Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và định lượng nồng độ ebv dna huyết tương trong ung thư vòm mũi họng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI P Ạ NG U T N NC UĐ CĐ Ể VÀ Đ N SÀNG C N Ư NG NỒNG ĐỘ V- N SÀNG U ẾT TƯ NG TRONG UNG T Ư VÕ ỌNG Chuyên ngành : Tai – Mũi – Họng Mã số Y họ c : 62720155 TẮT U N ÁN T ẾN SĨ vă n th ạc sĩ TÓ Lu ậ n À NỘ - 2018 ỌC Đ T VẤN ĐỀ Ung thư vòm mũi họng (UTVMH) ung thư thường gặp vùng đầu cổ mang t nh khu vực Ở Việt Nam, UTVMH loại ung thư hay gặp ung thư vùng tai mũi họng đứng hàng thứ 10 loại ung thư phổ biến UTVMH có li n quan đến nhiều yếu tố, đặc biệt vai trò sinh bệnh học Epstein Barr Virus (EBV) UTVMH Nhiều cơng trình nghi n cứu tr n giới khẳng định có mối liên quan nồng độ EBV-DNA huyết tương với đáp ứng điều trị ti n lượng bệnh Ở Việt Nam, có nghi n cứu thực ung thư vòm EBV, nhiêncòn nhiều hạn chế Ch nh chúng tơi thực đề tài “Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng định lượng nồng độ EBV-DNA huyết tương ung thư vòm mũi họng” với mục ti u ch nh: Mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng ung thư vòm mũi họng Định lượng nồng độEBV-DNA huyết tương trước sau điều họ c trị, đánh giá mối liên quan với số đặc điểm lâm sàng, cận sĩ Những đóng góp uận án: Y lâm sàng kết điều trị ung thư vòm mũi họng ạc Nghiên cứu xác định nồng độ EBV-DNA trung bình th bệnh nhân UTVMH Việt Nam Nghi n cứu tiến hành theo d i nồng độ EBV-DNA bệnh vă n nhân UTVMH trước sau điều trị để tìm thay đổi Lu ậ n nồng độ EBV-DNA bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Nghi n cứu chứng minh mối li n quan nồng độ EBV-DNA huyết tương với giai đoạn bệnh theo T, N tổng hợp giai đoạn theo TNM, nồng độ EBV-DNA yếu tố đóng vai trị quan trọng việc xác lập thể t ch điều trị xạ trị Nghi n cứu chứng minh mối li n quan nồng độ EBV-DNA huyết tương với đáp ứng điều trị ti n lượng bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Việt Nam Việc xác định nồng độ EBV-DNA huyết tương đóng góp vào hệ thống phân loại chẩn đoán TNM ố cục uận án: Luận án có 118 trang, bao gồm phần: đặt vấn đề (2 trang), tổng quan (37 trang), đối tượng phương pháp nghi n cứu (14 trang), kết (30 trang), bàn luận (32 trang), kết luận (2 trang), kiến nghị (1 trang) Luận án có 49 bảng, 19 hình 123 tài liệu tham khảo có tài liệu c tiếng Việt, tài liệu tiếng Anh họ Chương ỆU Y TỔNG QU N TÀ sĩ 1.1 Giải phẫu vòm họng hạch vùng cổ th 1.1.2 Giải phẫu hạch cổ ạc 1.1.1 Sơ lược giải phẫu vòm họng vă n 1.2 ịch tễ học ung thư vòm mũi họng 1.2.1 Tỉ lệ mắc bệnh Lu ậ n 1.2.2 Yếu tố nguy 1.3 Ch n đốn ung thư vịm mũi họng 1.3.1 Chẩn đoán lâm sàng 1.3.1.1 Triệu chứng  Các dấu hiệu sớm Thường nghèo nàn, bệnh nhân thường không để ý, dễ bỏ qua  Các dấu hiệu muộn Do khối u phát triển chỗ xâm lấn lan rộng gây ra: Triệu chứng hạch cổ; Triệu chứng mũi; Triệu chứng tai; Triệu chứng mắt; Triệu chứng thần kinh sọ não 