Khoá luận tốt nghiệp nghiên cứu quy trình nhân dòng vô tính dã yên thảo rủ tím đỏ mắt đen (petunia purple black eye) bằng kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN - NGUYỄN THỊ HỒNG LUẬN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH NHÂN DỊNG VƠ TÍNH DÃ N THẢO RỦ TÍM ĐỎ MẮT ĐEN (PETUNIA PURPLE BLACK EYE) BẰNG KĨ THUẬT NI CẤY MƠ TẾ BÀO THỰC VẬT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: DI TRUYỀN HỌC HÀ NỘI – 2018 TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN - NGUYỄN THỊ HỒNG LUẬN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH NHÂN DỊNG VƠ TÍNH DÃ N THẢO RỦ TÍM ĐỎ MẮT ĐEN (PETUNIA PURPLE BLACK EYE) BẰNG KĨ THUẬT NI CẤY MƠ TẾ BÀO THỰC VẬT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: DI TRUYỀN HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: ThS PHẠM PHƢƠNG THU HÀ NỘI – 2018 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới Ths Phạm Phƣơng Thu - Khoa Sinh - KTNN trường Đại học Sư Phạm Hà Nội tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Trong thời gian thực đề tài nhận giúp đỡ tận tình thầy TS La Việt Hồng - Khoa Sinh KTNN, cô Mai Thị Hồng - Phịng thí nghiệm Sinh lý thực vật, giúp đỡ, đóng góp ý kiến để tơi hồn thành đề tài khóa luận, nhân tơi xin chân thành cảm ơn Tôi xin cảm ơn tới Ban Giám hiệu trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện để tơi hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Phịng thí nghiệm Sinh lí thực vật, Phịng thí nghiệm Thực vật - Trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi trang thiết bị, phương tiện để tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên, góp ý kiến cho tơi q trình hồn thành đề tài Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Sinh viên Nguyễn Thị Hồng Luận LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Sinh viên NGUYỄN THỊ HỒNG LUẬN MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Dã yên thảo (petunia hybrid) 1.1.1 Vị trí, phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Nguồn gốc, phân bố 1.1.4 Các loại Dã yên thảo 1.1.5 Kĩ thuật trồng chăm sóc Dã yên thảo 1.1.5.1 Chuẩn bị nhà che 1.1.5.2 Chuẩn bị đất 1.1.5.3 Phân bón 1.1.5.4 Nước tưới 1.1.5.5 Chăm sóc 1.1.5.6 Các bệnh thường gặp Dã yên thảo 1.1.6 Những thuận lợi, khó khăn trồng Dã yên thảo nước ta 1.1.6.1 Thuận lợi 1.1.6.2 Khó khăn 1.2 Sơ lược nhân giống vơ tính in vitro 10 1.2.1 Cơ sở khoa học phương pháp nhân giống vơ tính in vitro 10 1.2.2 Ưu, nhược điểm phương pháp nhân giống vô tính 10 1.2.2.1 Ưu điểm 10 1.2.2.2 Nhược điểm 11 1.3 Tổng quan tình hình nghiên cứu nước giới 11 1.3.1 Trên giới 11 1.3.2 Trong nước 12 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Đối tượng, hóa chất, thiết bị 13 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 13 2.1.2 Hóa chất, thiết bị 13 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 13 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 13 2.3.1 Nội dung nghiên cứu 13 2.3.1.1 Thí nghiệm Tạo vật liệu in vitro từ chồi hoa Dã yên thảo 13 2.3.1.2 Thí nghiệm Nhân nhanh Dã yên thảo phương pháp tạo cụm chồi in vitro 14 2.3.1.3 Thí nghiệm Tạo rễ Dã yên thảo in vitro 16 2.3.1.4 Thí nghiệm Rèn luyện Dã n thảo in