Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông (sinningia speciosa) tại tỉnh thừa thiên huế (TT)

Ý nghĩa thực tiễn - Kết quả nghiên cứu cung cấp 3 quy trình kỹ thuật bao gồm: Quy trình kỹ thuật nhân giống cây hoa chuông in vitro; quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông sau nuô

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LÃ THỊ THU HẰNG

NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO

VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA

SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ

LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP

HUẾ, 2015

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM

LÃ THỊ THU HẰNG

NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN

VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG

(SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN

Công trình hoàn thành tại:

Khoa Nông học, Trường Đại học Nông Lâm Huế

Người hướng dẫn khoa học:

1 PGS.TS Lê Thị Khánh

2 PGS.TS Trần Thị Thu Hà

Phản biện 1: PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo

Phản biện 2: PGS.TS Nguyễn Thị Kim Lý

Phản biện 3: TS Ngô Quang Vinh

Luận án sẽ được bảo vệ tại hội đồng chấm luận án cấp Đại học Huế họp

tại: Phòng họp cơ quan Đại học Huế, số 04 đường Lê Lợi,

Tp Huế

Vào hồi …h…, ngày… tháng ….năm 2015

Có thể tìm hiểu luận án tại:

Thư viện quốc gia Việt Nam

Thư viện trường Đại học Nông Lâm Huế.

ở Hà Nội và Thành phố Hồ Chí Minh

Cây hoa chuông có thể được nhân giống bằng phương pháp nhân giống hữu tính (hạt) và nhân giống vô tính (củ, giâm cuống lá, đoạn thân và nuôi cấy mô tế bào) Trong đó, phương pháp nhân giống vô tính bằng kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật đã trở thành phương pháp nhân giống rất có hiệu quả với hệ số nhân giống cao, cây giống tạo ra hoàn toàn sạch bệnh, đồng nhất về kiểu hình, ổn định về tính di truyền và có thể sản xuất được ở quy mô lớn

Trong những năm vừa qua, đã có nhiều công trình nghiên cứu nhân

nhanh in vitro cây hoa chuông: Nguyễn Quang Thạch và cs (2004); Dương

Tấn Nhựt và cs (2005); Eui và cs (2012); Ioja-Boldura và Ciulca (2013);… Tuy nhiên, những công trình này mới chỉ dừng lại ở mức nghiên cứu thử nghiệm mà chưa đi đến xây dựng quy trình cụ thể để tạo ra sản phẩm cây giống cung cấp cho thị trường

Thừa Thiên Huế là trung tâm du lịch lớn và đặc sắc của Việt Nam nên nhu cầu trang trí làm đẹp cảnh quan của một thành phố du lịch là rất cần thiết Tuy nhiên, kỹ thuật trồng hoa ở đây còn rất hạn chế, sản xuất hoa phụ thuộc vào tự nhiên, bộ giống hoa còn nghèo nàn và chất lượng cây giống thấp,… nên các sản phẩm hoa làm ra có năng suất và chất lượng không cao Vì vậy, việc nghiên cứu, phát triển các loại hoa nói chung và hoa chuông nói riêng ở Thừa Thiên Huế là việc làm cấp thiết và được xem

là giải pháp bền vững để mang lại hiệu quả kinh tế cao

Xuất phát từ những vấn đề trên, chúng tôi thực hiện đề tài “Nghiên cứu

kỹ thuật nhân giống in vitro và trồng cây hoa chuông (Sinningia

speciosa) tại tỉnh Thừa Thiên Huế”

2 Mục tiêu của đề tài

2.1 Mục tiêu tổng quát

Xác định được quy trình kỹ thuật hoàn chỉnh từ khâu sản xuất cây

giống hoa chuông in vitro có chất lượng tốt, đến trồng cây hoa chuông

thương phẩm có năng suất, chất lượng cao và phát triển diện tích trồng cây hoa chuông ở tỉnh Thừa Thiên Huế

2.2 Mục tiêu cụ thể

- Xây dựng được quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông

có chất lượng tốt đáp ứng nhu cầu sản xuất ở quy mô lớn

- Xây dựng được quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông in vitro ở

giai đoạn vườn ươm

- Xây dựng được quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm phù hợp với điều kiện sinh thái Thừa Thiên Huế và phát triển ra diện rộng

