nghiên cứu kỹ thuật trồng nấm linh chi đỏ trên mạt cưa cao su

nghiên cứu kỹ thuật trồng nấm linh chi đỏ trên mạt cưa cao su

MỞ ĐẦU

Nấm linh chi đã được nuôi trồng từ rất lâu, không những là nấm ăn mà nó cònlà một loại dược liệu quý hiếm Từ xa xưa đến nay nấm Linh chi vẫn được xem lànguồn thực phẩm cao cấp với mùi vị thơm đặc trưng Vì vậy nấm không chỉ là thức ănngon mà còn là thực phẩm chức năng tốt cho sức khoẻ con người

Cũng như nhiều loại nấm khác, nấm Linh chi có hàm lượng chất béo thấp.Thành phần chất béo chủ yếu là axít béo chưa no, rất thích hợp cho những người ănkiêng, chống béo phì Hàm lượng protein cao chỉ sau thịt và đậu nành

Ngoài những giá trị về dinh dưỡng, nấm Linh chi còn có những dược tính quý.Những khảo sát dược lý và lâm sàng hiện nay cho thấy Linh chi không có độc tính,không có tác dụng phụ dù dùng dài ngày, không tương kỵ với những dược liệu kháchoặc tân dược trong điều trị và Linh chi cũng có nhiều công dụng:

o Linh chi được dùng trong điều trị viêm gan do virus

o Hỗ trợ điều trị các bệnh ung thư

o Chống dị ứng, chống viêm

o Tác dụng như chống oxy hoá

o Bảo vệ và chống ảnh hưởng của các tia chiếu xạ

o Nâng cao hệ miễn dịch trong điều trị nhiễm HIV

o Điều hoà và ổn định huyết áp Chống nhiễm mỡ xơ mạch và các biến chứng,giảm cholesterol

o Chữa loét dạ dày, tá tràng

o Hỗ trợ trong điều trị tiểu đường

o Chống suy nhược thần kinh kéo dài, mất ngủ

o Chống stress gây căng thẳng.Và còn nhiều công dụng khác…

Nhờ những giá trị dinh dưỡng và dược học mà ngày nay ở Việt Nam và trêntoàn thế giới việc nuôi trồng, tiêu thụ nấm Linh chi tăng mạnh Các nước sản xuấtnấm Linh chi chủ yếu là Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc, Đài Loan, Việt Nam …

Việt Nam là một nước nông nghiệp và giàu tiềm năng về lâm nghiệp, do đónguồn phế thải nông - lâm nghiệp như bã mía, rơm rạ, mạt cưa rất dồi dào, đây lànguồn nguyên liệu thích hợp cho việc trồng nấm Nuôi trồng nấm Linh chi ở nước tađã tiến hành từ nhiều năm trước đây, nhưng chỉ với những trang trại theo quy mô nhỏlẻ, tự phát Do chưa cơ cấu giống thích hợp và chưa có kỹ thuật nuôi trồng cụ thể

hoặc có những người nuôi trồng chưa nắm bắt rõ Nên hầu hết các trang trại nuôitrồng nấm không phát triển so với các nước bạn.

Để bảo vệ môi trường do sự phát triển của ngành nông nghiệp ngày càng thảinhiều chất gây ô nhiễm môi trường Làm cho môi trường ngày càng bị ô nhiễm ảnhhưởng tới đời sống và sức khoẻ của con người Và hiệu quả kinh tế cao mà ngànhtrồng nấm Linh chi mang lại Do đó, việc nghiên cứu kỹ thuật nuôi trồng nấm vớinhiều loại phế thải nông nghiệp thải ở Việt Nam

Nấm Linh chi là một loại nấm có giá trị dinh dưỡng, giá trị dược học và giá trịkinh tế cao Hiểu được những lợi ích của nấm Linh chi đem chúng tôi muốn nghiêncứu để biết rõ về loại nấm quý này Nội dung đề tài “Nghiên cứu kỹ thuật trồng nấmLinh chi đỏ (Ganoderma Lucidum) trên mạt cưa cao su”

Từ những điều trình bày trên, mục tiêu của đề tài là:

1 Nghiên cứu kỹ thuật trồng nấm Linh chi đỏ (Ganoderma lucidum) trên mạt cưacao su

2 Khảo sát tốc độ phát triển lan tơ của nấm Linh chi

3 So sánh tốc độ lan tơ của nấm Linh chi giống trên hạt lúa và trên thân khoai

mì

CHÖÔNG 1 TOÅNG QUAN

1.1 Giới thiệu về nấm Linh Chi

Linh chi có rất nhiều tên gọi: Nấm vạn năm, Nấm thần tiên, Cỏ trường sinh,Hạnh nhĩ,… trong đó Linh chi thảo là phổ biến nhất và được truyền tụng từ hàng ngànnăm nay với rất nhiều truyền thuyết Ngược dòng thời gian, các ghi chép sớm nhất vềLinh chi là từ thời Hoàng đế, cách đây hơn 2000 năm Theo các sách kim điển thìLinh chi có tác dụng làm trẻ hóa, sống lâu và ngừa được bách bệnh

Trong truyền thuyết của người Trung Quốc thường lưu truyền các câu chuyệnvề Linh chi chữa bệnh nan y, khá nhiều chuyện hấp dẫn và cảm động Trong truyềnthuyết nổi tiếng “Bạch xà truyện” kể rằng vì muốn cứu sống người chồng mà xà tinhBạch nương nương đã không quản ngại hiểm nguy đến tận núi Nga My xa hàng ngàndặm lấy cắp tiên thảo của Nam Cực tiên ông Cuối cùng mục đích của nàng đã đạtđược, Hứa Tiên được cứu sống và tiên thảo đó chính là Linh chi Vào thời Hán Vũ đế,trên chiếc xà ngang cung điện, một hôm bỗng mọc ra một cây nấm Linh chi, các vịđại thân đến chúc mừng và tâu rằng: Linh chi mọc là dự báo điềm lành đến với nhàvua Từ đó Hán Vũ đế đã hai lần hạ chiếu ân xá phạm nhân

Về công dụng chữa bệnh của Linh chi, lần đầu tiên xuất hiện là trong y vănHán Vũ đế Trong “Thần nông bản thảo kinh”, bộ sách nổi tiếng về thảo dược ra đờicách đây hơn 2000 năm được biên soạn từ thời hậu Hán (năm 25 đến 22 trước côngnguyên), đề cập đến 365 dược thảo thì Linh chi xếp vào loài Thượng dược, ở vị trí sốmột sau đó mới đến nhân sâm Thần nông bản thảo kinh phân biệt Linh Chi theo màusắc, có ghi: Linh Chi có 6 loại: Xích chi, Thanh chi, Bạch chi, Hoàng chi, Hắc chi, Tửchi

Đến thời Minh, Lý Thời Trân viết bản thảo cương mục gồm 2000 loài thuốc thìLinh Chi vẫn được xếp vào hàng đầu Ông viết: “Dùng lâu người nhẹ nhàng, khônggià, sống lâu như thần tiên” Ông căn cứ vào tính vị, công năng, tác dụng mà phânLinh Chi ra thành 6 loại :

1 Thanh chi: Còn có tên là Long chi: Toàn bình, không độc Chủ trị sáng mắt, bổcan khí, an thần, tăng trí nhớ

2 Hồng chi: Còn có tên là Xích chi hay Đơn chi: Vị đắng, tính bình, không độc.Chủ trị xung trung kết (tức ngực) ích tâm khí, bổ trung, tăng trí nhớ, tăng trítuệ

3 Hoàng chi: Còn có tên là Kim chi: Cam (ngọt) bình, không độc Chủ trị íchtrùng khí, an thần

4 Bạch chi: Còn có tên là Ngọc chi: Cay, bình, không độc Chủ trị ích phế khí,làm thông miệng, mũi, an thần

5 Hắc chi: Còn có tên gọi là Huyền chi: Mặn, bình, không độc Chủ trị ù tai, lợikhớp, bảo thần (bảo vệ công năng của hệ thần kinh) ích tinh khí, làm dai gâncốt

6 Tử chi: Còn có tên gọi là Mộc chi: Ngọt, ôn, không độc Chủ trị lợi thủy đạo(lợi tiểu), ích thận khí

Trong các bức họa hoặc các tướng đạo Trung Quốc, Linh chi thường đượcmang bên mình Các đạo sĩ tin rằng Linh chi được các thần linh ban cho và “là hạtgiống tinh thần” Họ tôn trọng Linh chi vì nó làm cân bằng ngũ quan và do đó hỗ trợtrường thọ

Ở Việt Nam, trong những tác giả xưa có hai ngưới nói đến Linh chi, một làdanh y Hải Thượng Lãn Ông (1720 – 1791) trong “Y lý thâu nhàn ngôn phụ chí”(Trong khi làm thuốc tìm thú nhàn, mượn lời quê để nói lên ý chí của mình) bài thơsố 14, Hải Thượng viết:

