Bài Thu Hoạch Ứng Dụng Các Kỹ Thuật Sắc Ký Để Phân Tích Độc Chất Có Trong “Thuốc Lắc.pdf

Chir viét tac 3,4-methylenedioxy-N- methamphetamine 3,4-methylenedioxy-N- methamphetamine-d5 High Performance Liquid Chromatography Gas Chromatography Mass Spectrometry Multiple Reaction

TRUONG DAI HOC Y DUOC CAN THO

LIEN BO MON HOA PHAN TICH

- KIEM NGHIEM - DOC CHAT

BAI THU HOACH UNG DUNG CAC KY THUAT SAC KY DE PHAN TICH DOC CHAT CO TRONG “THUOC LAC”

GVHD: PGS.TS Dé Chau Minh Vinh Tho Lớp: Dược 35 - Nhóm 11

Năm 2022

Chir viét tac

3,4-methylenedioxy-N- methamphetamine 3,4-methylenedioxy-N- methamphetamine-d5 High Performance Liquid Chromatography Gas Chromatography Mass Spectrometry Multiple Reaction Monitoring Time of Fligh

Gas Chromatography/Mass Spectroscopy

High Performance Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry

Nghia tiéng Viét Tên gọi chung của các chất

kích thích có cấu trúc hóa học

dạng Amphetamine Thuốc lắc hay Ecstacy

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu nang cao

Hệ thống sắc ký khí

Phương pháp khối phổ Phương pháp giám sát nhiều phản ứng

Kỹ thuật phân tích thời gian bay

Phương pháp sắc ký khí ghép

khối phố

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao ghép 2 lần khối phổ

1.2 Tính chất lý hóa 1.3 Thành phần hoá học

1.4 Điều chế/ tông hợp Độc tính, cơ chế gây độc và xử trí ngộ độc

2.1 Độc tính

2.2 Cơ chế gây độc

2.3 Xử trí ngộ độc Phân tích, so sánh các phương pháp định tính, định lượng chất MDMA có trong Thuốc Lắc, mẫu dịch sinh học bằng các kỹ thuật miễn dịch và sắc ky hiện đại (sắc ký lỏng, sắc ký khí)

3.1 Phương pháp miễn dịch 3.2 Phương pháp sắc ký lỏng

- Phuong phap sac ky long hiéu nang cao (HPLC)

- Phuong phap sac ky long hiéu nang cao ghép 2 lần khối phố (HPLC- MS/MS)

3.3 Phương pháp sắc ký khí

- _ Phương pháp sắc ký khí ghép khối phô (GC/MS) 3.4 Phân tích, so sánh, bản luận

BAI THU HOACH THUC TAP DOC CHAT CHU DE 9: UNG DUNG CAC KY THUAT SAC KY DE PHAN TICH DOC CHAT CO TRONG “THUOC LAC”

GVHD: PGS.7S Đỗ Châu Minh Vinh Tho Danh sách thành viên Dược K35 — Nhóm 11

STT Họ và Tên MSSV

01 Trần Thống 2133030004 02_ Huỳnh Phương Thuỳ 2133030005

03 Đồ Cao 2133030006

04 Võ Thị Thuý Oanh 2133030017

05 Võ Văn Qui 2133030018

06 Nguyễn Khắc Quy 2133030019 Ø7 Lé Thi Cam Tién 2133030020

08 Huynh Nhu Y 2133030028

LOI NOI DAU Trong những thập ký gần đây, việc sử dụng trái phép 3,4-methylenedioxy-N- methamphetamine và các loại thuốc kích thích tâm thần khác đã tăng lên đáng kê ở nhiều quốc gia 3,4-methylenedioxy-N-methamphetamine là một trong những chất kích thích dạng amphetamine Đây là loại thuốc có đặc tính kích thích hoặc gây ảo giác khi bị lạm dụng

Trong số các chất kích thích loại Amphetamine, MDMA được biết đến là một chất kích thích mạnh mẽ của hệ thong than kinh trung ương MDMA đã được chứng minh là làm giảm biêu hiện kiêu hình của 5-HT trong toàn bộ não người trưởng thành Một số bằng chứng chỉ ra sự mắt kiêu hình đối với nhiễm độc thần kinh serotonin do MDMA gây ra ở người lớn

Đề chân đoán và điều trị cho người nghiện ma túy, đánh giá nồng độ MDMA trong máu là một bước không thê thiếu Phương pháp sắc ký khí ghép khối phố (GC/MS) đã được sử dụng để phân tích loại thuốc này trong nhiều năm, nhưng đôi khi nó gặp khó khăn khi áp dụng do tính không bền nhiệt và phải tạo dẫn xuất đễ bay hơi hơn Gần đây, phương pháp sắc ký lỏng song song hiệu năng cao đã được ưu tiên lựa chọn để xác định MDMA và các chất kích thích khác, nhưng các phương pháp này chỉ được sử dụng đề phân tích các sản phẩm thuốc, mẫu nước tiêu

Phương pháp HPLC ghép nối khối phổ sử dụng kỹ thuật phân tích thời gian bay (TOE) của ion cũng được xác nhận để phân tích MDMA trong các mẫu máu Nhưng các thông số của phương pháp này chỉ được đánh giá băng cách sử dụng mẫu máu trắng đồng thời chưa được áp dụng trên phân tích mẫu thực Mục đích của nghiên cứu nhằm thâm định một phương pháp có độ nhạy cao đề xác định MDMA trong mẫu máu bằng HPLC-MS/MS từ đó áp dụng phân tích MDMA trong mẫn thực Bằng cách sử dụng đồng phân chứa năm đồng vị deuterium so với chất chuẩn (MDMA-d5) việc sử dụng

2 lần khối phô với chế độ MRM Phương pháp này hứa hẹn tính đặc hiệu và độ nhạy cao trong phân tích Ngoài ra, băng cách sử dụng mẫu máu thực trong xác định giá trị

thông số đặc trưng, hứa hẹn phương pháp phân tích đạt được với độ tin cậy cao và có

thé duoc ap dung cho chân đoán, điều trị hoặc nghiên cứu độc tính thuốc

NOI DUNG

1 Nguồn gốc, tính chất hóa lý

1.1 Nguồn gốc:

Thuốc lắc hay ecstasy, tên khoa học là MethyleneDioxyl-

MethamphetAmine (viết tắt: MDMA), là một dạng ma túy được chế tạo tổng hợp

lần đầu tiên từ năm 1910, và 2 năm sau thuộc quyền sở hữu của công ty dược Merek (Đức) dưới dạng chất ức chế cảm giác thèm ăn

Năm 1914 hãng thuốc Merck xin cầu chứng thuốc MDMA Lúc đó, MDMA chỉ được dùng đề bôi vào vết thương giúp cầm máu Nửa thể kỷ sau đó mới

có người thử uống thuốc lắc MDMA, lúc đầu để gây cảm giác chán ăn

Trong thập niên 1950 quân đội Hoa Kỳ thí nghiệm liều độ gây tử của loạt

thuốc tương tự như MDMA (ký hiệu EA-1475) Cho đến năm 1969 mới có tiết lộ

vẻ những thí nghiệm này Cùng năm, bác sĩ Alexander Shulgin đề nghị dùng thuốc

MDMA cho một vài căn bệnh tâm thần Nhờ khả năng gây sảng khoái, thuốc MDMA dan dan tro nên thông dụng ở Hoa Kỳ cho đến thập niên 1985 thì bị cam

Từ đó, dân chơi thuốc có thể mua lậu tại các câu lạc bộ tại Dallas, các hộp đêm đồng tính luyến ái và cho tới nay, thuốc MDMA tắt phô biến tại các sàn nhảy loại nhạc rave Trong thập niên 1990, phong trào chơi thuốc lắc MDMA xâm nhập vào các trường đại học và trung học Thuốc lắc là một trong các loại thuốc cắm ma túy phố biến nhất, cùng hạng với cocaine, heroin va can sa

Ecstasy là loại ma túy ăn chơi phô biến đầu tiên ở Mỹ, sau đó là Châu Âu

và ngày càng lan rộng ra những nơi khác trên thế giới MDMA được chế tạo tại

những địa điểm bí mật dưới dạng bột hay viên nén có nhiều màu sắc và hình ảnh

khác nhau

Những tên hiệu khác của MDMA là viên lắc, thuốc điên, viên chúa, viên

hoàng hậu, max, ecstasy, mecsydes, kẹo v.v

1.2 Tính chất lý hóa:

Về mặt hóa học, chúng thuộc nhóm Phenylalkylamine và có thể được coi là dẫn xuất của Amphetamine Dạng bazo, một số chất có thê lỏng sánh, không màu, một số

chất khác ở dạng bột kết tinh màu trắng, không hòa tan trong nước, chỉ hòa tan trong các dung môi hữu cơ như ethanol, diethyl ether và chloroform

- _ Khối lượng phân tử: 193,25 ø/mol

- Diém soi: 105°C

- _ Màu sắc: có nhiều màu sắc khác nhau

Trong thực tế chúng được dùng dưới dạng muối, chủ yếu là muối clohydrat Ở

dạng muối, tất cả các chất ATS đều là những chất kết tỉnh không màu hoặc bột kết

tinh màu trắng, hòa tan trong nước và rượu ethanol, hòa tan ít trong chloroform và không hòa tan trong điethyl ether Các viên có màu sắc khác nhau được gặp trên thị

trường là do các cơ sở sản xuất pha thêm phẩm màu đề tạo đặc điểm thương hiệu và

nhằm đánh lạc hướng các cơ quan thi hành pháp luật

liệu từ ephedrin tong hop thi san pham cua ching 1a d,l- methamphetamine c6 hoat tính kém hơn Ở châu Âu, người ta tông hợp MA từ phenylaxeton (benylmethylketon) 3,4-Methylendioxy-N-ethylamphetamine (MDEA) là chất tông hợp dòng Amphetamine

Thần kinh trung ương :

+Lo lắng, tính khí dễ thay đổi, hung hãn, ảo thị, ảo giác xúc giác, loạn thần kiêu tâm thần phân liệt dạng paranoid

+ Co giật, xuât huyết nội sọ, nhôi máu não, dau dau, hung cảm, chán ăn, vận

động kiêu múa vờn

Than kinh giao cảm: Vã mô hôi, thở nhanh, đồng tử giãn, run, buồn nôn

Các cơ quan khác : Tiêu cơ vân, cứng cơ, tôn thương phôi câp, viêm ruột kết thiêu máu, suy thận, RL đông máu

Tử vong :Thường do tăng thân nhiệt, loạn nhịp, xuất huyết noi so

Thay dỗi tính tình Vã mồ hôi Suy thận cấp

Tăng huyết áp Hồi hộp đánh trồng ngực Giảm huyết áp

Đau ngực DIC, tử vong

-_ Bệnh lý cơ tim: do cơn ngộ độc cấp và mạn

- Tang ap lực động mạch phôi: Khi dùng từ 3 tuần trở lên

- Van tim: Hé van DM chu, van hai lá

- Nao: Cac gốc tự do gây tôn thương vĩnh viên với neuron hệ serotonin và dopamin Thay doi chire nang transporter cua dopamin và serotonin, cạn kiệt các chât này ở synape

2.2 Cơ chế gây độc

Các loại amphetamine mới (MDMA, MDEA MNDA, và DOM) gây ra sự

phóng thích catecholamine (dopamine va norepinephrine) va serotonin Serotonin là chất vận chuyên thần kinh được chứng tỏ như là yếu tô chủ yếu liên quan đến tác động gây ảo giác Khi vào tế bào thần kinh, MDMA gây ra một sự phóng thích nhanh serotonin va ức chê sản xuât ra các enzyme phân hủy serotonin

Xung kin

2.3 Xử trí ngộ doc

Điều trị triệu chứng ngộ độc cấp tính và phụ thuộc

Điều trị ngộ độc cấp tính MDMA và phụ thuộc cũng tương tự như điều trị

amphetamines, mặc dù điều trị quá liều cấp tính ít cần thiết hơn

Nguyên tắc điều trị: Hồi sức là điều trị cơ bản Không có thuốc giải độc đặc hiệu Điều trị cụ thể:

Cấp cứu và các biện pháp hồi sức:

+ Khai thông đường thở và thông khí nhân tạo nếu cần

+ Điều trị kích thích, co giật, hôn mê và tăng thân nhiệt Benzodiazepin có hiệu quả tốt trong điều trị chống co giật, ngoài ra các butyrophenon (Haloperidol và Droperidol) cũng được dung

+ Tiếp tục theo dõi thân nhiệt, điện tim và các dâu hiệu sinh tồn khác trong ít nhất là

6 giờ

+ Điều trị tăng huyết áp: tốt nhất được điều trị bằng thuốc an thần, nêu không hiệu quả dùng thuốc giãn giãn mạch ngoại vi như phentolamin vả nitroprusside + Cơn nhịp nhanh bằng propranolol hoặc esmolol

- Thuốc giải độc đặc hiệu: không có

- _ Tăng đảo thải: lọc máu ngắt quãng và lọc máu qua cột than hoạt không hiệu quả

-_ Axit hóa nước tiểu làm tăng đảo thải dextroamphetamin nhưng không được khuyến cáo vì nguy cơ làm tăng ngộ độc myoglobin với thận

3 Phân tích, so sánh các phương pháp định tính, định lượng chất MDMA

có trong Thuốc Lắc, mẫu dịch sinh học bằng các kỹ thuật miễn dịch và sắc ký hiện đại (sắc ký lỏng, sắc ký khí) Phương pháp miễn dịch

a) Xét nghiệm kiếm tra hệ miễn dịch là gì?

Khi cơ thể người xuất hiện kháng nguyên hay một tác nhân gây bệnh nào đó,

hệ miễn dịch sẽ nhanh chóng nhận biết và tạo ra kháng thể tương ứng Điều nảy sẽ giúp cơ thể chống lại cũng như tiêu diệt được những kháng nguyên ấy đề bảo vệ sức khoẻ

Xét nghiệm kiểm tra hệ miễn dịch là những loại xét nghiệm được thực hiện với mục đích phát hiện ra sự phản ứng của kháng nguyên và kháng thể Từ đó, chân đoán ra được nhiều căn bệnh để có phương pháp điều trị phù hợp Các xét nghiệm này có thê được tiên hành phân tích thông qua mẫu máu, phân hoặc nước tiểu,

và đặc biệt tầm soát được ung thư hệ tiêu hoá

b) Xét nghiệm kiểm tra chất kích thích Nếu như chúng ta sử dụng các loại chất kích thích như ma tuý, thuốc lắc hoặc doping thì hệ thần kinh sẽ chịu những ảnh hưởng vô cùng lớn Khi thực hiện hiện xét nghiệm kiểm tra miễn dịch, bác sĩ sẽ đánh giá được tỉnh trạng hệ thần kinh có đang bị ảnh hưởng bởi bất kỳ loại chất kích thích nào hay không

c) Que thử nhanh:

Đề phát hiện ra một người nghiện thuốc lắc MDMA hay không , hãy sử dụng Que thử nhanh thuốc lắc Que thử nhanh thuốc lắc phát hiện sử dụng chất gây nghiện MDMA - Thuốc lắc (Nước tiểu hoặc Nước Bot) la dụng cụ xét nghiệm sắc ký miễn dịch định tính phát hiện sự co mat cha MDMA — Thuốc lắc trong nước tiểu/nước bọt

Kỹ thuật này chỉ cung cấp kết quả phân tích ban đầu Cần phải làm thêm các phương pháp hóa học khác , đặc hiệu hơn để khắng định kết quả (Phương pháp sắc ký khí / sắc ký khối phố GC/MS) Nén xem xét lại lâm sàng và quyết định chuyên môn đối

với bất kỳ kết quả gây nghiện, nào phát hiện chất gây nghiện , đặc biệt khi kết quả

xét nghiệm dương tính

e© Hướng dẫn sử dụng:

1 Đề Test thử thuốc lắc MDMA / ECTASY , mẫu phẩm, bộ điều chỉnh ở nhiệt

độ phòng ( 15-30 ° C ) trước khi làm xét nghiệm Lấy kít thử ra khỏi túi kín hoặc hộp đựng sản phẩm và sử dụng ngay khi có thé Dé đạt kết quả tốt nhất , toàn bộ quá trình xét nghiệm phải được hoàn thành trong vong | gio

2 Cầm phần cuối kít thử chỗ in tén sản phâm Tranh lam ban , không chạm vào mang kit thir

3 Cầm kít thử theo chiều dọc, nhúng kít thử vào mẫu phẩm nước tiêu khoảng ít nhất 10-15 giây Không ngâm quá vạch tối đa ( MAX ) trên kít thử

4 Sau khi hoàn thành xét nghiệm , lấy kít thử ra khỏi mẫu phẩm và đặt nó lên I mặt phăng không thấm nước Bắt đầu tính thời gian và chờ vạch màu xuất hiện Đọc kết quả trong vòng 5 phút Không sử dụng kết quả quá 10 phút

e© Diễn giải:

Kết quả trên Test thử thuốc lắc MDMA /ECTASY

- DUONG TINH: Chỉ có một vạch màu xuất hiện ở vùng chứng (C) Không có vạch nào xuất hiện ở vùng kết quả (T) Kết quả đương tính chỉ ra rằng nồng độ chất gây nghiện vượt quá mức có thê phát hiện

- AMTINH : Có 2 vạch màu xuất hiện Một vạch ở vùng chứng (C) và vạch kia ở vùng kết quả (T) Kết quả âm tính chỉ ra rằng nồng độ thuốc dưới mức có

thê phát hiện

KẾT QUÁ KHÔNG CÓ GIÁ TRỊ : Không xuất hiện vạch chứng (C) Nên loại

bỏ những kết quả không xuất hiện vạch này

d) Phương pháp ELISA Nguyên tắc: Phương pháp ELISA có rất nhiều dạng mà đặc điểm chung là đều dựa trên sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thê, trong đó kháng thê được găn với một enzyme Khi cho thêm cơ chất thích hợp (thường là nitrophenol phosphate) vào phản ứng, enzyme sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu Sự xuất hiện màu chứng tỏ đã xảy ra phản ứng đặc hiệu giữa kháng thể với kháng nguyên

và thông qua cường độ màu mà biết được nồng độ kháng nguyên hay kháng thê cần