Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây lưỡi rắn trắng (hedyotis diffusa willd)

Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây lưỡi rắn trắng (hedyotis diffusa willd) Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của cây lưỡi rắn trắng (hedyotis diffusa willd)

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

Phạm Lê Phương Uyên

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY LƯỠI RẮN TRẮNG

(HEDYOTIS DIFFUSA WILLD)

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Hà Nội - 2023

TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

Phạm Lê Phương Uyên

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÂY LƯỠI RẮN TRẮNG

(HEDYOTIS DIFFUSA WILLD)

Chuyên ngành : Hóa Hữu cơ Mã số : 8440112.02

LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS Đỗ Thị Việt Hương

TS Vũ Minh Trang

Lời cảm ơn

Với tất cả lòng biết ơn, trước hết em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới PGS.TS Đỗ Thị Việt Hương và TS Vũ Minh Trang đã tận tình hướng dẫn và giúp đỡ em trong quá trình hoàn thành luận văn thạc sĩ Em cũng xin gửi lời cảm ơn đến các thầy cô giáo đã tận tình truyền đạt những kiến thức quan trọng và bổ ích không chỉ là nền tảng cho quá trình thực hiện khóa luận mà còn là hành trang cho chặng đường phía trước

Em xin cảm ơn Trường Đại học Khoa học tự nhiên và Khoa Hoá học đã tạo điều kiện, cơ sở vật chất để em có cơ hội và môi trường học tập và rèn luyện

Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình, bạn bè đồng nghiệp đã luôn động viên và tạo điều kiện tốt nhất để em có thể nỗ lực hoàn thành tốt bài nghiên cứu

Em xin chân thành cảm ơn!

MỞ ĐẦU 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2

1.1 Tổng quan về Hedyotis diffusa : 2

1.1.1 Giới thiệu khái quát chung về họ, chi và loài của cây Hedyotis diffusa: 2

1.1.2 Đặc điểm thực vật của cây Hedyotis diffusa: 3

1.1.3 Mô tả: 3

1.1.4 Đặc điểm giải phẫu: 5

1.2 Dược lý: 6

1.2.1 Hoạt tính chống ung thư: 6

1.2.2 Tác dụng điều hòa miễn dịch: 8

2.3.3 Sắc ký cột (CC): 34

2.4 Phương pháp xác định cấu trúc của hợp chất hữu cơ: 35

2.4.1 Phương pháp cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR và 13C-NMR: 35

2.4.2 Phổ tăng cường DEPT: 36

2.4.3 Sắc ký khí khối phổ (GC – MS): 36

2.5 Thực nghiệm: 37

2.5.1 Chuẩn bị và tách dịch chiết từ mẫu Hedyotis diffusa: 37

2.5.2 Phân tách cặn chiết ethanol cây lưỡi rắn trắng EHW bằng phương pháp sắc ký cột thường (CC): 37

2.5.3 Khảo sát định tính các hợp chất dễ bay hơi trong cặn chiết EHW cây lưỡi rắn trắng bằng phương pháp sắc kí khí khối phổ GC/MS: 38

2.5.4 Xác định tổng hàm lượng phenolic và flavonoid của dịch chiết tổng EHW:… 39

2.5.4.1 Xác định tổng hàm lượng phenolic: 39

2.5.4.2 Xác định tổng hàm lượng flavonoid: 39

2.5.5 Khảo sát khả năng bắt gốc tự do DPPH của các phân đoạn chiết: 40

CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41

3.1.3 Khảo sát khả năng bắt gốc tự do DPPH của các phân đoạn chiết: 47

3.1.4 Xác định cấu trúc của hợp chất phân lập từ dịch chiết cây Lưỡi rắn trắng:…… 48

3.1.4.1 Hợp chất C01: 48

3.1.4.2 Hợp chất C02: 51

KẾT LUẬN 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57

DANH MỤC BẢNG BIỂU

Bảng 1.1 171 hợp chất trong Hedyotis diffusa 8

Bảng 1.2 Các hợp chất Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis diffusa Error! Bookmark not defined

Bảng 1.3 Flavonoids trong Hedyotis diffusa Error! Bookmark not defined Bảng 1.4 Anthraquinones trong Hedyotis diffusa Error! Bookmark not defined

Bảng 3.1 Phân tích GC-MS của dịch chiết ethanol của H diffusa 42

Hình 1.1 Hedyotis diffusa 4

Hình 1.2 Hedyotis corymbosa 4

Hình 1.3 Vi phẫu thân 5

Hình 1.4 Vi phẫu lá 5

Hình 1.5 Hedyotis diffusa khô 6

Hình 1.6 Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis Diffusa Willd 18

Hình 1.7 Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis Diffusa Willd (Tiếp) 22

Hình 1.8 Flavonoids trong Hedyotis diffusa 23

Hình 1.9 Acid Phenolic và các dẫn xuất trong H diffusa 28

Hình 1.10 Hợp chất khác trong H diffusa 31

Hình 2.1 Sơ đồ tách chiết 38

Hình 3.1 Sắc ký đồ GC-MS của dịch chiết ethanol của rễ H diffusa 41

Hình 3.2 Các hợp chất có trong dịch chiết ethanol cây lưỡi rắn trắng 43

Hình 3.3 Đồ thị đường chuẩn galic acid 45

Hình 3.4 Đồ thị đường chuẩn quercetin 46

Hình 3.5 Khả năng bắt gốc tự do DPPH và IC50 của nhóm phân đoạn dịch chiết cây lưỡi rắn trắng 47

Hình 3.6 Phổ khối lượng của hợp chất C01 48

BẢNG KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT

1H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy

13C-NMR Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance ABTS 2,2-azinobis-3-ethylbenzothiozoline-6-sulfonic acid Ac

CC DEPT

Acetyl Column Chromatograph Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer DPHH 1,1-diphenylpicrylhydrazyl

Gal GC

Beta-D-galactose D-galactose galactose Gas Chromatography

SiO2 CC silica gel column chromatography

Lưỡi rắn trắng có tên khoa học là Hedyotis diffusa Willd, thuộc họ Rubiaceae

được phân bố rộng rãi ở Trung Quốc, Philippin, Malaysia, Lào, Campuchi, Việt Nam;

có 362 loài thuộc chi Hedyotis phân bố trên toàn thế giới Trong y học dân gian Việt

Nam, lưỡi rắn trắng được dùng để thanh nhiệt, giải độc và hoạt huyết [10] Ở Trung Quốc, lưỡi rắn trắng được sử dụng để điều trị ung thư cũng như cải thiện các phản ứng bất lợi trong hóa trị

Các nghiên cứu dược lý cho thấy nó chứa các hợp chất có hoạt tính chống ung thư, bao gồm anthraquinone, hemiterpen, flavon, polyphenol, acid hữu cơ và

polysaccharides [17] Nghiên cứu của Chen và cộng sự đã chứng minh rằng chiết xuất

lưỡi rắn trắng ức chế sự hình thành mạch và thúc đẩy quá trình tự tiêu diệt các tế bào

khối u thông qua con đường phụ thuộc vào ty thể [25][26] Bằng phương pháp in silico

docking, nhận thấy rằng các thành phần quercetin, asperuloside trong dịch chiết lưỡi rắn trắng có thể điều hòa hoạt động của các protein kinase trong quá trình tăng sinh tế bào

[38][34] Trong nghiên cứu in vivo trên nô hình chuột bị gây bệnh ung thư gan, cho thấy

chiết xuất nước của loài cây này có thể ức chế hiệu quả sự phát triển tế bào ung thư gan HepG2 và phát huy hiệu quả chống ung thư của thuốc 5-fluorouracil liều thấp [27]

Thành phần hóa học của loài Hedyotis diffusa Willd cũng đã được nghiên cứu, bao gồm

các hợp chất iridoid, flavonoid, anthraquinone, phenolic và các dẫn xuất của chúng [30]

Để góp phần nghiên cứu thành phần hóa học của các loài cây có tác dụng chữa bệnh của Việt Nam nhằm khẳng định hơn giá trị của chúng, nghiên cứu đã tiến hành phân lập các hợp chất có hoạt tính sinh học của loài cây này, đồng thời tiến hành khảo

sát một số hoạt tính sinh học của các dịch chiết từ loài lưỡi rắn trắng Việt Nam

CHƯƠNG I: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan về Hedyotis diffusa

Theo trung tâm Dữ liệu thực vật Việt Nam

b Chi Hedyotis

Hedyotis được biết đến là một trong những chi lớn nhất của họ cà phê - Rubiaceae Chúng thường là cây thân thảo, cao từ 30-85 cm Lá nhỏ, có phiến lá hẹp và có gân ở giữa Hoa có màu trắng hoặc vàng, mọc thành chùm Hedyotis biflora, Hedyotis corymbosa và Hedyotis diffusa đều là những cây thuốc nổi tiếng thuộc chi này Hedyotis được tìm thấy ở các vùng nhiệt đới và cận nhiệt đới ở châu Á, cũng như các đảo phía tây bắc Thái Bình Dương Tổng cộng có khoảng 115 loài [7]

Tên khoa học: Hedyotis diffusa Willd Tên khác: Oldenlandia diffusa (Willd.) Roxb Tên thường gọi: Bạch hoa xà thiệt thảo, Bòi ngòi bò, Cỏ lưỡi rắn hoa trắng, …

Tên nước ngoài: Bai hua she she cao, Snake-needle grass

1.1.3 Mô tả

Cây có thân hơi tròn, giống cỏ, mọc dẹt và phân nhánh rộng, đạt chiều dài 30-40 cm và không có lông (Hình 1) Thân hình vuông, màu xanh lục hoặc nâu nhạt; thân trưởng thành có mặt cắt ngang hình tròn và màu nâu [1]

Các lá đơn giản và sắp xếp đối diện Phiến lá hình mác, thuôn nhọn về hai đầu, dài 2-4 cm, rộng 4-8 mm Mặt trên của lá có màu xanh đậm, mặt dưới nhạt hơn [5] Mép lá nguyên Gân lá có hình lông chim, chỉ có gân chính nhìn rõ còn gân phụ khó nhìn thấy bằng mắt thường mà có thể nhìn thấy qua kính lúp Cuống lá ngắn, mép lá thon dần về phía cuống Trên lá có một lá chét mỏng màu trắng chia thành 4-5 sợi, trong đó có 2 sợi lá kèm dài khoảng 1,5-2 mm, sợi ở giữa ngắn hơn [3]

Hoa màu trắng, có cuống, mọc đơn độc hoặc thành đôi, mọc từ nách lá Tràng hoa màu trắng, đài hoa có 4 thùy giống cánh hoa, có viền tua rua Tràng hoa có 4 thùy nhẵn, ống dài 1,5 mm Có 4 nhị hoa gắn vào ống tràng hoa Buồng trứng có 2 ngăn chứa nhiều noãn, đầu nhụy có hai ngăn [3]

Quả khô cao khoảng 2-2,5 mm, đỉnh tròn, xung quanh có các thùy đài dai dẳng Nó chứa nhiều hạt có cạnh [3]

Hình 1.1 Hedyotis diffusa Thuốc thảo dược dễ nhầm lẫn:

Hedyotis corymbosa (Hình 2): Hai loại này tương đối giống nhau, nhưng điểm khác biệt là Hedyotis diffusa phân nhánh nhiều hơn và có lá rộng hơn

Hình 1.2 Hedyotis corymbosa

Vi phẫu thân: Các cá thể trưởng thành có hình dạng

gần như tròn Lớp biểu bì bao gồm các tế bào hình vuông hoặc hoặc hình chữ nhật, lớn và khá đồng đều, có khí khổng rải rác Mặt ngoài biểu bì có lớp sừng mỏng hình răng cưa, lông đơn bào to, ngắn, đầu tù, bề mặt có đốm Mô mềm của vỏ là mô nhu mô gồm 3-4 lớp tế bào, hình tròn hoặc bầu dục, kích thước không đều nhau, thành mỏng, có tinh thể canxi oxalat hình kim tập trung thành bó trong tế bào Nội bì tạo thành các tế bào liên tục có hình lưỡi liềm, hình chữ nhật hoặc đa giác với kích thước không đồng đều Lớp ngoại bì nhỏ hơn lớp nội bì [22]

1.1.5 Phân bố và thu hoạch

Hedyotis diffusa là loài phân bố rộng rãi Nó được tìm thấy ở các nước nhiệt đới ở châu Á như Ấn Độ, Malaysia, Thái Lan và miền nam Trung Quốc Cây cũng được tìm thấy phổ biến ở Việt Nam Tuy nhiên, nó thường mọc thành từng cụm ven đường hoặc

Hình 1.4 Vi phẫu lá Hình 1.3 Vi phẫu thân

Cây mọc từ hạt và có thể thu hoạch sau 3 đến 4 tháng trồng, thường vào mùa hè và mùa thu Cây thu hoạch được rửa sạch rồi phơi khô dưới nắng hoặc dùng máy sấy (Hình 5) [3]

Hình 1.5 Hedyotis diffusa khô

1.2 Dược lý

1.2.1 Hoạt tính chống ung thư

* Hoạt tính chống ung thư đại trực tràng

H diffusa đã được sử dụng làm công thức chính trong điều trị ung thư đại trực tràng

trong các thử nghiệm lâm sàng Trong ống nghiệm, việc xử lý tế bào HT-29 bằng chiết

xuất ethanol của H diffusa làm giảm sự tăng sinh và gây ra apoptosis, dẫn đến sự phân mảnh DNA Trong khi đó, chiết xuất etanolic của H diffusa ức chế tế bào CT-26 ở tốc

độ ức chế và tác dụng ức chế trở nên mạnh hơn khi nồng độ tăng [22]

* Hoạt tính chống bệnh bạch cầu

Trong các dòng tế bào ung thư khác nhau, tác dụng chống bệnh bạch cầu của cả

chiết xuất nước và etanolic của H diffusa đã được kiểm tra H diffusa Trong ống nghiệm, chiết xuất nước H diffusa điều trị sự phát triển tế bào CEM bị ức chế bằng cách tăng

biểu hiện P53, tác động đến tế bào WEHI-3 của bệnh bạch cầu ở chuột và thúc đẩy sự tăng sinh tế bào T và B ở chuột mắc bệnh bạch cầu được sử dụng in vivo [23][24]

Sự ức chế H diffusa chiết xuất bằng dung dịch nước đối với di căn máu ở chuột đã

được báo cáo Trọng lượng của cơ thể và các cơ quan miễn dịch tăng lên sau ba liều chiết

xuất H diffusa (0,25, 0,5 và 1,0 mg/kg) Trong ống nghiệm, điều trị bằng chiết xuất nước của H diffusa (1,25-1 mg/ml) làm giảm đáng kể sự tăng sinh tế bào HepG2 theo cách

phụ thuộc vào liều lượng, rất có thể bằng cách ngăn chặn các tế bào ở pha G0/G1 và gây ra sự chậm trễ pha S 9 hợp chất từ H diffusa, bao gồm ethyl 13 (S)-hydroxy-chlorophyllide a, 2-methyl-3-methoxy anthraquinone, 2-hydroxymethyl anthraquinone, 2-hydroxy-3-methyl anthraquinone, 2-hydroxymethy-1-hydroxy anthraquinone , 2-hydroxy-1-methoxy anthraquinone, 2-hydroxy-3-methyl-1-methoxy anthraquinone, acid oleanolic và acid ursolic, đã được nghiên cứu về đặc tính chống ung thư gan ở khoảng nồng độ từ 1 đến 200 µM [24]

* Hoạt tính chống ung thư phổi

Điều trị bằng chiết xuất nước của H diffusa đã ức chế tế bào A549 và H1355 theo

cách phụ thuộc vào nồng độ Tuy nhiên, tác động tương tự không được quan sát thấy trong các tế bào LLC [16]

* Hoạt tính chống ung thư vú

Sử dụng dòng tế bào ung thư vú MCF7 ở người, anthraquinone, iridoid glucoside, stirysterol và chiết xuất alkaloid/flavonoid đã được thử nghiệm về hoạt tính chống ung thư vú [16]

* Hoạt tính chống ung thư tuyến tiền liệt

Các hoạt chất hóa học trong H diffusa trước đây đã được chứng minh là có đặc tính chống ung thư tuyến tiền liệt ở nhiều dòng tế bào [16]

* Hoạt tính chống đa u tủy xương

Cho đến nay, tác dụng chống đa u tủy xương của H diffusa đã được chứng minh ở

tế bào RPMI 822625 [16]

1.2.2 Tác dụng điều hòa miễn dịch

Ở chuột mắc bệnh bạch cầu do WEHI-3 tạo ra, chiết xuất nước của H diffusa ảnh hưởng đến phản ứng miễn dịch bằng cách thúc đẩy sự tăng sinh tế bào T và B [16]

1.2.3 Tác dụng chống oxy hóa

Hoạt tính chống oxy hóa của dịch chiết nước, metanol và 80% acetonic đã được thử nghiệm và việc chiết xuất từ cồn 80% (0,1–4,5 mg/mL) đã chứng minh hoạt tính chống oxy hóa cao nhất, được đo bằng 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl xét nghiệm (DPPH) [16]

1.2.4 Tác dụng chống viêm

Hơn nữa, hai kiểu hóa học chính đã được phát hiện trong các mô thận sau khi

điều trị bằng H diffusa, bao gồm 8 flavonoid và 4 glycosid iridoid, ngụ ý rằng các yếu

tố này có thể chịu trách nhiệm cho tác dụng chống viêm [16]

1.3 Thành phần hóa học:

Cho đến nay, 171 hợp chất đã được xác định trong Hedyotis diffusa, bao gồm 32 iridoids, 26 flavonoid, 24 anthraquinone, 26 phenol và các dẫn xuất của chúng, 50 loại dầu dễ bay hơi và 13 hợp chất khác Các nghiên cứu in vitro và in vivo đã chỉ ra rằng các chất phytochemical và chiết xuất thực vật này thể hiện một loạt các hoạt động dược lý, bao gồm tác dụng chống ung thư, chống oxy hóa, chống viêm, chống xơ hóa, điều hòa miễn dịch và bảo vệ thần kinh

Bảng 1.1 171 hợp chất trong Hedyotis diffusa

Iridoid

3 Asperuloside acid

5 Deacetyl asperulosidic acid methyl ester

22 6-α-Hydro-10-acetyl asperuloside acid

TT Hợp chất

23 6-β-Hydro-10-acetyl asperuloside acid

26 (E)-6-O-p-Coumaroyl-10-O-formoxyl scandoside methyl ester

27 (E)-6-O-p-Coumaroyl scandoside methyl ester

28 (Z)-6-O-p-Coumaroyl scandoside methyl ester

29 (E)-6-O-p-Methoxy cinnamoyl scandoside methyl ester

30 (Z)-6-O-p-Methoxy cinnamoyl scandoside methyl ester

31 (E)-6-O-Feruloyl scandoside methyl ester

32 (Z)-6-O-Feruloyl scandoside methyl ester

TT Hợp chất

58 Kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside 59 Kaempferol-3-O-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside 60 Kaempferol-3-O-(6-O-α-L-rhamnosyl)-β-D-glucopyranside

76 3-Hydroxy-2-methyl anthraquinone 77 3-Hydroxy-2-methyl-4-methoxy anthraquinone

79 1,3-Dihydroxy-2-methyl anthraquinone 80 1,7- Dihydroxy-6-methoxy-2-methyl anthraquinone 81 3-Hydroxy-2-methyl-4-methoxy anthraquinone 82 2,6-Dihydroxy-3-methyl-4-methoxy anthraquinone 83 2,6-Dihydroxy-1-methoxy-3-methyl anthraquinone

85 2-Hydroxymethy-1-hydroxy anthraquinone

Acid phenolic and derivatives

TT Hợp chất

Các hợp chất triterpenoid đã được phân lập từ Hedyotis diffusa và cấu trúc của chúng được thiết lập bằng phân tích quang phổ 1D và 2D-NMR và phép đo khối phổ ion hóa phun điện có độ phân giải cao (HRESIMS) Chúng được đặt tên là arborinone, isoarborinol, acid oleanolic và acid ursolic [36]

Cấu trúc hóa học của các hợp chất iridoid và triterpenoid được mô tả trong hình dưới đây

2 Deacetyl asperuloside: R1=H 4 Deacetyl asperyloside acid: R1=H,

R2=H 5 Deacetyl asperulosidic acid methyl

ester: R1=CH3, R2=H

6 Geniposidic acid: R=H 7 10-O-Acetyl geniposidic acid:

R=CH3CO

8 10-Dehydro geniposide: R=CH3

9 10-Dehydro geniposidic acid: R=H

12 Lupenylacetate 13 Alpigenoside

14 Oldenlandoside III 15 5-O-Feruloyl scandoside methyl ester Hình 1.6 Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis Diffusa Willd

Bảng 1.2 Các hợp chất Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis diffusa

33 Arborinone 34

Hình 1.7 Iridoids và Triterpenes trong Hedyotis Diffusa Willd (Tiếp)

1.3.2 Flavonoids

Flavonoid là một nhóm chính được tìm thấy trong Hedyotis diffusa, tất cả đều là dẫn xuất kaempferol và quercentin aglycone flavonol Gần đây, các aglycone khác như chrysin, oroxylin và wogonin đã được phân lập bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cực cao với phát hiện mảng diode/phép đo khối phổ thời gian bay bốn cực (UPLC-DAD/Q-TOF-MS) Cho đến nay, 26 flavonoid đã được xác định Cấu trúc hóa học được thể hiện trong bảng dưới đây

37 Amentoflavone 38 Chrysin-6-C-glucosyl-8-C-arabinosyl:

R1=Glc, R2=H, R3=Ara 39 Chrysin-6-C- arabinosyl-8-C-glucosyl:

R1=Ara, R2=H, R3=Glc 40 OroxylinA-O-glucuronic acid: R1=OCH3,

R2=Glu A, R3=H 41 Wogonin-O-glucuronic acid: R1=H, R2=Glu

A, R3=OCH3

42 5,7-Dihydroxy-3-methoxy flavonol: R1=OCH3, R2=OH, R3=H, R4=OH, R5=H, R6=H 43 5,7,4’-Trihydroxy flavonol: R1=OH,

R2=OH, R3=H, R4=OH, R5=H, R6=OH 44 5-Hydroxy-6,7,3’,4’-tetramethoxy flavone: R1=H, R2=OH, R3= OCH3, R4=OCH3,

R5=OCH3, R6= OCH3

Hình 1.8 Flavonoids trong Hedyotis diffusa

Bảng 1.3 Flavonoids trong Hedyotis diffusa

47 Quercetin-3-O-β-D-glucopyranside OH β-D-Glc 48 Quercetin-3-O-β-D-galactopyranoside OH β-D-Gal

49

Quercetin-3-O-(2-O-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranside OH β-D-Glc-(1→2)-D-Glc

50

Quercetin-3-O-(2-O-glucopyranosyl)-β-D-glucopyranside OH β-D-Glc-(1→2)-D-Gal 51 Quercetin-3-O-sambubioside OH β-D-Xyl-(1→2)-D-Glc

52 Quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-ferloyl)-β-

galactopyranoside

D-glucopyranosyl]-β-D-OH

6’-O-E-feruloyl- (1→2)-D-Gal

β-D-Glc-53 D-glucopyranosyl]-β-D- glucopyranside OH

Quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-6’-O-E-feruloyl- (1→2)-D-Glc

β-D-Glc-54 D-glucopyranosyl]-β-D- glucopyranside OH

Quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-sinapoyl)-β-6’-O-E-sinapoyl-

β-D-Glc-(1→2)-D-Glc

59 glucopyranosyl)-β-D- galactopyranoside H β-D-Glc-(1→2)-D-Gal

Kaempferol-3-O-(2-O-β-D-60

Kaempferol-3-O-(6-O-α-L-rhamnosyl)-β-D- glucopyranside H α-L-Rha-(1→6)- β -D-Glc

61 D-glucopyranosyl]-β-D- glucopyranside H

Kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-E-ferloyl)-β-6’-O-E-feruloyl- (1→2)-D-Glc

β-D-Glc-62 Kaempferol-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-

β-D-glucopyranosyl]-β-D- galactopyranoside

Bảng 1.4 Anthraquinones trong Hedyotis diffusa