Kiểm Nghiệm Vi Sinh Thực Phẩm

BÁO CÁO THỰC HÀNH Môn: Kiểm Nghiệm Vi Sinh Thực Phẩm GVHD: Lê Thị Phượng Linh Thành viên nhóm Nguyễn Ngọc Lan 18125152 Nguyễn Ngọc Minh Nguyên 19125225 Phan Thị Minh Thoa 19125350 Trần Ngọc Nhi 19125248 Phan Lê Duy Linh 18125164 NỘI DUNG Chuẩn bị mẫu Khái quát quy trình thực Kết I/ Chuẩn bị mẫu Tên mẫu : Nước Cam đường không đá Thời gian mua mẫu: 11h 45 ngày 7/10/2020 Thời gian thực hiện: 12h45 ngày 7/10/2020 Vị trí lấy mẫu: Quán nước đường Tám Giang trường Đại học Nơng Lâm Mơi trường vị trí lấy mẫu: nước cam vắt sạp nhỏ, xung quanh trời mưa, ẩm, dụng cụ vắt cam chứa đựng chưa vệ sinh kĩ lưỡng II/ Khái quát quy trình thực hiện: BÀI ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM KHUẨN LẠC  Cơng thức tính kết quả: X=  Trong đó: •N tổng số khuẩn lạc đếm •n số đĩa nồng độ •V thể tích dịch lấy mẫu •D nồng độ pha lỗng Nồng độ 10-2 10-3 10-4 Đĩa 84 13 Đĩa 86  Kết Bảng số lượng khuẩn lạc đếm mẫu nước cam •Áp dụng cơng thức ta có: X=== 8,5x103 (CFU/mL) Bài ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VSV MEN VÀ MỐC  Tính kết quả: Nồng độ 10-2 10-3 10-4 Đĩa 1 Đĩa 0  Do số khuẩn lạc đĩa 25 lạc khuẩn nên: 25 X 2  2,5 x103 10 X< (CFU/mL)  X< 2,5x103* (CFU/mL) BÀI 3: ĐỊNH LƯỢNG COLIFORM BẰNG PHƯƠNG PHÁP MPN BÀI 6: KIỂM SỐT VỆ SINH KHƠNG KHÍ Kết • • • • • • Phương pháp truyền thống: Đĩa 1: 45 Đĩa 2: Đĩa 3: 11 Đĩa 4: 15 Đĩa 5: Phương pháp đại ( máy) Thể Tích lấy mẫu 100L Số khuẩn lạc • Đĩa 1: 23 • Đĩa 2: 32  Trường hợp 100 l: Đĩa Số khuẩn lạc đếm được: 23 khuẩn lạc Tra bảng phụ lục ta được: N=24 V= thời gian lấy mẫu * 0,1 t= 0.5 Vậy: Mức độ nhiễm khơng khí = = )  Trường hợp 100 l: Đĩa Số khuẩn lạc đếm được: 30 khuẩn lạc Tra bảng phụ lục ta được: N=32 V= thời gian lấy mẫu * 0,1 t= 0.5 Vậy: Mức độ nhiễm khơng khí = = ) III/ KẾT QUẢ BÀI ĐỊNH LƯỢNG TỔNG SỐ VI SINH VẬT HIẾU KHÍ 8.5x103 (CFU/mL) Bài ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VSV MEN VÀ < 2.5x103 (CFU/mL) MỐC BÀI ĐỊNH LƯỢNG TỔNG COLIFORM ĐỊNH LƯỢNG TÔNG COLIFORM CHỊU NHIỆT (MPN/mL) (MPN/mL) Bài 4: ĐỊNH TÍNH E coli Khơng có E.coli BÀI 5: ĐỊNH TÍNH Salmonella Nghi ngờ khơng có Salmonella BÀI 6: KIỂM SỐT VỆ SINH KHƠNG KHÍ Truyền thống : 45,2,11,15,8 Máy V100 mL: Đĩa 1: 48 (CFU/m3 ), Đĩa : 64 (CFU/m3) BẰNG KIT ĐỊNH DANH Khơng định danh Real time PCR • Quy trình thực Bước 1: Ly trích ADN Bước 2: Phản ứng PCR Bước 3: Quan sát kết Quy trình ly trích ADN Chạy phản ứng Real – time PCR (polymarase Chain Reaction)  Bước : sử dụng nhiệt độ 95 độ C để tách mạch ADN thành mạch đơn ( ADN bị biến tính)  Bước Những vòng lặp lại thay đổi nhiệt độ • Ở 90 độ C: Nu tách rời thành mạnh đơn 30-40 • Ở 60-65 độ C: cho phép gắn kết mồi với khn DNA vịng • 72 độ C : tạo điều kiện cho phản ứng trùng hợp xúc tác lặp lại enzyme DNA polymerase  ( Chất màu huỳnh quang chèn vào sợi đơi DNA để tạo tín hiệu sau chu kỳ)  Bước 3: kéo dài phân tử lần cuối Kết Kết chứng dương Kết chứng âm Kết Realtime - PCR Kết nhóm Nước Cam Kết luận phản ứng Real time PCR • Khơng có Salmonella có mẫu nước cam nhóm đường biểu thị ngang So sánh kết vsv mẫu nước cam nhóm với tiêu vi sinh vật TCVN 5042:1994 nước giải khát khơng đóng chai   Định lượng tổng số vi sinh vật hiếu khí Định lượng tổng số men, mốc Colifrom Colifrom chịu nhiệt Định tinh E.coli Đinh tính Salmonella Kết 8.5x103 (CFU/ml) TCVN 5042-1994 5X104 (CFU/ml)