Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro và trồng cây hoa chuông (sinningia speciosa) tại tỉnh thừa thiên huế

ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP HUẾ, 2015 ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học trồng Mã số: 62 62 01 10 LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Lê Thị Khánh PGS.TS Trần Thị Thu Hà HUẾ, 2015 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực Các số liệu kết nghiên cứu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Tất nguồn thơng tin trích dẫn luận án liệt kê tài liệu tham khảo Nếu có sai sót tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm./ Tác giả luận án Lã Thị Thu Hằng ii LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Chính phủ Việt Nam hỗ trợ kinh phí học tập nghiên cứu thơng qua đề án 911 Tôi xin cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện lãnh đạo Đại học Huế, Lãnh đạo Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Huế Để hoàn thành luận án này, nỗ lực thân, xin chân thành cảm ơn hướng dẫn, giúp đỡ tận tình mặt khoa học PGS.TS Lê Thị Khánh PGS.TS Trần Thị Thu Hà Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu quý Thầy, Cô giáo khoa Nông học, Đại học Nông Lâm, Đại học Huế cho tơi góp ý q báu giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tơi xin gửi lời cảm ơn đến hộ nông dân vùng trồng hoa truyền thống tỉnh Thừa Thiên Huế: xã Phú Dương, huyện Phú Vang; phường Thủy Dương, thị xã Hương Thủy; xã Quảng An, huyện Quảng Điền giúp tơi xây dựng mơ hình thực nghiệm đề tài Luận án dành tặng Bố Mẹ - người sinh thành, chịu nhiều vất vả để nuôi dưỡng nên người Cảm ơn động viên chồng - người truyền nhiệt huyết để tơi hồn thành luận án Cuối cùng, xin gửi lời cảm sâu sắc đến tất người giúp tơi việc hồn thành luận án mà không kể tên hết Xin trân trọng cảm ơn./ Lã Thị Thu Hằng iii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH xi MỞ ĐẦU 1 Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài 2.1 Mục tiêu tổng quát 2.2 Mục tiêu cụ thể 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 4 Phạm vi nghiên cứu đề tài Những đóng góp luận án Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung hoa chuông 1.1.1 Nguồn gốc phân loại 1.1.2 Đặc điểm thực vật học 1.1.3 Yêu cầu ngoại cảnh hoa chuông 10 1.1.4 Tình hình sản xuất, tiêu thụ hoa chuông giới Việt Nam 11 1.2 Kỹ thuật nhân giống hoa chuông yếu tố ảnh hưởng 14 1.2.1 Nhân giống hữu tính 14 1.2.2 Nhân giống vơ tính 15 iv 1.2.3 Nhân giống vơ tính in vitro hoa chuông 16 1.2.4 Đặc điểm thời tiết khí hậu Thừa Thiên Huế miền Trung Việt Nam 24 1.3 Kỹ thuật ươm, trồng hoa chuông yếu tố ảnh hưởng 25 1.3.1 Thời vụ 25 1.3.2 Giá thể trồng 26 1.3.3 Phân bón 28 1.3.4 Bấm 32 1.4 Những kết nghiên cứu hoa chuông 34 1.4.1 Nhân giống in vitro 34 1.4.2 Những nghiên cứu kỹ thuật vườn ươm vườn sản xuất 38 1.4.3 Các nghiên cứu khác hoa chuông 40 Chương ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 44 2.1 Đối tượng nghiên cứu 44 2.1.1 Giống 44 2.1.2 Giá thể 45 2.1.3 Phân bón 45 2.1.4 Chất kích thích sinh trưởng 45 2.2 Nội dung nghiên cứu 46 2.3 Phương pháp nghiên cứu 47 2.3.1 Nội dung 47 2.3.2 Nội dung 51 2.3.3 Nội dung 54 2.3.4 Nội dung 56 2.4 Các tiêu theo dõi phương pháp xác định 58 2.4.1 Các tiêu nuôi cấy in vitro 58 2.4.2 Các tiêu sinh trưởng phát