Khảo sát động thái lên men của chủng streptomyces sp t1 và streptomyces sp t4

DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chú thích       ! " ! # $! %&'( !) #*+ DANH MỤC $*, /0123425627381229:;<:2=12!)>1? @<A2B!!2C8!D88E!103F.GH I $*J KLM&(NOPQ R $*J-,KLST#(NOPQ ,U $*J-JK3VWX?TY8Z ,U $*J-[K3VWX?TY8 ,. $*[ M\*W]%VW],UVWX ,^ $*[-,-M\*_L*W`aTVWXP"YbaT La_WX"cde*/fNg ,G $*[-J-M\*%V,UNVWX JU $*[-[-CW`aThiPj]dYbaTLa_ klWX"cde*/fNg J. $*[-I-CW`aTd2PW`aTL_PQ JJ $*[-m-CW`aTd2P"YbYaTLa_ WX"cde*/fNg T[GXPY`JUn J[ $*[-^-CW`aToi%PW`aTL_ Jm $*[-G-CW`aToi%Pj]dYbYaTLa _WX"cde*/fNg T[GXPY`JUn J^ $*[-RKCW`aToi_PW`aT,a_ JG $*[ U-CW`aToi_P"YbYaTLa_ WX"cde*/fNg JR $*[ CW`aToT&PW`aTLa_  [, $*[ ,-CW`aToT&Pj]dYbaTL a_WX"cde*/fNg [J $*[ J-CW`aToPW`aTLa_ kl [I $*[ [-CW`aToP"YbYaTLa_ WX"cde*/fNg T[GPY`JUn [m $*[ I-M\*PQilPYaTa_! [G $*[ mKM\*PQilPYaTa_![ IU $*[ ^-M\*%&pdTq.Uf[ aTa_ ! I, $*[ G-M\*%&pdTq.Uf[ aTa_ ![ I, DANH MỤC HÌNH 2p[ M\*W]%VW],UVWX ,^ 2p[-,-M\**W`aTVWXPj]dYbaT La_WX"cde*/fNg ,R 2p[-J-CW`aThiPW` J. 2p[-[-M\**W`aThiP"YbYaTL a_WX"cde*/fNg J, 2p[-I-M\**W`aTd2PW`aT,a_ J[ 2p[-mKM\*aToi%PW` Jm 2p[-^KM\**W`aToi_PW`aT,a _ JR [R 2p[-G-M\*PQilPYaTa_! [R 2p[-RKM\*PQilPYaTa_![ I. 2p[ U-!"%LaTLa_PQ I, MỤC LỤC PHÂN 1: MỞ ĐẦU 1 r#s ,-!taYdYd-!.'YdYd-![&ia%aT dcuhTlv%ul!L1P , J-AwTaTs' , J AwTTl , J-,-AwTvx , PHẦN 2 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 3 , !j\Ts_ J , wT J , ,-"de'vde&%aT_vP J , J-rklaT_ [ , [-2pLg"Wy'#M&' [ , I-$'('vp'&'(aT_ I , m-rkL\LpTjT&g'i%M%*W`M\L pW`'YbYaT_ m , ^-3i%M%*W`M\LpW`'YbYaT_- ^ ,-,-WsVhPY ^ ,-, ?TlTe% G ,-,-,-<PY'sk\LpPY G ,-,-J-%M&l R ,-,-[-!o*dPY U ,-J-zbY&''i%QNO U ,-[-!j\Ts#*{V , ,-[ rkaT#*{V , ,-[-,-!pp_(|#*{V , ,-I-Md_(|#* I ,-I LPMd_(|#* I ,-I-,-!"%LaTLaMd G PHẦN 3 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 J !XT'TkPQ R J-,-hPQ R J-, %W]PQKaYdYd-!.'YdYd-![W] hTlv%#d R J-,-,-!M&'ST#(NO R J-,-J-3VWXPQ ,U J-J-6WdLdPQ ,. J-J 6WdLdvTlVWXPY"]d ,. J-J-,-6WdLdLL*W`aTLM%y*{W`aT a_ ,, J-J-J-6WdLdLL*W`aTLM%y*{YbY' "YbY ,, J-J-[-6WdLd_LM%*W`M*{W`dLkaT _ ,J J-[-<PYPM&8}2!