Xuân nhật đăng sơn thái dược

Vu hồi thạch kính đạt sơn phi

Lai tuyết tàn hoa thẩm đạo y

Phất khứ hoang vân đăng tuyệt hiến

Phượng hoàng sào hạ mịch Linh chi

Đã được Nguyễn Thanh Giản, Nguyễn Tử Siêu, Nam Trân cùng dịch như sau:

Ngày xưa lên núi hái thuốc

Đường lên sườn núi mãi quanh đi

Tuyết rụng hoa rơi thẫm đạo y

Rẽ lối mây mù leo tận đỉnh

Tới vùng tổ phượng hái Linh chi

Người Việt Nam thứ hai có nói đến Linh chi là nhà bác học Lê Quý Đôn (1726– 1784) viết về Linh chi trong “Vân Đoài loại ngư” và “Kiến văn tiểu lục” đánh giáLinh chi là “Một sản vật quý hiếm của đất rừng Đại Nam” với những tác dụng lớnnhư kiện não, bảo can, cường tâm, kiên vị, cường phế, giải độc, giải cảm và giúp conngười sống lâu tăng tuổi thọ

Nấm Linh chi được Kỹ Sư Nguyễn Thanh đưa từ Trung Quốc về Việt Nam vớimột số chủng Linh chi đỏ quý Ganoderma lucidum (Leyss ex Fr.) Karst …, và được

nuôi trồng ra quả thể tại Đại Học Tổng Hợp Hà Nội Ở (hình 1.1 và hình 1.2) là quảthể nấm Linh chi đỏ.

Hình 1.1: Bề mặt trên của quả thể nấm Linh chi đỏ (Ganoderma lucidum)

Hình 1.2: Bề mặt dưới của quả thể nấm Linh chi đỏ (Ganoderma lucidum).

Ngày nay, các nhà khoa học đã xác định Linh chi là một loài nấm Linh chi làmột loài có tên khoa học là Ganoderma lucidum (Leyss ex Fr.) Karst, tên thông dụnglà Linh chi (Việt Nam), Lingzhi (Trung Quốc), Reishi (Nhật Bản) Nấm có màu đỏ,hiện nay có khoảng 45 thứ (variete) Linh chi được xác định, nghĩa là chỉ có Linh chiđỏ ta đã có 45 loại có màu sắc khác nhau thay đỗi từ vàng, vàng cam đến cam, đỏcam, đỏ, đỏ sậm, đỏ tía, …Ngoài ra còn có Linh chi đen (Ganoderma sinense) như(hình1.4), Linh chi tím (Ganoderma japonicum) là hai loại hoàn toàn khác Linh chiđỏ Linh chi vàng gặp ở Việt Nam là (Ganoderma colossum) như (hình 1.3) chưa pháthiện ở Trung Quốc và các nước Đông Nam Á khác

Hình 1.3: Qủa thể nấm Linh chi vàng (Ganoderma colossum)

Hình 1.4: Quả thể nấm Linh chi đen (Ganoderma sinense)

Hình 1.5: Quả thể nấm Linh chi trắng

Các loài Linh chi được xếp vào một họ riêng là họ nấm Linh chiGanodermataceae trong đó chi Ganoderma có rất nhiều loài, đến gần 80 loài, do vậyLinh chi đỏ được gọi là Linh chi chuẩn để phân biệt với những loài khác cùng chiGanoderma nhưng không phải là Linh chi thật sự Khi nói đến Linh chi là đề cập đếnLinh chi đỏ Ganoderma lucidum đây là loại Linh chi tốt nhất trong các loài thuộc họLinh chi Cho đến nay chưa ai thấy và chưa cĩ mơ tả khoa học về Linh chi trắng (hình1.5) và Linh chi xanh thuộc chi Ganoderma trong họ Ganodermataceae mà chỉ mới thấyLinh chi đỏ, Linh chi đen, Linh chi vàng, Linh chi tím Ngồi ra, các nhà khoa học NhậtBản còn cho rằng trồng trong một số điều kiện khác nhau Linh Chi sẽ có màu khácnhau.

Tên khoa học: Ganoderma lucidum (Leyss ex Fr) Kart (Linh Chi có nhiều loàikhác nhau)

Nấm Linh Chi thuộc:

Chi Ganoderma rất phong phú và phân bố khá rộng, nhất là ở vùng nhiệt đớiẩm, một số dùng làm thực phẩm chức năng và dược phẩm Gặp hầu hết ở các nướcChâu Á ở Việt Nam gặp rãi rác từ Bắc đến Nam

1.1.1 Đặc điểm sinh học

Về hình thái ngoài chúng cũng có ít nhiều sai khác Quả thể có cuống dài hoặcngắn, thường đính bên, đôi khi trở thành đính tâm do quá liền tán mà thành Cuốngnấm thường hình trụ, hoặc thanh mảnh (cỡ 0,3 – 0,8 cm đường kính), hoặc mập khỏe(tới 2 – 3,5 cm đường kính) Ít khi phân nhánh, đôi khi có uốn khúc cong quẹo (dobiến dạng trong quá trình nuôi trồng) Lớp vỏ cuống láng đỏ – nâu đỏ – nâu đen,bóng, không có lông, phủ suốt lên mặt tán nấm

Mũ nấm dạng thận – gần tròn, đôi khi xòe hình quạt hoặc ít nhiều dị dạngđồng tâm và có tỉa rảnh phóng xạ, màu sắc từ vàng chanh – vàng nghệ – vàng nâu –vàng cam – đỏ nâu – nâu tím, nhẵn bóng, láng như verni Khi già, sẫm màu lớp vỏláng lớùp phấn đỏ nâu trên bề mặt ngày càng nhiều và dày hơn Kích thước tai nấmbiến động lớn, từ 5 – 12 cm, dày 0,8 – 3,3 cm Phần đính cuống hoặc gồ lên hoặc lõmnhư lõm rốn (hình 1.6)

Hình 1.6: Hình thái giải phẫu thể quả nấm Linh chi

Phần thịt nấm dày từ 0,4 – 2,2 cm, màu vàng kem – nâu nhợt – trắng kem,phân chia kiểu lớp trên và lớp dưới Thấy rõ ở các lớp trên, các tia sợi hướng lên.Trên lát cắt trên giải phẫu hiển vi, chỉ thấy đầu trên các sợi phình hình chùy, màngrất dày, đan khít vào nhau, tạo thành lớp vỏ láng (dày khoảng 0,2 – 0,5 mm) Nhờ lớpláng bóng không tan trong nước do đó mà nấm chịu được mưa, nắng Ở lớp dưới hệsợi tia xuống đều đặn, tiếp giáp vào tầng sinh bào tử

Tầng sinh sản (bào tầng – thụ tầng - hymenium) là một lớp ống dày từ 0,2 –1,8 cm màu kem – nâu nhạt gồm các ống nhỏ thẳng, miệng gần tròn, màu trắng, vàngchanh nhạt, khoảng 3 -35 ống/mm Đảm đơn bào (holobasidie) hình trứng hình chùy,không màu dài 16 – 22 µm, mang 4 đảm bào tử (basidiospores)

Bào tử đảm thường được mô tả có dạng trứng cụt (truncate) Đôi khi có tác giảmô tả là dạng hình trứng có đầu chóp tròn – nhọn Thực ra đó là do chụp phủ lớp nảymầm (tectum cap) hoặc phồng căng, hoặc lõm thụt vào mà thành Bào tử đảm có cấutrúc lớp vỏ kép, màu vàng mật ong sáng, chính giữa khối nội chất tụ lại một giọt hìnhcầu, dạng giọt dầu, kích thước bào tử rất nhỏ dao động ít nhiều khoảng từ 8 – 11,5 x 6– 7,7 µm, phải xem dưới kinh hiển vi mới thấy được, khá phù hợp với tác giả (bảng1.1) Bào tử Linh chi có hai lớp vỏ rất cứng, khó nảy mầm Bào tử Linh chi có chứacác thành phần giống như Linh chi: Polyssacharide, triterpen, acid béo, acid amin,vitamin và các nguyên tố vi lượng, với hàm lượng đậm đặc hơn Linh chi từ 7 đếnkhoảng 20 lần (theo một số báo cáo) Khi Linh chi phóng thích bào tử, nhìn xuyênqua ánh nắng sẽ thấy từng đợt bào tử bay như khói bám vào mặt trên Linh chi tạothành một lớp bụi mỏng màu nâu đỏ, rất mịn, như đất đỏ bazan

Bào tầng – Thụ tầngMô thịt nấm

Cuống nấm

Mũ nấm

Tuy vậy số lượng bào tử Linh chi là rất ít Khi thu hoạch 1 tấn nấm Linh chi sẽthu được 1kg bào tử Tác dụng của bào tử cũng giống như tác dụng của nấm Linh chi.Thường một vài sản phẩm của các hãng trên thị trường có phối hợp Linh chi và bào tửphá vỏ hoặc không phá vỏ Các sản phẩm này thường đắt hơn các sản phẩm không cóbào tử Tuy nhiên những bào tử đã phá lớp vỏ thì dễ bị oxy hóa nếu bảo quản khôngtốt, còn nếu không phá vỏ thì cơ thể khó hấp thụ nếu dùng dưới dạng viên nang

Bảng 1.1: Biến động kích thước bào tử đảm nấm Linh chi chuẩn ở các mẫu vật khác nhau.

