lớp hai lá mầm - Magnoliopsida, ngành hạt kín - Magnoliophyta

2.1.1 Giới thiệu chi Gynostemma Blume

Gynostemma Blume bao gồm những cây thân thảo, hoa ñơn tính khác gốc, thân leo mảnh, nhẵn hoặc hơi có lông mịn có từ 3-5 lá chét, tua cuốn chẻ

2 Cụm hoa ñực thành chùy mảnh rất dài, nhiều hoa Hoa nhỏ, hình sao, ống bao hoa ngắn, cánh hoa rời nhau.Hoa thức của hoa ñực: *♂K5C5A(5)

Cụm hoa cái tương tự cụm hoa ñực nhưng dài hơn Chứa 2 noãn Vòi nhụy 3, ñầu nhụy 2-3 Hoa thức của hoa cái: *♀K5C5G2-3 Quả mọng chứa 2-3 hạt, hình tròn, không mở, ñường kính: 5-9mm Hạt hình tim, hơi dẹt và sần sùi Gồm 4-5 loài phân bố ở vùng nhiệt ñới châu Á và vùng Indonesia ở nước

ta có 2 loài.[20]

2.1.2 Giới thiệu loài Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino

Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino: Giảo cổ lam 5 lá, Cổ

yếm, Thư tràng hay còn gọi là “Ngũ diệp sâm”

Thuộc loài cây thân thảo mọc leo yếu Không có lông, vòi ñơn, lá kép

có cuống chung dài 3-4cm 5-7 lá chét, mép có răng cưa, dài 3-9 cm, rộng 1.5-3 cm Cây khác gốc, chùy hoa thòng, hoa nhỏ hình sao ống bao hoa rất ngắn C5 (cao 2.5mm) A(5) bao phấn dính thành ñĩa, bầu có 3 vòi nhụy Quả khô, tròn ñường kính 5-7mm màu ñen, có từ 2-3 hạt, treo, to 4mm có vân lăn

Phân bố ở Ấn ðộ, Xiri lanca, Mianma, Trung Quốc, Triều Tiên, Nhật Bản, Thái Lan, Lào, Việt Nam và bán ñảo Mã Lai

Ở Việt Nam cây mọc từ Lào Cai, Lạng Sơn, Quảng Ninh, Hòa Bình, Huế, Kon tum ñến ðồng Nai Cây mọc trên ñất ñá vôi, ñá hoa cương và ñất núi lửa, trong rừng thưa, lùm bụi từ vùng ñồng bằng ñến vùng núi cao 2000m.[20]

2.1.3 Giới thiệu loài Gynostemma laxum (Wall.) Cogn

Gynostemma laxum (Wall.) Cogn: Giảo cổ lam 3 lá, Cổ yếm lá bóng

Dây leo mảnh, gióng dài 10-20 cm, có lông mịn Vòi ñơn, 3 lá chét Lá giữa dài 10-12 cm, mỏng, mép lá có răng cưa nhọn, gân bên 5-7 ñôi Cây có hoa khác gốc Chùy hoa ñực dài 30cm, cánh hoa rời nhau, cao 3mm A(5) bao phấn dính nhau Quả tròn to 6-8 mm, màu lục vàng Hạt 2-3, hơi dẹt, kích

2.2 Thành phần hóa học, tác dụng và giá trị làm thuốc của cây Giảo cổ lam

2.2.1 Thành phần hóa học của cây Giảo cổ lam

Chi Gynostemma nổi tiếng với thành phần saponin trong ñó nhiều loại

saponin rất giống với thành phần saponin có trong nhân sâm, có tác dụng rất tốt cho sức khỏe về phòng ngừa và chữa bệnh Khi so sánh hàm

lượng saponin giữa một số loài cùng chi, loài G pentaphyllum ñược biết ñến với hàm lượng saponin cao nhất trong chi này, kế ñến là G pubescens và thấp nhất là G longipes [20] Thành phần hóa học chủ yếu của giảo cổ lam là

saponin và flavonoid Các saponin trong cây giảo cổ lam (còn gọi là

có nhiều hợp chất ñã ñược xác ñịnh có trong thành phần saponin trong nhân sâm và tam thất Ngoài ra, giảo cổ lam còn chứa các carotenoid, polysaccharid, sterol, các acid amin tan trong nước, nhiều vitamin và các nguyên tố vi lượng như Zn, Fe, Se [6]

2.2.2 Tác dụng và giá trị làm thuốc của cây giảo cổ lam

* Tác dụng của cây giảo cổ lam

+ Tác dụng giảm mỡ máu (triglycerid và cholesterol): giảo cổ lam ức chế tăng cholesterol 71% theo phương pháp ngoại sinh và 82,08% theo phương pháp nội sinh

+ Tác dụng tăng lực (nghiệm pháp chuột bơi): giảo cổ lam làm tăng lực 214,2%

+ Tác dụng bảo vệ tế bào gan: ñã chứng minh giảo cổ lam bảo vệ tế bào gan mạnh trước tác ñộng của các chất gây ñộc (CCL4) và làm tăng tiết mật + Tác dụng tăng ñáp ứng miễn dịch: giảo cổ lam làm tăng ñáp ứng miễn dịch tế bào khi chiếu xạ hoặc gây ñộc tế bào bằng hóa chất Cyclophosphamid + Tác dụng hạ ñuờng máu: giảo cổ lam có tác dụng hạ ñường huyết trên chuột nhắt trắng Trên chuột ñái tháo ñường di truyền, liều uống 500 mg/kg làm hạ ñường huyết 22%, liều 1.000mg/kg làm hạ tối ña tới 36% Trong nghiệm pháp dung nạp glucose ở chuột nhắt trắng, liều uống 1.000 mg/ kg ñã ức chế sự tăng ñường huyết tới 55% (sau 30 phút) và 63% (sau

60 phút) so với nhóm ñối chứng Giảo cổ lam gây hạ ñường huyết yếu trên chuột bình thường nhưng lại có tác dụng khá mạnh trên chuột có ñường huyết cao

Như vậy, ngoài cơ chế làm tăng tiết insulin, giảo cổ lam có thể còn làm tăng nhậy cảm của mô với insulin