~bYTN 'Md ,I J-I-6WdLdPQ"%L ,m J-m-6WdLdvTl#Td•]d ,m Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 [ 1PQvTlVWXPY"]d ,^ [-,-M\*i%M%*W`yW`'YbYaT,a_  JU [-, CW`aThiK JU [-,-,-CW`aTLd2 JJ [-,-J-CW`aToT& [. [-,-[-CW`aTo1 [I [-J-iLW`'j]dYYgTTYgdYTYaTLa _ [G [-[-M\**{%LaT,a_ I. [-I-M\*€hd%i#T I, KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 PHÂN 1: MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Vhl'TTdLkTSr&h' hPQ'TLLQNOV•yaTg Ts]"Lk%ysM\%Ne-h1T' Wy••hyS"Sg#]vdL kaTiLdd‚'TNW#]gg _ !Sg_y%W]#y'de&%`s• LLTg‚STc\Tlcƒ' #{W]aTLhL-r&h'*{TL* dQ#dSL(NOTWLYbYade]d#T de(g#L's]d#NW]L- h1T'iWyVhdgS'{V„i Tc\Tl-!PgLi{VT‚gTƒV seVxVWX#TNr•so#* {VWT\T_(|T_(|V‚L-2ƒMLT {Vs•ƒNeWeVxVWXg*W`y X%gQZYWXNe-h_(|#*qW]rT'vh t#eys&hdLdLTWKV#d…%…jTVgog &k !#*„&hdLd_(|Ps&#hge*W`_#y VWXLF.[H- !„{ƒeNvdLkaTTl†s VhdhTqS„&WyMyh&*hV WX‡WLdNOTl†'*#-3i%dW dLdTlWVh_(|#*V&•ƒ$TT hTXLMdlTh\*#*\TWM d0!fˆ!$g‰z8)>g W]QNO#iq-SSd y'v'VaTLMdS"'„LNOWh aT_S'dƒaTŠSMdlS*{ j]dLYbYde*_YbTgdYTbTgTTbT 1#Tc\TlaT_gW]vo|aTT 12f1!6gƒLWyN‹'`vdPVM'P . Qs'yiNKŒ*LiLPYaTaStreptomyces d-!.'Streptomycesd-!['`*_#Mdl(NO _(|#*{V•-yOPPQ*W`aTs hV#PW`'YbYaTLa_• {Th#\LpPYk%M&'Md l-s''W]vh'VŽSddƒ#yhe Th\**_#MdlgMdgLdQyP ƒ''TaT'{VS'MyQ#d#V xVWX'‹TLMT#- 1.2. Từ chủng Streptomyces sp. T1 và Streptomyces sp. T4 trong bộ chủng giống của phòng vi sinh vật – Viện Khoa học sự sống – Đại học Thái Nguyên f1PQW]VWXPY"]d#- f1PQW]LM%*W`M*{W`' *{YbYaTLa _Wd2ghigoi %goi_gvTlW]sh%Wk'rV%P M&PY- f1PQW]La_!.'![W`' YbY%#PVWXSoT&'o'- f1PQW]'pT€hd%i#"]d#k '#T- f1PQW]"%L„T,a_- 1.3. Ý nghĩa của đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học f?‚dPa%gh%MQql'PQ T- f$MW]dWdLdPQi#sTlg_(|'de "%hgLp&'i&LLTl- 1.3.2. Ý nghĩa thực tiễn f<'`Nk*_#Mdl_(|#*{V- , PHẦN 2 TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 2.1. Tổng quan về xạ khuẩn 2.1.1. Định nghĩa Actinomycetes 'iS Eubacteria de&%iqvP-2ƒM_iS?T NWgM"'%-S*{*s *dTj#\TlWYbY'L#LgNS ‚STcyPQTlglgVPd' VhdF,H- !Y‰TT -0-,UU. .T#S* ,R-UUUf ,-[UU-UUUƒ_gMRf[I•%F,.H- 2.1.2. Vị trí phân loại và sự phân bố của xạ khuẩn trong tự nhiên 'Sr&h-‚SV'T% SNpdS_WkSN]deLW#- p_S#‚eP€WlLgs TaT]‡ZWgPS'hl‚'# T'V]d|-de&%iqvP-%W] f} _.#WX y'h-!PVWXrT%_STK "'#-1s•S# W‡SWSporichthya •S"-?