NGUYÊN TIỀN CÔNGhoạt tinh kháng khuan của các hợp chat trên với các chủng vi khuẩn gram dương là Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, gram âm là Pseudomonas aeruginosa, Escherichia
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRUONG ĐẠI HỌC SƯ PHAM THÀNH PHO HO CHÍ MINH
b›8lìcs
KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP
CỬ NHÂN HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỮU CƠ
TÊN ĐÈ TÀI:
THIADIAZOL-2-YL)-1,3-THIAZOLIDIN-4-ONE
Š-ARYLIDENE-2-IMINO-3-(S-METHYL-1,3.4-THU VIEN
' MINH
Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYEN TIEN CONG
Sinh viên thyc hiện: LE TRỌNG ĐỨC
Tp Hồ Chí Minh, tháng 05 năm 2014
Trang 2NHAN XÉT CUA HỘI DONG
Sanne eee e denen Hi HH HH res HH ns ee cases seen 60 đc nón ĐÁ HÀ Se SEEE SEE EE EES EE EEE EEEEEE ESSER EERE EESE EEE ESTE
cản EERE SEE SEEEEEEEE EE
Trang 3Lời đầu tiên, em xin được gửi lời cảm ơn chân thánh vả sâu sắc nhất đến thayNguyễn Tiến Công - người đã hướng din em rất tận tình trong suốt thời gian thực hiệnkhỏa luận Thầy không những day cho em biết làm khoa học là như thé nào ma còn
dạy cho chúng em biết cách đối nhân xử thế, hoàn thiện bản thân.
Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban chủ nhiệm khoa các thay cô trong khoa.các thầy cô quản lí phòng thí nghiệm khoa Hóa hoc, trường Đại học Sư phạm
TP.HCM đã tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất dé em có thé hoàn thành khóa luận này
Em xin gửi lời cảm ơn đến ThS Tran Thị Minh Định, cô đã giúp em rất nhiềutrong việc thăm đò hoạt tính kháng khuẩn, là một phan ứng dụng quan trọng của de tài
Minh xin cảm ơn tat cả các bạn lớp Hóa K36C, các anh, chi, em làm việc tại
phòng thí nghiệm Tổng hợp hữu cơ M101 đã động viên, góp ý và giúp đỡ mình hoàn
thành tốt dé tài.
Cuối cùng, con xin cảm ơn gia đình, ba, mẹ đã tạo cho con động lực và niềm tín
về tương lai, từ đó con mới có đủ bản lĩnh để hoàn thành tốt khóa luận tốt nghiệp này.
Tp Hỏ Chi Minh, thang 05 năm 2014
Lê Trọng Đức
Trang 41.2 Vài nét về 1,3-thiazolidin-4-one s22 sssv22CZ 222zexccxvzrrsrcxsrre 9°
Tel als Ww kee 9
1.2.2 Các phương pháp tổng hợp và chuyền hóa 2-iminothiazolidin-4-one 10
CHƯƠNG 2: THỰC NGHIEM Eo: ee ey Oe GLENS 15
SF oid ee ghia G4 6660204/0020066146966065 mee meee 15
Si: Tổng ni Wen | ee COUT OR TFET PRON ORCAS REN MNT TS OTRO OTT 15
2.2.1 Tổng hợp 2-amino-5-methyl-1,3.4-thiadiazole (2) 2-55 152.2.2 Tong hợp 2-chloro-N-(5-methy|-1.3.4-thiadiazol-2-yl)acetamide (3) 16
2.2.3 Tông hợp 2-imino-3-(5-methy]-1 ,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one
2;3.1 Xác định nhiệt độ nóng chảy u sccsecesseesccccesscsssesenssssessessccssersvesserseceesss 19
3:32: Phố bằng ng COR) iiss eR ERS 192.3.3 Phd cộng hưởng tir proton (!H-NMR) - 55 cv 221cc 202.3.4 Phổ khối lượng phân giải cao (HR-MS) 2 22 222S7csczcvsez 2029:5; Ping t thinly khẳng khuẨn:s2::25::372xc-cc0:22000630/G00120202002260/020006E 20CHƯƠNG 3: KET QUA VÀ THẢO LUẬN 5<cssevssesvssecssee 21
3.1 Tổng hợp 2-amino-5-methyl-1,3,4-thiadiazole (2) + 52555 25s552 21
3.1.1 Phương trình phan ứng d/iárrtt6su\eia?siz840W60i0iisuä 21
ñ 11⁄0 GIÁ phát (han po¿ananaieidaoaaeaaaenoueioiinee 2I
Trang 5SEER ỹ nan 223.2 Tổng hợp 2-chloro-N-(5-methy!-1.3.4-thiadiazol-2-yl)acetamide (3) 23
eA Bla et ok 1 | oa 23
3:22: Cơ GP Hiểu Wea as ees cases sasedasaasiauiny shana oeaneroneenes 23
3.2:3›NghiÊn cứu cần tree 258 ss SSE eS 24
3.3 Tổng hợp 2-imino-3-(5-methyl-1.3.4-thiadiazol-2-y!)-1.3-thiazolidin-4-one
(ẨỀ gáát 0 G620 ccc NSE LURE 26
DiS SK Phương trinh Dần ỨNG 14 6620224-462600)20 2000000200200 kG/ 02620508 26
À:3,2:220 alk nhiên May scsi cnc neat tá0000121,G03)ã626028ãi8ả1g 26
3.3:3;NMghiền cứu câu tribe sas isicsss assess cu 220260 02020010ác26 CC saan iseies 026600 27
3.4 Tông hợp các hợp chat
5-arylidene-2-imino-3-(5-methy]-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-13:00i82080i0-3- b6 (Se) kueeenibekoeekoesaiitSigipo4oG051/226)/0534602ã 60i9g6xsu) 28
3.4.1 Phường trình phản EU seseeereeeeeeserddetdeiroeenieeiinesrseeoveeeyss 29
n1 ah) ƒỶ ra ===errrmeasseseee 293.4.3 Nghiên cứu cầu trúc - 2s zC+=+ se xv2zzt+vZExecrevsevrxrzrrservee 32
3.5 Phổ khối lượng phân giải cao HR-MS 22 t2 ©2SZ+s2CZZczz+zzevszz 38
EAA Wy RR | | | a 38
5:5 Nụ (0.i 2) ¡ 3 HE (SIE, ,20ncne cesoncssneacesnosernsacconanconnse an 39
3.6 Thăm đò hoạt tính kháng khuẩn 2 65525421223 21132512121 xee 40
CHƯƠNG 4: KET LUẬN inalienable Mo0G 46G 2x0 42
PHỤ LỤC
Trang 6DANH MỤC CÁC BANG BIEU
Bang 1.1 Kết quả tông hợp các dẫn xuất
5-arylidenc-2-imino-3-(5-methyl-1.3,4-thiadiazol-2-yl)-l,3-thiazolidin-4-one (Ša-c) - Ăn re 19
Bang 3.1 Một số pic hap thy tiêu biểu trén phd hồng ngoại của các hợp chất
5-ary lidene-2-imino-3-(5-methy|-!,3,.4-thiadiazol-2-yl}- 1 3-thiazolidin-4-one (Ša-e) 33
Bang 3.2 Các tin hiệu trên phỏ 'H-NMR (8 ppm va J Hz) của các hợp chất
5-ary lidene-2-imino-3-(5-methy|-1,3.4-thiadiazol-2-y1)- 1 ,3-thiazolidin-4-one (5a-c) 38
Bang 3.3 Đường kính vô khuẩn của các hợp chất tổng BD Gv caceocncozoae 41
EAU Sie PRR? SEDGE CAINE Fie CRAIN CPE ann nnnns sarees scovenaspernas ncosgesnsossrsononsscnsl 34Hình 3.9 Pho 'H-NMR của hợp chất (Sb) .- ce-cescceeccessoeecesecseessseeeneeseeeeesseenes 35Hình 3.10 Phố 'H-NMR của hợp chất (Sc) 2 -2 s52 v£22Z2xg2vzczvcvxee 36
Hình 3 II Phổ HR-MS của hợp chất (4) - -©222<22xecvEtzvkerxaerrkkccee 39
Hình 3.12 Phỏ HR-MS của hợp chất (5b) - 5S52cs<cvccrerrsrcserrvrrreee 39
Trang 7KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
MO DAU
® Ly do chọn đề tai:
Cùng với sự phat triển cua khoa học kỹ thuật nói chung và hóa học nói riêng,
hóa học vẻ tổng hợp các hợp chất hữu cơ cũng ngảy cảng phát triển nhằm tạo ra cáchợp chất mới phục vụ đời sống con người Trong lĩnh vực y học các chất này gópphân vảo việc chữa trị các căn bệnh hiểm nghéo, nang cao sức khỏe con người Những
hợp chất chửa dị vòng được tổng hợp ngày cảng nhiều vả có những hoạt tính sinh học,
khả năng ứng dụng cao.
Trong số các hợp chất dị vòng đã được tông hợp các hợp chất chứa dj vòng
thiadiazole và thiazolidin-4-one được nhiều tác giả quan tâm nghiên cứu bởi chúng cóhoạt tính sinh học rat phong phú [1-5], ching hạn kháng virus, kháng nắm [10] khángkhuẩn [4, 11], kháng HIV [25] và có tiêm nang chống ung thư [4, 14, 22, 23]
Với mong muốn tim ra được những chất mới cũng như khảo sát các hoạt tinhcủa các hợp chất chứa đồng thời dj vòng thiadiazole và thiazolidine này Chúng tôi
phân giải cao.
- Thăm đỏ hoạt tính kháng khuẩn của các dẫn xuất methyl- I,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one đối với các chủng vi khuẩn gram
5-arylidene-2-imino-3-(5-đương là Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, gram âm là Pseudomonas
aeruginosa, Escherichia coli.
e Đối tượng và phạm vi nghiên cứu:
- Đổi tượng nghiên cứu: một số dan xuất
Trang 8KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
hoạt tinh kháng khuan của các hợp chat trên với các chủng vi khuẩn gram dương là
Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, gram âm là Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli.
« Nhiệm vụ dé tai:
- Xuất phát từ thiosemicarbazide, tổng hợp nên
2-imino-3-($-methyl-l.3.4-thíadiazol-2-yl)-I,3-thiazolidin-4-one và sau đó ngưng tụ với các aldehyde
thom để tạo thành các din xuất
5-arylidene-2-imino-3-(5-methyl-1.3.4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one.
Khảo sat tính chất vat lý (trạng thái, dung môi kết tinh, nhiệt độ nóng chảy, màusắc) của các chất tỏng hợp được
- Khảo sat cấu trúc của
2-imino-3-{5-methyl-I.3.4-thiadiazol-2-yl)-l.3-thiazolidin-4-one vả các dan xuất điều chế được bằng các phô hồng ngoại phocộng hưởng tir proton và khối phẻ phân giải cao
- Tham đò hoạt tính kháng khuẩn của các hợp chat
S-arylidene-2-imino-3-(5-methyl- 1 ,3,4-thiadiazol-2-y1)-1,3-thiazolidin-4-one tổng hợp được
« Phương pháp nghiên cứu:
- _ Tổng hợp các tài liệu khoa học liên quan
- _ Tiến hành tổng hợp
2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one và các dẫn xuất
5-arylidene-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1.3-thiazolidin-4-one Khảo sát cấu trúc của các hợp chất thu được thông quacác phé hỏng ngoại (IR), phổ cộng hướng tir proton ('H-NMR), phổ khối lượng
(HR-MS).
- Thăm đò hoạt tính kháng khuẩn của các hợp chat
5-arylidene-2-imino-3-(5-methyl- | 3.4-thiadiazol-2-yl)-I.3-thiazolidin-4-one tổng hợp được
SVTH: LE TRỌNG ĐỨC Trang 2
Trang 9KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
CHƯƠNG 1: TONG QUAN
1.1 Vài nét về 1,3,4-thiadiazole
1.1.1 Câu tạo, đanh pháp
Thiadiazole la hợp chat di vòng 5 cạnh có 3 dị tô trong đó có 2 dị tổ nito và | dị
tố lưu huỳnh Thiadiazole có 3 đồng phản:
N—N N N/ ý Ì @ \
¿3 CÀ wa
1,3,4-thiadiazole 1.2,4-thiadiazole 1.2,3-thiadiazole
Trong 3 loại đồng phân của dj vòng thiadiazole các dẫn xuất của dị vòng1.3.4-thiadiazole được nghiên cứu tổng hợp nhiều nhất do có nhiều img dụng trong cáclĩnh vực hóa học, y dược Trong khuôn khé dé tải nay, đổi tượng quan tâm cua chúngtôi là các hợp chất 2-amino-1,3,4-thiadiazole và din xuất của chúng
1.1.2 Các phương pháp ting hợp và chuyển hóa 2-amino-1,3,4-thiadiazole
1.1.2.1 Từ chất đầu là thiosemicarbazide
Các hợp chất 2-amino-1,3,4-thiadiazole thường được tổng hợp từ chất dau là
thiosemicarbazide hay các dẫn xuất của thiosemicarbazide [26]:
N—N O
H,N-C-NHNH, + Rcoc) “Ss VL M
4-Sh / Ss R
H
R
Trong phản ứng nay, chloride acid vừa là tác nhân phan ứng vita là tác nhân hút
nước Các chloride acid còn có thể được thay thé bởi acid hay ester với tác nhân hút
nước là H:POx, H2SOs, POC|;, [22].
Theo tải liệu [13], Mahendrasinh va các cộng sự đã tổng hợp
2-amino-S-phenyl- I.3,4-thiađiazole đi từ acid benzoic vả thiosemicarbazide
Trang 10KHÓA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
Hop chất 2-amino-5-phenyl-1.3,4-thiadiazole sau đó đã được chuyên hóa thành
các dẫn xuất khác như ở sơ đồ chuyên hóa đưới đây Kết quả thăm dò hoạt tính khángkhuẩn cho thay các dẫn xuất 2-amino-l.3.4-thiadiazole trên đều thể hiện hoạt tinhkháng khuẩn với các chủng khảo sát là S aureus, B cereus, P aeruginosa và E coli
S.L Vasoya, D.J, Paghdar, P.T Chovatia, và H.S Joshi [19] đã thực hiện phản
ứng của 2-hydrazinocarbonyl-3-chloro-5-phenoxybenzo[4]thiophene với các phenyl
isothiocyanate khác nhau đẻ tạo thành các thành các hợp chat arylthiosemicarbazide
N-thé Vòng 1.3.4-thiadiazole được tạo thành từ các arylthiosemicarbazide nay khi có
sự hiện diện của tác nhân khép vòng lả acid sulfuric đậm đặc Tất cả các hợp chất chứa
vòng 1,3,4-thiadiazole này đều được thấy có khả năng kháng nhiều loại vi sinh vật
khác nhau.
Trang 11KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
X = 4-Cl 3-CI 2-CHy, 4-CH, 3-OCH; 4-OCH,, 3-NO; H
Theo tai liệu [16], thiosemicarbazide và các dẫn xuất của acid benzoic khi cỏ
mat tác nhân hút nước là POCl: cho phan img khép vòng tạo nên các hợp chất 2-amino-l,3,4-thiadiazole khác nhau Các hợp chat nảy, sau đó tiếp tục được chuyểnhóa thành các dẫn xuất chứa vòng thiazolidin-4-one như sau:
Trang 12KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
Các hợp chat mới tông hợp nay đã được thử nghiệm và cho hoạt tinh kháng
khuẩn trên các chủng khảo sat Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas
aeruginosa, và Salmonella typhi và cho hoạt tính kháng nam trên các chủng Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Monascus purpureous, Penicillium citrinum và
Candida albicans Hoạt tinh kháng vi sinh vật mạnh ở nồng độ 200 mg/ml và
100 mg/ml, trong đó kháng khuẩn mạnh nhất trên chủng vi khuẩn E.coli và kháng nắmmạnh nhất trên 2 chúng Aspergillus niger và Candida albicans
Từ ester chứa dj vòng 2-methylbenzimidazol Rajivet [17] đã thực hiện phản ứng
với thiosemicarbazide rồi khép vòng sản phan thu được với tác nhân hút nước là acid
sulfuric để tạo thành hợp chất chứa dị vong 2-amino- l.3,4-thiadiazole Hợp chất nảyđược tiếp tục chuyển hóa thành các dẫn xuất 3-{5-[(2-methylbenzimidazol-1-
yl)methy]}-1,3.4-thiadiazol-2-y1}-2-aryl-1,3-thiazolidin-4-one Cho các aldehyde thơm khác nhau ngưng tụ với nhóm metylen linh động trên dj vòng thiazolidine, sản phẩm
tạo thành lá các dẫn xuất của N-(2'-{2-aryl-5-thé-benzyliden-|,3-thiazolidin-4-on)}
-5'-metylen- I'.3',4'-thiađiazol]-2-methyl-benzimidazo Các hợp chat tong hợp được có khả
năng kháng các chủng vi khuẩn như Bacillus subtilis, Escherichia coli Klebsiellapneumonia, Streptococcus aureus, và các ching nằm như Trichoderma viride vàFusarium oxisporium ở nồng độ 50 và 100 ppm,
Trang 13KHÓA LUẬN TÔT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CONG
Đi từ hợp chat nitril và thiosemicarbazide Sara va các cộng sự [20] đã
tông hợp thành công hợp chat
l-(5-amino-l.3.4-thiadiazol-2-y])-3-(methylthio)-6,7-dihydrobenzo{c]thiophen-4(5H)-one Hợp chất 1.3.4-thiadiazole mới tổng hợp nay chothay có hoạt tinh kháng khuẩn cao đổi với 2 chủng vi khuẩn: Staphylococcus aureus và
Kucukguzel và các SG sự {11] đã công bố kết quả tổng hợp ba dẫn xuất của
acid 2`,4'-difluoro-4-hydroxybiphenyl-3-carboxylic và thiosemicarbazide lần lượt
chứa các dj vòng 1,2,4-triazoline-3-thione, 1,3,4-thiadiazole và 1,3,4-oxadiazole:
H A
Ị H N~R
R = CHy, C;H¿, C,H„, OCH)-CyHy, CH¡-C,H, F
Các hợp chat mới téng hợp nay cho hoạt tính khang khuẩn, kháng virus, kháng
viêm mạnh Đặc biệt là kháng mạnh các chủng vi khuan gram dương trong đó có
Bacillus subtilis.
1.1.2.2 Các phương pháp không sử dung thiosemicarbazide
Tác giả Georgeta Serban, Tunde Horvath [9] đã tổng hợp thành công một số
dẫn xuất 5-arvlamino-l.3.4-thiadiazol-2-yl]-acetamide Trong quy trình của minh, các
SVTH: LE TRỌNG ĐỨC Trang 7
Trang 14KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS, NGUYÊN TIỀN CÔNG
tác giá đã thực hiện phan ứng giữa hydrazide và aryHhioxianate để tạo thành dẫn xuất
của thiosemicarbazide Chat nay sau đó được khép vòng với sự hiện điện của acid
sulfuric dé tạo thành dj vòng 1.3.4-thiadiazol Các chuyển hóa được biểu diễn theo sơ
Ar = CgHy 4-CHy-Cyy 4-Br-Coly, &CL-CHy, 4-CHOC Hy 4-⁄C:H,O-C,HỤ, CoH» (naphthy!)
Những so sánh vẻ hoạt tinh của các hợp chất này cũng cho thấy các hợp chất cómang nhóm rút electron cho hoạt tinh sinh học mạnh hon, các nhom thé ở vị trí para
có hoạt tính mạnh hơn các nhóm thế ở vị tri ortho và meta, các hợp chat có gắn nhóm
thế sẽ có hoạt tính mạnh hơn là không gắn nhóm thế
Với mong muốn tim ra các loại hợp chất có hoạt tinh kháng vi sinh vật cao,
Adediji F Johnson [3] và các cộng sự cũng tiến hành tông hợp nên
2,5-diamino-1,3,4-thiadiazole từ bithiourea
s i : bá ƒ
Ì mg | 44s
uc—N— =o — oo ——> (aN NH;
2,5-Diamino-1.3.4-thiadiazole được thay có hoạt tính kháng khuân va kháng
nam mạnh nhất ở nông độ 60ig/ml
Từ acid carboxylic, Umadevi Parimi va Lalitha Pappu [24] đã tổng hợp nên các
dẫn xuất imino-|,3,4-oxadiazole và imino-1,3,4-thiadiazole theo sơ đồ chuyên hóa:
SVTH: LE TRỌNG DUC Trang 8
Trang 15KHỎA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
1.3-Thiazolidin-4-one có công thức phản tử là C›H:ONS, khối lượng phân tửM=103, có công thức cấu tạo như sau :
2-Iminothiazolidin-4-one có công thức phân tử là C;H„N;OS khối lượng phân tử
là M = 116 và có công thức cầu tạo như sau:
H
— -arararsasasarnrn-nanẳẫẳa-.-ễỶễ-.ễỶễỶzrzy.ee~—~—~——xz-=zZ-=r>=r-ree
SVTH: LE TRỌNG DUC Trang 9
Trang 16KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
1.2.2 Các phương pháp tổng hợp và chuyển hóa 2-iminothiazolidin-4-one
Nhiều dan xuất của 2-iminothiazolidin-4-one được thay có hoạt tính kháng namrat cao và phương pháp tông hợp nên dị vòng này sat đơn giản bởi phản ứng củaacetamide với KSCN dé tạo thành sản phẩm mong muốn
Ameya A Chavan và Nandini R Pai [4] đã đề xuất quy trình tổng hợp nên
2-iminothiazolidin-4-one sau đó ngưng tụ với các aldehyde thơm dé tạo thành các dẫn xuất Š-arylidene-2-iminothiazolidin-4-one từ acid 2-aminobenzo|lđ]thiazol-ó-
carboxylic như sau:
X~3-C¡ Cl, 9H 3-#t, 4⁄4QCH;, BNO, 6NOÓ.,H
Các chất mới tổng hợp được đều cho kết quả kháng khuẩn trên các chủng khảo
sat là Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Psuedomonas aeruginosa và
Escherichia coli.
Các tác giả Nguyễn Tiến Công Trương Chi Hiền [23] cũng đã thực hiện phản
ứng tổng hợp nên các hợp chất chứa dj vòng 2-iminothiazolidin-4-one xuất phát từ
p-toludine theo sơ đồ tong hợp như sau:
l | NH,SCN
2 Br, solos N
X= 4-CI, 4-N(CH¡);, 4-OCH, 4-DH, 2-NO,
SVTH: LE TRONG DUC Trang 10
Trang 17KHOA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CONG
Cac khao sat hoat tinh khang vi sinh vat cho thay thiazolidin-4-one có gan các
nhóm thế arylidene ở vị trí số 5 làm tăng hoạt tính của chúng Các nhóm rút điện tử
gắn trên hợp phản arylidene như Cl, NO» cho hoạt tính kháng vi sinh vật mạnh hơn.
Hui-Ling Liu, Zongcheng Li và Thorleif Anthonsen [10] đã tổng hợp và thửhoạt tính kháng nắm của 2-imino-3-(4-arvithiazol-2-yl)-thiazolidin-4-one và các dẫnxuất S-arylidene của chúng
Các hợp chất trên được thir trên 7 loại nim Pleurotus ostreatus (F1),
Aspergillus niger (F2), Pythiwn aphanidermatum (F3), Gaewmannomyces graminis (F4), Fusarium graminearium (FS) Pyricularia oryzae (F6) va Botrytis cinerea (F7),
Kết quả cho thấy các hợp chất mới nay có hoạt tính kháng nam rat cao đặc biệt với
2 chủng nắm FI và F4
Theo tai liệu [25] 2-imino-3-(2-oxo-2/#-benzopyran-6-y])-thiazolidin-4-one
được tổng hợp từ 6-aminocoumarin Ngưng tụ iminothiazolidinone với các aldehyde thơm khác nhau, phản ứng xảy ra ở nhóm methylene linh động tại vị trí số 5 của
nnn nnn ener eee eee
SVTH: LE TRONG DUC Trang I!
Trang 18KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
benzopyran-6-yl)-thiazolidin-4-one Các chat tong hợp được xác nhận cấu trúc qua các
di liệu phổ và được khảo sát các hoạt tính kháng vi sinh vật và cho thấy có hoạt tính
Kết quả kháng khuẩn của các chat chứa dị vòng 2-iminothiazolidin-4-one được
so sánh với tiêu chuẩn kháng khuẩn và cho thấy có hoạt tính kháng khuẩn tốt với
2 chủng khảo sát là Bacillus subtilis và Escherichia coli.
Cũng trên quy trình tương tự, Ch Sanjeeva Reddy, D Chandrashekar Rao.
V Yakub và A Nagaraj [5] đã tổng hợp một dãy các dẫn xuất
ðis-{2-imino-3-[5-(3-methylbenzo|[ð]furan-7-y1)- I,3.4-thiadiazole-2-yl]-5-arvlidene-
I,3-thiazolan-4-one}methane từ acid 5,5'-methylenebis(2-hydroxybenzoic):
SVTH: LÊ TRỌNG ĐỨC Trang 12
Trang 19KHÓA LUẬN TÔT NGHIỆP GVHD: TS, NGUYÊN TIỀN CÔNG
Các chất tổng hợp được có hoạt tinh kháng khuẩn và kháng nắm phong phi
trong đó các chất có nhóm thé 4-CIC¿H¿, 4-BrC¿H‹, 4-NOoCoHs ở vị trí số 5 của vòng
thiazolidine cho hoạt tính kháng khuẩn vả kháng nắm mạnh nhất.
SVTH: LỄ TRONG ĐỨC Trang 13
Trang 20KHOA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
Ngoài phương pháp tạo vòng 2-iminothiazolidin-4-one bang cách cho dan xuất
acetamide tác dụng với KSCN (hoặc NH:SCN) Maulik K Prajapat và Dr Dhrubo
Jyoti Sen [14] cũng đã tổng hợp thành công các dẫn xuất của 2-iminothiazolidin-4-onetheo sơ dé chuyên hóa đưới đây:
Coon COOCI, COONHNI, COONHNHCSNH,
Các chat tổng hợp được đều cho thấy có hoạt tinh kháng khuẩn trên các chủng
S aureus, S citrus, E coli và kháng nam trên chủng A nigar Trong đó các hợp chất
X = 2-Cl, 4-Cl cho hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất
Như vậy, với các dược tính quý báu của các di vòng thiazolidin-4-one va
thiadiazole như kháng khuẩn, kháng nắm, kháng ung thư [1-5, 9-19], kháng HIV [25]
v.v cùng với việc tổng hợp nên các dj vòng nay khá đơn giản, chúng tôi tiến hành
tông hợp và nghiên cứu cấu trúc các hợp chat chứa đồng thời di vòng thiadiazole vathiazolidin-4-one với mong muốn tạo ra thêm nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học và
ứng dụng phong phú hơn và khảo sát xem việc kết hợp đồng thời cả 2 di vòng vào
cùng một hợp chất cỏ làm giảm hay tăng hoạt tinh sinh học của hợp chat hay không
Bên cạnh đó, nhiều nghiên cứu cũng chỉ ra rằng việc có hay không có nhóm thé
ở vị trí số 5 của dị vòng thiazolidine [23] cũng ảnh hưởng đến hoạt tính của các hợpchất nay, chính vì vậy, ngoài mục đích xây dựng quy trình tông hợp nên các hợp chatchứa đồng thời dị vỏng thiadiazole và thiazolidine, chúng tôi còn mong muon khảo sat
xem sự ảnh hưởng của các nhóm thẻ ở vị trí số 5 của di vòng thiazolidine này đối với
hoạt tính sinh học của hợp chất như thé nao, từ đó làm tiền đề cho các nghiên cứu
tiếp theo.
_>ễễ———
SVTH: LE TRONG ĐỨC Trang l4
Trang 21KHOA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
CHƯƠNG 2: THỰC NGHIEM
2.1 Se đồ thực nghiệm
2-Imino-3-(5-methyl-1,3.4-thiadiazol-2-yl)-I,3-thiazolidin-4-one vả các dẫn xuất của nó được tông hợp từ thiosemicarbazide theo sơ dé sau:
Cach tién hanh:
Cho 34,8 ml acid acetic (0,6 mol) và 30 ml H;SO, đặc vao bình cầu 100 mi có
chứa sẵn 18 gam thiosemicarbazide, đun hỏi lưu hỗn hợp phan ứng trong 2 giờ
Hỗn hợp sau phan ứng được lam lạnh bằng cách cho vào 120 ml nước đá
2-amino-5-methyl-I,3.4-thiadiazole được tách ra khi kiểm hóa dung dịch bang dung dịch NHẠOH.
Lọc kết tủa tách ra dé khô rồi két tinh lại trong ethanol Dé khô và cân được 19.7 gam
chat rin dạng bột mau trăng nga nhiệt độ nóng chảy ôn định ở 222,2°C phủ hợp với
SVTH: LE TRỌNG ĐỨC Trang l§
Trang 22tài liệu [18], chat 2-amino-5-methyl-1,3.4-thiadiazole có nhiệt độ nóng chảy từ
và lắc đều Cho 2,48 gam chloroacetyl chloride vào trong bình tam giác chứa sẵn 8 ml
chloroform Ngâm bình cầu trong nước đá, cho từ từ hỗn hợp chloroacety! chloride
trong chloroform vào, vừa cho vừa lắc đều Hỗn hợp sau đó được đun hồi lưu trong
vòng 30 phút đến khi kết tủa trắng tách ra hoản toản Để nguội, lọc lẫy chất rắn, để khô
và kết tinh trong hỗn hợp ethanol : nước Dé khô và cân, thu được 2,58 gam chat bộtmàu tring, nhiệt độ nóng chảy ổn định là 229,5°C Hiệu suất phản ứng đạt 67,36 %
Trang 23KHÓA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
Cách tiến hành:
Cho vào bình câu 100 ml hỗn hợp gém 1.915 gam (0,01 mol) (3), 0.760 gam
NHiNCS (0.01 mol) Hòa tan hỗn hợp trong 50 ml acetone và dun hôi lưu cách thủy
trong vòng 6 giờ Chat rin sinh ra được lọc, đẻ khô và két tinh lại trong ethanol Dékhô và cân thu được 1,360 gam chất bột mau vàng, nhiệt độ nóng chảy ổn định là
236.3°C Hiệu suất phan ứng đạt 63.55%
2.2.4 Tổng hợp
5S-benzylidene-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one (Sa)
Héa chat:
- 0.535 gam (4)
- 0.246 gam natri acetate
- 30 ml acid acetic bang
- 0,265 gam benzaldehyde Phương trình phan ứng:
Cho vào bình cầu 100 ml hỗn hợp gồm 0,535 gam (0/0025 mol) (4).
0,246 gam (0,003 mol) natri acetate, hòa tan hỗn hợp nay trong 30 ml acid acetic bang.
Sau đó cho tir từ 0,265 gam (0,0025 mol) benzaldehyde vào hỗn hợp phản img trên rồi
đun hỏi lưu trong 5 giờ Dé nguội đồ dung dịch vào trong 30ml nước da, khuấy mạnh.Lọc lấy chất rắn tách ra, để khô và kết tỉnh lại trong hỗn hợp dioxan : nước Đẻ khô vảcân thu được 0,410 gam sản phẩm đưới dang chất rắn mau vàng cam, nhiệt độ nóng
chảy ổn định 1a 245,8°C, Hiệu suất phản ứng đạt 54,49 %
2.2.5 Tổng hợp
5-(2-fluorobenzylidene)-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one (5b)
Héa chat:
- 0.535 gam (4)
- 0.246 gam natri acetate
SVTH: LE TRONG DUC Trang 17
Trang 24KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
- 30 ml acid acetic bang
- 0.310 gam 2-flourobenzaldehyde Phương trình phản ứng:
N—N N—N
“hủ, (VY—' “ạ ` j + HO
I
Cách tiền hành:
Cho vảo bình cầu 100 mÌ hén hợp gồm 0.535 gam (0.0025 mol) (4)
0.246 gam (0.003 mol) natri acetate, hòa tan hỗn hợp nảy trong 30 mi acid acetic băng.Sau đó cho từ tử 0.310 gam (0.0025 mol) 2-flourobenzaldehyde vảo hỗn hợp phan ứng
trên rồi đun hồi lưu trong 5 giờ Dé nguội, dé dung dich vao trong 30ml nước đá, khuấy mạnh Lọc lấy chất rắn tách ra, dé khô và kết tinh lại trong hỗn hợp dioxan : nước Để khô vả cân, thu được 0.570 gam sản phẩm dưới dạng chất rắn màu vàng, nhiệt độ nóng chảy ổn định là 281,3°C Hiệu suất phan ứng đạt 71,25 %.
2.2.6 Tầng hợp
5-(4-flourobenzylidene)-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one (Sc)
Hóa chất:
- 0,535 gam (4)
- 0,246 gam natri acetate
- 30 ml acid acetic băng
Cho vảo bình cầu 100 ml hổn hợp gồm 0.535 gam (0.0025 mol) (4)
0,246 gam (0.003 mol) natri acetate, hòa tan hỗn hợp này trong 30 ml acid acetic băng.
SVTH: LẺ TRỌNG ĐỨC Trang 18
Trang 25KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
Sau đó cho từ từ 0,310 gam (0.0025 mol) 4-flourobenzaldehyde vao hôn hợp phan ứng
trên rồi đun hỏi lưu trong 5 giờ Dé nguội đổ dung dich vào trong 30 ml nước đá,
khuấy mạnh, Lọc lấy chất rắn tách ra, để khô và kết tinh lại trong hỗn hợp
dioxan : nước Dé khô và cân, thu được 0,520 gam sản phẩm dưới dạng chất rin màu
vàng nhiệt độ nóng chảy én định là 263.1°C Hiệu suất phan ứng đạt 65,00 %.
