nguyễn ngọc kim ngân 21126112

Trang 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌCBÁO CÁO THỰC HÀNH PHÁT TRIỂN SẢN PHẨM SINH HỌC Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh vi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÁO CÁO THỰC HÀNH

PHÁT TRIỂN SẢN PHẨM SINH HỌC

Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Sinh viên thực hiện : NGUYỄN NGỌC KIM NGÂN

Mã số sinh viên : 21126112 Niên khóa : 2021 – 2025

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH

KHOA KHOA HỌC SINH HỌC

BÁO CÁO THỰC HÀNH

PHÁT TRIỂN SẢN PHẨM SINH HỌC

Hướng dẫn khoa học Sinh viên thực hiện

TP Thủ Đức, 03/2024

MỤC LỤC

MỤC LỤC i

DANH SÁCH CÁC HÌNH ii

MỞ ĐẦU 1

BÀI 1 QUY TRÌNH TẠO RA CHẾ PHẨM SINH HỌC NẤM TRICHODERMA 2

1.1 Tổng quan 2

1.1.1 Chế phẩm sinh học 2

1.1.2 Phân loại các chế phẩm sinh học cho cây trồng 2

1.2 Tổng quan về nấm Trichoderma sp 3

1.3 Quy trình sản xuất chế phẩm sinh học 3

1.3.1 Chuẩn bị 3

1.3.2 Phương pháp tiến hành 3

1.4 Kết quả 7

CHƯƠNG 2: QUY TRÌNH KIỂM TRA MẬT SỐ BÀO TỬ 8

2.1 Vật liệu và phương pháp 8

2.1.1 Chuẩn bị 8

2.1.2 Quy trình thực hiện 8

2.2 Kết quả 10

2.3 Kết luận 11

DANH SÁCH CÁC HÌNH

Hình 1.1 Cân tấm và trấu 4

Hình 1.2 Hỗn hợp tấm và trấu 4

Hình 1.3 Cân nito 4

Hình 1.4 Đổ nước và Nito vào hỗn hợp trấu và tấm 5

Hình 1.5 Hỗn hợp sau khi hấp 5

Hình 1.6 Bình chứa giống Trichoderma sp 6

Hình 1.7 Cho giống vào các túi môi trường 6

Hình 1.8 Các túi môi trường sau khi thêm giống Trichoderma sp 6

Hình 1.9 Nấm Trichoderma sau khi cấy 1 tuần 7

Hình 2.1 Dung dịch EM nồng độ 109 Cfu/ml 8

Hình 2.2 Dung dịch 100 được lắc đều 8

Hình 2.3 Dung dịch 100 sau khi lắc 9

Hình 2.4 Hút 1ml từ bình nồng độ 100 9

Hình 2.5 Cho dung dịch 100 vừa hút vào ống nồng độ 10-1 9

Hình 2.6 Cấy trang lên đĩa petri cho nồng độ 10-5 10-6 10-7 10

MỞ ĐẦU

Công nghệ sinh học là một lĩnh vực tạo ra các công nghệ khai thác các hoạt động sống của vi sinh vật, tế bào thực vật và tế bào động vật dựa trên nền tảng khoa học và sự sống,

có sự kết hợp các quy trình và thiết bị kỹ thuật Từ đó, sản xuất các sản phẩm sinh học

có chất lượng cao, giúp phát triển kinh tế xã hội và bảo vệ môi trường Ở Việt Nam, các chính sách, đề án, chương trình trong mọi lĩnh vực của công nghệ sinh học đã và đang được xây dựng và triển khai thực hiện Công nghệ sinh học đã góp phần tạo ra nhiều sản phẩm có giá trị đóng góp vào sự phát triển kinh tế, xã hội của đất nước

Hiện nay sự phát triển của nên nông nghiệp Việt Nam đang đi vào mức độ thâm canh cao cùng với việc sử dụng ngày càng nhiều phân bón hóa học, thuốc bảo vệ thực vật và hàng loạt các biện pháp với mục đích khai thác, chạy theo năng suất và sản lượng Chính

vì vậy với sự canh tác trên đã làm cho đất đai ngày càng thoái hóa, dinh dưỡng mất cân đối, mất cân bằng hệ sinh thái trong đất, hệ vi sinh vật trong đất bị phá hủy, tồn dư các chất độc hại trong đất dẫn đến phát sinh một số dịch hại không dự báo trước

Vì thế, xu hướng quay lại nền nông nghiệp hữu cơ với việc tăng cường sử dụng các chế phẩm sinh học, phân bón hữu cơ trong canh tác cây trồng đang là xu hướng chung của Việt Nam nói riêng và thế giới nói chung

BÀI 1 QUY TRÌNH TẠO RA CHẾ PHẨM SINH HỌC

NẤM TRICHODERMA

1.1 Tổng quan

1.1.1 Chế phẩm sinh học

Chế phẩm sinh học là sản phẩm của quá trình tái tạo và sử dụng tài nguyên sinh học Chế phẩm sinh học đối với cây trồng được sử dụng ưa chuộng vì An toàn cho sức khỏe con người, vật nuôi, cây trồng; Không gây ô nhiễm môi trường sinh thái; Cân bằng hệ sinh thái trong môi trường; Tăng độ phì nhiêu cho đất; Đồng hóa chất dinh dưỡng, góp phần tăng năng suất và chất lượng nông sản; Tiêu diệt côn trùng gây hại, giảm thiểu bệnh hại, tăng khả năng đề kháng bệnh của cây trồng mà không làm ảnh hưởng đến môi trường như các loại thuốc bảo vệ thực vật hóa học khác; Có khả năng phân hủy, chuyển hóa các chất hữu cơ bền vững, các phế thải sinh học, phế thải nông nghiệp, công nghiệp, góp phần làm sạch môi trường; Phục vụ cho nông nghiệp bền vững

Bên cạnh những vai trò có ích cho môi trường, các chế phẩm sinh học vẫn chưa được phổ biến vì có giá thành cao; chưa được tiếp xúc nhiều với nông dân; khó sử dụng hơn thuốc hóa học; Tốn thời gian ( do có hiệu quả chậm); Đúng liều, đúng hướng dẫn, đúng thời điểm

1.1.2 Phân loại các chế phẩm sinh học cho cây trồng

1.1.2.1 Nhóm chế phẩm sinh học ứng dụng cho việc phòng trừ dịch hại trên cây trồng

Là thuốc bảo vệ thực vật có nguồn gốc sinh học có thể tiêu diệt hoặc phòng trừ dịch hại Dịch hại là các sinh vật, vi sinh vật, các loài sâu hại, các loài gậm nhấm, có khả năng gây hại cho cây trồng và lương thực

1.1.2.2 Nhóm chế phẩm sinh học ứng dụng cho sản xuất phân bón hữu cơ sinh học, phân bón vi sinh

Phân vi sinh: là tập hớp một hoặc nhiều nhóm vi sinh vật (nấm, vi khuẩn, virus) được

nhân lên từ các chế phẩm vi sinh và tồn tại trong các chất không vô trùng Đây là loại phân có chứa hàm lượng vi sinh vật có ích cao, nguồn dinh dưỡng hữu cơ, vô cơ và vi lượng trong phân thấp

Phân hữu cơ sinh học: là sản phẩm phân bón được tạo thành thông qua quá trình lên

men vi sinh vật các hợp chất hữu cơ có nguồn gốc khác nhau, có sự tác động của vi sinh vật hoặc các hoạt chất sinh học được chuyển hóa thành mùn

Phân hữu cơ vi sinh: là loại phân được sản xuất từ nguyên liệu hữu cơ có chứa hàm

lượng hữu cơ và ít nhất một chủng vi sinh vật sống có ích phù hợp với quy định của tiêu chuẩn hoặc quy chuẩn kỹ thuật quốc gia hoặc các văn bản quy định tương đương ban hành

1.1.2.3 Nhóm chế phẩm sinh học dùng cho cải tạo đất, xử lý phế thải nông nghiệp

Là loại chế phẩm có nguồn gốc sinh học được đưa vào đất để cải tạo lý hóa tính của đất hoặc giải phóng đất dưới các yếu tố bất lợi khác làm cho đất trở nên tốt hơn có thể sử dụng làm đất canh tác cây trồng

1.1.2.4 Nhóm điều hòa sinh trưởng cho cây trồng

Nhóm các chất kích thích sinh trưởng: là các chất có tác dụng kích thích sự sinh trưởng – phát triển của cây

Nhóm các chất ức chế sinh trưởng: là các chất có tác dụng kìm hãm, ức chế sinh trưởng – phát triển của cây

1.2 Tổng quan về nấm Trichoderma sp

Trichoderma sp là một loại nấm đối kháng có khả năng kiểm soát tất cả các loại nấm

gây bệnh khác

Cơ chế hoạt động

- Quá trình xâm nhập nấm bệnh khác: Trichoderma tiết ra một loại enzyme có khả năng làm tan vách tế bào của các loại nấm khác

- Quá trình tấn công: Bào tử nấm Trichoderma tấn công vào bên trong loài nấm gây hại

và biến chúng thành thức ăn cho chính nó phát triển đồng thời tạo nên những nguồn hữu

cơ có lợi giúp bộ rễ của cây có thể hấp thu tức thời

- Hiệu quả: tiêu diệt các loại nấm gây thối rễ, đồng thời giúp tái tạo, phục hồi lại các rễ

bị tổn thương do tuyến trùng hoặc rệp sáp gây ra

1.3 Quy trình sản xuất chế phẩm sinh học

1.3.1 Chuẩn bị

Vật liệu: Nấm Trichoderma sp, Tấm: 8kg, Trấu: 150g, Nước máy: 1 lít, Nito: 100g

Dụng cụ: Khay nhựa, Cân, 20 bịch nilon

Thiết bị: Máy hấp

1.3.2 Phương pháp tiến hành

Bước 1: Cân và cho 8kg Tấm vào khay nhựa, 150g Trấu cho vào khay

Hình 1.1 Cân tấm và trấu

Hình 1.2 Hỗn hợp tấm và trấu

Bước 2: Cân 100g Nito sau đó trộn với 1 lít nước máy rồi cho vào hỗn hợp tấm, trấu Trộn đều

Hình 1.3 Cân nito

Hình 1.4 Đổ nước và Nito vào hỗn hợp trấu và tấm

Bước 3: Cho 400g hỗn hợp vừa trộn vào mỗi bịch với số lượng 20 bịch Đậy nút bông kín rồi mang đi hấp tiệt trùng ở 121oC với thời gian từ 2 giờ 30 phút đến 3 giờ

Hình 1.5 Hỗn hợp sau khi hấp

Sau khi để nguội, đổ 25ml dung dịch được pha gồm 600ml Trichoderma và 650ml nước

cất vào các túi môi trường để nhân sinh khối nấm Trichoderma sp

Hình 1.6 Bình chứa giống Trichoderma sp

Hình 1.7 Cho giống vào các túi môi trường

Hình 1.8 Các túi môi trường sau khi thêm giống Trichoderma sp

1.4 Kết quả

Hình 1.9 Nấm Trichoderma sau khi cấy 1 tuần

1.5 Kết luận

Sau 1 tuần nhận thấy nấm phát triển tốt trên môi trường, nấm phát triển mạnh nhưng không đồng đều

CHƯƠNG 2: QUY TRÌNH KIỂM TRA MẬT SỐ

BÀO TỬ

2.1 Vật liệu và phương pháp

2.1.1 Chuẩn bị

Vật liệu: Chế phẩm sinh học EM dạng nước, Nước muối sinh lý 0.9%

Hình 2.1 Dung dịch EM nồng độ 109 Cfu/ml

Dụng cụ: Tủ cấy, Bình tam giác, Micropipet, 6 đĩa petri, Que cấy trang

Thiết bị: Máy lắc đều

2.1.2 Quy trình thực hiện

Thực hiện bên trong tủ cấy vô trùng

Đầu tiên pha ở nồng độ 100 ( pha 90ml NaCl 0.9% với 10ml dung dịch EM) vào bình tam giác đánh ký hiệu nồng độ Lắc đều 15-20 phút

Hình 2.2 Dung dịch 100 được lắc đều

Hình 2.3 Dung dịch 100 sau khi lắc.

Mang vào tủ cấy để bắt đầu pha loãng Hút 1ml từ ống pha 100 cho vào ống nghiệm kế tiếp, để có được nồng độ 10-1 tiếp tục hút 1ml từ ống nghiệm 10-1 cho vào ống nghiệm kết tiếp để có được nồng độ 10-2 Lặp lại thao tác cho đến nồng độ 10-7 thì dừng

Hình 2.4 Hút 1ml từ bình nồng độ 100

Hình 2.5 Cho dung dịch 100 vừa hút vào ống nồng độ 10-1 Sau khi pha loãng xong, lấy 3 ống nghiệm có nồng độ 10-5 10-6 10-7 lặp lại 2 lần ở mỗi nồng độ

Tiến hành cấy trang lên mỗi đĩa

Hút 1ml lên môi trường thạch Cấy trang từng nồng độ vào đĩa petri

Hình 2.6 Cấy trang lên đĩa petri cho nồng độ 10-5 10-6 10-7 Lưu ý cần cấy khô không làm rách thạch và tránh để nhiệt độ cao làm chết vi khuẩn Sau khi cấy, bọc bằng màng bọc cho vào bịch mang đi ủ ở nhiệt độ thường (27-30oC) trong vòng 48 tiếng Sau đó đếm số khuẩn lạc và tính mật số

2.2 Kết quả

Bảng 1 Vi khuẩn sau khi cấy 48h

10-5

13

5

8

20

10-7

65

19

2.3 Kết luận