Nghiên cứu nhân giống cây đinh lăng lá nhỏ polycias fruticosa l harm bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harm.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Thái Nguyên, năm 2016 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harms.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ Sinh học Lớp : K44 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2012 - 2016 Giảng viên hƣớng dẫn : PGS.TS Ngô Xuân Bình ThS Nguyễn Thị Tình Thái Nguyên, năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Đƣợc trí ban giám hiệu nhà trƣờng, ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học Và công nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: “Nghiên cứu nhân giống Đinh lăng nhỏ (Polycias fruticosa L Harm.) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật” Qua tháng thực tập viện nghiên cứu phát triển lâm nghiệp phía bắc đến em hoàn thành đề tài Để đạt kết nhƣ ngày hôm em xin chân thành cảm ơn ban giám hiệu nhà trƣờng, ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo môn công nghệ sinh học, anh chị phòng công nghệ sinh học viện nghiên cứu phát triển lâm nghiệp tạo điều kiện giúp đỡ em suốt thời gian thực đề tài Em xin bày tỏ long biết ơn sâu sắc tới Cô giáo Ths Nguyễn Thị Tình chị Phạm Thị Thảo tận tình bảo, hƣớng dẫn em thời gian thực đề tài Cuối em xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè hết lòng động viên, giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần cho em trình học tập nghiên cứu Do thời gian thực tập đề tài có giới hạn nên đề tài tránh khỏi sai sót Em mong nhận đƣợc đóng góp ý kiến thầy cô bạn để đề tài em đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn ! Thái nguyên, ngày tháng năm 2016 Sinh viên thực Nguyễn Văn Thanh ii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Trang Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1% đến kết khử trùng 27 Bảng 4.2 Kết ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng nhỏ sau 45 ngày 29 Bảng 4.3 Kết ảnh hƣởng nồng độ kinetine BA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lănglá nhỏ sau tháng 31 Bảng 4.4 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng loại cytokine thích hợp kết hợp với NAA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng sau tuần tiến hành thí nghiệm 34 Bảng 4.5 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin (NAA, IBA) đến khả rễ chồi Đinh lăng nhỏ 30 ngày 36 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm sau tuần 38 iii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Trang Cây Đinh lăng nhỏ Hình 2.1: Vƣờn đinh lăng trồng hộ gia đình 12 Hình 4.1: Biểu đồ thể ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1%đến hiệu khử trùng mẫu 28 Hình 4.2: Biểu đồ thể ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng nhỏ 30 Hình 4.3: Thể ảnh hƣởng nồng độ kinetine BA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lănglá nhỏ sau tháng 32 Hình 4.4: Thể ảnh hƣởng hàm lƣợng loại cytokine thích hợp kết hợp với NAA đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng nhỏ sau tuần thí nghiệm 34 Hình 4.5: Thể hiên ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin (NAA, IBA) đến khả rễ chồi Đinh lăng nhỏ 30 ngày 36 Hình 4.6: Biểu đồ thể ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm i iv DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT 2,4D : 2,4 Diclorophenoxy axetic axit BAP : 6-benzin- aminopurin CT : Công thức ĐC : Đối chứng GA3 : Axit giberilic IBA : Indol butylic acid MS : Murashige & Skoog TB : Trung bình v MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa đề tài PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lƣợc Đinh lăng 2.1.1 Nguồn gốc vị trí phân loại 2.1.2 Đặc điểm sinh thái 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.1.4 Cách trồng 2.1.5 Thu hái chế biến 2.1.6 Thành phần hóa học 2.1.7 Tác dụng dƣợc lý 2.2 Tình hình sử dụng Đinh lăng Việt Nam giới .11 2.2.1 Trên giới .11 2.2.2 Ở Việt Nam 11 2.3 Cơ sở khoa học 13 2.3.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào 13 2.3.2 Kỹ thuật nuôi cấy đỉnh sinh trƣởng tạo giống bệnh nhân nhanh giống 14 2.3.3 Ảnh hƣởng chất điều tiết sinh trƣởng tới trình nuôi cấy mô tế bào thực vật 14 PHẦN 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 3.1 Vật liệu phạm vi nghiên cứu 18 vi 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu .18 3.3 Hóa chất thiết bị sử dụng 18 3.3.1 Hóa chất .18 3.3.2 Thiết bị sử dụng 18 3.4 Nội dung nghiên cứu 19 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.5.1 Điều kiện bố trí thí nghiệm 19 3.5.2 Chuẩn bị môi trƣờng nuôi cấy mô tế bào thực vật 19 3.5.3 Nội dung 1: 20 3.5.4 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .21 3.5.5 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .22 3.5.6 Phƣơng pháp nghiên cứu nội dung .24 3.5.7 Phƣơng pháp xử lý số liệu .26 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 4.1 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1% đến đến kết khử trùng mẫu Đinh lăng .27 4.2 Kết ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng .29 4.3 Kết ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng tới khả nhân nhanh chồi Đinh lăng .31 4.3.1 Kết ảnh hƣởng nồng độ loại cytokine đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng 31 4.3.2 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng NAA thích hợp đến khả nhân nhanh chồi Đinh lăng .34 4.4 Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin than hoạt tính đến khả rễ chồi Đinh lăng 36 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm 37 vii PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 40 5.1 Kết luận 40 5.2 Kiến nghị .41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 I Tài liệu tiếng Việt .42 II Tài liệu nƣớc 44 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Nguồn tài nguyên thuốc Việt Nam phong phú, đa dạng có nhiều thuốc quý Trong số có Đinh lăng Đinh lăng (Polycias fruticosa L Harms.) loại dƣợc liệu có giá trị cao ngành y học cổ truyền Việt Nam số nƣớc giới Nhiều công trình nghiên cứu chứng minh tác dụng dƣợc lý Đinh lăng tƣơng tự nhƣ nhân sâm độc nhân sâm Vỏ, rễ Đinh lăng chứa saponin, alkaloit, vitamin B1, B2, B6, C, 20 axit amin, glycosit, phytosterol, tanin, axit hữu cơ, tinh dầu, nhiều nguyên tố vi lƣợng: K, Mn, Ca, Mg, Fe, Lo, Zw 21,10 % đƣờng Hai hợp chất quan trọng Đinh lăng polyacetylen saponin tripterpen Trong đó, hợp chất polyetylen tách chiết đƣợc có tính kháng khuẩn mạnh kháng số dạng ung thƣ, hợp chất saponin tripterpen có tác dụng chống stress, chống trầm cảm, chống oxi hóa tốt [13], [14], [20] Dựa nghiên cứu dƣợc tính Đinh lăng, số chế phẩm từ Đinh lăng đƣợc sử dụng nhƣ cao đặc Đinh lăng, tinh sâm PANA, rƣợu thuốc ngọt, viên ngậm DINLAN Điều cho thấy nhu cầu nguồn nguyên liệu Đinh lăng để làm thuốc chữa bệnh ngày tăng Tuy nhiên, nguồn nguyên liệu khai thác tự nhiên thƣờng phân tán, cho chất lƣợng không đồng số lƣợng hạn chế Vì vậy, nhân giống in vitro phƣơng pháp ƣu việt nhằm thu nhận nguồn nguyên liệu ổn định, giống đồng đều, bệnh, làm tăng hoạt chất sinh học so với nguyên liệu ban đầu Cây đinh lăng mang giá trị dƣợc liệu cao nhƣng chế phẩm chứa Đinh lăng thị trƣờng, nguyên nhân nguồn nguyên liệu hạn chế, trồng theo phƣơng pháp tự nhiên cần phải - năm thu hoạch đƣợc rễ 39 Từ kết bảng 4.6 hình 4.6 cho thấy: Với giá trị LSD.05 đạt 9,4 công thức khác có sai khác ý nghĩa mức độ tin cậy 95% Giá thể trộn ( đất : Trấu hun : mùn ) ( CT3) cho tỷ lệ sống sót cao đạt 96,67% , công thức với giá thể trấu hun, cho tỷ lệ sống đạt 86,67% Giá thể mùn công thức cho tỷ lệ sống thấp 80% Kết đƣợc giaiar thích nhƣ sau: Giá thể mùn chặt giữ nƣớc nên in vitro dễ bị úng gây thối rễ dẫn đến tỷ lệ sống thấp Giá thể trấu hun thoáng khí, trồng giá thể có tỷ lệ sống tƣơng đối cao đạt 86,67 % Do giá thể nghèo dinh dƣỡng sinh trƣởng chậm Giá thể trộn (1 đất : trấu hun: mùn) khắc phục đƣợc nhƣợc điểm hai giá thể Cây in vitro trồng giá thể có tỷ lệ sống cao đạt 96,67% Cây sinh trƣởng phát triển tốt Nhƣ giá thể thích hợp để in vitro phát triển sinh trƣởng tốt vƣờn ƣơm đất + trấu hun + mùn (1:2:1) 40 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Sau thời gian nghiên cứu nhân nhanh Đinh lăng nhỏ phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thức vật môi trƣờng MS bổ sung chất kích thích sinh trƣởng nhƣ: BA, Kinetin, NAA với nồng độ khác em rút số kết luận sau: - Thời gian khử trùng mẫu: mẫu đƣợc khử trùng dung dịch HgCl2 0,1 % 12 phút cho kết tốt Tỷ lệ mẫu sống không nhiễm đạt 92,56 % - Môi trƣờng thích hợp cho tái sinh chồi Đinh lăng nhỏ : MS + agar g/l + đường 30 g/l cho tỷ lệ tái sinh chồi đạt :90 % - Môi trƣờng thích hợp để nhân nhanh chồi Đinh lăng nhỏ bổ sung Kinetine BA là: kinetine với tỷ lệ nhân trồi 2,16 lần - Môi trƣờng thích hợp để nhân nhanh chồi Đinh lăng nhỏ bổ sung kết hợp Kinetine NAA : MS + agar g/l + đường 30 g/l + Kinetine1,5 mg/l + NAA 1,0 mg/l, hệ số nhân chồi đạt 3,07 lần - Môi trƣờng thích hợp cho cảm ứng rễ Đinh lăng nhỏ bổ sung thêm NAA : MS + agar g/l + đường 30 g/l + NAA 0,5 mg/l, số rễ/cây đạt 16,5 - Giá thể phù hợp cho phát triển sinh trƣởng Đinh lăng nhỏ in vitro vƣờn ƣơm là: Mùn hữu + Trấu hun + Đất ( 1:2;1), tỷ lệ sống đạt 93,33 % 1mg/l cho 96,67 % mẫu nuôi cấy có khả rễ với IBA 93,33 % mẫu Đinh lăng nuôi cấy có khả rễ 41 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu hoàn thiện quy trình nhân nhanh in vitro giống Đinh lăng Cần tạo số lƣợng lớn Đinh lăng đủ tiêu chuẩn để đƣa vào sản xuất đại trà 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Chƣơng, Nguyễn Thƣợng Dong, Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Huy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Hoàn, Cây thuốc Động vật làm thuốc Việt Nam - tập 1, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội, 2004 Đỗ Huy Bích, Nguyễn Tập, Trần Toàn, Trần Hùng, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu, Phạm Duy Mai, Bùi Xuân Chƣơng, Tài nguyên thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội, 1993 Lƣơng Thị Bích, “Nghiên cứu số điều kiện nuôi cấy mô sẹo Đinh lăng (Policias fruticosa L.Harms.)”, Khóa luận tốt nghiệp Đại học, Trƣờng Đại học Khoa học- Đại học Thái Nguyên, tr: 26 - 33, 2011 Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội, Công nghệ sinh học thực vật cải tiến giống trồng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, 1997 Tào Duy Cần, Thuốc nam, thuốc bắc phương thang chữa bệnh, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội, 2001 Võ Văn Chi, Từ điển thuốc Việt Nam, NXB Y học, 1997 Võ Văn Chi, Từ điển thực vật thông dụng - tập 2, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội, 2004 Võ Văn Chi, Sách tra cứu tên cỏ Việt Nam, NXB Giáo dục, Hà Nội, 2007 Lê Trần Đức, Cây thuốc Việt Nam - trồng hái chế biến, trị bệnh ban đầu, NXB Nông nghiệp, 1997 10 Hoàng Thị Hà, Dinh dưỡng khoáng thực vật, NXB Đại học Quốc Gia Hà Nội, Hà Nội, 1996 43 11 Phạm Hoàng Hộ, Cây có vị thuốc Việt Nam, NXB Trẻ, 2006 12 Nguyễn Bá Hoạt, Nguyễn Duy Thuần, Kĩ thuật trồng, sử dụng chế biến thuốc, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, 2005 13 Nguyễn Thị Thu Hƣơng, Lƣơng Kim Bích, Nguyễn Thới Nhâm, Tác dụng dược lý cao toàn phần chiết xuất từ rễ Đinh lăng, Công trình nghiên cứu khoa học 1987-2000, tr.241-243 14 Nguyễn Thị Thu Hƣơng, Hoàng Thị Mận, “Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa Đinh lăng”, Tạp chí Dược liệu, (8(5)), tr 142-146, 2003 15 Nguyễn Nhƣ Khanh, Cao Phi Bằng, Sinh lý học thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội, 2009 16 Nguyễn Nhƣ Khanh, Sinh lý học sinh trưởng phát triển thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội, 1996 17 Trần Thị Lệ, Võ Văn Quang, Giáo trình hóa sinh thực vật, NXB Nông nghiệp, 2006 18 Ngô Ứng Long, Đinh lăng, NXB Nông nghiệp Hà Nội, 1986 19 Đỗ Tất Lợi, Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học, 2003 20 Trần Công Luận, Hồ Thị Tuyết Linh, Phạm Thị Xuân Thắm, Nguyễn Thành Nguyên, Nguyễn Thƣơng Dong, Hợp chất polyacetylen Đinh lăng, Công trình nghiên cứu khoa học 1987-2000, tr.238-240 21 Trần Duy Minh, Ph.D Viện sinh học Nhiệt đới, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, Công nghệ sinh học thực vật, Giáo trình cao học nghiên cứu sinh, Trƣờng Đại học Nông Lâm, 2006 22 Nguyễn Văn Nghi, Chuyên đề sinh lý công nghệ tế bào thực vật, Đại học Quốc Gia Hà Nội - Trƣờng Đại học Khoa học tự nhiên, 1998 23 Nguyễn Văn Sang, 750 thuốc nam, NXB Phƣơng Đông, 2008 44 24 Phạm Xuân Sinh, Phương pháp chế biến thuốc cổ truyền, NXB Y học, 2006 25 Nguyễn Đức Thành, Nuôi cấy mô tế bào thực vật - Nghiên cứu ứng dụng, NXB Nông nghiệp Hà Nội, 2000 26 Nguyễn Văn Uyển tác giả, Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trông, NXB Nông nghiệp, 1993 27 Bùi Trang Việt, Sinh lý thực vật đại cương - phần 2, NXB Đại học Quốc Gia TP Hồ Chí Minh, 2000 28 Đỗ Năng Vịnh, Công nghệ tế bào thực vật ứng dụng, NXB Nông nghiệp, 2005 29 Vũ Văn Vụ, Sinh lý thực vật ứng dụng, NXB Giáo dục, Hà Nội, 1999 30 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp, Công nghệ sinh học tập 2, NXB Giáo dục, Hà Nội, 2006 31 Vũ Văn Vụ, Vũ Thanh Tâm, Hoàng Minh Tấn, Sinh lý học thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội, 2008 32 Viện dƣợc liệu, Tài nguyên thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội, 2002 33 Từ điển bách khoa dược học, NXB từ điển Bách Khoa, 1999 II Tài liệu nƣớc 34 Bhojwani S.S and Razdan M.K, Plant Tissue Culture: Theory and Practice, Amsterdam, Oxford, NewJork, Tokyo, p.421-449, 1983 35 Collin H.A and Edwards S., Plant Tissue Tulture, Springer Bios scientific publisters, UK, 1998 36 Narayanaswamy S., Plant Cell and Tissue Tulture, Tataca Mc Graw Hill, Publishing company limited, New Delhi, 1994 37 Simth R.H., Plant Tissue Culture, Departmen of soil and crop science, 1992 45 38 Sliwinska A & Olszowska O & Furmanowa M & Nosov A., Rapid multiplication of polyscias filicifolia by secondary somatic embryogenesis In Vitro Cell.Dev.Biol.