Bảng 2.1 Kết quả tổng hợp các dẫn xuất
S-arylidene-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one (Sa-c)
N=—x
Dung môi Trạngthá_- | Khối lượn
kết tinh màu sắc thu được ø Bạc (%)
Chat ran, Dioxan : nước
mau vang cam
Chat ran, 2-F Dioxan : nước 0.57 71,25
màu vàng
Chat ran, 4-F Dioxan : nước
mau vàng
2.3 Xác định tinh chất và một số tính chất vật lý
2.3.1 Xác định nhiệt độ nóng chảy
Các hợp chất đã tổng hợp đều là chất rắn Nhiệt độ nóng chảy được đo trên máy
Gallenkamp tại phòng thí nghiệm Hóa đại cương - Khoa Hoá — Trường DH Sư phạm
TP Hỗ Chí Minh
2.3.2 Phổ hẳng ngoại (IR)
Phé hong ngoại của tất cả các hợp chat đã tổng hợp được ghi trên máy
FTIR-8400S SHIMADZU dưới dang viên nén KBr, được thực hiện tại Khoa Hóa - Trường
ĐH Sư phạm TP Hỗ Chi Minh.
eee eee
SVTH: LE TRONG DUC Trang 19
THL! te AW
Trang 26KHÓA LUẬN TÔT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CONG
2.3.3 Phổ cộng hưởng từ proton ('H-VMR)
Pho 'H-NMR của các chất được ghi trên máy Bruker AC 500 MHz trong dung
môi DMSO-ds được thực hiện tại Phòng cộng hưởng tir hạt nhân - Viện Hóa học —
Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam Hà Nội.
2.3.4 Phé khối lượng phân giải cao (HR-MS)Phổ HR-MS của các chất được ghi trên máy Bruker micrOTOF-Q 10187, thực
hiện tại Trường Đại học Khoa học Tự nhiên - Đại học Quốc gia Tp Hồ Chí Minh.
2.3.5 Hoạt tinh kháng khuẩn
Việc thâm dé hoạt tinh kháng khuẩn của các hợp chất (5a-e) được thực hiện tại
Phòng thí nghiệm Vi sinh — Sinh hỏa, Khoa Sinh hoc, Trường DH Sư phạm TP Hỗ Chi
Minh.
—ễễễ———
SVTH: LE TRỌNG DUC Trang 20
Trang 27KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
CHƯƠNG 3: KÉT QUÁ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Tổng hợp 2-amino-5-methyl-1,3,4-thiadiazole (2)
3.1.1 Phương trình phản ứng
Theo tải liệu [18], S N Pandeya Vaishali Mishra va Alka Pandey đã dé xuất
quy trình téng hợp 2-amino-5-methyl-l.3.4-thiadiazole từ thiosemicarbazide theo
phương trinh phan ứng:
N—N H;SO
H,N—C—NHNH, + CH;COOH —2—+ pte MM + 2H:O
| HịC NH,
Ap dụng quy trình tổng hợp này, chúng tôi đã thu được sản phẩm có nhiệt độ
nóng chảy 222,2°C, phù hợp với nhiệt độ nóng chảy của hợp chất 1,3,4-thiadiazole mà tài liệu đã công bó
Trang 28KHOA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CÔNG
3.1.3 Nghién cứu câu trúc
3.1.3.1 Phố hồng ngoại IR
= + =®bs vA= ————
— = me ee 2 * eee? “ener “eee? n ưynG say: ngay
Hình 3.1 Phố IR của chất (2)
Trên phổ hỏng ngoại (IR) của (2) (xem hình 3.1) xuất hiện pic hấp thụ có tan số
3096 cm’! và 3289 cm'! đặc trưng cho dao động hóa trị của các liên kết N-H, pic hấpthụ có giá trị từ 2810 cm là đặc trưng cho dao động hóa trị của liên kết C„'-H Pichấp thụ ứng với đao động hóa trị C=N được thấy xuất hiện ở tần số 1641 cm"
Kết quả phổ IR của (2), phù hợp với tài liệu [18] đã công bố, điều đó cho phép
chúng tôi có thé kết luận phản ứng đã xảy ra và chất (2) đã được tổng hợp thành công
3.1.3.2 Phỗ cộng hưởng từ proton 'H-NMR
Về cường độ tín hiệu trên phô 'H-NMR của hợp chất (2) (xem hình 3.2) cho
thay có tông cộng 5 proton được tách thành các tín hiệu có cường độ tương đối là 3 : 2,phủ hợp với cau trúc dự kiến của hợp chat (2)
Tín hiệu singlet có cường độ tương đổi bảng 3 va độ chuyển dich
5 = 2,425 ppm được quy kết cho proton của nhóm methyl ở vị trí số 5 của dj vòng
thiadiazole Tín hiệu singlet còn lại có cường độ tương đổi bằng 2 và độ chuyên địch
5 = 6,932 ppm được quy kết cho proton của nhóm amin ở vị trí số 2 của dj vòng
thiadiazole.
SVTH: LE TRỌNG DUC Trang 22
Trang 29Giai đoạn |: Nguyên tử nito trong nhóm —NH; đóng vai trò tác nhân nucleophile
tắn công vào carbon carbony! mang một phan điện tích đương đây là giai đoạn chậm.quyết định tốc độ phan ứng
el
SVTH: LE TRONG DUC Trang 23
Trang 30KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYEN TIEN CONG
Giai đoạn 2: Quá trình tách anion Cl va loại proton Hˆ tao thành sản phẩm
Trang 31KHOA LUẬN TOT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIỀN CÔNG
3.2.3.2 Pho cộng hưởng tir proton 'H-NMR
công thức dự kiến của hợp chất (3)
Tin hiệu singlet có cường độ tương đối bằng 3 ở độ chuyển dịch ô = 2,622 ppmđược quy kết cho proton H' của nhóm methyl gắn ở vj trí số 5 của dị vòng thiadiazole
Tin hiệu singlet có cường độ tương đối bằng 2ởờđộ chuyên dich 5 = 4,418 ppm được
quy ket cho proton HỶ của nhóm methylen cạnh dị tô Cl Tín hiệu tu (broad) có cường
độ bằng | ở độ chuyển dich ô = 12.732 ppm được quy kết cho proton H của nhóm
imino gắn ở vị trí sé 2 trên vòng thiadiazole.
ma
SVTH: LE TRONG DUC Trang 25
Trang 323.3.2 Cơ chế phản ứngPhan ứng này đã được nhiều tác giả nghiên cứu vả là một trong các phương pháp
chính dé tổng hợp nên dj vòng thiazolidin-4-one Theo tài liệu [25], phan img nay xảy
ra qua hai giai đoạn;
Giai đoạn 1: Phan ứng thẻ nguyễn tử clo bằng ion thiocyanate
Phan ứng nay xây ra theo cơ chế thé nuclephile lưỡng phân tử (Sx2) với tác nhânnucleophile mạnh là ion NCS" và dung môi phi proton là acetone đều là những yếu tổ
thuận lợi cho phản ứng Sản phẩm hình thành qua sự tấn công của tác nhân nucleophile NCS vào carbon hình thành trạng thái chuyển tiếp trung gian
H
H H
= VỆ" —— hs si: a =—>\NCS ệm + cr
Giai đoạn 2: Phản img đóng vòng nội phân tử.
Nguyên tử nitơ ở chức amide đóng vai trò tác nhân nucleophile tấn công vào
carbon mang một phần điện tích dương của nhóm thiocyanate Sau đó, xảy ra quá trìnhchuyển vị proton và hinh thành sản phẩm:
Trang 33KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS, NGUYÊN TIỀN CÔNG
3.3.3 Nghiên cứu cầu trúc
3.3.3.1 Phô hồng ngoại IR
Hình 3.5 Phổ IR của hợp chất (4) Trên phổ hồng ngoại của hợp chất (4) nay (xem hình 3.5), ta cũng nhận thấy có
các tín hiệu của dao động hóa trị C„-H ở 2897 - 2982 cm", đao động hóa trị của liên
kết N-H ở 3039 cm'!, C=N ở 1560 cm", đặc biệt là đã có sự khác biệt rõ rệt giữa tần
số hắp thụ của nhóm C=O ở hợp chất (4) với hợp chất (3): dao động hóa trị của nhóm
C=O ở hợp chất (4) đã chuyên lên 1734 cm” trong khi dao động hóa trị của nhóm
C=O ở hợp chat (3) xuất hiện ở 1697 cm’, Điều này chứng tỏ đã xảy ra sự khép vòng
thành công va nguyên tử N trong vòng do còn bị ảnh hưởng rút electron của nhóm
imino nên sự chuyển dịch electron đến nhóm C=O bị giảm bớt; nhóm C=O vi thé ít nằm ở trạng thái kém bên Cˆ-O' hơn và cho tín hiệu xuất hiện ở tần số lớn hơn.
3.3.3.1 Phổ cộng hướng từ proton 'H-NMR
Vẻ cường độ trên phổ 'H-NMR của hợp chất (4) (xem hình 3.6) cho thấy có
tổng cộng 6 proton được tách thành các tin hiệu có cường độ tương đối lả 3 : 2 : | phủ
hợp với công thức dự kiến
Tín hiệu singlet có cường độ tương đối bằng 3 ở 6 = 2,630 ppm được quy kết
cho proton H' của nhóm methy! gắn ở vị trí số Š của di vong thiadiazole Tin hiệu tù
có cường độ tương đổi bing 1 và 5 = 12,229 ppm được quy kết cho proton H? của
SVTH: LE TRỌNG ĐỨC Trang 27
Trang 34KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS, NGUYÊN TIÊN CÔNG
Nl
nhóm NH Con tin hiệu singlet cuôi cùng có cường độ tương đổi bing 2 ở
ô = 4,072 ppm được quy kết cho proton H của nhóm methylene
"10
16 15 14 13 12 11 10 % 8 71 é s 4 32 1 9 ¬1 Ppa
Hình 3.6 Phổ 'H-NMR của hợp chất (4)
So với pho 'H-NMR cia chất (3) thi tín hiệu proton H? đã chuyển về vùng
trường mạnh hon do sau khi đóng vòng proton H° này gần dj tố S, còn chất (3) thi
proton H gan dị tố Cl mà Cl có độ âm điện lớn hơn S do đó tín hiệu của proton H ở
(3) sẽ có độ chuyên dịch lớn hơn Như vậy, một lan nữa khẳng định chất (4) đã được tông hợp thành công.
3.4 Tổng hợp các hợp chất
5-arylidene-2-imino-3-(5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)-1,3-thiazolidin-4-one (5a-c)
Chúng tôi đã tổng hợp 3 hợp chat
š§-arylidene-2-imino-3-(S-methyl-1.3.4-thiadiazol-2-y])- I.3-thiazolidin-4-one (5a-e) bao gôm:
SVTH: LẺ TRỌNG ĐỨC Trang 28
Trang 35KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP GVHD: TS NGUYÊN TIÊN CÔNG
DO
nyc (4) t HựC
(Sa-cÌ
aX-4H (Sa) bX=?1F (5b)
oX-4F (Se)
3.4.2 Cơ chế phản ứngPhản ứng tạo thành các hợp chat (Sa), (5b) (Sc) là phản ứng ngưng tụ của các aldehyde thơm với hợp chất có chứa hợp phần methylene linh động khi có acid hoặc
base làm xúc tác [21]
Các phản ứng tổng hợp (Sa), (Sb), (Se) được chúng tôi tiến hành trong môi
trường acid acetic, Phản ứng nảy xảy ra qua các giai đoạn sau:
Giai đoạn |: Andol hóa
Xúc tác acid có vai trò quan trọng trong việc enol hỏa hợp phan methylene của (4) và hoạt hóa nhóm carbonyl trong các benzaldehyde thé Trước tiên là phản ứng
cnol hóa
0 H—Or HO
V H
i XX] +] om o_o
Cation H* cũng có vai trò hoạt hóa nhóm carbony! trong các dan xuất thé của
benzaldehyde Khi nhóm carbonyl được proton hóa, oxi trở nên mang điên đương lam
.————mz.sẳễẳỶz-ẳờ-ơ-ẳẵẳẵnnờợ‹xsẳssễs-zsaađœss>=>=>ZTï——===TTm=Tï
SVTH: LE TRỌNG ĐỨC Trang 29