Chủ Đề 8 Ứng Dụng Các Kỹ Thuật Sắc Ký Để Phân Tích Chất Độc Có Trong “Muối Tắm” Và “Nước Biển Ghb”.Pdf

Mặc đù nó được phát triển như một chất kích thích hệ thần kinh trung ương vào những năm 1968, việc sử dụng nó đê giải trí, đã trở nên phố biến trong 4-5 năm gần đây, và nhiều trường hợp

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẢN THƠ

KHOA DƯỢC LBM HOA PHAN TICH — KIEM NGHIỆM - ĐỘC CHAT

Bài báo cáo thực tập

MÔN: ĐỘC CHÁT CHỦ DE 8: UNG DUNG CAC KY THUAT SAC KY

DE PHAN TICH CHAT DOC CO TRONG

“MUOI TAM” VA “NUOC BIEN/GHB”

DANH SACH NHOM

MUC LUC

DANH MUC VIET TAT

DANH MUC BANG

DANH MUC HINH

2 DOC TINH, CO CHE GAY ĐỘC VÀ XU LY NGO ĐỘC 6

2.1 Flakka tromg mui tam .ccccccccceccsscssssssssesssesssssseessessecsutessecsesseesseeseesess 6 2.2 GHB trong nue DiGn .cccccssesseessessssssesseessesussessseeseessscssessecssseesseeseeees 7

3 PHAN TICH SO SANH CAC PHUONG PHAP DINH TINH, DINH LUONG “ FLAKKA TRONG MUOI TAM “ VA “ GHB TRONG NƯỚC BIÊN” CO TRONG MAU DICH SINH HOC ( MAU, HUYET TUONG, NUGC TIEU) BANG CAC KY

THUAT MIEN DICH VA SẮC KY HIEN DAL .sesessssssssesssssecssseseesseccsseccnnecsnseensees 8

3.1 GHB trong nước biỂn -2- 5+ ©2222222<2EE2EE22E22122112112111211211211 21 Xe 8

3.2 Flakka tromg mui tam .c ccccceccsesssssssesssesssessesssesssessesstessesstessessteeseessees 12

C TÀI LIỆU THAM KHAO

Liquid chromatography Liquid chromatography -High Resolution Mass Spectrometry Liquid chromatography—mass spectrometry

Limit of Quantitation Methylenedioxypyrovalerone N-methyl-N-tri-

methylsilyltrifluoracetamide

Nghia tiéng Viét

Hệ thần kinh trung ương

Phương pháp sắc ký khí-

khối phô Sắc kí lỏng Sắc ký lỏng khối phổ

phân giải cao Phương pháp sắc ký

lỏng-khối phố

Giới hạn định lượng

DANH MUC BANG

Trang

Bảng L: Xét nghiệm chân đoán nhanh GHB với mẫu vật nước tiểu 10

Bảng 2: Tương quan mẫu vật -2- 2-5252 2E+SE+EE+EE2E22E2EE2EE2212121121121 1 2 cr2 12

Bảng 3: Chuyên tiếp phân mảnh lớn của chất chuyền tiếp và chất chuẩn nội 14

Bảng4: Các thông số Gradient sắc ký lỏng c cò cà cóc cà các T5

z Xá?

Bảng 5: Dữ liệu xác thực thu được từ phương pháp “pha loãng và bắn” cho tất cả các chất phân tích có trong xét nghiệm . 2-22 2©22+SE+2EE+EE+EE+EE+EE22EEEEEvEErrkervee 16 Bảng 6: Dữ liệu NPS dương tính từ khoảng thời gian 14 tháng thử nghiệm 18

DANH MỤC HÌNH

Trang

Hình I: Cầu trúc phân tử của œ-PVP ¿-©+¿+2++2E++EE22EE2EESEEEEEESEE2EEErrrrrrees 3

Hình 2: Tông hợp Flakka 2-22 +¿2S++EE2+EE+EEESEESEEEEEESEEEEEEEEEEEEEEErrrkrrrrees 4

Hình 8: Sắc đồ cho thay sy phân tách của các đồng phân etylone và butylone 17 Hình 9: Kit test xét nghiệm nhanh œ-PVP (Nước tiểu) -¿ 2-©52©cx5cszsc+ 20 Hình 10: Hướng dẫn sử dụng Panel ¿22 222+2s+x+Ex+rEerxerxezrrerrerxerxerxee 21