+ Phòng ung thư: Tỷ lệ ức chế khối u từ 20 - 80%, phòng ngừa u hóa tế bào bình thường

+ Chống suy thoái tế bào: cho dịch chiết giảo cổ lam vào môi trường nuôi cấy tế bào da người, số lần tái sinh tăng từ 20 lên 27 lần, kéo dài tuổi thọ

tế bào 22,7%

- Tác dụng giảm cân: sau hai tháng dùng giảo cổ lam chỉ số BMI giảm từ 25,04 xuống còn 23,12 với P < 0,01 Như vậy, tác dụng giảm cân của giảo cổ lam là tương ñối mạnh, tuy nhiên giảo cổ lam chỉ làm giảm lượng mỡ dư thừa tích tụ ở vùng bụng, ñùi và nội tạng do tăng cường chuyển hoá mỡ nhưng lại làm tăng trọng lượng cơ bắp nên chỉ giảm cân tốt ở những người béo

- Tác dụng tăng lực: giảo cổ lam làm tăng lực co cơ tới 11,11kg; cao hơn hẳn Quercetin (1,8) và Phylamin (1,7) Tác dụng này phù hợp với mục ñích dùng giảo cổ lam cho các vận ñộng viên thi ñấu ñể nâng cao thành tích ở Nhật Bản và Trung Quốc (còn ñược gọi là doping thiên nhiên)

- Tác dụng trên huyết áp: sau hai tháng ñiều trị bằng giảo cổ lam, huyết

áp trung bình của các bệnh nhân giảm từ 113, 765 xuống còn 97, 868

- Tác dụng giảm mỡ máu: giảo cổ lam làm hạ mỡ trong máu tới 20%, ñặc biệt làm giảm LDL (Cholesterol xấu) 22%

- Tác dụng bảo vệ gan: 100 bệnh nhân bị viêm gan B dùng giảo cổ lam trong hai tháng ñã cải thiện rõ rệt tình trạng bệnh

- Các triệu chứng cơ năng khác: ñau ñầu, thiếu máu não, ñau tức ngực, choáng ngất, mệt mỏi ñều ñược cải thiện rất tốt Về ăn, ngủ, ñại tiểu tiện ñều

có cải thiện tốt hơn (bệnh nhân dễ ngủ hơn, ngủ sâu giấc, ăn ngon miệng, hạn chế số lần ñi tiểu trong ñêm, hết táo bón) [2]

* Công dụng(giá trị làm thuốc) của cây giảo cổ lam

Theo kinh nghiệm dân gian và kết quả thực tế sử dụng tại Trung Quốc cho thấy, trà giảo cổ lam có tác dụng chính như sau:

- 3 giúp: giúp ngủ ngon, giúp khoẻ mạnh, giúp tiêu hoá

- 3 giảm: giảm mệt, giảm béo, giảm căng thẳng

- 6 tốt: ăn ngon cơm, nhuận tràng, ngủ ñược, tăng khả năng làm việc, kéo dài tuổi thanh xuân, mau lại sức

Theo nghiên cứu của các nhà khoa học Nhật Bản và các nhà dược học Việt Nam thực hiện tại các phòng thí nghiệm, tại các giường bệnh của bệnh viện y học cổ truyền Trung ương, dịch chiết cây giảo cổ lam thu hái ở Việt Nam có các tác dụng sau:

- Hạ cholesterol máu, làm giảm cholesterol xấu trong máu và làm tăng cholesterol tốt trong máu, giúp duy trì huyết áp ổn ñịnh

- Phòng chống ung thư: Tỷ lệ ức chế khối u lên ñến 20-80% phòng ngừa sự u hoá tế bào bình thường

- Chống lão hóa: Cho chế phẩm vào môi trường nuôi cấy, số lần tái sinh của tế bào da người tăng từ 22 ñến 27 lần, kéo dài tuổi thọ 27.7% Chế phẩm có khả năng bảo vệ tế bào gan rất tốt, chống lại các gốc tự do trong

cơ thể

- Làm tăng lưu lượng ñộng mạch vành, giảm trương lực thành cơ tim, giảm các cơn ñau tim, có khả năng ñiều tiết hai chiều hưng phấn và chấn tĩnh làm tăng cường trí lực Chế phẩm còn làm tăng trương lực cơ bắp Giảo cổ lam làm hạ ñường huyết và duy trì sự ổn ñịnh của ñường huyết trong máu Làm tăng khả năng miễn dịch của cơ thể chống lại các tác nhân tấn công giảo cổ lam rất tốt trong những trường hợp bệnh mãn tính như gan nhiễm mỡ, hen, suy tim Các nghiên cứu về ñộc tính cấp, bán trường diễn ñều không thấy ở loài cây này chứng tỏ giảo cổ lam là loài thực vật an toàn tuyệt ñối với con người [18]

2.2.3 Bộ phận giảo cổ lam sử dụng làm thuốc

Bộ phân dùng của giảo cổ lam là thân và lá Vào mỗi năm khi mùa xuân ñến khi có ñiều kiện thuận lợi về nhiệt ñộ và ñộ ẩm, cây giảo cổ lam phát triển thân và lá mạnh, khi cây ñạt tiêu chuẩn thu hái, người ta tiến hành

thu hái dược liệu Sau khi thu hái ựem băm dược liệu với chiều dài 2 Ờ 3cm, phơi khô [9]

2.3 Những nghiên cứu về dược liệu ở trên thế giới và ở Việt Nam

2.3.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới

Cây thuốc ựược sử dụng ở các nước trên thế giới từ rất lâu ựời, cây thuốc là nguồn dược liệu ựể chế ra các loại thuốc mà các loại thuốc này chiếm 30% tổng giá trị thuốc trên toàn thế giới Nhu cầu sử dụng thuốc thảo mộc và dược liệu là rất lớn Trong những năm gần ựây thị trường thế giới về dược liệu diễn ra rất sôi ựộng Theo Tewari nghiên cứu về cây thuốc từ thảo mộc, sản phẩm y tế, dược phẩm, chất phụ gia dược phẩm và mỹ phẩm ngày càng tăng Thị trường chiếm 60 tỷ USD/năm và tăng với tỷ lệ 7% riêng với thị trường thuốc thảo mộc ựạt 20,3 tỷ USD, trên thực tế năm 2003 tăng gần 10%

so với năm 2000 [1], [3]

Theo thống kê của tổ chức lương thực thế giới FAO năm 1998 tổng diện tắch quế ựơn ở ựộ tuổi khai thác tại hai tỉnh Quảng đông và Quảng Tây của Trung Quốc khoảng 35.000 ha với tổng sản lượng là 28.000 tấn

Theo Chandrica Mago (The time of Indica News service 9/5/2000), Ấn

độ có thể trở thành quốc gia ựóng vai trò chắnh trên thị trường thế giới về xuất khầu nguyên liệu và thuốc từ thảo mộc

Năm 2003, Tổ chức Y tế thế giới (WHO) ựã tập hợp ý kiến ựóng góp

của 105 nước trên thế giới và thành lập ban biên soạn sách ỘHướng dẫn thực hành nông nghiệp và thu hái tốt ựối với cây thuốcỢ (WHO Guidelines on

good Agricultural and Collection Practices (GAP) for Medicinal Plants) Ban này bao gồm 31 nhà khoa học của nhiều nước có truyền thống sản xuất và sử dụng cây thuốc hàng ựầu trên thế giới như Trung Quốc, Ân độ, Nhật Bản, Cannada, Indonesia, Pakistan, đức cùng với sự hợp tác của nhiều tổ chức quốc tế như Tổ chức Nông Lương Liên Hợp quốc (FAO) Liên đoàn thuốc

vệ Giống cây trồng mới (UPOV), Quỹ Tài nguyên Quốc tế (WWF) vv mục tiêu của sách hướng dẫn ñể nhằm nâng cao chất lượng và quản lý chặt chẽ các sản phẩm thuốc ñược sản xuất từ cây con làm thuốc Sách bao hàm từ lĩnh vực trồng trọt, thu hái, sơ chế biến, bao bì, ñóng gói và bảo quản cho ñến sản xuất các sản phẩm thuốc phục vụ ñiều trị bệnh cho con người [27],[29]

Ngoài ra sách còn hướng dẫn các quốc gia hoặc các vùng sản xuất cây thuốc kỹ thuật sản xuất dược liệu theo các tiêu chuẩn ñược quy ñịnh rất chặt chẽ cho cả người sản xuất và người tiêu dùng

Sách khuyến khích và tư vấn các phương án trồng và thu hái bền vững cây thuốc cho chất lượng an toàn, sạch và tốt nhất trên cơ sở tôn trọng và ủng

hộ công cuộc bảo tồn tài nguyên cây thuốc và môi trường trên phương diện tổng thể Các hướng dẫn trên ñã ñề cập toàn diện, chi tiết các biện pháp kỹ thuật then chốt trong trồng, thu hái và sơ chế biến dược liệu như:

Xác ñịnh cây trồng: Cây thuốc ñược các nước sử dụng trên cơ sở ñúc

rút kinh nghiệm từ lâu ñời của dân tộc của ñất nước mình Vì thế ña số các loại cây thuốc ñược nhân loại biết ñến dùng ñể chữa một số bệnh là thống nhất Nhưng cũng có một số cây thuốc ở nước này, dân tộc này dùng ñể chữa một bệnh, thì nước khác, dân tộc khác lại dùng ñể chữa bệnh khác (Tuy nhiên

có một số thay ñổi trong thu hái và chế biến) do ñó việc cần thiết ñầu tiên là phải chọn ñúng cây thuốc ñể chữa bệnh là hết sức quan trọng Chọn ñúng cây thuốc theo kiến thức Y học Cổ Truyền vẫn chưa ñủ mà còn phải xác ñịnh rõ ràng tên khoa học, loài, thứ, bộ, họ thực vật vv cũng cần ñược xác ñịnh ñánh giá rõ ràng Và sau cùng là xác ñịnh ñúng giống cây thuốc cần trồng mà con người ñã thuần hóa hay chọn tạo ra [7], [8]

Hạt giống hoặc các vật liệu nhân giống: Hạt giống cây thuốc hoặc các

vật liệu nhân giống như cành, thân, hom, rễ, hạt phấn vv cũng cần ñược xác ñịnh và cung cấp ñầy ñủ thông tin trước lúc ñưa vật liệu nhân giống ra sử

Chọn ñiểm trồng: Trên thực tế cùng một loại cây thuốc, cùng một

giống cây thuốc nếu trồng ở các ñịa ñiểm khác nhau sẽ cho chất lượng sản phẩm khác nhau ðịa ñiểm trồng phải là nơi khí hậu ñiển hình thích nghi tối

ưu với từng loại cây thuốc ðịa ñiểm trồng phải xa các khu công nghiệp lớn, ñặc biệt khu công nghiệp hóa chất, các trung tâm dân cư ñông ñúc, các bệnh viện, ñường giao thông, các khu chăn nuôi gia cầm và gia súc ðịa ñiểm và ñất trồng không phải là bãi chăn thả gia cầm, gia súc và không ñược gần khu nghĩa trang, bãi tha ma [19]

Nước tưới: Nước tưới cần kiểm soát chặt chẽ cả về mặt khối lượng

cũng như chất lượng Khối lượng ñược ño bằng mức ñộ cần thiết của cây trồng và chất lượng là không làm ô nhiễm môi trường xung quanh và chất lượng dược liệu Nước tưới không chứa các yếu tố gây ô nhiễm ảnh hưởng ñến chất lượng dược liệu như nước tưới không là nước thải của các khu công nghiệp lớn, nước thải bệnh viện, khu dân cư Nước không chứa các hóa chất, khoáng chất và vi sinh gây ô nhiễm, không chứa các kim loại nặng, các loại thuốc bảo vệ thực vật, thuốc trừ cỏ, các chất kích thích ñiều hòa sinh trưởng quá giới hạn cho phép Nước tưới cũng không có các kim loại nặng, các chủng vi sinh vật gây hại ñến sức khỏe con người cũng như hàm lượng Nitrat trong nước quá cao

Bảo vệ thực vật ñối với cây thuốc: Muốn có năng suất cao, giá trị

thương phẩm của dược liệu tốt, mỗi khi cây thuốc bị sâu bệnh phá hoại cũng rất cần sử dụng các loại thuốc phòng trừ sâu, bệnh, nấm và cả tuyến trùng ñể phòng và ñiều trị, nhưng dùng như thế nào? các loại thuốc gì có thể sử dụng ñược, cách phun thuốc phòng trừ sâu bệnh và ñặc biệt thời gian cách ly giữa thời ñiểm phun và thời ñiểm thu hoạch dược liệu Lượng tồn dư của các loại thuốc bảo vệ thực vật cho phép trong dược liệu là bao nhiêu? Tất cả vấn ñề ñó nhất thiết phải có những nghiên cứu ñể xác ñịnh Sử dụng các loại thuốc bảo

nếu hóa chất cần thận trọng sử dụng các loại thuốc ít ñộc hại, thời gian phân hủy ngắn ñặc biệt không còn lượng tồn dư trong dược liệu khi dược liệu ñược thu hoạch

Thu hoạch và chế biến: Các phương pháp thu hái, sơ chế biến và bảo

quản dược liệu cũng cần ñược ñảm bảo vệ sinh Từ các loại dụng cụ, máy móc, bao bì, kho tàng phải ñược quy ñịnh cụ thể và tiêu chuẩn hóa Cây thuốc cần ñược thu hái trong ñiều kiện thời tiết tốt nhất như trời nắng, quang mây, không sương mù, ñộ ẩm không khí thấp, nhân lực dồi dào [5]

Yếu tố con người: Con người là yếu tố hết sức quan trọng, ngoài các

ñiều kiện tự nhiên xã hội, kỹ thuật vv thì yếu tố con người vẫn ñược tổ chức

y tế thế giới nhìn nhận là hết sức quan trọng Muốn nguyên tắc GAP ñược thực hiện ñầy ñủ trước hết nhận thức của các nhà lãnh ñạo và của cả những chuyên gia, những cán bộ công nhân viên tham gia trong quá trình sản xuất dược liệu theo nguyên tắc GAP phải ñược thấm nhuần Công nghệ là kỹ thuật then chốt nhưng thiếu nó chúng ta có thể ñào tạo, học hỏi còn nhận thức của con người thì không dễ gì thay ñổi Tất cả các cá nhân, chuyên gia tham gia vào quá trình trồng, chế biến và bảo quản dược liệu sạch trước hết phải tôn trọng và hiểu biết vấn ñề vệ sinh ðiều kiện vệ sinh phải ñược ñảm bảo, từ những thiết bị bảo hộ lao ñộng như khẩu trang, mặt nạ, những dụng cụ lao ñộng cho ñến các hóa chất và các thao tác thuần thục trong công việc Nói tóm lại nhận thức và tư tưởng con người về vấn ñề GAP ñối với cây thuốc không bao giờ ñược xem nhẹ [30],[32]

Chế biến dược liệu: Bao gồm các chế biến sau thu hái, sơ chế biến,

phơi sấy, chế biến ñặc biệt, ñối với các loại dược liệu ñặc thù và mang tính cổ truyền sâu sắc Các thiết bị, dụng cụ phục vụ cho công tác chế biến dược liệu theo nguyên tắc của GAP cũng ñã ñược sách hướng dẫn ñề cập như: vị trí xây dựng nhà xưởng, tiêu chuẩn nhà xưởng ñể ñáp ứng yêu cầu của chế biến các

các tiêu chuẩn cụ thể cho ñến các khâu kỹ thuật chế biến dược liệu theo GAP, như khu rửa làm sạch dược liệu bằng tay, tiêu chuẩn ánh sáng các loại ñèn ñiện, công suất quạt ñiện v.v [31]

Sách hướng dẫn trồng, chế biến và thu hái dược liệu theo nguyên tắc GAP của TCYTTG là văn bản vừa mang tính pháp lý vừa mang tính kỹ thuật công nghệ hết sức quan trọng Mặc dù cuối năm 2003 sách hướng dẫn mới ñược ấn hành và phổ biến nhưng phần lớn các khâu kỹ thuật quan trọng, các ñiều kiện nghiên cứu cần thiết ñể xây dựng quy trình trồng và chế biến dược liệu sạch của

ñề tài mã số KC10-02 ñã ñược nêu ra ñể giải quyết từ những năm 2001

Văn bản thứ 2, mặc dù có phạm vi trên lãnh thổ một nước, Nước Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa, là một nước có truyền thống nghiên cứu, sản xuất

và sử dụng thuốc Y học Cổ Truyền lâu ñời nhất và rộng rãi nhất trên thế giới

ñó là Pháp lệnh quản lý thuốc Y học Cổ Truyền Nhà nước Cộng hòa Nhân dân Trung Hoa Bao gồm 10 chương, 57 ñiều, Chương I nói về yêu cầu chất

lượng thuốc Y học Cổ Truyền Trung Hoa ñể thỏa mãn ñiều kiện của nguyên tắc GAP cũng như các tiêu chuẩn GMP, GLP của Trung Quốc và thế giới Chương II quy ñịnh ñiều kiện sinh thái, môi trường và ñịa ñiểm, vị trí có thể trồng cây thuốc ñể sản xuất dược liệu Chương III, quy ñịnh về chủng loại chất lượng các loại vật liệu giống cây thuốc vv Lần lượt 10 chương và 57 ñiều của pháp lệnh ñều ñề cập các quy ñịnh, tiêu chuẩn chặt chẽ của quá trình sản xuất chế biến và bào chế thuốc Y học Cổ Truyền Trung Quốc theo các nguyên tắc GAP, GMP, GLP ðiều 42 quy ñịnh trước khi chuyển sang công ñoạn bao bì ñóng gói dược liệu cần kiểm tra ñể ñạt các tiêu chuẩn, không lẫn tạp chất, ñộ ẩm ở mức cho phép, tỷ lệ tro toàn phần, tỷ lệ tro không tan trong acide, hàm lượng hoạt chất ðặc biệt pháp lệnh ñã quy ñịnh chặt chẽ với dư lượng các loại thuốc bảo vệ thực vật, các kim loại nặng, tỷ lệ các vi sinh vật ảnh hưởng ñến sức khỏe của người sử dụng.vv phải ở mức cho phép hoặc

Văn bản thứ 3 quy ñịnh về chất lượng dược liệu ñược trồng và chế biến theo nguyên tắc GAP của Châu Âu (The European Agency for Evaluation of Medicinal Products (EMEA) Working Party on Herbal Medicinal Products (HMPWP) Văn bản quy ñịnh này ñược bắt ñầu soạn thảo bởi Văn phòng Châu Âu về ñánh giá chất lượng thuốc, nhóm làm việc về thuốc thảo mộc từ tháng 1/1999 và ñược hoàn thành vào tháng 5/2002 Cũng như các quy ñịnh của TCYTTG và của Trung Quốc về nguyên tắc GAP ñối với cây thuốc Quy ñịnh của Châu Âu cũng quy ñịnh và khuyến cáo 14 vấn ñề về trồng trọt, thu hái, chế biến và bảo quản cây thuốc và dược liệu Bắt ñầu văn bản bằng lời giới thiệu các vấn ñề bức xúc về chất lượng dược liệu trước tình hình ngày càng trầm trọng do môi trường, ñất, nước, không khí vv bị ô nhiễm Các vấn

ñề con người và giáo dục ñào tạo ñược Châu Âu quan tâm trước tiên cho ñến các vấn ñề, ñánh giá kiểm tra chất lượng dược liệu, nhà xưởng và trang thiết

bị, tư liệu hóa, hạt giống và các vật liệu nhân giống, kỹ thuật trồng trọt, thu hái và sơ chế biến, chế biến bao bì ñóng gói và kho tàng, phân phối và tiếp thị [24], [25], [26]

Tháng 9 – 2003, Nhật Bản cũng chính thức ràng buộc hệ thống trồng cây thuốc và chế biến dược liệu của mình bởi nguyên tắc GAP và theo ñó 11 mục quy ñịnh cụ thể ñã ñược phổ biến Là nước công nghiệp phát triển hàng ñầu thế giới nên Nhật Bản rất coi trọng vấn ñề vệ sinh trong mọi hoạt ñộng, ñời sống xã hội ñặc biệt là trong lĩnh vực thuốc và nguyên liệu làm thuốc Vì vậy trong quy ñịnh của Nhật Bản về nguyên tắc GAP cho cây thuốc, các biện pháp kỹ thuật và ñiều kiện ñể các biện pháp kỹ thuật ñáp ứng nguyên tắc GAP ñược quy ñịnh rất cụ thể và chi tiết Trong ñiều khoản nói về kỹ thuật trồng trọt việc chọn ñịa ñiểm ñể trồng cây thuốc ñược ñưa lên hàng ñầu và ñược hệ thống hóa các ñiều kiện rất rõ ràng ðất trồng không bị ô nhiễm, có ñiều kiện tưới tiêu nước thuận lợi Nước tưới không bị ô nhiễm bởi nước thải công

ñội, các nông trang, nông trại nuôi gia súc gia cầm Hay quy ñịnh diện tích trồng cây thuốc tuyệt ñối cấm chăn thả hoặc vô tình xâm phạm bởi các loại gia súc, gia cầm Quy ñịnh của Nhật Bản còn chi tiết ñến mức ñộ cây thuốc ñược trồng ở những diện tích mà ở ñó cỏ có thể mọc ñược Cỏ là cây chỉ thị cho ñiều kiện thích hợp ñể trồng cây thuốc [31]

Nói tóm lại cũng như Trung Quốc, Châu Âu, Nhật Bản ñã ñưa GAP vào nguyên tắc quy ñịnh ñể trồng và chế biến dược liệu một cách bắt buộc và

có cơ sở pháp lý nhằm nâng cao chất lượng dược liệu an toàn

2.3.2 Tình hình sản xuất và nghiên cứu cây thuốc ở nước ta

ơ

Theo những nghiên cứu của các nhà khoa học Việt Nam có gần 11.000 loài thực vật bậc cao có mạch, 800 loài rêu, 600 loài nấm và hơn 2.000 loài tảo, nhiều loài ñược sử dụng làm thuốc, trong ñó cây cỏ có vị trí quan trọng nhất về phần chủng loại cũng như giá trị sử dụng (Theo thống kê của GS Phan

Kế Lộc) Qua quá trình nghiên cứu tính cho ñến nay ñã có hơn 3.800 loài thực vật ñược dùng làm thuốc, một số cây thuốc quý ñã ñược nhân dân trồng trọt

và trở lên quen thuộc Ngoài sự phong phú về chủng loại, nguồn dược liệu Việt Nam còn có giá trị to lớn khi ñược sử dụng rộng rãi trong cộng ñồng ñể chữa nhiều chứng bệnh khác nhau, dưới dạng ñộc vị hoặc phối hợp với nhau

ñể tạo nêu các bài thuốc bổ ñã tồn tại và lưu truyền qua nhiều thế hệ Nhiều loại thuốc ñược chiết xuất từ dược liệu Việt Nam như Rutin, D.strophantin, berberin, palmatin, astermisin…bên cạnh ñó sản phẩm từ tinh dầu ñược sử dụng rộng rãi trong nước và xuất khẩu ra nhiều nước trên thế giới Xu hướng

ñi sâu nghiên cứu xác minh các kinh nghiệm từ y học cổ truyến và tìm kiếm các hợp chất tự nhiên có hoạt tính sinh học cao ñể làm thuốc từ dược liệu ngày càng ñược quan tâm [10], [14], [15]

Trong những năm gần ñây tình hình sản xuất nông nghiệp của nước ta

có nhiều thay ñổi về cả diện tích và chủng loại cây trồng nói chung và cây

Yên, Hà Nội… nhưng do áp dụng thâm canh, luân canh cây trồng và sự gia tăng diện tích ở các vùng khác nên nguồn dược liệu cung cấp từ trồng trọt vẫn tương ñối cao và ñáp ứng ñược phần nào nhu cầu sử dụng trong nước và xuất khẩu ñược cho một số nước trên thế giới Hàng năm từ nguồn thu nhập từ dược liệu cho nước ta từ 500 - 800 tỷ ñồng trong ñó dược liệu xuất khẩu ñạt

20 - 50 triệu USD với số lượng 5.000 - 10.000 tấn Hiện nay ngành Dược Việt Nam ñang quy hoạch xây dựng phát triển công nghiệp dược theo yêu cầu GMP cung cấp ñược 50% nhu cầu thuốc nam cho nhân dân vào năm 2005 và 70% vào năm 2010 [11] [13]

2.4 Kĩ thuật trồng và chăm sóc các giống Giảo cổ lam

2.4.1 Chọn vùng trồng

Căn cứ vào ñiều kiện sinh thái và kết quả bước ñầu nghiên cứu về vùng trồng giảo cổ lam có thể xác ñịnh: giảo cổ lam có thể trồng ñược ở những vùng núi cao (từ 300 ñến 3.000m so với mặt nước biển) có ñiều kiện khí hậu mát mẻ, nhiệt ñộ trung bình từ 15 - 25oC, ñộ ẩm không khí 70 - 95%, ñất giữ

ẩm và thoát nước tốt

* Chọn ñất trồng

ðất trồng Giảo cổ lam ñể lấy sản phẩm dược liệu phải ñảm bảo các ñiều kiện sau:

- ðất trồng phải sạch, không ô nhiễm môi trường

- Khu trồng không gần nơi ñổ rác thải của khu dân cư, khu công nghiệp, không gần nghĩa trang…

- ðất trồng không chứa các chất tồn dư ñộc hại như thuốc trừ sâu, kim loại nặng

2.4.2 Giống

Giảo cổ lam ñược nhân giống chủ yếu bằng 2 phương pháp:

- Nhân giống bằng hạt

2.4.3 Thời vụ trồng

Thời vụ trồng giảo cổ lam tốt nhất là từ tháng 2, tháng 3 Vì ở thời ñiểm này, thời tiết mát mẻ, ñộ ẩm không khí và ñộ ẩm ñất rất cao, phù hợp cho cây sinh trưởng và phát triển Ngoài ra, trồng vào tháng 2, tháng 3 thì thời ñiểm thu hoạch vào khoảng tháng 6, tháng 7, là những tháng có nhiều nắng, rất thuận lợi cho việc thu hoạch và phơi khô sản phẩm ðể có cây giống trồng vào tháng 2 thì nên giâm cành trong vườn ươm từ tháng 1

2.4.4 Kỹ thuật làm ñất và lên luống

Tiến hành cày bừa kỹ, làm ñất tơi xốp, làm sạch cỏ dại Sau khi làm ñất thì tiến hành lên luống Luống cao khoảng 20cm, rộng 60-70cm, chiều dài tùy theo chiều dài của ruộng trồng

2.4.5 Phân bón và kỹ thuật bón phân

Lượng phân bón cho một ha:

Kết quả nghiên cứu lượng phân bón cho 1 ha cho 1 vụ như sau:

- Bón 15 tấn phân chuồng : 400kg N : 300kg P2O5 : 200kg K2O: thu ñược 6.5tấn dược liệu khô

Phương pháp bón phân

- Bón lót toàn bộ lượng phân chuồng và phân lân

- Bón thúc: Lượng ðạm và Kali còn lại chia làm 6 lần bón

+ Lần 1: Bón sau khi trồng 20 ngày

2.4.6 Mật ñộ, khoảng cách, và kỹ thuật trồng

* Mật ñộ, khoảng cách trồng

Giảo cổ lam là cây thân bò, thời ñiểm thu hoạch phụ thuộc vào ñộ dày của các lớp giảo cổ lam Mật ñộ giảo cổ lam càng dày thì càng nhanh ñược thu hoạch, tuy nhiên nếu mật ñộ giảo cổ lam quá dày sẽ ảnh hưởng ñến hiệu suất quang hợp,

vì thế sẽ ảnh hưởng ñến năng suất dược liệu giảo cổ lam Qua nghiên cứu, mật ñộ giảo cổ lam phù hợp là 200 cây/1m2 với khoảng cách 5cm x 10cm

2.4.7 Chăm sóc và quản lý ñồng ruộng

- Làm cỏ: thường xuyên làm sạch cỏ dại, kết hợp với các lần bón phân

- Tưới nước: giảo cổ lam là cây ưa ẩm, do vậy cần phải chú ý ñến việc tưới nước giữ ẩm ñất cho cây sinh trưởng, phát triển thuận lợi

- Thoát nước: giảo cổ lam không chịu ñược úng, vì vậy cần tháo nước ngay cho cây sau những ñợt mưa to kéo dài

- Sau mỗi vụ thu cây, nên tiến hành bón lót ngay cho cây

2.4.8 Phòng trừ sâu bệnh

- Sâu ban miêu: xuất hiện gây hại từ tháng 6 ñến giữa tháng 7 Tốc ñộ phá hủy cây rất nhanh Nên tiến hành thu cây trước ñợt xuất hiện của sâu, hoặc dùng tay bắt

- Chưa thấy xuất hiện bệnh hại trên cây giảo cổ lam

2.4.9 Thu hoạch, bảo quản và chế biến

Việc thu hoạch giảo cổ lam làm dược liệu cần dựa trên 2 yêu cầu ñó là:

ðể ñạt ñược yêu cầu ñó, khi thu hoạch giảo cổ lam phải chú ý những yếu tố sau:

- Tránh thu cây sau những ñợt mưa dài, khi ñó hàm lượng hoạt chất sẽ rất thấp

- Nên thu cây vào những ngày nắng to, ñể ñảm bảo dược liệu có màu sắc ñẹp

- Không ñược thu cây sau khi bón phân, vì như vậy sẽ còn tồn dư ñạm nitrat trong dược liệu, ảnh hưởng ñến chất lượng dược liệu Nên thu hoạch sau khi bón phân ít nhất 3 tuần

* Bảo quản

- Dược liệu sau khi ñược phơi khô (ñộ ẩm ñạt khoảng ≤ 13%) thì ñược ñóng vào tải nilon, khâu bao dứa bảo quản bên ngoài Trong quá trình vận chuyển tránh làm rách bao dứa và bao nilon, làm dược liệu hút ẩm, gây mốc, ảnh hưởng ñến chất lượng dược liệu

- Bảo quản tốt nhất là ở trong kho lạnh

PHẦN III ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 ðối tượng nghiên cứu

Các mẫu giống giảo cổ lam ñược thu thập ở các ñịa phương, vùng sinh thái khác nhau

Kiểu hình Các mẫu giống ðịa ñiểm thu thập

Các loại phân hữu cơ thu thập tại ñịa phương, các loại phân vô cơ bón gốc và bón lá

3.2 Nội dung nghiên cứu

- ðặc ñiểm hình thái giải phẫu của các mẫu giống

- Năng suất của các mẫu giống

- Tác ñộng của các công thức bón thúc ñến năng suất và ñộ an toàn nitrat của thảo dược giảo cổ lam

3.3 ðịa ñiểm nghiên cứu

Các thí nghiệm về năng suất, phân bón, thu hái, sơ chế ñược triển khai tại Trạm nghiên cứu trồng cây thuốc Sa Pa

Các thí nghiệm về hình thái giải phẫu thực vật ñược triển khai tại bộ môn thực vật- khoa Nông học trường ðại học nông nghiệp Hà Nội

3.4 Thời gian nghiên cứu

Thí nghiệm ñược thực hiện từ tháng 04 năm 2011 ñến tháng 04 năm

2012

3.5 Phương pháp nghiên cứu và bố trắ thắ nghiệm

Các mẫu giống giảo cổ lam ựược nhân vô tắnh và trồng ựể theo dõi các thắ nghiệm

Thắ nghiệm 1: Nghiên cứu ựặc ựiểm hình thái giải phẫu thực vật các mẫu giống giảo cổ lam

Phương pháp nghiên cứu:

- Thu thập và xử lý mẫu theo phương pháp nghiên cứu ựa dạng thực vật về thành phần loài

- Phân loại thực vật theo phương pháp hình thái so sánh và phương pháp giải phẫu

- Phương pháp làm tiêu bản giải phẫu ựược thực hiện theo các bước như

xử lý mẫu, cắt tiêu bản, nhuộm kép, quan sát, chụp ảnh trên kắnh hiển vi Phân tắch giải phẫu cấu tạo các bộ phận sinh dưỡng: thân, lá, rễ và các bộ phận sinh sản: hoa, quả, hạt

Thắ nghiệm 2: đánh giá năng suất các mẫu giống giảo cổ lam

Các mẫu giống giảo cổ lam thu thập, trồng trọt theo quy trình của Viện Dược Liệu

Bố trắ thắ nghiệm:

Thắ nghiệm bố trắ theo kiểu ngẫu nhiên ựầy ựủ (RCB), mỗi công thức là một mẫu giống giảo cổ lam với 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại là 1 ô thắ nghiệm có diện tắch 5 m2

- Bố trắ thắ nghiệm:

Thắ nghiệm bố trắ theo kiểu ngẫu nhiên ựầy ựủ (RCB), mỗi công thức là một mẫu giống giảo cổ lam với 3 lần nhắc lại, mỗi lần nhắc lại là 1 ô thắ nghiệm có diện tắch 5 m2

Các công thức

Công thức Các mẫu giống ðịa ñiểm thu thập

Sơ ñồ bố trí thí nghiệm:

Dải bảo vệ

Bón lót 500 kg + 20 kg NPK/sào Sau khi cây bén

rễ hồi xanh bón 2kg ureae +14ml NEB26 /sào 3 tuần

1 lần.ngừng bón trước thu hoạch 20 ngày Sau thu hái bón bổ sung 10 kg NPK (thành phần phân bón

Bón lót 500 kg + 20 kg NPK/sào Sau khi cây bén

rễ hồi xanh sử dụng phân bón lá phun 2 tuần 1 lần Ngừng phun trước thu hoạch 20 ngày (thành phần dinh dưỡng phân bón lá ñầu trâu 502 – tỷ lệ % N-

P2O5-K2O: 30,0-12,0-10,0; Ca: 0,05; Mg: 0,05; Zn: 0,05; Cu: 0,05; Fe: 0,01; B: 0,02; Mn: 0,01; Mo: 0,001; PenacP: 0,002; Gibberelin: 0,002; αNAA: 0,002; βNOA: 0,002)

Lượng phân bón cho 1 Sào bắc bộ: Phân chuồng

500 kg + 12 kg N + 7kg P2O5 + 3 kg K2O hay (500kg phân chuồng + 23 kg ñạm urê + 35 kg supe lân + 6 kg kali clorua) Cách bón:

- Bón lót: Toàn bộ lượng phân chuồng + toàn bộ supe lân trước khi trồng

- Bón thúc: Lượng ðạm và Kali còn lại chia làm

6 lần bón + Lần 1: Bón sau khi trồng 20 ngày + Lần 2: Bón sau trồng 40 ngày + Lần 3: Bón sau trồng 60 ngày + Lần 4: Bón sau trồng 80 ngày + Lần 5: Bón sau trồng 100 ngày + Lần 6: Bón sau trồng 120 ngày (1) Là phân ngâm từ phân hữu cơ hoai mục + cành lá các loại cỏ dại thân thảo

- Nhân tố phụ là các mẫu giống giảo cổ lam

G9P1 G9ðC G9P3 G9P2

Dải bảo vệ

3.6 Các chỉ tiêu theo dõi

3.6.1 Theo dõi các ñặc ñiểm hình thái học thực vật

A Các chỉ tiêu về ñặc ñiểm hình thái, giải phẫu Rễ

- Số lượng bó dẫn

- Số mạch gỗ trên một bó dẫn

- Kích thước libe: dày, rộng

- Kích thước gỗ: dày, rộng

B Các chỉ tiêu về ñặc ñiểm hình thái, giải phẫu thân

- Chiều dài ñốt thân : mỗi mẫu giống tiến hành ño trên 5 cây, mỗi cây ño 3

ñốt trưởng thành rồi lấy giá trị trung bình

- ðường kính thân

- Kích thước hậu mô

- Kích thước cương mô

- Kích thước lá chét giữa: dài, rộng

- Chiều dài cuống

D Các chỉ tiêu về ñặc ñiểm hình thái, giải phẫu Hoa

- ðường kính hoa

- Kích thước ñài hoa: dài, rộng

- Kích thước tràng hoa: dài, rộng

- Kích thước nhị: dài chỉ nhị, bao phấn

- Kích thước bầu hoa(ñối với hoa cái): chiều cao, ñường kính bầu

E Các chỉ tiêu về ñặc ñiểm hình thái, giải phẫu Quả và hạt

- Màu sắc quả

- ðường kính quả

- ðặc ñiểm, màu sắc hạt

- Kích thước hạt

3.6.2 Theo dõi các chỉ tiêu nông học

- ðộng thái biến ñộng nhánh các cấp/ cây Theo dõi số liệu 20 ngày 1 lần tính từ thời ñiểm trồng cây

- Diện tích lá (m2 lá/m2 ñất): ðược xác ñịnh theo phương pháp cân nhanh vào 4 thời kỳ (ðo ñếm trên cùng mẫu xác ñịnh khả năng tích lũy chất khô)

 30 ngày sau trồng

 60 ngày sau trồng

 90 ngày sau trồng

 Trước khi thu hoach

- Cách làm: mỗi tháng lấy 5 ô tiêu chuẩn (mối ô diện tích 0,25 m2) ngẫu nhiên trong ô thí nghiệm theo phương pháp 5 ñiểm chéo góc, rồi cắt 1 tấm kính

có diện tích 1dm2 sau ñó lấy lá ở các vị trí trên các cành trong ô cắt sao cho ñúng bằng tấm kính ñem cân số lá ñó ta ñược khối lượng 1dm2 lá và ký hiệu là PA, các

ô ñều làm tương tự như vậy Sau ñó cân toàn bộ số lá của ô tiêu chuẩn và cộng thêm khối lượng của 1dm2 lá ñã cân, ñược trọng lượng là PB Cuối cùng tính chỉ

số diện tích lá theo công thức sau:

PB Chỉ số diện tích là =

- Khoảng cách giữa các lứa thu hái (ngày)

- Tỷ lệ tươi/khô của dược liệu

- Năng suất tính theo ô tiêu chuẩn (kích thước ô tiêu chuẩn 50 cm x 50cm tương ñương diện tích 1 ô 0.25m2, mỗi ô thí nghiệm thu theo ñường chéo 5 ñiểm)

- Năng suất lý thuyết (tấn/ha) = năng suất ô tiêu chuẩn x4x 10.000 m2

- Năng suất thực thu (tấn/ha)

- Kiểm tra nhanh hàm lượng nitrat ở các mẫu cần phân tích

- Mỗi ô thí nghiệm theo dõi 10 cây, lấy mấu ngẫu nhiên theo ñường chéo

PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 4.1 ðặc ñiểm hình thái và giải phẫu các mẫu giống giảo cổ lam

4.1.1 ðặc ñiểm hình thái, giải phẫu và kích thước các cơ quan sinh dưỡng

Giảo cổ lam là một loại dược liệu quý mà bộ phận ñược sử dụng ñể làm thuốc là thân và lá, do vậy sự sinh trưởng phát triển của thân và lá chính là yếu tố cấu thành nên năng suất cũng như chất lượng của dược liệu Tuy nhiên, giảo cổ lam cũng như các loại cây trồng khác, sự sinh trưởng phát triển cũng như năng suất hay chất lượng sản phẩm thu hoạch còn phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: giống, dinh dưỡng, khí hậu ñể góp phần phân biệt, giúp tìm ra mẫu giống giảo cổ lam có thể cho năng suất và chất lượng dược liệu cao nhất chúng tôi tiến hành phân tích và so sánh ñặc ñiểm giải phẫu của các mẫu

giống thu thập tại Sa pa - Lào cai

4.1.1.1 ðặc ñiểm giải phẫu và kích thước rễ

Bảng 4.1 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp 3 mẫu giống giảo cổ lam

Cấu tạo giải phẫu thứ cấp rễ của các mẫu giống Giảo cổ lam nghiên cứu

có từ 3-4 bó dẫn thứ cấp Qua bảng số liệu 4.1 cho thấy: ñộ dày libe của các mẫu giống dao ñộng trong khoảng từ 59,03 µm ñến 76,22 µm trong ñó mẫu

5 lá chét có ñộ dày libe lớn nhất (76,22 µm) và mẫu 9 lá chét có ñộ dày libe là nhỏ nhất(59,03 µm) ðộ rộng libe của các mẫu giống dao ñộng trong khoảng

từ 347,22 µm ñến 404,17 µm trong ñó mẫu 7 lá chét là rộng nhất (404,17 µm)

và mẫu 5 lá chét là hẹp nhất (347,22 µm)

ðộ dày gỗ của các mẫu giống tương ñối ñồng ñều, dao ñộng từ 314.76

µm ñến 338.19 µm Lớn nhất là ở mẫu 7 lá chét (338,19 µm)và nhỏ nhất ở mẫu 5 lá chét(314,76 µm) ñộ rộng của gỗ biến ñộng theo ñộ dày, lớn nhất ở mẫu 7 lá chét (404,17 µm) và nhỏ nhất ở mẫu 5 lá chét (341,32 µm).từ số liệu thu ñược chúng tôi thấy kích thước gỗ ở rễ của mẫu 7 lá chét là lớn nhất và kích thước gỗ của mẫu 5 lá chét là nhỏ nhất

Số lượng mạch gỗ của các mẫu khoảng từ 27 ñến 30 nhiều nhất ở mẫu 7 lá

chét với trung bình số mạch là 29,22 và ít nhất ở mẫu 5 lá chét với trung bình

Mạch gỗ Libe Gỗ

Bó Mạch Hình 1 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 5 lá chét

Libe Mạch gỗ Gỗ

Bó Mạch Hình 2 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 7 lá ché

Gỗ Mạch gỗ Libe

Bó Mạch Hình 3 Cấu tạo giải phẫu rễ thứ cấp mẫu giống 9 lá chét