Nghiên cứu nhân giống in vitro cây đinh lăng lá nhỏ (polyscias fruticosa l harms)

1 TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VIỆN KHOA HỌC SỰ SỐNG BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƢỜNG MÃ SỐ : T2016-30 NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polyscias fruticosa L Harms) Chủ trì đề tài: ThS Đào Duy Hƣng THÁI NGUYÊN, 2016 TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VIỆN KHOA HỌC SỰ SỐNG BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP TRƢỜNG MÃ SỐ : T2016-30 NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ (Polyscias fruticosa L Harms) Chủ trì đề tài : ThS Đào Duy Hƣng Những ngƣời tham gia : ThS Lê Thị Hảo ThS Đỗ Bích Duệ KS Nguyễn Hƣơng Xiêm Thời gian thực : Từ tháng 01/2016 đến tháng 12/2016 Địa điểm nghiên cứu : Khu Công nghệ Tế bào Viện Khoa học Sự sống Đại học Nông Lâm Thái Nguyên THÁI NGUYÊN, 2016 TÓM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: “Nghiên cứu nhân giống in vitro Đinh lăng nhỏ (Polyscias fruticosa L Harms)” – Mã số: T2016-30 – Chủ nhiệm đề tài: ThS Đào Duy Hƣng – Tel.: 0978131645 duyhungtn09@gmail.com E-mail: – Cơ quan chủ trì đề tài: Đại học Nông Lâm Thái Nguyên – Cơ quan cá nhân phối hợp thực hiện: – Thời gian thực hiện: Tháng 01/ 2016 đến tháng 12/2016 Mục tiêu: - Nghiên cứu thành công quy trình nhân giống in vitro đinh lăng nhỏ - Sản xuất thử nghiệm 500 lăng nhỏ giống công nghệ nuôi cấy mô tế bào Viện Khoa học Sự sống Nội dung chính: - Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật vô trùng tạo vật liệu ban đầu cho nhân giống - Nội dung 2: Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh cụm chồi giống Đinh lăng - Nội dung 3: Nghiên cứu kỹ thuật rễ cho chồi nuôi cấy để tạo Đinh lăng hoàn chỉnh phòng thí nghiệm - Nội dung 4: Nghiên cứu giá thể phù hợp cho Đinh lăng in vitro phát triển tốt điều kiện vƣờn ƣơm Kết đạt đƣợc (khoa học, ứng dụng, đào tạo, kinh tế – xã hội, v.v…) 3.1 Kết nghiên cứu - Vô trùng tạo vật liệu ban đầu cho nhân giống in vitro đinh lăng nhỏ nên khử trùng mẫu dung dịch HgCl2 với nồng độ 0,1% thời gian 15 phút cho tỷ lệ mẫu đạt 70% tỷ lệ mẫu tạo chồi đạt 65% -Nhân nhanh cụm chồi đinh lăng nhỏ môi trƣờng MS có bổ sung BAP nồng độ mg/l thích hợp cho hệ số nhân chồi đạt 5,37 lần, chiều cao chồi trung bình đạt 2,1 cm, chồi mập xanh, chồi rõ ràng - Môi trƣờng thích hợp để tạo hoàn chỉnh cho đinh lăng nhỏ môi trƣờng 1/2MS bổ sung NAA với nồng độ 0,3 mg/l cho kết tạo hoàn chỉnh tốt tỷ lệ chồi rễ đạt 100%, trung bình số rễ chồi đạt 4,40 rễ/chồi chất lƣợng rễ tốt - Giá thể phù hợp để đƣa đinh lăng nhỏ in vitro trồng vƣờn ƣơm giá thể đất màu trộn với trấu hun tỷ lệ (4:1) cho tỷ lệ sống đạt 100%, trung bình chiều cao phù hợp đạt 4,35 cm chất lƣợng tốt (thân mập, xanh) 3.2 Kết khoa học - 01 báo khoa học 3.3 Kết ứng dụng - 01 quy trình nhân giống đinh lăng nhỏ công nghệ nuôi cấy mô tế bào - 500 đinh lăng nhỏ giống đƣợc nhân công nghệ nuôi mô tế bào SUMMARY - Research Project Title: In vitro propagation of Polyscias fruticosa L Harms - Code number: T2016-30 - Coordinator: Hung Dao Duy (MSC) - Implementing Institution: Thai Nguyen University of Agriculture and Forestry - Cooperating Institution(s): - Duration: from 01/2016 to 12/2016 Objectives: - A micropropagation system of Polyscias fruticosa L Harms was set up - Trial production of 500 trees (Polyscias fruticosa L Harms) by in vitro propagation technology at Institue of life science Main contents: - Content 1: Research aseptic technique to create original material for breeding - Content 2: Study bud regeneration technique of Polyscias fruticosa L Harms - Content 3: Technical studies rooting for shoots cultures of complete plants in the laboratory - Content 4: Research suitable growing substrate for in vitro cultured Polyscias fruticosa L Harms at nursery stage Results obtained: 3.1 Results research - In vitro propagation of Polyscias fruticosa L Harms, the shoottip was sterilized by HgCl2 0,1% in 15 minutes, rate of clean samples was as 70%, and 65% of samples produced buds - Suitable culture medium for bud regeneration was basic MS medium added with BAP (2 mg/l), this has resulted in 5,37 times of bub regeneration, 2,1 cm of average height, bud was large with green leaf - Most suitable culture medium for root formation was as ½ MS added with NAA 0,3 mg/l, that of 100% cultured samples produced roots with average of 4,4 roots/bud - Suitable growing substrate for in vitro cultured plant at nursery stage was as cultivated soil with rice husk ask (at the rate mixing of 4:1), all of 100% nursery plants have been good growing, 4,35 cm of average height, plant shoot was large with strong green leaf 3.2 Results science - 01 article science 3.3 Results to apply - 01 process Polyscias fruticosa L Harms propagation techniques by tissue culture - 500 of Polyscias fruticosa L Harms was breeding by in vitro propagation technology MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung đinh lăng 1.1.1 Đặc điểm thực vật học Đinh lăng 1.1.2 Nguồn gốc phân bố 1.1.3 Phân loại 1.1.4 Thành phần hóa học 1.1.5 Giá trị Đinh lăng 1.2 Tình hình nghiên cứu nhân giống Đinh lăng 1.3 Cơ sở khoa học phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.4 Ảnh hƣởng điều kiện nuôi cấy 1.5 Một số công trình nhân giống dƣợc liệu phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật nƣớc CHƢƠNG II NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 12 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 12 2.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 12 2.2 Nội dung phƣơng pháp nghiên cứu 12 2.2.1 Nội dung nghiên cứu 12 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu 12 2.2.2.1 Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật vô trùng tạo vật liệu ban đầu cho nhân giống 12 2.2.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh cụm chồi giống Đinh lăng 14 2.2.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu kỹ thuật rễ cho chồi nuôi cấy để tạo Đinh lăng hoàn chỉnh phòng thí nghiệm 15 2.2.2.4 Nội dung 4: Nghiên cứu giá thể phù hợp cho Đinh lăng in vitro phát triển tốt điều kiện vườn ươm 17 2.2.3 Xử lý số liệu 18 2.2.4 Điều kiện thí nghiệm 18 2.2.4.1 Thí nghiệm in vitro 18 2.2.4.2 Thí nghiệm thích ứng in vitro điều kiện tự nhiên 18 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 19 3.1 Kết nghiên cứu vô trùng mẫu đinh lăng làm vật liệu nuôi cấy mô 19 3.2 Kết nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh cụm chồi giống Đinh lăng 20 3.2.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin đến hiệu nhân chồi 20 3.2.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến hiệu nhân chồi 21 3.2.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BAP IAA đến hiệu nhân chồi 22 3.2.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng kết hợp BAP IBA đến hiệu nhân chồi 23 3.3 Kết nghiên cứu kỹ thuật rễ cho chồi nuôi cấy để tạo Đinh lăng hoàn chỉnh phòng thí nghiệm 24 3.3.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến hiệu rễ 24 3.3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến hiệu rễ 25 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể đến tỷ lệ sống đinh lăng nhỏ sau nuôi cấy mô 26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO 29 NH NG CH VIẾT TẮT BAP 6-benzylaminopurine CT Công thức ĐC Đối chứng Kinetin furfurylaminopurine MS Murashinge and Skoog, 1962 NAA Naphlene acetic acid TN Thí nghiệm IBA Indole – – butyric acid IAA Indole-3-acetic acid LV 1/2MS B5 Môi trƣờng MS có thành phần dinh dƣỡng giảm nửa 10 DANH MỤC CÁC BẢNG TRONG BÁO CÁO Bảng Tên bảng luận văn Trang Bảng 3.1 Kết nghiên cứu vô trùng mẫu đinh lăng làm vật liệu nuôi cấy mô 19 Bảng 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng Kinetin đến hiệu nhân chồi 20 Bảng 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng BAP đến hiệu nhân chồi 21 Bảng 3.4 Bảng 3.5 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp BAP IAA đến hiệu nhân chồi Kết nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu nhân chồi 22 23 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng NAA đến hiệu Bảng 3.6 rễ 24 Bảng 3.7 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng IBA đến hiệu rễ 25 Bảng 3.8 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng giá thể đến tỷ lệ sống đinh lăng nhỏ sau nuôi cấy mô 26 41 fruticosa L Harms Araliacea), Công trình Nghiên cứu khoa học 1987-2000, Viện D c Liệu, Nxb Khoa Học Kỹ Thuật, Trang 241-244 11 Nguy n Thị Thu H ơng, Nguy n Thị Ánh Nh (2004), “Nghi n cứu tác dụng bảo vệ gan củ Đinh lăng Polyscias fruticosa L Harms dự tr n chế tác dụng chống oxy hó ”, Tạp trí Dược liệu, Tập 6, (Số 1), Trang 26-33 12 Ngô Ứng Long (1985), “So sánh tác dụng tăng lực thích nghi Đinh lăng Polyci s frusticos L H rms, Chân chim Eleuterococ”, Tạp trí Dược liệu, Tập 2, (Số 1), Trang 24-27 13 Đỗ Tất L i (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học Trang 828-830 14 Phạm Thị Tố Liên, Võ Thị Bạch M i (2007), “B ớc đầu nghiên cứu tạo dịch treo tế bào đinh lăng Polysci s fruticos L H rms”, Tạp chí phát triển KH&CN, tập 10, (số 07) 15 Trần Thị Liên, Nguy n Văn Thuận, Đoàn Thị Thanh Nhàn (2005), “Nghi n cứu nhân nh nh Đinh lăng Polysci s fruticos L H rms ph ơng pháp in – vitro”, Tạp trí Nông nghiệp Phát triển nông thôn, (Số 14), trang 35- 40 16 Phùng Văn Ph , Nguy n Thị Hồng Gấm, Nguy n Trung Thành (2010), “Nghi n cứu kỹ thuật nhân nhanh chồi in vitro loài lan kim tuyến (Anoectochilus Roxburghii (Wall.) Lindl)”, Tạp chí Khoa học, Đại học Quốc Gia Hà Nội, số 26, trang 248-253 17 Ninh Thị Ph m, “Một số biện pháp kỹ thuật tăng hiệu nhân giống, Củ đinh lăng nhỏ, Polysci s fruticos (L.) H rms”, Tạp chí Khoa học Phát triển 2013, Tập 11, (số 2), 168-173 18 Nguy n Thị Sơn, Nguy n Thị Lý Anh, Vũ Ngọc Lan, Trần Thế Mai (2012), “Nhân giống in vitro loài lan Dendrobium Fimbriatum Hook (Hoàng Thảo Long Nhãn)”, Tạp chí Khoa học Phát triển, Số 2(10), trang 263-271 19 Nguy n Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật, nghiên cứu ứng dụng, Nhà xuất Nông Ngiệp, Hà Nội 20 Nguy n Thị Kim Th nh, D ơng Huyền Tr ng (2008), “Nghi n cứu kỹ thuật nhân giống vô tính lô hội ph ơng pháp nuôi cấy in vitro”, Tạp chí Khoa học Phát triển, số 6(6), trang 514-521 21 L Thị Nh Thảo, Hoàng Hữu Tuấn, M i Thị Ph ơng Ho , Đỗ Tiến Vinh, Trần Văn Minh (2014), Nhân giống Đinh lăng nhỏ kỹ thuật nuôi cấy chồi đỉnh, Tạp ch D c liệu, tập 19, số 1/2014 (tr ng 46-52) 42 22 Ngô Văn Thu (1990), Hóa Học saponin, Kho d c, tr ờng Đại Học Y D c Tp-HCM, Trang 194 23 L Thi n Th , Võ Thị Bạch M i (2005), “Nghi n cứu phát sinh hình thái nuôi cấy in – vitro Đinh lăng Polysci s fruticos L H rms”, Tạp trí Phát triển Khoa học Công nghệ Đại học Quốc gia TP Hồ Chí Minh, Tập 8, (số 11), trang 47-51 24 L Văn Tr (1993), Giáo trình thực vật rừng, Nhà xuất Nông nghiệp, Tp Hồ Chí Minh 25 Võ Châu Tuấn, Huỳnh Minh T (2010), “Nghi n cứu nhân giống in vitro ba kích (Morinda Officinalis How)”, Tạp chí Khoa học Công nghệ, Đại học Đà Nẵng, số (40), trang 191-196 26 Vũ Văn Vụ, Nguy n Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2006), Công nghệ sinh học tập hai (Công nghệ sinh học tế bào), NXB Giáo Dục, Hà Nội Tiếng Anh 27 Collin H.A and Edwards S (1998), Plant cell culture, Bios scientific publishers limited, Oxford 28 Murashige T and Skoog F (1962), “A resied medium for r pid growth nd bio ss ys with tob cco tissue cultures”, Physiol Plant (15), pp 473-495 29 Roberla H Smith (1992), Plant tissue culture techniques and experiments, Academic press, Inc., California 30 Salwa S Sakr, Saad S Melad, M A El-Shamy, Asmaa E Abd Elhafez (2014), In vitro Propagation of Polyscias fruticosa Plant, International Journal of Plant & Soil Science 3(10): 1254-1265; Article no IJPSS.2014.10.006 31 Vo D H., Yamamura, S., Ohtani, K., Kassai, R., Yamasaki, K., Nguyen, T.N., Hoang, M.C (1998) Oleanaae Saponins from Polysias Frutisoca Phytochemistry, Vol 29, No 12 2472 32 Wenck A R., Conger B V., Trigiano R N., and SamsC E (1988) Inhibitionof somatic embryogenesis in Ochardgrass by endogenenous cytokinins Plant Physiol, 88, pp 900-992 43 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH VỀ NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY ĐINH LĂNG LÁ NHỎ 44 Hình 1: Mẫu đinh lăng nhỏ đ c tạo vật liệu b n đầu thành công (S u 40 ngày nuôi cấy) Hình 2: Cụm chồi đinh lăng nhỏ in vitro hình thành môi tr ờng nhân chồi (S u 60 ngày nuôi cấy) 45 Hình 3: Chồi đinh lăng nhỏ hình thành r in vitro (Sau 40 ngày nuôi cấy) Hình 4: Cây đinh lăng nhỏ in vitro r bầu xuất v ờn PHỤ LỤC MÔI TRƯỜNG MS Thành phần Nhóm I II III IV Hàm lƣợng (mg/l) NH4NO3 1650 KNO3 1900 MgSO4 7H2O 370 MnSO4 H2O 22,3 ZnSO4 7H2O 10,6 CuSO4 H2O 0,025 CaCl2 2H2O 440 KI 0,83 CoCl2 6H2O 0,025 KH2PO4 170 46 H3BO3 6,2 Na2M0O4 2H2O 0,25 FeSO4 7H2O 27,85 Na2EDTA 2H2O 37,25 Nicotinic acid 0,5 Glycine Thiamine HCl 0,1 Pyridoxine HCl 0,5 Myo Inositol 100 V Vitamins PHỤ LỤC KẾT QUẢ CHẠY IRRISTAT Khử trùng dung dịch H2O2 (20%) 15/10/** 9: PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 8956.67 2239.17 282.84 0.000 R 3.33333 1.66667 0.21 0.816 * RESIDUAL 63.3332 7.91665 * TOTAL (CORRECTED) 14 9023.33 644.524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMTC FILE VT1 15/10/** 9: PAGE VARIATE V004 TLMTC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 3943.33 985.833 215.09 0.000 R 30.0000 15.0000 3.27 0.091 * RESIDUAL 36.6668 4.58336 * TOTAL (CORRECTED) 14 4010.00 286.429 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE VT1 15/10/** 9: PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS TLMS TLMTC 47 3 3 0.000000 11.6667 18.3333 46.6667 66.6667 0.000000 11.6667 13.3333 41.6667 38.3333 SE(N= 3) 1.62446 1.23604 5%LSD 8DF 5.29721 4.03059 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMS 28.0000 29.0000 29.0000 TLMTC 19.0000 22.0000 22.0000 SE(N= 5) 1.25830 0.957430 5%LSD 8DF 4.10320 3.12208 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE VT1 15/10/** 9: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLMS TLMTC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 28.667 15 21.000 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 25.387 2.8137 9.8 0.0000 16.924 2.1409 10.2 0.0000 |R | | | 0.8156 0.0908 Khử trùng dung dịch HgCl2(0,1%) 15/10/** 9:10 PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 11726.7 2931.67 226.97 0.000 R 30.0000 15.0000 1.16 0.362 * RESIDUAL 103.334 12.9168 * TOTAL (CORRECTED) 14 11860.0 847.143 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMTC FILE VT2 15/10/** 9:10 PAGE VARIATE V004 TLMTC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 9690.00 2422.50 149.08 0.000 R 70.0000 35.0000 2.15 0.178 * RESIDUAL 130.000 16.2500 * TOTAL (CORRECTED) 14 9890.00 706.429 