Đang tải... (xem toàn văn)
NẤM MEN : • Nấm men là loại nấm đơn bào, thường có hình cầu hoặc hình bầu dục... NẤM MỐC : • Nấm mốc là loại nấm mọc ở dạng sợi đa bào hay còn gọi là sợi nấm.. Các nhánh sợi nấm hình ống
Trang 1NôngThị Kim Chi- 2005210236
Lê Hoàng Quỳnh Nhi- 2005210379 An Thị Thanh- 2005211062
NguyễnTrần Anh Thư- 2005210464
Trang 3TỔNG QUAN:
Trang 4NẤM MEN : • Nấm men là loại nấm đơn bào, thường có hình cầu
hoặc hình bầu dục
• Nấm men thì trường màu trắng, trắng đục
• Nấm men tăng trưởng giới hạn trong phạm vi pH từ 4,0 đến 4,5.
Trang 5NẤM MỐC :
• Nấm mốc là loại nấm mọc ở dạng sợi đa bào hay còn gọi là sợi nấm Các nhánh sợi nấm hình ống này có nhiều nhân giống hệt nhau về mặt di truyền, nhưng tạo thành một thể thống nhất.
• Nấm mốc thường phát triển chậm hơn so với nấm men sau khi được cấy vào môi trường.
• Nấm mốc có thể phát triển trong phảm vi nồng độ axit(pH) rộng hơn so với nấm men
Trang 7PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC
THỦ CÔNG
TỰ ĐỘNG
Đầu tiên , người ta thường đặt đĩa petri lên một lưới ô Sau đó đếm các khuẩn lạc
trong mỗi ô và đánh dấu khuẩn lạc đếm được ở đằng sau của đĩa petri
Nguyên lí cơ bản của máy đếm
Trang 8MÔI TRƯỜNG VÀ
HÓA CHẤT
Trang 9MÔI TRƯỜNG-HÓA CHẤT MỤC ĐÍCH
Saline Peptone Water (SPW) Pha loãng mẫu
DG18 Nuôi cấy nấm men và nấm mốc
Trang 10PHẠM VI ÁP DỤNG
TCVN 8275-1,2010(ISO 21527-1:2008)
Trang 11Sản phẩm thủy phân mô động vật hoặc thực vật bằng enzyme
Có vai trò khử độc cho môi trường
D-Glucoza (C6H12O6) Là nguồn vật chất cung cấp C trong quá trình sinh trưởng của vi sinh vật.
Kali dihydro phosphat (KH2PO4) Làm nên hệ thống đệm giúp điều chỉnh pH môi trường.
Magie sulfat (MgSO4.H2O) Trung tâm hoạt tính của một số thành phần của sắc tố quang hợp
Dichloran (2,6-dicloro-4-nitroanilin) Ức chế sự kéo dài khuẩn ty nấm mốc mọc nhanh , vì thế cho phép phát hiện những nấm mốc mọc chậm
Rose Bengal
Thạch Làm rắn môi trường chứ không phải là cơ chất dinh dưỡng cho vi sinh vật sử dụng
Chloramphenicol Là kháng sinh, có tác dụng kìm khuẩn
Nước cất hoặc nước đã loại ion Là yếu tố quan trọng nhất quyết định sự phát triển của mọi sinh vật
DRBC
Trang 12NaCl Duy trì cân bằng áp suất thẩm thấu
Nguồn cung cấp các Nitrogen và cacbon, các axit amin chuỗi dài, vitamin và các chất
dinh dưỡng cần thiết khác
Nước cất Pha môi trường
SPW là môi trường dinh dưỡng tốt để khuẩn lạc phát triển
Pepton là chất dinh dưỡng để cho vi khuẩn phát triển tốt, nước muối dùng để tạo áp suất thẩm thấu.
Trang 13Ống nghiệm Tủ cấy vô trùng
Đĩa petri Nồi hấp
Cốc thủy tinh (100ml,250ml) Tủ ấm
Bình tam giác (250ml) Máy dập mẫu (Stomacher)
Ống đong (100ml ) Máy trộn mẫu (vortex mixer)
Đầu tip Pipetman Cân phân tích ( 4 số lẻ )
Lò viba DỤNG CỤ :
Trang 14QUY TRÌNH
ĐỊNH LƯỢNG
Trang 17Cho vào máy dập mẫu (mẫu rắn) hoặc lắc đều
(mẫu lỏng
Bước 1: Chuẩn bị mẫu thử và huyền phù ban đầu
Mục đích: đồng nhất mẫu
Trang 19Bước 3:Cấy và ủ mẫu
Mục đích:Sau khi có mẫu ta cần cấy mẫu vào môi trường để vi sinh vật có môi trường phù hợp để phát tiển về kích thước, sau đó ta cần ủ trong nhiệt độ thích hợp để thời
gian cho vinh sinh vật phát triển
Trang 20Chọn đĩa
chứa ít hơn 150 khuẩn lạc và đếm
Bước 4: Quan sát, chọn và đếm khuẩn lạc
Mục đích:Sau khi pha loãng và ủ để vi sinh vật phát triển về kích thước và số lượng ta có thể đếm số lượng nấm men-nấm mốc có trong dĩa, từ đó tính toán ra hàm lượng vi sinh có trong
sản phẩm
Trang 21MÀU CỦA KHUẨN LẠC
Khuẩn lạc nhỏ có màu xanh
Trang 22TÍNH TOÁN KẾT QUẢ
Trang 23C: Tổng số khuẩn lạc nấm men hoặc nấm mốc đếm được trên 4 đĩa của 2 độ pha loãng liên tiếp V: Thể tích dịch cấy đã cấy trên mỗi dĩa ,tính bằng ml
n1 :số đĩa ở độ pha loãng thứ nhất được giữ lại n2 :số đĩa ở độ pha loãng thứ hai được giữ lại d: độ pha loãng đầu tiên được giữ lại
Tổng số nấm men hoặc nấm mốc trong 1g mẫu (X) được tính theo công thức :
Làm tròn số kết quả có được tới 2 số có nghĩa (chẳng hạn 2864 làm tròn là 2900 ) và biểu thị theo công thức :
a: số thập phân tương ứng có giá trị từ 1.0 đến 9.9 n : số mũ phù hợp của 10
Trang 24Độ pha loãng 10^-2 10^-3
Số khuẩn lạc 99 11
Ví dụ cách tính tổng nấm men và nấm mốc trong 1ml sữa lên men :
So khuẩn lạc nấm men hoặc nấm mốc đếm được trên 2 độ pha loãng liên tiếp là
-Ở độ pha loãng d=10^ -2 , đếm được 99khuẩn lạc và 91khuẩn lạc -Ở độ pha loãng d= 10^ -3 , đếm được 11khuẩn lạc và 9khuẩn lạc Với V=0.1g
->Làm tròn kết quả là 9.5x10^4 CFU/ml
Trang 25Theo quyết định 46/2007 của Bộ Y tế:
-> Mẫu không đạt chỉ tiêu nấm men, nấm mốc
Trang 26CÂU HỎI TRẮC
NGHIỆM
Trang 292.Trong quá trình chuẩn bị
Trang 302.Trong quá trình chuẩn bị
Trang 334.Thời gian và nhiệt độ ủ
Trang 344.Thời gian và nhiệt độ ủ
Trang 37THANK YOU FOR
LISTENING