vitro ngồi mơi trường tự nhiên 16 2.3.2 Phương pháp phân tích số liệu 17 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 Tạo vật liệu khởi đầu in vitro từ chồi Dã yên thảo hoa rủ tím đỏ mắt đen 18 3.2 Nhân nhanh Dã yên thảo phương pháp tạo cụm chồi in vitro 20 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 21 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 22 3.3 Tạo rễ Dã yên thảo in vitro 25 3.4 Rèn luyện Dã yên thảo in vitro ngồi mơi trường tự nhiên 30 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 35 4.1 Kết luận 35 4.2 Kiến nghị 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO 36 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BAP : 6-Benzylaminopurine NAA : 1-naphthaleneacetic acid MS : Murashige & Skoog KH & CN : Khoa học công nghệ Nxb : Nhà xuất ĐC : Đối chứng CT : Công thức TDZ : 1-phenyl-3 DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các cơng thức thí nghiệm xác định hiệu chất khử trùng 14 Bảng 2.2 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 15 Bảng 2.3 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 15 Bảng 2.4 Ảnh hưởng nồng độ α - NAA nước dừa đến tạo rễ chiều cao chồi Dã yên thảo in vitro 16 Bảng 3.1 Hiệu khử trùng chồi hoa Dã yên thảo 19 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến hệ số nhân chồi Dã yên thảo 21 Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 22 Bảng 3.4 Ảnh hưởng α - NAA nước dừa đến hình thành rễ Dã yên thảo 26 Bảng 3.5 Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành rễ sinh trưởng Dã yên thảo 27 Bảng 3.6 Ảnh hưởng giá thể tới rèn luyện tự nhiên 30 Bảng 3.7 Kết rèn luyện Dã yên thảo tuần 1, tuần 2, tuần 3, tuần 31 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Dã n thảo rủ tím đỏ mắt đen (petunia purple black eye) Hình 1.2 Dã yên thảo đơn Hình 1.3 Dã yên thảo kép Hình 1.4 Dã yên thảo biển sóng Hình 3.1 Hiệu chất khử trùng mẫu đỉnh sinh trưởng Dã yên thảo 19 Hình 3.2 A - mẫu chồi Dã yên thảo sử dụng để tạo vật liệu khởi đầu; B - Mẫu Dã yên thảo sau ngày nuôi cấy 20 Hình 3.3 Ảnh hưởng nồng độ BAP đến hệ số nhân nhanh từ chồi hoa Dã yên thảo 21 Hình 3.4 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến hệ số nhân nhanh từ chồi hoa Dã yên thảo 23 Hình 3.5 Cụm chồi Dã yên thảo sau tuần nuôi cấy mơi trường có bổ sung BAP 24 Hình 3.6 Mẫu chồi Dã yên thảo sau tuần ni cấy mơi trường có bổ BAP Kinetin 25 Hình 3.7 Mẫu chồi Dã yên thảo bổ sung nước dừa sau tuần nuôi cấy 28 Hình 3.8 Tạo rễ Dã yên thảo in vitro 29 Hình 3.9 Tỷ lệ sống Dã yên thảo giai đoạn rèn luyện 32 Hình 3.10 Dã yên thảo giai đoạn rèn luyện A - Dã yên thảo trồng ngồi 33 Hình 3.11 Quy trình nhân dịng hoa Dã n thảo rủ tím đỏ mắt đen in vitro 34 Hình 3.4 Ảnh hƣởng nồng độ BAP Kinetin đến hệ số nhân nhanh từ chồi hoa Dã yên thảo Kết xử lý số liệu cho thấy: Hệ số nhân nhanh chồi nghiệm thức tương đồng có hệ số nhân chồi thấp Cụ thể nghiệm thức đối chứng 2,25 nghiệm thức lại 1,5; 2,5; 1,75; 1,75 Khi bổ sung chất kích thích sinh trưởng BAP Kinetin sinh trưởng chậm, hệ số nhân nhanh chồi thấp nên không sử dụng BAP Kinetin nồng độ để nhân nhanh chồi Như vậy, để nhân nhanh tạo cụm chồi Dã yên thảo ta tiến hành mơi trường MS có bổ sung BAP với nồng độ 0,3 mg/l với hệ số nhân chồi 73,5 23 A B D C E Hình 3.5 Cụm chồi Dã yên thảo sau tuần nuôi cấy mơi trường có bổ sung BAP Hình A, B, C, D có bổ sung BAP với nồng độ 0,1; 0,3; 0,5; 0,7 mg/l Hình E mơi trường MS khơng bổ sung chất kích thích (ĐC) 24 A B D C E Hình 3.6 Mẫu chồi Dã yên thảo sau tuần nuôi cấy môi trường có bổ BAP Kinetin Hình A, B, C, D mơi trường có bổ sung BAP 0,1 mg/l Kinetin có nồng độ 0,1; 0,3; 0,5; 0,7 mg/l Hình E mơi trường MS khơng bổ sung chất kích thích (ĐC) 3.3 Tạo rễ Dã yên thảo in vitro Rễ phận thiếu cây, rễ giúp hút nước muối khống, để in vitro sinh trưởng tốt ngồi mơi trường tự nhiên cần hồn thiện rễ Kết thúc giai đoạn nhân nhanh có số lượng lớn chồi chưa hình thành hồn chỉnh chưa có rễ Vì cần chuyển chồi từ môi trường nhân nhanh sang môi trường tạo rễ Thí 25 nghiệm có mục đích tìm mơi trường thích hợp kích thích rễ Dã yên thảo in vitro Trong thí nghiệm môi trường MS bổ sung α - NAA với nồng độ 0,1 mg/l; 0,3 mg/l; 0,5 mg/l; 0,7 mg/l; Ngồi chúng tơi cịn sử dụng nước dừa cho thí nghiệm tạo rễ với nồng độ , 10 , 15 nước dừa có chứa nhiều chất môi trường MS giúp sinh trưởng tốt kích thích rễ Bảng 3.4 Ảnh hƣởng α - NAA nƣớc dừa đến hình thành rễ Dã yên thảo Công thức Nồng độ (mg/l) Sự tạo rễ ĐC MS + CT1 0,1 - CT2 0,3 - CT3 0,5 - CT4 0,7 - CT5 5% + CT6 10% + CT7 15% + Từ kết cho thấy: Môi trường MS có bổ sung α - NAA khơng có tác dụng kích thích rễ CT1 (α - NAA 0,1 mg/l), CT2 (α - NAA 0,3 mg/l), CT3 (α - NAA 0,5 mg/l), CT4 (α - NAA 0,7 mg/l) sau tuần ni cấy khơng rễ, mẫu có tượng tạo mơ sẹo Cịn mơi trường ĐC (MS bản) CT4 (nước dừa 5%), CT5 (nước dừa 10%), CT6 (nước dừa 15%) tạo rễ sau tuần nuôi cấy Như vậy, để tạo rễ Dã n thảo ta sử dụng mơi trường có bổ sung nước dừa 26 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng nồng độ nƣớc dừa đến hình thành rễ sinh trƣởng Dã yên thảo Chiều cao chồi (mm) Chiều dài trung bình Cơng thức Nồng độ nước dừa ĐC MS0 61,25a 21,25b CT5 73,75a 25a CT6 10 nước dừa 61,25a 20b CT7 15 nước dừa 37,5b 17,5c 14,90 1,48 nước dừa LSD 0.05 rễ (mm) Từ bảng cho thấy: Các nghiệm thức cho hiệu rễ tốt sau tuần, số rễ nhiều, sinh trưởng phát triển nhanh Chiều dài trung bình rễ nghiệm thức cao nghiệm thức nước dừa 5% cao 25 Khi nồng độ nước dừa tăng chiều dài trung bình rễ lại giảm Cụ thể CT6 (10 nước dừa), CT7 (15 nước dừa) 20; 17,5 Chiều cao chồi công thức cao Cụ thể ĐC, CT5, CT6, 61,25; 73,75; 61,25 CT7 có chiều cao chồi thấp 37,5 Từ kết chúng tơi kết luận CT5 (mơi trường có bổ sung nước dừa nồng độ 5%) môi trường thích hợp để kích thích rễ Dã yên thảo môi trường sinh trưởng phát triển nhanh 27 A B C D Hình 3.7 Mẫu chồi Dã yên thảo bổ sung nước dừa sau tuần ni cấy Hình A, B, C mơi trường ni cấy có bổ sung nước dừa với nồng độ 5%, 10%, 15% Hình D mơi trường ni cấy khơng bổ sung chất kích thích (ĐC) 28 A B C D Hình 3.8 Tạo rễ Dã yên thảo in vitro Hình A, B mẫu Dã yên thảo nuôi môi trường α - NAA khơng rễ, tạo mơ sẹo Hình C, D mẫu Dã yên thảo nuôi môi trường nước dừa mơi trường MS có rễ 29 3.4 Rèn luyện Dã yên thảo in vitro mơi trƣờng tự nhiên Mục đích thí nghiệm ni cấy mô tạo giống với số lượng lớn, việc cho từ mơi trường ống nghiệm môi trường tự nhiên thành công thí nghiệm thành cơng Khi ống nghiệm đủ tiêu chuẩn (về chiều cao, số lá, số rễ) chuyển trơng ngồi mơi trường tự nhiên Vì in vitro mơi trường ống nghiệm cung cấp sẵn chất dinh dưỡng, ánh sáng, độ ẩm pH thích hợp lên việc rèn luyện với mơi trường tự nhiên khó khăn Khi cho ngồi tự nhiên chúng tơi cho làm quen để thích nghi tốt Một tuần dùng lưới đen để che giúp không bị nước héo Các tuần mở lưới đen với tần suất tăng dần để làm quen với khơng khí bên ngồi Sau cứng cáp không bị héo cho ngồi vườn trồng, rèn luyện chúng tơi tưới nước thường xuyên ngày lần để đảm bảo độ ẩm cho Bảng 3.6 Ảnh hƣởng giá thể tới rèn luyện tự nhiên Giá thể Tỷ lệ sống Số sống Số chết Cát ẩm 100% 48 4% Đất thịt 100% 45 10% Đất thịt + tro trấu + cát 23 27 46% 41 82% sau tuần tỷ lệ 2:1:1 Đất thịt + tro trấu + sơ dừa + xỉ than với tỷ lệ 2:1:1:1 Từ kết cho thấy giá thể cát ẩm đất thịt cho tỷ lệ sống thấp, cát ẩm làm rễ khó thích nghi, rễ hay bị thối, giá thể đất thịt 30 khơng tơi xốp rễ khó hấp thụ chất dinh dưỡng nước Hai giá thể cịn lại cho tỷ lệ sống sót cao, giá thể có độ tơi xốp tốt giúp rễ hô hấp phát triển, giá thể không tích nước làm bị úng giá thể đất thịt, cát ẩm Giá thể gồm đất thịt, tro trấu, sơ dừa, xỉ than có tỷ lệ sống sót cao 82% Như giá thể thích hợp để trồng Dã yên thảo giá thể gồm đất thịt, tro trấu, sơ dừa, xỉ than với tỷ lệ 2:1:1:1 Chúng tiến hành theo dõi tỉ lệ sống Dã yên thảo với giá thể tìm tuần khác Kết thu thể bảng sau: Bảng 3.7 Kết rèn luyện Dã yên thảo tuần 1, tuần 2, tuần 3, tuần Tuần Số sống Số chết Tỷ lệ sống 45 90% 42 84% 41 82% 41 82% Từ kết bảng cho thấy: Số Dã yên thảo chết qua tuần giảm dần Cụ thể tuần có chết sang tuần khơng có chết Tỷ lệ sống sót Dã yên thảo qua tuần cao đạt 82% Sau tuần cứng cáp tiến hành mang trồng chăm sóc 31 Tuần Tuần Tuần Tuần Hình 3.9 Tỷ lệ sống Dã yên thảo giai đoạn rèn luyện 32 A B C D Hình 3.10 Dã yên thảo giai đoạn rèn luyện A - Dã yên thảo trồng vườn thực nghiệm; B, C, D - Dã yên thảo hoa tự nhiên 33 Từ thí nghiệm chúng tơi đưa sơ đồ quy trình nhân dịng vơ tính Dã yên thảo rủ tím đỏ mắt đen kĩ thuật in vitro Chồi đỉnh hoa Dã yên thảo Javen 5%/ phút Tạo vật liệu khởi đầu in vitro BAP 0,3 mg/l tuần Nhân nhanh tạo cụm chồi in vitro Nước dừa 5% tuần Tạo rễ in vitro Đất thịt + tro trấu + sơ dừa + xỉ than theo tỉ lệ 2:1:1:1 tuần Rèn luyện in vitro thích nghi với mơi trường tự nhiên Hình 3.11 Quy trình nhân dịng hoa Dã yên thảo rủ tím đỏ mắt đen in vitro 34 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Qua thí nghiệm thực rút kết luận sau việc nhân giống in vitro Dã yên thảo rủ tím đỏ mắt đen:  Cơng thức tạo vật liệu khởi đầu in vitro từ đỉnh sinh trưởng Dã yên thảo sau xử lý sơ khử trùng mẫu dung dịch Javen 5% với thời gian khử trùng phút cho hiệu khử trùng 70%  Mơi trường thích hợp để tạo cụm chồi Dã yên thảo mơi trường có bổ sung BAP nồng độ 0,3 mg/l cho hệ số nhân chồi 73,5  Môi trường thích hợp để tạo Dã yên thảo in vitro hồn chỉnh (mơi trường tạo rễ) mơi trường có bổ sung nước dừa 5%, sinh trưởng phát triển tốt  Mơi trường thích hợp rèn luyện hoa Dã yên thảo tự nhiên môi trường hỗn hợp bao gồm đất thịt + tro trấu + sơ dừa + xỉ than theo tỉ lệ 2:1:1:1 cho có tỷ lệ sống 82% 4.