triển 59 v 2.4.3 Các tiêu hoa, suất chất lượng hoa 60 2.4.4 Các tiêu đặc điểm sinh học 61 2.4.5 Phương pháp đánh giá chất lượng chồi in vitro giống in vitro 61 2.4.6 Các tiêu theo dõi sâu bệnh hại 61 2.4.7 Đánh giá hiệu kinh tế 62 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 62 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 63 3.1 Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro hoa chuông 63 3.1.1 Giai đoạn tạo nguồn vật liệu khởi đầu 63 3.1.2 Giai đoạn tạo phát sinh hình thái nhân nhanh 65 3.1.3 Giai đoạn tạo hoàn chỉnh 70 3.2 Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ươm giống hoa chng in vitro giai đoạn vườn ươm 73 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 74 3.2.2 Nghiên cứu xác định thời vụ phù hợp để đưa giống hoa chuông in vitro trồng vườn ươm 76 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 78 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 83 3.3 Kết nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng hoa chuông thương phẩm - giai đoạn vườn sản xuất 89 3.3.1 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả sinh trưởng, phát triển hoa chuông 89 3.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến sinh trưởng, phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản suất 98 vi 3.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng thời điểm bấm đến khả sinh trưởng phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản xuất 109 3.4 Tình hình sâu bệnh hại hoa chng 115 3.5 Kết thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm tỉnh Thừa Thiên Huế 119 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 127 4.1 Kết luận 127 4.2 Đề nghị 128 CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 129 TÀI LIỆU THAM KHẢO 130 PHỤ LỤC Error! Bookmark not defined vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT ABA - Axít abscicic ADN - Axít Deoxyribo Nucleic ARN - Axít ribonucleic ATP - Adenosin triphosphat BA - 6-benzyl adenine BVTV - Bảo vệ thực vật cs - cộng CCC - Chlormequat chlorid CEC - Khả trao đổi cation (Cation exchange capacity) đ/c - Đối chứng EU - Liên minh Châu Âu GA3 - Gibberellic axít IAA - Axít indolylacetic IBA - Axít indolyl butyric lux - đơn vị đo cường độ ánh sáng MS - môi trường Murashige Skoog NAA- Axít naphthylacetic NADPH2 - nicotinamide adenine dinucleotide hydrogen phosphate ppm - đơn vị minigam/lít Q (calo) - Nhiệt lượng TDZ - Thidiazuron UDS - Đô la Mỹ VCR - value cost ratio 2,4-D - Axít diclorophenoxy acetic viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Nồng độ thời gian xử lý nấm khuẩn bề mặt mẫu 20 Bảng 2.1 Các cơng thức thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng quan nuôi cấy đến tạo nguồn vật liệu khởi đầu hai giống hoa chuông .48 Bảng 2.2 Các cơng thức thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp BA -NAA đến khả tái sinh chồi in vitro hai giống hoa chuông 49 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng quan nuôi cấy đến tạo nguồn vật liệu khởi đầu hai giống hoa chuông .64 Bảng 3.2 Ảnh hưởng phối hợp BA -NAA đến khả tái sinh chồi in vitro hai giống hoa chuông .67 Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tăng hệ số nhân chồi sinh trưởng chồi in vitro hai giống hoa chuông .69 Bảng 3.4 Ảnh hưởng nồng độ α-NAA đến hình thành rễ chồi in vitro