A MO DAU

e Thuc trang sir dung :

Muối tắm Alpha-pyrrolidinovalerophenone (a-PVP) là một chất kích thích tông hợp bất hợp pháp có tên gọi đường phô là "flaka" Mặc đù nó được phát triển như một chất

kích thích hệ thần kinh trung ương vào những năm 1968, việc sử dụng nó đê giải trí,

đã trở nên phố biến trong 4-5 năm gần đây, và nhiều trường hợp ngộ độc và tử vong

đã được báo cáo do chất này Chúng có thê được mua trực tuyến hoặc từ các cửa hàng bán lẻ và thường được bán dưới dạng "muối tắm”

GHB/ nước biển

Gamma-hydroxybutyrate (GHB) là một chất ức chế hệ thần kinh trung ương chủ yếu được sử dụng như một loại thuốc bị lạm dụng để giải trí, nhưng cũng dùng

đề điều trị chứng ngủ rũ với cataplexy ở bệnh nhân người lớn và như một chất bồ trợ

để kiểm soát hội chứng cai rượu

e_ Đặt vẫn đề

«Vì sao lại chọn nghiên cứu về chất độc trong Muối tắm va GHB/ nước biến”

Hiện nay “Muối tắm” , “Nước biển” đã trở nên phố biến hơn ở một bộ phận giới

trẻ Việt Nam, là hiểm họa ma tuý nguy hiêm ấn nắp với những tên gọi tưởng chừng

Vì vậy việc lựa chọn chủ đề nhằm cung cấp chúng ta một cái nhìn khái quát về nguồn

gốc, tính chat lý hoá, thành phần hoá học, những biểu hiện độc tính , cơ chế gây độc

,cách xử lí khi ngộ độc và cách sử dụng một số kỹ thuật miễn dịch và sắc ký hiện đại

để định tính, định lượng “Flaka trong muối tắm” và “ GHB trong nước biển” có trong mẫu dịch sinh học

e Giải pháp để kiểm soát việc sử dụng “ Muối tắm” và “ GHB/ Nước biên”

+ Tuyên truyền vẻ hậu quả tác hại của ma tuý, tránh xa các chất gây nghiện

+ Có biện pháp chế tài nghiêm khắc đối với người buôn bán chất gây nghiện

+ Quản lí và bắt buộc cai nghiện đôi đôi với người đã sử dụng và nghiện

Một loại ma túy tống hợp được biết đến trên đường phố là “Flakka” (œ- pyrrolidinovalerophenone, ơœ-PVP) đã trở nên phổ biến ở Hoa Kỳ Nó tương tự về mặt hóa học với MDPV, còn được gọi là muối tắm, là nguyên nhân gây ra sự gia tăng các trường hợp say va kích động ky lạ ở Hoa Ky vai nam trước day

Công thức phân tử là C15H21NO (C15H22NOCI trong trường hợp là muối clohydrid của nó)

O

Hinh 1: Cau trúc phân tử của a-PVP

Tổng hop Quá trình tông hợp œ-PVP trong phòng thí nghiệm theo 3 bước

+ Bước I, I-phenyl1-pentanone được tạo thành từ phản ứng của valeronitril với phenylmagnesium bromide, với một phản ứng tạo axit tiếp theo

+ Bước 2, brom hóa để tạo ra œ-bromo xeton tương ứng Chất này phản ứng

với pyrrolidine để tạo ra ơ-PVP (hiệu suất 51%)

+ Bước 3, được chuyển thành muối hydrochloride

Truong hop tong hop GHB dau tiên có từ năm 1874 và được báo cáo bởi A

Zaytseff Nghiên cứu tiên phong về ảnh hưởng của GHB ở người do Tiến sĩ Laborit

dẫn đầu vào đầu những năm sáu mươi Vào năm 1964, GHB đã được sử dụng như

một chất gây mê, nhưng chưa phát huy tác dụng triệt để vì có rất nhiều tác dụng phụ

Từ những năm 1970 đến 1980, nhiều trường hợp lạm dụng GHB đã được báo cáo trong số những người xây dựng cơ thê vì nó được cho là có khả năng làm tăng hormone tăng trưởng Trong suốt những năm 1980 và 1990, nó nối tiếng như một

chất kích thích hoạt động tình dục, đặc biệt là đối với những người thường xuyên đi

hộp đêm Từ những năm 1990, GHB đã được chú ý nhiều hơn vì nhiều trường hợp

ngộ độc cấp tính Năm 2000, Cơ quan Thực thi Ma túy Hoa Kỳ (DEA) đã dua GHB vào Bảng I của các loại ma túy do khả năng lạm dụng và phụ thuộc về thể chất và tâm lý Năm 2003, nó được liệt vào danh sách thuốc loại C trong Đạo luật lạm dụng thuốc của Vương quốc Anh Là một loại thuốc bị lạm dụng, GHB năm trong tầm kiêm soát ở tất cả các nước thành viên EU Tuy nhiên, nó cũng được ứng dụng trong điều trị chứng ngủ rũ và ít thường xuyên hơn như một chất bỗ trợ trong việc kiểm soát các hội chứng cai rượu và nghiện rượu

> Tính chất lý hóa

Gamma-hydroxybutyrate (GHB) là tiền chất nội sinh của axit gamma- aminobutyric (GABA) va chat gay suy nhugc hé thần kinh trung ương (CNS) đã trở nén khét tién g vi bi lam dụng như một loại thuốc tiêu khiển dưới dạng chất lỏng không màu, không mùi hoặc màu trắng bột, viên nén và viên nang đưới một số tên (“Georgia Home Boy”, “Juice”, “Liquid Ecstasy”, “MIIs”, “G”, “Liquid X”, “Liquid G” vả

Tổng hợp Con đường chính của sự tông hợp GHB là thông qua chất dẫn truyền than kinh GABA; do đó, quá trình sinh tông hợp của nó sẽ là quá trình mà nó được thê hiện trong hình 4, trong đó GABA-T sẽ là enzym GABA transaminase; SSA-DH sẽ

là enzyme succinic semialdehyde dehydrogenase; SSA sé 14 succinic semialdehyde;

va SSA-R (hoac SSR) sé la enzyme succinic semialdehyde reductase

Hình 4: Quá trình sinh tong hop acid GHB

2 DOC TINH, CO CHE GAY DOC VA XU LY NGO DOC

2.1 Flakka trong muối tắm

> Độc tính Flakka là một chất thuộc nhóm cathinone được phát triển như một chất kích thích hệ thần kinh trung ương, là một chất gây nghiện tác dụng nhanh, sau khi sử dụng làm nhịp tim nhanh, kích động, tăng huyết áp, ảo giác, mắt ý thức, khó thở, hẹp

và tử vong có thé xay ra dac biét hanh vi thiếu hụt nhận thức, các triệu chứng mê sảng kèm theo hành vi bạo lực dẫn đến tự sát hoặc giết nguoi

> Cơ chế gây độc:

Tác dụng dược lý mạnh của Flakka chủ yếu qua trung gian ức chế tái hấp thu dopamine gây ảo giác đáng sợ, rối loạn tâm thần hoang tưởng kích động cực độ và nhiều trạng thái tâm thần khác nhau

> Xử trí ngộ độc:

+ Cấp cứu: Không có phương pháp đặc biệt điều trị ngộ độc Flakka, các biện

pháp điều trị chỉ tập trung vào việc kiêm soát đôi với rôi loạn hành vi và kích động

+ Giải độc: Thuốc Benzodiazepine hoặc thuốc chống loạn thần đường như là lựa chọn đầu tiên Lưu ý Bệnh nhân có dấu hiệu của hội chứng mê sảng phần khích chống chỉ dinh dung Benzodiazepine trong trường hợp này, hành vi bạo lực đột ngột,

ảo giác và tử vong sau khi bị kiềm chế liên tục sau khi sử dụng Flakka

+ Hỗ trợ điều trị: Các nghiên cứu gần đây cho thấy việc tiêm phòng có thể làm giảm tác dụng của Flakka

2.2 GHB trong nước biển

> Doc tinh:

GHB cé6 anh huéng tiêu cực đáng kể đến trí nhớ và nhận thức, tuỳ liều lượng

mà gây nên triệu chứng khác nhau như an thần sau đó hôn mê, yếu cơ, chậm nhịp

tim, ức chế hô hấp, giảm ý thức, buôn nôn, nôn mửa và vấn đề liên quan đến hô hấp, mắt trí nhớ ngắn hạn vv ngoài ra, không tự nguyện cử động, co giật lú lẫn, kích động

và hung hăng, gây ảo giác Nghiêm trọng có thể hôn mê và tử vong

+ Hỗ trợ diều trị: Sử dụng các loại thuốc cụ thể ức chế Enzym GABA-T để điều trị cho bệnh nhân này vì thuốc có tác dụng là giảm nồng độ GHB trong não Baclofen cũng là một chất chủ vận GABA-B, có thể hỗ trợ trong quá trình cai nghiện

3 PHÂN TÍCH SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG “ FLAKKA TRONG MUOI TAM “ VÀ “ GHB TRONG NƯỚC

BIEN” CÓ TRONG MẪU DỊCH SINH HỌC ( MAU, HUYET TƯƠNG,

NƯỚC TIỂU) BẰNG CÁC KỸ THUẬT MIỄN DỊCH VÀ SẮC KÝ HIỆN ĐẠI 3.1 GHB trong nước biển

3.1.1.Kỹ thuật xét nghiệm sắc ký hiện đại

Giới thiệu phương pháp Axit gamma-hydroxybutyric (GHB) là một loại thuốc an thần được sử dụng trong các tội phạm ma túy Cửa số phát hiện của nó rất ngăn GHB trải qua quá trình chuyền hóa giai đoạn I chuyén sâu thanh cac axit htru co: axit glycolic, axit succinic, axit dihydroxybutyric

Phương pháp sắc ký khí-khối phố (GS/MC) sử dụng chiết lỏng-lỏng và tao

dẫn xuất với N-metyl-N-tri-metylsilyltrifluoracetamit đã được phát triên cho phép phát hiện và định lượng mức độ nội sinh của các chất chuyên hóa này trong các mẫu sinh học (máu và nước tiểu)

Mẫu nước tiểu:

Đề tránh ô nhiễm vi khuẩn trong mẫu nước tiểu, thêm vào hai đến ba giọt cloroform, mẫu được bảo quản ở -20°C cho đến khi sử dụng (Tốt nhất là trong 4 giờ đầu sau khi sử dụng GHB)

Tiến hành

Nước tiểu (1 mL) được thêm vào 40 L của GHB-d6 nội chuẩn (500 nợ / mL)

Một lượng 100 HL axit clohydric 6M đã được thêm vào đề điều chỉnh độ pH đến 1—

2 Cuối cùng, các chất phân tích được chiết bằng cách sử dụng 5 mL etyl axetat Hỗn

hợp được lắc kỹ trong 1 phút và ly tâm ở tốc độ 3000 vòng / phút trong 3 phút Phần nỗi phía trên được cân thận chuyên sang một ống nghiệm thủy tính khác Sau đó, 100

uL HCI (0,1 mol / L trong 2-propanol) được thêm vào, và phan nổi phía trên được làm khô dưới dòng nitơ nhẹ ở nhiệt độ phòng Cặn khô được tạo dẫn xuất và trimetylsilyl hóa bằng cách sử dụng 500 pL MSTEA ở 60 ® C trong 60 phút Hỗn hợp phản ứng được chuyền vào lọ lấy mẫu tự động và 2 wL được tiêm vào hệ thống GC

—MS

Điều kiện máy sắc ký khối phố GC/MS

GC/MS được thực hiện bằng cách su dung MSD 5975C (Agilent Technologies, Santa Clara, USA) duoc trang bi 7890A GC (Agilent) va bd lay mau tu động 7683B (Agilent)

Cột mao quản được sử dụng là TG-5SILMS (30 m x 0,25 mm 1.d., độ dày màng 0,25 yum) (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)

GC duoc vận hành ở chế độ phân chia (tỷ lệ phân chia 1/20), và nhiệt độ của

kim phun và đầu báo được đặt lần lượt ở 280 ° C và 230 ° C

Chương trình nhiệt độ được sử dụng như sau: tăng 10 ° C / phút từ 80 ° C đến

300 ° C, với nhiệt độ ban đầu được duy trì trong 2 phút và nhiệt độ cudi cung duoc duy trì trong 3 phút

Heli có độ tinh khiết cao được sử dụng làm khí mang ở tốc độ dòng chảy 0,9

mL / phút

Các hợp chất bị ion hóa bởi tác động của điện tử 70 eV Detector chọn lọc khối lượng được sử dụng ở chế độ giam sat ion đã chon dé phân tích định lượng Các ion sau được theo dõi (sử dụng thời gian dừng là 20 ms)

Kết quả: Phương pháp này được thiết kế đặc biệt để đánh giá định lượng GHB và

các axit hữu cơ nội sinh trong quá trình chuyên hóa GHB giai đoạn I trong các mẫu

huyết thanh và nước tiểu

Các nong độ chất nội sinh axit glycolic, GHB, axit succinic, axit 2,4- dihydroxybutyric, axit 3,4-dihydroxybutyrie là cơ sở kết luận có sử dụng GHB hay không

3.1.2.Kỹ thuật xét nghiệm miễn dịch

Hình 5: Bộ xét nghiệm lạm dụng thuốc có độ nhạy cao GHB

Thư nghiệm nhanh dải 3 mm Bang 1: Xét nghiệm chân đoán nhanh GHB với mẫu vật nước tiểu

Bộ dụng cụ

Thể loại TESGTING lạm Định dạng STRIP 4 GHB

dụng ma túy Mẫu vật Nước tiêu Thời gian thử nghiệm | 5 - 15 phút

Thời hạn sử dụng | 24 tháng Ứng dụng Xét nghiệm

GHB

Diem noi bat

Self testing drug

kits, drug test

11

Mô tả

Axit-Hydroxybutyric (GHB), còn được gọi là axit 4-hydroxybutanoIc, là một chất dẫn truyền thần kinh tự nhiên và một loại thuốc thần kinh Nó đã được sử dụng trong môi trường y tế như một loại thuốc gây mê nói chung và như là một phương pháp điều trị bệnh cataplexy, chứng ngủ rũ và nghiện rượu Nó cũng được sử dụng bất hợp pháp như một chất gây say, để cô gắng tăng hiệu suất thể thao, và như một loại thuốc hiếp đâm ngày Nó thường được sử dụng dưới dạng muối, chăng hạn như natri-hydroxybutyrate (Na.GHB, natri oxybate) hoặc kali-hydroxybutyrate (K.GHB, kali oxybate) Nước tiêu thường là mẫu vật thường dùng cho mục đích theo dõi lạm dụng thuốc Cả-butyrolactone (GBL) và 1,4-butanediol đều được chuyên đổi thành GHB trong co thé

Nguyén tac kiém tra GHB-DH (gammahydroxybutyrate dehydrogenase) xuc tac phan ng cua GHB

và NAD+ đề tạo ra NADH, và một phản ứng nhuộm tetrazoliym cặp diaphorase dẫn đến việc tạo ra phức hợp thuốc nhuộm màu tím Các thuốc thử đã được ốn định và được sử dụng đề tạo ra xét nghiệm sàng lọc GHB trong nước tiểu 6 mire 10 pg / mL Hạn chế

1 Băng thử nghiệm nhanh chỉ cung cấp kết quả phân tích sơ bộ, định tính Một phương pháp phân tích thứ cấp phải được sử dụng để có được kết quả xác nhận Phương pháp sắc ký khí / quang phố khối (GC/MS) là phương pháp xác nhận

2 Có thể có các lỗi kỹ thuật, cũng như các chất gây nhiễu khác trong mẫu nước tiêu có thể gây ra kết quả sai

3 Chất pha trộn, chăng hạn như thuốc tây hoặc phèn, trong mẫu nước tiểu có thé tạo ra kết quả sai lệch bất kế phương pháp phân tích được sử dụng Nếu nghi ngờ, xét nghiệm nên được lặp lại với một mẫu nước tiêu khác

4 Một kết quả dương tính cho thấy sự hiện diện của thuốc hoặc các chất chuyên hóa của nó nhưng không cho thấy mức độ nhiễm độc, đường dùng hoặc nồng độ trong nước tiêu