3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài

3.1 Ý nghĩa khoa học

- Kết quả nghiên cứu sẽ cung cấp những dẫn liệu khoa học nhằm bổ sung thông tin về cây hoa chuông, kỹ thuật nhân giống, kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm có năng suất cao, chất lượng hoa tốt để áp dụng vào sản xuất có hiệu quả

- Kết quả nghiên cứu làm cơ sở khoa học cho những nghiên cứu tiếp theo

về chọn tạo giống và ứng dụng kỹ thuật di truyền đối với cây hoa chuông

- Là nguồn tài liệu tham khảo cho công tác giảng dạy, học tập và nghiên cứu khoa học, trong lĩnh vực công nghệ sinh học, công nghệ sản xuất giống

và kỹ thuật trồng hoa chậu

3.1 Ý nghĩa thực tiễn

- Kết quả nghiên cứu cung cấp 3 quy trình kỹ thuật bao gồm: Quy trình

kỹ thuật nhân giống cây hoa chuông in vitro; quy trình kỹ thuật ươm cây

giống hoa chuông sau nuôi cấy mô; quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm, phù hợp với điều kiện sinh thái Thừa Thiên Huế và khu vực miền Trung

- Việc nghiên cứu xác định được quy trình kỹ thuật nhân giống và trồng cây hoa chuông thương phẩm có năng suất, chất lượng cao, phù hợp vơi điều kiện sinh thái của địa phương góp phần nâng cao thu nhập cho người trồng hoa, tạo thêm công ăn việc làm cho người lao động

- Kết quả nghiên cứu có ý nghĩa trong việc chuyển đổi cơ cấu cây trồng thích hợp, bổ sung vào danh mục các loại cây trồng phi thực phẩm

có giá trị trên địa bàn tỉnh Thừa Thiên Huế và khu vực miền Trung

- Kết quả nghiên cứu góp phần phát huy thế mạnh của vùng và tận dụng nguồn nhân lực có kinh nghiệm trồng hoa ở các vùng trồng hoa truyền thống của địa phương

4 Những đóng góp mới của luận án

 Cung cấp được quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông,

để tạo ra cây giống có chất lượng cao đáp ứng nhu cầu sản xuất ở quy

mô lớn

 Cung cấp được quy trình kỹ thuật ươm cây giống hoa chuông in vitro

phù hợp với điều kiện sinh thái của tỉnh Thừa Thiên Huế nói riêng và khu vực miền Trung nói chung

 Cung cấp được quy trình kỹ thuật trồng cây hoa chuông thương phẩm phù hợp với điều kiện sinh thái của địa phương, có năng suất và chất lượng hoa cao, đáp ứng nhu cầu của người chơi hoa và phát triển cây hoa chuông ra diện rộng

5 Phạm vi nghiên cứu của đề tài

- Thời gian thực hiện: Từ năm 2012 - 2015

- Địa điểm nghiên cứu: Khoa Nông học, Trường Đại học Nông Lâm Huế và một số vùng trồng hoa truyền thống tại tỉnh Thừa Thiên Huế

Thực nghiệm 1: Tại vườn của gia đình ông Đặng Văn Tình, xã Phú

Dương, huyện Phú Vang, tỉnh Thừa Thiên Huế

Thực nghiệm 2: Tại vườn của gia đình bà Nguyễn Thị Huệ, xã Quảng

An, huyện Quảng Điền, tỉnh Thừa Thiên Huế

Thực nghiệm 3: Tại vườn của gia đình ông Lê Bá Thông, phường Thủy

Dương, thị xã Hương Thủy, tỉnh Thừa Thiên Huế

Thời gian thực hiện 03 thực nghiệm: Từ 10/2014 - 3/2015

Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung về hoa chuông

Cây hoa chuông được phát hiện đầu tiên ở vùng rừng nhiệt đới Brazil vào năm 1785 Năm 1815, hoa chuông được trồng ở Anh Hiện nay, hoa chuông được trồng phổ biến ở nhiều nước trên thế giới như Mỹ, Châu Âu, Trung Quốc, Nhật, Thái Lan, Ấn Độ, Philippin… Tuy nhiên, ở mỗi vùng sinh thái khác nhau cây hoa chuông có chu kỳ sinh trưởng phù hợp để thích nghi và duy trì nòi giống Trong các điều kiện sinh thái cụ thể, để phát triển diện tích trồng cây hoa chuông ở quy mô lớn, cần nghiên cứu các phương pháp nhân giống nhân giống có hiệu quả để tạo ra cây giống có chất lượng tốt và các biện pháp kỹ thuật trồng cây thương phẩm có năng suất và chất lượng hoa cao