hai giống hoa chuông 71 Bảng 3.5 Ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm .75 Bảng 3.6 Ảnh hưởng thời vụ ươm đến tỷ lệ sống khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm .77 Bảng 3.7 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến tỷ lệ sống thời gian sinh trưởng hai hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 79 Bảng 3.8 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 80 Bảng 3.9 Một số đặc điểm sinh học hai giống hoa chuông in vitro trồng loại giá thể khác 82 Bảng 3.10 Ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm 84 Bảng 3.1 Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả tăng hệ số nhân chồi sinh trưởng chồi in vitro hai giống hoa chuông (sau tuần nuôi cấy) BA (mg) 0,0 0,1 0,3 0,5 0,7 1,0 LSD0,05 0,0 0,1 0,3 0,5 0,7 1,0 LSD0,05 Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao chồi (cm) Số lá/chồi (cái) Hoa màu đỏ cánh kép 1,43 4,37a 2,60d 3,22b 3,83c 2,73c 5,10a 2,30d 5,17a 2,21d 4,90b 1,91e 0,20 0,14 Hoa màu trắng cánh đơn e 1,57 4,25a 4,00d 3,13b 6,87c 2,85c 7,83b 2,34d 8,57a 2,28d 7,20c 1,89e 0,45 0,23 e Chất lượng chồi 5,90a 4,80b 4,40c 3,90d 3,70e 3,40f 0,19 ++ ++ +++ +++ ++ ++ - 6,00a 5,07b 4,67c 4,03d 3,90de 3,67e 0,33 ++ +++ +++ +++ ++ + - Ghi chú: a, b, c, d, e, f, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05, +++ Chồi to, khỏe, màu xanh đậm, ++ Chồi nhỏ, bé màu xanh nhạt, + Chồi nhỏ, bị cong, mọng nước, xuất khối callus màu xanh nhạt 3.1.4 Nghiên cứu tạo hoàn chỉnh Kết thí nghiệm ra, mức nồng độ -NAA (0 - 0,5 mg/l), trình rễ chồi in vitro hai giống có thay đổi rõ rệt môi trường dinh dưỡng để tạo rễ cho hoa chng in-vitro có hiệu là: MS + 0,3 mg -NAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l Từ kết thu được, chúng tơi phân tích hồi quy, xác định mơ hình toán học biểu diễn mối quan hệ nồng độ α-NAA tỷ lệ rễ chồi in vitro tuần thứ sau: y1 = - 618,56x12 + 406,19x1 + 39,553 (r1 = 0,946) y2 = - 547,37x22 + 374,52x2 + 44,3 (r2 = 0,954) Trong đó: x nồng độ α-NAA; y: tỷ lệ rễ chồi in vitro; r: hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn) 11 Bảng 3.4 Ảnh hưởng nồng độ α-NAA đến hình thành rễ chồi in vitro hai giống hoa chuông NAA (mg) Động thái rễ chồi (%) tuần c 0,0 0,1 0,2 0,3 0,5 LSD0,05 0,00 0,00c 3,33bc 13,33a 10,00ab 8,42 0,0 0,1 0,2 0,3 0,5 LSD0,05 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 - tuần tuần tuần Hoa màu đỏ cánh kép 6,67 33,33c 43,33b 56,67b 86,67b 100,00a 63,33b 93,33ab 100,00a 83,33a 100,00a 100,00a 66,67b 90,00b 100,00a 11,91 8,06 4,86 Hoa màu trắng cánh đơn d 6,67 40,00c 56,67b 56,67c 83,33b 100,00a 73,33ab 100,00a 100,00a 86,67a 100,00a 100,00a 70,00bc 96,67a 100,00a 13,53 11,40 4,86 c (sau tuần nuôi cấy) Số Chiều Chất rễ/chồi dài lượng (cái) rễ/chồi rễ (cm) 1,97d 3,37c 4,43b 7,07a 4,07b 0,47 2,30d 3,93c 5,17b 7,23a 5,97b 0,82 0,71e 1,57d 1,83c 2,09b 6,63a 0,15 ++ ++ +++ +++ + - 0,70d 1,58c 1,76c 2,03b 6,20a 0,25 ++ +++ +++ ++ + - Ghi chú: a, b, c, d, e cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05, +++ Rễ đồng đều, mập, ++ Rễ không đồng + Rễ không đồng đều, nhỏ Từ kết nghiên cứu thu được, đề xuất quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro hoa chuông nuôi cấy đoạn thân mang mắt ngủ theo sơ đồ hình 3.1 12 Đoạn thân mang mắt ngủ (MS + mg BA/l + 0,02 mg αNAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l) tuần Tạo chồi (MS + 0,5 mg BA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l) tuần Nhân nhanh chồi (MS + 0,3 mg -NAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l) tuần Tạo hoàn chỉnh Hình 3.1 Sơ đồ quy trình kỹ thuật nhân giống in vitro hoa chuông nuôi cấy đoạn thân mang mắt ngủ 3.2 Kết nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ươm giống hoa chng in-vitro giai đoạn vườn ươm 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm Kết nghiên cứu cho thấy, in vitro có khối lượng 0,6 0,9g/cây, có tỷ lệ sống đạt cao từ 93,33 - 100%, tiêu sinh trưởng thu đạt giá trị tốt Bằng phương pháp phân tích hồi quy, chúng tơi xác định mơ hình tốn học biểu diễn mối quan hệ khối lượng giống in vitro tỷ lệ sống sau: y1 = - 5,5556x12 + 33,333x1 + 48,889 (r1 = 0,945) y2 = - 11,667x22 + 57,222x2 + 32,222 (r2 = 0,981) Trong đó: x khối lượng giống in vitro; y: tỷ lệ sống; r: hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn) 13 3.2.2 Nghiên cứu xác định thời vụ phù hợp để đưa giống hoa chuông in-vitro trồng vườn ươm Bảng 3.6 Ảnh hưởng thời vụ ươm đến tỷ lệ sống khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm (sau trồng tuần) Công thức Xuân (25/2/2013) Hè (25/5/2013) Thu (25/8/2013) Đông (25/11/2013) LSD0,05 Xuân (25/2/2013) Hè (25/5/2013) Thu (25/8/2013) Đông (25/11/2013) LSD0,05 Chiều cao (cm) Hoa màu đỏ cánh kép a 96,67 7,27a 6,44a 64,44b 6,13b 5,72b 95,56a 7,47a 6,27ab 100,00a 7,10a 6,32ab 7,11 0,39 0,61 Hoa màu trắng cánh đơn 98,89a 7,50a 6,28a 54,44b 6,10b 5,57b 95,56a 7,37a 6,04a 100,00a 7,67a 6,19a 7,61 0,52 0,27 Tỷ lệ sống (%) Số lá/cây (lá) Chiều dài rễ (cm) Khối lương tươi (gam) 2,98a 2,06b 3,02a 2,78a 0,34 1,31ab 1,20c 1,34a 1,29b 0,05 2,86ab 2,12b 3,35a 3,60a 0,98 1,37ab 1,16c 1,28b 1,44a 0,10 Ghi chú: a, b, c, d, e, f, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05 Kết nghiên cứu cho thấy, giống hoa chng in vitro đưa ươm ba thời vụ năm vụ Xuân, vụ Thu, vụ Đông Ở vụ Hè không nên đưa vườn ươm gần khơng thích nghi kịp với với điều kiện ngoại cảnh nên tỷ lệ sống thấp, đạt 54,44 - 64,44%, sinh trưởng 3.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm Trong loại giá thể nghiên cứu giá thể cát cho tỷ lệ sống sinh trưởng hoa chuông in vitro tốt nhất, tỷ lệ sống đạt 97,78 100% sau trồng - ngày bắt đầu bén rễ để thích ứng với điều kiện sống bên ngồi, số lá/cây 8,04 lá, chiều cao 6,82 cm 14 Bảng 3.8 Ảnh hưởng loại giá thể trồng đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm (sau tuần trồng) Giá thể trồng Đất Cát Bột dừa Đất Tribat Bột dừa + trấu hun (1:1) LSD0,05 Đất Cát Bột dừa Đất Tribat Bột dừa + trấu hun (1:1) LSD0,05 Tỷ lệ sống (%) Số /cây Chiều cao Chiều dài (cái) (cm rễ (cm) Hoa màu đỏ cánh kép 58,89c 5,75d 97,78a 8,04b 90,00b 7,63c 94,44ab 8,67a 91,11b 7,71c 6,00 0,32 Hoa màu trắng cánh đơn 60,00c 5,90c 100,00a 7,97b 91,11b 7,33b 93,33ab 8,73a 95,56ab 7,67b 7,34 0,68 6,31e 6,82d 7,47c 8,36a 7,73b 0,24 1,86d 3,36c 4,90b 5,76a 3,38c 0,18 5,82c 6,51b 6,75b 8,19a 6,84b 0,44 1,66d 3,71bc 4,15a 4,02ab 3,49c 0,37 Ghi chú: a, b, c, d, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in-vitro giai đoạn vườn ươm Trong loại phân bón nghiên cứu phân bón Đầu trâu 005 phù hợp cho cấy hoa chuông in vitro giai đoạn vườn ươm Chiều cao cây, số lá/cây đường kính tán đạt giá trị cao lá: 7,28 cm, 7,93 6,61 cm Các tiêu sinh học đạt như: Hàm lượng diệp lục 35,84 (chỉ số SPAD), khối lượng tươi là: 1,369 (g/cây), khỏe, màu xanh đậm 15 Bảng 3.10 Ảnh hưởng loại phân bón đến khả sinhtrưởng hai giống hoa chuông in vitro giai đoạn vườn vươm (sau trồng tuần) Loại phân Nước lã (đ/c) Đầu trâu 005 Humix Greendelta-25 Bacte 02 Growmore LSD0,05 Nước lã (đ/c) Đầu trâu 005 Humix Greendelta-25 Bacte 02 Growmore LSD0,05 Chiều cao (cm) Số Hàm lượng lá/cây diệp lục (chỉ (cái số SPAD) Hoa màu đỏ cánh kép d 5,64 5,63c 18,48e 7,28a 7,93a 35,84a 7,02b 7,67ab 33,25c 6,62c 7,20b 31,70d 6,77c 7,53ab 32,92c 7,16ab 7,73a 34,53b 0,21 0,49 1,01 Hoa màu trắng cánh đơn d 5,58 5,77d 15,37d 7,17a 7,87a 27,24ab 6,59bc 7,47c 24,67c 6,30c 7,30c 25,03bc 6,54bc 7,50bc 23,08c 6,81ab 7,73ab 27,87a 0,36 0,26 2,29 Khối lượng tươi (g) Khối lượng khô (g) 0,747c 1,369ab 1,264b 1,408a 1,379ab 1,313ab 0,126 0,045c 0,108a 0,084b 0,077b 0,081b 0,092ab 0,019 0,678c 1,342ab 1,286b 1,352a 1,364a 1,328ab 0,061 0,038d 0,105a 0,087bc 0,083c 0,079c 0,096ab 0,014 Ghi chú: a, b, c, d, e, f, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức p= 0,05 Tóm lại: Từ kết nghiên cứu thu được, chúng tơi đề xuất quy trình kỹ thuật ươm giống hoa chuông in vitro theo sơ đồ hình 3.2 16 Cây giống in vitro đủ tiêu chuẩn đưa vườn ươm (Cây có - lá/cây, cao - cm, rễ dài 0,5 - cm) Thời vụ ươm (vụ Xuân, vụ Thu vụ Đông) Cây giống hoa chuông giai đoạn vườn ươm Giá thể (cát) Phân bón Đầu trâu 005 tuần (1g/l nước liều lượng ngày/lần) Cây giống đủ tiêu chuẩn xuất vườn ươm (Cây có - 10 lá/cây, rễ nhiều, chiều cao - cm) Hình 3.2 Sơ đồ quy trình kỹ thuật ươm hoa chng in vitro 3.3 Kết nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng hoa chuông thương phẩm - giai đoạn vườn sản xuất 3.3.1 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả sinh trưởng, phát triển hoa chng Các giống hoa chng có khả thích ứng tốt với điều kiện sinh thái Thừa Thiên Huế Thời vụ năm để trồng hoa chuông thương phẩm vụ Đông (tháng 11/2013), thu hoạch vào dịp Tết nguyên đán Ngoài ra, hoa chng trồng rải vụ vào vụ Thu, vụ Đông Xuân vụ Xuân để thu hoạch hoa vào ngày lễ Tết năm: ngày 20/10; ngày 20/11; ngày Tết dương lịch; ngày lễ tình nhân 14/ ngày 8/3 17 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến khả sinh trưởng suất hai giống hoa chuông Công thức Số lá/cây (lá) I (1/9/2013) 12,87c II (1/10/2013) 13,03bc III (1/11/2013) 13,90a IV (1/12/2013) 13,77a V (1/01/2014) 13,37b LSD0,05 0,39 I (1/9/2013) 13,10d II (1/10/2013) 14,27c III (1/11/2013) 16,47a IV (1/12/2013) 16,03ab V (1/01/2014) 15,80b LSD0,05 0,52 Đường Chiều kính cao tán (cm) (cm) Hoa màu đỏ cánh kép d 67,25 25,87c 5,31b 80,03c 29,43b 5,44ab 96,33a 33,90a 6,71a 94,70a 31,77a 6,53ab 88,19b 32,25a 6,39ab 6,05 2,18 1,35 Hoa màu trắng cánh đơn 70,51d 27,10c 5,28b 81,76c 30,27b 5,64b 120,34a 35,47a 7,09a 114,40ab 35,03a 6,80a 108,87b 34,80a 6,51a 6,03 1,79 0,78 Diện tích lá/cây (cm2) Số nụ/cây (nụ) Số hoa/cây (hoa) Tỉ lệ nụ hữu hiệu/cây (%) 13,87d 19,33c 30,63a 28,77a 24,90b 1,87 11,67d 17,63c 28,53a 26,67a 22,60b 1,93 84,22b 91,86a 93,03a 92,76a 91,29a 4,21 14,73c 20,27b 30,43a 29,30a 27,40a 4,16 13,07c 18,80b 28,87a 27,50a 25,30a 4,00 88,90c 93,14ab 95,16a 94,08ab 92,31b 2,23 Ghi chú: a, b, c, d, e, f, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05 Từ kết thu được, phân tích hồi quy, xác định mơ hình tốn học biểu diễn mối quan hệ đường kính tán suất hoa thời vụ trồng khác sau: y1 = -0,0583x12 + 5,5057x1 - 92,211 (r1 = 0,914) y2 = -0,1884x22 + 13,505x2 - 214,96 (r2 = 0,909) Trong đó: x: đường kính tán cây; y: số hoa/cây; r: hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn) 3.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng loại phân bón đến sinh trưởng, phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản xuất Đối với hoa chuông trồng giai đoạn vườn sản xuất, sử dụng phân bón để bổ sung nguyên tố dinh dưỡng thiết yếu cho có hiệu Trong loại phân bón nghiên cứu phân bón Đầu trâu 005 cho kết tốt Cây sinh trưởng phát triển tốt cho suất chất lượng hoa cao 18 Bảng 3.2 Ảnh hưởng loại phân bón đến xuất chất lượng hoa hai giống hoa chuông Công thức Số nụ/cây (nụ) Nước lã (Đ/c) Đầu trâu 005 F-GA3 Dana 01 Atonik 1.8 D LSD0,05 4,43 32,00b 31,63b 37,00a 16,47c 1,79 Nước lã (Đ/c) Đầu trâu 005 F-GA3 Dana 01 Atonik 1.8 D LSD0,05 4,73d 34,27b 32,19b 38,63a 18,70c 3,06 d Số hoa/cây (hoa) Tỉ lệ nụ hữu hiệu/cây (%) Chiều cao cuống hoa (cm) Hoa màu đỏ cánh kép 2,83d 64,11d 6,58c 30,03b 93,84a 7,53b 29,27b 92,56ab 7,31b 32,03a 86,68c 10,89a 14,90c 90,45b 7,60b 1,27 3,38 0,39 Hoa màu trắng cánh đơn 3,23d 68,89d 6,74d 32,93a 96,21a 8,39bc 29,97b 93,05ab 8,07c 33,80a 87,55c 11,64a 17,10c 91,37bc 9,18b 2,53 3,84 1,08 Đường kính hoa (cm) Độ bền hoa (ngày) 6,08c 7,63a 7,02b 6,67b 6,24c 0,40 5,33c 8,00a 6,67b 6,00bc 6,00bc 0,77 6,13b 7,94a 7,50a 6,95ab 7,10ab 1,07 6,00d 10,67a 9,00b 6,00d 7,00c 0,49 Ghi chú: a, b, c, d, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05 Từ kết thu được, chúng tơi phân tích hồi quy, xác định mơ hình toán học biểu diễn mối quan hệ số lá/cây suất hoa sử dụng loại phân bón sau: y1 = -1,838x12 + 54,107x1 - 366,23 (r1 = 0,931) y2 = -0,5674x22 + 21,639x2 - 167,87 (r2 = 0,960) Trong đó: x: số lá/cây; y: số hoa/cây; r: hệ số tương quan (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn) 3.3.3 Nghiên cứu ảnh hưởng thời điểm bấm đến khả sinh trưởng phát triển hai giống hoa chuông - giai đoạn vườn sản xuất Nghiên cứu biện pháp bấm cho hoa chuông thực thời điểm khác Kết thu cho thấy, bấm thời kỳ sinh trưởng sinh sản (sau trồng 50 ngày) làm tăng chất lượng hoa Đường kính hoa, độ bền hoa,… cao so với công thức đối chứng 19 Bảng 3.24 Ảnh hưởng thời kỳ bấm đến suất chất lượng hoa hai giống hoa chuông Công thức Số nụ/cây (nụ) I (đ/c1) II III IV V(đ/c2) LSD0,05 33,07b 36,00a 10,63d 24,50c 31,90b 2,01 I (đ/c1) II III IV V (đ/c2) LSD0,05 33,57b 37,20a 12,03d 24,83c 34,80ab 2,54 Số hoa/cây (hoa) Tỷ lệ nụ hữu hiệu/cây (%) Chiều cao cuống hoa (cm) Hoa màu đỏ cánh kép 31,03b 93,89c 7,61b 33,57a 93,26c 6,75c 10,43d 98,23a 7,96a 23,50c 96,06b 7,52b 30,10b 94,33c 7,29b 2,03 1,47 0,33 Hoa màu trắng cánh đơn 32,20b 95,96abc 8,41ab 35,07a 94,29c 7, 58c 11,80d 98,03a 8,63a 24,17c 97,32ab 8,59a 33,07ab 95,14bc 8,01b 2,79 2,49 0,42 Đường kính hoa (cm) Độ bền hoa (ngày) 7,65a 6,58b 7,81a 7,59a 7,25a 0,67 7,67b 7,00c 8,67a 8,00b 7,00c 0,60 7,84ab 7,02c 8,25a 7,98ab 7,63b 0,48 10,33b 9,33c 12,00a 12,67a 10,00bc 0,69 Ghi chú: a, b, c, d, e, f, cơng thức có ký tự cột khơng có sai khác ý nghĩa mức α = 0,05 Bằng phương pháp phân tích hồi quy, chúng tơi xác định mơ hình tốn học biểu diễn mối quan hệ số chồi/cây với suất hoa bấm thời kỳ khác sau: y1 = 32,958x12 - 55,748x1 + 29,027 (r1 = 0,934) y2 = 27,369x22 - 46,082x2 + 31,261 (r2 = 0,933) Trong đó: x: số chồi/cây; y: số hoa/cây; r: hệ số tương quan, (y1, x1, r1: giống hoa màu đỏ cánh kép; y2, x2, r2: giống hoa màu trắng cánh đơn) Từ kết nghiên cứu giai đoạn vườn sản xuất, để xuất quy trình kỹ thuật trồng hoa chng thương phẩm theo sơ đồ hình 3.3 20 Cây giống đủ tiêu chuẩn xuất vườn ươm Thời vụ (vụ Đơng - 01/11) Giá thể trồng (đất phú sa, cát, pha chuồng, - 10 trấu hun (1:1:1:1)) tuần Phân bón Đầu trâu 005 (liều lượng ngày/lần, 1g/lít nước) Bấm (sau trồng 50 ngày) Thị trường tiêu thụ Hình 3.3 Sơ đồ quy trình kỹ thuật trồng hoa chuông thương phẩm 3.5 Kết thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm Thừa Thiên Huế Từ kết nghiên cứu đạt được, mở rộng áp dụng ba địa điểm Thừa Thiên Huế năm 2014 - 2015 Kết thu cho thấy, ba thực nghiệm trồng hai giống hoa chuông Thừa Thiên Huế sinh trưởng phát triển tốt cho hiệu kinh tế cao Mức lãi ròng đạt trồng hai giống hoa màu đỏ cánh kép hoa màu trắng cánh đơn ba địa bàn dao động khoảng từ 15.220.000đ - 15.930.000đ/50m2 Vì vậy, chúng tơi đề xuất quy trình kỹ thuật hoàn chỉnh từ khâu nhân giống in vitro đến trồng thương phẩm vườn sản xuất theo sơ đồ hình 3.4 21 Bảng 3.26 Một số tiêu sinh trưởng, phát triển hai giống hoa chuông thực nghiệm Địa điểm Phú Vang Hương Thủy Quảng Điền Phú Vang Hương Thủy Quảng Điền Quy trình Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thực nghiệm Đ/c Tăng so Đ/c Thời Số gian nở lá/cây hoa (lá) (ngày) Hoa màu đỏ cánh kép 69 34 13,59 84 21 12,31 -15 13 1,28 70 32 13,16 88 18 10,31 -18 14 2,85 71 32 13,07 85 21 12,35 -14 11 0,72 Hoa màu trắng cánh đơn 67 40 14,21 76 23 13,24 -9 17 0,97 65 39 16,03 82 25 14,68 -17 14 1,35 64 41 15,37 79 22 13,79 -15 19 1,58 Từ trồng đến hoa nở (ngày) Số nụ/cây (nụ) Số hoa/cây (hoa) 32,84 10,46 22,38 34,21 11,46 22,75 33,07 13,46 19,61 30,63 8,81 21,82 32,11 10,72 21,39 31,19 10,86 20,33 33,02 14,38 18,64 35,27 15,09 20,18 36,81 8,73 28,08 34,3 12,57 21,73 33,61 13,42 20,19 35,65 7,21 28,44 Ghi chú: - Thực nghiệm: Quy trình trồng áp dụng biện pháp kỹ thuật tốt nghiên cứu - Đ/c: Quy trình trồng áp dụng theo kinh nghiệm người trồng hoa địa phương (phụ thuộc vào điều kiện thời tiết, đầu tư thâm canh, ) 22 Cây giống hoa chuông lựa chọn (MS + 0,5 mg BA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l) 16 tuần Cụm chồi (MS + 0,3 mg -NAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l) tuần Tạo hoàn chỉnh Thời vụ ươm, trồng Giá thể ươm, trồng Cây giống hoa chng giai đoạn vườn ươm tuần Phân bón Đầu trâu 005 Cây hoa chuông giai đoạn vườn sản xuất -10 tuần tuần Bấm s Thị trường Hình 3.4 Sơ đồ quy trình kỹ thuật nhân giống trồng hoa chuông CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận 1) Xác định quy trình nhân giống hoa chng in vitro - Mẫu đưa vào nuôi cấy đoạn thân mang mắt ngủ, cách thức khử trùng dùng HgCl2 nồng độ 0,1% thời gian 10 phút cho tỷ lệ mẫu sống cao 43,33 - 53,33% - Môi trường tái sinh chồi tốt là: MS + mg BA/l + 0,02 mg αNAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l Tỷ lệ mẫu tạo chồi số chồi/mẫu cao đạt là: 46,67 - 60% 1,17 - 1,53 chồi - Môi trường nhân nhanh chồi tốt là: MS + 0,5 mg BA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l Hệ số nhân chồi đạt 5,10 - 7,83 lần, chiều cao chồi 2,30 - 2,34 cm 23 - Môi trường tạo rễ tốt là: MS + 0,3 mg -NAA/l + 6,5 g agar/l + 30 g saccarose/l Tỷ lệ chồi rễ đạt 100% - Tiêu chuẩn giống hoa chuông in vitro đưa vườn ươm: - lá/cây, rễ nhiều, chiều dài rễ: 0,5 - cm, chiều cao: - cm, khối lượng tươi: 0,6 - 0,9g 2) Xác định quy trình kỹ thuật ươm in vitro giai đoạn vườn ươm - Thời vụ ươm phù hợp tháng năm trước đến tháng năm sau Tỷ lệ sống đạt từ 95,56% - 100%; tiêu sinh trưởng tăng trưởng tốt - Cát giá thể ươm thích hợp Tỷ lệ sống đạt cao 97,78 - 100% Cây sinh trưởng tốt, đồng - Sử dụng phân bón Đầu trâu 005 tốt cho giai đoạn vườm ươm: số lá/cây: 7,87 - 7,93 chiều cao cây: 7,17 – 7,28 cm - Tiêu chuẩn giống xuất vườn ươm là: - 10 lá/cây, rễ nhiều, chiều cao - cm, khối lượng tươi - g/cây 3) Xác định quy trình trồng hoa chuông thương phẩm phù hợp địa bàn Thừa Thiên Huế - Thời vụ trồng thích hợp vụ Đông (tháng 11/2013), thu hoạch vào dịp Tết nguyên đán Số hoa/cây 28,53 - 28,87 hoa, đường kính hoa 7,56 8,09 cm thời gian nở hoa dài 38,67 - 46,67 ngày - Phân bón Đầu trâu 005 thích hợp cho sinh trưởng phát triển hoa chuông, giúp tăng suất chất lượng hoa Thời gian hoa nở sớm từ 64 - 68 ngày, số hoa/cây 30 - 32 hoa, tỷ lệ hoa hữu hiệu 93,84 - 96,21%, độ bền hoa: - 11 ngày - Bấm vào thời kỳ sinh trưởng sinh sản (sau trồng 50 ngày) giúp tăng chất lượng hoa thương phẩm: đường hoa 7,81 - 8,25 cm, độ bền hoa 12 ngày 4) Thực thành công thực nghiệm trồng hoa chuông thương phẩm ba địa điểm tỉnh, hai giống hoa nghiên cứu, mang lại hiệu kinh tế cao 4.2 Đề nghị - Phổ biến rộng rãi kỹ thuật nhân giống biện pháp kỹ thuật ươm trồng hoa chuông vào sản xuất, để mở rộng diện tích trồng hoa chng địa bàn tỉnh khu vực miền Trung - Thực phương pháp vật lý hóa học để tạo giống hoa đột biến mới, đa dạng màu sắc, kiểu dáng hoa hình thái 24 CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống hoa chng (Sinningia speciosa) in-vitro Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, 2013, Số: Tháng 6, Trang: 102 - 107 Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể khối lượng giống in-vitro đến khả sinh trưởng hoa chuông (Sinningia speciosa) giai đoạn vườn ươm Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn, 2014, Số: Tháng 4, Trang: 41 - 47 Nghiên cứu số biện pháp kỹ thuật trồng hoa chuông (Sinningia speciosa) in-vitro giai đoạn vườn ươm Thừa Thiên Huế Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn, 2015, chấp nhận đăng 25 ...ĐẠI HỌC HUẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÃ THỊ THU HẰNG NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ TRỒNG CÂY HOA CHUÔNG (SINNINGIA SPECIOSA) TẠI TỈNH THỪA THIÊN HUẾ Chuyên ngành: Khoa học trồng Mã... xây dựng quy trình kỹ thuật phục vụ sản xuất Xuất phát từ vấn đề trên, thực đề tài ? ?Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống in vitro trồng hoa chuông (Sinningia speciosa) tỉnh Thừa Thiên Huế? ?? Mục tiêu đề... nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật ươm giống hoa chng in vitro giai đoạn vườn ươm 73 3.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng khối lượng giống in vitro đến khả sinh trưởng hai giống hoa chuông in