1.3.1.2.Thăm hám l m sàng * Nội soi tai mũi họng: Nội soi tai mũi họng kết hợp sinh thiết đóng vai trị to lớn chẩn đốn UTVMH * Th m khám hạch cổ *Th m khám dây thần kinh sọ * Th m khám toàn trạng 1.3.2 Chẩn đoán cận lâm sàng 1.3.2.1 Ch n oán h nh ảnh họ c * -qu ng quy c * Ch p cắt l p vi tính sọ n o; Ch p c ng hư ng t : Giúp đánh giá Y xác vị tr , k ch thước, mức độ xâm lấn khối ung thư vòm sĩ Ngồi cịn giúp đánh giá tổn thương di c n xa phổi, não, gan th dẫn chọc dò sinh thiết hạch ạc * Siêu m v ng cổ: Phát tổn thương hạch vùng cổ hướng * Ch p S ECT, PET/CT: Giúp phát thay đổi bệnh học * Các vă n mức độ chuyển hóa phân tử t nghiệm hác Lu ậ n 1.3.2.2 Ch n oán EBV: Định liều tải lượng virus huyết thanh: 1.3.2.3 Ch n oán giải phẫu bệnh lý: Hay gặp ung thư biểu mơ khơng biệt hóa 1.3 Chẩn đốn ác định dựa vào kết mô bệnh học 1.3 Chẩn đoán giai đo n Ch n oán gi i oạn theo ph n loại AJCC7th 2010 1.4 Ngu n tắc điều t ị Điều trị UTVMH giống bệnh ung thư khác điều trị đa mô thức tùy thuộc vào giai đoạn bệnh  Giai đoạn sớm: Xạ trị phương pháp điều trị  Giai đoạn trung gian giai đoạn tiến triển: phác đồ hóa xạ trị đồng thời  Giai đoạn di c n: Điều trị hóa chất tồn thân 1.5 Virus EBV ung thư vòm mũi họng 1.5.1 Cấu t o virus EBV EBV virus nhóm gammaherpesvirus, cấu trúc gồm phần (nhân chứa vật chất di truyền; vỏ protein; vỏ trung gian; vỏ ngoài) c 1.5.2 Giả thuyết chế bệnh sinh EBV UTVMH họ 1.5.2.1 EBV m t yếu tố phát sinh phát triển UTVMH hối u vòm họng sĩ 1.5.2.3 Biểu l EBV Y 1.5.2.2 Nhiễm EBV tế bào biểu mô ạc 1.5.2.4 Sinh học ph n t ếp gen củ EBV UTV 1.5.3 Các kỹ thuật sinh học phân tử ác định EBV th 1.5.3.1 Kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) vă n Nguy n tắc phản ứng PCR dựa tr n sở t nh chất biến t nh, hồi t nh DNA nguy n lý tổng hợp DNA nhờ hoạt t nh Lu ậ n DNA polymerase n Lu ậ vă n ạc th sĩ Y c họ 1.5.3.2 Kỹ thuật CR ịnh lượng (Re ltime-PCR) Kỹ thuật PCR định lượng (real-time PCR) phản ứng khuếch đại gen mà sản phẩm khuếch đại phản ứng hiển thị xác định q trình phản ứng thơng qua hệ thống nhận biết máy 1.5.4 Ứng dụng chẩn đoán điều trị dựa mối liên quan EBV UTVMH 1.5.4.1 Ứng d ng ch n oán Các nghiên cứu gần tr n giới hy vọng dùng test để sàng lọc phát sớm ung thư vịm mũi họng thơng qua test với EBV 1.5.4.2 Ứng d ng iều trị bệnh a) Nồng EBV yếu tố tiên lượng trư c iều trị b) Nồng EBV trư c, s u iều trị Chương NC U Y họ ĐỐ TƯ NG VÀ P Ư NG P ÁP NG c c) Điều trị miễn dịch dựa EBV sĩ 2.1 Đối tượng nghi n cứu ạc Đối tượng nghi n cứu gồm 119 bệnh nhân chẩn đốn điều trị Ung thư vịm mũi họng bệnh viện K, Bệnh viện Đại Học Y th Hà nội trung tâm Gen Protein Trường Đại học Y Hà Nội vă n 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn bệnh nhân + Có chẩn đốn xác định dựa vào tiêu chuẩn vàng chẩn đốn Lu ậ n mơ bệnh học ung thư vòm mũi họng + Có chẩn đốn tổn thương vịm lan tràn rộng khối u tr n phim chụp CT scan MRI vịm mũi họng theo quy chuẩn + Có chẩn đốn lâm sàng qua nội soi vòm mũi họng, sinh thiết vòm nội soi, th m khám hạch cổ, thần kinh sọ tồn thân + Chẩn đốn phát di c n xa qua si u âm, hình ảnh PET-CT + Định lượng nồng độ EBV-DNA huyết tương truớc sau điều trị + Được phân loại giai đoạn bệnh theo TNM - AJCC 2010 + Điều trị đầy đủ theo phác đồ Bệnh viện K giai đoạn 2013-2016 + Được theo d i th m khám đánh giá kết đáp ứng sau trình điều trị 2.1.2 Tiêu chuẩn lo i trừ + Điều trị khác với phác đồ kể tr n, điều trị bệnh viện khác + Hồ sơ bệnh án thiếu tiêu chí lâm sàng, hình ảnh mô c bệnh học họ + Các bệnh nhân khơng tn thủ hết liệu trình điều trị Y + Bệnh nhân không đồng ý tham gia nghiên cứu ạc 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu sĩ 2.2 Phương pháp nghi n cứu th Mơ tả chùm bệnh có theo dõi dọc Lu ậ n Cỡ mẫu: vă n 2.2.2 Cỡ m u Để t nh cỡ mẫu nghi n cứu, sử dụng công thức t nh cỡ mẫu áp dụng cho việc ước t nh tỷ lệ quần thể p (1  p) n  Z (21 / 2) 2 Trong đó: n: cỡ mẫu nghi n cứu α: mức ý nghĩa thống k , chọn α = 0,05 (tương ứng với độ tin cậy 95%) Z(1-α/2): tra giá trị từ bảng, tương ứng với giá trị α tr n kết Z(1-α/2) = 1,96 p: tỷ lệ bệnh nhân có nồng độ EBV-DNA dương t nh điều trị (p= 0,5) δ: độ lệch tuyệt đối y u cầu ± 10% (0,10) Áp dụng công thức tr n thu kết quả: p (1  p) 2 1,96 0,5  0,5  97 0,12 c n  Z12 / họ Ước t nh tỷ lệ bỏ sau n m: 10% => số lượng đối tượng sĩ 2.3 Các biến số, số nội nghiên cứu Y nghi n cứu cần khảo sát n ≥ 100bệnh nhân ạc 2.3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu th 2.3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng 2.3.3 Định lượng nồng độ EBV-DNA trước, sau điều trị mối liên Lu ậ n vă n quan với đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng kết điều trị 2.4 Các bước tiến hành nghiên cứu  Bước 1: Khai thác thông tin hành triệu chứng lâm sàng  Bước 2: Thu thập số cận lâm sàng, lập quy trình định lượng đánh giá nồng độ EBV-DNA huyết tương  Bước : Chẩn đoán  Bước : Thực điều trị  Bước 5: Đánh giá đáp ứng điều trị  Bước 6: Thu thập thông số nghiên cứu, đánh giá kết viết luận án 2.5 Các kỹ thuật xét nghiệm sử dụng nghiên cứu Quy trình định lượng nồng độ EBV-DNA huyết tương trước sau điều trị kỹ thuật realtime PCR Tiêu chuẩn đánh giá đáp ứng RECIST 2.6 Phương tiện nghi n cứu 2.6.1 Trang thiết bị phương tiện nghiên cứu t i bệnh viện K Trung ương, ệnh viện Đ i học y hà nội c 2.6.2 Dụng cụ, trang thiết bị hoá chất nghiên cứu t i Labo trung họ tâm nghiên cứu Gen-Protein trường Đ i Học Y Hà Nội Y 2.7 Địa điểm thời gian nghiên cứu sĩ  Địa điểm nghiên cứu: Trung tâm nghiên cứu Gen- Protein Trường Đại Học Y Hà nội, Các sở hóa xạ trị Bệnh ạc viện K Trung ương, Bệnh viện Đại Học Y Hà nội vă n n m 2016 th  Thời gian nghiên cứu: Từ tháng n m 2013 đến tháng 12 2.8 Xử lí số liệu: Bằng phần mềm Stata 12.0 2.9 Đạo đức nghi n cứu: Tuân thủ đầy đủ theo quy định Hội đồng Lu ậ n đạo đức y học