KĨ THUẬT NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬTI.Giới thiệu:Nuôi cấy mô thực vật là một trong những lĩnh vực ứng dụng đạt nhiều thành công nổi bật của công nghệ sinh học thực vật. Bằng các kỹ thuật nuôi cấy trong điều kiện vô trùng các bộ phận tách rời của cơ thể thực vật, người ta đã nhân giống in vitro thành công nhiều loài cây trồng có giá trị mà trước đây các phương thức nhân giống truyền thống gặp nhiều khó khăn. Bên cạnh đó, Tế bào động vật có thể sinh trưởng trên các loại môi trường dinh dưỡng tổng hợp bên ngoài cơ thể, vì thế chúng đã được nuôi cấy cho các mục đích sau: nghiên cứu các tế bào ung thư, phân loại các khối u ác tính, sản xuất tế bào gốc…III. Khái niệm : Nuôi cấy mô tế bào thực vật là kĩ thuật cho phép nuôi cấy dễ dàng những tế bào thực vật hay mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo thích hợp để tạo ra những khối tế bào hay những cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm.
Trang 1BÀI TIỂU LUẬN
CÔNG NGHỆ SINH HỌC
Đề tài:
KĨ THUẬT NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT I.Giới thiệu:
Nuôi cấy mô thực vật là một trong những lĩnh vực ứng dụng đạt nhiều thành công nổi bật của công nghệ sinh học thực vật Bằng các kỹ thuật nuôi cấy trong điều kiện vô trùng các bộ phận tách rời của cơ thể thực vật, người ta đã nhân
giống in vitro thành công nhiều loài cây trồng có giá trị mà trước đây các phương
thức nhân giống truyền thống gặp nhiều khó khăn
Bên cạnh đó, - Tế bào động vật có thể sinh trưởng trên các loại môi trường
dinh dưỡng tổng hợp bên ngoài cơ thể, vì thế chúng đã được nuôi cấy cho các mục đích sau: nghiên cứu các tế bào ung thư, phân loại các khối u ác tính, sản xuất tế bào gốc…
III Khái niệm :
Nuôi cấy mô- tế bào thực vật là kĩ thuật cho phép nuôi cấy dễ dàng những
tế bào thực vật hay mô phân sinh sạch bệnh trong môi trường nhân tạo thích hợp
để tạo ra những khối tế bào hay những cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm
IV Cơ sở khoa học của công nghệ nuôi cấy mô- tế bào thực vật.
1 Tính toàn năng:
Là khả năng của 1 tế bào hình thành 1 cây hòa chỉnh khi gặp điều kiện thuận lợi, do trong tế bào có chứa bộ AND(NST) hoàn chỉnh, chứa toàn bộ thông tin di truyền cho 1 chu kì sống hoàn chỉnh
2 Sự phân hóa, phản phân hóa của tế bào:
Phân hóa : từ một tế bào ban đầu được biến đổi thành các tế bào chuyên hoá đặc hiệu cho các mô, cơ quan khác nhau
Phản phân hóa : khi các tế bào đã phân hóa thành các tế bào chuyên biệt nhưng vẫn có thể quay về dạng tế bào phôi sinh ban đầu khi gặp điều kiện thuận lợi
V Các bước trong kĩ thuật nuôi cấy mô- tế bào thực vật
Trang 2Bước 1: Chọn vật liệu nuụi cấy:
Đỉnh chồi, đỉnh rễ : là bộ phận non, dễ tham gia vào quỏ trỡnh phõn hoỏ và phản phõn hoỏ tạo nờn cơ thể mới.Thường ớt nhiễm bệnh
Bước 2 : Khử trựng
- Mẫu và dụng cụ được tẩy rửa khử trựng
- Cắt đỉnh sinh trưởng thành phần tử nhỏ, tẩy rửa, khử trựng ở buồng vụ trựng
- Vật liệu nuụi cấy tiến khử trựng với HgCl 0,1% và nước cất
- Que cấy, ống nghiệm và giỏ thể.được khử trựng trong nồi hấp
Bước 3 : Tạo chồi :
Chọn vật liệu nuôi cấy
Tạo chồi Khử trùng
Tạo rễ
Cấy cây vào môi tr ờng thích ứng
Trồng cây trong v ờn ơm
Bướcư1
Bướcư2
ưưBướcư3
ưưBướcư4
ưưBướcư6
ưưBướcư5
Trang 3Vật liệu khởi đầu được chuyển sang môi trường nhân nhanh có bổ sung Xitokinin
- Để cây có thể phát triển thân cành
- Cắm vật liệu nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng có bổ sung thêm xytokinin hoạt hoá tạo chồi
Bước 4 : Tạo rễ:tách riêng các chồi cho vào môi trường tạo rể (bố sungAuxin)
mỗi chồi ra rể thành 1 cây hoàn chỉnh
- Khi cây đạt tiêu chuẩn về chiều cao, số lá thì chuyển sang MT tạo rễ Đó
là MT dinh dưỡng thích hợp bổ sung chất KT auxin, IBA
Bước 5 :Cấy cây vào môi trường thích ứng
- Chuyển cây sang MT thích ứng gần giống với MT tự nhiên về: nhiệt độ,
độ ẩm, ánh sáng
- Không thể bỏ qua bước này được vì cây mới tạo ra rất yếu Nếu trồng trực tiếp vào MT tự nhiên cây sẽ dễ nhiễm bệnh và chết
ChuÈn bÞ t¹o c©y con C©y con míi ®ang h×nh thµnh
T¹o rÔ
Trang 4
Bước 6: Trồng cây trong vườn ươm
- Cho cây thích ứng với MTSX
- Khi cây đủ chiều cao, thân lá thì chuyển cây ra vườn ươm nhân nhanh SX
VI Ý nghĩa khoa học:
- Tạo ra 1 quần thể cây con đồng đều giữ nguyên đặc tính của cây mẹ
- Hệ số nhân nhanh cao
- Rút ngắn thời gian đưa giống vào sản xuất và phát huy được hiệu quả kinh tế
- Nhân được số lượng cây lớn trong 1 diện tích nhỏ
- Đảm bảo các cây giống sạch bệnh
- Cây con được tạo ra nuôi cấy mô được trẻ hoá cao độ
- Thuận tiện và hạ giá thành vận chuyển
- Bảo quản cây giống thuận lợi
VII Ứng dụng trong thực tiễn:
-Nhân cây giống,tạo cây giống
-Sản xuất chất thứ cấp
+ Chất thứ cấp ứng dụng trong công nghiệp
thực phẩm: chất tạo mùi,màu,chất ngọt
+ Chất thứ cấp ứng dụng trong dược phẩm: ankanoid,steroid,các chất riêng lẻ khác ( ubiquinon,saponin ),các protein tái tổ hợp
Làm sạch virut qua nuôi cấy mô phân sinh đỉnh
*Nguyên lý:
- Nồng độ virut giảm dần ở bộ phận gần đỉnh sinh trưởng do:
Trang 5+ virut không vận chuyển được trong mô phân sinh đỉnh.
+ Các tế bào mô phân sinh đỉnh không cho phép sự sao chép thông tin di truyền của virut
+ Hệ thống vô hiệu hoá virut ở mô phân sinh đỉnh mạnh hơn các vùng khác + Nồng độ auxin cao ngăn cản quá trình sao chép của virut
VIII Thành tựu:
• Ngày 16/5/2009, Lâm trường Tiền Phong, tỉnh Thừa Thiên-Huế, cho biết tỉnh vừa đầu tư xây dựng và đưa vào hoạt động một nhà nuôi cấy mô, có
công suất 1 triệu cây/năm để phát triển trồng rừng (Tinmoi.vn)
• Các nhà khoa học Australia cho biết, để tăng kích cỡ bộ ngực, thay vì bơm silicon (một chất dễ gây tai biến), phụ nữ có thể sử dụng các tế bào của chính mình Kỹ thuật nâng ngực bằng cách nuôi cấy tế bào tự thân đã được nhóm nghiên cứu Đại học Melbourne thực hiện thành công trên chuột và
thỏ (18 Tháng tám 2003 vietbao.vn )
• Đại học Đà Lạt đã nhân được gần 30 loài lan đặc hữu của Vườn Quốc gia
Cát Tiên bằng biện pháp nuôi cấy mô (VietNamNet.vn )
• Nhân giống cây lô hội bằng nuôi cấy mô tế bào - một dược liệu quý
(vnExpress.net )
• Mỹ: Nuôi cấy thành công các tế bào cơ tim (10/12/2006 TienPhong.vn)
• Nuôi cấy thành công bước đầu giác mạc từ tế bào gốc (21/11/2007 VietNamNet.vn)
Trang 6
• Nuôi cấy thành công tinh trùng điều trị vô sinh nam (30/12/2008
VietNamNet.vn)
•
(20/02/2007 vnMedia.vn )
•
Trang 7IX TÀI LIỆU THAM KHẢO
baigiang.violet.vn
Giáo trình Nhập môn Công nghệ sinh học PGS.TS Nguyễn Hoàng Lộc
VietNamNet.vn
vnExpress.net
Tinmoi.vn
vietbao.vn
vnMedia.vn
TienPhong.vn
Họ và tên Tìm tài liệu Trình bày Ghi chú
Nguyễn Xuân Hùng
Nguyễn Thị Thu Hồng
Phan Minh Ngọc
Tô Khuynh