9 – 13 x 6 – 8

7 – 12 x 6 – 8

7 – 12 x 6 – 87,5 – 10 x 5 – 6,5

9 – 13 x 5 – 7 8,2 – 11,5 – 13,5 x 6,3 – 7,5 –8,1

9 – 12 x 5,5 – 8

10 – 11,8 x 6,8 – 7,8

7 – 8 x 6 – 8

9 – 11 x 6 – 78,5–11,5 x 5–7

9 – 12 x 5 – 7

8 – 10,5 x 5 – 77,5 - 11,5 x 5,5 – 7

Đông DươngNhật BảnTrung QuốcIndonesia Úc ChâuAnh Quốc

Bắc Âu Phi ChâuĐông Phi ChâuBắc Việt NamArgentineBồ Đào NhaBắc MỹBắc MỹBắc ÂuTrung QuốcĐài LoanHà Bắc Việt NamLạng Sơn Việt NamĐà Lạt Việt Nam

Vỏ bào tử khá dày, cỡ 0,7 – 1,2 µm có cấu trúc phức tạp, mặc dù kích thướcbiến đỗi nhưng cấu trúc tinh vi của bào tử đảm có độ ổn định cao, dù là ở chủng nuôitrồng ở Trung Quốc, Nhật Bản chủng nấm Linh chi Hà Bắc hay chủng Đà Lạt Rõràng kiến tạo lỗ thủng trên bề mặt lớp vỏ ngoài là phổ biến nhất ở các chủng nghiêncứu, và quan sát thường thấy mấu lồi nhỏ (đường kính 0,5 – 1,5µm) ở đầu đối diệnvới lỗ nảy mầm – tức là ở đáy bào tử (có thể thấy rõ ở chủng nấm Linh Chi) Mới chỉthấy Steyaert (1972), Futado (1962), Hseu (1990), Buchanan và Wilkie (1994), … chụpvà vẽ mô tả cấu trúc này nhưng chưa ai đưa ra nhận xét và thuật ngữ nào.

Lỗ nảy mầm của bào tử đảm khá lớn, là đặc điểm quan trọng của loàiGanoderma (đường kính cỡ 3,2 – 4,2µm) Đã có nhiều thảo luận lý thú, đặc biệt làcác thí nghiệm gieo đảm bào tử để xác định chức năng của cấu trúc này Đặc biệtFurtado và Steyaert thường lưu ý, gọi vùng này là đỉnh bào tử, nhấn mạnh đặc điểmnở phồng dày lên của vùng này của các loài Ganoderma

Trên lớp vỏ ngoài thấy rõ các trụ chống chính là khái niệm “gai chống” do đasố các tác giả nhận xét đỉnh các trụ nổi gồ thành các mụn cóc Các trụ chống chính làtầng cột theo phân loại của Erdtman (1952) – các trụ được nối với nhau bằng váchmỏng chống từ tầng nền tới tầng phủ mỏng, trong suốt, bao bọc toàn bộ bên ngoàibào tử Như thế tạo thành các xoang rỗng ở lớp vỏ ngoài, nhờ đó tạo khả năng bảo vệcao cho vỏ bào tử

Lớp vỏ trong mỏng hơn, sát ngay bên dưới tầng nền của lớp vỏ ngoài, thườngcảm quan mạnh, do vậy thấy đậm màu dưới kính hiển vi quang học Cấu trúc của lớpvỏ trong cho đến nay còn chưa được biết rõ

1.1.2 Đặc điểm sinh trưởng và sinh sản

Các bào tử đảm đơn bội, trong điều kiện thuận lợi, nảy mầm tạo hệ sợi sơ cấp,trong thực nghiệm thì tỷ lệ nảy mầm ở nhiệt độ 28 – 30oC Hệ sợi sơ cấp đơn nhânđơn bội mau chóng phát triển, phối hợp với nhau tạo ra hệ sợ thứ cấp – tức hệ sợisong hạch phát triển, phân nhánh rất mạnh, tràn ngập khắp giá thể Lúc này, thườngcó hiện tượng hình thành bào tử vô tính màng dày – rất dày

Chúng dễ dàng rụng ra khi gặp điều kiện phù hợp sẽ nảy mầm cho ra hệ sợisong mạch tái sinh Hệ sợi thứ cấp phát triển mạnh đạt tới giai đoạn cộng bào – tứccác vách ngăn được hòa tan

Tiếp đó là giai đoạn sợi bện kết để chuẩn bị cho sự hình thành mầm mống quảthể, đây chính là giai đoạn phân hóa hệ sợi Từ hệ sợi nguyên thủy hình thành các sợicứng màng dày, ít phân nhánh bên kết lại thành cấu trúc bó được cố kết bởi các sợibên phân nhánh rất mạnh

Từ đó hình thành các mầm nấm màu trắng mịn vươn dài thành các trụ trònmập Phần đỉnh trụ bắt đầu xòe thành tán, trong lúc lớp vỏ láng đỏ cam xuất hiện

Tán lớn dần hình thành bào tầng và bắt đầu phát tán bào tử đảm liên tục cho đến khinấm già sẫm màu, khô tóp và lụi dần trong vòng 3 – 4 tháng Chu trình sống của nấmLinh chi (hình 1.7).

Hình 1.7: Chu trình sống của nấm Linh chi.

Nấm Linh chi có thể mọc trên cây gỗ (thường là thuộc bộ đậu Fabales) đãchết Quả thể gặp rộ vào mùa mưa (từ tháng 5 – tháng 11 dương lịch), có thể trênthân cây (cuống thường ngắn, tai nấm nhỏ), quanh gốc cây hoặc từ các rễ cây khi ấycuống thường dài và có thể phân nhánh, đôi khi tán nấm lớn (xấp xỉ 30 cm) Nấmthường mọc tốt dưới bóng rợp, ánh sáng khuyếch tán nhẹ Do có lớp vỏ láng đỏ, Linhchi có thể chịu nắng rọi, khi ấy sẽ xuất hiện lớp phấn ánh xanh tím, có thể chịu mưaliên tục Đáng chú ý là các chủng nấm Linh chi thường có màu nâu đỏ bóng sẫm màuhơn, trong khi chủng Linh chi ở Đà Lạt thường đỏ hồng – đỏ cam Ở những vùng thấp(< 500 m) rõ ràng là ưu thế của các chủng chịu nhiệt độ cao (28 – 35) như ở vùngchâu thổ sông Hồng và đồng bằng sông Cửu Long (quanh thành phố Hồ Chí Minh)

Bởi thế, chủng Linh chi đỏ được chúng tôi chọn làm đối tượng để tìm hiểu vànuôi trồng khảo cứu chính phục vụ cho bài tốt nghiệp Và nghiên cứu chi tiết hơn vềkỹ thuật nuôi trồng Linh chi ở điều kiện khí hậu tại TP Hồ Chí Minh

1.1.3 Điều kiện sinh trưởng và sinh sản

 Nhiệt độ thích hợp:

 Giai đoạn nuôi sợi: Từ 20oC đến 30oC

 Giai đoạn quả thể: Từ 22oC đến 28oC

 Độ thông thoáng: Trong suốt quá trình nuôi sợi và phát triển quả thể, nấm Linhchi đều cần có độ thông thoáng tốt

 Ánh sáng:

 Giai đoạn nuôi sợi: Không cần ánh sáng

 Giai đoạn phát triển quả thể: Cần ánh sáng tán xạ (ánh sáng có thể đọc sáchđược) Cường độ ánh sáng cân đối từ mọi phía

 pH:

Linh chi thích nghi trong môi trường trung tính đến acid yếu Đối với nguyênliệu trồng nấm, không ở dạng dung dịch, nên khó đo với các loại máy đo pH ở dạngdung dịch Người ta có thể dùng “pH đo đất” để xác định độ pH của nguyên liệu.Dụng cụ đơn giản như một cái dùi nhọn, khi ghim vào nguyên liệu sẽ cho biết ngay

pH của cơ chất

 Dinh dưỡng:

Sử dụng nguồn dinh dưỡng trực tiếp từ nguồn xenlulo

1.1.4 Thành phần hóa học và dược tính cơ bản của nấm Linh chi

Số lượng các chủng loài nấm Linh chi được sử dụng trong công nghệ dược liệu,dược phẩm ngày càng tăng và đó cũng là bí quyết của các quốc gia Á Đông Kháiniệm Lục Bảo Linh chi từ thời Lý Thời Trân cách nay 400 năm (1595) có lẽ phải baohàm hàng chục loài khác nhau Cho nên, không phải ngẫu nhiên mà ở Trung Quốc cókhá nhiều cơ sỡ tầm cỡ nghiên cứu và sản xuất Linh chi (đặc biệt là ở Phúc Kiến vàTứ Xuyên)

Các nước Châu Á dẫn đầu về nghiên cứu hoá dược, nuôi trồng và bào chế cácloại Linh chi Thực tế một số tác giả đã quan tâm phân tích thành phần cấu tạo vỏláng ở các loài Ganoderma và Amauroderma vào thập niên 20, phát hiện cácergosterol và các enzyme phenoloxydase, peroxydase,…ở G.lucidum (dẫn theo tài liệuTrung Quốc, 1976) Gần đây mới có lẻ tẻ các khảo cứu về tác dụng gây dị ứng và

bệnh đường hô hấp bởi bào tử một số loài Ganoderma ở Aukland (New Zealand)(Hasnain SM Et al 1985) đặc biệt bởi các thành tố chiết từ G applanatum, G.lucidum và G meredithiae ở New Orleans (Hoa Kỳ) (Horner, W E et al 1993).

