Khảo sát tác động kháng viêm của cao phân đoạn từ lá cây lá đắng Vernonia amygdalina Delile trên chuột nhắt trắng Tổng quan về cây lá đắng, về tác dụng dược lý của cây lá đắng, tổng quan về kháng viêm và các thuốc kháng viêm, giới thiệu một số mô hình đã nghiên cứu tác dụng kháng viêm. Trình bày đối tượng nghiên cứu và phương pháp nghiên cứu: xác định độ tinh khiết của dược liệu, khảo sát sơ bộ thần phần hóa học, chiết xuất cao toàn phần và các cao phân đoạn, khảo sát tác dụng kháng viêm của các cao phân đoạn lá đăng trên mô hình gây phù chân chuột bằng carrageenan. Kết quả nghiên cứu, bàn luận, kết luận và kiến nghị.
TRƢỜNGĐẠIHỌCLẠCHỒNG KHOADƢỢC BÁO CÁO NGHIÊNCỨUKHOAHỌC ĐỀTÀI KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦACAOPHÂNĐOẠNTỪLÁCÂYLÁĐẮNG VERNONIAAMYGDALINADELILE TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG ĐINHDIỆUQUYÊN ĐỒNGNAI,THÁNG7/2020 TRƢỜNGĐẠIHỌCLẠCHỒNG KHOADƢỢC BÁO CÁO NGHIÊNCỨUKHOAHỌC ĐỀTÀI KHẢO SÁT TÁC ĐỘNG KHÁNG VIÊM CỦACAOPHÂNĐOẠNTỪLÁCÂYLÁĐẮNG VERNONIAAMYGDALINADELILE TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG Sinh viên thực hiện: ĐINH DIỆU QUN Thầy hƣớng dẫn: ThS.ĐỒNVĂNVIÊN ThS.NGƠVĂNCƢỜNG ĐỒNGNAI,THÁNG7/2020 MỤCLỤC Danhmụcchữviếttắt v Danhmụchình vi Danhmụcbảng vii Danhmụcsơđồ .viii Đặtvấnđề Chƣơng1 1.1 Tổngquan .3 TổngquanvềcâyLáđắngVernoniaamygdalinaDelile 1.1.1 Danhpháp 1.1.2 ĐặcđiểmthựcvậtcâyVernoniaamygdalina 1.1.3 Phânbố,sinhtháicủacâyVernoniaamygdalina .4 1.1.4 ThànhphầnhóahọccủacâyVernoniaamygdalina 1.2 Tổngquanvềtácdụngdượclý .8 1.2.1 Tácdụngchốngoxyhóa 1.2.2 Tácdụnghạđườnghuyết .8 1.2.3 Tácdụnghạlipidhuyết 1.2.4 Tácdụngchốngungthư 1.2.5 Tácdụngbảovệgan .9 1.2.6 Tácdụngkhángkhuẩnvàkhángkýsinhtrùng 10 1.2.7 Tácđộngkhángviêm,giảmđau 11 1.3 Tổngquanvềkhángviêm 11 1.3.1 Kháiniệmviêm 11 1.3.2 Nguyênnhângâyviêm 12 1.3.3 Diễntiếncủaquátrìnhviêm 12 1.3.4 Viêmcấp 12 1.3.5 Viêmmạn 18 1.4 Cácthuốckhángviêm 20 1.4.1 Cácthuốckhángviêmkhôngsteroid(NSAID) .20 1.4.1.1 Cơchếtácđộng 20 1.4.1.2 PhânloạiNSAID 21 1.4.1.3 Tácdụngkhôngmongmuốn 21 1.4.2 Thuốckhángviêmsteroid(Glucocorticoid) 23 1.4.2.1 Cơchếtácđộng 23 1.4.2.2 Phânloại .24 1.4.2.3 Tácdụngkhôngmongmuốn 24 1.5 Mộtsốmơhìnhnghiêncứutácdụngkhángviêm 24 1.5.1 Mơhìnhgâyviêmcấpvàbáncấp 24 1.5.1.1 Mơhìnhgâyphùbànchânchuột .24 1.5.1.2 Mơhìnhgâyphùtaichuột 25 1.5.1.3 Mơhìnhgâyviêmmàngphổi 25 1.5.1.4 Mơhìnhgâybanđỏvớitiatửngoại .25 1.5.1.5 Mơ hình sàng lọc chất kháng viêm thông qua thụ thể toll like (TLR4)trênmàngtếbàomacrophagechuột .25 1.5.2 Mơhìnhgâyviêmmạntính 26 1.5.2.1 Mơhìnhtạouhạt .26 1.5.2.2 Mơhìnhgâyviêmđakhớp .26 Chƣơng2 Đốitƣợngvàphƣơngphápnghiêncứu 27 Đốitượngnghiêncứu 27 2.1 2.1.1 Dượcliệuvàđộngvậtthửnghiệm 27 2.1.2 Hóachấtvàthuốcthử 27 2.1.3 Thiếtbịvàdụngcụthửnghiệm 27 2.2 Phươngphápnghiêncứu 28 2.2.1 Xácđịnhđộtinhkhiếtcủadượcliệu 28 2.2.1.1 Xácđịnhđộẩm 28 2.2.1.2 Xácđịnhđộtrotoànphần 28 2.2.2 Khảosátsơbộthànhphầnhóahọc 28 2.2.3 Chiếtxuấtcaotoànphầnvàcáccaophânđoạn 28 2.2.4 KhảosáttácdụngkhángviêmcủacáccaophânđoạnLáđắngtrênmơhìnhgâyphùchâ nchuộtbằngcarrageenan 30 2.2.4.1 Quytrìnhđothểtíchchânchuột 30 2.2.4.2 Quytrìnhgâyviêmbằngcarrageenan .31 2.2.4.3 Cơngthứctínhđộphùchânchuột 31 2.2.4.4 Xửlýsốliệuthựcnghiệm 32 2.2.4.5 ThửnghiệmđánhgiátácđộngkhángviêmcủacaotoànphầnLáđắng 32 2.2.4.6 KhảosáttácđộngkhángviêmcủacáccaophânđoạnLáđắng 33 Chƣơng3 3.1 Kếtquảnghiêncứu 34 Kếtquảxácđịnhđộtinhkhiết 34 3.1.1 Độẩmdượcliệu 34 3.1.2 Độtrotoànphầndượcliệu 34 3.2 KếtquảchiếtxuấtcaotoànphầnvàcáccaophânđoạnLáđắng 35 3.2.1 Chiếtxuấtcaotoànphần .35 3.2.2 Hiệusuấtchiếtcaophânđoạn 36 3.3 KếtquảkhảosátsơbộhóathựcvậtcáccaophânđoạnLáđắng 37 3.4 Kết khảo sát tác dụng kháng viêm cao tồn phần cao phân đoạn Láđắngtrênmơhìnhgâyphùchânchuột 38 3.4.1 Ướctínhliềuthửnghiệmcáccaophânđoạn .38 3.4.2 Đánhgiátrọnglượngchuộttrongquátrìnhthửnghiệm .39 3.4.3 Kết thử nghiệm đánh giá tác động kháng viêm cao toàn phần Láđắng 40 3.4.3.1 Đánh giá thể tích chân chuột sau gây viêm cao toàn phần Láđắng 40 3.4.3.2 ĐánhgiáđộgiảmsưngphùchânchuộtcủacaotoànphầnLáđắng 42 3.4.4 KếtquảkhảosáttácđộngkhángviêmcủacáccaophânđoạnLáđắng 43 3.4.4.1 Đánh giá thể tích chân chuột sau gây viêm cao phân đoạn Láđắng 43 3.4.4.2 ĐánhgiáđộgiảmsưngphùchânchuộtcủacáccaophânđoạnLáđắng45 Chƣơng4 Bànluận .48 Chƣơng5 Kếtluậnvàkiếnnghị 51 5.1 Kếtluận 51 5.2 Kiếnnghị 51 Tàiliệuthamkhảo Phụlục PL-1 DANHMỤCCHỮVIẾTTẮT Viếttắt TiếngAnh CaoTP TiếngViệt Caotoànphần CF Chloroform Cloroform COX Cyclooxygenase Cyclooxygenase DPPH 2,2–diphenyl–1 –1 –picrylhydrazyl EA Ethylacetate Ethylacetat IC50 Thehalfmaximalinhibitorycon centration Nồngđộứcchế50% IL Interleukine Interleukin LC50 Lethalconcentration50 Nồngđộgâychết50% LPO Lipidperoxidation Lipidperoxidhóa LT Leukotriene Leukotrien MIC Minimuminhibitoryconcentration Nồngđộứcchếtốithiểu PAF Plateletactivatingfactor Yếutốhoạthóatiểucầu PG Prostaglandine Prostaglandin Po Peros(bymouthororally) Đườnguống SC Subcutaneous Tiêmdướida TNF Tumornecrosisfactor Yếutốhoạitửkhốiu TX Thromboxane Thromboxan DANHMỤCHÌNH Hình1.1.ĐặcđiểmhìnhtháiV.amygdalina Hình 1.2 Vị trí tác dụng glucocorticoid thuốc kháng viêm không steroid trongt ổ n g hợpPG 23 Hình2.1.MáyđothểtíchchânchuộtPlethysmometer37140 30 Hình2.2.TiêmSCganbànchânchuột 31 Hình2.3.ĐothểtíchchânchuộtvớimáyPlethysmometer37140 .31 Hình3.1.MẫudượcliệuLáđắngtrướckhiđemxay 35 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn trọng lượng chuột sinh lý vào ngày0 trọng lượng chuột sau thửnghiệmvàongày6 39 Hình3.3.Hìnhảnhchânchuộtsinhlý 41 Hình3.4.Hìnhảnhchânchuộtsaukhigâyviêmbằngcarrageenan 41 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao toàn phần Lá đắng ngày (trong ngày) 42 Hình 3.6 Đồ thị biểu diễn phần trăm độ giảm sưng phù chân chuột sau tiêm carrageenan (ngày 0) 30 phút sau uống cao phân đoạn ngày (trong ngày) 45 DANHMỤCBẢNG Bảng2.1.ThànhphầnhóahọccủacâyVernoniaamygdalina .5 Bảng2.2.HoạttínhsinhhọccácchấtphânlậptừV.amygdalinađãđượcchứngminh Bảng3.1.Kếtquảthửđộẩm(%)củaládượcliệuLáđắng 34 Bảng3.2.Kếtquảthửđộtrotoànphần(%)ládượcliệuLáđắng 34 Bảng3.3.HiệusuấtchiếtphânđoạncaocồntồnphầnLáđắng 36 Bảng3.4.KếtquảsơbộhóathựcvậtLáđắngcủacáccaophânđoạn 37 Bảng3.5.Liềucaochochuộtuống 38 Bảng3.6.Thểtíchchânchuột sinhlývàsauđiềutrị(ngày1đếnngày6)c caotoàn phầnLáđắng 40 Bảng3.7.Thểtíchchânchuộtsinhlývàsau điềutrị(ngày1đếnngày6)củacáccao phân đoạnLáđắng 43 Bảng3.8.Độphùchânchuột(%)theothờigianthửnghiệmcủacáccaophânđoạn 46 DANHMỤCSƠĐỒ Sơ đồ 1.1 Vị trí phân loại Lá đắngVernonia amygdalinaDelile theo hệ thống phânl o i Takhtajan(2009) .3 Sơđồ1.2.Diễntiếncủaquátrìnhviêm 12 Sơđồ1.3.MốiliênquangiữacácconđườngtạoracácPGbởiCOX-1vàCOX-2 20 Sơđồ1.4.Quytrìnhchiếtcaotồnphần 29 Sơđồ2.1.SơđồchiếtcaophânđoạnLáđắng 29 Sơđồ3.1.QuytrìnhchiếtxuấtLáđắng 35