1.2 Kỹ thuật nhân giống hoa chuông và những yếu tố ảnh hưởng

Trong tự nhiên cây hoa chuông được nhân giống bằng 2 phương pháp: nhân giống hữu tính và nhân giống vô tính Ở mỗi phương pháp đều có

những ưu nhược điểm nhất định và chịu ảnh hưởng nhiều yếu tố liên quan: nhiệt độ, ánh sáng, chế độ dinh dưỡng Phương pháp nhân giống vô tính

ứng dụng kỹ thuật nhân giống in vitro đã mở ra một hướng phát triển mới

trong ngành nông nghiệp, giúp tăng sản lượng và chất lượng cây giống, đảm bảo nguồn cung cấp cây giống có chất lượng tốt cho thực tiễn sản xuất

1.3 Kỹ thuật ươm, trồng cây hoa chuông và những yếu tố ảnh hưởng

Cây hoa chuông có nguồn gốc nhiệt đới và đa số các giống hoa chuông được trồng hiện nay đều ưa khí hậu mát mẻ, nhiệt độ thích hợp dao động từ

18 - 240C Cây hoa chuông cần nhiều ánh sáng nhưng không ưa ánh sáng trực xạ Vì vậy, áp dụng các biện pháp kỹ thuật ươm trồng phù hợp có ý nghĩa quyết định tới sự sinh trưởng, phát triển, cho năng suất và chất lượng hoa của cây hoa chuông

1.4 Kết quả nghiên cứu về cây hoa chuông

Cây hoa chuông, đã thu hút được sự quan tâm nghiên cứu của nhiều nhà

khoa học trên thế giới và trong nước về phương pháp nhân giống vô tính in

vitro và các biện pháp kỹ thuật trồng Tuy nhiên, các nghiên cứu chỉ dừng lại

ở mức độ thăm dò, đánh giá chứ chưa có tính hệ thống để xây dựng được các quy trình kỹ thuật cụ thể cho từng vùng sinh thái Đặc biệt, ở Thừa Thiên Huế cho đến nay chưa có một nghiên cứu nào về cây hoa chuông được thực hiện để làm cở sở phát triển diện tích trồng Vì vậy, nghiên cứu phương pháp

nhân giống vô tính in vitro cây hoa chuông và các biện pháp kỹ thuật trồng

cây hoa thương phẩm được thực hiện sẽ có ý nghĩa rất lớn cả về mặt khoa học và thực tiễn trong lĩnh vực công nghệ sản xuất giống và kỹ thuật trồng hoa chậu đối với các loài hoa nhập nội có giá trị tại Thừa Thiên Huế

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu

2.1.1 Giống

Hai giống hoa chuông sử dụng để nghiên cứu là hoa màu đỏ cánh kép (hoa đỏ) và hoa màu trắng cánh đơn (hoa trắng), được lựa chọn từ năm giống hoa chuông nhập về từ Đà Lạt Hai giống này sinh trưởng phát triển tốt, phù hợp với điều kiện vụ Đông - Xuân của Thừa Thiên Huế và được thị trường rất ưa chuông

Bộ phận đưa vào nuôi cấy là: Đoạn thân mang mắt ngủ, lá non, nụ non

TE), Bacte 02 (32:11:10 + TE), Growmore (30:10:10), F-GA3, Dana 01, Atonik 1.8 D

2.1.4 Chất kích thích sinh trưởng

- BA (6-benzyl adenine)

- α-NAA (α-naphthaleneaceticd)

2.2 Nội dung nghiên cứu

Toàn bộ nội dung nghiên cứu được tóm tắt theo sơ đồ hình 2.1

Hình 2.1 Sơ đồ tóm tắt các nội dung nghiên cứu của luận án

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 Nội dung 1 (Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống in

vitro cây hoa chuông)

Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian khử trùng và cơ quan

nuôi cấy đến sự tạo nguồn vật liệu khởi đầu ở hai giống hoa chuông

Thí nghiệm gồm 12 công thức, tương ứng với 3 cơ quan và 4 mốc thời gian khác nhau Hóa chất khử trùng sử dụng là HgCl2 0,1% (thí nghiệm 2 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

Hoa màu đỏ cánh kép và màu trắng cánh đơn

Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro cây hoa chuông (Nghiên cứu phương pháp khử trùng, nghiên cứu tái sinh và nhân nhanh

chồi, nghiên cứu tạo cây hoàn chỉnh)

Nghiên cứu khả năng sinh trưởng của cây cấy mô ở giai đoạn vườn ươm

(Khối lượng cây in vitro, nghiên cứu thời vụ, giá thể, phân bón)

Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật trồng cây hoa thương

phẩm (Nghiên cứu thời vụ, phân bón, biện pháp bấm ngọn)

Thực nghiệm trồng cây hoa thương phẩm

Sản xuất

Môi trường nền được sử dụng cho các công thức thí nghiệm là: MS + 30% Saccarose/l + 6%Agar/l

Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp của BA và -NAA đến khả năng tái sinh chồi in vitro ở hai giống hoa chuông

Nguồn mẫu là đoạn thân mang mắt ngủ (kế thừa kết quả của thí nghiệm 1) Thí nghiệm gồm 13 công thức, tương ứng với 13 tổ hợp BA và -NAA ở các mức nồng độ khác nhau (thí nghiệm 2 yếu tố được tiến hành độc lập trên

2 giống)

Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng tăng hệ

số nhân chồi và sinh trưởng của chồi in vitro ở hai giống hoa chuông

Thí nghiệm gồm 6 công thức, tương ứng với 6 mức nồng độ BA khác nhau (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ -NAA đến sự hình

thành rễ của chồi in-vitro ở hai giống hoa chuông

Thí nghiệm gồm 5 công thức, tương ứng với 5 mức nồng độ -NAA khác nhau (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

* Phương pháp bố trí thí nghiệm

Các thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD), nhắc

lại 3 lần, mỗi lần 10 mẫu, theo dõi 30 mẫu

* Điều kiện thí nghiệm

Môi trường nuôi cấy cơ bản: Sử dụng môi trường dinh dưỡng khoáng Murashige và Skoog (1962), ký hiệu MS

* Các kỹ thuật áp dụng

Sử dụng các kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật thường quy

2.3.2 Nội dung 2 (Nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ươm cây giống

hoa chuông in-vitro giai đoạn vườn ươm)

Thí nghiệm 5: Nghiên cứu ảnh hưởng của khối lượng cây giống in vitro đến

khả năng sinh trưởng của hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm

Thí nghiệm gồm 3 công thức, tương ứng với 3 mức khối lượng cây giống

in vitro khác nhau khi đưa ra vườn ươm, (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành

độc lập trên 2 giống)

Thí nghiệm 6: Nghiên cứu xác định thời vụ phù hợp để đưa cây giống hoa chuông in-vitro ra trồng ở vườn ươm

Thí nghiệm gồm 4 công thức, tương ứng với 4 thời vụ ra ngôi cây giống

in vitro trong năm (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng của các loại giá thể trồng đến khả năng sinh trưởng của hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm

Thí nghiệm gồm 5 công thức, tương ứng với 5 loại giá thể khác nhau để

ươm cây giống hoa chuông in vitro (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc

* Phương pháp bố trí thí nghiệm

Các thí nghiệm được bố trí theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên (RCBD), nhắc lại 3 lần, mỗi lần 28 cây (1 công thức/1 khay 84 lỗ), theo dõi 30 cây

ngẫu nhiên

* Điều kiện thí nghiệm

Cây giống in vitro có đủ thân lá, rễ, có kích thước tương đối đều: cây có

5 - 7 rễ, 6 - 8 lá, cao 5 - 5,5 cm, được sử dụng làm vật liệu nghiên cứu trong các thí nghiệm ở giai đoạn vườn ươm

Các thí nghiệm được tiến hành trong điều kiện nhà lưới, có mái che mưa hoàn toàn và lưới đen giảm 50% cường độ ánh sáng

Cây giống được trồng trong khay xốp 84 lỗ/khay để ươm trồng Kích thước khay: dài x rộng x cao = 49 x 28 x 4,5 cm

Giá thể trồng: Các loại giá thể trước khi sử dụng cho các thí nghiệm được xử lý nguồn bệnh bằng thuốc Basudin 10H (0,3 kg/m3

giá thể) và Vicarben (1 ml/l nước)

* Các kỹ thuật áp dụng

Chăm sóc cây con sau trồng: Ngoài yếu tố thí nghiệm, việc tưới nước, bón phân, phòng trừ sâu bệnh… được thực hiện giống nhau ở các công thức thí nghiệm

Giữ ẩm bằng cách tưới phun sương 2 - 3 lần/ngày

2.3.3 Nội dung 3 (Nghiên cứu xây dựng quy trình trồng cây hoa thương

phẩm - giai đoạn vườn sản xuất)

Thí nghiệm 9: Nghiên cứu ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả năng sinh trưởng phát triển của cây hoa chuông- giai đoạn vườn sản xuất

Thí nghiệm gồm 5 công thức tương ứng với 5 thời vụ trồng cây hoa chuông thương phẩm khác nhau trong năm (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

Thí nghiệm 10: Nghiên cứu ảnh hưởng của các loại phân bón lá đến sinh

trưởng phát triển của hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản xuất

Thí nghiệm gồm 5 công thức tương ứng với 5 loại phân bón lá khác nhau, liều lượng phân ở các công thức là như nhau (1 g/l nước, phun 7 ngày/lần), (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

Thí nghiệm 11: Nghiên cứu ảnh hưởng của thời điểm bấm ngọn đến khả

sinh trưởng phát triển của hai hoa chuông

Thí nghiệm gồm 5 công thức, tương ứng với 5 thời điểm bấm ngọn khác nhau (thí nghiệm 1 yếu tố được tiến hành độc lập trên 2 giống)

* Phương pháp bố trí thí nghiệm

Thí nghiệm được bố trí theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên (RCBD), nhắc lại 3 lần, mỗi công thức thí nghiệm trồng 45 cây (chậu) theo dõi ngẫu nhiên 30 cây

* Điều kiện thí nghiệm

Cây giống: cây có 6 - 8 lá/cây, nhiều rễ, chiều cao 5 - 7 cm, cây khỏe cứng cáp, được dử dụng để trồng cho các công thức thí nghiệm

Giá thể trồng là hỗn hợp gồm: đất phù sa, cát, phân chuồng, trấu hun tỷ

lệ (1:1:1:1)

Dụng cụ trồng: Cây hoa chuông được trồng đơn lẻ vào từng chậu nhựa

có kích thước: đường kính miệng x đường kính đáy x chiều cao (16 cm x 12

Giữ ẩm bằng cách tưới nước 1 - 2 lần/ngày

2.3.4 Nội dung 4 (Xây dựng thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm)

Xây dựng 3 thực nghiệm tại 3 địa điểm của tỉnh Thừa Thiên Huế

* Quy mô thực nghiệm: 1000 cây (500 cây thực hiện thực nghiệm và 500

thực hiện đối chứng) Diện tích thực hiện 100 m2 (50 m2/thực nghiệm và 50

m2/đối chứng)

* Điều kiện thực hiện thực nghiệm

Cây giống: cây có 6 - 10 lá/cây, nhiều rễ, chiều cao 4 - 8 cm, cây

khỏe cứng cáp

Chậu trồng: chậu nhựa có kích thước: đường kính miệng x đường

kính đáy x chiều cao (16 cm x 12 cm x 12 cm)