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE VT2 15/10/** 9:10 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLMS 0.000000 20.0000 43.3333 70.0000 71.6667 TLMTC 0.000000 20.0000 40.0000 65.0000 65.0000 48 SE(N= 3) 2.07499 2.32737 5%LSD 8DF 6.76634 7.58932 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLMS 40.0000 43.0000 40.0000 TLMTC 37.0000 41.0000 36.0000 SE(N= 5) 1.60728 1.80277 5%LSD 8DF 5.24118 5.87866 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE VT2 15/10/** 9:10 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |T (N= 15) SD/MEAN | NO BASED ON BASED ON % | OBS TOTAL SS RESID SS | TLMS 15 41.000 29.106 3.5940 8.8 0.0000 TLMTC 15 38.000 26.579 4.0311 10.6 0.0000 Nghiên cứu nhân nhanh dùng BAP 29/10/** 10:41 -VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF |R | | | 0.3620 0.1777 | | | | PAGE SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 75.5881 18.8970 ****** 0.000 R 263333E-01 131666E-01 2.10 0.184 * RESIDUAL 501309E-01 626636E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 75.6646 5.40461 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBCCC FILE NN1 29/10/** 10:41 PAGE VARIATE V004 TBCCC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4.51583 1.12896 99.02 0.000 R 168533E-01 842666E-02 0.74 0.511 * RESIDUAL 912134E-01 114017E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.62389 330278 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NN1 29/10/** 10:41 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 HSNC 1.00000 2.06667 5.36667 6.17667 6.46667 TBCCC 2.46667 2.38667 2.09667 1.27000 1.18333 SE(N= 3) 0.457033E-01 0.616487E-01 5%LSD 8DF 0.149034 0.201030 MEANS FOR EFFECT R 49 R NOS 5 HSNC 4.17200 4.20200 4.27200 TBCCC 1.87000 1.84600 1.92600 SE(N= 5) 0.354016E-01 0.477528E-01 5%LSD 8DF 0.115441 0.155717 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NN1 29/10/** 10:41 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC TBCCC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.2153 15 1.8807 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.3248 0.79160E-01 1.9 0.0000 0.57470 0.10678 5.7 0.0000 |R | | | 0.1840 0.5108 Nghiên cứu nhân nhanh dùng kinetin 15/10/** 15:20 PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION | | | | DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2.08263 520657 106.33 0.000 R 609333E-02 304666E-02 0.62 0.565 * RESIDUAL 391735E-01 489668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.12789 151992 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBCCC FILE NN2 15/10/** 15:20 PAGE VARIATE V004 TBCCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 547693 136923 34.63 0.000 R 177333E-02 886667E-03 0.22 0.805 * RESIDUAL 316267E-01 395334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 581093 415067E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NN2 15/10/** 15:20 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS HSNC TBCCC 1.00000 1.32333 1.14333 1.40000 3 1.57000 1.71000 1.90000 1.83333 1.89000 1.63667 SE(N= 3) 0.404008E-01 0.363012E-01 5%LSD 8DF 0.131743 0.118375 MEANS FOR EFFECT R R NOS HSNC TBCCC 1.48000 1.57200 1.52800 1.57400 50 1.49400 1.59600 SE(N= 5) 0.312944E-01 0.281188E-01 5%LSD 8DF 0.102048 0.916926E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NN2 15/10/** 15:20 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC TBCCC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.5007 15 1.5807 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.38986 0.69976E-01 4.7 0.0000 0.20373 0.62876E-01 4.0 0.0001 |R | | | 0.5645 0.8053 Nghiên cứu nhân nhanh sử dụng kết hợp BAP IAA 1/ 3/** 22: PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 22.5593 5.63982 179.25 0.000 R 344934E-01 172467E-01 0.55 0.602 * RESIDUAL 251706 314633E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 22.8455 1.63182 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBCCC FILE NN3 1/ 3/** 22: PAGE VARIATE V004 TBCCC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.98989 1.49747 78.82 0.000 R 292800E-01 146400E-01 0.77 0.497 * RESIDUAL 151987 189983E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.17116 440797 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NN3 1/ 3/** 22: PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 HSNC 5.37667 4.12000 2.86667 2.31000 2.12333 TBCCC 2.09667 3.41333 3.78667 3.74000 3.63333 SE(N= 3) 0.102410 0.795787E-01 5%LSD 8DF 0.333948 0.259498 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 HSNC 3.29200 3.40000 TBCCC 3.27800 3.38600 51 3.38600 3.33800 SE(N= 5) 0.793263E-01 0.616414E-01 5%LSD 8DF 0.258675 0.201006 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NN3 1/ 3/** 22: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC TBCCC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.3593 15 3.3340 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2774 0.17738 5.3 0.0000 0.66393 0.13783 4.1 0.0000 |R | | | 0.6021 0.4973 Nghiên cứu nhân nhanh sử dụng kết hợp BAP IBA 1/ 3/** 17: PAGE VARIATE V003 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 23.2577 5.81442 464.34 0.000 R 264933E-01 132467E-01 1.06 0.393 * RESIDUAL 100174 125218E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 23.3843 1.67031 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBCCC FILE BAP-IBA 1/ 3/** 17: PAGE VARIATE V004 TBCCC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 6.47296 1.61824 230.19 0.000 R 800933E-01 400466E-01 5.70 0.029 * RESIDUAL 562402E-01 703002E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.60929 472092 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAP-IBA 1/ 3/** 17: PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 HSNC 5.40000 3.95333 2.82333 2.24667 2.04333 TBCCC 1.99333 3.41333 3.73667 3.70667 3.58667 SE(N= 3) 0.646060E-01 0.484081E-01 5%LSD 8DF 0.210674 0.157854 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 HSNC 3.23400 3.32000 3.32600 TBCCC 3.18400 3.34000 3.33800 52 SE(N= 5) 0.500436E-01 0.374967E-01 5%LSD 8DF 0.163187 0.122273 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAP-IBA 1/ 3/** 17: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC TBCCC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.2933 15 3.2873 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2924 0.11190 3.4 0.0000 0.68709 0.83845E-01 2.6 0.0000 |R | | | 0.3928 0.0290 Nghiên cứu rễ, tạo hoàn chỉnh dùng IBA 15/10/** 15:31 PAGE VARIATE V003 TLCRR LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 15818.4 3954.59 ****** 0.000 R 10.3719 5.18593 1.56 0.269 * RESIDUAL 26.6585 3.33232 * TOTAL (CORRECTED) 14 15855.4 1132.53 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBR/C FILE RR11 15/10/** 15:31 PAGE VARIATE V004 TBR/C SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 14.4210 3.60524 431.50 0.000 R 849334E-02 424667E-02 0.51 0.624 * RESIDUAL 668405E-01 835506E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.4963 1.03545 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RR11 15/10/** 15:31 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLCRR 0.000000 42.2200 72.2200 86.6700 83.3333 TBR/C 0.000000 1.84667 2.20000 2.50000 2.76667 SE(N= 3) 1.05393 0.527733E-01 5%LSD 8DF 3.43676 0.172088 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLCRR 56.0000 56.6660 58.0000 TBR/C 1.89000 1.86600 1.83200 SE(N= 5) 0.816372 0.408780E-01 5%LSD 8DF 2.66211 0.133299 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RR11 15/10/** 15:31 53 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLCRR TBR/C GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 56.889 15 1.8627 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 33.653 1.8255 3.2 0.0000 1.0176 0.91406E-01 4.9 0.0000 |R | | | 0.2686 0.6236 Nghiên cứu rễ, tạo hoàn chỉnh dùng NAA 5/11/** 9:17 PAGE VARIATE V003 TLCRR LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 21380.8 5345.20 ****** 0.000 R 10.3719 5.18593 2.16 0.177 * RESIDUAL 19.2415 2.40519 * TOTAL (CORRECTED) 14 21410.4 1529.31 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBR/C FILE RR1 5/11/** 9:17 PAGE VARIATE V004 TBR/C SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 36.8575 9.21438 694.04 0.000 R 372000E-02 186000E-02 0.14 0.871 * RESIDUAL 106212 132765E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 36.9674 2.64053 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RR1 5/11/** 9:17 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLCRR 0.000000 64.4433 90.0000 100.000 100.000 TBR/C 0.000000 2.12000 2.79000 4.39667 4.03333 SE(N= 3) 0.895394 0.665245E-01 5%LSD 8DF 2.91979 0.216930 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLCRR 70.6660 70.0000 72.0000 TBR/C 2.67600 2.68200 2.64600 SE(N= 5) 0.693569 0.515296E-01 5%LSD 8DF 2.26166 0.168033 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RR1 5/11/** 9:17 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 54 VARIATE TLCRR TBR/C GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 70.889 15 2.6680 STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 39.106 1.5509 2.2 0.0000 1.6250 0.11522 4.3 0.0000 |R | | | 0.1774 0.8712 Nghiên cứu giá thể vườn ươm 15/10/** 15:42 PAGE VARIATE V003 TLCS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF | | | | SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 118.504 29.6259 9.98 0.004 R 5.94075 2.97038 1.00 0.411 * RESIDUAL 23.7408 2.96760 * TOTAL (CORRECTED) 14 148.185 10.5847 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TBCCC FILE RC 15/10/** 15:42 PAGE VARIATE V004 TBCCC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5.45131 1.36283 68.10 0.000 R 137734E-01 688668E-02 0.34 0.722 * RESIDUAL 160093 200117E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 5.62517 401798 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RC 15/10/** 15:42 PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLCS 100.000 100.000 93.3333 100.000 95.5567 TBCCC 3.39667 4.34667 3.52333 4.69667 3.11000 SE(N= 3) 0.994585 0.816735E-01 5%LSD 8DF 3.24324 0.266329 MEANS FOR EFFECT R R NOS 5 TLCS 97.3320 97.3340 98.6680 TBCCC 3.77600 3.81800 3.85000 SE(N= 5) 0.770402 0.632640E-01 5%LSD 8DF 2.51220 0.206297 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RC 15/10/** 15:42 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | |R | | | 55 TLCS TBCCC NO OBS 15 97.778 15 3.8147 BASED ON TOTAL SS 3.2534 0.63388 BASED ON RESID SS 1.7227 0.14146 % | | 1.8 0.0037 3.7 0.0000 | | 0.4112 0.7219 | | ... nhiều loài thuộc chi Polysci s, nh đinh l ng trổ, đinh l ng ráng, đinh l ng tròn đinh l ng nhỏ Trong loài đinh l ng nhỏ (Polyscias fruticosa (L. ) Harms) loài đ c dân gi n sử dụng rộng rãi l m... hành: Nghiên cứu nhân giống Đinh l ng nhỏ (Polyscias fruticosa (L. ) Harms) phương pháp nuôi cấy mô tế bào” 12 * Mục tiêu nghiên cứu - Nghi n cứu thành công quy trình nhân giống in vitro đinh l ng. .. Magnoliophyta L p: Magnoliopsida L p phụ: Rosidae Bộ: Apiales Họ: Araliaceae Loài: Polyscias fruticosa (L. ) Harms 14 T n thông th ờng: Đinh l ng nhỏ, gỏi cá, N m d ơng l m, Đinh l ng xẻ, Đinh l ng