Năm 1936, nấm Linh chi (Ganoderma lucidum) nuôi trồng đại trà thành công ởNhật Bản thì trào lưu nghiên cứu về hoá sinh học nấm càng trở nên mạnh mẽ Sảnlượng nấm nuôi trồng chủ động trên thế giới ngày một nâng cao cung cấp đủ nguyênliệu cho các nhà dược học đi dâu vào nghiên cứu thành phần hoá học của nấm Linhchi

Vào thập niên 70 – 80, bắt đầu một trào lưu khảo cứu hoá dược học các nấmLinh chi (bảng 1.2) Chủ yếu ở trung Quốc, Nhật Bản, Hàn Quốc, Đài Loan và ViệtNam Gần đây một số phòng thí nghiệm ở Hoa Kỳ và vùng Đông Nam Á cũng bắtđầu tham gia vào tiến trình này

Với các phương pháp cổ điển trước đây người ta đã phân tích các thành phầnhoá dược tổng quát của Linh chi, cho thấy:

(trong cao mềm của Việt Nam thì tới 22,32%)

Chất béo (kể cả dạng xà phòng hoá) : 1,9 – 2%

(có thể có tới 0,4% trong cao)Hợp chất Sterol toàn phần : 0,11 – 0,16%

Alcaloide và Glucoside tổng số : 1,82 – 3,06%

Từ những năm 1980 đến nay, người ta, bằng các phương pháp hiện đại: phổ kế

UV (tử ngoại), IR (hồng ngoại)…, phổ kế khối lượng – sắc ký khí (GC - MS), phổ kếcộng hưởng từ hạt nhân (đánh dấu với H – 3 và C – 13) (NMR) và đặc biệt là kỹthuật sắc ký lỏng cao áp (HPLC) và phổ kế plasma (ICP), đã xác định chính xác gần

100 hoạt chất và dẫn xuất trong nấm Linh chi Dẫn liệu từ MedLine cho thấy cũng cóđến gần con số 200 công trình nghiên cứu trong lĩnh vực này (từ 1983 – 1993 ) Cóthể khái quát trong (bảng 1.3) dưới đây:

Điều đáng lưu ý là các nhóm hoạt chất chính gặp khá phổ biến ở nhiều loàiGanoderma Kast Và cả các loài Amauroderma Murr như luận điểm về tính thống

nhất của họ Ganodermataceae Donk về phương diện hoá sinh học của (Lê XuânThám, Đàm Nhuận, 1994).

Bảng 1.2: Một số loài Linh chi đã được phân chất

Bảng 1.3: Thành phần hoạt chất cơ bản ở nấm Linh chi

Cyclooctasulfur Nucleotide ƯcÙ chế giải phóng histamine

Adenosine dẫn xuất Proteine Ức chế kết dính tiểu cầu, thư giãn

cơ, giảm đauLingzhi – 8 Alcaloide Chống dị ứng phổ rộng Điều hoà

miễn dịch

Lanosporeric acid A Steroide Ức chế sinh tổng hợp CholesterolLanosterol Steroide Ức chế sinh tổng hợp Cholesterol

II, III, IV, V Steroide Ức chế sinh tổng hợp CholesterolGanoderans A, B, C Polysaccharide Hạ đường huyết

Beta – D Glucan Polysacc Chống ung thư, tăng tính miễn dịch

BN – 3B; 1, 2, 3, 4 Polysacc

hoá acid nucleic

Ganoderic acids R, S Triterpenoide Ức chế giải phóng histamine

Ganoderic acids B, D, F, H, Y Triterpen Hạ huyết áp, ức chế ACE

Ganoderic acids Triterpen Ức chế sinh tổng hợp Cholesterol Ganodermadiol Triterpen Hạ huyết áp, ức chế ACE

Ganodermic acids Mf Triterpen Ức chế sinh tổng hợp CholesterolGanodermic acids T O Triterpen Ức chế sinh tổng hợp Cholesterol

Ganosporelacton A Triterpen Chống khối u

Ganosporelacton B Triterpen Chống khối u

Oleic acid dẫn xuất Acid béo Ức chế giải phóng Histamine

Trong số các nhóm hoạt chất, nhóm có bản chất protein nổi bật với Lingzhi – 8

do các nhà khoa học Nhật Bản tìm ra (Kino K et al 1989, 1991…), được chứng minh làmột tác nhân chống dị ứng phổ rộng và điều hoà miễn dịch hữu hiệu, đồng thời duytrì tạo kháng thể chống các kháng nguyên viêm gan B

Riêng nhóm nucleoside, nổi bật trong Ganoderma lucidum và G capense cócác dẫn xuất của adenosine với tác dụng thư giãn cơ giảm đau và ức chế sự dính kếttiểu cầu

Nhóm alcaloide còn ít được khảo cứu, mặc dù với tác dụng trợ tim là rõ ràng.Dẫn liệu về nấm Linh chi (G lucidum) cho thấy hàm lượng alcaoide tổng số rất đángkể có vẻ mâu thuẫn với ý kiến của G Paris (1948) cho rằng nấm Linh chi không cóalcaloide và không độc

Nhóm Steroid khá phong phú ở nấm Linh chi với tác dụng chủ đạo ức chế sinhtổng hợp Cholesterol Đặc biệt từ bào tử đảm G lucidum ngoài 2 lacton A, B còn có 5hợp chất sterol đã được Chen – Ry và Yu 1991 xác định chính xác công thức phân tử:

3, 7, 11, 12, 15, 23 - hexaoxo - 5 alpha - lanosta - 8 - en - oic acid (I)

3beta, 7beta - trihydroxy - 11, 25, 23 trioxo - 5 alpha - lanosta 8 - en - 26 oic acid(II)

7beta – hydroxyl – 11, 15, 23 - pentaoxo - 5 alpha - lanosta - 8 - en - oic acid (III)

3,7, 11, 15, 23 – pentaoxo - 5 alpha - alpha - lanosta - 8 - en - oic acid (IV)

24, 25, 26 - trihydroxy - 5 alpha - lanosta – 7, 9 (11) - dien -3- one(V)

Trong đó hợp chất đầu (I) là một chất mới tìm thấy được đặt tên làGanosporeric A còn 4 chất sau lần đầu tiên thu nhận được từ bào tử G lucidum.Các hợp chất Lanostannoid có cấu trúc kiểu triterpen được phát hiện ngày một nhiều,năm 1986, Arisawa, M, et al xác định cấu trúc 3 hợp chất mới

Trong nhóm các Ganodermic acid, Wang, C.N., et al (1989) đã chứng minhhiệu lực ức chế kết tụ tiểu cầu người và xác định cấu trúc phân tử của ganodermicacid S.

lanosta - 7,9,(11)24 - trien – 3 beta, 15 alpha – diacetoxy – 26 – oic acid

Kết quả gắn đồng vị phóng xạ P- 32 chỉ ra rằng Ganodermic acid S hoạt hoásự thuỷ phân P1P2 (đó là phosphatidylinostol 4,5- bophosphate) Dưới kính hiển viđiện tử quét, ở dưới ngưỡng kết tụ, tiểu cầu có dạng dĩa với gai nhỏ, còn ở trênngưỡng, chúng dạng tròn hoặc bất thường có gai và các biến dạng của màng

Nhóm ester với acid béo không no linoleic được ghi nhận vào 1991 có hoạttính chống ung thư với công trình của Lin, C.N et al Đó là 2 ergosterol mới:

 Steryl ester 1:

Ergosta – 7,22 - dien – 3 beta – yl - linoleate

 Steryl ester 2:

5 alpha, 8 alpha – epidioxyergosta – 6,22 dien – 3 beta- yl - linoleate

Đồng thời các tác giả còn tìm ra 1 lanostanoid và steroid mới cũng có tác dụngức chế các tế bào ung thư

Nhóm Polysaccharide cũng rất phong phú ở các nấm Linh chi và phổ hoạt lựcmạnh

He Y et al (1992) đã khảo cứu các BN3B – gồm 4 polysaccharide đồng nhấtcó hoạt tính tăng miễn dịch Trong đó arabinogalactan mang các liên kết glycoside

Hikino H et al 1985 – 1989 chứng minh hoạt lực hạ đường huyết của nhiềupolysaccharide Đó chính là các heteroglycan có cả hoạt tính chống ung thư Đó làganoderan B có tác dụng làm tăng mức insuline huyết tương, làm giảm sinh tổng hợpglycogen và hàm lượng glycogen trong gan; và đó là cơ sở điều trị liệu trên các bệnhnhân đái đường

Đặc biệt các phức hợp polysaccharide – protein có hoạt tính chống khối u vàtăng miễn dịch đã được chỉ ra từ lâu (Ukai, S et al 1983) Byong kak Kim (1992,1994) et al còn tiến hành lai hệ sợi bằng dung hợp Protoplast giữa nấm Linh chichuẩn G lucidum với các loài khác: G applanatum… thậm chí với cả nấm hươngLentinus edodes, nhờ đó tăng cường hoạt tính chống khối u sarcom 180 của các phứcpolysaccharide – protein lên đáng kể Gần nay tác dụng tăng sinh tổng hợp IL -2(Interleukine - 2) và hoạt tính AND polymerase ở chuột già tuổi bởi polysaccharideđã soi sáng thêm khả năng trẻ hoá, tăng tuổi thọ bởi các nấm Linh chi (Lei L.S vàLin Z.B 1993)

Loạt nghiên cứu về polysaccharide không tan trong nước của các tác giả NhậtBản (Sone, Y et al, 1985; Takashi, M.et al, 1993, ) chứng tỏ hiệu lực chống khối urất rõ, thậm chí làm tan khối u với tỷ lệ ¾ với các loài G.applanatum và G lucidum.

Gần đây Lin Zhibin và Lei sheng (1994) đã xác định trọng lượng phân tử củaPolysaccharide từ G.lucidum cho kết quả: 7.100 – 9.300 Nhưng tổng kết xác đáng vềvai trò sinh – dược học của nhóm hoạt chất này đã được R Chang (1994) giới thiệutại hội thảo Bắc Kinh với báo cáo thực nghiệm của tác giả Đài Loan, Trung Quốc vàHoa Kỳ

Mặc dù còn ít nghiên cứu, song các alcaloide ở Ganoderma capence (Lloyd)Teng rất đáng lưu ý Chúng là các pyrroles đặc biệt (Yang, J, J và Yu, DQ, 1990);(Yu, J,G, et al 1990)

N9 – (anpha, anpha diemethyl – gama - oxybutyl) adenine

Từ đó đã tổng hợp các alkaloid tương tự các mẫu tự nhiên có hiệu quả chốngviêm (1A và 1B):

1A: 1 - isopentyl 1- 2 - formyl 5 - hydroxymethylpyrrole 1B: 1 - phenylethyl 1 - 2 – formyl - 5 hydroxymethylpyrrole

Tác dụng bảo vệ gan, chống tác hại của CCl, được chứng minh rõ ràng vớicác chế phẩm chiết từ các loài linh chi

Có lẽ đa dạng nhất và tác dụng dược lý mạnh nhất là nhóm sapoine –triterpenoids – các acid ganoderic Lần đầu tiên Nishtoba et al (1984 - 1987) chứngminh các ganoderic acid C là mới trong tự nhiên, sau đó Morigiwa et al 1986, tìm rathêm ganoderic acid B Chúng thể hiện hoạt lực ức chế giải phóng histamine, ức chếAngiotensine Conversion enzyme (ACE), ức chế sinh tổng hợp Cholesterol và hạhuyết áp Ngày nay nhóm ganoderic acids đã được phát hiện có tới hàng chục dẫnxuất khác nhau Kết quả tách trên sắc ký lỏng cao áp (HPLC) loài Linh chi G.tsugaeMurrill rất đặc sắc

Rõ ràng có sự tương đồng lớn với G lucidum Ngoài lucideric acid (lucidone)

do Kohda et al (1985) tìm ra, còn có dẫn xuất lucidenol được Su C H et al (1993)

chứng minh là mới hoàn toàn Cấu trúc phân tử của 4 hoạt chất chính được các kỹthuật quang phổ và cộng hưởng từ hạt nhân xác định (Su et al, 1993).

Các hợp chất này đều có tác dụng bảo vệ gan, thực nghiệm đặc sắc thu đượcvới việc gây tăng GOT và GOP bằng CCL4 (tetrachlorurcarbon) Điều lý thú là từngtriterpenoid tinh khiết riêng rẽ thể hiện hoạt lực thấp hơn khi dùng các phân đoạntách chưa tinh chế, nghĩa là tổ hợp các đồng phân của chúng hiệu quả hơn Do vậy dễhiểu người ta thường dùng tách dịch chiết toàn bộ từ nấm Linh chi

1.1.5 Tác dụng của nấm Linh chi:

Linh chi được dùng như một thượng dược từ khoảng 4000 năm nay ở TrungQuốc Chưa thấy có tư liệu về tác dụng xấu, độc tính của Linh chi (ngoại trừ các khảocứu về khả năng tồn tại các dị ứng nguyên trên bề mặt bào tử một số loài Ganoderma– điều rất phổ biến trong nấm)

Linh chi là “Cây gậy chống trước khi ngã”

Linh chi là một loại nấm đặc biệt, Linh chi có tính bình, vị đắng, có tác dụngtăng co bóp cơ tim, tăng tuần hoàn, trị chứng tắc nghẽn, khó chịu, tăng trí lực, kéo dàituổi thọ

Bảng 1.4: Tác dụng dược lí của nấm Linh chi theo sắc màu (Lý Thời Trân, 1590).

Thanh chi: Còn có tên

là Long chi:

Xanh Vị chua, Toàn bình, không độc Chủ trị sáng

mắt, bổ can khí, an thần, tăng trí nhớ

Hồng chi còn có tên là

Xích chi hay Đơn chi:

Đỏ Vị đắng, tính bình, không độc Chủ trị xung trung

kết (tức ngực) ích tâm khí, bổ trung, tăng trí nhớ,tăng trí tuệ

Hoàng chi còn có tên là

Cay, bình, không độc Chủ trị ích phế khí, làmthông miệng, mũi, an thần

Hắc chi còn có tên gọi

là Huyền chi: Đen Mặn, bình, không độc Chủ trị ù tai, lợi khớp,bảo thần (bảo vệ công năng của hệ thần kinh)

ích tinh khí, làm dai gân cốt

Tử chi còn có tên gọi là

Mộc chi: Tím Ngọt, ôn, không độc Chủ trị lợi thủy đạo (lợitiểu), ích thận khí.Trên thực tế, có thể coi Linh chi không có độc tính Quá trình kiểm tra đã đượcthực hiện ở Việt Nam, tại một số cơ sở theo GS Bùi Chí Hiếu 1993

Tất cả các nhà y học cổ xưa của Trung Quốc đều dùng Linh chi như mộtthượng dược, với ý nghĩa không độc, không tác dụng phụ dù dùng liều cao và trongmột thời gian dài Tại Trung Quốc, Linh chi được xem là một loại thuốc trị bách bệnhtrong dân gian, trị tất cả các loại bệnh

Trung Quốc là nước có tryền thống sử dụng nấm Linh chi lâu đời nhất Từ thếkỷ XVI, Lý Thời Trân đã sử dụng và theo màu sắc cũng có tác dụng trị liệu tươngứng như (Bảng 1.4):

Phân viện kiểm nghiệm Dược phẩm – Bộ y tế – SaØi Gòn

Trung tâm Đào tạo và nghiên cứu y dược học Dân tộc

Viện Dược liệu, Hà Nội (Đàm Nhận, 1994 - 1995)

Kết quả cho thấy dùng liều cao gấp 50 - 150 lần liều dùng thông thường chongười cũng không gây ra độc cấp tính hay trường diễn Kết quả (bảng1.5) tổng hợpcủa Gueng – Tao Lui rất đáng lưu ý với hiệu quả trị liệu cao

Bảng 1.5: Thử nghiệm chiết bằng cồn – nước rửa của các lồi Ganoderma (theo Geng – Tao Lui, 1993).

%

Tháng điều trị

Loạn dưỡng cơ tiến triển MAW.SAW 121 56,2 % 3 – 6Công hiệu của Linh chi ghi trong “Thần nông bản thảo kinh” hiện nay hoàntoàn được chứng minh đồng thời còn phát hiện các hoạt tính dược lý và trị liệu đaphương của Linh chi Lý do là Linh chi có khả năng nâng cao sức đề kháng của cơ

thể, chính vì vậy mà phòng trừ được các chứng bệnh sinh ra do sức đề kháng của cơthể yếu

Linh chi có công dụng nâng cao thể chất, nâng cao khả năng thích ứng của cơthể, điều chỉnh cân bằng sinh lý, nâng cao khả năng kháng bệnh, khả năng phục hồisức khỏe Linh cho có công hiệu phòng trị tốt đối với nhiều loại bệnh, từ ung bướuđến cao huyết áp, mỡ trong máu cao, ứ máu, tắc mạch máu, bệnh mạch vành, chảymáu não, nhồi máu cơ tim; từ bệnh trĩ đến viêm tuyến tiền liệt; từ bệnh suy nhượcthần kinh đến bệnh hen suyễn đều có thể dùng Linh chi để phòng ngừa và điều trịbệnh Ngoài ra Linh chi còn có tác dụng làm trì hoãn quá trình lão hóa của cơ thể,nâng cao khả năng kháng bệnh

Linh chi chứa khá đầy đủ thành phần khoáng vi lượng mà các khoáng tố này lànhân tố quan trọng trong rất nhiều phản ứng chống ung thư, dị ứng, chống lão hoá, xơvữa, chống kết dính tiểu cầu…điều chỉnh dẫn truyền luồng thần kinh Do đó Linh chiđược xem như biện pháp phòng trị cơ bản

Theo BS Lương Lễ Hoàng (Cộng hoà liên bang Đức) thì “… Linh chi có tácdụng gián tiếp theo cơ chế đòn bẩy, thanh lọc cơ thể toàn diện qua chức năng lợi tiểuvà lợi mật, một mặt kích thích nhiều chuỗi phản ứng sinh hoá trong cơ thể để từ đóđiều chỉnh các rối loạn chức năng, làm lành ác tổn thương cơ quan, phục hồi hệ miễnnhiễm Một khi hội đủ ba điều kiện trên thì cơ thể khó bệnh, con người khó già trướctuổi Nếu biết cách áp dụng Linh chi sẽ là một trong các phương tiện hữu hiệu và antoàn để tăng cường sức đề kháng cơ thể trong cuộc sống đầy căng thẳng và ô nhiễmmôi trường của thế kỷ 21…”

Linh chi đóng một vai trò quan trọng trong y học cổ truyền Trung Quốc dùdùng độc vị hay phối hợp với các thảo dược khác

 Đối với bệnh ung bướu:

Theo “Linh chi phòng trị bệnh” thì “Linh chi có tác dụng nâng cao khả năngmiễn dịch cơ thể Linh chi còn giúp cải thiện thể chất của bệnh nhân ung bướu, giảmnhẹ triệu chứng” Đa số bệnh nhân ung bướu sau khi uống Linh chi hoặc bào tử Linhchi triệu chứng giảm thấy rõ, ăn uống và giấc ngủ được cải thiện, các triệu chứng nhưsốt nhẹ, ho, tức ngực, đại tiện lỏng đều chuyển biến tốt, khối u bị ức chế, chức năngmiễn dịch được phục hồi Tinh thần và thể lực được cải thiện, tuổi thọ kéo dài, một sốtrường hợp ung bướu được trị lành Dùng Linh chi phối hợp với hoá trị, xạ trị, nângcao hiệu quả của hoá trị và xạ trị

 Đối với bệnh tim mạch:

Trước đây người ta cho rằng không thể điều trị để giảm xơ vữa Nhưng gầnđây, đã có công trình chứng minh được, nếu điều trị tốt sẽ làm giảm kích thước mảng

xơ vữa, giảm nguy cơ nhồi máu cơ tim, giảm đột tử

Linh chi có công dụng hạ huyết áp, hạ mỡ trong máu Linh chi có tác dụng làmgiảm độ tạo huyết khối của máu và phòng ngừa tắc mạch máu, chủ yếu là nhờ:

 Linh chi có thể làm tăng lượng lipoprotein mật độ cao trong máu, từ đó dầndần chuyển hoá, hoà tan và đào thải cholesterol mật độ thấp

 Linh chi có thể nâng cao khả năng hoà tan của máu, làm tan các khối tiểu cầutrong máu nhằm ngăn ngừa tạo huyết khối và tắc mạch máu

Linh chi làm giảm nồng độ mỡ trong máu, kể cả loại cholesterol xấu Các thửnghiệm dược lý ở Nhật Bản và Trung Quốc cho thấy khi bổ sung Linh chi vào khẩuphần ăn của chuột bị cao huyết áp sẽ làm giảm huyết áp rõ rệt hơn là chuột không bổsung Linh chi Khi thử nghiệm lâm sàng trên bệnh nhân cho thấy huyết áp trên bệnhnhân điều trị tiến gần đến tiêu chuẩn của WHO cho người cao huyết áp bình thường.Ngoài ra còn có sự giảm tổng số cholesterol, và có ý nghĩa ở chổ cholesterol tốtkhông giảm trong khi các cholesterol xấu giảm đi

Ngày nay nhiều loại thuốc điều trị bệnh tim mạch chỉ có tác dụng làm giảmthiểu bệnh tình một phần nào chứ không thể điều trị triệt để tận gốc Khi dùng Linhchi phối hợp để điều trị, có tác dụng làm bệnh thuyên giảm đồng thời hiệu quả lại ổnđịnh, là loại thảo dược lý tưởng dùng để hỗ trợ điều trị bệnh tim mạch hiện nay

 Đối với bệnh viêm gan:

Bệnh gan là một bệnh khó trị, khi bệnh gan tiến triển thì quá trình tổng hợp,trao đỗi chất trở nên xấu đi; cơ thể người bệnh trở nên suy yếu, đó là lý do làm cáichết đến nhanh hơn

Tỉ lệ người Việt Nam bị nhiễm virus viêm gan B (HBV) hiện nay là 18 - 24%.Việt Nam được xếp vào những nước có tỉ lệ nhiễm HBV cao trên thế giới Tuy nhiênkhi nhiễm virus viêm gan B, không phải ai cũng trở thành người bệnh Ung thư ganthường là sau khi bị xơ gan do rượu (thường gặp ở Châu Âu) và xơ gan do HBV hoặcHCV

Linh chi được xem là có hiệu quả đối với gan chủ yếu là do có chứapolysaccharide và các triterpen Germanium có trong Linh chi tác dụng đến chấtendorphin là chất do cơ thể tiết ra, giống như morphin, làm giảm đau, dễ chịu nhưngendorphin rất dễ bị phân giải, chính germanium ngăn chặn sự phân giải endorphin,kéo dài cảm giác dễ chịu, giảm đau Ngoài ra Linh chi còn kích thích tiết Interferon,nâng cao khả năng miễn dịch của cơ thể, có tác dụng chống virus rất mạnh và tácdụng trực tiếp đến tế bào gan bị tổn hại, ngăn chặn sự phát triển của bệnh gan

Linh chi có tác dụng:

 Tiêu viêm, làm viêm gan thuyên giảm

 Chất triterpen có trong Linh chi làm phục hồi các hoạt động của tế bào gan.Ngoài ra, Linh chi có tác dụng nâng cao khả năng miễn dịch cơ thể, nâng caokhả năng phân biệt, sát thương và nuốt chửng virus viêm gan của tế bào miễn dịch (tếbào NK, tế bào T, tế bào B…) nâng cao khả năng tái sinh của tế bào gan, xúc tiếnphục hồi tổ chức gan bị tổn thương, phục hồi và nâng cao chức năng gan Do vậy Linhchi điều trị các bệnh viêm gan rất tốt, nhất là viêm gan cấp

 Chống HIV:

Các chất chiết tan trong nước của Linh chi có tác dụng chống HIV (Hattori et

al, 1997 Kim eet al, 1997) Gần nay Mekkawy (1998), Min et al (1998) cho biếtganoderiol F và ganodermanontriol, acid ganoderic beta, ganodermanondiol,ganoderma nontriol và acid ganolucidic A và gucidumol B cũng có tác dụng chốngHIV Đặc biệt, có hai báo cáo của Đại học Chulalongkorn, Thái Lan và một báo cáocủa Đại học Y dược Toyama, Nhật về thử nghiệm trên virus HIV Theo Tiến sĩPraphan Panuphak, nấm Linh chi đã được micron hoá (micronized) thử nghiệm trênnhững bệnh nhân nhiễm HIV ở Thái Lan cho thấy thuốc được dung nạp tốt nhưng tácdụng lâm sàng chưa rõ rệt

Điều này gợi mở cho các nhà nghiên cứu Linh chi trên thế giới một hướng mớitrong việc khảo sát loại nấm được xem là trường thọ này, ngoài những tác dụng đãbiết và làm chúng ta nhớ lại một thông tin đăng trên Sunday Morning Post 18 – 10 –1992: Cơ quan FDA của Hoa Kỳ cho phép được sử dụng Linh chi (một trong 7 loạiđược phép) trong khi chờ những thuốc công hiệu hơn để ngăn ngừa và điều trị AIDS,mà Linh chi đã được chứng minh có ảnh hưởng phục hồi hệ miễn dịch của cơ thể Dr.Anderew Weil cho biết: “Linh chi kích thích hệ thống miễn dịch tốt nhất, Linh chikhông độc và rất hữu dụng trong lĩnh vực này” Ông sử dụng nó trong ba năm cho cáctrường hợp ung thư, các trường hợp nhiễm HIV, các điều kiện tiền HIV và cho việcsuy giảm hệ miễn dịch một cách tổng quát Và gần đây là hữu ích trong các trườnghợp của triệu chứng mệt mỏi mạn tính

 Hiệu quả của Linh chi đối với mệt mỏi mạn tính:

Linh chi phục hồi, làm giảm mỏi mệt, phòng ngừa bệnh Linh chi từ xưa đếnnay được trân trọng như thuốc chữa vạn bệnh nhưng ngay cả những người khôngbệnh, Linh chi cũng hữu dụng

Người ta cho rằng việc tích tụ mệt mỏi do căng thẳng giữa mối quan hệ conngười với nhau, do công việc, do môi trường làm phá vỡ sự thăng bằng của tâm hồnvà cơ thể là nguyên nhân Muốn điều trị, trước hết phải xem lại nhịp độ sinh hoạt củabản thân và sữa chữa lại, đồng thời việc sử dụng Linh chi cũng góp phần làm cânbằng nhịp sinh học của cơ thể

Linh chi cũng có công dụng dưỡng nhan sắc Một số vật chất tiểu phân tử loạioligosaccharide có trong Linh chi có thể được cơ thể hấp thụ thông qua biểu bì, cócông dụng cải thiện tuần hoàn ngoại vi ở da, trừ khử gốc tự do, tiêu trừ sắc tố nâu tíchtụ ở da, từ đó đem lại hiệu quả làm nhuận da, dưỡng nhan sắc Ngày nay có nhiềuhãng làm mỹ phẩm từ Linh chi.

 Hiệu quả giảm đường huyết:

Bệnh tiểu đường phát sinh là do tuyến tuỵ bị tổn thương hoặc viêm, hoặc dotuổi già, cơ thể suy nhược, chức năng sinh lý của tuyến tuỵ suy yếu, lượng insulin tiết

ra giảm nên gây bệnh Insulin có các chức năng: Thúc đẩy tiến trình oxy hoá glucosetrong tế bào để cung cấp năng lượng cho cơ thể hoạt động Kích thích tổng hợpglucose thành glycogen dự trữ trong gan Ức chế glycogen trong gan phân giải thànhglucose Ức chế protein, chất béo phân giải thành glucose Nếu Isulin bị giảm, lượngđường huyết trong máu tăng và bị thải ra ngoài theo đường nước tiểu, làm tiểu nhiều.Từ đó dẫn đến phải uống nhiều nước để bù vào lượng nước đã mất, nhưng vẫn khônghết khát Luôn luôn cảm thấy đói, ăn nhiều nhưng do glucose cung cấp cơ thể khônggiữ được, lại tiếp tục cảm thấy đói, phải ăn nhưng cơ thể vẫn thấy gầy ốm vì khônghấp thu được glucose, lượng protein và mỡ dự trữ bị huy động để tạo năng lượng

Linh chi có hiệu quả trị liệu nhất định đối với bệnh tiểu đường Linh chi có thểlàm tăng tuần hoàn máu ở tuyến tuỵ tăng lượng isulin tiết ra từ tuỵ Vài triteerpen nhưganoderan A, B, C chiết xuất từ Linh chi làm giảm đường huyết mạnh (Hikino etal,1985) tác dụng phụ của những thuốc trị bệnh tiểu đường khi phối hợp với Linh chiđược giảm đến mức thấp nhất Bệnh nhân tiểu đường sau khi uống Linh chi, đườngniệu, đường huyết đều giảm, thể lực gia tăng

 Linh chi trị suy nhược thần kinh:

Linh chi trị suy nhược thần kinh hiệu quả rất rõ rệt, vừa cải thiện giấc ngủ,tăng sự thèm ăn, làm giảm hoặc khỏi chứng nhức đầu, nặng đầu, chống mệt mỏi, giúpphục hồi trí nhớ đồng thời không gây ra phản ứng phụ Linh chi có tác dụng an thần,giảm đau và chống co thắt cơ trơn Linh chi có tác dụng kháng viêm, có thể giảmviêm mô thần kinh nên cũng có khả năng phục hồi trí nhớ, phần nào có ích trong điềutrị bệnh Alzheimer Sự kiện này giải thích việc người xưa dùng Linh chi để phục hồitrí nhớ ở người cao tuổi

1.2 Giới thiệu về nguyên liệu mạt cưa và vi sinh vật phân giải nguyên liệu

Nguyên liệu trồng nấm Linh Chi bao gồm các loại cây lá rộng thân mềm, cóthể sử dụng cây rừng hoặc cây vườn Linh Chi sử dụng nguyên liệu chủ yếu là mạtcưa cao su tươi, khô, không có tinh dầu và độc tố Ngoài ra còn có thể trồng Linh Chitừ nguyên liệu là thân gỗ Tốt nhất nên sử dụng cây gỗ Cao Su, Bồ Đề, So Đũa,Sung, …

Mạt cưa cao su là nguồn cơ chất mà Linh chi phát triển rất tốt với giá thu muarẽ tăng thêm lợi nhuận cho việc trồng nấm Mạt cưa là nguồn phế thải gây ô nhiễmmôi trường nặng nhưng nó lại đem lại hiệu quả kinh tế trong việc trồng nấm đặc biệtlà nấm Linh chi Dùng nguồn cơ chất này có thể làm nguồn cơ chất trồng nấm vàcũng góp một phần giải quyết vấn đề ô nhiễm môi trường từ nguồn phế thải mạt cưa.Và sau khi nuôi trồng nấm có thể tận dụng làm phân bón hữu cơ sạch rất tốt chotrồng trọt.

Chúng tôi lựa chọn mạt cưa cao su làm nguồn cơ chất chủ yếu để trồng nấmLinh Chi Vì ở miền Nam loại mạt cưa cao su rất nhiều và rẻ Nên đốn cây (chặt cây)vào thời điểm cây chứa chất dự trữ nhiều nhất (vừa rụng lá hoặc chuẩn bị mọc lánon), tức là vào mùa thu, khoảng tháng 10 hàng năm Chọn cây có đường kính khôngnhỏ hơn 20 cm Cắt khúc khoảng 0.8 – 1,2 m, loại bỏ những khúc có nấm mốc đãmọc Cây khi cưa khúc phải xử lý đầu gốc bị cưa, nếu không sẽ bị nhiễm mốc Cónhiều cách xử lý như:

 Chất đống hoặc xếp gỗ sao cho đầu khúc gỗ hướng mật ra ngoài nơi luồng gióqua lại, nếu vết cắt mau khô sẽ ít bị nhiễm

 Quét vôi lên vết cắt Vôi có tác dụng làm vết cắt mau khô và diệt khuẩn, ngăncác loại nấm mốc lạ phát triển

 Đốt qua các đầu cắt bằng cách hơ lửa hoặc nhúng cồn thoa đều mặt cắt rồi đốt.Mạt cưa được lấy từ tế bào thực vật như các loại gỗ mềm, thành phần chủ yếulà xenlulozơ, hemixenlulo, licnin Trong tế bào thực vật xenlulozơ liên kết chặt chẽvới nguồn hydro cacbon khác như hemi xenlulozơ, pectin, licnin để tạo liên kết bềnvững Hàm lượng xenlulozơ có trong nguyên liệu mạt cưa rất cao, cấu trúc rất bền và

đa dạng, để phân giải phải dùng các loại axit hoặc kiềm mạnh, như vậy sẽ gây ônhiễm môi trường Vì vậy cần có vi sinh vật (VSV) phân huỷ để nấm có thể hấp thụdễ dàng Trong thiên nhiên có rất nhiều nhóm vi sinh vật có khả năng phân giảixenlulozơ

 Nấm sợi:

Trong các nhóm VSV tham gia phân giải xenlulozơ thì nấm sợi có khả năngphân giải mạnh nhất vì

 Nấm sợi có số lượng lớn và đa dạng về chủng loại ở trong tự nhiên

 Nấm sợi có hệ sợi phát triển, hệ sợi có khả năng và xuyên qua nhiều nguồnxenlulozơ có cấu trúc bền vững

 Nấm sợi có thể sinh trưởng được trên nhiều nguồn xenlulozơ tự nhiên khácnhau ngay cả trên nguồn xenlulozơ khó phân giải và nghèo chất dinh dưỡng mà cácVSV khác như vi khuẩn, xạ khuẩn, nấm men không thể sinh trưởng được

 Trong quá trình lên men nấm sợi không sinh độc tố.

