Nghiên cứu thành phần hóa học và khả năng xua muỗi Aedes aegypti trong không gian của tinh dầu quế (Cinnamomum cassia) Đề tài xây dựng quy trình chiết xuất tinh dầu quế (Cinnamomum cassia) trong phòng thí nghiệm và xác định thành phần hóa học của tinh dầu quế, khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất chiết xuất tinh dầu, phân tích thành phần có trong tinh dầu quế. Trình bày xây dựng hệ thống thử nghiệm khả năng xua muỗi trong không gian và đánh giá khả năng xua muỗi Aedes aegypti trong không gian của tinh dầu quế.
TổngquanvềbệnhsốtxuấthuyếtDengue
ĐặcđiểmchủyếucủabệnhSXHD
SXHD là bệnh nhiễm vi-rútDenguecấp tính do muỗi truyền và dễ gây thành dịch lớn.Bệnhkhônglâytruyềntrựctiếptừngườisangngườimàdomuỗiđốtngườibệnh truyềnvirútsangngườilànhquavếtđốt.HailoàimuỗitruyềnbệnhSXHDphổbiến làmuỗiAedesaegyptichiếmchủyếuvàmộtphầnnhỏhơnlàmuỗiAedesalbopictus Ngoài ra, những loài muỗi này cũng là vật trung gian truyền bệnh chikungunya, sốt vàng da và vi-rút Zika Bệnh xảy ra phổ biến khắp các vùng nhiệt đới, với các mức độrủirokhácnhaudoảnhhưởngcủalượngmưa,nhiệtđộ,độẩmcaovàcảquátrình đô thị hóa nhanh không có kế hoạch[9],[14].
HiệnnaybệnhSXHDvẫnlàbệnhnguyhiểmvìbệnhchưacóthuốcđiềutrịđặchiệu vàchưacóvắcxinphòngbệnh.Dođó,khixảyradịchlớnvớinhiềungườimắccùng lúc sẽ làm cho công tác điều trị hết sức khó khăn, bệnh còn có nguy cơ tử vong cao dođểlạinhiềubiếnchứng(xuấthuyết,rốiloạnđôngmáu,suytạng…)nhấtlàvớitrẻ em,gâythiệthạilớnvềkinhtế,xãhội.Đángchúýnhấtlàvi-rútDengue(thuộcnhóm Flavivirus, họFlaviviridae) có tới 4 týp huyết thanh gây bệnh là DEN-1, DEN-2, DEN-3 và DEN-4 luân phiên nhau gây dịch Do miễn dịch được tạo thành sau khi mắc bệnh chỉ có tính đặc hiệu đối với từng týp cho nên người ta có thể mắc bệnh SXHD lần thứ 2 hoặc thứ 3 bởi những týp khác nhau[3].
TìnhhìnhchungvềSXHD
Trong năm 2020 số lượng ca mắc SXHD đã giảm nhiều chỉ bằng 1/3 so với cùng kì năm2019.Tuynhiênđâychưaphảidấuhiệuđángmừngvìtìnhhìnhdịchbệnhdiễn biến phức tạp do biến đổi khí hậu toàn cầu[2].
Theo báo cáo ngày 13/8/2020 của WHO, nhiều quốc gia trong khu vực và trên thế giới vẫn tiếp tục ghi nhận số mắc và tử vong cao như sau Tại Châu Á: Malaysia(66.199 mắc, 109 tử vong), Philippines (55.160mắc, 200 tử vong), Lào (4.155mắc,9tửvong),Campuchia(4.450mắc,5tửvong),Singapore:21.834mắc,tăngcaohơn cùngkỳ2019vàgiaiđoạn5nămtrước.RiêngkhuvựcchâuMỹLaTinhđãghinhận tổngsố1.992.477camắcvà725catửvong.TrongđócaonhấttạiBrazil(1.330.245 mắc,465tửvong), Paraway(220.234mắc,73tửvong),Bolivia(83.533mắc,19tử vong),Argentina(79.775mắc, 25tửvong),C o l o m b i a (67.560mắc, 36tửvong), Mexico(55.048mắc,28tửvong)[2].
2020 so với năm 2019, tại tuần 37 năm 2020, Việt Nam
Từsốliệuthốngkê của CụcYtế dựphòng – BộYtếthìcóthểthấy sốcamắc vàtử vongdoSXHDvàonăm2020đãgiảmđángkểsovớinăm2019.CụthểtạimiềnBắc số ca mắc giảm 67,4%, miền Trung giảm 39,0%, Tây Nguyên giảm 86,6% vàmiền Nam giảm 67,3%[2]. Trong 3 tuần cuối năm 2020 số mắc có xu hướng tăng và gần với ngưỡng cảnh báo dịch, tập trung chủ yếu ở một số tỉnh miền Trung, miền Nam như: Bến Tre, Bình Định, Bình Dương, Đồng Nai, Gia Lai, Kon Tum, Khánh Hòa, Bình Thuận, Kon Tum, Long An, Phú Yên, Quảng Bình, Tây Ninh, Tiền Giang, TP.Hồ Chí Minh và
Hà Nội Không có sự bất thường về diễn biến dịch, xu hướng gia tăng số mắc các tuần này cơ bản cũng như các năm trước[2].
NhữngbiệnphápphòngchốngbệnhSXHD
Việc điều trị và phòng chống SXHD vẫn còn nhiều khó khăn vì những lý do khác nhau như lĩnh vực giám sát ca bệnh, xử lý ổ dịch, kể cả xét nghiệm chẩn đoán sớm SXHDvàvấnđề về vắcxin Ngay cả khi vắc xinđượcsửdụngrộngrãi trongtương lai trên cộng đồng thì đó cũng không phải phương án tốt nhất để kiểm soát SXHD. Dođó,khôngcònlàtráchnhiệmriêngcủacánbộytếmàcầncảsựthamgiacủatoàn thể người dân trong xã hội với sự phối hợp đầy đủ giữa các biện pháp phòng, chống dịch[12]. Điểm mẫu chốt để phòng bệnh tốt nhất là diệt muỗi, lăng quăng/bọ gậy và phòng chống muỗi đốt.
- Loạibỏnơisinhsảncủamuỗi,diệtlăngquăng/bọgậybằngcách: Đậykíntấtcảcácdụngcụchứanướcđểmuỗikhôngvàođẻtrứng.Vớicácdụng cụ chứa nước vừa và nhỏ (lu, khạp…)t h ì t h ư ờ n g x u y ê n thay rửa ít nhất một lần mộttuần,khikhôngđùngđếnthìlậtúplạiđểtránhtồnđọngnước.Vớicácdụng cụchứanướclớn(bể,giếng,chum,vại )cóthểthảcáhoặcmêzô(loàigiápxác ăn bọ gậy) để diệt lăng quăng/bọ gậy.
Thu gom, hủy các vật dụng phế thải trong nhà và xung quanh nhà như chai, lọ, mảnhchai,mảnhluvỡ,ốngbơ,vỏdừa,vỏxecũ,hốctre,bẹlá ,dọnvệsinhmôi trườngquangđãng, khôráo.Cácđồdùngnhư bìnhhoa cầnphảiđượcthaynước đềuđặnhaynhữngbátnướcđượckêchântủđựngchénbátđểchốngkiếnthìnên bỏ muối hoặc dầu vào để lăng quăng/ bọ gậy không thể sinh trưởng.
- Phòng chống muỗi đốt: Ngủ trong mùng kể cả ban ngày, mặc quần áo dài tay ở nơi có nhiều muỗi và lúc ngủ Dùng các sản phẩm diệt hoặc xua muỗi như bình xịt diệt muỗi, hương muỗi, kem xua muỗi, vợt điện diệt muỗi Dùng rèm che, màn tẩm hóa chất diệt muỗi xung quanh không gian nhà ở.
- Ngoàira,cầntíchcựcphốihợpvớichínhquyềnvàngànhytếtrongcácđợtphun hóa chất phòng, chống dịch[3].
Giớithiệuvéc-tơSXHD–muỗiAedesaegypti
SựphânbốcủamuỗiAedesaegypti
Muỗivằn(muỗiAedesaegypti)làvéc-tơchínhtruyềnvi-rútDenguetrongcộngđồng.
MuỗivằncónguồngốctừChâuPhinhưnghiệntạinóphânbốrấtphổbiếnởcáckhu vựcnhiệtđớivàcậnnhiệtđới.Quátrìnhdicư,nhậpcưtrêntoànthếgiới,sựgiatăng đilại,buônbán,giaolưugiữacáckhuvựcđãđónggópđángkểvàosựlantruyềnvà phổ biến của muỗi vằn sang các châu lục khác trên toàn thế giới Sự tăng lên nhanh chóngcủadânsốtoàncầu,quátrìnhđôthịhoágiatăngcũnglànguyênnhândẫnđến các tình trạng như: nhà ở không đạt tiêu chuẩn, thiếu hệ thống cung cấp nước sạch, quản lý rác thải và vệ sinh kém, người dân sử dụng nhiều các dụng cụ chứa nước uống,nướcsinhhoạtvàdụngcụphếthảicónướcđọng.TạiViệtNam,muỗivằnxuất hiện ở hầu hết các khu vực, bao gồm miền Nam, miền Trung và miền Bắc[14].
ĐặctínhsinhhọccủamuỗiAedesaegypti
- VòngđờicủamuỗiAedesaegyptiqua4giaiđoạnchính:Trứng˗Bọgậy˗Nhộng
(Nguồn:https://www.cdc.gov/mosquitoes/about/life-cycles/aedes.html)
Trứng (từ 2 đến 3 ngày): muỗi cái trưởng thành đẻ trứng ở trên bề mặt các vật chứa nước (bát, cốc, chậu, bình hoa, vỏ lon…), trứng có thể dính chặt vào thành vật chứa và tồn tại trong một thời gian rất dài Trứng muỗi thường có màu đen như những hạt bụi li ti nhỏ.