„T WX#Ss&'('Zl'&'(ƒ-1M&' (•&'TpW]l'T&'(T&'("-$'(`_ W]T`ƒi%Ykp'LL {-LŠ&'(Sk‘gSk_+gSk`NW]SgS klTlc L%&'('%T&' (SkPŽgSkdeL-LrkpL'#\T lM'P_F,H-     iyd  0&TYTg deyd Actinobacteridaeg  &i Actinomycetaleg&To.U&igJIlg U'.UUU'S[^G' J iStreptomyces'IUU'iLcW]_Md'_ MF,H- 2.1.3. Đặc điểm sinh học của xạ khuẩn ’rk|STaT_ iSNNW“g‚(NOWXgW]g T_„gdgdY's]d#„Lk'o T&g%Tg%TgT#Yg&iWgTT_g dYdk'o-!P*{#dOL#'V %T`L'gLaLT- 6ƒy_iSM"gWTgi%"WT hghi"]dW`',GuJU  -i"]d% y_NTi*[UuIU•gyd2*mgG u^gI-S*{YbY'L#LPW] QNOswvaTX%F^H- * KSJydK<ydZ'SN]&srgyd W%_%dgyd„TS#‚j- ’K !PVWX#rgh]aT_dLk ',Ki+e'VWXl'h]# #u&TYY yQ{aM'NNW“-3i dLkP&srl'h]""uTYT Y yQ{aM'*- 1s    •  S  h  ]    #  W  ‡  S    W   Sporichthya •Sh]"-Sh]"tT'h O*tT'hONNW“F^H- 2.1.4. Hình thái, kích thước và cấu tạo tế bào -2pLg"WyKT%_S#N]gL]M N"yT'Ss'+LTK+g'g eg"g_Lg 3'+aT_'irkde\Tl- WX"]aT_*tUg.fUgI”-Skde&hT ]LTK]"'h]lP&srVWX'&s r_gtedLT&'(-]#']+e 'VWX'hO#d#NNW“-3i%_ [ VS]"'•S]#g]''&sr_ •'SLT#s-<•S]"pW] #NxL'&iTZVWX- f#M&'K S#‚M&'WvL ?TNW-/Wy"kh(Sk#–L'dƒ"K !'M&'g'#gP#g#egLkd- !'M&'SM#NWygN'*.Uf,UgoSJydK<yd '•N'*mUf.,U0  gyd„TN'*IU0  gydN' *IU0  -!'M&'SLNONppN'&*h M&'-Ly#g'M&'_VQT_YbT' WQTsYbYTT'\LpTj#'\Lp k#\T'M&'-3'M&'#N'*IU' S#‚WvW'M&'#aTgLM&'V QT_YbTrg%y-1eVS#‚k pg•'„x+k'eVS'–hF^H- 2.1.5. Bào tử và sự hình thành bào tử của xạ khuẩn $'(_W]p'PLLdeSTaT "l'%&'(-e'\T*rW_ -!PŠ%&'(TJUu.UU&'(gVSk T  y  ,UU  &'  (  ‡  S    •  S  i  r  T  &'  (   Saccharomonosprora,  Microbispora - 2pL%&'(' pL&'('rk\Tl#de_FGH- %&'(aT_SspNLTWK ‘gW]SgN_+cgŠ&'(VdLkr_+ *SpSe-$'(p'oXP#*sN'aT %&'(Y,LMT+‚'WXSpOgTg ƒg\Ygy—d•r_•_pgSTrTdLkN''V- $'(_W]&T&l&`'dTTNY'dY yiN'*JUUf[UU0  T'Jyd-Lyd'L&'( „Li&#]aTsh*Whigd2˜2p N#‚Š&'('#‚'&'('„"W %j''rk\Tlde_-!P I [...]... khối khô thu được trong 20ml dịch của chủng Streptomyces sp T1 lên men trong môi trường Gause I là 7,56(mg), trong môi trường Gause II là 5,12(mg), trong môi trường ISP – 4 là 4,65(mg) và của chủng Streptomyces sp T4 trong môi trường lên men Gause I, Gause II , ISP – 4 lần lượt là 7,7 2(mg), 6,24(mg), 3,78(mg).Như vậy, lượng sinh khối khô thu được cao nhất của cả 2 chủng đều trong môi trường Gause I... hiện ở bảng 4.2 và hình 4.2 Bảng 4.2 Kết quả xác định ảnh hưởng của môi trường lên hoạt tính enzym của các chủng xạ khuẩn (đường kính vòng phân giải D-d, mm) Chủng xạ khuẩn T1 T4 Chủng xạ khuẩn T1 T4 Chủng xạ khuẩn T1 T4 Hoạt tính cellulase (đường kính vòng phân giải D-d, mm) Gause I Gause II ISP - 4 17 13 12 16 11 14 Hoạt tính amylase (đường kính vòng phân giải D-d, mm) Gause I Gause II ISP - 4 14 12... sánh trong môi trường Gause I thấy lượng sinh khối khô thu được của chủng Streptomyces sp T1 thấp hơn lượng sinh khối khô thu được của chủng Streptomyces sp T4 là 0,169(mg) Qua kết quả trên chúng tôi thấy môi trường Gause I thích hợp nhất cho cả 2 chủng sinh trưởng Kết quả lựa chọn môi trường nào thích hợp nhất làm môi trường lên men và môi trường sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo phụ thuộc trong... phẩm của quá trình trao đổi chất Công nghệ lên men gồm ba giai đoạn: (1) Giai đoạn nhân giống; (2) Lên men; (3) Thu hồi sản phẩm 8 2.2.1 Giai đọan nhân giống Giống xạ khuẩn tốt hay xấu sẽ ảnh hưởng trực tiếp lên quá trình lên men Nhân giống là đưa một số lượng vi khuẩn nhất định có trạng thái sinh lí nhất định vào môi trường nuôi cấy Nhưng do có yêu cầu về chất và lượng của chủng giống nên để cho chủng. .. II ISP - 4 13 9 10 11 8 9 29 Hình 4.2 Kết quả ảnh hưởng của môi trường lên sinh tổng hợp enzym của các chủng xạ khuẩn (đường kính vòng phân giải D-d, mm) 30 Kết quả trên bảng 4.2 và hình 4.2 cho thấy trong 3 môi trường lên men, dịch lên men ở cả 2 chủng xạ khuẩn nghiên cứu đều cho hoạt tính enzyme lớn nhất trong môi trường Gause I Từ kết quả này đã chứng tỏ các thành phần trong môi trường lên men có... Chất là chỉ trạng thái sinh lí của vi khuẩn giống, giống tiếp vào phải sinh trưởng mạnh mẽ, trao đổi chất mạnh Lượng bao gồm 2 mặt, thứ nhất là chỉ tỷ lệ giữa số vi khuẩn được tiếp giống với tổng số vi khuẩn cuối thời kỳ lên men, thứ hai là tỷ lệ so sánh giữa thể tích dịch giống và dịch lên men Lượng giống tiếp vào chiếm 1-10% là chỉ giá trị tỷ số giữa dịch giống và môi trường lên men Trong thực tế... cứ vào thực nhiệm và kinh nghiệm để xác định Vi khuẩn giống, môi trường, điều kiện công nghệ và giải pháp công nghệ không giống nhau nên lượng tiếp giống của nó cũng khác nhau Nhưng kinh nghiệm cho thấy rằng, trong một phạm vi nhất định, lượng tiếp giống nhiều hay ít không ảnh hưởng rõ rệt đến chu kỳ lên men và số lượng khuẩn trong đó 2.2.1.2 Môi trường lên men Trong công nghệ lên men, môi trường lên. .. trường lên men đóng vai trò quan trọng Một môi trường lên men tốt phải là môi trường vừa thuận lợi cho chủng xạ khuẩn sinh trưởng tốt vừa mang lại hiệu suất lên men cao.Vì vậy cần phải lựa chọn được môi trường tốt nhất đồng thời môi trường đó có bổ sung thêm các nguồn cacbon, nitơ, hàm lượng các chất khoáng phù hợp nhất [3] 2.2.2 Lên men và điều khiển quá trình lên men 2.2.2.1 Nhiệt độ và điều khiển... xác định ảnh hưởng của pH lên khả năng sinh trưởng của các chủng xạ khuẩn Dịch enzyme dùng để nhỏ vào các giếng thạch chứa môi trường cellulose, tinh bột và cazein để kiểm tra hoạt tính enzyme của các chủng xạ khuẩn 3.4 Lên men trên thiết bị Infors HT (Switzerland) và tạo chế phẩm Nhân giống cấp 1: Nhân giống trong môi trường Gause I dịch thể, nuôi cấy trong bình tam giác ở nhiệt độ và thời gian thích... enzyme của 2 chủng xạ khuẩn 4.2.1 Ảnh hưởng của nhiệt độ: Nhiệt độ là yếu tố rất quan trọng ảnh hưởng đến sự sinh trưởng và sinh enzyme Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ lên sinh trưởng của các chủng xạ khuẩn phụ thuộc vào kết quả lượng sinh khối khô thu được trong 20ml dịch môi trường thể hiện ở bảng 4.3, hình 4.3 Bảng 4.3 Kết quả sinh khối khô trong 20 ml dịch môi trường Chủng xạ khuẩn T1 T4 . 1#TcTlaT_gW]vo|aTT 12f1!6gƒLWyN‹'`vdPVM'P . Qs'yiNKŒ*LiLPYaTa Streptomyces d-!.' Streptomyces d-!['`*_#Mdl(NO _(|#*{V•-yOPPQ*W`aTs hV#PW`'YbYaTLa_• {Th#LpPYk%M&'Md l-s''W]vh'VŽSddƒ#yhe Th**_#MdlgMdgLdQyP ƒ''TaT'{VS'MyQ#d#V xVWX'‹TLMT#- 1.2. Từ chủng Streptomyces sp. T1 và Streptomyces sp. T4 trong bộ chủng giống của phòng vi sinh vật – Viện Khoa học sự sống – Đại học Thái Nguyên f1PQW]VWXPY"]d#- f1PQW]LM%*W`M*{W`' *{YbYaTLa. men !VhPYgVWXPYSTcTl- 3iVWXPY%d*'VWXtT]a_ W`%tTTh#PYT-pƒd*vT lW]VWX%#oXVWXSS&jPL oT&gg'W]L#Ld•]d#FJH- 2.2.2. Lên men và điều khiển quá trình lên men 2.2.2.1. Nhiệt độ và điều khiển nhiệt độ 1hi'Le%Tl#*W`MW`' dLkaT-hi{g%id*QSTM G &'%iW`TgrLYbYphi{T'# "-1hiW`"]d#aT_',GfJU  - "phiTlWP{skhiT id›U-I  -v%Mhih%PYv i'VTLshkYN–_LYP|N• Wy'WySk%MhiFJH- 2.2.2.2 2pL%&'(' pL&'('rkTl#de_FGH- %&'(aT_SspNLTWK ‘gW]SgN_+cgŠ&'(VdLkr_+ *SpSe-$'(p'oXP#*sN'aT %&'(Y,LMT+‚'WXSpOgTg ƒgYgy—d•r_•_pgSTrTdLkN''V- $'(_W]&T&l&`'dTTNY'dY yiN'*JUUf[UU0  T'Jyd-Lyd'L&'( „Li&#]aTsh*Whigd2˜2p N#‚Š&'('#‚'&'('„"W %j''rkTlde_-!P I „"'SkS„Tj#V#PV WXSoLTFGH- 2.1.6. Đặc điểm các quá trình trao đổi cacbon, nitơ và một số yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh trưởng và sinh enzyem của xạ khuẩn. 2.1.6.1. Trao đổi cacbon T&''%"]d#„#PkaTl '-pkSToT&'L#ƒMM &'M"'ƒLpNNW“aTM&'F^H- (NOW]#sNTT&gtLY_YW Yg