 Đặc biệt nấm sợi có một hệ enzyme phân giải xenlulozơ mạnh và phong phú

 Như vậy với những đặc điểm ưu việt của nấm sợi được xem là đối tượng quantrọng để phân giải từng nguồn xenlulozơ tự nhiên

 Vi khuẩn:

Nói chung, vi khuẩn có khả năng phân giải xenlulozơ nhưng không mạnh bằngnấm sợi, do xenlulozơ tự nhiên không phải là môi trường tốt cho sinh trưởng của vikhuẩn Nhưng trong tự nhiên một số vi khuẩn có ưu điểm là sinh trưởng được trongđiều kiện môi trường pH và nhiệt độ khác nhau, nên có thể giúp phân giải xenlulozơtrong điều kiện môi trường axít, kiềm hoặc ở nhiệt độ cao

Tham gia quá trình phân giải xenlulozơ tự nhiên có vi khuẩn hiếu khí lẫn yếmkhí

 Vi khuẩn hiếu khí: Cellulomonas, Vibrio, Archomobacter, Cytophaga,

Soragium, Bacillus,…

 Vi khuẩn yếm khí: Clostridium, và một số loài Bacillus

 Xạ khuẩn:

Ngoài nấm sợi và vi khuẩn, xạ khuẩn cũng tham gia quá trình phân giải

xenlulozơ đáng chú ý là các xạ khuẩn: Streptosporangium, Streptomyces.

Actinomyces, Nocardia, Micromonospora,…

1.3 Tình hình phát triển nghề nuôi trồng và sản xuất nấm Linh chi

Ngành sản xuất nấm ăn đã hình thành và phát triển trên thế giới từ hàng trămnăm Việc nghiên cứu và sản xuất nấm ăn trên thế giới ngày càng phát triển mạnhmẽ

Ở Châu Âu, Bắc Mỹ trồng nấm đã trở thành một ngành công nghiệp lớn được

cơ giới hóa toàn bộ nên năng suất và sản lượng rất cao Các loại nấm được trồng theoquy mô dây chuyền công nghiệp chuyên môn hóa cao độ: có nhà máy chuyên xử línguyên liệu sử dụng robot trong các khâu nuôi trồng chăm sóc và thu hái nấm

Nhiều nước ở Châu Á, trồng nấm còn mang tính chất thủ công, năng suấtkhông cao, nhưng sản xuất gia đình, trang trại với số lượng đông nên tổng sản lượngrất lớn chiếm 70% tổng sản lượng nấm ăn toàn thế giới Các nước Đông Bắc Á nhưNhật Bản ,Trung Quốc, Hàn Quốc và vũng lãnh thổ Đài Loan,…

Theo Wuang X J (dẫn theo Chang, 1993) thì từ đầu thế kỷ 17 (1621) cácNấm Linh chi đã được nuôi trồng ở Trung Quốc, chính bởi giá trị dược liệu của chúng

Gần nay người lại tìm thấy trên núi Maiji tỉnh Gansu, một tấm bia đá khắc năm 1124ghi chép về nuôi trồng 38 loại nấm Linh chi Đến 1936 GS Dật Kiến Vũ Hưng và

KS Trực Tính Hậu Hồng Thị đã nuôi trống đại trà thành công nấm Linh chiGanoderma lucidum ở trường Đại học Nông Nghiệp Tokyo Nhật Bản

Khoa học hiện đại nghiên cứu về nấm Linh Chi, đi đầu là các nhà khoa họcNhật Bản, sau đó là Hàn Quốc, Trung Quốc, Đài Loan,…năm 1972 đã trồng thínghiệm nấm Linh Chi đạt kết quả tốt Biểu đồ sau cho thấy nhịp độ gia tăng ổn địnhcủa công nghệ nuôi trồng nấm Linh chi ở Nhật bản từ năm 1979 đến 1995 sản lượngtăng tới 40 lần (hình1.8)

Hình 1.8 : Sản lượng nấm Linh chi nuôi trồng ở Nhật Bản (đơn vị tính: tấn, 1995: dự báo)

Hàn Quốc nổi tiếng với nấm Linh Chi (Ganoderma lucidum) mỗi năm suấtkhẩu thu về hàng trăm triệâu USD Ở Trung Quốc từ những năm 1960 bắt đầu trồngnấm có áp dụng các biện pháp cải tiến kỹ thuật nên năng suất tăng gấp 4 – 5 lần vàsản lượng tăng vài chục lần Hàng năm Trung Quốc xuất khẩu hàng triệu tấn nấmsang các nước phát triển thu về nguồn ngoại tệ hàng tỷ đô la Hiện nay Trung Quốcđã dùng kỹ thuật (Khuẩn thảo học) để trồng nấm nghĩa là dùng các loại cỏ, cây thânthảo để trồng thay cho gỗ rừng và nguồn nguyên liệu tự nhiên ngày càng cạn kiệt

Ở Đài Loan, Peng (1990), Hseu (1992) báo cao đã sưu tầm, nuôi trồng tới hơn

10 loài Ganoderma khác nhau Song Trung Quốc vẫn được thừa nhận là trung tâm lớnnhất thế giới về nuôi trồng, sản xuất nấm Linh chi (Zhao et Zhang, 1994) Hàn Quốccũng chiếm một thị phần đáng kể Đài Loan áp dụng các kỹ thuật tiên tiến và côngnghiệp hóa trong nghề nấm đã có mức tăng trưởng tăng hàng trăm lần

Các nước vùng Đông Nam Á gần nay cũng bắt đầu công nghệ nuôi trồng nấmLinh chi Malaysia chú trọng cải tiến các quy trình nuôi trồng nấm Linh chi ngắnngày trên các phế thải giàu chất xơ, thậm chí cho thu hoạch thể quả chỉ sau 40 ngày(Teow et al, 1994) Ở Thái Lan đã có một số trạng trại cỡ vừa nuôi trồng Ganodermalucidum Linh chi cũng được nuôi trồng từ 1929 ở Ấn Độ (Bose,1929) và phát triển ởqui mô nhỏ

Ngày nay nhiều nước trên thế giới như Thái Lan, Malaysia, Mỹ,… nuôi trồngvà đã sản xuất nấm cùng các chế phẩm Linh Chi làm thuốc và dược phẩm dưỡngsinh Hằng năm doanh thu của các chế phẩm chống ung thư điều chế từ Linh Chi ởĐài Loan đạt trên 350 triệu USD

Ở Việt Nam viện Dược liệu – Hà Nội đã trồng nấm Linh Chi (giống TrungQuốc) thành công vào năm 1987 Chín năm sau, các nhà khoa học thuộc Đại họckhoa học tự nhiên đã chọn được giống nấm Linh Chi mọc hoang ở rừng núi LâmĐồng để nhân giống và đưa vào sản xuất tại trại trồng nấm Linh Chi của Xí nghiệpDược Phẩm Trung Ương 24, đạt kết quả tốt vào năm 1988

Ở Việt Nam, Hải Thượng Lãn Ông Lê Hữu Trác đã nói về Linh chi từ lâu và LêQuý Đôn đã chỉ rõ đó là “Nguồn sản vật quý hiếm của đất rừng Đại Nam” Song gầnnay, loài chuẩn Ganoderma lucidum mới được nuôi trồng thành công trong phòng thínghiệm (1978) và vào thập niên 90, Linh chi mới thật sự bùng nổ tại TP Hồ ChíMinh (Đỗ Tất Lợi et al, 1994), sản lượng hàng năm mới đạt khảng 10 tấn/năm (CổĐức Trọng, 1991, 1993) Nghề trồng nấm ở Việt Nam đang phát triển nhưng quy mônhỏ lẻ hộ gia đình, trang trại mỗi năm sử dụng vài tấn nguyên liệu có sẵn tới vài trămtấn /1 cơ sở để sản xuất nấm

Nhìn chung nghề trồng nấm Linh chi phát triển mạnh và rộng khắp, và đem lạihiệu quả kinh tế rất lớn, nhất là trong 20 năm gần đây Trong sinh học nhờ sự pháttriển của khoa học kỹ thuật trong nghề nấm về chọn tạo giống nấm, về kỹ thuật nuôitrồng và sự bùng nổ thông tin, nghề trồng nấm đã và đang phát triển trên toàn thếgiới, được coi là nghề xóa đói giảm nghèo và làm giàu thích hợp với các vùng nôngthôn, miền núi

1.4 Tiềm năng phát triển của nghề trồng nấm Linh Chi ở Việt Nam

Tiềm năng và những điều kiện thuận lợi của nghề trồng nấm ăn và nấm dượcliệu rất phù hợp với người nông dân nước ta vì: