Chủ Đề 8 Ứng Dụng Các Kỹ Thuật Sắc Ký Để Phân Tích Chất Độc Có Trong “Muối Tắm” Và “Nước Biển Ghb”.Pdf

Trang 2

9_ | Lý Hồng Võn 2033030010 100%

Trang 3

MUC LUC

DANH MUC VIET TAT DANH MUC BANG DANH MUC HINH

AL MG DAU ooeecsssesessssssessssssssussssssessessesssesssssssussieseisessssnssussssssssssesstesessessessuseseeseeseees 1 B NỘI DUNG 2-â2- S22 S222222212212212121122112112112112111121121121121111 111.1 re 3 1 NGUON GểC, TÍNH CHẤT Lí HểA:: 2-::19é19::222S2+2222222EE2EE+rxerxee 3

In na na 3

12 GHB 22.222222122122122122121211211211.1 1e 4 2 DOC TINH, CO CHE GAY ĐỘC VÀ XU LY NGO ĐỘC 6

2.1 Flakka tromg mui tam .ccccccccceccsscssssssssesssesssssseessessecsutessecsesseesseeseesess 6 2.2 GHB trong nue DiGn .cccccssesseessessssssesseessesussessseeseessscssessecssseesseeseeees 7

3 PHAN TICH SO SANH CAC PHUONG PHAP DINH TINH, DINH LUONG “ FLAKKA TRONG MUOI TAM “ VA “ GHB TRONG NƯỚC BIấN” CO TRONG MAU DICH SINH HOC ( MAU, HUYET TUONG, NUGC TIEU) BANG CAC KY

THUAT MIEN DICH VA SẮC KY HIEN DAL .sesessssssssesssssecssseseesseccsseccnnecsnseensees 8

3.1 GHB trong nước biỂn -2- 5+ â2222222<2EE2EE22E22122112112111211211211 21 Xe 8

3.1.1 Kỹ thuật xột nghiệm sắc 001001115 8

3.1.2 Kỹ thuật xột nghiệm MIEN ICH ecececececececseseseseceseseceseseseceeceeeceeeceees 10

3.2 Flakka tromg mui tam .c ccccceccsesssssssesssesssessesssesssessesstessesstessessteeseessees 12

3.1.3 Kỹ thuật xột nghiệm sắc ký hiện đại -. -cS<ccSccseeece 12

3.1.4 Kỹ thuật xột nghiệm MIEN ICH cececececececsesesesesesecececesesecececececececeees 18

Trang 4

Chữ viết tat a-PVD CNS GABA GHB

GHB-DH

GC/MS

LC LC-HRMS LC-MS

LOQ MDPV

MSTFA

DANH MUC VIET TAT

Chir nguyộn

Alpha-pyrrolidinovalerophenone Central nervous system Acid gamma-aminobutyric Gamma-hydroxybutyrate Gammahydroxybutyrate- dehydrogenase

Gas Chromatography Mass Spectometry

Liquid chromatography Liquid chromatography -High Resolution Mass Spectrometry Liquid chromatography—mass spectrometry

Limit of Quantitation Methylenedioxypyrovalerone N-methyl-N-tri-

methylsilyltrifluoracetamide

Nghia tiộng Viột

Hệ thần kinh trung ương

Phương phỏp sắc ký khớ-

khối phụ Sắc kớ lỏng Sắc ký lỏng khối phổ

phõn giải cao Phương phỏp sắc ký

lỏng-khối phố

Trang 5

DANH MUC BANG

Trang

Bảng L: Xột nghiệm chõn đoỏn nhanh GHB với mẫu vật nước tiểu 10

Bảng 2: Tương quan mẫu vật -2- 2-5252 2E+SE+EE+EE2E22E2EE2EE2212121121121 1 2 cr2 12

Bảng 3: Chuyờn tiếp phõn mảnh lớn của chất chuyền tiếp và chất chuẩn nội 14

Bảng4: Cỏc thụng số Gradient sắc ký lỏng c cũ cà cúc cà cỏc T5

z Xỏ?