Bọ gậy (lăng quăng) ( từ 5 đến 8 ngày): trứng muỗi tồn tại đủ lâu trong các vật hoặc những nơi chứa nước sẽ nở ra thành bọ gậy Bọ gậy không có chân nhưng có đầu phát triển, mình phủ nhiều lông, bơi được bằng các chuyển động của cơthể.
Nhộng(từ2 đến3ngày): chúngcóhình dạng nhưmộtdấu phẩy, mộtphầnđược bọc trong kén, với phần đầu ở một phía và phần chân chèo nhỏ ở phía còn lại Trong quá trình phát triển này thì con nhộng không cần ăn.
(Nguồn:http://www.bugoutbvi.org/wp-content/uploads/2016/08/Mosquito-Life-Cycle-
Muỗi trưởng thành: tuổi thọ của muỗiAedes aegyptibị ảnh hưởng bởi điều kiện môitrường,ởđiềukiệnlýtưởngmuỗicáisốngtừ20đến40ngày,trongkhimuỗi đực sống ngắn hơn từ 9 đến 12 ngày MuỗiAedes aegypticó kích thước trung bình khoảng 5 mm,thân muỗi có màu đen bóng và có nhiều vẩy trắng bạc tập trung từng cụm hay thành từng đường trên mình muỗi Ở tấm ngực thứ nhất và thứhaicóhaiđườngvẩytrắngbạcphìnhra,trôngnhưhainửavòngcungômhai bên lưng tạo thành hình như một mặt đàn, đầu muỗi có vảy trắng bạc đính ở gốc râu,đỉnhpantrắngngangtừngđốt.Trênmặtlưngởgốccácđốtbànchânsauthứ hai đến thứ tám có những khoang trắng, riêng đốt bàn chân thứ năm trắng hoàn toàn, do đó muỗiAedes aegypticòn gọi là “muỗi vằn”.
Hình2.4.Muỗi Aedesaegyptiđực(trái)vàAedesaegypticái(phải)trưởngthành
(Nguồn:https://en.wikipedia.org/wiki/Aedes_aegypti)
MuỗiAedesaegyptithíchđậuởnhữngchỗmátvàtốinhưcáchốckẹttrongnhà,sàn giường, sàn tủ, gầm bàn, quần áo treo trên sào hoặc móc trên vách Chúng thích các bề mặt nhám hơn là những vật có bề mặt trơn láng MuỗiAedes aegyptiđực chỉ hút nhựa cây để sống MuỗiAedes aegypticái hút máu người và đẻ trứng, chúng hoạt động nhiều vào ban ngày, cao điểm vào lúc sáng sớm và chiều tối Sau khi đã hút máu người bệnh có chứa vi-rútDenguethì sau 3 ngày muỗi đã có thể truyền vi-rútDenguesuốt đời[12].
MuỗiAedes aegyptilà trung gian truyền bệnh sốt xuất huyếtDengue, có thể bay trongb á n k í n h 1 0 0 m é t , k h o ả n g b a y c ủ a m u ỗ i t h ư ờ n g k h ô n g v ư ợ t q u á 3 0
Sau khi hút máu người có chứa vi-rútDengue, thời kỳ ủ bệnh ở muỗi khoảng 8 đến10ngày, virút xuyênquadạdày muỗi và tiếp tụcsinhsảntrongtuyến nướcbọt của muỗi.Sauđókhimuỗihútmáumộtngườikhôngnhiễmbệnhkhácthìchúngdùng kimđâmquada,virútDenguetheonướcbọtravàlàmlâytruyềnvi-rútDengue.Số người nhiễm vi-rútDenguetrong cộng đồng càng nhiều thì nguy cơ lan truyền của bệnhcànglớn.Ướctính cứ1trườnghợpSXHDcósốcvàobệnhviệnthìcókhoảng 200-500ngườibị nhiễmvi-rútDenguecótriệuchứnghaykhôngcótriệuchứnglâm sàng, nhất là ở vùng có mật độ muỗiAedescao MuỗiAedescó thể truyền vi-rútDenguechotrứngnên trứngnhiễmvi-rúttrởthànhmuỗimangvi-rút cóthểdẫnđến việclâylandịchbệnhnày.Vi- rútDenguecũngcóthểlâytruyềnquađườngsinhdục ở muỗi[12].
Giớithiệuvềcâyquế
Nguồngốcvàphânbố
Quếlàmộtloạigiavị đãcótừ lâuđời,nóđãđượcđềcậptrongCựuước trongKinh thánh và có những chỉ dẫn về việc sử dụng quế ở Ai Cập sớm nhất là vào năm 3000 trướcCôngnguyên.HiệnnaycâyquếđượctrồngtrảirộngkhắpChâuÁvàchâuPhi nhưViệtNam,Indonesia,TrungQuốc,SrilancavàÚcvớikhoảng250loàikhácnhau[26] Trong năm 2017, bốn quốc gia chiếm 99% tổng sản lượng quế trên thế giới là Indonesia,TrungQuốc,ViệtNamvàSriLanka.Sảnlượngtoàncầuđãtănghơnmười lần kể từ năm
1970 Sự thay đổi lớn nhất theo quốc gia là nước Việt Nam, từ một nước sản xuất nhỏ vào năm
1970 vươn lên hàng thứ ba thế giới vào năm 2017[27].
2.3.1.2 ViệtNam Ở nước ta cây quế tự nhiên mọc tự nhiên trong các khu rừng tự nhiên nhiệt đới ẩm, từBắcvàoNam.Tuynhiênchođếnnay quếtựnhiênđãkhôngcònnữamàthayvào đó cây quế đã được thuần hoá thành cây trồng Từ lâu đời nước ta đã hình thành 4 vùng trồng quế, mỗi vùng có những sắc thái riêng về tự nhiên về dân tộc và nguồn lợi thu được từ quế.
Có thể sơ bộ giới thiệu 4 vùng quế ở nước ta đó là: vùng quếPhong(NghệAn),ThườngXuân(ThanhHóa);vùngquếYênBái;vùngquếTràMi, Trà Bồng;vùng quế Quảng Ninh[4].
Đặcđiểmthựcvậtvàphânloại
Bảng 2.1.Phân loại thực vật học của cây quế
(Nguồn:https://vi.wikipedia.org/wiki/Chi_Quế)
Trên thế giới hiện nay có ba loài quế chính: Giống quế ở Thanh Hóa và Nghệ An, Việt Nam (Cinnamomum loureiriiNees), giống quế Srilanca (CinnamomumzeylanicumNees), giống quế Trung Quốc (Cinnamomum cassiaBlume).
- Giống quế Việt Nam (quế Thanh): cây thường cao từ 12-20 m Lá cây hình bầu dục, thuôn dài ở hai đầu, có ba gân rõ chạy từ cuống đến đầu lá Hoa màu vàng mọc thành chùm, quả hình tròn, lúc đầu có màu xanh lục, khi chín ngả màu nâu tím.LoạiquếnàymọchoangvàđượctrồngởkhắpvùngrừngnúicủaViệtNam, nhưngchủyếuởdọcdãynúiTrườngSơntừphíabắclàcáctỉnhThanhHóa,Nghệ An, Hà Tĩnh cho tới phía Nam thuộc các tỉnh Quảng Nam, Quảng Ngãi Đây là loại quế có giá trị dược liệu rất cao và để bồi bổ sức khỏe[4].
Hình2.5.GiốngquếViệtNam(CinnamomumloureiriiNees) (Nguồn: https://vi.wikipedia.org/wiki/Quế_Thanh)
- Giống quế Srilanca (quế quan): cây cao khoảng 20-25 m, cành non hình vuông, có lông ngắn và thưa Lá mọc đối, thuôn dài và cứng, hình trái xoan, nhẵn bóng, hơi nhọn ở gốc Hoa mọc thành chùm màu trắng hoặc vàng nhạt, quả mọc hình trứng Ở nước ta chỉ có ít quế quan mọc rải rác ở Thanh Hóa, Nghệ An, Nha Trang, Bà Rịa, Tây Ninh Giống quế này ít được ưa chuộng trên thị trường ngày nay vì đây là loại quế thân nhỏ, hàm lượng tinh dầu thấp và năng suất kém[4].
Hình2.6.GiốngquếSrilanca(CinnamomumzeylanicumNees) (Nguồn: https://vi.wikipedia.org/wiki/Quế_quan)
- GiốngquếTrungQuốc(quếđơn):caotừ12-17m,lámọcsole,dàivàcứng,sáng bóngvànhẵnởmặttrên,mặtdướicólôngmịn.Lácóbagân,haigânphụnổirất rõởmặtdưới,cuốngláto.Hoamọcthànhchùm,quảhìnhtrứngthuôndài.ỞViệt
Nam,loạiquếnàythườngđượctrồngởcáctỉnhQuảngNinh,YênBáivàQuảng Nam TạiTrung Quốc chủ yếu được trồng ở các tỉnh Quảng Đông, Quảng Tây.quếđơnthườngđượcđánhgiálàloạiquếtốtnhất,quếđặcsản,giáthànhcao, thườngđược sửdụng chủyếulàmgiavị trong thựcphẩm, dượcliệu vàthuốc bổ[4].
Hình2.7.GiốngquếTrungQuốc(CinnamomumcassiaBlume) (Nguồn: https://vi.wikipedia.org/wiki/Quế_đơn)
Giớithiệuvềtinhdầuquế
Đặcđiểmcủatinhdầuquế
Bộphậnchínhđượcsửdụngđểchiếtxuấttinhdầuthườnglàtừláquếvàvỏquế,với hàmlượngtinhdầuthuđượctừ0,41-2,61%tùyvàođộtuổivàvịtrívỏtrêncây[18] Trong đó thành phần hóa học chính có trong tinh dầu quế là cinnamaldehyd, theo nghiêncứucủa Josevà cộng sự (2019) về đánhgiáhàmlượngcó trongtinhdầu cây quếCinnamomumcassiađượctrồngởẤnĐộcũngchothấykếtquảhàmlượng(E)-
Cinnamaldehydtrong mẫutinhdầu vỏquếkhácaolà 96,7%[20],đâylàthànhphần quyết định hương vị và màu sắc đặc trưng của quế Ngoài ra, tinh dầu quế cũng là mộttrong nhữngtinhdầunặnghơnnước,tỷtrọngcủatinhdầu quếở nhiệtđộ20°C là từ 1,040 đến 1,072[1].
Khi tiếp xúc với ánh sáng ở nhiệt độ phòng trong sáu giờ thì 10% hàm lượng cinnamaldehydsẽbịmấtvà36giờsauchỉcònlại25%lượngcinnamaldehyd.Các nghiêncứusau đóđã chỉrarằnghợpchấtnàychuyểndầnthànhacid cinnamic dạng kết tinh khi tiếp xúc với ánh sáng[22].
Côngdụngtinhdầuquế
Từ thời xa xưa quế và tinh dầu quế được sử dụng như là một gia vị và một vị thuốc chữabệnh.TrongKinhthánhcónhắcđếnviệcMosessửdụngtinhdầuquếnhưmột trong những thành phần có trong hỗn hợp sử dụng trong nghi lễ sức dầu Người Ai Cập cổ đại cũng thường sử dụng loại gia vị này trong cuộc sống hàng ngày như nấu ăn, tắm gội thậm chí còn dùng trong việc ướp xác[19].
Ngày nay, tinh dầu quế được sử dụng ngày càng phổ biến và ứng dụng của tinh dầu quếcũngdầnmởrộng,đặcbiệttronglĩnhvựcytế.Thànhphầncinnamaldehydtrong tinh dầu quế là một chất chống oxi hóa mạnh và trong các nghiên cứu dược lý cho thấyởcảcáccuộcthửnghiệmcậnlâmsàngtrênthúvàcácthửnghiệmlâmsàngtrên người đều cho thấy khả năng kiểm soát tốt đường huyết và insulin trong máu, điều này mở ra một tiềm năng lớn cho việc điều trị bệnh đái tháo đường Nhiều nghiên cứu còn chỉ ra rằng tinh dầu quế có khả năng tuyệt vời kháng nhiều loại vi khuẩn (Pseudomonasaeruginosa,Staphylococcusaureus,andEscherichiacoli…)cũngnhư kháng nấm(Coriolus versicolor, Laetiporus sulphureus, Eurotium spp.,
Aspergillusspp.,vàPenicillium),hơnthếnữanócũngcótiềmnănglớntrongkhảnăngxuamuỗiA edes aegyptivà được các nhà nghiên cứu tin rằng có triển vọng như một nguồn chính kiểm soát loài véc tơ gây hại này[19].
Chưngcấtlôicuốnhơinước
Kháiquátvềphươngphápchưngcấtlôicuốnhơinước
Quá trình chưng cất lôi cuốn hơinước từ lâu đã đượcsử dụngđể chiếtxuấttinhdầu vàcáchợpchấtcóhoạttínhsinhhọctừcácnguyênliệuthựcvật.Chưngcấtlôicuốn hơinướccóbaphươngphápchínhgồm:chưngcấtvớinước,chưngcấtvớihơinước không có nồi hơi riêng, chưng cất bằng hơi nước có nồi hơi riêng Trong quá trình chưng cất xảy ra các quá trình hóa lý chính liên quan đến quá trình thẩm thấu, hòa tan, khuếch tán và lôi cuốn theo hơi nước của hợp chất hữu cơ trong tinh dầu chứa trongcácmôkhitiếpxúcvớihơinướcởnhiệtđộcao,hơinướclàphươngtiệnchính để giải phóng tinh dầu hoặc các hợp chất hoạt tính sinh học trong mô thực vật và mangchúngđitheo.Thiếtbịlàmlạnhgiántiếplàmngưngtụhỗnhợphơivàlàmcho quátrìnhtáchtinhdầuvàcáchợpchấthoạttínhsinhhọckhỏinướctạothànhhailớp riêngbiệt.Tinhdầuvàcáchợpchấthoạttínhsinhhọcgốcdầuthườngđượclàmkhô trênnatrisulfatkhan.Vìquátrìnhchưngcấtlôicuốnhơinướcthườngđượctiếnhành ởnhiệtđộsôicủanước,mộtsốthànhphầndễbayhơi,chấtmàutựnhiênvàcáchợp chất hoạt tính sinh học không bền nhiệt có thể bị mất[23].
Ưunhượcđiểm
- Quy trình kỹ thuật tương đối đơn giảnvà an toàn,cóthểc h ư n g c ấ t n h i ề u l oạ i t i n h d ầ u[8].
- Nguyênliệudễbịcháykhétkhichưngcấtthiếunước,hoặcbịbếtdínhvàothành thiết bị, đặc biệt khi chưng cất các loại hoa[8].
- Khóđiềuchỉnh các thôngsố kỹ thuật (T°, p) khichưng cất và thông thườngthời gian chưng cất bị kéo dài[8].
Nguyênliệukhichưngcấtcầnđượclàmvỡvụncàngnhiềucàngtốt,cầnlàmcholớp nguyênliệucómộtđộxốpnhấtđịnhđểhơinướccóthểđixuyênnganglớpnàyđồng đều và dễ dàng. Trong quá trình chưng cất hơi nước, tại nhiệt độ nước sôi, tinh dầu trongtế bào thực vậtsẽ khuếch tán ra ngoài bề mặtnguyên liệu và bị hơinướccuốn đi Còn nước thẩm thấu vào trong nguyên liệu theo chiều ngược lại và tinh dầu lại tiếp tục bị cuốn vào lượng nước này Quy trình lặp đi lặp lại cho dến khi tinh dầu trongcác mô thoát hết ra ngoài Như vậy,sự hiệndiện của nướclà rất cần thiết,cho nêntrongtrườnghợpchưngcấtsửdụngnướcquánhiệt,chúýtránhđừngđểnguyên liệubịkhô.Nhưngcũngkhôngsửdụngquánhiềunướcnhấtlàtrongtrườnghợptinh dầu có chứa những cấu phần dễ tan trong nước[6]. b) Sựthủygiải
Những thành phần ester trong tinh dầu thường dễ bị thủy giải cho raacid và alcohol khi đun nóng trong một thời gian dài với nước Để tránh hiện tượng này cần chưng cất trong thời gian càng ngắn càng tốt[6]. c) Nhiệtđộ
Hầuhếtcáctinhdầuđềukémbềnvớinhiệt,nếuchưngcấtởnhiệtđộquácaosẽlàm phân hủy tinh dầu Do đó, khi cần thiết phải dùng hơi nước quá nhiệt (trên 100 °C) nên thực hiện việc này trong giai đoạn cuối cùng của sự chưng cất, sau khi các cấu phần dễ bay hơi đã lôi cuốn đi hết và thời gian chịu nhiệt cao của tinh dầu cũng nên ngắn nhất có thể[6].
Kếtluận:Trongnghiêncứunày, tác giảnghiêncứusửdụngphươngphápchưngcất lôicuốnhơinước để chưngcất tinh dầu quế vìphươngpháp và thiếtbị sử dụngkhá đơngiản,dễthựchiện vàantoàn,lượngmẫucầntrongnghiêncứunhỏnênphùhợp để thực hiện.
Tổngquanvềsựxuamuỗitrongkhônggian(mosquitospatialrepellency)
Kháiniệm
Theo định nghĩa của WHO: sự xua muỗi trong không gian (mosquito spatial repellency) được dùng để chỉ sự ảnh hưởng của các chất hóa học có tác dụng xua muỗitrongkhônggian (spatialrepellent)dẫn đếnthayđổihayphávỡhànhvithông thường của muỗi (véc-tơ gây bệnh) bao gồm các chuyển động tránh xa khỏi kích thích hóa học đó, ức chế sự thu hút làm giảm sự phát hiện ra vật chủ (con người) và giảmphảnứngkiếmăn[29].Cácchấtxuamuỗitrongkhônggiannàythườngkhông có độc tố quá lớn để tiêu diệt muỗi mà chỉ đủ gây khó chịu và thay đổi hành vi của muỗi, dẫn đến giảm sự tiếpxúc của muỗivới vậtchủ (con người)trongmột khoảng không gian nhất định từ đó giảm nguy cơ truyền bệnh[15].
Sự khác biệt giữa chất xua muỗi trong không gian (spatial repellent)và chất xua muỗi dạng tiếp xúc (contact repellent)
Cácchấtxua muỗinày đềucó cơchếngănchặnsựtiếpxúc củamuỗi(véc-tơtruyền bệnh) bằng cách phá vỡ hành vi hoặc gián đoạn việc tiếp cận vật chủ dẫn đến việc giảm nguy cơ truyền bệnh[24].
Bảng2.2.Sosánhsựkhácbiệtgiữachấtxuamuỗitrongkhônggian(spatial repellent) và chất xua muỗi dạng tiếp xúc (contact repellent)
-C á c hợpchấtdạngnàyrấtdễbayhơi và có khả năng khuếch tán trong không khí ở trong khoảngkhônggian nhất định xung quanh vật chủ (con người) gây cản trở muỗi trên con đường tìm đến vật chủ.
-C á c h ợ p c h ấ t d ạ n g n à y c h ỉ p h á t h u y t á c dụngxuamuỗikhimuỗiđếngần hoặc tiếp xúc trực tiếp với bềmặt(da) mà có sự hiện diện của chúng.
-C ơ c h ế c h í n h x á c c ủ a c á c c h ấ t xuamuỗi trong không gian hiện nay chưa rõ ràng, một số cơ chế đề xuất nhưdotácđộngcủacácchấtnàylêncác thụ thể cảm nhận mùi của muỗi vànhữngchấtnàycũngcókhảnăng gây đột biến các ăng-ten của muỗi.
Ngănmùihươngtiếtra từvậtchủlà các chất hữu cơ dễ bay hơi (L- lacticacidand1-octen-3- ol)hoặcCO2gâyhấp dẫn muỗi.
Giảmphảnứngăng-tencủamuỗido ức chế hoạt động các thụ thểthần kinh cảm nhận mùi của muỗi khiến muỗi giảm khả năng nhận biết mùi cũngn h ư g i ả m k h ả n ă n g t ì m kiếm vậtchủ.
C á c chấtcókhảnăngxuamuỗitrongkh ông gian: các hợp chấtpyrethroid(Transfluthrin và
-C á c chấtxuamuỗidạngtiếpxúc:các hợp chất hóa học (DEET, PMD…) và một số tinh dầu tự nhiên(sảshanh, sả Java, bạch đàn chanh…)
-C á c d ạ n g s ả n p h ẩ m x u a m u ỗ i t r o n g k h ô n g g i a n h i ệ n n a y c ó t r ê n t h ị t r ư ờ n g : Nhangxuamuỗi,nến,miếng dán đuổi muỗi trong không gian, dạngx ị t đ u ổ i m u ỗ i t r o n g không gian…[24]
Lợiíchcủaviệcsửdụngchấtxuamuỗitrongkhônggian
- Ngănchặnsựtiếpxúccủamuỗivớivậtchủbằngcáchgâynhiễuloạnchuỗihành vi trước, trong và sau khi hút máu (truyền bệnh) của muỗi Hơn thế nữa còn xua đuổiđượcnhiềuloạivéc-tơhútmáukhácnhauvàcácvéc-tơloàichânđốttruyền bệnh khác.
- Dođộctínhkhôngcaonênchỉgâyảnhhưởngtớimuỗinhưngkhônggâyhạicho sức khỏe con người và những loài không phải vật chủ của muỗi.
- Giảmsựđềkhángsovớicácloạithuốc,sảnphẩmtiêudiệtvéc-tơtruyềnbệnhtừ đó giúp tăng tính bền vững của các can thiệp hóa học hiện có và mới.
- Muỗikhikhôngtiếpxúcđượcvớivậtchủchínhlàngườisẽmấtđinguồnthứcăn vàsẽtìmvậtchủkhácđểthaythế(màkhôngthểmangmầmbệnhmàmuỗitruyền qua)dođósẽlàmgiảmkhảnănggâybệnhchoconngười.Đồngthời,thiếunguồn thứcănchínhtừmáungườivàthêmcáctácnhânkhắcnghiệtkháctừmôitrường
(Nhiệtđộ,độẩm,cácloàithiênđịch…)dẫnđếnlàmgiảmsốlượngloàimuỗimột cách tự nhiên mà không cần đến các chất độc hóa học để tiêu diệt chúng.
Phươngphápđánhgiáxuamuỗitrongkhônggian
- Theo WHO (2013), phương pháp thử nghiệm khả năng thu hút-ức chế vật chủ (host attraction-inhibition) nhằm mục đích đo lường khả năng của một chất có hoạt tính được thử nghiệm (active ingredient) trong việc ức chế sự thu hút của muỗi/côn trùng đối với vật chủ Phương pháp thử nghiệm này được thực hiện bằng cách sử dụng một máy đo khứu giác được khuyến nghị với dạng thiết kế cổng kép, chẳng hạn như một ống chữ Y (Y-olfactometer) để thử nghiệm sự thu hút đối với mùi của vật chủ trong trường hợp đồng thời có mặt và không có mặt của chất thử nghiệm[29].
- Giới thiệu về hệ thống hình chữ Y của G.Nentwig và cộng sự (2016)[17]: hệ thốngcóhìnhdạngchữ Yvớibaphầnchính,20-25conmuỗicáiđóisẽđượcthả ởvịtríC,tronghaivịtríAvàBthìsẽcómộtvịtríđặtmẫuthửđượcđánhgiácó tiềmnăng xua muỗi được pha trongethanol và vị trícòn lại sẽ chỉ có mẫuchứng là ethanol Sau đó, đặt tay vào hai vị trí cùng với mẫu thử và mẫu chứng để thu hút muỗi Muỗi sau đó sẽ chọn một trong hai vị trí A và B để bay tới, sau thời gian thử nghiệm,tính số muỗi và đánh giá khả năng xua muỗi của chất khảo sát.
Trong nghiên cứu này tác giả thử nghiệm khả năng thu hút-ức chế vật chủ để đánh giá tinh dầu quế về khả năng xua muỗi trong không gian Tuy nhiên, tác giả sẽ thiết kế và cải tiến mô hình dựa trên sự tham khảo hệ thống chữ Y của WHO (2013) và của G Nentwig cùng cộngsự (2016) theo hướngphù hợpvà đơngiảnvới mục đích thử nghiệm của bài nghiên cứu.
Tìnhhìnhnghiêncứutrongvàngoàinước
Tìnhhìnhnghiêncứuởngoàinước
Changvàcộngsự(2006)đãnghiêncứu“KhảnăngxuamuỗiAedesaegyptitừthành phần hóa học có trong vỏ quếCinnamomum cassiavà sản phẩm kem có chứa tinh dầu quế trong điều kiện phòng thí nghiệm và trong nhà ở” Trong nghiên cứu này nghiên cứu thành phần hóa học có trong vỏ quế, tinh dầu quế và một sản phẩm kem chứa5% (w/w) tinh dầu quế là (E)-Cinnamaldehyd và so sánh khả năng xua muỗi của chất này với DEET, Cinnamyl Alcohol cùng với hai chất xua muỗi từ trong sản phẩm thương mại (kem Meimei chứa tinh dầu sả và tinh dầu phong lữ, bình xịtRepellan S chứa 19% DEET) ở hai điều kiện chính là trong phòng thí nghiệm và trong nhà Kết quả đầu tiên thực hiện tại phòng thí nghiệm cho thấy, ở thử nghiệmdạngmiếngdán,(E)-Cinnamaldehydở0,153mg/cm 2 vàDEETở0,051mg/cm 2 cung cấp khả năng bảo vệ khỏi muỗiAedes aegyptilần lượt là 93% và 89% sau 40 phút. Trong các thử nghiệm trên da thì cho thấy (E)-Cinnamaldehyd ở 0,051 mg/cm 2 và DEET ở 0,025 mg/cm 2 có khả năng bảo vệ lần lượt là 87% và 95% sau 30 phút So vớiCinnamylAlcoholởcảhaithửnghiệmnhưtrênthì(E)-Cinnamaldehydvẫnđem lạikếtquảcaođángkểhơn.Nghiêncứuởđiềukiệntrongnhàvới4tìnhnguyệnviên thì loại kem chứa 5% tinh dầu quế cung cấp khả năng bảo vệ khỏi muỗi cáiAedesaegyptilần lượt 94% trong 30 phút, 83% trong 30 phút, 61% trong 70 phút và kém hiệu quả hơn một chút so với loại kem trên thị trường là Meimei, trong khi đó bình xịtRepellanScóhiệuquả91%khảnăngxua muỗitrong120phút.Cácsảnphẩmtự nhiên có chứa tinh dầu quế đang được nghiên cứu sâu hơn như là một chất xua đuổi muỗitiềmnăngbảovệconngườivàvậtnuôikhỏicácvậttrunggianhútmáuvàcác bệnh truyền nhiễm[21].
Tìnhhìnhnghiêncứuởtrongnước
Hiện nay, ở Việt Nam chưa có công trình nghiên cứu nào thực hiện nghiên cứu khả năng xua muỗiAedes aegyptitrong không gian của tinh dầu quế Tuy nhiên trong nhữngnămgầnđâyvẫncómộtsốnghiêncứunhấtđịnhvềkhảnăngxuamuỗiAedesaegypticủa một số loại tinh dầu khác.
Lê Thị Hồng Hạnh (2019), nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu khả năng diệt bọ gậy và xua đuổi muỗiAedes aegyptigây bệnh sốt xuất huyết của tinh dầu bạch đàn chanh (Corymbiacitriodora)”đãchỉrarằngtinhdầubạchđànđượcchưngcấtbằngphương pháplôicuốntheohơinướcvớithờigianchưngcấtphù hợpvàhiệuquảnhấtlà vào khoảng 120phút,đólà lúclượngtinhdầu trongláđã hếtvà hàmlượngcủa tinhdầu là 2.13% Tinh dầu bạch đàn chứa các thành phần chính như citronellal (78.55%), citronelol(12.08%)vàisopulegol(7.19%),cácthànhphầnnàychiếmhàmlượngkhá caotrongtinhdầu.Tinhdầuđónggópvaitròkhálớntrongđờisốngconngười,mang lại nhiều lợi ích,đặc biệt là khả năng tiêu diệt và xua đuổi các loại côn trùng Tinh dầucóthểdiệtbọgậyởnồngđộthấp.Nồngđộgâychết50%bọgậy(LC50)là98.46 ppm và 90%(LC90) là 165.84 ppm Khả năng xua đuổi muỗi của tinh dầu được thể hiệnbằngthờigianbảovệ,ởnồngđộ100%, thờigianbảovệtrungbìnhlà90phút,
50%là67.5phút,và25%là45phút.Bêncạnhđó,tinhdầukhônggâyrabấtkìtriệu chứng bất thường trên cơ thể người[5].
NguyễnThịThanhHiếu(2019),đãnghiêncứuđềtài“Nghiêncứuchiếtxuấttinhdầu và bào chế gel có tác dụng xua muỗi truyền bệnh sốt xuất huyết từ sả Java (Cymbopogonwinterianus)”chothấyhàmlượngtinhdầuởlásảtươivàlásảkhôcó một sự chênh lệch đáng kể Hàm lượng tinh dầu thu được tối đa là 2,21% và 1,30% lần lượt đối với lá sả khô và lá sả tươi sau 120 phút chưng cất Phân tích tinh dầu sả bằng phương pháp GS-MS thu được 19 thành phần hóa học, trong đó 2 thành phần có hàm lượng cao nhất là elemol (lá tươi 29,47%, lá khô 24,62%) và citronellal (lá tươi23,45%,lákhô23,22%).Tácdụngxuađuổimuỗiởcácmứcnồngđộ25%,50%, 100% cho thời gian bảo vệ lần lượt là 45 phút, 165 phút, 285 phút, gel tinh dầu cho thời gian bảo vệ là 135 phút ở mức nồng độ 16%[7].
Qua những nghiên cứu này cho thấy tinh dầu có tiềm năng lớn trong việc xua đuổi côntrùngđặcbiệtlàmuỗi,cókhảnăngthaythếnhữnghợpchấthóahọcđộchại.Bên cạnh đó việc nghiêncứukhả năngxua muỗi ở trongkhônggian của tinhdầu nhấtlà tinh dầu quế sẽ là tiền đề để tạo ra các sản phẩm giúp cải thiện những tác dụng phụ xảy ra trên cơ thể người cũng như vẫn giữ được tác dụng tối ưu trong việc xua đuổimuỗi.
Đốitượngnghiêncứu
- Quy trình chiết xuất tinh dầu quế (Cinnamomum cassia) trong phòng thí nghiệm và xác định thành phần hóa học của tinh dầu quế.
- Hệ thống thử nghiệm khả năng xua muỗiAedes aegyptitrong không giantheok h u y ế n c á o c ủ a W H O ( 2 0 1 3 )
Thờigiannghiêncứu
Địađiểmnghiêncứu
Đốitượngvàvậtliệudùngtrongthửnghiệm
Đốitượngthửnghiệm
- NguyênliệuvỏquếmuaởxãĐàoThịnh,huyệnTrấnYên,tỉnhYênBái,doCông ty Sản xuất và Thương mại Mộc Yến Bag cung cấp vào tháng 9 năm 2020.
- Tinhdầuvỏquế(Cinnamomumcassia)thuđượcbằngphươngphápchưngcấtlôi cuốn hơi nước ở bộ môn Hóa hữu cơ, trường Đại học Lạc Hồng.
- Hệ thống thử nghiệm khả năng xua muỗi trong không gian được thiết kế và cải tiến dựa theo hướng dẫn của WHO (2013).
- MuỗiAedesaegyptinuôitrong phòng thí nghiệm(đãđượcđịnh danh tạibộ môn Ký sinh trùng, trường Đại học Lạc Hồng).
Vậtliệudùngtrongthửnghiệm
STT Têndụngcụ/thiếtbị Hãngsảnxuất Xuấtxứ
2 Becher100ml,250ml,500ml Bomex TrungQuốc
- 6tấmnhựaacrylictrongsuốtdày3mm(2tấmkíchthước30×30cm,4tấmkích thước
- 4ốngnhựatrongsuốt(2ốngđườngkính9cm,dài15cmvà 2ốngđườngkính9 cm, dài 20 cm).
- Lưới vải cứng chất liệu polyester và các miếng nhựa hình tròn dùng để làm nắp chặn đường kính 9 cm.
- 2cáiquạt hút,kíchthước 2×2cm,công suất1W.
Phươngphápnghiêncứu
Sơđồnghiêncứu
Xây dựng quy trình chiết xuất tinh dầu quế (Cinnamomum cassia)trong phòng thí nghiệm
Bước 1:nguyên liệu vỏ quế sau khi được xử lý đem đi xay nhuyễn thành bột mịn, sauđócân30(g)bộtvỏquếvàngâmtrongnướccấtvớitỉlệbộtvỏ quếsovớinước cất là 30:300 (g/ml) trong vòng 30 phút.
Bước2:tiếnhànhlắpđặthệthốngchưngcấtlôicuốnhơinướcvàchưngcấttinhdầu quế,luôngiữnhiệtđộở100 o C,trongquátrìnhchưngcấtthuđượcsảnphẩmchưng cấtlàdịchcómàutrắngđụcnhưsữa,chưngcấtchođếnkhikhôngcònthuđượcdịch trắng sữa.
Bước 3:150 ml dịch chưng cất thu được sẽ được tách nước bằng dung môi hữu cơ
(chloroformhoặcdichloromethan)vớitỉlệdịchchưngcấtsovớidungmôilàcứ100 ml dịch chưng cất được chiết với 90 ml dung môi, trong đó chia số lần chiết thành nhiều lần và mỗi lần chiết trong 15 phút bằng bình lắng gạn 250 ml.
Bước 4:loại bỏ dung môi từ dịch chiết bằng máy cô quay chân không để thu được tinhdầuquếnguyênchất,lượngtinhdầuthuđượcrấtnhỏdođókhôngcôquayhoàn toàn Tinh dầu quế thu được cho vào trong lọ thủy tinh, tráng bình cầu sau khi cô quay bằng 1 ml dung môi rồi đổ lại vào lọ thủy tinh đựng tinh dầu để tránh bị hao hụt, sau đó do còn lẫn ít dung môi nên sau khi cho vào lọ thủy tinh không đậy nắpngaymàđểdungmôibayhơihết.Sau1ngày,tiếptụclàmkhanbằngNa 2 SO4đểloạibỏ hoàn toàn nước dư rồi tiến hành cân sản phẩm và tính hàm lượng tinh dầu thuđược.
Saukhichưngcấtvớimộtkhốilượngnguyênliệuquếm(g),thìhàmlượngtinhdầu được tính theo công thức:
Hàm lượng tinh dầu (%) = Khối lượng tinh dầu
Khảo sát một số yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất chiết xuất tinh dầuquế
Tiếnhànhchưngcất30gbộtvỏquếbằngphươngphápchưngcấtlôicuốnhơinước theo quy trình chung đã đề ra Ở bước 3 (chiết bằng dung môi), tiến hành khảo sát chiết trên hai dung môi khác nhau là chloroform và dichloromethan, với mỗi dung môi sẽ tiến hành 3 lần.
Sosánhcảmquanvàhàmlượngtinhdầusaukhichiếtbằnghaidungmôichloroform và dichloromethan và chọn ra dung môi chiết xuất tối ưu.
Thí nghiệm 2: khảo sát hàm lượng tinh dầu thu được khi chiết xuất thêm với muối và chiết xuất không dùng muối
Khảo sát 1:tiến hành chưng cất 30 g bột vỏ quế bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước theo quy trình chung đã đề ra mà không sử dụng muối và xác định hàm lượng tinh dầu thu được (kết quả được lấy từ thí nghiệm 1).
Khảo sát 2:tiến hành chiết 30 g bột vỏ quế bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước theo quy trình chung, sau khi thu được dịch chưng cất tiến hành cho muối NaCl vào với tỉ lệ muối NaCl so với dịch chưng cất là 15:150 (g/ml) khuấy đều cho tanhoàntoànvàtiếptụcdùngdungmôiđểtáchtinhdầurakhỏidịchchưngcất.Xác định hàm lượng tinh dầu thu được (số lần thực hiện: 3 lần)
Khảosát3:tiếnhànhchothêm15gmuốiNaClvà30gbộtvỏquếvàotrong300ml nướccất và ngâmtrong24giờtrướckhichưngcất Sauđó tiếnhànhchưngcất theo quy trình chung và xác định hàm lượng tinh dầu thu được (số lần thực hiện: 3 lần)
Sosánhcảmquanvàhàmlượngtinhdầusaukhichiếtvớimuốivàkhikhôngcó muối và chọn ra quy trình chiết xuất đem lại hiệu suất cao nhất.
Phântíchthànhphầncótrongtinhdầuquế
Mẫu tinh dầu vỏ quế sau khi chưng cất tại phòng thí nghiệm sẽ được đem phân tích tại Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng – phòng phân tích Hóa Lý.
Chỉtiêuphântích:Phântínhhàmlượngthànhphầncáchợpchấttrong mẫutinhdầu vỏ quế bằng phương pháp GC-MS.
Mẫutinhdầu(25àL)phatrong1.0mLn-hexan.Tiờmmẫu:1.0àL Mỏy GC
CộtHP5-MS,ápsuấtHeđầucột9.3psi,tỉlệchiadòng1:50
Chươngtrìnhnhiệtchomẫu:50 o Cgiữtrong2phútsauđótăng2 o C/phútđến80 o C, tăng
5 o C/phút đến 150 o C, tiếp tục tăng 10 o C/phút đến 200 o C, tăng 20 o C/phút đến 300 o C giữ trong 5 phút.
Ghi nhận kết quả về thành phần chính và hàm lượng có trong mẫu tinh dầu vỏ quế sau khi đem phân tích và nhận xét.
Xâydựnghệthốngthửnghiệmkhảnăngxuamuỗitrongkhônggian
- Thiết kế hệ thống bằng nhựa acrylic dựa trên tham khảo tài liệu về hệ thống đo khứu giác hình chữ Y của WHO (2013) (Y-tube Olfactometer) và hệ thống hình chữ Y của G Nentwig và cộng sự (2016).
- Saukhithamkhảocácnguồntàiliệunóitrênthìtácgiảnghiêncứutiếnhànhxây dựng và cải tiến lại hệ thống để phù hợp với thí nghiệm của bài nghiên cứu Hệ thốngđượcthiếtkếđểđánhgiákhảnăngxuamuỗitrongkhônggiancủachấtthử nghiệm bằng cách tạo ra một không gian khép kín dạng cổng kép để thử nghiệm khả năng xua muỗi trong không gian khi có mặt đồng thời mẫu thử được xem là chất có tác dụng xua muỗi trong không gian và mẫu đối chứng Hệ thống được thiết kế có dạng hình chữ Y bao gồm các bộ phận: Ống dẫn muỗi vào lồng chứa
(1);Lồngchứamuỗi(2);Ốngbắtmuỗi(3);Ốngchứamẫuthử(4).Trongđó,một tronghainhánhchữYtạivịtríốngchứamẫuthử(4)sẽchứamẫuthửnghiệmmà được xem là có khả năng xua muỗi trong không gian và nhánh còn lại chứa mẫu đốichứng,đồngthờiởcảhainhánhsẽcótácnhânkíchthíchmuỗiđóilàvậtchủ của muỗi (tay người) Sau khi muỗi đói thử nghiệm được cho vào hệ thống và ở tronglồngchứamuỗi(2)chúngsẽquyếtđịnhhướngdichuyểnvàomộttronghai nhánhcủahệthốnghìnhchữYđểtìmnguồnthứcăn(dobịkíchthíchtừtínhiệu của vật chủ) tuy nhiên chúng sẽ bị giữ lại ở vị trí ống bắt muỗi (3) mà không thể đến được tay người Khi kết thúc thử nghiệm, chất thử nghiệm sẽ được đánh giá khảnăngxuamuỗitrongkhônggianbằngcáchđếmsốlượngmuỗitrongốngbắt muỗi (3) ở cả hai nhánh của hệ thống và được tính toán phần trăm khả năng xua muỗi trong không gian của chất đó.
Hình3.4.Bảnvẽthiếtkếhệthốngthửnghiệmxuamuỗitrongkhônggiancủatác giả nghiên cứu
Đánhgiákhảnăngxuamuỗitrongkhônggiancủatinhdầuquế
- 20 con muỗi cáiAedes aegypti5-7 ngày tuổi được nuôi bằng đường saccharose 10% tại phòng thí nghiệm với điều kiện nhiệt độ 27±2 o C và độ ẩm là 80±10%, không có mầm bệnh và chưa hút máu trước đó, muỗi cái sẽ bị bỏ đói 24 tiếng trước khi thử nghiệm.
- Hệ thống thử nghiệm khả năng xua muỗi trong không gian được tác giả nghiên cứu xây dựng.
- Tình nguyện viên khi tham gia làm thử nghiệm phải đảm bảo trên tay không có mùi nước hoa hoặc các chất có mùi nào khác.
3.5.6.2 Thử nghiệm đánh giá khả năng xua muỗi trong không gian của tinh dầu quế
Bước 1:chuẩn bị lồng muỗi chứa 20 con muỗi cái với kích thước lồng 30×20×20 cm, đặt vào vị trí thích hợp Tình nguyện viên rửa tay bằng nước sạch, để khô tựnhiên.
Bước 2:lắp đặt hệ thống thử nghiệm xua muỗi trong không gian, đảm bảo hệ thống phải sạch và không có mùi tồn dư.
Bước3:chuẩnbịmẫuthửtinhdầuquếhoặcmẫuDEETphatrongethanolởcácnồng độ thử nghiệm, dựng micropipet hỳt 0,15 ml (150 àl) mẫu thử và 0,15 ml (150 àl) mẫuđốichứnglàethanolsauđóthấmđềutrênmặtgiấylọc2×3cmrồiđặtvàotrong đĩa petri.
Bước 4:thử nghiệm khả năng xua muỗitrongkhônggiancủa chấtthử nghiệm(tinh dầuquếhoặcDEET)bằnghệthốngthửnghiệmkhảnăngxuamuỗitrongkhônggian hình chữ Y đã xây dựng Sau khi thấm mẫu thử và mẫu đối chứng trên giấy lọc, để yêntrongvòng5phút, sauđó tiếnhànhchomẫuthử ởnồngđộ thửnghiệm vào một bên ống ở vị trí ống chứa mẫu thử của hệ thống và ống ở nhánh còn lại là mẫu đối chứng (ethanol) rồi đặt hai tay vào cả hai bên ống để kích thích muỗi đói (lưu ý hai taycầnphảiđặtngangvịtrívớinhau),cứ30phútđếmsốmuỗi1lầncảhaiốngởhai nhánh và đếm tại 3 thời điểm 30, 60, 90 phút (số muỗi thu hút được đếm bằng cách cộng dồn sau mỗi lần đếm, lần đếm cuối cùng chính là tổng số muỗi đã bị thu hút trongmộtlầntest).Tổngsốlầnđếmmuỗitrong1thửnghiệmlà3lầntươngứngtổng thời gian thực hiện thử nghiệm là 90 phút.
Mỗichấtthửnghiệmthựchiện2lầnvớimỗilầnthửnghiệmsẽđổivịtríđặtmẫuthử vàmẫuđốichứngchonhau(vídụnếulầnthửnghiệm1vịtríốngbênphíataytráilà mẫu thử và vịtrí ống bên phải là mẫu đối chứng thì lần 2sẽ ngược lại) và đồng thời thay toàn bộ lô muỗi mới sau mỗi lần thử nghiệm Ghi nhận kết quả và nhận xét.
Thời giant ương ứng(p hút)
Bước5:Kếtquảtrungbìnhsaukhighinhậnởbảng3.2.sẽđượctínhtheocôngthức dướiđây để sosánhtỉlệ phần trămkhả năng xua muỗitrongkhônggian ởcác nồng độ khác nhau sau
30, 60 và 90 phút Tính kết quả và nhận xét.
Xlàtỉlệphầntrămkhảnăngxuamuỗicủa mẫuthửnghiệm(tinhdầu quếhoặc DEET
N2l àtổngsốmuỗicái đivàoống bắtmuỗiphíacóchứamẫu đốichứng(con)X=+100:
Khả năng xua muỗi cao nhất
Bảng3.3.Kếtquảtỉlệphầntrămkhảnăngxuamuỗitrongkhônggian củacácchất thử nghiệm theo thời gian (giá trị trung bình)
Tinhdầu quế5%Tinhdầu quế1%DEET10%
Tínhcảmquancủatinhdầuquế
- Tinhdầuquếdạnglỏng,trongsuốt,cómàuvàngnhạtlúcmớivừachưngcấtxong và màu vàng đậm dần lên theo thời gian do bị oxy hóa.
Hình4.2.Tinhdầuquế saukhimớichưngcất(bêntrái)và tinhdầuquếbịkếttinh sau một thời gian tiếp xúc với không khí (bên phải)
Nhận xét:tinh dầu quế sau một thời gian ngắn tiếp xúc với ánh sáng và không khí bên ngoài thì thường bị kết tinh ngay cả ở nhiệt độ thường Do thành phần chính có trong tinh dầu quế là cinnamaldehyd, thành phần này rất nhạy cảm với ánh sáng Vì vậy,để bảo quảntinhdầu quế trongthời gian dàivà tránh tinhdầubị biếnđổithành dạng tinh thể, cần phải đậy nắp thật kín và lọ đựng tối màu, để ở nơi không có ánhsáng.
Khảosátmộtsốyếutốảnhhưởngđếnhiệusuấtchiếtxuấttinhdầuquế
Thínghiệm1:Sosánhhàmlượngtinhdầuthuđượcsaukhichiếtbằngcácdung môi chiết khác nhau
Hình4.4.Chiếttinhdầuquếbằng dung môi chloroform Hình4.5.Chiếttinhdầuquếbằng dung môi dichloromethan
-T á c h l ớ p h o à n t o à n , c ó m ộ t v ò n g n h ạ t màutrắngđụcngăncáchgiữa lớp trên và lớp dưới.
- Màu dịch chiết: có màu vàngnhạtvà trong.
Hình4.6.Sảnphẩmtinhdầuquế chiết bằng dung môi chloroform Hình 4.7.Sản phẩm tinh dầu quế chiếtbằngdungmôidichloromethan
-C ả m quan:màuvàngtrong,rấtítcặn và không thấy có xuấthiệntinh thể.
-C ả m q u a n : m à u v à n g n h ạ t v à hơiđục,cólẫnnhiềucặnvàmộtíttin h thể đang hình thành sớm.
Nhậnxét:từbảngkếtquả4.1chothấyhaidungmôiđềucókhảnăngchiếtxuấttinh dầuquế,tuynhiênnếuchiếtbằngchloroformsẽtiếtkiệmthờigiandodungmôitách lớp nhanh và sản phẩm tinh dầu lâu bị kết tinh hơn.
Khốilượn gbì + tinh dầu thu được(g) (m2)
Hàmlượ ngtinhd ầuthuđư ợctrung bình (%)
Nhận xét:chiết bằng dung môi chloroform cho hàm lượng tinh dầu quế khoảng
2,55%cóhiệusuấtcaohơnsovớichiếtbằngdichloromethanchỉchohàmlượngtinh dầu quế khoảng 1,93% Do đó có thể dùng chloroform cho những lần chiết xuất và khảo sát tiếp theo để đem lại hiệu suất tốt nhất.
Thí nghiệm 2: khảo sát hàm lượng tinh dầu thu được khi chiết xuất thêm vớim u ố i v à c h i ế t x u ấ t k h ô n g d ù n g m u ố i
Khốilượn gbì + tinh dầu thu được(g) (m2)
Hàm lượng tinhdầu thuđượ ctrung bình (%)
Chiết bằngChloro form(khảos át1)
Muối và chiết bằngChloro form (khảosát2)
Ngâm bột vỏ Quế với muối24giờ và chiếtbằngC hloroform
Nhậnxét:trongquátrìnhchiếtchưathấyđượcsựkhácbiệtgiữaviệcchiếtxuấttinh dầu quế có sử dụng thêm muối và không sử dụng muối Về hàm lượng tinh dầu thì có thể thấy chỉ cần chiết với dung môi chloroform thì vẫn đem lại hiệu suất cao hơn so với việc sử dụng thêm muối trong quá trình chiết xuất Do đó trong phòng thí nghiệm ta có thể dùng dung môi chloroform để chiết xuất nhằm giúp tiết kiệm thời gian và nguyên liệu đồng thời lượng tinh dầu tinh khiết đủ với nhu cầu sử dụng.
Kết luận:sau khi thực hiện các khảo sát về hiệu suất trong quy trình chiết xuất tinh dầutừvỏquếtạiphòngthínghiệm,tathấyphươngphápchưngcấtlôicuốnhơinước và chiết xuất bằng dung môi chloroform đem lại lợi ích tối ưu nhất với hàm lượng tinhdầutrungbìnhlà2,55%.Kếtquảnàycũngcósựtươngđồngvớinghiêncứucủa Geng và cộng sự (2011) khimà hàm lượng tinhdầu từ vỏcây quế thu đượctừ 0,41- 2,61% tùy vào độ tuổi và vị trí vỏ trên cây.
Phântíchthànhphầncótrongtinhdầuquế
SaukhiphântíchbằngphươngphápGC-MSxácđịnhđượccácthànhphầnchính có trong tinh dầu từ vỏ quế (Bảng 4.4).
TT Rt Tênchất Mw Match
Nhận xét:từ bảng kết quả cho thấy thành phần chiếm hàm lượng cao nhất ở mẫu tinh dầu vỏ quế là (E)-Cinnamaldehyd (trans-Cinnamaldehyd) với hàm lượng99,24% Kết quả này phù hợp với mô tả của Dược Điển Việt Nam V và nghiên cứu của Jose và cộng sự (2019) về đánh giá hàm lượng có trong tinh dầu cây quếCinnamomumcassiađượctrồngởẤnĐộ.Bêncạnhđócònmộtsốchấtkháccótrong mẫu nhưng hàm lượng không đáng kể như α-Copaen, γ-Muurolen, α-Muurolen, δ-Cadinen là những thành phần có trong nhựa cây quế.
Xâydựnghệthốngthửnghiệmkhảnăngxuamuỗitrongkhônggian
Bước1:đầu tiên, thiết kế ống dẫn muỗi vào lồng chứa (1) bằng nhựa có dạng ống kích thước dài 20 cm, đường kính 9 cm. Ốngdẫn muỗivào lồngchứa (1) được dùngđể chuyểnmuỗiđói thử nghiệm từ lồng nuôi muỗi vào trong lồng chứa muỗi một cách dễ dàng, nhanh chóng và không tốn công sức.
Bước2:tiến hành lắp ráp lồng chứa muỗi (2) bằng cách ghép các tấm nhựa acrylic trong suốt vào với nhau tạo thành hình hộp chữ nhật khép kín (kích thước dài×rộng×cao là 40×30×30 cm), mặt trên có phần nắp để có thể vệ sinh bên trong sau mỗi lần thử nghiệm, phía mặt trên còn có các lỗ khí nhỏ để đủ không khí cho muỗi tồn tại suốt thời gian thử nghiệm.
Lồngchứa muỗi (2) là không gianchứa muỗi đóithử nghiệm, từ vịtrínày muỗi đói sẽ quyết định hướng di chuyển là một trong hai nhánh của hệ thống để tìm thức ăn khi bị kích thích bởi tín hiệu mùi của tác nhân kích thích từ vật chủ (tay người).
Bước 3:thiết kế hai ống bắt muỗi (3)làm bằng nhựa trong suốt có dạng ống kích thước dài 15 cm, đường kính 9 cm, một đầu có khớp nối với lồng bắt muỗi, gắn với miếng lưới nhựa hình nón và đầu còn lại được đậy kín bao phủ hết mặt ống bằng miếng lưới nhựa, đầu này cũng có khớp nối để nối với ống chứa mẫu thử. Ốngbắtmuỗi(3)cónhiệmvụgiữmuỗiởtrongốngtrongsuốtquátrìnhthửnghiệm đánhgiá.Nhờvàothiếtkếcủaống,khimuỗiđóigặptácnhânkíchthích(tayngười) chúngsẽdichuyểnvào mộttronghainhánh đểtìmthứcăntuynhiênmuỗisẽbịgiữ lại ở trong ống bắt muỗi mà không thể di chuyển tiếp để đến tay người hoặc bay ra khỏihệthốngcũngnhưkhôngthểbaytrởngượclạivịtrílồngchứamuỗi.Dođó,sau khikết thúc quá trìnhthử nghiệm có thể đếm được số muỗi trong ốngbắt muỗi ở cả hai vị trí để đánh giá.
Hình4.11.Muỗibịthuhútbịgiữlạiởtrongốngbắtmuỗi Bước4:thiếtkếhaiốngchứamẫuthử(4)làmbằngnhựatrongsuốtvớidạngốngcó chiềudài20cm,đườngkính9cm.Phíađầuốngcókhớpnốivớiốngbắtmuỗi,cách đầuốngkhoảng5cmgắnquạthútkíchthước 2×2cmcôngsuất1 W,côngsuấtvừa đủđểtăngkhảnănghútmùikíchthíchmuỗimàkhôngảnhhưởngđếnkhảnăngbay vào ống bắt muỗi của muỗi, quạt hút được gắn trực tiếp với nguồn điện. Ốngchứamẫu thử(4)làvịtrídùngđểđặt mẫuthửđượcxemcókhả năngxuamuỗi trong không gian và mẫu đối chứng, hai mẫu được đặt ở vị trí ngang bằng nhau và phía sau quạt hút khoảng 5 cm, đồng thời phía sau mẫu thử và mẫu đối chứng là vị trí đặt tác nhân kích thích muỗi đói, lưu ý tác nhân kích thích không có sự hiện diện của bất kì mùi hương nào khác gây khó chịu cho muỗi.
Hình4.13.Vịtríđặtmẫuthửnghiệm,mẫuđốichứngvàđặttay Bước5:lắpđặtốngbắtmuỗivàốngchứamẫuthửnhưhình4.15.
Bước 6:sau khi hoàn thiện từng bộ phận của hệ thống, tiến hành lắp ráp theo như hình 4.16.
Môtảcách thựchiện thửnghiệmvớihệthống: khibắtđầutiếnhành thửnghiệm,20 con muỗi cáiAedes aegyptiđói sẽ được dẫn vào lồng chứa muỗi thông qua ống dẫn muỗivàolồngchứa.Sauđó,chuẩnbịmẫuthử(tinhdầuquếởcácnồngđộthửnghiệm hoặc DEET10%), mẫu đối chứng (ethanol) và tác nhân kích thích muỗi đói (tay người) cũng được đặt đồng thời vào bên trong ống chứa mẫu thử Sử dụng quạt hút đểtăngkhảnănghútmùiđếnmuỗiđóinhờvậykíchthíchmuỗiđóinhanhchóng hơn.Theo lýthuyết, khimuỗiđóicảmnhận đượctác nhân kích thích,nếu có sự cản trở từ chất có khả năng xua muỗi trong không gian chúng sẽ quyết định không bay vàohướngcóchấtđómàsẽbaytheohướngcủanhánhcònlạinơikhôngcóchấtxua muỗi trong không gian, muỗi sẽ bị giữ lại trong ống bắt muỗi và không thể tiếp cận tácnhânkíchthíchcũngnhưkhôngthểbaytrởngượclạilồngchứamuỗi.Dođó,sau khi kết thúc thử nghiệm muỗi bị giữ lại trong ống bắt muỗi ở cả hai nhánh sẽ được đếmlạisốlượngtạicácthờiđiểmkhảosátvàtiếnhànhtínhtoánđểđánhgiákếtquả khả năng xua muỗi trong không gian của chất thử nghiệm.
Đánhgiákhảnăngxuamuỗitrongkhônggiancủatinhdầuquế
Kếtquảthửnghiệmkhảnăngxuamuỗitrongkhônggiancủatinhdầu quếBảng 4.5.Bảng đếm số lượng muỗi bị thu hút của các chất thử nghiệm
Thời giant ương ứng(p hút)
Bảng4.6.Kếtquảtỉlệphầntrămkhảnăngxuamuỗitrongkhônggian củacácchất thử nghiệm theo thời gian (giá trị trung bình)
Hình4.16.Biểuđồkếtquảtỉlệphầntrăm khả năngxua muỗitrongkhônggiancủa tinh dầu quế ở các nồng độ khác nhau và DEET 10% theo thời gian
Nhận xét:từ kết quả trên ghi nhận được khả năng của tinh dầu quế và DEET 10% trong việc xua đuổi muỗiAedes aegyptitrong không gian, cụ thể tinh dầu quế ở các nồng độ 25%, 15%, 5%, 1% có hiệu quả xua muỗi trên 60% trong khi DEET10% chỉcóhiệuquả33,33%trong30phútđầutiên.Vớitinhdầuquếởnồngđộ25%vẫn giữ hiệu quả kéo dài lên đến 90 phút với tỉ lệ phần trăm là 73,33% Tinh dầu quế ở nồng độ15% cũng có hiệu quả khá ổn định sau 90 phút thử nghiệm với tỉ lệ phần trăm khả năng xua muỗi là 57,14% Trong khi đó sau 90 phút thử nghiệm tinh dầu quếởnồngđộ5%và1%giảmhiệuquảđángkểlầnlượtcòn33,33%và17,65%,còn DEET 10% chỉ có hiệu quả 12,50% Kết quả trên cho ta thấy tinh dầu quế có hiệu quả xua muỗi trong không gian và hiệu quả tốt hơn DEET 10% Do đó tinh dầu quế cótiềmnăngđểsảnxuấtthànhnhữngsảnphẩmtựnhiênhữuíchxuađuổimuỗitrong không gian và đồng thời an toàn cho sức khỏe con người.
Kếtluận
Đây là nghiên cứu đầu tiên ở Việt Nam đánh giá khả năng xua đuổi muỗiAedesaegyptigây bệnh sốt xuất huyết ở trong không gian của tinh dầu quế (Cinnamomumcassia) và thu được những kết quả sau đây:
Nghiên cứu đã xây dựng được quy trình chiết xuất tinh dầu quế tối ưu bằng phương pháp chưng cất lôi cuốn hơi nước và chiết xuất bằng dung môi chloroform với hàm lượng trung bình thu được là 2,55%.
Thànhphầnchínhtìmđượctrongtinhdầuởvỏquếlàcinnamaldehydvớihàmlượng rất cao là 99,24% Ngoài ra tinh dầu quế rất dễ biến đổi thành dạng tinh thể acid cinnamic do tác động của ánh sáng và tính chất dễ bị oxy hóa của nó.
Xâydựngthànhcônghệthốngthửnghiệmkhảnăngxuamuỗitrongkhônggiandạng chữYtheohướngdẫncủaWHO(2013)vàmộtsốtàiliệuthamkhảokhácnhằmgiúp đánhgiákhảnăngxuamuỗitrongkhônggiancủacácmẫuthửcóhoạttínhxuamuỗi Đánh giá được khả năngxua muỗi trong khônggian của tinhdầu quế ởcác nồngđộ 25%,15%,5%,1%vàDEET10%sau90phútlầnlượtlà73,33%,57,14%,33,33%,
17,65% và 12,50%.Từ kếtquả trên ta thấy tinhdầu quế có hiệuquả xua muỗi trong không gian và có hiệu quả tốt hơn DEET 10%.
Đềnghị
Nghiên cứu thêm về khả năng xua muỗiAedes aegyptitrong không gian củanhiều loại tinh dầu khác.
Bào chế các chế phẩm xua đuổi muỗiAedes aegyptidùng trong không gian nhưlà dạnghươngxuamuỗi,haymiếngdáncótẩmchếphẩmchứatinhdầu,tiếnhànhkhảo sát khả năng bảo vệ (khoảng không gian, khoảng thời gian) của các chế phẩm.
[1].B ộ YTế(2017),DượcđiểnviệtnamV,NhàxuấtbảnYhọc,HàNội,tr.1494- 1496, tr.1402-1403.
[2].C ụ c YtếDựphòng-BộYtế(2020),Tìnhhìnhdịchbệnhsốtxuấthuyếtvàcácbiện pháp phòng chống trọng tâm,Cục Y tế Dự phòng-Bộ Y tế, truy cập ngày 08 tháng 05 năm
2021,.
[3].C ụ c Y t ế D ự p h ò n g - B ộ Y t ế ( 2 0 2 1 ) , Cách phòng bệnh sốt xuất huyết,Cục Y tếD ự p h ò n g -
.
[4].Đ ỗ TấtLợi(2004),NhữngcâythuốcvàvịthuốcViệtNam,NXBKhoahọcvà kỹ thuật, tr. 858-863.
[5].L ê ThịHồngHạnh(2019),NghiêncứukhảnăngdiệtbọgậyvàxuađuổimuỗiAedes aegypti gây bệnh sốt xuất huyết của tinh dầu bạch đàn chanh (Corymbia citriodora),Khoá luận Tốt nghiệp Đại học, Khoa Dược, Đại học Lạc Hồng.
[6].N g u y ễ n ThịHuỳnhNhư(2013),Khảosátcácyếutốảnhhưởngđếnkhảnăngtrích ly tinh dầu Quế bằng phương pháp chưng cất hơi nước tại phòng thí nghiệm côngtyOlamViệtNam,ĐồánTốtNghiệp,KhoaCôngnghệthựcphẩm,ĐạihọcKỹ thuật Công nghệ TP.HCM.
[7].N g u y ễ n T h ị T h a n h H i ế u ( 2 0 1 9 ) , Nghiên cứu chiết xuất tinh dầu và bào chếgel có tác dụng xua muỗi truyền bệnh sốt xuất huyết từ sả Java (Cymbopogon winterianus), Khoá luận Tốt nghiệp Đại học, Khoa Dược, Đại học
[8].N g u y ễ n V ă n N i n h ( 2 0 0 9 ) , Công Nghệ Chất Thơm Thiên Nhiên, NXB Bách Khoa- Hà Nội, tr 19-22.
[9].Q u y ế t địnhsố1499/QĐ-BYTvềviệchướngdẫngiámsátvàphòngchốngbệnhsốt xuất huyết Dengue,Bộ Y tế ban hành ngày 17 tháng 05 năm 2011.
[10].Q u y ế t đ ị n h s ố 3 7 0 5 / Q Đ - B Y T v ề v i ệ c h ư ớ n g d ẫ n c h ẩ n đ o á n , đ i ề u t r ị s ố t x u ấ t huyết Dengue,Bộ Y tế ban hành ngày 22 tháng 8 năm 2019.
[11].Q u y ế t đ ị n h s ố 4 5 8 / Q Đ - B Y T v ề v i ệ c h ư ớ n g d ẫ n c h ẩ n đ o á n , đ i ề u t r ị s ố t x u ấ t huyết Dengue,Bộ Y tế ban hành ngày 16 tháng 02 năm 2011.
[12].T r ầ n M i n h H ò a ( 2 0 2 0 ) , Đặc điểm dịch tễ của bệnh sốt xuất huyết Dengue tạihuyện Long Thành, tỉnh Đồng Nai từ năm 2008 - 2012 và kết quả của một số giải pháp can thiệp, Luận án Tiến sĩ Y học, khoa Y tế Công cộng,
Trường Đại học Y Dược Huế.
.
Aedes aegypti),truy cập ngày2 1 t h á n g 0 5 , n ă m 2 0 2 0 , < http://www.eliminatedengue.com/viet-nam/aegyp ti-vn>.
(2020),LifeCycleofAedesaegyptiandAe.albopictusMosquitoes , t r u ycậpngà y05tháng03năm2020,
.
[17] G Nentwig, et al., (2017), “Evaluation of Clove Oil, Icaridin, and Transfluthrinf o r S p a t i a l R e p e l l e n t E f f e c t s i n T h r e e T e s t s S y s t e m s A g a i n s t t h e Aedes aegypti(Diptera: Culicidae)”,Journal of Medical
[19].H a d d i , Khalid,LêdaRAFaroni,EugênioE.Oliveira(2017),“Cinnamonoil”,Green
R e m a , J ( 2 0 1 9 ) , “ E v a l u a t i o n of coumarin content and essential oil constituents in Cinnamomum cassia (Nees & T Nees) J. Presl”,Journal of Spices and Aromatic Crops,28(1), 43-51.
[21].K y u - S i k C h a n g , e t a l , ( 2 0 0 6 ) , “ R e p e l l e n c y o fCinnamomum cassiabark compounds and cream containing cassia oil toAedes aegypti(diptera: culicidae) under laboratory and indoor conditions”,pest management science, 62, 1032-1038.
[22].L i , S.,Han, Q.,Qiao,C.,Song,J.,Cheng, C L.,&Xu,H.(2008),“Chemical markers for the quality control of herbal medicines: an overview”,Chinesemedicine,3(1), 1-16.
V e g e t a b l e s ” , Integrated Processing Technologies for Food andAgricultural By-Products, Academic Press, pp 245-272.
[24].N o r r i s , E.J.,&Coats,J.R,(2017),“Currentandfuturerepellenttechnologies: the potential of spatial repellents and their place in mosquito-bornedisease control”,Internationalj o u r n a l o f e n v i r o n m e n t a l r e s e a r c h a n d p u b l i c h e a l t h ,14(2), 124.
[26].T h o m a s , J , K u r u v i l l a , K M ( 2 0 1 2 ) , “ C i n n a m o n ” ,Handbook of herbs andspices, Woodhead Publishing, pp 182-196.
[27].UN Food and Agriculture Organization Corporate Statistical Database (FAOSTAT)(2018),Globalcinnamonproductionin2017;Crops/Regions/WorldRegions/
ProductionQuantity(picklists),truycậpngày29tháng06năm2021,.
[28].W H O ( 2 0 0 9 ) ,Dengue: Guidelines for diagnosis, treatment, prevention andcontrol.
[30].W H O ( 2 0 2 1 ) , Dengue and severe dengue, truy cập ngày 19 tháng 05 năm 2021, .
VIỆNHÀNLÂMKHOAHỌCVÀ CỘNG HÒAXÃHỘICHỦNGHĨAVIỆTNAM CÔNGNGHỆVIỆTNAM Độclập – Tự do – Hạnhphúc
03ATL29,phườngThạnhLộc,Quận12,Tp.HCM ĐT: 08
38999198 Đơnvị:ĐạihọcLạcHồng PHIẾUKẾTQUẢ Địachỉ:10HuỳnhVănNghệ,phườngBửuLong,Tp.BiênHòa Tên khách hàng: thầy Hồ Dũng Mạnh
Tên mẫu: Tinh dầu vỏ quế
Chỉtiêuphântích:Phântínhhàmlượngthànhphầncáchợpchấttrongmẫutinh vỏ quế bằng phương pháp GCMS.
TT Rt Tênchất Mw Match
Mẫutinhdầu(25àL)phatrong1.0mLn-hexan.Tiờmmẫu:1.0àL Mỏy GC
CộtHP5-MS,ápsuấtHeđầucột9.3psi,tỉlệchiadòng1:50
Chươngtrìnhnhiệtchomẫu:50 o Cgiữtrong2phútsauđótăng2 o C/phútđến80 o C, tăng
5 o C/phút đến 150 o C, tiếp tục tăng 10 o C/phút đến 200 o C, tăng 20 o C/phút đến 300 o C giữ trong 5 phút.
Tp.HCM,ngày07tháng04năm2021
THEO Ý KIẾN HỘI ĐỒNG ĐÁNH GIÁ
NGHIÊNCỨUTHÀNHPHẦNHÓAHỌCVÀ KHẢNĂNGXUAMUỖI AEDESAEGYPTITRONG KHÔNGGIAN CỦA
TINH DẦU QUẾ ( CINNAMOMUM CASSIA )
1 Sửalỗichínhtả,lỗiviếthoacácdungmôivàtêndượcliệukhôngcóquyluật,chuyển danh pháp quốc tế của các hóa chất về tiếng Việt.
2 Chỉnh sửa văn phong, lỗi dùng từ đồng nghĩa và loại bỏ những từ tiếng Anh không cần thiết,
3 Sửalỗi dùngkítựđặcbiệt đểgạch đầudòng, bổ sung chú thích từviết tắt PMD vào danh mục các chữ viết tắt.
4 Bổ sung chú thích tiếng Việt vào các hình ảnh tiếng Anh, thêm trích dẫn nguồn vào cáchình ảnh,chuyểntríchdẫn tài liệu thamkhảotừvị trí tiêu đềxuống cuốiđoạnvăn.
Em xin cam kết đã bổ sung và chỉnh sửa các điểm nêu trên theo ý kiến đóng góp của hộiđồngvàgiảngviênhướngdẫn.Nếucógìsaisót,emxinhoàntoànchịutráchnhiệm theo quy định của Khoa và Nhà trường.