-Plant, p.69-77, 2008 39 Vo DH, Yamamura S, Ohtani K, Kasai R, Yamasaki K, Nguyen TN, Hoang MC, Oleanane saponins from Polyscias fruticosa, PhytoChemistry, 1998 40 Tran Ty Yen, Stimulation of sexual performance in male rats with the root extract of Dinh lang (Policias fruticosa L.), Department of Pharmacology, Semmelweis University Medical School, Budapest, Hungary, 1990 PHỤ LỤC Hình ảnh Giai doạn vào mẫu Giai đoạn nhân nhanh Giai đoạn rễ Sản phẩm giai đoạn rễ Giai đoạn vƣờn ƣơm PHỤ LỤC Môi trƣờng MS Vitamin (PH=5,6-5,8) Môi trường MS Vitamin (PH=5,6-5,8) Thành phần (mg/l) Lƣợng lấy (ml) KNO3 1900 20 NH4NO3 1650 20 KH2PO4 170 10 MgSO4.7H2O 370 10 CaCl2.2H2O 440 10 FeSO4.7H2O 27,8 Na2 EDTA 37,3 H3BO3 0,3 MnSO4.H2O 0,76 ZnSO4.7H2O 0,2 STT (B5 Minor) (B5 Vitamins) KI 0,075 Na2MoO4.2H2O 0,025 CuSO4 0,0025 CoCl2.6H2O 0,0025 Myo-inositol 10 Nicotinic acid 0,1 Pyridoxin-HCl 0,1 Thiamin-HCl 10 10 20 Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0.1% đến đến kết khử trùng mẫu Đinh lăng nhỏ BALANCED ANOVA FOR VARIATE SKNHIEM FILE TN1 23/ 5/16 8: :PAGE thi nghiem anh huong cua thoi gian khu trung Hgcl2 0.1% VARIATE V003 SKNHIEM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 90.2667 22.5667 84.63 0.000 * RESIDUAL 10 2.66666 266666 * TOTAL (CORRECTED) 14 92.9333 6.63810 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 23/ 5/16 8: :PAGE thi nghiem anh huong cua thoi gian khu trung Hgcl2 0.1% MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 SKNHIEM 7.00000 9.33333 11.3333 14.3333 11.6667 SE(N= 3) 0.298142 5%LSD 10DF 0.939457 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 23/ 5/16 8: :PAGE thi nghiem anh huong cua thoi gian khu trung Hgcl2 0.1% F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SKNHIEM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 10.733 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.5765 0.51640 4.8 0.0000 | | | | Kết ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi Đinh lăng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TROIMOC FILE HIC 23/ 5/16 1:47 :PAGE thi nghiem ve moi truong ms b5 va wpw VARIATE V003 TROIMOC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 80.2222 40.1111 51.57 0.000 * RESIDUAL 4.66668 777779 * TOTAL (CORRECTED) 84.8889 10.6111 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HIC 23/ 5/16 1:47 :PAGE thi nghiem ve moi truong ms b5 va wpw MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 TROIMOC 27.0000 20.0000 21.6667 SE(N= 3) 0.509176 5%LSD 6DF 1.76132 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HIC 23/ 5/16 1:47 :PAGE thi nghiem ve moi truong ms b5 va wpw F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TROIMOC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 22.889 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.2575 0.88192 3.9 0.0003 | | | | Kết ảnh hƣởng chất kích thích sinh trƣởng tới khả nhân nhanh chồi Đinh lăng BALANCED ANOVA FOR VARIATE CHOIBAT FILE TN3 23/ 5/16 0:42 :PAGE thi nghiem nhan nhanh troi dinh lang su dung kinetine va BA VARIATE V003 CHOIBAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 327.407 40.9259 73.67 0.000 * RESIDUAL 18 10.0000 555556 * TOTAL (CORRECTED) 26 337.407 12.9772 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3 23/ 5/16 0:42 :PAGE thi nghiem nhan nhanh troi dinh lang su dung kinetine va BA MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 3 3 CHOIBAT 10.6667 14.6667 18.0000 23.0000 19.6667 13.6667 16.0000 19.6667 16.3333 SE(N= 3) 0.430332 5%LSD 18DF 1.27858 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3 23/ 5/16 0:42 :PAGE thi nghiem nhan nhanh troi dinh lang su dung kinetine va BA F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CHOIBAT GRAND MEAN (N= 27) NO OBS 27 16.852 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.6024 0.74536 4.4 0.0000 | | | | Kết ảnh hƣởng hàm lƣợng Auxin than hoạt tính đến khả rễ chồi Đinh lăng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TROIBAT FILE BOOK1 23/ 5/16 3:24 :PAGE thi nghiem ve su ket hop NA vs (A) VARIATE V004 TROIBAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 174.267 43.5667 93.36 0.000 * RESIDUAL 10 4.66668 466668 * TOTAL (CORRECTED) 14 178.933 12.7810 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BOOK1 23/ 5/16 3:24 :PAGE thi nghiem ve su ket hop NA vs (A) MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 3 TROIBAT 20.6667 22.6667 25.0000 30.6667 26.3333 SE(N= 3) 0.394406 5%LSD 10DF 1.24279 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BOOK1 23/ 5/16 3:24 :PAGE thi nghiem ve su ket hop NA vs (A) F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TROIBAT GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 25.067 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.5750 0.68313 2.7 0.0000 | | | | Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số loại giá thể đến khả sinh trƣởng phát triển in vitro vƣờn ƣơm BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLCS FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom VARIATE V003 TLCS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 422.222 211.111 9.50 0.014 * RESIDUAL 133.333 22.2222 * TOTAL (CORRECTED) 555.556 69.4444 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 TLCS 80.0000 86.6667 96.6667 SE(N= 3) 2.72166 5%LSD 6DF 9.41464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SL 14/ 5/16 15: :PAGE anh huong cua gia the den kha nang sinh truong va phat trien cua cay in vitro o ngoai vuon uom F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLCS GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 87.778 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.3333 4.7140 5.4 0.0144 | | | | ... nghệ thực phẩm thời gian thực tập tốt nghiệp em thực đề tài: Nghiên cứu nhân giống Đinh lăng nhỏ (Polycias fruticosa L Harm.) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Qua tháng thực tập viện nghiên. .. Nghiên cứu nhân giống Đinh lăng nhỏ (Polyciasfruticosa L Harm.) phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Hình 1.1: Cây Đinh lăng 1.2 Mục tiêu đề tài Xác định đƣợc công thức môi trƣờng phù hợp để nhân. .. - - NGUYỄN VĂN THANH Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polycias fruticosa L Harms.) BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO THỰC VẬT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào