Trang 1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO Trang 2 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌC BÁO CÁO THỰC HÀNHKIỂM NGHIỆM VI SINH TRONG THỰC PHẨMGiản
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC BÁO CÁO THỰC HÀNH KIỂM NGHIỆM VI SINH TRONG THỰC PHẨM Ngành học : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành : CƠNG NGHỆ SINH HỌC Nhóm thực : NHĨM Niên khố : 2021 – 2025 Tháng 04 năm 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC BÁO CÁO THỰC HÀNH KIỂM NGHIỆM VI SINH TRONG THỰC PHẨM Giảng viên hướng dẫn Sinh viên thực TS TRƯƠNG PHƯỚC THIÊN HOÀNG NGUYỄN LAN ANH ThS LÊ PHƯỚC THỌ NGUYỄN THỊ LAN ANH ĐỖ NGỌC BẢO CHÂN HUỲNH NGỌC DƯƠNG PHẠM THỊ MỸ HẠNH ĐOÀN NGHI THẢO THÙY Tháng 04 năm 2023 MỤC LỤC MỤC LỤC DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH SÁCH CÁC HÌNH DANH SÁCH CÁC BẢNG Bài ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS VÀ E COLI 1.1 Định lượng Coliforms E coli phương pháp khuẩn lạc 1.1.1 Định lượng E coli phương pháp khuẩn lạc 1.1.2 Định lượng Coliforms phương pháp đếm khuẩn lạc 1.2 Định lượng Coliforms E coli phương pháp MPN 1.2.1 Môi trường LSB 1.2.2 Định lượng Coliforms phương pháp MPN 1.2.3 Định lượng E coli phương pháp MPN Bài ĐỊNH LƯỢNG SALMONELLA 3.1 Định tính Salmonella thực phẩm 3.1.1 Môi trường tăng sinh BPW 3.1.2 Môi trường tăng sinh chọn lọc RVS 3.1.3 Môi trường HE 3.1.4 Môi trường XLD Bài ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VI KHUẨN HIẾU KHÍ VÀ TỔNG NẤM MEN – NẤM MỐC i 4.1 Định lượng tổng vi khuẩn hiếu khí 4.1.1 Kết 4.1.2 Biện luận 4.1.3 Kết luận 4.2 Định lượng nấm men – nấm mốc 4.2.1 Kết 4.2.2 Biện luận 4.2.3 Kết luận ii DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT TBX: Tryptone Bile X glucuronide VRBL: Violet Red Bile Agar LSB: Lauryl Sulfate Broth BGBL: Brilliant Green Bile Broth Lactose EC: E Coli Medium EMB: Eosin Methylene Blue Agar BPW: Buffered Peptone Water RV: Rappaport Vassiliadis Soya HE: Hektoen Entric Agar XLD: Xylose Lysine Desoxycholate PCA: Plate Count Agar DRBC: Dichloran-Rose Bengal Chloramphenicol Agar DANH SÁCH CÁC HÌNH Hình 1.1 Mẫu nước mía mơi trường TBX Hình 1.2 Mẫu nước mía mơi trường VRBL Hình 1.3 Mẫu nước mía pha lỗng mơi trường LSB Hình 1.4 Mẫu nước mía pha lỗng mơi trường BGBL Hình 1.5 Mẫu nước mía pha lỗng mơi trường EC .5 Hình 1.6 Đĩa petri có E coli cấy ria mơi trường EMB .6 Hình 3.1 Mẫu tôm khô mua từ chợ .7 Hình 3.2 Mẫu đồng BPW .7 Hình 3.3 Mẫu sau 24 tăng sinh RV .8 Hình 3.4 Đĩa môi trường HE sau 24 phân lập khuẩn lạc Hình 3.5 Đĩa mơi trường XLD sau 24 phân lập khuẩn lạc Hình 4.1 Mẫu bún mơi trường PCA 10 Hình 4.2 Mẫu bún môi trường DRBC .11 DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 1.1 Số lượng khuẩn lạc môi trường TBX Bảng 3.1 Số lượng khuẩn lạc môi trường DRBC 12 Bài ĐỊNH LƯỢNG COLIFORMS VÀ E COLI 1.1 Định lượng Coliforms E coli phương pháp khuẩn lạc 1.1.1 Định lượng E coli phương pháp khuẩn lạc 1.1.1.1 Kết B A Hình 1.1 Mẫu nước mía mơi trường TBX A Nồng dộ 10-1; B Nồng độ 10-2 Nhận xét: khơng có xuất E coli môi trường TBX 1.1.1.2 Biện luận Môi trường TBX (Tryptone Bile X-glucuronide) môi trường màu thiết kế nhằm mục đích xác định làm giàu vi khuẩn Escherichia coli mẫu thực phẩm, thức ăn chăn nuôi nước E coli nuôi cấy Tryptone Bile X-Glucuronide (TBX) để xuất dạng khuẩn lạc màu xanh sau thời gian ủ bệnh 24 Escherichia coli có thời gian ủ 12 - 72 với nhiệt độ tăng trưởng tối ưu 37°C Số khuẩn lạc: số lượng khuẩn lạc đĩa có nồng độ pha loãng sau hai lần lặp lại nồng độ khác Do số lượng khuẩn đĩa nồng độ 10 -1 sau hai lần lặp lại không nên khơng cần đề cập hình đĩa có nồng độ 10-2 10-3 Qua thực nghiệm có xuất sinh vật hiếu khí mà khơng thấy tồn E coli nên không cần tiếp tục bước thí nghiệm Bảng 1.1 Số lượng khuẩn lạc môi trường TBX Nồng độ Số lần lăp lại 10-1 36 25 10-2 1 10-3 0 N= Σaa (n 1+0,1 n 2) ×V × d 36+25+1 = (2+0,1 ×2)× 10−1 ×10−2 ¿ 2,8 ×1 04 CFU/ml 1.1.1.3 Kết luận Trên mẫu nước mía nghi ngờ có xuất E coli thấp (250 >250 10-2 125 240 10-3 55 57 125+240+ 55+57 =216818 ≈ 2,17 ×105 CFU/ml −2 −3 ×0,1 ×10 + 2× 0,1× 10 4.2.3 Kết luận Có xuất nấm men, nấm mốc mẫu bún Với mẫu bún có số tế bào nấm men nấm mốc 2,17×105 CFU/ml, vượt mức an toàn so với định 46/2007/QD BYT Quy định giới hạn tối đa ô nhiễm sinh học hóa học thực phẩm 12