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu Dã yên thảo với màu sắc khác tiến hành sản xuất Dã yên thảo với số lượng lớn cung cấp cho thị trường theo quy trình nhân dịng vơ tính Dã yên thảo tìm 35 TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tài liệu tiếng Việt Trần Quốc Cường (2011), Hiệu BA, NAA, TDZ lên tái sinh chồi dã yên thảo (petunia sp.) in vitro, Trường Đại học Cần Thơ Phạm Hoàng Hộ (2000), Cây cỏ Việt Nam, Quyển II (in lần 2), Nxb trẻ, tr 769 Nguyễn Thị Diệu Linh (2017), “Nghiên cứu ảnh hưởng cuả thời điểm rèn luyện đến tỉ lệ sống số đặc điểm sinh lí Dã yến thảo nuôi cấy mô giai đoạn vườn ươm” Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương pháp nghiên cứu sinh lý học thực vật, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội, tr 111-114 Vũ Quang Sáng (2010), Sinh lí thực vật ứng dụng, Nxb Đại học Nông nghiệp Hà Nội Lê Hồng Thủy Tiên (2006), “Khảo sát hoa ống nghiệm dừa cạn dã yên thảo”, Trường Đại học nơng lâm Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Thùy Vân (2015), “Nhân nhanh hoa Dã yên thảo (petunia hybrid) kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật”, Trường Đại học Sư phạm Hà Nội  Tài liệu tiếng anh: E G Kirby I K Vasil (1978); “Effects of Diffusates Pollen on germination of pollen elution specimens of Petunia hybrida in vitro”, Đại học Florida Gainesville,Volume No Huits HSM, Gerats AGM, Kreike MM, Mol HNM, Koes RE, 1994, “Genetic control of dihydro - flavonol - reductase gene expression in Petunia hybrida”, Plant J, 6:295 - 310 10 Kortessa Dimasi - TheriouAthanasios, S EconomouEvangelos, M Sfakiotakis, (1993), “Promotion of petunia (Petunia hybrida L.) regeneration 36 in vitro by ethylene”, Plant Cell, Tissue and Organ Culture, Volume 32, Issue 2, pp 219 - 225 11 Segatto ALA, Ramos-Fregonezi AMC, Bonatto SL, Freitas LB, 2014, “Molecular insights into the purple-flowered ancestor of garden petunias”, Am J Bot.101,119 - 127  Trang web tham khảo 12 http://agriviet.com/threads/phan-biet-cac-loai-hoa-da-yen-thao-dang-cotai-viet-nam.207931/ 13 http://cayhoacanh.com/cay-hoa-da-yen-thao/ 14 http://chamsoccaytrong.com/tiet-lo-bi-mat-cach-trong-va-cham-soc-hoada-yen-thao.html 15 http://kythuatnuoitrong.com/ky-thuat-nhan-giong-cay-hoa-da-yen-thaobang-phuong-phap-nuoi-cay-mo/ 16 http://saomaiphuongnam.com/xem-tin-tuc=154:trong-hoa-cay-canh-huong-moi-cua-nong-nghiep-do-thi.html 37 ... hành thực đề tài ? ?Nghiên cứu quy trình nhân dịng vơ tính Dã n thảo rủ tím đỏ mắt đen (petunia purple black eye) kĩ thuật nuôi cấy mơ tế bào thực vật? ?? Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu quy trình nhân. .. NGUYỄN THỊ HỒNG LUẬN NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH NHÂN DỊNG VƠ TÍNH DÃ N THẢO RỦ TÍM ĐỎ MẮT ĐEN (PETUNIA PURPLE BLACK EYE) BẰNG KĨ THUẬT NI CẤY MƠ TẾ BÀO THỰC VẬT KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành:... 3.11 Quy trình nhân dịng hoa Dã yên thảo rủ tím đỏ mắt đen in vitro 34 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Qua thí nghiệm thực rút kết luận sau việc nhân giống in vitro Dã yên thảo rủ tím đỏ