Phan tich du luong chat khang sinh trong thuc pham

Đại học Bách Khoa TP.HCM Khoa công nghệ Hóa Học Bộ môn Công Nghệ Thực Phẩm BÁO CÁO PHÂN TÍCH THỰC PHẨM CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH LƯỢNG DƯ THUỐC KHÁNG SINH TRONG THỰC PHẨM TP.HCM, 12/2011 Sinh viên thực hiện: 1. Vũ Minh Triết 60902903 2. Bùi Thiên Duy 60900368 3. Trần Tấn Lộc 60901467 4. Trương Đờ Kháng 60901168 Giảng viên hướng dẫn: TS. Vũ Ngọc Hòa Nội dung báo cáo tiểu luận - Giới thiệu tổng quan về chất kháng sinh - Các phương pháp xác định lượng chất kháng sinh trong thực phẩm - Biện pháp khắc phục lượng dư chất kháng sinh trong thực phẩm. I. Giới thiệu chất kháng sinh 1 Định nghĩa - Kháng sinh còn được gọi là trụ sinh là những chất có khả năng tiêu diệt vi khuẩn hay kìm hãm sự phát triển của vi khuẩn một cách đặc hiệu. Nó có tác dụng lên vi khuẩn ở cấp độ phân tử, thường là một vị trí quan trọng của vi khuẩn hay một phản ứng trong quá trình phát triển của vi khuẩn [1]. 2. Tác dụng của chất kháng sinh Được xem là phụ gia của thức ăn chăn nuôi gia sức và thủy hải sản - Làm thuốc chữa bệnh Penicillin G 3. Cơ chế tác động của chất kháng sinh Chất kháng sinh Penicilin Sulfamid Quinolon Cephalosporin Tetracyline Aminosid Macrolid Licosamid 4. Phân loại chất kháng sinh 5. Mặt trái của thuốc kháng sinh Tích tụ thuốc kháng sinh trong cơ thể động vật và con người Hiện tượng nhờn thuốc Kháng sinh cấm Chỉ tiêu kiểm tra Giới hạn phát hiện tối thiểu EU Mỹ Nhật Chloramphenicol Chloramphenicol (CAP) 0.3 ppb 0.3 ppb 0.5 ppb Malachite green/Leucomalachite green Malachite green / Leucomalachite green (MG/LMG) 2.0 ppb 2.0 ppb 2.0 ppb Furazolidone 3-amino-2-oxazolidone (AOZ) 1.0 ppb 1.0 ppb 1.0 ppb Furaltadone 5-methylamorfolino-3- amino-2-oxazolidone (AMOZ) 1.0 ppb 1.0 ppb 1.0 ppb Nitrofurantoin 1-aminohydantoin (AHD) 1.0 ppb 1.0 ppb 1.0 ppb Nitrofurazone Semicarbazide (SEM) 1.0 ppb 1.0 ppb 1.0 ppb 6. Các chất kháng sinh cấm và giới hạn sử dụng 7. Các chất kháng sinh thường gặp trong thực phẩm - Thuốc kháng sinh họ fluoroquinolone - Chloramphenicol - Penicillin - Sulfonamit [...]... Máy xay sinh tố 5 Phút Định mức lên 50ml bằng nước cất Đun cách thủy Sôi trong 10 Phút Li tâm, lấy nước trong 10ml clorofooc • 2 ml NaOH 1N • 4ml K2SO4.24H2O • 20 ml nước cất Phễu chiết Lắc 10 Ph, để yên 15 Ph Tách lấy tướng hữu cơ Phễu chiết Dung dịch nước Lắc 30 Ph, để yên 25 Ph  Pha dãy chuẩn Mẫu streptomycin sunphat nồng độ 1 mg/ml Dung dịch 0.1μg/ml Dung dịch 0.5μg/ml Dung dịch …μg/ml Dung dịch... chuẩn 3 Phân tích tồn dư kháng sinh nhóm Quinolone trong tôm bằng phương pháp ELISA Đối tượng: Tôm,… a Mẫu - Mẫu trắng: 5 kháng sinh thuộc nhóm quinolones gồm enrofloxacin, flumequin, norfloxacin, Ciprofloxacin và sarafloxacin ở dạng bột và đều là sản phẩm của SigmaAldrich - Mẫu gốc: 1 mg/ml: Hòa tan trong metalnon và NH4OH 2M Dung dịch dùng củng cố mẫu được pha loãng từ dung dịch gốc (1 mg/ml) bằng... 5g Mẫu 10 ml ethyl acetate 0,3 ml dung dịch n–hexane Ống li tâm 50 ml Lấy 7 ml lớp ethyl acetate phía trên Bình cô quay, bay hơi ethyl acetate Lắc trong vòng 5-10 phút 650C, Bình cô quay chân không Cặn 0,3 ml dung dịch PBST Trộn đều trong 1 phút Ống nghiệm 100 μl lớp dung dịch ở dưới đem xét nghiệm •Ly tâm: 5 phút / 4000 rpm / nhiệt độ phòng (20 – 25°C / 68 – 77°F) trong phòng kiểm nghiệm, hoặc bằng... %100 = X %100 Trong đó : o N là tổng số mẫu phân tích = N+ + N- o N+ là số mẫu thực sự dương tính (mẫu củng cố) o N- là số mẫu thực sự âm tính (mẫu trắng) o PA là số mẫu dương tính theo kết quả phân tích trong số N+ mẫu o FN là số mẫu âm tính theo kết quả phân tích trong số N+ mẫu o FP là số mẫu dương tính theo kết quả phân tích trong số N- mẫu o NA là số mẫu âm tính theo kết quả phân tích trong số N-... và đo mỗi mẫu 3 lần; + Lập đồ thị đường chuẩn theo hệ toạ độ D – C Trong đó D là mật độ quang của dung dịch mẫu chuẩn có nồng độ C tương ứng ; + Xác định nồng độ Cx của chất phân tích theo đường chuẩn đã dựng được e Tính kết quả Hàm lượng của streptomycin trong mẫu phân tích được tính theo công thức sau: Co = (Cx Tính bằng g/g.V) / a Trong đó:  a là lượng mẫu cân (ở đây a = 20 g)  V là thể tích pha... bao gồm 2 mẫu trắng và 2 mẫu củng cố của mỗi kháng sinh đại diện - Mẫu được chuẩn bị và tách chiết theo hướng dẫn kèm theo trong kít - Sau khi đọc giá trị OD (mật độ quang) của các giếng trên khay ở bước sóng 450 nm, kết quả được tính toán nhờ vào công thức thiết lập trên Microsoft Office Excel 2003 - Từ kết quả khẳng định khả năng nồng độ quinolone trong tôm e Kết quả Kết quả có được so với đường... cảo < Thuỷ sản tẩm bột < Thuỷ sản khô < Mắm thuỷ sàn - Lượng tinh bột có trong mẫu phân tích có ảnh hưởng đáng kể đến độ chính xác của xét nghiệm ELISA - Hàm lượng phát hiện là >0,3ppb Mức độ ảnh hưởng của nền mẫu tới kết quả của phép thử ELISA là khác nhau giữa các loại thủy sản khác nhau 2 Phương pháp xác định dư lượng kháng sinh streptomycin a Đối tượng: Chủ yếu là thịt gia súc như thịt heo,… b...II Phương pháp xác định hàm lượng chất kháng sinh 1 Phân tích hàm lượng Chloramphenicol trong thủy sản bằng kít elisa thông qua phân tích khẳng định bằng LC – MS/MS a Đối tượng: Tôm, cua, cá, ghẹ, hải sản,… b Dụng cụ Kit thử của các hãng R-Biopharm và TAPB Hệ thống LC-MS/MS... khẳng định khả năng nồng độ quinolone trong tôm e Kết quả Kết quả có được so với đường chuẩn f Kết luận - Kít có khả năng phát hiện tốt các kháng sinh thuộc nhóm quinolone được thử ở nồng độ 0,7 ppb - Khi áp dụng kít này để phân tích mẫu kiểm soát dư lượng kháng sinh thuộc nhóm quinolone, để có kết luận chính xác về nồng độ dư lượng và đặc biệt địnhdanh chính xác hợp chất quinolone, cần áp dụng các phương... mg/ml: Hòa tan trong metalnon và NH4OH 2M Dung dịch dùng củng cố mẫu được pha loãng từ dung dịch gốc (1 mg/ml) bằng nước cất Hỗn hợp methanol/PBS (50/50) pH 7,4 (dung dịch PBS pH 7,4 là hỗn hợp 9 gam NaCl, 7,78 gam Na2HPO4.2H2O và 0,75 gam KH2PO4 pha trong 1 lít nước cất) - Mẫu Phân tích Mẫu tôm tại các vị trí khác nhau Bỏ đầu và vỏ Nghiền đồng nhất bằng máy moulinex Lưu giữ ở âm 80°C b Dụng cụ Kít ELISA . Hòa Nội dung báo cáo tiểu luận - Giới thiệu tổng quan về chất kháng sinh - Các phương pháp xác định lượng chất kháng sinh trong thực phẩm - Biện pháp khắc phục lượng dư chất kháng sinh trong. kháng sinh Chất kháng sinh Penicilin Sulfamid Quinolon Cephalosporin Tetracyline Aminosid Macrolid Licosamid 4. Phân loại chất kháng sinh 5. Mặt trái của thuốc kháng sinh Tích tụ thuốc kháng sinh. nước cất Lắc 30 Ph, để yên 25 Ph Dung dịch nước  Pha dãy chuẩn Mẫu streptomycin sunphat nồng độ 1 mg/ml Dung dịch 0.1μg/ml Dung dịch 0.5μg/ml Dung dịch …μg/ml Dung dịch 2.5μg/ml Định mức 20ml