Bảng 5: Dữ liệu xỏc thực thu được từ phương phỏp “pha loóng và bắn” cho tất cả cỏc chất phõn tớch cú trong xột nghiệm . 2-22 2â22+SE+2EE+EE+EE+EE+EE22EEEEEvEErrkervee 16 Bảng 6: Dữ liệu NPS dương tớnh từ khoảng thời gian 14 thỏng thử nghiệm 18

DANH MỤC HèNH

Trang

Hỡnh I: Cầu trỳc phõn tử của œ-PVP ¿-â+¿+2++2E++EE22EE2EESEEEEEESEE2EEErrrrrrees 3

Hỡnh 2: Tụng hợp Flakka 2-22 +¿2S++EE2+EE+EEESEESEEEEEESEEEEEEEEEEEEEEErrrkrrrrees 4

Hỡnh 3: Thành phần húa học GHB - 22-2 â22+2+222+2+EE2EEEEEESEEEEErrkrsrrrrrrees 5

Hỡnh 4: Quỏ trỡnh sinh tống hợp acid GHEB 2-â22-552222222xcSrvvrxrsrxrrrrees 6 Hỡnh 5: Bộ xột nghiệm lạm dụng thuốc cú độ nhạy cao GHB Thứ nghiệm nhanh dải Su 0 10

Hỡnh 6: Sắc ký đồ LC-MS/MS ::19é19::2222222222212212212212211211211211211212121 xe 13 Hỡnh 7: Sắc ký đồ phủ của 10 chất phõn tớch được xỏc định trong xột nghiộm l6

Trang 6

A MO DAU e Thuc trang sir dung : Muối tắm Alpha-pyrrolidinovalerophenone (a-PVP) là một chất kớch thớch tụng hợp bất hợp phỏp cú tờn gọi đường phụ là "flaka" Mặc đự nú được phỏt triển như một chất

kớch thớch hệ thần kinh trung ương vào những năm 1968, việc sử dụng nú đờ giải trớ,

đó trở nờn phố biến trong 4-5 năm gần đõy, và nhiều trường hợp ngộ độc và tử vong đó được bỏo cỏo do chất này Chỳng cú thờ được mua trực tuyến hoặc từ cỏc cửa hàng bỏn lẻ và thường được bỏn dưới dạng "muối tắm”

GHB/ nước biển

Gamma-hydroxybutyrate (GHB) là một chất ức chế hệ thần kinh trung ương chủ yếu được sử dụng như một loại thuốc bị lạm dụng để giải trớ, nhưng cũng dựng đề điều trị chứng ngủ rũ với cataplexy ở bệnh nhõn người lớn và như một chất bồ trợ để kiểm soỏt hội chứng cai rượu

e_ Đặt vẫn đề

ôVỡ sao lại chọn nghiờn cứu về chất độc trong Muối tắm va GHB/ nước biến”

Hiện nay “Muối tắm” , “Nước biển” đó trở nờn phố biến hơn ở một bộ phận giới

trẻ Việt Nam, là hiểm họa ma tuý nguy hiờm ấn nắp với những tờn gọi tưởng chừng vụ hại

Việc sử dụng trỏi phộp những chất ma tuý này cú thờ gõy nờn hậu quả nghiờm trọng như nghiện, ngộ độc cấp tớnh, thậm chớ cú thẻ dẫn đến tử vong

Ngoài ra , sản xuất trỏi phộp những loại ma tuý này và đặt tờn chỳng trựng với những sản phẩm được bày bỏn hợp phỏp như “muối tắm”, “nước biển” dễ gõy ra những nhằm lẫn nghiờm trọng , khú khăn cho việc kiểm soỏt và phỏt hiện ra chỳng Vỡ vậy việc lựa chọn chủ đề nhằm cung cấp chỳng ta một cỏi nhỡn khỏi quỏt về nguồn

gốc, tớnh chat lý hoỏ, thành phần hoỏ học, những biểu hiện độc tớnh , cơ chế gõy độc

Trang 7

e Giải phỏp để kiểm soỏt việc sử dụng “ Muối tắm” và “ GHB/ Nước biờn”

+ Tuyờn truyền vẻ hậu quả tỏc hại của ma tuý, trỏnh xa cỏc chất gõy nghiện

+ Cú biện phỏp chế tài nghiờm khắc đối với người buụn bỏn chất gõy nghiện

Trang 8

B NOI DUNG 1 NGUON GOC, TINH CHAT LY HOA: 1.1 Muối tắm > Nguồn gốc: Muối tắm là tờn được đặt cho một nhúm ma tỳy cú chứa một hoặc nhiều húa chất tụng hợp liờn quan đến cathinone, một chất kớch thớch tương tự như amphetamine duoc tim thay trong cay Khat (Catha edulis)

Một loại ma tỳy tống hợp được biết đến trờn đường phố là “Flakka” (œ- pyrrolidinovalerophenone, ơœ-PVP) đó trở nờn phổ biến ở Hoa Kỳ Nú tương tự về mặt húa học với MDPV, cũn được gọi là muối tắm, là nguyờn nhõn gõy ra sự gia tăng cỏc trường hợp say va kớch động ky lạ ở Hoa Ky vai nam trước day > Tớnh chất lý húa: a-PVP là một loại bột kết tỉnh màu trắng hoặc trắng nhạt, khụng mựi Cú ở dạng viờn nộn, viờn con nhộng và chất lỏng > Thành phần húa học: ơœ-PVD [thường là ứ-PVP, ơ-PVP, O-2387, B xeton-prolintan, prolintanone hoặc I-phenyl-2- (pyrrolidin-1-yl) pentan-1- one] pyrovalerone vộ mat hộa hoc va được liờn kết với chất tương tự xeton cua prolintane

Cụng thức phõn tử là C15H21NO (C15H22NOCI trong trường hợp là muối clohydrid của nú)

O

Trang 9

Tổng hop

Quỏ trỡnh tụng hợp œ-PVP trong phũng thớ nghiệm theo 3 bước

+ Bước I, I-phenyl1-pentanone được tạo thành từ phản ứng của valeronitril với phenylmagnesium bromide, với một phản ứng tạo axit tiếp theo

+ Bước 2, brom húa để tạo ra œ-bromo xeton tương ứng Chất này phản ứng

với pyrrolidine để tạo ra ơ-PVP (hiệu suất 51%) + Bước 3, được chuyển thành muối hydrochloride Cr €YY N_ PhMgEr,H;SO, SZ =} Bro ar “Yr > \ Valeronitrile 1-pheayl-1-pentanone 1-phenyl-2-bromo-1-pertanone Alpha-pyrrolidinovalerophenone (alpha-PVP, Flakka) Hinh 2: Tong hop Flakka 1.2 GHB > Nguồn gốc

Truong hop tong hop GHB dau tiờn cú từ năm 1874 và được bỏo cỏo bởi A

Zaytseff Nghiờn cứu tiờn phong về ảnh hưởng của GHB ở người do Tiến sĩ Laborit

dẫn đầu vào đầu những năm sỏu mươi Vào năm 1964, GHB đó được sử dụng như

một chất gõy mờ, nhưng chưa phỏt huy tỏc dụng triệt để vỡ cú rất nhiều tỏc dụng phụ Từ những năm 1970 đến 1980, nhiều trường hợp lạm dụng GHB đó được bỏo cỏo trong số những người xõy dựng cơ thờ vỡ nú được cho là cú khả năng làm tăng hormone tăng trưởng Trong suốt những năm 1980 và 1990, nú nối tiếng như một

Trang 10

hộp đờm Từ những năm 1990, GHB đó được chỳ ý nhiều hơn vỡ nhiều trường hợp

ngộ độc cấp tớnh Năm 2000, Cơ quan Thực thi Ma tỳy Hoa Kỳ (DEA) đó dua GHB vào Bảng I của cỏc loại ma tỳy do khả năng lạm dụng và phụ thuộc về thể chất và tõm lý Năm 2003, nú được liệt vào danh sỏch thuốc loại C trong Đạo luật lạm dụng thuốc của Vương quốc Anh Là một loại thuốc bị lạm dụng, GHB năm trong tầm kiờm soỏt ở tất cả cỏc nước thành viờn EU Tuy nhiờn, nú cũng được ứng dụng trong điều trị chứng ngủ rũ và ớt thường xuyờn hơn như một chất bỗ trợ trong việc kiểm soỏt cỏc hội chứng cai rượu và nghiện rượu

> Tớnh chất lý húa

Trang 11

Tổng hợp Con đường chớnh của sự tụng hợp GHB là thụng qua chất dẫn truyền than kinh GABA; do đú, quỏ trỡnh sinh tụng hợp của nú sẽ là quỏ trỡnh mà nú được thờ hiện trong hỡnh 4, trong đú GABA-T sẽ là enzym GABA transaminase; SSA-DH sẽ là enzyme succinic semialdehyde dehydrogenase; SSA sộ 14 succinic semialdehyde; va SSA-R (hoac SSR) sộ la enzyme succinic semialdehyde reductase đềI DIỆN GABA -T ơ SSA-R SSA Iằ GHB SSA-DH I axit succinic

Hỡnh 4: Quỏ trỡnh sinh tong hop acid GHB

2 DOC TINH, CO CHE GAY DOC VA XU LY NGO DOC

2.1 Flakka trong muối tắm > Độc tớnh

Flakka là một chất thuộc nhúm cathinone được phỏt triển như một chất kớch thớch hệ thần kinh trung ương, là một chất gõy nghiện tỏc dụng nhanh, sau khi sử dụng làm nhịp tim nhanh, kớch động, tăng huyết ỏp, ảo giỏc, mắt ý thức, khú thở, hẹp và tử vong cú thộ xay ra dac biột hanh vi thiếu hụt nhận thức, cỏc triệu chứng mờ sảng kốm theo hành vi bạo lực dẫn đến tự sỏt hoặc giết nguoi

> Cơ chế gõy độc:

Tỏc dụng dược lý mạnh của Flakka chủ yếu qua trung gian ức chế tỏi hấp thu dopamine gõy ảo giỏc đỏng sợ, rối loạn tõm thần hoang tưởng kớch động cực độ và nhiều trạng thỏi tõm thần khỏc nhau

> Xử trớ ngộ độc:

+ Cấp cứu: Khụng cú phương phỏp đặc biệt điều trị ngộ độc Flakka, cỏc biện

Trang 12

+ Giải độc: Thuốc Benzodiazepine hoặc thuốc chống loạn thần đường như là lựa chọn đầu tiờn Lưu ý Bệnh nhõn cú dấu hiệu của hội chứng mờ sảng phần khớch chống chỉ dinh dung Benzodiazepine trong trường hợp này, hành vi bạo lực đột ngột, ảo giỏc và tử vong sau khi bị kiềm chế liờn tục sau khi sử dụng Flakka

+ Hỗ trợ điều trị: Cỏc nghiờn cứu gần đõy cho thấy việc tiờm phũng cú thể làm giảm tỏc dụng của Flakka

2.2 GHB trong nước biển > Doc tinh:

GHB cộ6 anh huộng tiờu cực đỏng kể đến trớ nhớ và nhận thức, tuỳ liều lượng

mà gõy nờn triệu chứng khỏc nhau như an thần sau đú hụn mờ, yếu cơ, chậm nhịp

tim, ức chế hụ hấp, giảm ý thức, buụn nụn, nụn mửa và vấn đề liờn quan đến hụ hấp, mắt trớ nhớ ngắn hạn vv ngoài ra, khụng tự nguyện cử động, co giật lỳ lẫn, kớch động và hung hăng, gõy ảo giỏc Nghiờm trọng cú thể hụn mờ và tử vong

> Cơ chế gõy độc:

GHB là chất dẫn truyền thần kinh/ điều hoà thần kinh trung ương

Việc lạm dụng GHB dẫn đến việc ngăn chặn hoạt động tự phỏt của tế bào thần

kinh GABA và do đú đề ức chế tế bào thần kinh dopamine gõy độc tớnh thần kinh khi

dựng kộo dài > Xử lý ngộ dộc:

+ Cấp cứu: khi bệnh nhõn biểu hiện cỏc triệu chứng đe đoạ tớnh mạng cần được giỏm sỏt tớch cực trong một cơ sở với một đơn vị chăm súc đặc biệt

+ Giải độc: Bệnh nhõn cú biểu hiện hội chứng cai nghiện GHB nghiờm trọng cần được điều trị tớch cực bằng thuốc an thần, thuốc ngủ (benzodiazepine liều cao, Taranar & Nelson hoặc GHB dược phẩm)

Trang 13

3 PHÂN TÍCH SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH, ĐỊNH LƯỢNG “ FLAKKA TRONG MUOI TAM “ VÀ “ GHB TRONG NƯỚC

BIEN” Cể TRONG MẪU DỊCH SINH HỌC ( MAU, HUYET TƯƠNG,

NƯỚC TIỂU) BẰNG CÁC KỸ THUẬT MIỄN DỊCH VÀ SẮC Kí HIỆN ĐẠI 3.1 GHB trong nước biển

3.1.1.Kỹ thuật xột nghiệm sắc ký hiện đại

Giới thiệu phương phỏp

Axit gamma-hydroxybutyric (GHB) là một loại thuốc an thần được sử dụng trong cỏc tội phạm ma tỳy Cửa số phỏt hiện của nú rất ngăn GHB trải qua quỏ trỡnh chuyền húa giai đoạn I chuyộn sõu thanh cac axit htru co: axit glycolic, axit succinic, axit dihydroxybutyric

Phương phỏp sắc ký khớ-khối phố (GS/MC) sử dụng chiết lỏng-lỏng và tao

dẫn xuất với N-metyl-N-tri-metylsilyltrifluoracetamit đó được phỏt triờn cho phộp phỏt hiện và định lượng mức độ nội sinh của cỏc chất chuyờn húa này trong cỏc mẫu sinh học (mỏu và nước tiểu)

Thuốc thử

Chất chuẩn nội sinh đó được pha loóng (GHB-dú6, 1,0 mg / mL trong metanol) được pha loóng với metanol dộ thu được dung dịch gốc 500 ug / mL

N-methyl-N-tri-methylsilyltrifluoracetamide (MSTFA) Axit clohydric 6M

Axit clohydric 0,1 mol / L trong 2-propanol Ethyl axetat

Mẫu nước tiểu:

Đề trỏnh ụ nhiễm vi khuẩn trong mẫu nước tiểu, thờm vào hai đến ba giọt cloroform, mẫu được bảo quản ở -20°C cho đến khi sử dụng (Tốt nhất là trong 4 giờ đầu sau khi sử dụng GHB)

Tiến hành

Nước tiểu (1 mL) được thờm vào 40 L của GHB-d6 nội chuẩn (500 nợ / mL)

Một lượng 100 HL axit clohydric 6M đó được thờm vào đề điều chỉnh độ pH đến 1—

Trang 14

hợp được lắc kỹ trong 1 phỳt và ly tõm ở tốc độ 3000 vũng / phỳt trong 3 phỳt Phần nỗi phớa trờn được cõn thận chuyờn sang một ống nghiệm thủy tớnh khỏc Sau đú, 100 uL HCI (0,1 mol / L trong 2-propanol) được thờm vào, và phan nổi phớa trờn được làm khụ dưới dũng nitơ nhẹ ở nhiệt độ phũng Cặn khụ được tạo dẫn xuất và trimetylsilyl húa bằng cỏch sử dụng 500 pL MSTEA ở 60 đ C trong 60 phỳt Hỗn hợp phản ứng được chuyền vào lọ lấy mẫu tự động và 2 wL được tiờm vào hệ thống GC —MS

Điều kiện mỏy sắc ký khối phố GC/MS

GC/MS được thực hiện bằng cỏch su dung MSD 5975C (Agilent Technologies, Santa Clara, USA) duoc trang bi 7890A GC (Agilent) va bd lay mau tu động 7683B (Agilent)

Cột mao quản được sử dụng là TG-5SILMS (30 m x 0,25 mm 1.d., độ dày màng 0,25 yum) (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)

GC duoc vận hành ở chế độ phõn chia (tỷ lệ phõn chia 1/20), và nhiệt độ của

kim phun và đầu bỏo được đặt lần lượt ở 280 ° C và 230 ° C

Chương trỡnh nhiệt độ được sử dụng như sau: tăng 10 ° C / phỳt từ 80 ° C đến 300 ° C, với nhiệt độ ban đầu được duy trỡ trong 2 phỳt và nhiệt độ cudi cung duoc duy trỡ trong 3 phỳt

Heli cú độ tinh khiết cao được sử dụng làm khớ mang ở tốc độ dũng chảy 0,9 mL / phỳt

Cỏc hợp chất bị ion húa bởi tỏc động của điện tử 70 eV Detector chọn lọc khối lượng được sử dụng ở chế độ giam sat ion đó chon dộ phõn tớch định lượng Cỏc ion sau được theo dừi (sử dụng thời gian dừng là 20 ms)