* Các biện pháp kỹ thuật áp dụng

Thực nghiệm: áp dụng kỹ thuật trồng hoa chuông thương phẩm đã

nghiên cứu đề xuất: Giá thể trồng, phân bón, bấm ngọn,

Đối chứng: áp dụng kỹ thuật trồng và chăm sóc theo kinh nghiệm của

nông dân: Trồng trong điều kiện không đầu tư thâm canh

2.4 Phương pháp xử lý số liệu

Số liệu thí nghiệm được xử lý trên phần mềm Microsoft Excel 2007

và Statictis SXW 10.0 phù hợp với từng nội dung nghiên cứu

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

3.1 Kết quả nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống

in-vitro cây hoa chuông

3.1.1 nghiên cứu tạo nguồn vật liệu khởi đầu

Để tạo nguồn vật liệu khởi đầu trong nhân giống in-vitro cây hoa

chuông, sử dụng cơ quan sinh dưỡng là đoạn thân mang mắt ngủ cho hiệu

quả cao hơn hẳn đài nụ non và lá non Thời gian khử trùng là 10 phút cho tỷ

lệ mẫu sống cao nhất đạt từ 43,33% - 53,33%

Phân tích hồi quy, chúng tôi xác định được mô hình toán học biểu diễn

mối quan hệ giữa thời gian khử trùng và tỷ lệ mẫu sống đối với đoạn thân

mang mắt ngủ như sau:

y1 = -1,2163 x1 + 25,606 x1 - 90,532 (r = 0,969)

y2 = -1,6028x22 + 34,482x2 - 135,74 (r = 0,888)

Trong đó: x là thời gian xử lý; y là tỷ lệ mẫu sống; r: là hệ số tương

quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu

trắng cánh đơn)

3.1.2 Nghiên cứu tái sinh chồi in vitro

Nghiên cứu xác định ảnh hưởng của sự phối hợp BA và α-NAA đến khả

năng tái sinh chồi của các mẫu cấy là đoạn thân mang mắt ngủ của hai giống

hoa chuông Kết quả nghiên cứu cho thấy, các công thức có bổ sung BA và

α-NAA đều cho sự phát sinh chồi cao hơn đối chứng Tuy nhiên, ở mỗi tổ

hợp nồng độ BA và α-NAA khác nhau thì tỷ lệ mẫu phát sinh chồi và số

chồi/mẫu đều có sự sai khác Trong các công thức thí nghiệm, công thức cho

tỷ lệ mẫu tạo chồi và số chồi/mẫu cao nhất là: MS + 1mg BA/l + 0,02mg NAA/l + 6,5g agar/l + 30g saccarose/l

α-Bằng phương pháp phân tích hồi quy, chúng tôi xác định được mô hình toán học biểu diễn mối quan hệ giữa nồng độ BA và α-NAA đến tỷ lệ mẫu tái sinh chồi Tuy nhiên, kết quả phân tích ANOVA ở mức xác suất P = 0,05 thì tỷ lệ mẫu tái sinh chồi thu được không phụ thuộc vào nồng độ α-NAA

mà chỉ phụ thuộc vào nồng độ BA bổ sung Đồng thời, mối tương quan giữa

tỷ lệ mẫu tái sinh chồi và nồng độ BA là tương đối chặt (r = 0,612 - 0,619)

Vì vậy, mô hình toán học biểu diễn mối quan hệ giữa nồng độ BA và tỷ lệ mẫu tái sinh chồi như sau:

y1 = - 16,667x12 + 40x1 - 3,75 (r1 = 0,612)

y2 = - 19,1667x2 + 48x2 - 4,7083 (r2 = 0,619)

Trong đó: x là nồng độ BA; y: tỷ lệ mẫu tái sinh chồi; r: là hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn)

3.1.3 Nghiên cứu nhân nhanh chồi in vitro

Kết quả bảng 3.1 cho thấy, khi bổ sung BA nồng độ từ 0,1 - 1 mg/l, hệ

số nhân chồi được cải thiện rõ rệt Nồng độ BA bổ sung vào môi trường

nhân nhanh chồi in vitro phù hợp nhất là 0,5 mg BA/l

Từ kết quả thu được, chúng tôi phân tích hồi quy, xác định được mô hình toán học biểu diễn mối quan hệ giữa nồng độ BA và hệ số nhân chồi như sau:

y1 = -6,9118x1 + 10,268x1 + 1,509 (r1 = 0,993)

y2 = -14,682x2 + 19,93x2 + 1,8717 (r2 = 0,989)

Trong đó: x là nồng độ BA; y: là hệ số nhân chồi; r: là hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn)